(Luận văn thạc sĩ) đặc điểm phân tử của vi rút dại lưu hành ở miền bắc việt nam từ năm 2006 2012 luận văn ths sinh vật 60 42 40

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - Nguyễn Vĩnh Đông Đặc điểm phân tử vi rút dại lƣu hành miền Bắc Việt Nam từ năm 2006-2012 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – Năm 2012 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - Nguyễn Vĩnh Đông Đặc điểm phân tử vi rút dại lƣu hành miền Bắc Việt Nam từ năm 2006-2012 Chuyên ngành: Vi sinh vật học Mã số: 604240 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS.BS Nguyễn Thị Kiều Anh Hà Nội – Năm 2012 MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG - TỔNG QUAN 1.1 Sơ lƣợc lịch sử phát vi rút dại 1.2 Virut dại 1.2.1 Phân loại: 1.2.2 Hình thái: 1.2.3 Cấu trúc 1.2.4 Khả chế gây bệnh 1.3 Dịch tễ học bệnh dại 11 1.3.1 Tình hình bệnh dại giới Việt Nam 11 1.3.2 Ổ chứa nguồn truyền bệnh 12 1.3.3 Các biện pháp phòng chống bệnh dại……………………….13 1.3.4 Các loại vắc xin tế bào phòng bệnh dại giới……….13 1.4 Nghiên cứu nƣớc liên quan đến đề tài…………………… 15 1.5 Chẩn đốn phịng thí nghiệm: 15 1.5.1 Chẩn đoán bệnh dại người 15 1.5.2 Chẩn đoán động vật 17 1.6 Các kỹ thuật sinh học phân tử: 17 1.6.1 Các phương pháp định týp nghiên cứu tiến hóa vi rút Dại 17 1.6.2 RT- PCR: 18 1.6.3 RT - Realtime PCR 19 1.6.4 RT - LAMP 20 1.6.5 Kỹ thuật sequencing 20 CHƢƠNG - VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu: 25 2.2 Vật liệu nghiên cứu: …………………………………………… 25 2.2.1 Chủng vi rút 25 2.2.2 Trình tự gien 26 2.2.3 Sinh phẩm, hóa chất 26 2.2.4 Trang thiết bị, dụng cụ 27 2.2.5 Phần mềm phân tích………………………………………… 28 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu: 28 2.3.1 Xác định định týp vi rút 30 2.3.2 Phân tích đặc điểm phân tử nucleoprotein 38 CHƢƠNG - KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 39 3.1 Kết xác định định týp vi rút: 39 3.1.1 Kết xác định vi rút dại lưu hành miền Bắc: 39 3.1.2 Kết xác định genotype vi rút dại 50 3.2 Kết phân tích đặc điểm nucleoprotein vi rút dại 60 3.2.1 Đặc điểm chung phân tử nucleoprotein vi rút dại 60 3.2.2 Mức độ tương đồng mức nucleotide axit amin ……… 63 3.2.3 Kết phân tích SNP xuất chủng vi rút 67 3.2.4 Trình tự axit amin chủ yếu xuất chủng vi rút 72 KẾT LUẬN 76 KIẾN NGHỊ .77 TÀI LIỆU THAM KHẢO Danh mục bảng Bảng Tên bảng Trang 1.1 Phân loại Lyssavirus gây bệnh dại/viêm não tủy 3.1 Kết chẩn đoán bệnh dại người kỹ thuật RT – 39 PCR 3.2 Kết chẩn đoán bệnh dại động vật 44 3.3 Phân bố bệnh nhân dại chẩn đốn xác định phịng thí 47 nghiệm số tỉnh miền Bắc, Việt nam 3.4 Sự tương đồng axit amin nucleotide chủng vi 65 rút dại phân lập Việt Nam so với chủng vi rút dại nước Châu Á chủng dùng làm vắc xin 3.5 Trình tự nucleotide (vị trí 100 – 397) gen N chủng 69 virus dại hoang dại lưu hành miền Bắc Việt Nam, 2006 – 