Bài viết dựa trên đặc điểm hình thái và trình tự vùng ITS của rDNA, cả ba chủng Tr.6, Tr.7 và Tr.8 được xác định thuộc loài Trichoderma asperellum. Ba chủng nấm Trichoderma tuyển chọn này có tiềm năng ứng dụng trong sản xuất chế phẩm sinh học dùng cho phòng trừ vi nấm gây bệnh trên cây cam và các cây trồng khác
VNU Journal of Science: Natural Sciences and Technology, Vol 36, No (2020) 98-104 Original Article Isolation and Characterization of Trichoderma Strains Antagonistic Against Pathogenic Fungi on Orange Crops Vu Xuan Tao1, Tran Van Tuan2, Center of Experimental Biology, National Center for Technological Progress, Ministry of Science and Technology, C6 Thanh Xuan Bac, Thanh Xuan, Hanoi, Vietnam Department of Microbiology, Faculty of Biology, VNU University of Science, 334 Nguyen Trai, Thanh Xuan, Hanoi, Vietnam Received 29 May 2020 Revised 24 June 2020; Accepted 29 June 2020 Abstract: Agricultural production is greatly influenced by diseases caused by fungi Penicillium digitatum is a common fungus that causes blue mold in citrus fruits In addition, Fusarium and Phytophthora species are also recognized as citrus pathogens, involving in root rot and fruit rot Currently, the use of microbial bioproducts to control fungal pathogens is always prioritized for an organic and sustainable agriculture Trichoderma species are considered as safe filamentous fungi that antagonize against many fungal plant pathogens In this study, 10 strains of Trichoderma were isolated and monitored for their antagonistic capacity towards the citrus pathogen P digitatum The strains Trichoderma Tr.6, Tr.7 and Tr.8 exhibited inhibitory efficacy of 95-100% against P digitatum Additionally, these three strains also strongly suppressed the growth of two other common plant pathogens Fusarium oxysporum and Phytophthora capsici Based on the morphological characteristics and the sequence analysis of the internal transcribed spacer (ITS) region of rDNA, all three strains Tr.6, Tr.7 and Tr.8 were identified as Trichoderma asperellum These Trichoderma strains represent promising potentials for applications in the production of bioproducts for the control of pathogenic fungi infecting citrus and other crops Keywords: Orange crops, fungal antagonism, Penicillium digitatum, Fusarium oxysporum, Phytophthora capsici, Trichoderma asperellum Corresponding author Email address: tuantran@vnu.edu.vn https://doi.org/10.25073/2588-1140/vnunst.5086 98 V.X Tao, T.V Tuan / VNU Journal of Science: Natural Sciences and Technology, Vol 36, No (2020) 98-104 99 Phân lập tuyển chọn chủng Trichoderma có khả đối kháng vi nấm gây bệnh cam Vu Xuan Tao1, Tran Van Tuan2, Trung tâm Sinh học Thực nghiệm, Viện Ứng dụng Công nghệ, Bộ Khoa học Công nghệ, C6 Thanh Xuân Bắc, Thanh Xuân, Hà Nội, Việt Nam Bộ môn Vi sinh vật học, Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội, 334 Nguyễn Trãi, Thanh Xuân, Hà Nội, Việt Nam Nhận ngày 29 tháng năm 2020 Chỉnh sửa ngày 24 tháng năm 2020; Chấp nhận đăng ngày 29 tháng năm 2020 Tóm tắt: Sản xuất nơng nghiệp chịu ảnh hưởng lớn bệnh hại trồng vi nấm gây Nấm Penicillium digitatum vi nấm phổ biến gây bệnh thối mốc xanh có múi Ngoài ra, nấm Fusarium Phytophthora ghi nhận