Tách chiết collagen từ da cá tra

ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA NGÔ HỒNG BẢO CHÂU TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA (Pangasius hypophthalmus) CHUYÊN NGÀNH : CƠNG NGHỆ HĨA HỌC LUẬN VĂN THẠC SĨ TP Hồ Chí Minh, tháng năm 2010 CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HỒN THÀNH TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HỒ CHÍ MINH Cán hướng dẫn khoa học: TS Mai Thanh Phong Cán chấm nhận xét 1: TS Trần Thị Bích Lam Cán chấm nhận xét 2: TS Lê Thị Hồng Nhan Luận văn thạc sĩ bảo vệ Trường Đại Học Bách Khoa, ĐHQG Tp.HCM, ngày 18 tháng năm 2010 Thành phần Hội đồng đánh giá luận văn thạc sĩ gồm : PGS.TSKH Lưu Cẩm Lộc (Chủ tịch hội đồng) PGS TS Trịnh Văn Dũng (Thư kí) TS Nguyễn Đình Thành (Ủy viên) TS Nguyễn Vĩnh Khanh (Ủy viên) TS Mai Thanh Phong (Ủy viên) Xác nhận Chủ tịch Hội đồng đánh giá luận văn Bộ môn quản lý chuyên ngành sau luận văn sửa chữa Chủ tịch Hội đồng đánh giá luận văn Bộ môn quản lý chuyên ngành TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA KHOA KỸ THUẬT HĨA HỌC CỘNG HỒ XÃ HỘI CHỦ NGHIÃ VIỆT NAM Độc Lập - Tự Do - Hạnh Phúc - - -oOo Tp HCM, ngày 30 tháng năm 2010 NHIỆM VỤ LUẬN VĂN THẠC SĨ Họ tên học viên : NGÔ HỒNG BẢO CHÂU Ngày, tháng, năm sinh: 06/12/1982 Phái: Nữ Nơi sinh: TP.HCM Chuyên ngành: Cơng nghệ hóa học MSHV: 00508392 1- TÊN ĐỀ TÀI: TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA (Pangasius hypophthalmus) 2- NHIỆM VỤ LUẬN VĂN: • Khảo sát q trình loại tạp chất da cá trước tách chiết • Khảo sát trình chiết collagen acid acetic enzyme pepsin • Xác định phương trình động học q trình tách chiết • Tinh chế collagen CO2 siêu tới hạn • Phân tích tính chất collagen : Trọng lượng phân tử, nhiệt độ biến tính, chụp SEM xác định cấu trúc sợi, phổ hồng ngoại xác định nhóm chức có mặt collagen 3- NGÀY GIAO NHIỆM VỤ : 25/1/2010 4- NGÀY HOÀN THÀNH NHIỆM VỤ : 30/11/2010 5- HỌ VÀ TÊN CÁN BỘ HƯỚNG DẪN : TS.MAI THANH PHONG Nội dung đề cương Luận văn thạc sĩ Hội Đồng Chuyên Ngành thông qua CÁN BỘ HƯỚNG DẪN CHỦ NHIỆM BỘ MÔN KHOA QL CHUYÊN NGÀNH (Họ tên chữ ký) QUẢN LÝ CHUYÊN NGÀNH (Họ tên chữ ký) (Họ tên chữ ký) LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, em xin chân thành cảm ơn Khoa Kỹ Thuật Hóa Học – Trường Đại Học Bách Khoa TP.HCM hổ trợ trang thiết bị, máy móc, vật tư, phịng thí nghiệm giúp em hồn thành tốt luận văn Xin cảm ơn dự án RBE ( Research Based Education) - JICA hổ trợ suốt trình thực đề tài B1-07 ‘Fish collagen extraction and appication’, xin gửi lời tri ân đến quý thầy cô nhóm nghiên cứu collagen, PGS.TS Phan Đình Tuấn, TS.Mai Thanh Phong (Bộ mơn Q trình thiết bị), TS Nguyễn Hồng Dũng, Cơ Nguyễn Thị Ngun (Bộ mơn Cơng nghệ thực phẩm), NCS Lê Thu Hương hướng dẫn tạo điều kiện làm việc tốt cho luận văn Cuối cùng, xin gửi lời chúc sức khỏe đến quý thầy cô bạn lớp cao học K2008 – Ngành cơng nghệ hóa học Xin cảm ơn Ngơ Hồng Bảo Châu TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ Luận văn hướng đến đối tượng nghiên cứu hấp dẫn collagen cá Trước nay, người ta thường sử dụng collagen trích từ động vật hữu nhủ ứng dụng lĩnh vực mỹ phẩm, thực phẩm, y dược học Tuy nhiên, năm gần đây, giới bộc phát bệnh bệnh lở mồm long móng heo, bệnh bị điên bị Cho nên, chế phẩm khơng an toàn Luận văn mở hướng nghiên cứu collagen từ loài cá tra nước Trong luận văn này, da cá tra qua trình loại tạp chất LasNa 1%, 4h, nhiệt độ 4oC Sau đó, chúng chiết với acid acetic 0.25 M – M enzyme pepsin 0.25 – 0.75 % (w/v) Dịch chiết kết tủa NaCl 0.9M thu collagen thô Collagen thô tiếp tục tinh chế qua màng cellophan qua CO2 siêu tới hạn thành collagen sạch, sấy thăng hoa thu sản phẩm collagen dạng rắn, màu trắng đục LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA MỤC LỤC I ĐẶT VẤN ĐỀ II.TỔNG QUAN 10 II.1 COLLAGEN 10 II.1.1 Cấu tạo, vị trí chức năng: 10 II.1.2 Tính chất lý hóa collagen 16 II.1.3 Các lĩnh vực ứng dụng collagen: 18 II.2 CÁC VẤN ĐỀ TRONG TÁCH CHIẾT COLLAGEN: 25 II.2.1 Sự phá vỡ tế bào 25 II.2.2 Sự tách chiết protein collagen 26 II.2.3 Phương pháp tinh collagen 27 II.2.4 Làm khô bảo quản chế phẩm collagen 29 II.2.5 Sử dụng CO2 siêu tới hạn tinh collagen: 29 II.3 CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ 34 II.3.1 Các cơng