luận văn
BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI NGUYỄN NGỌC TIẾN NGHIÊN CỨU TỶ LỆ LƯU HÀNH HUYẾT THANH BỆNH LỞ MỒM LONG MÓNG TRÊN TRÂU, BỊ VÀ LỢN TẠI HAI TỈNH THÁI BÌNH VÀ NAM ðỊNH BẰNG PHẢN ỨNG HUYẾT THANH HỌC LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành: Thú y Mã số : 60.62.50 Người hướng dẫn: GS.TS Nguyễn Như Thanh PGS.TS Nguyễn Hữu Nam HÀ NỘI - 2010 LỜI CAM ðOAN Tơi xin cam đoan rằng: - Các kết nghiên cứu luận văn trung thực, khách quan chưa ñược sử dụng ñể bảo vệ học vị - Mọi giúp đỡ q trình thực nghiên cứu viết luận văn ñã ñược cảm ơn Tất thơng tin trích dẫn luận văn ñã ñược ghi rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày 10 tháng 11 năm 2010 Tác giả Nguyễn Ngọc Tiến Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp i LỜI CẢM ƠN Tơi xin trân trọng cảm ơn giúp đỡ q báu Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội, Viện ðào tạo Sau ñại học, Khoa Thú y ñã tổ chức tạo điều kiện cho tơi tham dự khóa học Cao học Thú y K17, ñồng thời giúp ñỡ tơi suốt q trình học tập hồn thành luận văn Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới thầy, cô giảng viên Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội tận tình giảng dạy, giúp đỡ tơi thời gian học tập trường, ñặc biệt hướng dẫn, bảo tận tình Giáo sư - Tiến sỹ Nguyễn Như Thanh, Phó Giáo sư - Tiến sỹ Nguyễn Hữu Nam suốt q trình nghiên cứu, thực đề tài hồn thành luận văn Cuối tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban lãnh ñạo, tập thể cán bộ, nhân viên Cục Thú y, Phịng Dịch tễ, Trung tâm Chẩn đốn Thú y T.W, Chi cục Thú y tỉnh Thái Bình Nam ðịnh, ñặc biệt Tiến sĩ Ronald Jackson Epicenter – ðại học Massey – New Zealand ñã tạo ñiều kiện cho tơi tham dự khóa học, triển khai thực nghiên cứu để hồn thành tốt đề tài Một lần nữa, tơi xin ghi nhận bày tỏ lịng biết ơn tới tất giúp ñỡ quý báu nhiệt tình thày cơ, gia đình, bạn bè, ñồng nghiệp Hà Nội, ngày 10 tháng 11 năm 2010 Tác giả Nguyễn Ngọc Tiến Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ii MỤC LỤC Lời cam ñoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt v Danh mục bảng vi Danh mục hình vii MỞ ðẦU 1.1 ðặt vấn ñề 1.2 Ý nghĩa khoa học thực tiễn ñề tài 1.3 Mục tiêu ñề tài 1.4 ðối tượng phạm vi nghiên cứu 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Khái niệm bệnh Lở mồm long móng 2.2 Lịch sử bệnh Lở mồm long móng 2.3 Vi rút gây bệnh Lở mồm long móng 10 2.4 Bệnh Lở mồm long móng 14 2.5 Các phương pháp chẩn đốn bệnh 22 2.6 Một số phương pháp chọn mẫu dịch tễ học 29 NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 3.1 Nội dung nghiên cứu 34 3.2 ðịa ñiểm nghiên cứu 34 3.3 Nguyên liệu 35 3.4 Phương pháp nghiên cứu 35 3.5 Phương pháp xử lý số liệu 44 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 45 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nơng nghiệp iii 4.1 ðiều tra tình hình chăn ni bệnh LMLM Thái Bình Nam ðịnh 45 4.1.1 Tình hình phát triển chăn ni tỉnh Thái Bình Nam ðịnh 45 4.1.2 Tình hình bệnh Lở mồm long móng Thái Bình 47 4.1.3 Tình hình bệnh Lở mồm long móng Nam ðịnh 49 4.2 Phân bố lồi trâu, bị, lợn nái chia theo lứa tuổi 50 4.3 ðánh giá tỷ lệ lưu hành huyết qua phản ứng 3ABC ELISA đồ phân bố gia súc dương tính 57 4.3.1 ðánh giá tỷ lệ lưu hành huyết loài theo tỉnh 57 4.3.2 ðánh giá tỷ lệ lưu hành huyết loài theo huyện 61 4.3.3 ðánh giá tỷ lệ lưu hành huyết theo loài 65 4.4 Tỷ lệ lưu hành huyết dương tính theo týp huyết đồ phân bố gia súc dương tính 70 KẾT LUẬN 82 5.1 Tỷ lệ lưu hành huyết LMLM theo vị trí 82 5.2 Tỷ lệ lưu hành huyết týp huyết LMLM theo loài gia súc 5.3 82 Tỷ lệ lưu hành huyết LMLM loài gia súc theo týp huyết 83 5.4 Phân bố gia súc có huyết dương tính theo vị trí 83 5.5 Phân bố huyết dương tính với typ theo vị trí 83 TÀI LIỆU THAM KHẢO 85 PHỤ LỤC 90 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp iv DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ADN: Acid Deoxyribonucleic ARN: Acid ribonucleic BHK: Baby Hamster Kidney CFT: Complement Fixation Test CI: Confidence Interval ELISA: Enzyme Linked Immunosorbent Assay FMD: Foot and Mouth Disease IB-RS-2: Instituto Biologico Rim Suino – IgG: Immuno Globulin LMLM: Lở mồm long móng LPB: Liquid Phase Blocking nm: Nanometer µl: Micro liter OD: Optical Density OIE: Tổ chức Thú y Thế giới OPD: Ortho Phenylenediamine PBS: Phosphate Buffered Saline PBST: Phosphate Buffered Saline + Tween PCR: Polymerase Chain Reaction PI: Percentage Inhibition RT: Reverse Transciption TCID50: Tissue Culture Infectious Dose VP: Viral Protein Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp v DANH MỤC CÁC BẢNG Số TT Tên bảng Trang 2.1 Tình hình dịch LMLM nước khu vực 2.2 Tình hình bệnh LMLM qua 10 năm từ 1999 ñến 2009 10 3.1 Sơ ñồ khung chọn mẫu nghiên cứu bậc 37 3.2 Quy định chọn hộ gia đình làng 38 4.1 Số lượng gia súc tỉnh Thái Bình Nam ðịnh qua năm 46 4.2 Tình hình dịch LMLM năm 2006 Thái Bình 48 4.3 Cấu trúc đàn gia súc theo lồi lứa tuổi 51 4.4 Tỷ lệ phần trăm lồi trâu, bị, lợn nái nhóm tuổi 55 4.5 Cấu trúc tỷ lệ (%) so sánh ñàn gia súc theo lồi địa bàn 56 4.6 Cấu trúc tỷ lệ phần trăm so sánh đàn trâu bị theo tính biệt ñịa bàn 57 4.7 Tỷ lệ lưu hành huyết dương tính theo tỉnh (n = 4384) 59 4.8 Tỷ lệ lưu hành huyết dương tính theo huyện (n=4384) 62 4.9 Tỷ lệ lưu hành huyết dương tính theo lồi gia súc 65 4.10 Tỷ lệ lưu hành huyết dương tính lồi theo địa bàn tỉnh 67 4.11 Tỷ lệ lưu hành huyết dương tính theo týp vi rút 71 4.12 Tỷ lệ lưu hành huyết dương tính lồi gia súc theo týp huyết 4.13 74 Tỷ lệ lưu hành huyết dương tính týp huyết theo lồi gia súc Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp vi 76 DANH MỤC CÁC HÌNH Số TT Tên hình Trang 2.1 Một số hình ảnh vi rút LMLM 11 2.2 Sơ ñồ cấu trúc gien vi rút LMLM 12 2.3 Triệu chứng bệnh tích miệng bị bị bệnh LMLM 18 2.4 Bệnh tích miệng lưỡi bò bị bệnh LMLM 19 2.5 Bệnh tích vú bị bị bệnh LMLM 20 2.6 Bệnh tích chân lợn bị bệnh LMLM 21 4.1 Tỷ lệ gia súc phân theo nhóm tuổi 52 4.2 Cấu trúc tỷ lệ (%) đàn gia súc theo lồi theo nhóm tuổi 53 4.2a Phân bố số lượng bò 54 4.2b Phân bố số lượng lợn nái 54 4.2c Phân bố số lượng trâu 54 4.3 Tỷ lệ phần trăm lồi trâu, bị lợn nái nhóm tuổi 55 4.4 Tỷ lệ lưu hành huyết theo tỉnh với ñộ tin cậy 95% 59 4.5 Bản đồ phân bố xã có gia súc dương tính 61 4.6 Tỷ lệ lưu hành huyết dương tính theo địa bàn huyện 63 4.7 Tỷ lệ lưu hành huyết dương tính theo huyện tỉnh Thái Bình 64 4.8 Tỷ lệ lưu hành huyết dương tính theo huyện tỉnh Nam ðịnh 64 4.9 Tỷ lệ huyết dương tính theo lồi gia súc 66 4.10 Tỷ lệ lưu hành huyết theo lồi gia súc địa bàn tỉnh 68 4.11 Bản đồ phân bố xã có bị dương tính 68 4.12 Bản đồ phân bố xã có trâu dương tính 69 4.13 Bản đồ phân bố xã có lợn nái dương tính 70 4.14 Tỷ lệ lưu hành týp huyết Thái Bình Nam ðịnh 71 4.15 Phân bố xã có gia súc dương tính với týp huyết 72 4.16 Phân bố xã có gia súc dương tính với týp O 73 4.17 Phân bố xã có gia súc dương tính với týp Asia1 73 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp vii 4.18 Phân bố xã có gia súc dương tính với týp A 74 4.19 Tỷ lệ phần trăm lưu hành týp O loài gia súc 75 4.20 Tỷ lệ phần trăm lưu hành týp Asia1 loài gia súc 75 4.21 Phân bố xã có bị dương tính với týp O 77 4.22 Phân bố xã có trâu dương tính với týp O 78 4.23 Phân bố xã có lợn nái dương tính với týp O 78 4.24 Phân bố xã có mẫu bị dương tính với týp Asia1 79 4.25 Phân bố xã có mẫu bị dương tính với týp A 79 4.26 Phân bố xã có mẫu lợn nái dương tính với týp Asia1 80 4.27 Phân bố xã có mẫu lợn nái dương tính với týp A 80 4.28 Phân bố xã có mẫu bị, lợn nái dương tính với týp A 81 Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp viii MỞ ðẦU 1.1 ðặt vấn ñề Thái Bình Nam ðịnh hai tỉnh trọng điểm chăn nuôi thuộc khu vực ðồng sông Hồng Theo ước tính sơ bộ, đàn trâu hai tỉnh năm 2008 đạt 12,4 ngàn con, đàn bị 105,6 ngàn ñàn lợn 1820,1 ngàn (nguồn Tổng cục Thống kê) Theo điều tra Cục Chăn ni – Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn, sản lượng thịt lợn năm 2009 hai tỉnh ñạt 228,058 ngàn chiếm 7,78% tổng sản lượng nước Như thấy chăn ni chiếm phần quan trọng cấu ngành nông nghiệp, đặc biệt chăn ni lợn Thái Bình Nam ðịnh vùng cung cấp lợn sữa cho xuất thị trường quốc tế Hồng Kơng, Malaysia, cung cấp lợn giống, lợn thịt cho nhiều tỉnh thành nước Trong vòng 10 năm trở lại đây, dịch lở mồm long móng (LMLM) gia súc bùng phát nhiều ñịa phương nước, có hai tỉnh Thái Bình Nam ðịnh, gây ảnh hưởng nghiêm trọng đến ngành chăn ni, sản phẩm chăn nuôi chủ lực lợn sữa, lợn giống, lợn thịt khơng xuất bán được, đặc biệt việc xuất lợn sữa ñi nước bị dừng lại Do vậy, cơng tác phịng chống dịch LMLM quan tâm ưu tiên hàng đầu Thủ tướng Chính phủ định chi 33 triệu la Mỹ cho Chương trình quốc gia khống chế tốn bệnh LMLM giai đoạn 2006-2010 để mua vắc xin tiêm phòng, Ủy ban nhân dân tỉnh, thành phố trực thuộc Trung ương chi hàng chục tỷ ñồng cho chương trình phịng chống dịch địa phương Việc khống chế ñược dịch LMLM hai tỉnh Thái Bình, Nam ðịnh góp phần vào việc thúc đẩy sản xuất chăn nuôi xuất sản phẩm chăn nuôi Nhằm cung cấp sở khoa học chứng minh dịch LMLM tỉnh Thái Bình Nam ðịnh khống chế, ñáp ứng ñiều kiện vùng an tồn dịch theo quy định Tổ chức Thú y Thế giới, chúng tơi tiến hành nghiên cứu đề tài: Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... lưu hành huyết bệnh Lở mồm long móng trâu, bị lợn hai tỉnh Thái Bình Nam ðịnh phản ứng huyết học? ?? ðây phần quan trọng dự án Chính phủ New Zealand tài trợ để giúp hai tỉnh Thái Bình Nam ðịnh khảo... chăn ni bệnh LMLM Thái Bình Nam ðịnh 45 4.1.1 Tình hình phát triển chăn ni tỉnh Thái Bình Nam ðịnh 45 4.1.2 Tình hình bệnh Lở mồm long móng Thái Bình 47 4.1.3 Tình hình bệnh Lở mồm long móng Nam. .. huyết bệnh LMLM gia súc ñịa bàn tỉnh Thái Bình Nam ðịnh Xây dựng ñồ phân bố bệnh LMLM ñịa bàn hai tỉnh Thái Bình Nam ðịnh 1.4 ðối tượng phạm vi nghiên cứu Trâu, bò, lợn nái ñịa bàn hai tỉnh Thái Bình