(Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tổng hợp các dẫn xuất của triterpenoit khung lupan ’’ thành nghiên cứu tổng hợp thuốc chữa bệnh tiểu đường glibenclamide và metformin hydrochloride

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI ́ C GIAHỌ TRƢỜNG I HỌ C KHOA TƢ̣I NHIÊN ĐẠĐẠ I HỌ C QUÔ HÀCNỘ TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TƢ̣ NHIÊN   ĐINH THỊ CÚC NGUYỄN HOÀNG MINH HUỆ NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP THUỐC CHỮA BỆNH TIỂU NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP VÀ VÀMETFORMIN CHUYỂN HÓA ĐƢỜNG GLIBENCLAMIDE HYDROCHLORIDE MỘT SỐ 4-FORMYLSYDNONE TETRA-O- ACETYL-β-D-GALACTOPYRANOSYL THIOSEMICARBAZON THẾ LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – 2012 Hà Nội – 2014 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TƢ̣ NHIÊN  ĐINH THỊ CÚC NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP THUỐC CHỮA BỆNH TIỂU ĐƢỜNG GLIBENCLAMIDE VÀ METFORMIN HYDROCHLORIDE Chuyên ngành : Hoá Hữu Mã số : 60 44 0114 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC GS TS Nguyễn Văn Tuyến Hà Nội-2014 LỜI CẢM ƠN Với lịng kính trọng và biết ơn sâu sắc, em xin chân thành cảm ơn GS.TS Nguyễn Văn Tuyến và T.S Đặng Thị Tuyết Anh đã giao đề tài và tận tình hƣớng dẫn em śt thời gian thực đề tài Em xin chân thành cảm ơn cán bợ phịng Hóa Dƣợc, cử nhân Nguyễn Bích Thuận, Nguyễn Thị Hạnh, Hoàng Thị Phƣơng đã giúp đỡ em nhiều trình thực nghiệm và hoàn thành luận văn Tôi xin cảm ơn anh chị, bạn học viên, em sinh viên phịng Hóa Dƣợc, bạn học viên lớp K22- lớp Cao học Hóa đã trao đổi và giúp đỡ suốt thời gian thực đề tài Cuối cùng, xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới gia đình tơi, bạn bè ngƣời đã bên cạnh động viên và giúp đỡ suốt thời gian học tập và thực luận văn này Hà nội,ngày 12 tháng năm 2014 Học viên Đinh Thị Cúc MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT DM1 DANH MỤC CÁC BẢNG VÀ HÌNH DM2 DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ DM3 MỞ ĐẦU CHƢƠNG I TỔNG QUAN 1.1.Khái quát bệnh tiểu đƣờng 1.1.1.Phân loại bệnh tiểu đƣờng 1.1.2 Các thuốc điều trị bệnh tăng đƣờng huyết 1.1.2.1.Insulin và th́c kích thích bài tiết insulin: 1.1.2.2.Các thuốc làm tăng nhạy cảm insulin 1.1.2.3.Thuốc chống tăng đƣờng huyết sau ăn (thuốc ức chế enzym -glucosidase)4 1.1.3.Quan niệm y học cổ truyền bệnh tiểu đƣờng 1.1.4.Các thuốc Đông y điều trị bệnh tiểu đƣờng 1.2 Thuốc chữa bệnh tiểu đƣờng Glibenclamide 1.3.Thuốc chữa bệnh tiểu đƣờng Metformin hydrochloride 1.3.1 Tình hình nghiên cứu nƣớc 1.3.2 Tình hình nghiên cứu ngoài nƣớc CHƢƠNG II THỰC NGHIỆM 11 2.1.Hóa chất và thiết bị 11 2.1.1.Hóa chất và dung mơi 11 2.1.2 Thiết bị xác định cấu trúc 11 2.1.3 Xác định cấu trúc,định tính phản ứng và kiểm tra độ tinh khiết sản phẩm tổng hợp đƣợc 12 2.2.Tổng hợp Glibenclamide .12 2.2.1 Tổng hợp 5-chloro-2-methoxybenzoyl chloride 12 2.2.2 Tổng hợp chất trung gian (4) 13 2.2.3 Tổng hợp Glibenclamide (5) 14 2.2.4 Phân tích hàm lƣợng sản phẩm glibenclamide (5) theo tiêu