trình nghiên cứu collagen giới nước ta nay: 34 II.3.2 Những vấn đề tồn hướng tập trung nghiên cứu giải quyết: 49 III NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 52 IV PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 53 IV.1 BẢO QUẢN NGUYÊN LIỆU: 53 IV.2 QUÁ TRÌNH TIỀN XỬ LÍ: 53 IV.3 PHƯƠNG PHÁP TÁCH CHIẾT COLLAGEN 54 IV.3.1 Tách chiết collagen acid: 54 IV.3.2 Tách chiết collagen enzyme: 56 IV.4 PHƯƠNG PHÁP TINH SẠCH COLLAGEN 60 IV.4.1 Tách muối tạp chất có phân tử lượng thấp khỏi collagen: 60 IV.4.2 Tách béo collagen CO2 siêu tới hạn: 62 IV.5 PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH SẢN PHẨM COLLAGEN 64 HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu 2010 CBHD: TS.Mai Thanh Phong LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA IV.5.1 Phân tích hàm lượng ẩm 64 IV.5.2 Phân tích hàm lượng chất vơ hữu 64 IV.5.3 Phân tích hàm lượng chất béo 65 IV.5.4 Phân tích hàm lượng hydroxyproline 66 IV.5.5 Phương pháp điện di 69 IV.5.6 Phương pháp xác định thành phần acid amin: 70 IV.5.7 Phương pháp đo độ nhớt dung dịch collagen 70 IV.5.8 Scanning electron microscopy (SEM) transmission electron microscopy (TEM) 71 IV.5.9 Phổ hồng ngoại IR 71 V KẾT QUẢ - NHẬN XÉT 72 V.1 KẾT QUẢ Q TRÌNH TIỀN XỬ LÍ DA CÁ: 72 V.1.1 Kết phân tích thành phần da cá 72 V.1.2 Kết khả loại béo LasNa: 72 V.1.3 Ảnh hưởng LasNa đến hàm lượng hydroxyproline da: 73 V.1.4 Ảnh hưởng trình tẩy màu H2O2 76 V.2 KẾT QUẢ QUÁ TRÌNH CHIẾT COLLAGEN BẰNG ACID ACETIC 77 V.2.1 Kết chiết collagen acid acetic 77 V.2.2 So sánh khả tách chiết acid acetic acid lactic 79 V.2.3 Động học trình chiết collagen acid acetic 82 V.3 TÁCH CHIẾT COLLAGEN BẰNG ENZYME PEPSIN 85 V.3.1 Hiệu suất tách chiết: 85 V.3.2 Thực nghiệm yếu tố toàn phần: 90 V.4 KẾT QUẢ QUÁ TRÌNH TINH SẠCH COLLAGEN 94 V.4.1 Phân tích hàm lượng chất béo 94 V.4.2 Phân tích thành phần collagen thành phẩm 94 V.5 ĐIỆN DI 94 V.6 NHIỆT ĐỘ BIẾN TÍNH COLLAGEN 96 V.7 SEM VÀ TEM 98 HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu 2010 CBHD: TS.Mai Thanh Phong LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA V.8 Phổ IR 100 VI KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 102 TÀI LIỆU THAM KHẢO 105 PHỤ LỤC 107 HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu 2010 CBHD: TS.Mai Thanh Phong LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA DANH MỤC HÌNH Hình Cấu tạo phân tử acid amin .10 Hình 2 Chuỗi xoắn collagen gồm dây xoắn chặt 13 Hình Trật tự xếp acid amin collagen 13 Hình Tổ chức bó sợi collagen 14 Hình Từng bậc cấu tạo chuỗi collagen .14 Hình Sản phẩm phomat có chứa collagen hydrolysate làm giảm hàm lượng chất béo 19 Hình Sản phẩm kẹo dẻo có vỏ màng collagen hydrolysate 19 Hình Collagen hydrolysate làm chất kết dính kẹo 19 Hình Sản phẩm thịt nguội có chứa collagen hydrolysate 20 Hình 10 Collagen hydrolysate làm gạn loại thức uống .20 Hình 11Viên nang mềm có lớp vỏ làm từ collagen .21 Hình 12 Viên nang cứng làm từ chất liệu collagen .22 Hình 13 Vai trò collagen hydrolysate tái tạo khớp xương 23 Hình 14 Ứng dụng collagen hydrolysate kỹ thuật nội soi 23 Hình 15 Collagen hydrolysate mảnh bọt biển sử dụng nha khoa 24 Hình 16 Mặt nạ dưỡng da collagen hydrolysate 25 Hình 17 Tóc bị hư tổn phục hồi sau sử dụng sản phẩm chăm sóc tóc có chứa collagen hydrolysate .25 Hình 18 Quy trình tách chiết collagen 26 Hình 19 Giản đồ pha (áp suất – nhiệt độ) carbon dioxide 32 Hình 20 Giản đồ pha (mật độ - áp suất) carbon dioxide 32 Hình 21 Sơ đồ quy trình tách chiết CO2 siêu tới hạn 33 Hình 22 Quy trình chiết collagen cid acetic .35 Hình 23 Sắc kí điện di SDS-PAGE collagen loại I da heo collagen da cá .36 Hình 24 Quy trình chiết collagen pepsin 38 Hình 25 Sắc kí điện di SDS-PAGE collagen loại I da heo collagen da cá .40 Hình 26 Quy trình chiết collagen có mặt vi khuẩn Bacillus 43 Hình 27 Biểu đồ phụ thuộc độ nhớt theo nhiệt độ 46 Hình 28 Cấu trúc bề mặt collagen (a) gelatin (b) 46 Hình 29 Phổ FTIR ASC PSC từ cá da trơn largefin longbarbel (Mystus macropterus) .48 Hình 30 Đồ thị đường chuẩn biểu thị mối tương quan diện tích peak hàm lượng acid amin .49 Hình 1Quy trình xử lí da cá ngun liệu .53 Hình Quy trình chiết collagen acid acetic 54 Hình Thiết bị Automatic lab reactor, Mettler Toledo, Labmax .55 HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu 2010 CBHD: TS.Mai Thanh Phong LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA Hình 4 Quy trình chiết collagen pepsin 57 Hình Sơ đồ trình tinh chế collagen 60 Hình Màng cellophan .61 Hình Thiết bị CO2 siêu tới hạn THAR SFC SN.11419 .62 Hình Sơ đồ quy trình tách béo collagen CO2 siêu tới hạn 63 Hình Sơ đồ quy trình phân tích hydroxyproline 68 Hình 10 Máy diện di BIORAD LABORATORY, 041 BR71844 .70 Hình Đồ thị hàm lượng chất béo theo thời gian xử lý da cá với LasNa 72 Hình Đồ thị đường chuẩn hydroxyproline 73 Hình Đồ thị hàm lượng hydroxyproline theo thời gian xử lý da cá LasNa 1% 74 Hình Đồ thị ảnh hưởng trình xử lý da cá LasNa 1% lên hàm lượng hydroxyproline hàm lượng béo 75 Hình 5 Da cá trước sau tẩy màu H2O2 1% .76 Hình Đồ thị chiết collagen acid acetic nồng độ khác 78 Hình Đồ thị chiết collagen acid lactic nồng độ khác 80 Hình Đồ thị so sánh hiệu suất chiết collagen acid lactic 0.25M acid acetic 0.25M 80 Hình Đồ thị so sánh hiệu suất chiết collagen acid lactic 0.5M acid acetic 0.5M 81 Hình 10 Đồ thị so sánh hiệu suất chiết collagen acid lactic 0.5M acid acetic 0.75M 81 Hình 11 Đồ thị so sánh hiệu suất chiết collagen acid lactic 1.0M acid acetic 1.0M 82 Hình 12 Đường động học trình tách chiết collagen acid acetic 0.25M 83 Hình 13 Đường động học trình tách chiết collagen acid acetic 0.5M 83 Hình 14 Đường động học trình tách chiết collagen acid acetic 0.75M 84 Hình 15 Đường động học trình tách chiết collagen acid acetic 1.0M 84 Hình 16 Đồ thị hiệu suất chiết collagen pepsin 3oC, tỉ lệ L/R = 20 87 Hình 17 Đồ thị hiệu suất chiết collagen pepsin 3oC, tỉ lệ L/R = 80 88 Hình 18 Đồ thị hiệu suất chiết collagen pepsin 17oC, tỉ lệ L/R = 20 88 Hình 19 Đồ thị hiệu suất chiết collagen pepsin 3oC, tỉ lệ L/R = 20 89 Hình 20 Đồ thị hiệu suất chiết collagen pepsin 10oC, tỉ lệ L/R = 50 89 Hình 21 Hình ảnh điện di collagen ASC PSC 94 Hình 22 Điện di collagen 95 Hình 23 Đồ thị đường cong biến tính nhiệt dung dịch collagen 0.3% 97 Hình 24 Hình ảnh collagen ASC (phương pháp chụp SEM) 98 HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu 2010 CBHD: TS.Mai Thanh Phong LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA – 81%, tùy theo nồng độ enzyme Tuy nhiên nhiệt độ thích hợp 10 oC Ở nhiệt độ 10 oC, hiệu suất đạt từ 95 – 97% Vậy điều kiện tối ưu cho trình chiết collagen enzyme pepsin : Nồng độ enzyme: 0.5% (w/v) pha dung dịch acid acetic 0.5M Nhiệt độ: 10 oC Tỉ lệ rắn/lỏng = 1/50 Tốc độ khuấy trộn: 200 rpm Thời gian chiết: 24 Hiệu suất chiết đạt 95% Chúng ta lưu ý chiết dung dịch enzyme pepsin không để lâu thời gian 24h hoạt động cắt mạch pepsin diễn liên tục, để lâu mạch polypeptide bị cắt ngắn Lúc này, sản phẩm thu acid amin peptide mạch ngắn, protein collagen Do ảnh hưởng đến chất lượng collagen Cho nên đến thời điểm chiết đạt cân tiến hành tháo sản phẩm cho kết tủa tinh chế *Về trình tinh chế collagen CO2 siêu tới hạn: Collagen ASC PSC sau kết tinh chứa hàm lượng chất béo cao tiêu chuẩn quy định Nên tiến hành khử béo CO2 siêu tới hạn Điều kiện tiến hành tốt nhất: Tốc độ dòng CO2: 10 g/phút Áp suất: 200 bar Nhiệt độ: 40oC Thời gian: 30 phút Khối lượng mẫu collagen: 200 g/mẻ ¾ KIẾN NGHỊ Từ kết đạt q trình nghiên cứu luận văn này, chúng tơi đưa hướng nghiên cứu cho đề tài collagen: • Hướng ứng dụng cho hai sản phẩm collagen ASC PSC chiết được: hai sản phẩm đạt độ định theo tiêu chuẩn, HVTH: Ngơ Hồng Bảo Châu 2010 CBHD: TS.Mai Thanh Phong 103 LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA đưa vào nghiên cứu làm sản phẩm mỹ phẩm dược phẩm kem dưỡng da, màng bọc thuốc Tuy nhiên, cần phải nghiên cứu thêm trọng lượng phân tử hai loại collagen Vì rằng, chúng có khoảng trọng lượng phân tử từ 50-198 kDa, mà phân đoạn có tính chất đặc trưng riêng biệt Cho nên, phân đoạn có ứng dụng khác Có thể phân đoạn ứng dụng cho lĩnh vực mà ứng dụng cho lĩnh vực khác • Hướng nghiên cứu cho phần bã thảy ra: Sau trình chiết collagen, phần bã da cá nghiên cứu làm phân bón Nếu thế, luận văn quy trình khép kín từ da cá ngun liệu đến collagen, đến phân bón hữu Đó xu hướng bước vào nghiên cứu đề tài phải hạn chế thảy chất bã môi trường xung quanh HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu 2010 CBHD: TS.Mai Thanh Phong 104 LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA TÀI LIỆU THAM KHẢO Bae, I., Osatomi, K., Yoshida, A., Osako, K., Yamguchi, A., Hara, K (2008) Biochemical properties of acid-soluble collagen extracted from the skins of underutilised fishes Food chemistry, 108, 49–54 Devictor, P., Allard, R., Perier, E., Huc, A Unpigmented fish skin, particularly from flat fish, as a novel industrial source of collagen, extraction method, collagen and biomaterial thereby obtained United States patent No 5420248 Hwang, J H., Mizuta, S., Yokoyama, Y., & Yoshinaka, R (2007) Purification and characterization of molecular species of collagen in the skin of skate (Raja kenojei) Food Chemistry, 100, 921–925 Hsiao, C, Y., Chou, H, C., Sun, H, W., Seah, J, N Novel collagen production method Patent application publication No US 2004/0253678 A1 Ignat’eva, N,Y., Danilov, N, A., Averkiev, S, V., Obrezkova, M, V., Lunin, V, V., Sobol, E, N.(2007) Dertermination of hydroxyproline in tissues and the evalution of the collagen content of the tissues Journal of analytical chemistry, 62, 51–57 Kittiphattanabawon, P., Benjakul, S., Viessanguan, W., Nagai, T., Tanaka, M (2005) Characterisation of acid-soluble collagen from skin and bone of bigeye snapper (Priacanthus tayenus) Food chemistry, 89, 363–372 Losso, J, N., Ogawa, M., Potier, R, J (2005) Extraction of collagen from calcified tissues Patent application publication No US 2005/0267292 A1 Morimura, S., Nagata, H., Uemura, Y., Fahmi, A., Shigematsu, T., Kida, K (2002) Development of an effective process for utilization of collagen from livestock and fish waste Process Bochemistry, 37, 1403–1412 Nagai, T., Araki, Y., & Suzuki, N (2002) Collagen of skin of ocellate puffer fish (Takifugu rubripes) Food Chemistry, 78, 173–177 10 Nagai, T., & Suzuki, N (2000a) Isolation of collagen from fish waste material-skin, bone and fins Food Chemistry, 68, 277–281 HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu 2010 CBHD: TS.Mai Thanh Phong 105 LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA 11 Nhan Hong Thi Le, Anh Thy Bui.(2008) Isolation of collagen from the skin of basa fish (Pangasius Bocourti) 12 Sadowska, M., Kolodziejska, I., & Niecikowska, C (2003) Isolation of collagen from the skins of Baltic cod (Gadus morhua) Food Chemistry, 81, 257–262 13 Senaratne, L.S., Park, P.J., Kim, S.K (2006) Isolation and characterization of collagen from brown backed toadfish (Lagocephalus gloveri) skin Bioresource Technology, 97, 191–197 14 Shimizu, J., Shimizu, H., Nagashima, K., Yamada, K., Takamatsu, M Fish collagen and method of producing same United States patent No US 6271350 B1 15 Villanueva, P, A., McNulty, A, K., Beniker, H, D., Kieswetter, K Method for quantitation of collagen tissues Patent application publication No US 2009/0142799 A1 16 Zhang, M., Liu, W., Li, G (2009) Isolation and characterisation of collagens fom the skin of largefin longbabel catfish (Mystus macropterus) Food chemistry, 115, 826–831 HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu 2010 CBHD: TS.Mai Thanh Phong 106 LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA PHỤ LỤC PL 6.1 SỐ LIỆU PHÂN TÍCH HÀM LƯỢNG ẨM , HÀM LƯỢNG CHẤT VÔ CƠ, CHẤT HỮU CƠ CỦA DA CÁ TRƯỚC VÀ SAU XỬ LÍ VỚI LASNA 1% Da nguyên liệu Thời gian xử lí(h) m cốc(g) m cốc+ da ướt(g) m cốc + dasau sấy khô(g) m cốc + tro sau nung(g) m da ướt(g) m da khô(g) m tro(g) m chất hữu cơ(g) % ẩm % tro % chất hữu Da xử lí LasNa 1% lần kí hiệu A1 A2 lần lần lần lần lần lần lần lần lần 32.078 31.1235 31.0794 32.8012 31.5138 32.2461 33.0386 32.8227 34.7594 31.2336 34.1103 33.16 32.1394 34.0654 32.6343 33.5002 34.2655 34.0129 35.9381 32.4018 A3 32.8748 31.9083 31.3543 33.1346 31.779 32.5374 33.2549 33.0214 34.9142 31.3976 A4 m1 m2 m3 m4 % H2O %TR %HC 32.0948 31.1371 31.0807 32.8043 31.5151 32.2475 33.0398 32.8263 34.7616 31.2352 2.0323 2.0365 1.06 1.2642 1.1205 1.2541 1.2269 1.1902 1.1787 1.1682 0.7968 0.7848 0.2749 0.3334 0.2652 0.2913 0.2163 0.1987 0.1548 0.164 0.0168 0.0136 0.0013 0.0031 0.0013 0.0014 0.0012 0.0036 0.0022 0.0016 0.78 0.7712 0.2736 0.3303 0.2639 0.2899 0.2151 0.1951 0.1526 0.1624 60.793 61.463 74.066 73.628 76.332 