vi nấm bệnh có múi, bệnh thối rễ thối Hiện nay, việc kiểm soát vi nấm gây bệnh trồng sử dụng chế phẩm sinh học nhằm hướng tới nông nghiệp bền vững ngày ý Nấm Trichoderma đánh giá chi nấm an tồn, có khả đối kháng chống lại nhiều lồi nấm gây bệnh trồng Trong nghiên cứu này, 10 chủng nấm Trichoderma phân lập đánh giá khả đối kháng chống lại nấm P digitatum gây hỏng cam Các chủng Trichoderma Tr.6, Tr.7 Tr.8 có hoạt tính kháng nấm P digitatum vượt trội, đạt 95-100% Đồng thời, ba chủng nấm có khả kháng mạnh với hai loài nấm bệnh phổ biến khác Fusarium oxysporum Phytophthora capsici Dựa đặc điểm hình thái trình tự vùng ITS rDNA, ba chủng Tr.6, Tr.7 Tr.8 xác định thuộc loài Trichoderma asperellum Ba chủng nấm Trichoderma tuyển chọn có tiềm ứng dụng sản xuất chế phẩm sinh học dùng cho phòng trừ vi nấm gây bệnh cam trồng khác Từ khóa: Cây cam, đối kháng nấm bệnh, Penicillium digitatum, Fusarium oxysporum, Phytophthora capsici, Trichoderma asperellum Mở đầu Hiện gần 90 nước giới thuộc vùng nhiệt đới nhiệt đới, ngành trồng ăn có múi phát triển, cam đối tượng Đặc trưng cam loại ăn lâu năm, có hàm lượng nước dinh dưỡng cao, điều kiện thuận lợi cho phát triển số loại vi sinh vật, đặc biệt vi nấm gây bệnh Nấm Penicillium digitatum nguyên nhân gây bệnh thối mốc Tác giả liên hệ Địa email: tuantran@vnu.edu.vn https://doi.org/10.25073/2588-1140/vnunst.5086 xanh rụng có múi P digitatum có khả sinh trưởng phổ nhiệt độ rộng từ 4-30oC, tối ưu nhiệt độ 25-30oC, không sinh trưởng 37oC P digitatum lây nhiễm qua vết xước có múi Các vết xước, tổn thương vỏ trùng tác nhân vật lý gây Nếu nấm nhiễm vào giai đoạn trước thu hoạch gây tượng rụng Bào tử nấm từ thối hỏng xâm nhập vào đất phát tán theo gió di chuyển đến nhiều địa điểm khác [1] Nấm 100 V.X Tao, T.V Tuan / VNU Journal of Science: Natural Sciences and Technology, Vol 36, No (2020) 98-104 Fusarium Phytophthora ghi nhận tác nhân gây bệnh thối rễ, thối có múi, đặc biệt cam [2] Hiện nay, để kiểm soát loài nấm gây hại này, biện pháp phổ biến sử dụng loại thuốc có nguồn gốc hóa học, độc hại cho người gây ô nhiễm môi trường Áp dụng biện pháp kiểm soát sinh học cách sử dụng phân bón hữu chế phẩm sinh học có chứa vi sinh vật đối kháng ưu tiên hàng đầu sản xuất nông nghiệp bền vững Vi nấm Trichoderma đánh giá chi nấm an tồn có hoạt tính đối kháng chống lại số nấm gây bệnh trồng nhờ chế sinh kháng sinh, ký sinh cạnh tranh [3] Ngồi ra, Trichoderma cịn có khả kích thích sinh trưởng trồng, sinh enzyme phân giải chất hữu giúp cải tạo đất Tại Việt Nam, chế phẩm phòng trừ nấm bệnh cho trồng chưa nhiều Một số chế phẩm sinh học (như chế phẩm BIMA Trung tâm Công nghệ sinh học thành phố Hồ Chí Minh) tập trung chủ yếu vào phịng trừ nấm bệnh đất trồng hồ tiêu, cà phê cao cao Việc nghiên cứu, tuyển chọn thêm chủng Trichoderma có hoạt tính đối kháng mạnh góp phần hỗ trợ thiết thực cho việc sản xuất chế phẩm sinh học để phòng trừ nấm gây bệnh có múi số trồng quan trọng khác nước ta Vật liệu phương pháp 2.1 Vật liệu Chủng nấm Penicillium digitatum, Fusarium oxysporum, Phytophthora capsici Bộ môn Vi sinh vật học, Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội cung cấp Chủng nấm Trichoderma harzianum KS3 chủng dùng để sản xuất chế