chuẩn dƣợc điển châu Âu 2002 15 2.3.Tổng hợp Metformin hydrochloride 15 2.3.1 Nghiên cứu kết tinh metformin hydrochloride 16 2.3.1.1 Kết tinh metformin hydrochloride dung môi Aceton 16 2.3.1.2 Kết tinh metformin hydrochloride dung môi MeOH 17 2.3.1.3 Kết tinh metformin hydrochloride dung môi EtOH 17 2.3.2.Nghiên cứu xác định đợc tính cấp (LD50) metformine hydrochloride 17 2.3.2.1 Đối tƣợng nghiên cứu .18 2.3.2.2 Phƣơng pháp nghiên ứ c u 18 2.3.2.3 Kết nghiên cứu 18 2.3.3.Nghiên cứu hàm lƣợng metformine hydrochloride theo phƣơng pháp HPLCMS) 19 CHƢƠNG III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 22 3.1 Tổng hợp Glibenclamid 22 3.2 Tổng hợp metformine hydrochloride 28 3.2.1 Nghiên cứu kết tinh metformine hydrochloride .29 3.2.2 Nghiên cứu xác định đợc tính cấp (LD50) metformine hydrochloride .30 3.2.3 Hàm lƣợng metformin hydrochloride theo phƣơng pháp HPLC 31 KẾT LUẬN 33 TÀI LIỆU THAM KHẢO 34 PHỤ LỤC 38 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT 13 C- NMR Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân carbon-13 (13C Nuclear Magnetic Resonance) DMSO Dimethyl sulfoxide Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân proton (1H Nuclear Magnetic Resonance) H- NMR HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao IR Phổ hồng ngoại (Infrared Spectroscopy) MS Phổ khối lƣợng va chạm điện tử ( Electron Impact-Mass Spectrometry) H, C Đợ chuyển dịch hóa học proton và cacbon ppm Phần triệu ( parts per million ) s singlet dd Double doulet CHCl3 Clorofoc EtOH Etanol MW Microwave MeOH Metanol OMe Methoxy SOCl2 Sulfonylchlorua DM DANH MỤC CÁC BẢNG VÀ HÌNH Bảng 2.1 Kế t quả thƣ̉ đô ̣c tiń h cấ p của metformine hydrochloride 19 Hình Biể u đồ về mố i tƣơng quan giƣ̃a liề u dùng và sớ ch ̣t chế t 19 Hình 3.1: Phổ 1H-NMR chất trung gian (4) 23 Hình 3.2: : Phổ 13C-NMR chất trung gian (4) 24 Hình 3.3: Phổ 1H-NMR chất glibenclamide (5) 25 Hình 3.4: : Phổ 13C-NMR chất glibencalmide (5) 26 Hình 3.6: Phổ 1H-NMR chất metformin hydrochloride 28 Hình 3.7: : Phổ 13C-NMR chất metformin hydrochloride 29 Hình 3.9: Sắc kí đồ HPLC metformin hydrochloride 32 DM DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ Sơ đồ 1.1: Quá trình tổng hợp calci cyanamide Sơ đồ 1.2: Quá trình tổng hợp 1-cyanoguanidin Sơ đồ 1.3: Quá trình tổng hợp metformin hydrochloride Sơ đồ 1.4: Quá trình tổng hợp metformin hydrochloride theo Shapiro Sơ đồ 1.5: Quá trình tổng hợp metformin hydrochloride theo Shalmashi Sơ đồ1.6: Chuyển hóa tiền chất metformin Sơ đồ 1.7: Tổng hợp dẫn xuất metformin 10 Sơ đồ 3.1 Tổng hợp glibenclamide 22 Sơ đồ 3.2: Tổng hợp trực tiếp metformin hydrochloride………………… 27 DM MỞ ĐẦU Tiểu đƣờng là bệnh nguy hiểm thuộc hệ nội tiết, đe doạ nghiêm trọng sức khoẻ ngƣời và gây nhiều biến chứng nguy hiểm, đặc biệt là tiểu đƣờng tuýp II (chiếm tới 90-95%) Theo Hiệp hội giới tiểu đƣờng, tử vong bệnh này đứng hàng thứ tƣ nƣớc phát triển, bệnh gây nhiều tai biến nguy hiểm nhƣ: mù loà và giảm thị lực ngƣời trƣởng thành; đoạn chi khơng tai nạn nhiều ngƣời