76.772 82.370 83.305 86.867 85.961 0.827 0.668 0.123 0.245 0.116 0.112 0.098 0.302 0.187 0.137 38.380 37.869 25.811 26.127 23.552 23.116 17.532 16.392 12.946 13.902 Trung bình % ẩm TB % tro TB % chất hữu TB % H2O %TR %HC 61.128 73.847 76.552 82.838 0.747 0.184 0.114 0.200 86.414 0.162 38.125 25.969 23.334 16.962 13.424 m1 − m2 2.0323 − 0.7968 × 100 = 60.793 × 100 = 2.0323 m1 m 0.0168 % tro = %TR = ×100 = ×100 = 0.827 2.0323 m1 m − m3 0.7968 − 0.0168 ×100 = ×100 = 38.380 % chất hữu = 2.0323 m1 % ẩm = % H2O = HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu 2010 CBHD: TS.Mai Thanh Phong 107 LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA PL 6.2 SỐ LIỆU PHÂN TÍCH HÀM LƯỢNG CHẤT BÉO TRONG Q TRÌNH XỬ LÍ DA CÁ BẰNG LASNA 1% thời gian xử lí (h) m bì (g) m bì+ mẫu ướt(g) m bì + mẫu khơ(g) m bì + mẫu sau chiết béo(g) m mẫu khô(g) A1 0.8113 0.938 0.825 1.1915 1.1734 1.2377 1.1595 1.1631 1.1361 1.2183 1.0091 A2 5.6956 5.922 5.8317 6.32 6.2774 6.3643 6.3925 6.3977 6.4494 6.3839 6.0782 A3 2.4818 2.652 2.523 2.4796 2.4651 2.3634 2.2894 1.806 1.7854 2.0407 1.8613 A4 2.3029 2.42 2.3702 2.377 2.3649 2.3277 2.2502 1.791 1.772 2.03 1.8464 m1 1.6705 1.714 1.698 1.2881 1.2917 1.1257 1.1299 0.6429 0.6493 0.8224 0.8522 m béo(g) m2 0.1789 0.232 0.1528 0.1026 0.1002 0.0357 0.0392 0.015 0.0134 0.0107 0.0149 % béo %B 10.709 13.544 8.999 7.965 7.757 3.171 3.469 2.333 2.064 1.301 1.748 %béo TB 11.084 7.861 3.320 2.198 1.525 m mẫu khô = m1 = A3 – A1 = 2.4818 – 0.8113 = 1.6705 (g) m béo = m2 = A3 – A4 = 2.3029 - 2.4818 = 0.1789 (g) % béo = % B = m2 0.1789 ×100 = ×100 = 10.709 (%) 1.6705 m1 PL 6.3 SỐ LIỆU HÀM LƯỢNG BÉO TRONG DA CÁ XỬ LÝ THEO PHƯƠNG PHÁP NaCl NaOH Phương pháp xử lý NaCl 10% NaOH 0.1M Thời gian (h) 24 24 m bì (g) 0.7302 0.7463 0.6417 0.635 m bì+ mẫu ướt (g) 5.7662 5.8267 5.8472 5.6571 m bì + mẫu khơ (g) 2.1516 2.1522 1.5635 1.5225 m bì + mẫu sau chiết béo (g) 2.0558 2.0678 1.5438 1.5021 m mẫu khô (g) 1.4214 1.4059 0.9218 0.8875 m béo (g) 0.0958 0.0844 0.0197 0.0204 % béo 6.740 6.003 2.137 2.299 %béo TB 6.37 2.218 HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu 2010 CBHD: TS.Mai Thanh Phong 108 LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA PL 6.4 SỐ LIỆU PHÂN TÍCH HÀM LƯỢNG HYDROXYPROLINE TRONG DA CÁ TRƯỚC VÀ SAU XỬ LÍ VỚI LASNA 1% Da nguyên liệu Thời gian xử lí (h) Số lần thí nghiệm m da ướt (g) m da khơ(g) Pha loãng(lần) Độ hấp thu Abs Hyp suy từ đường chuẩn (μg/ml) Hyp (mg/g khô) Hyp (mg/g ướt) da xử lí với LasNa 1% 2 2 m0 m1 n a 0.7979 0.857 1.0806 1.0465 1.1189 1.0864 1.0216 1.0936 1.1268 1.1506 0.3112 0.3256 0.2756 0.2850 0.2401 0.2435 0.1928 0.1893 0.1601 0.1565 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 2.454 2.514 2.305 2.023 1.694 1.863 1.274 1.37 0.98 0.983 HP HP1 HP2 27.562 28.238 25.884 22.708 19.003 20.907 14.274 15.355 10.963 10.997 88.567 86.725 93.919 79.678 79.148 85.858 74.033 81.113 68.475 70.266 34.543 32.949 23.953 21.699 16.984 19.244 13.972 14.041 9.729 9.557 trung bình Hyp (mg/g khô) Hyp (mg/g ướt) 87.646 86.799 82.503 77.573 69.370 33.746 22.826 18.114 14.006 9.643 Phương trình đường chuẩn: y = 0.0888x + 0.0065 Trong y: độ hấp thu Abs đo dung dịch hydroxyproline (Hyp) chuẩn x (μg/ml): nồng độ dung dịch hydroxyproline chuẩn Hàm lượng Hyp suy từ đường chuẩn = HP = a − 0.0065 2.454 − 0.0065 = 0.0888 0.0888 = 27.562 (μg/ml) Hàm lượng Hyp mẫu da (tính theo trọng lượng khơ tuyệt đối): HP1 = HP × n 27.562 ×1000 = = 88.567 (mg/g khô) 0.3112 ×1000 m1 ×1000 Hàm lượng Hyp mẫu da (tính theo trọng lượng ướt): HP2 = HP × n 27.562 ×1000 = = 34.543 (mg/g ướt) 0.7979 ×1000 m0 ×1000 HVTH: Ngơ Hồng Bảo Châu 2010 CBHD: TS.Mai Thanh Phong 109 LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA PL 6.5 SỐ LIỆU PHÂN TÍCH HÀM LƯỢNG HYDROXYPROLINE (HYP) TRONG DA CÁ Ở QUÁ TRÌNH TẨY MÀU BẰNG H2O2 Da nguyên da xử lí với Tẩy màu Kí hiệu liệu LasNa 1% H2O2 0.1% Thời gian xử lí (h) m da ướt (g) m0 0.7979 0.857 1.1189 1.0864 1.136 1.146 m da khô(g) m1 0.3112 0.3256 0.2401 0.2435 0.2499 0.2457 Pha loãng(lần) n 1000 1000 1000 1000 1000 1000 Độ hấp thu Abs a 2.454 2.514 1.694 1.863 1.736 1.742 Hyp suy từ đường chuẩn(μg/ml) HP1 27.562 28.238 19.003 20.907 19.476 19.544 Hyp (mg/g khô) HP 88.567 86.725 79.148 85.858 77.937 79.544 Hyp (mg/g ướt) HP2 34.543 32.949 16.984 19.244 17.145 17.054 Trung bình Hyp (mg/g khô) 87.646 82.503 78.740 Hyp (mg/g ướt) 33.746 18.114 17.099 Da cá ngun liệu sau q trình tiền xử lí (tức sau qua cơng đoạn xử lí với LasNa 1%, thời gian 4h, tiếp tục qua công đoạn tẩy màu H2O2 0.1%, 2h): Hàm lượng Hyp (mg/g ướt) = 17.099 HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu 2010 CBHD: TS.Mai Thanh Phong 110 LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA PL 6.6 SỐ LIỆU CHIẾT COLLAGEN BẰNG ACID ACETIC Ở CÁC NỒNG ĐỘ Nhiệt độ chiết (oC) Tỉ lệ rắn:lỏng Khối lượng da cá (g) Hàm lượng Hyp da (mg/g ướt) Tổng thể tích dịch chiết (ml) Thể tích dịch chiết thủy phân (ml) Hệ số pha lỗng phân tích Thời gian chiết (h) Nồng độ acid acetic (M) 0.25 0.5 0.75 R:L m HP2 V v n 0 0 0.25 0.5 0.75 0 0 0.25 0.5 0.75 0 0 0.25 0.5 0.75 0 0 1:50 60 17.099 3000 0.5 10 15 24 48 72 Độ hấp thu (Kí hiệu: a) 0.63 0.79 1.01 1.209 1.25 0.474 0.726 0.856 1.2 1.416 1.45 1.47 0.631 0.876 1.235 1.346 1.358 1.353 0.671 1.211 1.27 1.272 1.25 1.28 Hyp suy từ đường chuẩn(μg/ml) (Kí hiệu: HP) 7.021 8.823 11.301 13.542 14.003 5.265 8.102 9.566 13.440 15.873 16.256 16.481 7.033 9.792 13.834 15.084 15.220 15.163 7.483 13.564 14.229 14.251 14.003 14.341 Hàm lượng Hyp dịch chiết(mg/ml) (Kí hiệu: HP1) 0.140 0.176 0.226 0.271 0.280 0.105 0.162 0.191 0.269 0.317 0.325 0.330 0.141 0.196 0.277 0.302 0.304 0.303 0.150 0.271 0.285 0.285 0.280 0.287 Hiệu suất chiết (%) (Kí hiệu H%) 41.063 51.601 66.090 79.196 81.896 30.789 47.386 55.947 78.603 92.829 95.068 96.385 41.129 57.265 80.908 88.218 89.009 88.679 43.763 79.327 83.213 83.345 81.896 83.872 Phương trình đường chuẩn: y = 0.0888x + 0.0065 Trong y: độ hấp thu Abs đo dung dịch hydroxyproline (Hyp) chuẩn x (μg/ml): nồng độ dung dịch hydroxyproline chuẩn Hàm lượng Hyp suy từ đường chuẩn : HP = a − 0.0065 0.474 − 0.0065 = = 5.265 (μg/ml) 0.0888 0.0888 Hàm lượng Hyp dịch chiết: HP1 = 5.265 ×10 HP × n = = 0.105 (mg/ml) 0.5 ×1000 v ×1000 HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu 2010 CBHD: TS.Mai Thanh Phong 111 LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA Hiệu suất chiết: H% = 0.105 × 3000 HP1 × V ×100 = ×100 = 30.789 60 ×17.099 m × HP2 PL 6.7 SỐ LIỆU CHIẾT COLLAGEN BẰNG ACID LACTIC Ở CÁC NỒNG ĐỘ Nhiệt độ chiết (oC) Tỉ lệ rắn:lỏng Khối lượng da cá (g) Hàm lượng Hyp da (mg/g ướt) Tổng thể tích dịch chiết (ml) Thể tích dịch chiết thủy phân (ml) Hệ số pha lỗng phân tích Thời gian chiết (h) Nồng độ acid lactic (M) 0.25 0.5 0.75 0.25 0.5 0.75 0.25 0.5 0.75 0.25 0.5 0.75 R:L m HP2 V v n 1:50 60 17.099 3000 0.5 15 24 48 Độ hấp thu (Kí hiệu: a) 0.763 0.873 1.023 1.176 1.18 0.712 0.803 0.901 0.973 1.02 0.599 0.63 0.672 0.713 0.741 0.561 0.58 0.592 0.628 0.634 Hyp suy từ đường chuẩn(μg/ml) (Kí hiệu: HP) 8.519 9.758 11.447 13.170 13.215 7.945 8.970 10.073 10.884 11.413 6.672 7.021 7.494 7.956 8.271 6.244 6.458 6.593 6.999 7.066 Hàm lượng Hyp dịch chiết(mg/ml) (Kí hiệu: HP1) 0.034 0.039 0.046 0.053 0.053 0.032 0.036 0.040 0.044 0.046 0.027 0.028 0.030 0.032 0.033 0.025 0.026 0.026 0.028 0.028 Hiệu suất chiết (%) (Kí hiệu H%) 9.964 11.413 13.389 15.404 15.457 9.293 10.491 11.782 12.731 13.350 7.804 8.213 8.766 9.306 9.675 7.304 7.554 7.712 8.186 8.265 72 1.2 1.035 0.756 0.65 13.440 11.582 8.440 7.247 0.054 0.046 0.034 0.029 15.721 13.547 9.872 8.476 Phương trình đường chuẩn: y = 0.0888x + 0.0065 Trong y: độ hấp thu Abs đo dung dịch hydroxyproline (Hyp) chuẩn x (μg/ml): nồng độ dung dịch hydroxyproline chuẩn Hàm lượng Hyp suy từ đường chuẩn : HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu 2010 CBHD: TS.Mai Thanh Phong 112 LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA HP = a − 0.0065 0.763 − 0.0065 = = 8.519 (μg/ml) 0.0888 0.0888 Hàm lượng Hyp dịch chiết: HP1 = 8.519 × HP × n = = 0.034 (mg/ml) 0.5 ×1000 v ×1000 Hiệu suất chiết: H% = HP1 × V 0.034 × 3000 ×100 = ×100 = 9.964 60 ×17.099 m × HP2 PL 6.8 SỐ LIỆU CHIẾT COLLAGEN BẰNG ENZYME PEPSIN TT Enzym (%) acid acetic(M) L/R 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 0.25 0.75 0.25 0.75 0.25 0.75 0.25 0.75 0.25 0.75 0.25 0.75 0.25 0.75 0.25 0.75 0.5 0.5 0.5 0.25 0.25 0.75 0.75 0.25 0.25 0.75 0.75 0.25 0.25 0.75 0.75 0.25 0.25 0.75 0.75 0.5 0.5 0.5 20 20 20 20 80 80 80 80 20 20 20 20 80 80 80 80 50 50 50 T(h) 0 0 0 0.393 0.326 0.381 0.456 0.05 0.056 0.601 0.602 0.563 0.53 0.09 0.069 TT HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu Nhiệt độ (oC) m da cá (g) 3 3 3 3 17 17 17 17 17 17 17 17 10 10 10 150 150 150 150 47.5 47.5 47.5 47.5 150 150 150 150 47.5 47.5 47.5 47.5 60 60 60 ĐỘ HẤP THU (a) 0.658 0.7 0.656 0.71 0.623 0.698 0.55 0.565 0.125 0.156 0.077 0.079 2010 V dịch chiết (ml) v thủy phân (ml) pha loãng n (lần) 3000 3000 3000 3000 3000 3000 3000 3000 3000 3000 3000 3000 3000 3000 3000 3000 3000 3000 3000 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 2 2 4 4 2 2 2 2 12 24 48 0.75 0.731 0.713 0.65 0.186 0.09 0.753 0.745 0.719 0.68 0.23 0.12 0.756 0.748 0.723 0.72 0.245 0.123 CBHD: TS.Mai Thanh Phong 113 LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 0 0 0 0 0 0 0.058 0.058 0.099 0.091 0.15 0.195 0.06 0.112 0.094 0.142 0.086 0.074 0.125 0.068 0.06 0.155 0.113 0.343 0.411 0.095 0.162 0.18 0.174 0.126 0.152 0.158 0.08 0.063 0.219 0.202 0.501 0.452 0.125 0.172 0.195 0.208 0.201 0.214 0.192 0.09 0.067 0.249 0.23 0.594 0.52 0.154 0.181 0.23 0.239 0.235 0.24 0.224 0.115 0.063 0.265 0.26 0.61 0.624 0.198 0.203 0.238 0.242 0.271 0.28 0.261 0.125 0.073 0.283 0.296 0.65 0.691 0.211 0.242 0.241 0.246 0.368 0.364 0.37 0.128 0.078 0.298 0.35 0.685 0.73 0.184 0.209 0.246 0.25 0.369 0.356 0.375 HP (μg/ml) SUY TỪ ĐỒ THỊ ĐƯỜNG CHUẨN TT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 TT 10 11 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 12 24 4.352 6.695 7.337 7.810 8.373 8.407 3.598 6.706 7.314 7.922 8.159 8.316 4.217 6.267 6.943 7.787 7.956 8.024 5.062 5.895 6.120 6.289 7.247 7.584 0.490 0.940 1.334 1.684 2.021 2.517 0.557 0.704 0.794 0.816 0.940 1.278 0.580 0.693 0.828 0.940 1.222 1.334 0.580 0.602 0.636 0.681 0.636 0.749 1.042 1.672 2.393 2.731 2.911 3.114 0.952 1.199 2.202 2.517 2.855 3.260 1.616 3.789 5.569 6.616 6.796 7.247 2.123 4.555 5.017 5.783 6.954 7.708 0.602 0.997 1.334 1.661 2.157 2.303 1.188 1.751 1.864 1.965 2.213 2.652 0.985 1.954 2.123 2.517 2.607 2.641 1.526 1.886 2.269 2.618 2.652 2.697 0.895 1.346 2.190 2.573 2.979 4.071 0.760 1.639 2.337 2.630 3.080 4.026 1.334 1.706 2.089 2.449 2.866 4.093 HP(mg/ml) TÍNH TỚI HỆ SỐ PHA LỖNG KHI PHÂN TÍCH 12 24 0.174 0.268 0.293 0.312 0.335 0.336 0.144 0.268 0.293 0.317 0.326 0.333 0.169 0.251 0.278 0.311 0.318 0.321 0.202 0.236 0.245 0.252 0.290 0.303 0.020 0.038 0.053 0.067 0.081 0.101 0.045 0.056 0.064 0.065 0.075 0.102 0.046 0.055 0.066 0.075 0.098 0.107 0.046 0.048 0.051 0.055 0.051 0.060 0.083 0.134 0.191 0.218 0.233 0.249 0.076 0.096 0.176 0.201 0.228 0.261 0.065 0.152 0.223 0.265 0.272 0.290 HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu 2010 48 8.440 8.350 8.069 8.035 2.686 1.312 1.368 0.805 3.283 3.868 7.641 8.148 1.999 2.280 2.697 2.742 4.082 3.936 4.150 48 0.338 0.334 0.323 0.321 0.107 0.105 0.109 0.064 0.263 0.309 0.306 CBHD: TS.Mai Thanh Phong 114 LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA 12 13 14 15 16 17 18 19 TT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 0 0 0 0 0.085 0.024 0.048 0.039 0.061 0.036 0.030 0.053 0.182 0.040 0.070 0.078 0.075 0.054 0.066 0.068 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 20.36 16.83 19.73 23.68 7.24 16.47 17.14 17.14 9.75 8.90 7.56 9.93 8.90 17.55 14.56 22.54 10.47 8.89 15.61 31.32 31.38 29.32 27.58 13.89 20.80 20.46 17.80 15.65 11.22 17.73 21.31 14.72 25.87 28.87 27.87 15.74 19.17 19.96 HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu 0.201 0.231 0.053 0.066 0.075 0.079 0.085 0.101 0.091 0.105 0.088 0.103 0.093 0.105 0.084 0.098 HIỆU SUẤT CHIẾT (%) 34.33 36.54 34.22 37.07 32.48 36.43 28.64 29.43 19.72 24.87 23.46 24.13 24.46 27.79 18.80 20.13 22.39 25.55 20.60 23.55 26.05 30.95 23.47 27.05 19.72 24.54 27.54 29.03 31.36 37.19 33.53 38.68 25.62 30.10 27.33 30.76 24.43 28.65 2010 0.278 0.086 0.089 0.104 0.106 0.119 0.123 0.115 0.308 0.092 0.106 0.106 0.108 0.163 0.161 0.164 0.326 0.080 0.091 0.108 0.110 0.163 0.157 0.166 12 39.17 38.17 37.22 33.90 29.87 27.79 36.10 18.80 27.24 26.71 31.80 32.53 31.86 32.69 38.52 39.18 34.84 36.02 33.52 24 39.33 38.91 37.54 35.48 37.19 37.77 39.43 22.13 