Đánh giá tác dụng của chế phẩm probiotic bio triluc đến sinh trưởng và hình thái vi thể niêm mạc ruột gà j dabaco

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN THỊ THẢO ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CỦA CHẾ PHẨM PROBIOTIC BIO TRILUC ĐẾN SINH TRƯỞNG VÀ HÌNH THÁI VI THỂ NIÊM MẠC RUỘT GÀ J DABACO Ngành: Thú y Mã số: 60.64.01.01 Người hướng dẫn khoa học: TS Nguyễn Bá Tiếp NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2017 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các nội dung nghiên cứu, số liệu tính, kết thể luận văn trung thực chưa công bố cho việc bảo vệ học vị nước Tôi cam đoan rằng, giúp đỡ để thực luận văn cảm ơn thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Tác giả luận văn Nguyễn Thị Thảo i LỜI CẢM ƠN Trước hết xin gửi lời cảm ơn tới Thầy cô giáo công tác Học viện Nông nghiệp Việt Nam nói chung Thầy Khoa Thú Y nói riêng giúp đỡ tơi suốt q trình học tập hồn thành luận văn Đặc biệt, xin cảm ơn TS.Nguyễn Bá Tiếp - Bộ môn Giải phẫu - Tổ chức, khoa Thú Y người tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tơi q trình thực tập hồn thành luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới gia đình, anh em, bạn bè đồng nghiệp động viên, giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho tơi hồn thành luận văn Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Tác giả luận văn Nguyễn Thị Thảo ii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt v Danh mục bảng vi Danh mục hình vii Trích yếu luận văn viii Thesis abstract ix Phần Mở đầu 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục đích đề tài Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Những khái niệm probiotic 2.1.1 Định nghĩa Probiotic 2.1.2 Cơ chế tác động Probiotic 2.1.3 Ứng dụng Probiotic 2.2 Yếu tố thể vật nuôi đáp ứng với Probiotic 10 2.2.1 Đường tiêu hóa 10 2.2.2 Quá trình sinh trưởng 12 2.2.3 Một số yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng gia cầm 13 2.2.4 Các tiêu đánh giá sinh trưởng gia cầm 16 Phần Vật liệu phương pháp nghiên cứu 18 3.1 Vật liệu, địa điểm thời gian nghiên cứu 18 3.2 Nội dung phương pháp nghiên cứu 19 3.2.1 Nội dung nghiên cứu 19 3.2.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 20 3.2.3 Phương pháp theo dõi tiêu 20 3.2.4 Phương pháp làm tiêu vi thể biểu mô ruột non gà 21 3.3 Phương pháp phân tích số liệu 22 iii Phần Kết thảo luận 23 4.1 Tác dụng chế phẩm Bio Triluc đến tiêu sản xuất gà 23 4.1.1 Tỷ lệ nuôi sống gà J Dabaco từ sau nở đến 13 tuần tuổi 23 4.1.2 Khối lượng thể đàn gà J Dabaco thí nghiệm 27 4.2 Tác dụng chế phẩm Bio Triluc đến chuyển hóa thức ăn 29 4.2.1 Lượng thức ăn thu nhận gà J Dabaco 29 4.2.2 Tỷ lệ chuyển hóa thức ăn (FCR) 32 4.3 Ảnh hưởng chế phẩm Bio Triluc đến hình thái biểu mơ kích thước lông nhung ruột non gà 34 4.3.1 Hình thái biểu mô ruột non gà 34 4.3.2 Kích thước lơng nhung biểu mô 38 4.4 Hiệu sử dụng bổ sung Bio Triluc cho gà 41 Phần Kết luận đề nghị 44 5.1 Kết luận 44 5.2 Kiến nghị 44 Tài liệu tham khảo 45 iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nghĩa tiếng Việt Cs Cộng ĐC Đối chứng EU European Union