bình thƣờng từ 15-40 lần; suy thận giai đoạn cuối nên cần phải chạy thận thay thận nhân tạo; gây biến chứng tim mạch nguy hiểm Theo ƣớc tính, giới có 194 triệu ngƣời mắc bệnh tiểu đƣờng chiếm tới 5,1% dân sớ giới, ƣớc tính đến năm 2025 số ngƣời bị bệnh tiểu đƣờng là 333 triệu ngƣời Theo thống kê năm 2008, tỷ lệ mắc bệnh đái tháo đƣờng Việt Nam là 5% dân số (khoảng 4,5 triệu ngƣời) và 7,2% thành phớ lớn TP Hồ Chí Minh có 800.000 ngƣời mắc bệnh Trong danh sách thuốc thiết yếu WHO 2007 và danh mục thuốc thiết yếu Bộ Y tế, glibenclamide và metformin là một hai thuốc tiểu đƣờng sử dụng theo đƣờng uống chữa bệnh tiểu đƣờng tuýp II Glibenclamide và metformin đƣợc dùng riêng rẽ dùng tổ hợp với Glucovance (thuốc tổ hợp glibenclamide và metformin) dùng để chữa bệnh tiểu đƣờng có đƣờng huyết cao Glibenclamide kích thích tuyến tụy tiết insulin cịn metformin làm chậm hấp thụ đƣờng ruột non; ngăn cản gan chuyển đƣờng dự trữ vào máu và giúp thể sử dụng insulin tự nhiên hiệu Vì vậy, sử dụng glucovance hiệu và gây phản ứng phụ.Nhƣ tổng hợp đƣợc glienclamide và metformin chủ đợng sản xuất đƣợc hai loại thuốc thiết yếu để chữa bệnh tiểu đƣờng túyp II, làm tăng thêm lựa chọn, tăng tính hiệu việc chữa bệnh tiểu đƣờng và chủ động sản xuất thuốc generic chữa bệnh tiểu đƣờng giá rẻ Việt nam Vì vậy,chúng tơi đã tiến hành lựa chọn đề tài: “Nghiên cứu tổng hợp thuốc chữa bệnh tiểu đường glibenclamide metformin hydrochloride” có ý nghĩa lớn khoa học và thực tiễn 3.2 Tổng hợp metformine hydrochloride Tổng hợp metformine hydrochloride theo phƣơng pháp Shapiro [3] (sơ đồ 3.2) điều kiện không dung môi Từ mol dicyano diamide và mol dimethyl amine hydrochloride trộn lẫn với đƣợc đun nhiệt độ: 140oC 6h Hỗn hợp phản ứng sau đƣợc kết tinh dung mơi metanol nhận đƣợc metformin hydrochloride với hiệu suất phản ứng là 70% Sơ đồ 3.2: Tổng hợp trực tiếp metformin hydrochloride Hình 3.6: Phổ 1H-NMR chất metformin hydrochloride Phổ cợng hƣởng từ hạt nhân 1H-NMR chất metformin hydrochloride xuất tín hiệu đặc trƣng cho đợ chuyển dịch hóa học proton có 28 mặt phân tử Tín hiệu δH 2,91 ppm (6H, s,) đặc trƣng cho proton nhóm CH3 Hình 3.7: : Phổ 13C-NMR chất metformin hydrochloride Trên phổ 13 C-NMR xuất đầy đủ tín hiệu cợng hƣởng nguyên tử cacbon bao gồm nhóm metyl ( CH3) δC (ppm) 37,4 ( C-1 và C-1‟ ); nhóm amin C-NH2 δC (ppm) 160,0 (C-3), và 158,3 (C-2) Phổ khối EI-MS cho pic ion giả phân tử glibenclamide m/z 129 [MHCl]+ (C4H11N5.HCl) 3.2.1 Nghiên cứu kết tinh metformine hydrochloride Metformine hydrochloride đƣợc làm cách kết tinh dung môi khác nhau: aceton, metanol, etanol Sản phẩm thô metformine hydrochloride (50g) lần lƣợt đƣợc hoàn tan dung mơi nóng aceton, MeOH và EtOH Dung dịch đƣợc lọc nóng để loại bỏ tạp chất và sản phẩm chƣa tan hết dung môi Dịch lọc đƣợc kết tinh tủ lạnh 24h, lọc bỏ dung môi, hút khô nhận đƣợc tinh thể 29 metformine hydrochloride màu trắng với hiệu suất kết tinh aceton là 30%, MeOH là 82% và EtOH là 48% Nhƣ vậy, metformine hydrochloride đƣợc kết tinh dung môi MeOH cho