2012 3.6 Trình tự axit amin (vị trí – 150) gen N chủng virus dại hoang dại lưu hành miền Bắc Việt Nam, 2006 – 2012 74 Danh mục hình Hình Tên hình Trang 1.1 Hình ảnh cấu trúc vi rút dại 1.2 Sơ đồ cấu trúc hệ gien vi rút dại 1.3 Ổ chứa vi rút dại loài động vật hoang dại Thế giới 12 2.1 Tiến hành bước thử nghiệm 29 3.1 Hình ảnh điện di sản phẩm PCR trực tiếp từ mẫu bệnh phẩm 40 lâm sàng 3.2 Tiền sử phơi nhiễm bệnh nhân dại chẩn đốn xác 42 định phịng thí nghiệm 3.3 Bản đồ lưu hành chủng vi rút dại chó người thuộc 49 tỉnh phía Bắc 3.4 Genotype chủng virus dại phân lập Miền Bắc Việt 52 Nam 3.5 Cây phả hệ chủng virus dại phân lập người động vật 55 Việt Nam (500 nucleotide gen N) 3.6 Sự lưu hành nhóm vi rút dại theo vùng địa dư từ 2006- 58 2012 3.7 Sự lưu hành chủng vi rút dại, 2006-2009 59 3.8 Sự lưu hành chủng vi rút dại xuất SNP vị trí 71 T124 C330 miền Bắc Việt Nam, 2006 – 2012 3.9 Sự lưu hành chủng vi rút dại có đột biến axit amin phân lập miền Bắc Việt Nam, 2006 – 2012 75 CÁC CHỮ VIẾT TẮT AA Axit amin ARN Axit Ribonucleic ADN Axit Deoxy Ribonuleic Bp Base pairs cDNA Complementary DNA CVS Chủng virus thử thách (Challenge Virus Strain) dNTP Deoxiribonucleotide 5’-triphosphates ELISA Enzyme linked-immusorbent assay (Thử nghiệm hấp phụ miễn dịch gắn enzyme) KN Antigen (Kháng nguyên) Nu Nucleotide PM Chủng virut Pitman More PV Chủng virus Pasteur (Pasteur Virus) RFFIT Thử nghiệm ức chế tạo đám huỳnh quang (Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test) RT-LAMP Reverse transcriptase-Loop-mediated isothermal amplification (Phản ứng khuếch đại đẳng nhiệt qua trung gian vòng phiên mã ngược) RT-PCR Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction (Phản ứng chép ngược chuỗi di truyền phân tử) SNP Single-nucleotide polymorphism (Đa hình di truyền nucleotide đơn) TAE Tris Acetate EDTA TCYTTG Tổ chức Y tế giới MỞ ĐẦU Bệnh dại bệnh viêm não màng não nguyên phát động vật có vú, vi rút dại thuộc họ Rhabdoviridae gây nên Đây bệnh cổ xưa động vật truyền sang người tiếp xúc với vi rút dại qua niêm mạc da bị tổn thương Bệnh thường biểu hai thể lâm sàng thể (chiếm 80%) có triệu chứng điển tăng kích thích, sợ nước, sợ gió, sợ ánh sáng, tăng tiết đờm dãi, co thắt hô hấp thể liệt (chiếm 20%) Khi lên dại, 100% bệnh nhân tử vong Ổ chứa vi rút dại đa dạng bao gồm động vật máu nóng hoang dại động vật gần người chó, mèo, ngựa, trâu, bị, chồn, cáo, chó sói, dơi Cho đến nay, giới có tới genotype thuộc giống Lyssavirus ghi nhận tác nhân gây bệnh dại viêm não tủy giống bệnh dại Vi rút dại cổ điển chủng vi rút sản xuất vắc-xin xác định thuộc Lysssavirus genotype [2] Bệnh dại coi bệnh bị lãng quên giới, lại tái trội số nước thuộc châu Á, châu Phi [1] Theo Tổ chức Y tế Thế giới (TCYTTG), năm có khoảng 55.000 ca tử vong bệnh dại 10 triệu người bị động vật nghi dại cắn tiếp