phẩm Mocabi đối kháng số nấm gây bệnh trồng, dùng làm đối chứng so sánh với chủng nấm phân lập nghiên cứu Chủng T harzianum KS3 chuyển giao giáo sư Kasem Soytong (Đại học King Mongkut, Thái Lan) cung cấp Công ty TNHH Nông Sinh (Đan Phượng, Hà Nội) Các mẫu đất vùng rễ số trồng thu thập từ số tỉnh miền Bắc (Nam Định, Thanh Hóa, Thái Bình, Hà Nội, Hà Giang) để phân lập chủng Trichoderma 2.2 Phương pháp Thu mẫu đất: Mẫu đất vùng rễ khỏe mạnh, phát triển tốt lấy dụng cụ inox vô trùng bọc giấy bạc Mỗi điểm thu đào xuống từ mặt đất 10-15cm lấy khoảng 100g đất xung quanh vùng rễ Mẫu đựng túi polyetylen chịu nhiệt vô trùng trước sử dụng Thời gian địa điểm thu mẫu ghi trực tiếp vỏ túi bút chống xóa Mẫu bảo quản mát vịng 24-48 sử dụng để phân lập nấm Trichoderma chuyển phịng thí nghiệm Phân lập xác định đặc điểm hình thái chủng nấm Trichoderma: Môi trường sử dụng để phân lập PDA có bổ sung kháng sinh chloramphenicol (100 g/ml) Kháng sinh chloramphenicol có tác dụng kháng khuẩn, ngăn khơng cho vi khuẩn sinh trưởng Các mẫu đất pha loãng nước cất vô trùng đến nồng độ khác từ 10-1 đến 10-5 Cấy trải mẫu nồng độ pha lỗng lên mơi trường PDA có bổ sung kháng sinh chloramphenicol Các đĩa ủ 28oC thu nhận khuẩn lạc nấm riêng rẽ Các khuẩn lạc có sợi trắng, bào tử màu xanh xanh vàng tách riêng, làm giữ ống nghiệm để sử dụng cho thí nghiệm Các chủng nấm sau khiết ni cấy trực tiếp tiêu kính hiển vi vơ trùng có chứa mơi trường PDA Tiêu giữ hộp nhựa vơ trùng có bổ sung giấy thấm nước vơ trùng để trì độ ẩm Mẫu ủ 28oC 4-5 ngày Hình thái hệ sợi nấm cuống sinh bào từ quan sát kính hiển vi [4] Tuyển chọn chủng nấm Trichoderma có hoạt tính đối kháng nấm gây bệnh: Môi trường PDA sử dụng để đánh giá hoạt tính đối kháng chủng Trichoderma chống lại V.X Tao, T.V Tuan / VNU Journal of Science: Natural Sciences and Technology, Vol 36, No (2020) 98-104 nấm gây bệnh Trên đĩa môi trường PDA đặt hai miếng thạch có đường kính mm đối diện Một phía đặt miếng thạch chứa hệ sợi nấm bệnh, phía đối diện đặt miếng thạch chứa hệ sợi chủng Trichoderma Đĩa đối chứng cấy nấm bệnh Các đĩa giữ nhiệt độ 25 ± 2oC 5-7 ngày Sau đó, tiến hành đo đường kính nấm gây bệnh đĩa đối kháng, tính phần trăm đối kháng công thức: I = (C-T)/C x 100 I = phần trăm đối kháng, C = đường kính nấm bệnh cấy đĩa mơi trường, T = đường kính nấm bệnh đĩa đối kháng [5] Định danh nấm Trichoderma dựa trình tự vùng ITS rDNA: Bào tử nấm thu từ đĩa nuôi cấy sử dụng nước vô trùng màng lọc Miracloth DNA tổng số chiết từ hệ sợi nấm theo quy trình nhóm nghiên cứu công bố [6] Vùng ITS rDNA khuếch đại từ mẫu DNA tổng số PCR sử dụng cặp mồi ITS1 (TCCGTAGGTGAACCTG CGG)/ITS4(TCCTCCGCTTATTGATATGC) đặc hiệu cho nấm [7] Sản phẩm PCR điện di gel agarose 0,7% tinh kit hãng Promega Mẫu DNA tinh giải trình tự cơng ty 1st BASE (Singapore) Trình tự ITS so sánh với liệu Ngân hàng gen Quốc tế (GenBank) sử dụng chương trình BLAST phân tích vẽ phát sinh chủng loại phần mềm MEGA7 Kết thảo luận 3.1 Phân lập đặc điểm hình thái chủng Trichoderma Từ mẫu đất thu thập, phương pháp pha loãng mẫu cấy trải môi trường PDA, phân lập khiết 10 chủng Trichoderma Sau 3-5 ngày nuôi cấy mơi trường PDA 28oC, chủng nấm hình thành hệ sợi màu trắng mang bào tử màu xanh nhạt