hiệu suất kết tinh đạt 82% và độ tinh khiết khoảng 99,8% 3.2.2 Nghiên cứu xác định độc tính cấp (LD50) metformine hydrochloride Liều độc LD50 đƣợc nghiên cứu Khoa Sinh học, Trƣờng Đại học Khoa học tự nhiên, Đại học Quốc Gia Hà Nội Kế t quả nghiê n cƣ́u cho thấ y sau uố ng thuố c , lô dùng thuốc với liều thấp dƣới 900mg/kg thể trọng, chuô ̣t có giảm hoa ̣t đô ̣ng, run nhƣng sau khoảng 30 phút lại ăn uống và hoạt đợng bình thƣờng , ngoài phân khơ Ở lô chuột uố ng thuố c thƣ̉ liề u cao, chuô ̣t giảm vâ ̣n đô ̣ng , run rõ rê ̣t , tai và đuôi tím tái , phân nhaõ Tƣ̀ liề u 1100mg/kg trở lên có chuô ̣t chế t vòng 72 giờ Số lƣơ ̣ng chuô ̣t chế t vòng 72 giờ đƣơ ̣c trin ̀ h bày nhƣ bảng 3.1 LST T Liều dùng (mg/kg) Số chuôt/lô ̣ Số chuôṭ chế t Tỷ lệ % 900 10 0 1100 10 10 1300 10 20 1500 10 40 1700 10 70 1900 10 80 2100 10 10 100 Bảng 3.1:Bảng kết thử đợc tính cấp metformin hydrochloride Từ bảng kế t quả , xây dƣ̣ng đƣợc đồ thi ̣về mố i tƣơng quan giƣ̃a liề u dùng và số chuột chếtnhƣ sau: 30 Số chuô ̣t chế t Liề u (mg/kg) Hình 3.8: Đồ thị mới tƣơng quan liều dung và số chuột chết Với R = 0,9776 đã cho thấ y hai đa ̣i l ƣợng này có mới tƣơng quan tuyến tính, đó ta có thể sƣ̉ du ̣ng phƣơng trình y = 0,0088x – 8,5536 để tính đƣợc LD50 = 1540mg/kg Nhƣ vật,đợc tính cấp LD50 metformine hydrochloride là: 1540mg/kg 3.2.3 Hàm lƣợng metformin hydrochloride theo phƣơng pháp HPLC Định lƣợng metformin hydrochloride HPLC sử dụng hệ thiết bị HPLC Agilent 1100, Detector DAD, bƣớc sóng 254nm Pha đợng H2O: MeOH= 35:65 Hệ Pha động đƣợc cài đặt nhƣ sau: Time(min) %B (MeOH) Flow (ml/min) 0,00 65 0,01 4,00 65 0,01 5,00 65 0,3 30 65 0,3 Đƣờng chuẩn đƣợc xây dựng dựa phần mềm excel nhƣ hình sau 31 nongdo(mg/ml) 2.5 1.5 nongdo(mg/ml) 0.5 Predicted nongdo(mg/ml) 2000 4000 6000 Dtich Phƣơng trình đƣờng chuẩn: Y= 0.000372*X Trong đó: Y là Nồng đợ metformin hydrochloride (mg/ml); X là diện tích pic metformin hydrochloride (mg/ml) Xác định nồng độ Metformin: Cân 0,8mg chất cần phân tích, hịa tan 1ml MeOH Kết đo diện tích pic (X)= 2115,1(mg/ml).Thay vào phƣơng trình đƣờng chuẩn ta đƣợc Y= 0,8mg/ml Nhƣ vậy, mẫu phân tích chứa 100% metformin hydrochloride Hình 3.9: Sắc kí đồ HPLC metformin hydrochloride 32 KẾT LUẬN 1.Đã nghiên cứu tổng hợp đƣợc glibenclamide từ axit 5-chloro-2methoxybenzoic với hiệu suất là 82,11% Đã đánh giá đƣợc hàm lƣợng sản phẩm glibenclamide theo tiêu chuẩn dƣợc điển châu Âu với hiệu suất 99,95% 3.Đã nghiên cứu tổng hợp metfomine hydrochloride phƣơng pháp Shapiro:Ngƣng tụ trực tiếp dicyano diamide và dimetyl amine hydrochloride, kết cho thấy ngƣng tụ trực tiếp dicyano diamide và dimethyl amine nhiệt độ 1400C khoảng thời gian 6h nhận đƣợc metfomin hydrochloride với hiệu suất cao 70% Đã nghiên cứu kết tinh metformine hydrochloride dung môi aceton, metanol, etanol Kết cho thấy kết tinh metanol cho hiệu suất cao 82% Đã tiến hành nghiên cứu xác định đợc tính cấp LD50 metformine hydrochloride, cho giá trị LD50= 1540mg/kg 6.