29.14 30.51 33.90 36.06 34.02 39.18 39.02 39.85 47.62 47.09 47.88 48 39.49 39.07 37.75 37.59 39.68 38.77 40.43 23.79 30.72 36.20 35.75 38.12 29.53 33.69 39.85 40.51 47.75 46.04 48.54 CBHD: TS.Mai Thanh Phong 115 LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA PL 6.9 SỐ LIỆU PHÂN TÍCH HÀM LƯỢNG CHẤT BÉO TRONG COLLAGEN SAU Q TRÌNH CO2 SIÊU TỚI HẠN Mẫu collagen ASC Thời gian qua CO2 siêu 20 30 tới hạn(ph) lần lần lần lần m giấy lọc (g) 1.0326 1.046 1.0653 1.0369 1.0295 0.8761 m giấy lọc+ mẫu ướt (g) 1.9666 1.955 2.1021 2.1027 2.0169 1.8131 m giấy lọc+mẫu khô (g) 1.9012 1.8891 2.0344 2.0325 1.9527 1.7569 m giấy +mẫu sau chiết 1.8777 1.8672 2.0147 2.0123 1.952 1.756 béo (g) m mẫu ướt (g) 0.934 0.909 1.0368 1.0658 0.9874 0.937 m mẫu khô (g) 0.8686 0.8435 0.9691 0.9956 0.9232 0.8808 m sau chiet béo (g) 0.8451 0.8216 0.9494 0.9754 0.9225 0.8799 m béo (g) 0.0235 0.0219 0.0197 0.0202 0.0007 0.0009 % béo 2.7055 2.5963 2.0328 2.0289 0.0758 0.1022 % Ẩm 7.0021 7.247 6.52971 6.586602 6.5019 5.9979 % béo TB 2.651 2.031 0.089 Hiệu suất loại béo (%) 23.39 96.64 Mẫu collagen Thời gian qua CO2 siêu tới hạn(ph) m giấy lọc (g) m giấy lọc+ mẫu ướt (g) m giấy lọc+mẫu khô (g) m giấy +mẫu sau chiết béo (g) m mẫu ướt (g) m mẫu khô (g) m sau chiet béo (g) m béo (g) % béo % Ẩm % béo TB Hiệu suất loại béo (%) PSC 20 30 lần lần 1.0236 1.086 1.9989 1.994 1.9355 1.9319 lần 1.0568 2.0933 2.024 lần 1.0654 2.1041 2.0357 lần lần 1.0309 1.0525 2.0222 1.9956 1.9548 1.9296 1.9109 1.9074 2.0036 2.0146 1.9540 1.9289 0.9753 0.907 0.9119 0.8455 0.8873 0.8210 0.0246 0.0245 2.698 2.898 6.50 6.80 2.798 1.0365 1.0387 0.9672 0.9703 0.9468 0.9492 0.0204 0.0211 2.109 2.175 6.69 6.59 2.142 23.44 0.9913 0.9431 0.9239 0.8771 0.9231 0.8764 0.0008 0.0007 0.087 0.080 6.80 7.00 0.083 97.03 HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu 2010 CBHD: TS.Mai Thanh Phong 116 LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA PL 6.10 SỐ LIỆU PHÂN TÍCH CÁC THÀNH PHẦN TRONG COLLAGEN ASC PSC m cốc khô (g) 38.2597 31.1547 31.8818 33.4228 31.4892 37.4512 m cốc collagen(g) 39.3867 32.3645 33.1856 33.9204 32.082 37.9561 m cốc collagen sau sấy(g) 39.3078 32.2774 33.1009 33.8905 32.0435 37.9218 m cốc tro sau nung(g) 38.2709 31.1656 31.8975 33.4292 31.4963 37.4562 m collagen trước sấy(g) 1.127 1.2098 1.3038 0.4976 0.5928 0.5049 m collagen sau sấy(g) 1.0481 1.1227 1.2191 0.4677 0.5543 0.4706 m nước(g) 0.0789 0.0871 0.0847 0.0299 0.0385 0.0343 m tro(g) 0.0112 0.0109 0.0157 0.0064 0.0071 0.005 m chất hữu cơ(g) 1.0369 1.1118 1.2034 0.4613 0.5472 0.4656 % ẩm 7.000 7.200 6.500 6.000 6.500 6.800 % tro 0.994 0.901 1.204 1.286 1.198 0.990 % chất hữu 92.006 91.899 92.296 92.714 92.302 92.210 TRUNG BÌNH % ẩm 6.900 6.433 % tro 1.033 1.158 % chất hữu 92.067 92.409 PL 6.11 SỐ LIỆU PHÂN TÍCH HÀM LƯỢNG HYP TRONG COLLAGEN Loại collagen ASC PSC lần lần lần3 lần lần lần3 m mẫu ướt (g) 0.0186 0.0183 0.0177 0.0225 0.0238 0.0209 m mẫu khô (g) 0.0173 0.017 0.0165 0.021 0.0223 0.0195 pha loãng (lần) 100 100 100 100 100 100 Đ ộ hấp thu abs 0.571 0.591 0.588 0.747 0.734 0.724 Hyp suy từ đường chuẩn (μg/ml) 6.357 6.582 6.548 8.339 8.193 8.080 Hyp collagen (mg/g) 36.746 38.719 39.687 39.709 36.738 41.436 Trung bình Hyp collagen (mg/g) 38.384 39.294 PL 6.12 PHIẾU KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM ĐO PHỔ HỒNG NGOẠI FTIR PL 6.13 PHIẾU KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM CHỤP SEM PL 6.14 TIÊU CHUẨN SẢN PHẨM COLLAGEN PL 6.15 BÀI BÁO ĐĂNG TẠI HỘI NGHỊ KHU VỰC VỀ CÔNG NGHỆ SINH HỌC TẠI CAMBODIA HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu 2010 CBHD: TS.Mai Thanh Phong 117 ... CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA (Pangasius hypophthalmus) I ĐẶT VẤN ĐỀ Việt Nam quốc gia có tiềm xuất thủy sản lớn Năm 2006, tổng sản lượng cá tra, cá basa tỉnh ĐBSCL... để dịch chiết đến 48h 100 Hình 28 Phổ FTIR collagen (ASC) da cá tra 100 HVTH: Ngô Hồng Bảo Châu 2010 CBHD: TS.Mai Thanh Phong LUẬN VĂN THẠC SĨ TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA DANH MỤC... 1- TÊN ĐỀ TÀI: TÁCH CHIẾT COLLAGEN TỪ DA CÁ TRA (Pangasius hypophthalmus) 2- NHIỆM VỤ LUẬN VĂN: • Khảo sát trình loại tạp chất da cá trước tách chiết • Khảo sát q trình chiết collagen acid acetic