tới đậm màu vàng nhạt lan phủ bề mặt đĩa thạch tạo thành vòng tròn đồng tâm (Hình 1) Khi quan sát kính hiển vi với độ phóng đại 400 lần cho thấy hình dạng sợi nấm, cuống sinh bào tử có cấu trúc phân nhánh có hình 101 chai Bào tử đính (conidia) có dạng hình trứng, ovan Hệ sợi nấm cịn hình thành thêm bào tử vách dày (chlamydospore) Đây đặc điểm đặc trưng loài thuộc chi nấm Trichoderma [8] (Hình 2) Hình Hình thái khuẩn lạc chủng Trichoderma mơi trường PDA Hình Cấu trúc cuống sinh bào tử đính hệ sợi mang bào tử vách dày chủng Trichoderma 3.2 Khả đối kháng chủng Trichoderma Nấm Trichoderma cơng nhận vi nấm có khả đối kháng chống lại nhiều nấm gây bệnh trồng [9] Trong nghiên cứu này, tất 10 chủng Trichoderma tiến hành kiểm tra khả đối kháng với nấm P digitatum gây bệnh thối mốc xanh, rụng cam so sánh với chủng T harzianum KS3 dùng cho sản xuất chế phẩm thương mại Mocabi Công ty TNHH Nông Sinh Kết nghiên cứu cho thấy, khả đối kháng với nấm P digitatum tùy vào chủng cho mức độ đối kháng khác Ba chủng Trichoderma Tr.6, 102 V.X Tao, T.V Tuan / VNU Journal of Science: Natural Sciences and Technology, Vol 36, No (2020) 98-104 Tr.7 Tr.8 có hoạt tính đối kháng tốt với P digitatum đạt 95-100%, cao nhiều so với chủng T harzianum KS3 đạt 64% (Hình 3) Đáng ý ba chủng có khả sinh trưởng mạnh số 10 chủng phân lập (Hình 1) Theo nghiên cứu Kotasthane cộng [10] khả đối kháng chủng Trichoderma với nấm bệnh Sclerotium cho thấy kết mức độ đối kháng nằm khoảng 49,5-81% [10] màng lipid, tham gia vào hoạt động đối kháng trực tiếp cảm ứng khả đề kháng với tác nhân gây bệnh trồng [11] Hình Khả đối kháng chủng Trichoderma với nấm F oxysporum P capsici Hình Khả đối kháng chủng Trichoderma với nấm P digitatum Chủng thương mại KS3 sử dụng làm đối chứng để so sánh Ba chủng Trichoderma Tr.6, Tr.7 Tr.8 tiếp tục kiểm tra khả ức chế sinh trưởng với hai loài nấm bệnh khác F oxysporum P capsici gây thối rễ thối trồng Kết nghiên cứu cho thấy, chủng nấm Trichoderma đối kháng mạnh với F oxysporum P capsici, đặc biệt chủng Tr.6 có hiệu kháng hai loài nấm nêu lên tới 90% (Hình 4) Theo nghiên cứu ElKomy cộng [5], hiệu đối kháng Trichoderma với nấm F oxysporum nằm khoảng 68-71% Ngoài chế ký sinh cạnh tranh giúp cho nấm Trichoderma có khả kháng lại số nấm gây bệnh trồng lồi Trichoderma cịn có khả sinh chất kháng nấm dạng chất bay hơi, enzyme ngoại bào chất kháng sinh Các chất có tác dụng phá vỡ Trên giới, nấm T asperellum T harzianum xác nhận an toàn sử dụng để sản xuất chế phẩm sinh học thương mại Mycostop, Tenet, Trianum P dùng phòng trừ nấm bệnh đất cho trồng [12] Tuy nhiên, Việt Nam chưa có nhiều chế phẩm sử dụng Trichoderma phòng trừ nấm bệnh cách hiệu quả, đặc biệt vi nấm gây bệnh có múi Với hoạt tính kháng nấm vượt trội, chủng Trichoderma phân lập nghiên cứu có tiềm ứng dụng vào sản xuất chế phẩm sinh học phịng trừ nấm gây bệnh trồng sử dụng cho nghiên cứu chuyên sâu chế sinh chất kháng nấm, chế cạnh tranh 3.3 Định danh chủng nấm Trichoderma giải trình tự vùng ITS rDNA Để xác định xác đến loài cho ba chủng Trichoderma Tr.6, Tr.7 Tr.8, chúng tơi tiến hành giải trình tự vùng ITS rDNA So với gen 18S rRNA 28S rRNA rDNA, vùng ITS (gồm ITS1; 5,8S rRNA; ITS2) có mức độ biến đổi cao lồi gần gũi Do trình tự vùng ITS sử dụng thị mã vạch nghiên cứu phân loại nấm, bao gồm loài thuộc chi Trichoderma [1316] V.X Tao, T.V Tuan / VNU Journal of Science: Natural Sciences and Technology, Vol 36, No (2020) 98-104 103 kháng mạnh với hai loài nấm bệnh khác F oxysporum P capsici Ba chủng Trichoderma Tr.6, Tr.7 Tr.8 định danh thuộc loài Trichoderma asperellum dựa đặc điểm hình thái trình tự vùng ITS rDNA Lời cảm ơn Các tác giả xin cảm ơn CN Trần Thị Thanh Huyền hỗ trợ kỹ thuật cho số thí nghiệm Cơng trình hỗ trợ kinh phí từ đề tài KH&CN cấp Bộ Khoa học Công nghệ “Nghiên cứu tạo chế phẩm sinh học kháng vi nấm gây bệnh cam số tỉnh phía Bắc” Tài liệu tham khảo Hình Định danh chủng Trichoderma Tr.6, Tr.7 Tr.8 dựa trình tự vùng ITS rDNA (A, B) DNA sản phẩm PCR vùng ITS gel agarose 0,7%, (C) Cây phát sinh chủng loại dựa trình tự ITS rDNA DNA tổng số ba chủng Trichoderma Tr.6, Tr.7 Tr.8 tách chiết kiểm tra gel agarose 0,7% Kết cho thấy chất lượng DNA đủ tốt cho nghiên cứu (Hình 5A) Vùng ITS khuếch đại PCR sử dụng cặp mồi ITS1/ITS4 Kết cho thấy băng DNA có kích thước khoảng 500 bp (Hình 5B) Kết so sánh trình tự ITS với liệu có GenBank xây dựng phát sinh chủng loại sử dụng phần mềm MEGA7 cho thấy ba chủng Trichoderma Tr.6, Tr.7 Tr.8 thuộc lồi Trichoderma asperellum với mức độ tương đồng trình tự ITS đạt từ 99% đến 100% (Hình 5C) [1] [2] [3] [4] [5] Kết luận Đã phân lập đánh giá khả đối kháng 10 chủng Trichoderma từ mẫu đất với nấm P digitatum gây bệnh cam Các chủng Tr.6, Tr.7 Tr.8 có hiệu kháng nấm P digitatum vượt trội, đạt 95-100% Đồng thời, ba chủng Trichoderma thể khả [6] S Bautista-Baños, Penicillium digitatum, Penicillium italicum (green mold, blue mold), in: L Palou (ed.), Postharvest Decay, Elsevier, Amsterdam, 2014, pp 45-102 M.W Olsen, Diseases of citrus in Arizona, University of Aiona, College of Agriculture and Life Sciences, Tucson, 2000 M Verma, S.K Brar, R.D Tyagi, R.Y Surampalli, J.R Valero, Antagonistic fungi, Trichoderma spp.: panoply of biological control, Biochemical Engineering Journal 37 (2007) 1-20 https://doi.org/ 10.1016/j.bej.2007.05.012 X.T Vu, T.T Ngo, T.D.L Mai, T.T Bui, H.D Le, T.V.H Bui, Q.H Nguyen, X.B Ngo, V.T Tran, A highly efficient Agrobacterium tumefaciensmediated transformation system for the postharvest pathogen Penicillium digitatum using DsRed and GFP to visualize citrus host colonization, Journal of Microbiological Methods 144 (2018) 134-144 https://doi.org/10.1016/ j.mimet.2017.11.019 M.H ElKomy, A.A Saleh, A Eranthodi, Y.Y Molan, Characterization of novel Trichoderma asperellum isolates to select effective biocontrol agents against tomato Fusarium wilt, The Plant Pathology Journal 31 (2015) 50-60 https://doi org/10.5423/PPJ.OA.09.2014.0087 V.T Tran, T.B.X.L Do, T.K Nguyen, X.T Vu, B.N Dao, H.H Nguyen, A simple, efficient and universal method for the extraction of genomic DNA from bacteria, yeasts, molds and microalgae suitable for PCR-based applications, Vietnam 104 [7] V.X Tao, T.V Tuan / VNU Journal of Science: Natural Sciences and Technology, Vol 36, No (2020) 98-104 Journal of Science, Technology and Engineering 59 (2017) 66-74 https://doi.org/10.31276/VJS TE.59(4).66 M.A Innis, D.H Gelfand, J.J Sninsky, T.J