xúc với nguồn truyền bệnh dại phải điều trị dự phòng huyết thanh/vắc xin (VX) dại Trong năm gần đây, Việt Nam số nước khu vực Phillipin, Lào, Cam Pu Chia Trung Quốc phải đối mặt với vấn đề tăng nhanh ca bệnh dại Ở Việt Nam, có 560 trường hợp mắc bệnh dại người báo cáo từ năm 2007-2011 bệnh dại diễn 25 – 27 tỉnh nước, tập trung chủ yếu tỉnh phía Bắc [3] Nguồn lây bệnh dại Việt Nam chó mèo, chưa thấy có ghi nhận trường hợp mắc dại tiếp xúc với động vật khác Việc triển khai công tác tiêm phịng vắc xin dại cho đàn chó mèo chưa tốt, đặc biệt vùng nông thôn, vùng sâu, vùng xa Hơn việc kiểm soát xuất/nhập động vật vùng biên giới, vùng có dịch bệnh dại động vật lưu hành vùng dịch chưa chặt chẽ, ổ chứa bệnh dại chưa thật kiểm soát từ nguồn lây bệnh cho người Đứng trước tình hình bệnh dại gia tăng diễn biến phức tạp, ngày 19/1/2009 thủ tướng phủ thức phê duyệt chương trình phịng chống bệnh dại Quốc Gia CV99/TTG – KTN Để đánh giá hiệu chương trình phòng chống bệnh dại, việc giám sát ca bệnh dại người động vật quan trọng theo dõi đặc điểm phân tử chủng vi rút dại lưu hành giúp cho việc khẳng định hiệu việc phòng chống bệnh dại giai đoạn cụ thể, sở có đề xuất xác đáng cho việc thực hoạt động phòng chống bệnh dại hiệu giai đoạn Chính chúng tơi tiến hành nghiên cứu đề tài: “Đặc điểm phân tử vi rút dại lưu hành miền Bắc Việt Nam, 2006-2012“ với mục tiêu: 1/ Xác định định týp chủng vi rút dại lưu hành miền Bắc Việt Nam, 2006 - 2012 2/ Phân tích đặc điểm phân tử Nucleoprotein chủng vi rút dại lưu hành miền Bắc Việt Nam, 2006 - 2012 CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Sơ lƣợc lịch sử phát vi rút dại Bệnh dại bệnh viêm não tuỷ cấp viêm màng não nguyên phát động vật có vú Bệnh truyền sang người qua niêm mạc da bị tổn thương Từ hàng nghìn năm trước công nguyên, người thầy thuốc cổ phương Đông viết bệnh tương tự bệnh dại – bệnh sợ nước, sợ gió mà chó người mắc phải Bệnh dại người da đỏ, người Ả rập người Do Thái cổ đề cập y văn với dấu hiệu bệnh dại chó: mõm há, chảy nước dãi, tai rủ, đuôi cụp, giọng khàn khuyến cáo gặp vật có biểu phải tiêu diệt cung tên Ở Ai Cập, Hy Lạp, La mã người ta coi bệnh dại trừng phạt thượng đế bí mật nguyên gây bệnh khủng khiếp triệu chứng lâm sàng [10, 16, 47] Một trăm năm sau công nguyên, Celse biết độc tố truyền từ chó sang người muốn loại bỏ độc tố cần phải đốt vết thương que sắt nung đỏ [46] Hai trăm năm sau công nguyên, Galien đề phương pháp phẫu thuật cắt bỏ phần thể bị vết cắn để ngăn ngừa phát bệnh dại [47] Đầu kỷ 19, Zinke chứng minh tính lây nhiễm có nước dãi chó dại Tại viện Lion, Galtier thành công việc gây bệnh thực nghiệm thỏ thử nghiệm gây miễn dịch cho cừu cách tiêm nước bọt vật bị bệnh dại vào tĩnh mạch vật lành Năm 1884, Louis Pasteur thành công việc nghiền não tuỷ chó mắc bệnh dại sau gây nhiễm màng cứng não thỏ Tiếp tục nghiền não thỏ gây nhiễm truyền cho thỏ tiếp tục sau 100 lần tiêm truyền liên tiếp não thỏ ông thu chủng vi rút có thời gian ủ bệnh thu ngắn cố định - ngày, ơng gọi “vi rút dại cố định” Trung Quốc tràn sang ngược lại chúng xuất phát từ nguồn Đồng thời, chứng để theo dõi vi rút học xác định vi rút dại từ bên xâm nhập vào Việt Nam lan truyền sang vùng khác lãnh thổ Việt Nam, chứng giúp cho đánh giá hiệu phương pháp phòng chống năm tới Bảng 3.5 Trình tự nucleotide (vị trí 100 – 397) gen N chủng virus dại hoang dại lưu hành miền Bắc Việt Nam, 2006 – 2012 Hình 3.8 Sự lƣu hành chủng vi rút dại xuất SNP vị trí T124 C330 miền Bắc Việt Nam, 2006 – 2012 Hình 3.8 đồ lưu hành chủng vi rút dại xuất SNP miền Bắc Việt Nam, cho thấy có SNP vị trí T124 (Thymine 124) xuất chủng phân lập tỉnh Phú Thọ, Lạng Sơn, Sơn La, Yên Bái Lào Cai Và SNP vị trí C330 (Cytosine 330) xuất chủng phân lập tỉnh Tun Quang, Hà Nội, Phú Thọ, Hịa Bình Thái Bình Riêng tỉnh Phú Thọ thấy đồng thời lưu hành chủng có SNP vị trí C330 chủng có SNP vị trí T124 3.2.4 Trình tự acid amin đặc trưng xuất chủng vi rút dại lưu hành Miền Bắc Việt Nam, 2006 – 2012 Bảng 3.6 kết so sánh xếp trình tự axit amin 31 chủng vi rút dại phân lập miền Bắc, Việt Nam với chủng vi rút lưu hành Miền Nam, Tây Nguyên; chủng vi rút vắc xin; chủng Quốc tế chủng vi rút lưu hành số nước châu Á phần mềm MEGA 4, sử dụng trình tự axit amin chủng PV cơng bố Tordo cộng làm sở so sánh Kết cho thấy xuất vị trí axit amin đặc trưng số chủng vi rút hoang dại lưu hành miền Bắc Việt Nam S42 (Serine 42) D110 (Aspartic 110) Sự xuất axit amin đặc trưng xuất SNP ba mã hóa axit amin T124 C330 (bảng 3.5) Cụ thể thời gian địa điểm phân lập chủng sau: a) Tại vị trí axit amin S42:  Năm 2008, chủng phân lập người tỉnh Lạng Sơn  Năm 2011, chủng phân lập chó tỉnh Sơn La Lào Cai  Năm 2012, chủng phân lập người tỉnh Phú Thọ chủng phân lập chó tỉnh Yên Bái b) Tại vị trí axit amin D110:  Năm 2007, chủng phân lập người Hà Nội, Phú Thọ  Năm 2008, chủng phân lập người Hà Nội, Hịa Bình, Phú Thọ, Tun Quang  Năm 2009, chủng phân lập người Hà Nội  Năm 2010, chủng phân lập người Hà Nội, Phú Thọ Thái Bình  Năm 2012, chủng phân lập người Phú Thọ Riêng tỉnh Phú Thọ thấy đồng thời lưu hành chủng vi rút có axit amin đặc trưng vị trí S42 chủng vi rút có axit amin đặc trưng vị trí D110 Phân tích trình tự axit amin (aa) số chủng vi rút dại lưu hành 2006 – 2012 vùng gien ổn định gien N từ vị trí đến 150 cho thấy có xuất axit amin đặc trưng vị trí S42 (Serine - S) axit amin tìm thấy chủng vi rút phân lập chó Sơn La Lạng Sơn năm 2011; chủng người Lạng Sơn năm 2008; chủng người vào năm 2012; chủng phân lập chó Yên Bái vào năm 2012 chủng hoang dại có nguồn gốc từ bò dại Trung Quốc đăng ký ngân hàng gien năm 2007 Điều xâm nhập vi rút vào tỉnh biên giới Việt Nam từ tỉnh miền Nam Trung Quốc, nơi điểm nóng bệnh dại Trung Quốc năm gần [51] ngược lại thông qua di chuyển tự nhiên vật bị dại thông qua việc buôn bán động vật nhiễm dại qua đường tiểu ngạch mà khơng kiểm sốt Sự xuất aa đặc trưng vị trí D110 hầu hết chủng vi rút phân lập người chó tỉnh Hà Nội, Tun Quang, Thái Bình, Hịa Bình, Phú Thọ số chủng vi rút Trung Quốc cho thấy chắn có nhiễm chéo vi rút vùng biên giới hai nước, từ vi rút phát tán sang vùng lân cận Điều giúp cho xây dựng chiến lược phịng chống bệnh dại phải bao gồm việc kiểm soát xuất nhập động vật qua biên giới truyền thông người dân không buôn bán động vật qua đường tiểu nghạch mà khơng kiểm sốt bệnh dại Các aa đặc trưng tìm giúp theo dõi đặc điểm vi rút học lưu hành chủng vi rút hoang dại quần thể ổ chứa, vector người để có biện pháp can thiệp hữu hiệu nhằm giảm thiểu phát tán vi rút từ ổ chứa, vector lây truyền sang người Đồng thời việc giám sát dịch tễ học phân tử vi rút dại thường xuyên cần thiết để đưa chiến lược đắn cho phòng chống bệnh dại, đặc biệt kiểm soát bệnh dại vùng biên giới, đồng thời đánh giá kết khống chế, phòng chống bệnh dại động vật người quốc gia khu vực Qua phân tích đặc điểm nucleotide axit amin chủng vi rút dại lưu hành miền Bắc Việt Nam chưa phát thay đổi aa SNP liên quan đến chức độc lực, sinh miễn dịch gien N công bố nghiên cứu trước [22, 23, 27, 39] Bảng 3.6 Trình tự axit amin (vị trí – 150) gen N chủng virus dại hoang dại lưu hành miền Bắc Việt Nam, 2006 – 2012 Hình 3.9 Sự lƣu hành chủng vi rút dại có đột biến axit amin phân lập miền Bắc Việt Nam, 2006 – 2012 Hình 3.9 mơ tả vị trí địa lý chủng vi rút dại phân lập miền Bắc Việt Nam có đột biến axit amin so với chủng vi rút dại giới Sự sai khác xuất tỉnh miền Bắc bao gồm Hà Nội, Thái Bình, Hịa Bình, Lào Cai, n Bái, Phú Thọ, Tuyên Quang, Sơn La Lạng Sơn KẾT LUẬN Xác định định týp vi rút dại lƣu hành miền Bắc Việt Nam, 2006 – 2012  Các chủng vi rút dại lưu hành miền Bắc Việt Nam, 2006 - 2012 thuộc genotype Lysavirus chia làm nhóm  Cả hai nhóm vi rút dại có nhánh tạo thành từ chủng vi rút phân lập miền Bắc Việt Nam số chủng vi rút dại lưu hành Trung Quốc Đặc điểm nucleoprotein vi rút dại lƣu hành miền Bắc Việt Nam, 2006 – 2012  Mức độ tương đồng axit amin nucleotide chủng vi rút dại lưu hành miền Bắc Việt Nam năm 2006 - 2012 so với chủng sản xuất vắc xin (PM, PV Vnukovo) 92,2 – 97,1% 84,5 – 96,9%  Xuất chủng vi rút mang đa hình đơn nucleotide đặc trưng vị trí T124 C330 trình tự nucleotide gien N vi rút dại lưu hành miền Bắc Việt Nam số chủng lưu hành Trung Quốc  Các đa hình đơn nucleotide xuất tạo nên axít amin đặc trưng vị trí S42 (Serin 42) D110 (Aspartic 110) gien N vi rút dại lưu hành miền Bắc Việt Nam số chủng lưu hành Trung Quốc KIẾN NGHỊ Cần phải tăng cường giám sát phịng thí nghiệm vi rút dại nghiên cứu đặc điểm dịch tễ học phân tử vi rút để hiểu rõ nguồn gốc vụ dịch bùng phát, góp phần xây dựng chiến lược phòng chống bệnh dại hiệu tương lai Cần thực biện pháp truyền thông cho đối tượng có nguy người làm nghề giết mổ chó, mèo, nhân viên thú y cần phải tiêm phòng vắc xin dại trước phơi nhiễm Thúc đẩy việc thực thi nghị định 05 Chính Phủ kiểm sốt bệnh dại động vật ni chó phải đăng ký tiêm phịng cho chó; khơng giết mổ động vật nghi dại; thực nguyên tắc xuất, nhập động vật; tiêu hủy động vật bị dại xử lý ổ dịch quy định TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Nguyễn Thị Kiều Anh, Nguyễn Vĩnh Đông, Ngô Châu Giang, Nguyễn Thị Hồng Hạnh, Phạm Hồng Nhung (2009), "Đặc điểm genotype chủng virus dại lưu hành số tỉnh miền Bắc Việt Nam năm 2007 – 2008”, Tạp chí nghiên cứu Y học tập 60, số 1- 2/2009, tr.25 – 30, Nguyễn Thị Kiều Anh (2010), "Thích nghi chủng vaccine dại Vnukovo-32 tế bào Vero ứng dụng sản xuất vắc xin thử nghiệm", Luận án tiến sĩ Y học, Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương, Hà Nội Nguyễn Thị Kiều Anh, Nguyễn Vĩnh Đông, Nguyễn Tuyết Thu, Ngô Châu Giang, Satoshi Inoue, Nguyễn Thị Hồng Hạnh (2011), " Đặc điểm phân tử nucleoprotein số chủng vi rút dại lưu hành miền Bắc Việt Nam, 2010 - 2011", Tạp chí nghiên cứu Y học tập 85, số 5-6/2011, tr.40 – 45, Lê Huy Chính cộng (2003), “Vi Sinh Y học” Đại học y Hà Nội, tr: 264 – 267 Đào Đình Đức, Trần Văn Tiến CS (1990), “Bệnh dại, biện pháp phòng chống” Bộ y Tế, tr: – 10 Ngô Châu Giang (2011), " Nghiên cứu hoàn thiện kỹ thuật RT -LAMP chẩn đoán vi rút dại ", Luận văn thạc sỹ Y học, Đại học Y, Hà Nội Vũ Thị Hà (2009), "Ứng dụng kỹ thuật RT-PCR chẩn đoán bệnh dại", Khóa luận tốt nghiệp cử nhân y khoa: tr 21-23 Thái Hà, “Chết bệnh dại từ chó mèo gia tăng” Báo Sức Khoẻ Đời Sống, số 14/ 8/ 2006 Nguyễn Thị Hạnh (1975), "Hỏi đáp bệnh dại", NXB Y học: tr tr: 5-11 10 Hoàng Minh Hiền (2001), "Nghiên cứu vắc xin mẫu chuẩn quốc gia phòng bệnh dại", Luận án Tiến sĩ Y học 11 Nghị định số 05/ 2007/ NĐ - CP (1/2007), “Chương III: Chống dịch bệnh dại động vật”, tr: – 12 Lê Duy Thành CS (2008), “Cơ sở sinh học phân tử” NXB Giáo Dục, tr: 134 – 153 13 Phạm Hùng Vân (2009), "PCR realtime PCR, vấn đề áp dụng thường gặp": tr tr 9-36 14 Phạm Hùng Vân (2009), "PCR giải trình tự": tr tr 81-87 15 Tạ Thành Văn (2009), "Nguyên lý ứng dụng PCR số kỹ thuật y sinh học phân tử": tr tr:10-12 16 Viện Vệ Sinh Dịch Tễ Trung Ương (2010), "Virus y học": tr tr.139-156 17 Đinh Kim Xuyến, Trần Văn Tiến (1996), “Một số nhận xét tình hình bệnh dại Việt Nam năm 1991 – 1995” Tạp chí Vệ Sinh Phịng Dịch, IV, tr 19 – 20 18 Đinh Kim Xuyến (2001), “Bệnh dại Việt Nam” Tập san Hội nghị Quốc tế “Giám sát bệnh dại châu á” lần IV, HN 3/ 2001, tr:19 – 20 19 Đinh Kim Xuyến (2007), "Tình hình bệnh dại Việt Nam từ 1994 – 2007" Tiếng Anh 20 Anh K.T Nguyen, Dong V Nguyen, Giang C Ngo, Thu T Nguyen, Satoshi Inoue, Akio Yamada, Xuyen D Kim, Dung V Nguyen, Thao X Phan, Bao Q Pham, Hien T Nguyen, and Hanh T H Nguyen (2011), "Molecular of rabies virus in Vietnam, 2006 – 2009", Jpn, J Infect Dis., 64, pp 391 – 396 21 Baer GM., Bellini WJ., (1990), “Rhabdoviruses”, Virology, Second Edition Field BN ed., pp 883- 930 22 Bourhy, H., Kissi, B., Tordo, N (1993), "Molecular diversity of lyssavirus genus", Virology, 194, pp 70 – 81 23 Bourhy, H (2008), "Rabies diagnosis", Conference of sharing information on rabies control and prevention among ASEAN plus three countries, setion 5, 21 – 24 April, 2008 24 B Boldbaatar, S Inoue, N Sugiura, A Noguchi, (2009), "Rapid detection of rabies virus by reverse transcription loop-mediated isothermal amplification", Jpn J Infect Dis, 62(3): tr 187-91 25 Center for Disease control (1997), “Rabies in a Laboratory worker”, New York MMWR 26, pp 183- 184 26 Charles V Trimarchi and Jean S Smith (2001), “Postmortem diagnosis of rabies in animal”, Rabies, pp 309 – 319V 27 Charles V Trimarchi and Jean S Smith (2001), “Diagnosis of rabies in human”, Rabies, pp 337 -342 28 Conzelmann, K K., J H Cox, et al (1990), "Molecular cloning and complete nucleotide sequence of the attenuated rabies virus SAD B19", Virology 175(2), pp 485-99 29 Dietzschold B., Koprowski H et al (1996), “Rhabdoviruses”, Fields Virology, 3rd Edition, 38, pp 1145-1151 30 Dinh Kim Xuyen & Et Al (2004), "Rabies situation in Viet Nam", Proceedings of the 2nd Vietnam – Laos – Cambodia symposium, July 2004, Hanoi, Vietnam 31 Dong-Kun Yang, Young-Nam Park, Gyeong-Soo Hong, Hee-Kyung Kang,Yoon-I Oh, Soo-Dong Cho, Jae-Young Song (2011), "Molecular characterization of Korean rabies virus isolates", J Vet Sci., 12 (1), 57-63 32 Eiken Chemical Co & Ltd "The principle of LAMP method", loopamp.eiken.co.jp 33 Fishbein D.B (1991), "Rabies in human", Nature history of Rabies 2nd ed.; Ed Baer, G.M; CRCD press: tr pp 519-549 34 http://www.ncbi.nlm.nih.gov 35 Heiman F L Wertheim, Thai Q Nguyen, Kieu Anh T Nguyen, Menno D de Jong, Walter R J Taylor, Tan V Le, Ha H Nguyen, Hanh T H Nguyen, Jeremy Farrar, Peter Horby, Hien D Nguyen (2009), “Furious rabies after an atypical exposure”, Plos Medicine, Volume 6, Issue 3, pp 1-5 36 Hien Tran Nguyen (2009), “Rabies in Vietnam”, The second international rabies in Asia conference (RIACON) proceeding, Hanoi, Vietnam Sep 2009 37 Jackson (2002), "Human Disease", Rabies: tr 219 - 244 38 James E Childs (2002), "Rabies: Routes of rabies virus transmission to humans", Academic press, pp 125 – 126 39 Kissi, B., Tordo, N and Bourhy, H (1995), "Genetic polymorphism in the rabies virus nucleoprotein gen", Virology, 209, pp 526 – 537 40 Kureishi A, Xu LZ, Wu H, Stiver HG (1992), "Rabies in China: Recommendations for control", Bull