HQSDTA Hiệu sử dụng thức ăn LTATN Lượng thức ăn thu nhận NT Ngày tuổi TA Thức ăn TCVN Tiêu chuẩn Việt nam TN Thí nghiệm TNHH Trách nhiệm hữu hạn TT Tuần tuổi TTTA Tiêu tốn thức ăn VSV Vi sinh vật WHO World Health Organization v DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1 Tỷ lệ ni sống gà thí nghiệm 24 Bảng 4.2 Khối lượng thể đàn gà J Dabaco thí nghiệm (g/con) 27 Bảng 4.3 Lượng thức ăn thu nhận gà J Dabaco 30 Bảng 4.4 Tỷ lệ chuyển hóa thức ăn 33 Bảng 4.5 Hiệu bổ sung Bio Triluc 42 vi DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Cơ chế kháng vi sinh vật Bacteriocin.(Cotter et al.,2005) Hình 2.2 Cấu tạo ruột non 12 Hình 4.1 Tỷ lệ ni sống gà J Dabaco thời gian thí nghiệm 25 Hình 4.2 Gà J Dabaco 13 tuần tuổi ni thí nghiệm 26 Hình 4.3 Khối lượng thể đàn gà J Dabaco thí nghiệm 29 Hình 4.4 Lương thức ăn thu nhận gà J Dabaco thí nghiệm 31 Hình 4.5a Khơng tràng lợn 28 ngày tuổi 34 Hình 4.5b Khơng tràng gà thí nghiệm 34 Hình 4.6 Tá tràng gà thuộc nhóm bổ sung chế phẩm Bio Triluc nhóm đối chứng 35 Hình 4.7 Khơng tràng gà thuộc nhóm bổ sung chế phẩm Bio Triluc nhóm đối chứng 36 Hình 4.8 Hối tràng gà thuộc nhóm bổ sung chế phẩm Bio Triluc nhóm đối chứng 37 Hình 4.9 Chiều cao chiều rộng lông nhung biểu mô tá tràng 39 Hình 4.10 Chiều cao chiều rộng lơng nhung biểu mơ khơng tràng 40 Hình 4.11 Chiều cao chiều rộng lông nhung biểu mô hồi tràng 40 ` vii TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Nguyễn Thị Thảo Tên luận văn: Đánh giá tác dụng Probiotic Bio Triluc đến sinh trưởng hình thái vi thể niêm mạc ruột gà J Dabaco Ngành: Thú y Mã số: 60.64.01.01 Cơ sở đào tạo: Học viện Nông nghiệp Việt Nam MỤC ĐÍCH NGHIÊN CỨU Đánh giá tác dụng probiotic dạng bảo tử chế phẩm Bio Triluc đến hiệu suất tăng trưởng hình thái vi thể niêm mạc ruột gà J Dabaco, làm sở khuyến cáo cho sử dụng chế phẩm chăn nuôi gà bền vững PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU - Phương pháp bố trí thí nghiệm nhân tố đánh giá tác dụng chế phẩm Bio Triluc chứa vi khuẩn dạng bào tử đến tiêu dinh dưỡng tăng trưởng - Phương pháp thường quy làm tiêu vi thể nhuộm HE - Kích thước lơng nhung đo phần mềm Infinity Analysis kính hiển vi Kniss MBL-2000T (Olympus, Japan) KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CHÍNH - Bổ sung Bio Triluc chứa vi khuẩn dạng bào tử nước uống làm giảm 1,35% tỷ lệ chết gà - Bổ sung Bio Triluc làm tăng khả sinh trưởng gà (3,96%), giảm tỷ lệ chuyển hóa thức ăn (1,23%) dẫn đến làm tăng khả tiêu hóa thức ăn gà - Các vi khuẩn dạng bảo tử bảo vệ biểu mô ruột non thể tồn vẹn lơng nhung biểu mơ, tăng chiều dài chiều rộng lơng nhung từ giúp cải thiện khả hấp thu dinh dưỡng - Bổ sung chế phẩm Bio Triluc làm giảm chi phí sản xuất (1,24%) qua làm tăng lợi nhuận cho người chăn nuôi KẾT LUẬN CHỦ YẾU CỦA LUẬN VĂN Những kết nghiên cứu góp phần chứng minh tác dụng tích cực vi khuẩn dạng bào tử chế phẩm Bio Triluc đến tăng trưởng tiêu trao đổi chất tế bào biểu mô ruột gà J Dabaco Kết coi sở cho việc sử dụng chế phẩm chứa bào tử vi khuẩn thành phần bổ sung vào thức ăn chăn nuôi gà bền vững viii THESIS ABSTRACT Author name: Nguyen Thi Thao Thesis title: Evaluation of effects of Probiotic Bio Triluc on growth and mophology of intestinal mucosa in chicken J Dabaco Major: Veterinary Code: 60.64.01.01 Institution: Viet Nam national university of Agriculture AIMS OF THE RESEARCH Investigation of effects on the growth and intestinal epithelial villum measurements of J Dabaco chickens of bacterial spores as a probiotic supplement Bio Triluc METHODS - One factor experimental design for assessing the effects of Bio Triluc containing bacterial spores on nutritional and growth parameters - Routine methods for microscopic examination with HE staining slides - Epithelial villum measurement was performed with Infinity Analysis software o using Kniss MBL-2000T microscope (Olympus, Japan) MAIN RESULTS - Supplement of Bio Triluc containing bacterial spores in drinking water led to a decrease of mortality rate of chicks (1,35%) - Bio Triluc supplemented chickens had higher (3,96%) growth rate, lower (1,23%) feed conversion ratio (FCR) leading to higher efficacy of feed metabolism of J Dabaco chickens - Bacterial spores protected small intestinal epithelia shown in the epithelial integrity, higher and wider villa that led to positive effects on nutrition absorbability of Fayoumi layers - Supplement of Bio Triluc reduces production costs (1,24%) that led to an increase in profitability for the chicken owners CONLUSIONS The results proved productive effects of baterial spores in Bio Triluc as probiotics on growth and metabolism parameters as well as on epithelial cells of J Dabaco chickens The study can be considered as additional evidence for using bacterial spore products as feed supplements in sustainable chicken farming ix tương tự tá tràng Lông nhung tá tràng có dạng hai gấp nếp; có dạng hình lưỡi hình (Van Leeuwen et al., 2004) Quan sát tiêu vi thể cho thấy không tràng lông nhung ngắn rộng lông nhung tá tràng Đỉnh lông nhung tù đáy lông nhung rộng lơng nhung tá tràng (hình 4.7) Dưới kính hiển vi thấy hầu hết lơng nhung khơng tràng gà bổ sung chế phẩm Bio Triluc (hình 4.7a) có phần đỉnh lơng nhung tồn vẹn cao lơng nhung tá tràng gà nhóm đối chứng (hình 4.7b) Một số lơng nhung khơng tràng nhóm bổ sung chế phẩm có xu hướng bẻ cong, lơng nhung q cao so với đường kính lịng ruột Kiểu hình thái không thấy biểu mô ruột non lợn số động vật có khác e e d d c a b c b a Hình 4.7 Khơng tràng gà thuộc nhóm bổ sung chế phẩm Bio Triluc (trái) nhóm đối chứng (phải): (a) áo ngoài; (b) áo (cơ trơn); (c) lớp đệm (d) lơng nhung biểu mơ; (e) lịng ruột; x100 HE Các nghiên cứu trước cho thấy, số trường hợp lơng nhung khơng tràng có dạng hình uốn cong thắt lưng (Yamauchi, 2002) Tại đoạn ruột có đường kính lớn hay đoạn ruột phì đại ảnh hưởng đến lưu thông chất chứa ruột nhu động Sự gia tăng lơng nhung có hình thái khơng bình thường nhiều nguyên nhân khác chất chứa lưu lâu ruột thừa dinh dưỡng Hồi tràng (ileum) đoạn ngắn ruột non, ngắn khoảng 10% chiều dài tá tràng (Hassouna, 2001) Hình thái biểu mơ hồi tràng tương tự tá tràng không tràng Trên tiêu quan sát thí nghiệm thấy hầu hết lơng nhung hồi tràng có đỉnh tù phần đáy rộng Hồi tràng có nhiều tế bào hình đài tá tràng không tràng 36 f e e d d c b c b a a Hình 4.8 Hồi tràng gà thuộc nhóm bổ sung chế phẩm Bio Triluc (trái) nhóm đối chứng (phải): (a) áo ngoài; (b) áo (cơ trơn); (c) lớp đệm (d) lơng nhung biểu mơ; (e) lịng ruột; x100 HE Từ tá tràng xuống đoạn ruột sau, kích thước lơng nhung thường giảm chiều cao dần xuống hồi tràng (Rolls et al., 1978) Lông nhung hồi tràng ngắn (Khambualai et al., 2009) có diện tích nhỏ lơng nhung khơng tràng (Incharoen and Yamauchi, 2009) Đặc điểm hình thái giải thích khác chức đoạn ruột, hồi tràng chất dinh dưỡng gần hấp thu hết phần ruột trước đó, chất chứa hồi tràng nghèo dinh dưỡng nên vai trò hấp thu nhỏ dẫn đến giảm chiều cao diện tích lơng nhung Tuy nhiên, chất chứa hồi tràng chứa nhiều chất dinh dưỡng điều xảy ra? Nghiên cứu Yamauchi et al (2010) phát rằng, hàm lượng dinh dưỡng tăng, kích thước lơng nhung khơng tăng lên mà nhiều lơng nhung hợp lại tạo thành lông nhung lớn Lông nhung cấu trúc hình ngón tay nhơ lên bề mặt niêm mạc ruột làm tăng diện tích bề mặt ruột non lên nhiều lần Các lông nhung cách khe lông nhung Trên lông nhung có enterocyte hình trụ với nhiều vi nhung; xen kẽ với enterocyte tế bào goblet Các enterocyte lông nhung hấp thu dinh dưỡng từ lịng ruột sau chất dinh dưỡng chuyển vào hệ thống mao mạch mao mạch bạch huyết; tập trung đổ tĩnh mạch cửa đổ tĩnh mạch đường tiêu hóa chuyển vào máu Nhiều nghiên cứu chứng minh rằng, gà, số lượng lông nhung tá tràng nhiều so với không tràng hồi tràng Chiều cao lông nhung giảm dần từ tá tràng xuống hồi tràng Đặc điểm cấu trúc phù hợp với chức đoạn ruột Kết nghiên cứu chứng minh điều 37 Như vậy, đặc điểm điển hình cấu tạo vi thể ruột non gà thí nghiệm bao gồm: Thành ruột mỏng; lớp áo mỏng; lớp hạ niêm mạc lớp niêm không rõ Lớp đệm lớp biểu mô dày lớp khác Biểu mơ gồm lơng nhung có chiều cao, khoảng cách hình thái khác đoạn ruột non Giữa hai nhóm, lơng nhung tá tràng lông nhung không tràng gà bổ sung chế phẩm Bio Triluc có cấu trúc rõ ràng lơng nhung biểu mơ gà nhóm đối chứng Một số lơng nhung biểu mơ ruột non gà nhóm đối chứng có phần đỉnh khơng tồn vẹn Đây đặc điểm ảnh hưởng đến khả hấp thu dinh dưỡng nguy nhiễm bệnh vi sinh vật đường ruột gây nên 4.3.2 Kích thước lơng nhung biểu mơ Để đánh giá ảnh hưởng bổ sung chế phẩm Bio Triluc đến kích thước lơng nhung, tiêu từ tá tràng, không tràng hồi tràng quan sát kính hiển vi gắn máy ảnh hình Các lơng nhung vi trường tiêu đo chiều cao chiều rộng Chiều cao đo tính từ điểm cao đỉnh lông nhung kéo xuống đến đáy lông nhung Chiều rộng đo vng góc với chiều cao trung điểm chiều cao Kết kích thước lơng nhung biểu mô tá tràng cho thấy chế phẩm Bio Triluc làm chiều cao lông nhung tăng rõ rệt so với chiều cao lơng nhung biểu mơ tá tràng nhóm đối chứng (1,69 ± 0,46mm so với 1,15 ± 0,101 mm), tỷ lệ tăng tới xấp xỉ 47% (hình 4.8) Chiều rộng lông nhung tá tràng gà bổ sung chế phẩm 0,32±0,11mm, tương đường chiều rông lông nhung tá tràng gà nhóm đối chứng (0,29±0,08mm) (hình 4.8) 38 Hình 4.9 Chiều cao chiều rộng lơng nhung biểu mơ tá tràng (a = sai khác có ý nghĩa với giá trị tương ứng nhóm ĐC; p