White, Amplification and direct sequencing of fungal ribosomal RNA genes for phylogenetics, in: T.J White, T.D Bruns, S.B Lee, J.W Taylor (Eds.), PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications, Academic press, Massachusetts, 1990, pp 315-322 [12] [13] [8] L Li, Q Qu, B Tian, K.Q Zhang, Induction of chlamydospores in Trichoderma harzianum and Gliocladium roseum by antifungal compounds produced by Bacillus subtilis C2, Journal of Phytopathology 153 (2005) 686-693 https://doi org/10.1111/j.1439-0434.2005.01038.x [9] F.A.C Lopes, A.S Steindorff, A.M Geraldine, R.S Brandão, V.N Monteiro, M.L Júnior, R.N Silva, Biochemical and metabolic profiles of Trichoderma strains isolated from common bean crops in the Brazilian Cerrado, and potential antagonism against Sclerotinia sclerotiorum, Fungal Biology 116 (2012) 815-824 https://doi org/10.1016/j.funbio.2012.04.0 15 [10] A Kotasthane, T Agrawal, R Kushwah, O.V Rahatkar, In-vitro antagonism of Trichoderma spp against Sclerotium rolfsii and Rhizoctonia solani and their response towards growth of cucumber, bottle gourd and bitter gourd, European Journal of Plant Pathology 141 (2015) 523-543 https://doi.org/10.1007/s10658-014-05 60-0 [11] H Saba, D Vibhash, M Manisha, K.S Prashant, H Farhan, A Tauseef, Trichoderma a promising [14] [15] [16] plant growth stimulator and biocontrol agent, Mycosphere (2012) 524-531 https://doi org/10.5943/mycosphere/3/4/14 R Bhattacharjee, U Dey, An overview of fungal and bacterial biopesticides to control plant pathogens/diseases, African Journal of Microbiology Research (2014) 1749-1762 https ://doi.org/10.5897/AJMR2013.6356 J Curran, F Driver, J.W.O Ballard, R.J Milner, Phylogeny of Metarhizium: analysis of ribosomal DNA sequence data, Mycological Research 98 (1994) 547-552 https://doi.org/10.1016/S095375 62(09)80478-4 C.L Schoch, K.A Seifert, S Huhndorf, V Robert, J.L Spouge, C.A Levesque, W Chen, F.B Consortium, Nuclear ribosomal internal transcribed spacer (ITS) region as a universal DNA barcode marker for Fungi, Proceedings of the National Academy of Sciences 109 (2012) 6241-6246 https://doi.org/10.1073/pnas.1117018 109 C Kullnig, G Szakacs, C.P Kubicek, Molecular identification of Trichoderma species from Russia, Siberia and the Himalaya, Mycological Research 104 (2000) 1117-1125 https://doi.org/ 10.1017/S0953756200002604 A Hagn, S Wallisch, V Radl, J.C Munch, M Schloter, A new cultivation independent approach to detect and monitor common Trichoderma species in soils, Journal of Microbiological Methods 69 (2007) 86-92 https://doi.org/10 1016/j.mimet.2006.12.004 ... loài Trichoderma asperellum Ba chủng nấm Trichoderma tuyển chọn có tiềm ứng dụng sản xuất chế phẩm sinh học dùng cho phòng trừ vi nấm gây bệnh cam trồng khác Từ khóa: Cây cam, đối kháng nấm bệnh, ... chủng Trichoderma Nấm Trichoderma cơng nhận vi nấm có khả đối kháng chống lại nhiều nấm gây bệnh trồng [9] Trong nghiên cứu này, tất 10 chủng Trichoderma tiến hành kiểm tra khả đối kháng với nấm. .. bệnh hại trồng vi nấm gây Nấm Penicillium digitatum vi nấm phổ biến gây bệnh thối mốc xanh có múi Ngồi ra, nấm Fusarium Phytophthora ghi nhận vi nấm bệnh có múi, bệnh thối rễ thối Hiện nay, vi? ??c