World Health Organ 70: 443-4750 41 Ky Dang Van (2007), “Animals rabies control and prevention in Vietnam”, ASEAN + conference on sharing information on rabies and prevention, Halong, Vietnam Apr 2007 42 Mcevoy Gerald K (2005), "Rabies Vaccine", AHFS Drug Information: tr 3303 - 3310 43 National Institute of Hygiene Epidemiology (2012), "Rabies conference for 10 main point rabies provinces", held in ThaiNguyen, June, 2012 44 N Mori, Y Motegi, Y Shimamura, T Ezaki, (2006), "Development of a new method for diagnosis of rubella virus infection by reverse transcription-loopmediated isothermal amplification", J Clin Microbiol, 44(9): tr 3268-73 45 Perry Ll (1990), "Rabies vaccines from Pasteur’s time up to experimental subunit vaccines today", Viral vaccines: tr 325-345 46 Qi Liu, Yi Xiong, Ting Rong Luo, You-Chuan Wei, Song-Jian Nan, Fang Liu,Yan Pan, Li Feng, Hua-Ming Li (2007), "Molecular epidemiology of rabies in Guangxi Province, south of China", Journal of Clinical Virology, 39, pp 295– 303 47 Tordo N (1996), "Characteristic and molecular biology of the rabies virus", Laboratory Techniques in rabies, 4th edition: pp 28 – 50 48 Selimov M A (1982), "Rabies", Moscow Medistina: tr 182 - 185 49 Wagner RR., (1990), “Rhabdoviridae and their replication”, Field BN, Knipe DM,eds.Virology NewYork, Raven Press, pp 867-881 50 Wallerstein C (1999), "Rabies cases increase in the Philippines" BMJ 318: 1306 51 Xiao-Yan Tao, Qing Tang, Hao Li, Zhao-Jun Mo, Hong Zhang, Ding-Ming Wang, Qiang Zhang, Miao Song, Andres Velasco-Villa, Xianfu Wu, Charles E Rupprecht, and Guo-Dong Liang (2009), "Molecular Epidemiology of Rabies in Southern People’s Republic of China", Emerging Infectious Diseases, Vol.15, No 8, pp 1192-1198 52 Yamagata J, Ahmed K, Khawplod P, Mannen K, Xuyen DK, Loi HH, Dung NV, Nishizono A (2007), "Molecular epidemiology of rabies in Vietnam", Microbiol.immunol., 51 (9), 833 – 840 53 Yokosuka O.&Omata M Tagawa M (1992), "Polymerase Chain Reaction": tr 322 – 326 54 Zhang YZ, Xiong CL, Zou Y, Wang DM, Jiang RJ, Xiao QY, et al (2006), "Molecular characterization of rabies virus isolates in China during 2004", Virus Res., 121:179–88 ... NHIÊN - Nguyễn Vĩnh Đông Đặc điểm phân tử vi rút dại lƣu hành miền Bắc Vi? ??t Nam từ năm 2006- 2012 Chuyên ngành: Vi sinh vật học Mã số: 604 240 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN... Bắc Vi? ??t Nam, 2006 - 2012 2/ Phân tích đặc điểm phân tử Nucleoprotein chủng vi rút dại lưu hành miền Bắc Vi? ??t Nam, 2006 - 2012 CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Sơ lƣợc lịch sử phát vi rút dại Bệnh dại bệnh... bệnh dại hiệu giai đoạn Chính tiến hành nghiên cứu đề tài: ? ?Đặc điểm phân tử vi rút dại lưu hành miền Bắc Vi? ??t Nam, 2006- 2012? ?? với mục tiêu: 1/ Xác định định týp chủng vi rút dại lưu hành miền Bắc