Đã phân tích đƣợc hàm lƣợng metformine hydrochloride theo phƣơng pháp HPLC kết cho thấy mẫu phân tích chứa 100% metformin hydrochloride 33 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Tạ Văn Bình, Hoàng Kim Ƣớc và cộng (2004), "Dịch tễ học bệnh đái tháo đường, yếu tố nguy vấn đề liên quan đến quản lý bệnh đái tháo đường khu vực nội thành thành phố lớn năm 2001", Mợt sớ cơng trình nghiên cứu khoa học tiêu biểu dự án quốc gia thực bệnh viện nội tiết 1969-2003, NXB Y Học,tr 173-199 Tạ Văn Bình, Hoàng Kim Ƣớc và cợng (2004), "Kết điều tra đái tháo đường rối loạn dung nạp đường huyết đối tượng có nguy cao Phú Thọ, Sơn La, Thanh Hoá Nam Định năm 2003"- Mợt sớ cơng trình nghiên cứu khoa học tiêu biểu dự án quốc gia thực bệnh viện nội tiết 1969-2003, NXB Y Học,tr 353-373 Tạ Văn Bình, Stephen Colargiuri và cợng (2004), Phịng quản lý bệnh đái tháo đường Việt Nam-Phần , NXB Y Học,tr 8-9, 12-13,17 4.Đỗ Trung Đàm ( 1996), Phương pháp xác định độc tính cấp thuốc, Nhà xuất Y học, Hà Nội 5.Trƣơng Phƣơng và Ngô Quốc Huy (2006), “ Tạp chí Dƣợc học ”,tr 264, 11-13 Thái Hồng Quang (1997), Bệnh đái tháo đường, Bệnh nội tiết , NXB Y Học,Hà Nợi, tr 257-358 Lê Đình Sáng (2010), Y học cổ truyên, NXB Y Học,Hà Nội 8.Nguyễn Đình Triệu (2006), Các phương pháp vật lý ứng dụng hóa học, NXB Đại học Q́c gia Hà Nội, Hà Nội Mai Thế Trạch và cộng ( 1994), "Dịch tễ học điều tra bệnh tiểu đường nội thành thành phố Hồ Chí Minh" Tạp chí Y Học, chun đề nợi tiết học, Trường Đại Học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh,tr 25-28 10.Nguyễn Đình Thành (2011),Cơ sở phương pháp phổ ứng dụng hoá học, NXB Khoa học kỹ thuật,Hà Nội 34 11 Nguyễn Minh Thảo (2001), Tổng hợp hữu cơ, NXB Đại học Quốc Gia Hà Nội, Hà Nội Tiếng Anh 12.Alimova IN, Liu B, Fan Z, et al (2009), “ Metformin inhibits breast cancer cell growth, colony formation and induces cell cycle arrest in vitro’’ , Cell Cycle 26:8 13.Ashcroft SJH, Niki I, Kenna S, Weng L, Skeer L, Coles B, Ashcroft FM (1993), “ The -cell sulfonylurea receptor ‟‟, Adv Exp Med Biol ; 334: 4761 14 Barelli, Giulio; De, Regis Massimo (1997), “ A glibenclamide-metformin combination for the treatment of diabetes mellitus type II PCT Int Appl ‟‟ , 24 pp CODEN: PIXXD2 WO 9717975 A1 19970522 15.Bentefrit, F và cộng (1997) , “ J Inorg Biochem ’’, 68, 53-59 16.Dipalma J R (1971), “ Diabetes mellitus, Drill's pharmacology in medicine’’, McGraw-Hill, 1492-1525 17.Gaines KL, Hamilton S, Boyd AE III.(1988) , „„ Characterization of the sulfonylurea receptor on beta cell membranes’’, J Biol Chem ;263: 2589–92 18.Hokfelt B, Jonsson A (1988), “ Hypoglycemic activity in relation to chemical structure of potential oral antidiabetic substances ‟‟, I 1-Sulfonyl3-alkylureas J 19.http://www.fda.gov/bbs/topics/ANSWERS/ANS00627.html "FDA Approves New Diabetes Drug " 20.Hadad SM, Appleyard V, Thompson AM (2009) “ Therapeutic metformin/AMPK activation promotes the angiogenic phenotype in the ERalpha negative MDA-MB-435 breast cancer model ‟‟ , Breast Cancer Res Treat 114:391 35 21.Hadad SM, Fleming S, Thompson AM ,Targeting AMPK (2008), “ A new therapeutic opportunity in breast cancer ‟‟, Crit Rev Oncol Hematol 67:1–7 22.Kristiina, M và cộng (2009), “ J Med Chem ’’, 52, 4142-4118 23.Lara Ochoa, Jose Manuel Francisco; De la Torre Garcia, Juan Antonio; Franco Andrade, Fidencio ( publication date 25-01-2001), “ Improved process for the preparation of benzenesulfonylureas used as secondgeneration oral hypoglycemic agents’’, PCT patent W 0015354 (A2) 24.Meyer M, Chudziak F, Schwanstecher C, Schwanstecher M, Panten U (1999), „„Structural requirements of sulphonylureas and analogues for interaction with sulphonylurea receptor subtypes’’, Br J Pharmacol ; 128:27– 34 25.Niki I, Welsh M, Berggren PO, Hubbard P, Ashcroft SJ.(1991), „„ Characterization of the solubilized glibenclamide receptor in a hamster pancreatic beta-cell line’’, HIT T15 Biochem J ;277:619–24 26.Pamela, A và cộng (2009) , “ Metformin in breast cancer: time of action ’’, J Clin Oncology, 27, 1-3 27.Phoenix KN, Vumbaca F, Claffey KP (2009), “Therapeutic metformin/AMPK activation promotes the angiogenic phenotype in the ERalpha negative MDA-MB-435 breast cancer model ‟‟, Breast Cancer Res Treat 113:101–111 28.Proks P, Reimann F, Green N, Gribble F, Ashcroft F (2002), Sulfonylurea stimulation of insulin secretion Diabetes, ; 51(suppl 3):368–76 29.Panten U, Schwanstecher M, Schwanstecher C (1992), “ Pancreatic and extrapancreatic sulfonylurea receptors’’, Horm Metab Res ;24:549– 54 30.Rao, N K và cộng (2007) , “ JASA ’’, 3, 43-45 31.Shapiro, S L.; Parrino, V A.; Freedman (1959) , “ L J Am Chem Soc ’’, 81, 3728 36 32.Shalmashi A (2008) ,“ New Route to Metformin Hydrochloride (N, Ndimethylimidodicarbonimidic diamide hydrochloride) Synthesis‟‟, Molbank , M564 33.Stambolic V, Woodgett JR, Fantus IG, et al (2009) , “ Utility of metformin in breast cancer treatment, is neoangiogenesis a risk factor ’’ , Breast Cancer Res Treat 114:387–389 34.Zakikhani, M và cộng (2006), “ Metformin is an AMP kinasedependent growth inhibitor of breast cancer cells ’’, Cancer Res, 66, 1026910273 37 PHỤ LỤC 38 Phụ lục 1.1 Phổ 1H-NMR chất trung gian Phụ lục 1.2 Phổ 13C-NMR chất trung gian 39 Phụ lục 2.1 Phổ 1H-NMR glibenclamide Phụ luc 2.2 Phổ 13C-NMR glibenclamide 40 Phụ lục 3.1 Phổ 1H-NMR metformin hydrochloride Phụ luc 3.2 Phổ 13C-NMR metformin hydrochloride 41 Phụ lục 3.3 Sắc ký đồ HPLC metformin hydrochloride 42 ... động sản xuất thuốc generic chữa bệnh tiểu đƣờng giá rẻ Việt nam Vì vậy,chúng tơi đã tiến hành lựa chọn đề tài: ? ?Nghiên cứu tổng hợp thuốc chữa bệnh tiểu đường glibenclamide metformin hydrochloride? ??... Sơ đồ 1.7: Tổng hợp dẫn xuất metformin 10 Sơ đồ 3.1 Tổng hợp glibenclamide 22 Sơ đồ 3.2: Tổng hợp trực tiếp metformin hydrochloride? ??……………… 27 DM MỞ ĐẦU Tiểu đƣờng là bệnh nguy hiểm... THỊ CÚC NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP THUỐC CHỮA BỆNH TIỂU ĐƢỜNG GLIBENCLAMIDE VÀ METFORMIN HYDROCHLORIDE Chuyên ngành : Hoá Hữu Mã số : 60 44 0114 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA