xây dựng quy trình định lượng đồng thời một số phthalat trong nước sơn móng tay bằng phương pháp gc ms

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THẠCH THỊ BƠ PHA XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG THỜI MỘT SỐ PHTHALAT TRONG NƯỚC SƠN MÓNG TAY BẰNG PHƯƠNG PHÁP GC - MS LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Thành phố Hồ Chí Minh – 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THẠCH THỊ BƠ PHA XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG THỜI MỘT SỐ PHTHALAT TRONG NƯỚC SƠN MÓNG TAY BẰNG PHƯƠNG PHÁP GC-MS LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Ngành: Kiểm nghiệm thuốc – Độc chất Mã ngành: 8720210 Giảng viên hướng dẫn: TS NGUYỄN HỮU LẠC THỦY TS LÊ THỊ THU CÚC Thành phố Hồ Chí Minh – 2020 LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Thành phố Hồ Chí Minh, ngày tháng 11 năm 2020 Học viên THẠCH THỊ BƠ PHA Luận văn thạc sĩ dược học - Khóa 2018 - 2020 Chuyên ngành: Kiểm nghiệm thuốc Độc chất - Mã số: 8720210 XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG THỜI MỘT SỐ PHTHALAT TRONG NƯỚC SƠN MÓNG TAY BẰNG PHƯƠNG PHÁP GC – MS Thầy hướng dẫn: TS Nguyễn Hữu Lạc Thủy TS Lê Thị Thu Cúc Học Viên: Thạch Thị Bơ Pha TĨM TẮT Mở đầu: Phthalat ester phthalic anhydride sử dụng chất phụ gia sơn móng tay nhằm tăng độ sáng mịn độ bóng sản phẩm Một số phthalat có khả ảnh hưởng tới sức khỏe người Phthalat chất có khả gây ảnh hưởng sức khỏe người nước sơn móng tay sản phẩm mỹ phẩm mà nhà sản xuất sử dụng phthalat làm phụ gia để làm tăng độ sáng mịn độ bóng sản phẩm Mục tiêu: Xây dựng quy trình định lượng đồng thời số phthalat nước sơn móng tay phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ Đối tượng phương pháp nghiên cứu: 20 phthalat, bao gồm phthalat cấm mỹ phẩm Điều kiện sắc ký khí tối ưu hóa cho việc tách phthalat Các phthlat có thời gian lưu trùng phân tích định lượng bẳng mảnh ion đặc trưng Kết quả: Một phương pháp GC-MS phát triển nhằm xác định hàm lượng 20 phthalates mẫu sơn móng tay với bước chuẩn bị mẫu đơn giản Các thông số thẩm định thực theo hướng dẫn ISO 12787:2011 Kết luận: GC-MS phương pháp nhanh để định lượng phthalat với bước chuẩn bị mẫu đơn giản Từ khóa: Phthalat, sơn móng tay, GC-MS ii Master’s thesis – Academic course: 2018 – 2020 Specialty: Drug Quality Control & Toxicology – Code: 8720210 DETERMINATION OF PHTHALATE ESTERS IN NAIL POLISH BY GAS CHROMATOGRAPHY WITH MASS SPECTROMETRIC DETECTION Thach Thi Bo Pha Supervisor: Ph.D Nguyen Huu Lac Thuy Ph.D Le Thi Thu Cuc Introduction: Phthalates are the esters of phthalic anhydride that are mainly used in nail polish to increase their transparency, durability Some certain phthalates esters were indicated to effect to humane health Objectives: To develop a gas chromatography coupled with mass spectrometric detection (GC-MS) method for determination of the certain phthalate esters in nail polish Materials and methods: Twenty phthalates esters, including six banned phthalates in cosmetics, was examined in this study The optimized gas chromatography was surveyed for separation of phthalate esters The same retention time of phthalates was monitored by their unique m/z for quantitative determination Results: A fast GC-MS method was successfully developed for simultaneous quantitative determination of twenty kinds of phthalate in nail polish with a simple step of sample extraction The validation parameters of this method were performed as guidance in ISO 12787:2011 Conclusion: GC-MS is time-saving method for determination of phthalates with simple step of sample extraction Keywords: Phthalates, nail polish, GC – MS MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHŨ VIẾT TẮT ii DANH MỤC CÁC HÌNH iii DANH MỤC CÁC BẢNG iv PHẦN MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan phthalat 1.2 Tổng quan GC-MS 1.3 Phương pháp xử lý mẫu mỹ phẩm 14 1.4 Một số phương pháp phân tích phthalat 15 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.1 Đối tượng, nguyên vật liệu-trang thiết bị nghiên cứu 28 2.2 Phương pháp nghiên cứu 30 2.2.1 Chọn mẫu placebo 30 2.2.2 Khảo sát dung môi chiết 30 2.2.3 Khảo sát xây dựng quy trình định lượng đồng thời số phthalat nước sơn móng tay phương pháp sắc ký khí - khối phổ (GC-MS) 31 2.2.4 Ứng dụng 35 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 36 3.1 Kết nghiên cứu 36 3.1.1 Lựa chọn mảnh ion định lượng 36 3.1.2 Kết chọn mẫu placebo 37 3.1.3 Kết khảo sát dung môi chiết 39 3.1.4 Kết xây dựng quy trình định lượng 41 3.1.5 Thẩm định quy trình 61 3.1.6 Ứng dụng quy trình 72 3.2 Bàn luận 74 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 77 4.1 Kết luận 77 4.2 Kiến nghị 79 TÀI LIỆU THAM KHẢO 80 MỤC LUC PL ii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt GC-MS HPLC Từ gốc Gas Chromatography - Mass Spectrometry High Performance Liquid Chromatographic Tiếng Việt Sắc ký khí ghép khối phổ Sắc ký lỏng hiệu cao Liquid Chromatographic - Mass Săc ký lỏng đầu dò khối Spectrometry phổ LOD Limit Of Detection Giới hạn phát LOQ Limit Of Quantitation Giới hạn định lượng RSD Relative Standard Deviation Độ lệch chuẩn tương đối Di (n-Hexyl, n-Octyl, Di (n-Hexyl, n-Octyl, n-Decyl) Phthalate n-Decyl) Phthalat LC-MS 610P TIC Total Ion Count CTN Chương trình nhiệt SKĐ Sắc ký đồ NSMT Nước sơn móng tay iii DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 1.1: Công thức cấu tạo chung phthalat .3 Hình 1.2: Cơng thức cấu tạo phthalat nghiên cứu .7 Hình 1.3: Sơ đồ khối máy khối phổ Hình 1.4: Sơ đồ tổng quát hệ thống GC-MS 11 Hình 1.5: Cơng thức cấu tạo D4-DBP .13 Hình 1.6: Cơ chế phân mảnh GC-MS phthalat 13 Hình 1.7: Cơ chế phân mảnh DMP GC-MS 13 Hình 2.8: Hệ thống sắc ký khí ghép khối phổ 29 Hình 3.9: SKĐ khảo sát mẫu 14 mẫu NSMT thu thập 39 Hình 3.10: Mẫu placebo thêm chất đối chiếu chiết với dung môi khác 39 Hình 3.11: SKĐ TIC 20 phthalat đối chiếu phân tích cột DB-5ms 42 Hình 3.12: SKĐ SIM 20 phthalat đối chiếu phân tích cột DB-5ms 42 Hình 3.13: SKĐ TIC 20 phthalat đối chiếu phân tích cột DB-35ms 42 Hình 3.14: SKĐ SIM 20 phthalat đối chiếu phân tích cột DB-35ms 43 Hình 3.15: SKĐ SIM DINP DNP cột DB-5ms DB-35ms 43 Hình 3.16: SKĐ SIM DEHP, DHpP DCyHP cột DB-5ms DB-5ms .43 Hình 3.17: SKĐ mẫu đối chiếu CTN 46 Hình 3.18: SKĐ SIM phthalat CTN khác nhau: 47 Hình 3.20: SKĐ SIM, phổ khối đồ thư viện NIST phổ khối đồ chuẩn DMP .51 Hình 3.21: SKĐ SIM, phổ khối đồ thư viện NIST phổ khối đồ chuẩn DEP 51 Hình 3.22: SKĐ SIM, phổ khối đồ thư viện NIST phổ khối đồ DiPrP, DPrP 52 Hình 3.23: SKĐ SIM, phổ khối đồ thư viện NIST phổ khối đồ DiDP .52 Hình 3.24: SKĐ SIM, phổ khối đồ thư viện NIST phổ khối đồ chuẩn BBP 53 Hình 3.25: SKĐ SIM, phổ khối đồ thư viện NIST phổ khối đồ chuẩn DHpP 53 Hình 3.26: SKĐ SIM, phổ khối đồ thư viện NIST phổ khối đồ DiBP, DBP 54 Hình 3.27: SKĐ SIM, phổ khối đồ thư viện NIST phổ khối đồ DiPP, DnPP 55 Hình 3.28: SKĐ SIM, phổ khối đồ thư viện NIST phổ khối đồ DiHP, DHP .56 iv Hình 3.29: SKĐ SIM, phổ khối đồ thư viện NIST phổ khối đồ DCyHP 57 Hình 3.30: SKĐ SIM, phổ khối đồ thư viện NIST phổ khối đồ chuẩn DUP 57 Hình 3.31: SKĐ SIM, phổ khối đồ thư viện NIST phổ khối đồ DnOP, DEHP 58 Hình 3.32: SKĐ SIM, phổ khối đồ thư viện NIST phổ khối đồ DiNP, DNP .59 Hình 3.33: SKĐ SIM, phổ khối đồ thư viện NIST phổ khối đồ chuẩn DMEP 60 Hình 3.34: SKĐ TIC tính đặc hiệu phthalat .61 Hình 3.35: SKĐ tính đặc hiệu DMP DEP .62 Hình 3.36: SKĐ tính đặc hiệu DiPrP DPrP, DiBP DBP 62 Hình 3.37: SKĐ tính đặc hiệu BBP, DiPP DnPP 62 Hình 3.38: SKĐ tính đặc hiệu DiHP DHP; DHpP .63 Hình 3.39: SKĐ tính đặc hiệu DCyHP, DEHP DnOP 63 Hình 3.40: SKĐ tính đặc hiệu DiNP DNP; DiDP 63 Hình 3.41: SKĐ tính đặc hiệu DUP DMEP 64 Hình 3.42: Khảo sát mẫu thu thập .72 v DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1: Giá trị LD50 phthalat Bảng 1.2: Tóm tắt phương pháp phân tích phthalat 21 Bảng 2.3 Danh mục chất đối chiếu phthalat nghiên cứu 28 Bảng 2.4: Chuẩn bị dung dịch chuẩn 34 Bảng 3.5: Các ion phân mảnh 20 phthalat 36 Bảng 3.6: Diện tích pic phthalat chiết với dung mơi khác .40 Bảng 3.7: Kết khảo sát nhiệt độ inlet 41 Bảng 3.8: Các thông số sắc ký cột DB-5ms DB-35ms 44 Bảng 3.9: Chương trình nhiệt khảo sát .45 Bảng 3.10: Điều kiện sắc ký quy trình định lượng 49 Bảng 3.11: Kết khảo sát tính phù hợp hệ thống 50 Bảng 3.12: Đường tuyến tính nồng độ cao .65 Bảng 3.13: Đường tuyến tính nồng độ thấp .66 Bảng 3.14: Kết khảo sát độ độ lặp lại phthalat .68 Bảng 3.15: Độ xác phthalat 69 Bảng 3.16: Giá trị LOD LOQ phthalat nghiên cứu .71 Bảng 3.17: Thông tin sản phẩm khảo sát 72 Bảng 3.18: Kết khảo sát mẫu thị trường 73 ... mẫu nước sơn móng tay để xây dựng quy trình định lượng đồng thời 20 phthalat nước sơn móng tay phương pháp GC- MS - Thẩm định quy trình đạt yêu cầu theo hướng dẫn ISO 12787:2011 - Ứng dụng quy trình. .. tài: ? ?Xây dựng quy trình định lượng đồng thời số phthalat nước sơn móng tay phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ” Với hai mục tiêu sau: Xây dựng thẩm định quy trình phân tích đồng thời số phthalat. .. ngành: Kiểm nghiệm thuốc Độc chất - Mã số: 8720210 XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG THỜI MỘT SỐ PHTHALAT TRONG NƯỚC SƠN MÓNG TAY BẰNG PHƯƠNG PHÁP GC – MS Thầy hướng dẫn: TS Nguyễn Hữu Lạc Thủy