Phân lập gen mã hóa protein lc điều hòa sinh tổng hợp anthocyanin từ cây ngô nếp địa phương

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM NGUYỄN THỊ KHUYÊN PHÂN LẬP GEN MÃ HÓA PROTEIN Lc ĐIỀU HỊA SINH TỔNG HỢP ANTHOCYANIN TỪ CÂY NGƠ NẾP ĐỊA PHƯƠNG LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC THÁI NGUYÊN - 2018 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM NGUYỄN THỊ KHUYÊN PHÂN LẬP GEN MÃ HÓA PROTEIN Lc ĐIỀU HỊA SINH TỔNG HỢP ANTHOCYANIN TỪ CÂY NGƠ NẾP ĐỊA PHƯƠNG Ngành: Di truyền học Mã ngành: 8.42.01.21 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Người hướng dẫn khoa học: TS Phạm Thị Thanh Nhàn THÁI NGUYÊN - 2018 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi Mọi trích dẫn luận văn ghi rõ nguồn gốc Các số liệu, kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa công bố Thái Nguyên, tháng năm 2018 Tác giả luận văn Nguyễn Thị Khuyên i LỜI CẢM ƠN Lời tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành sâu sắc tới TS Phạm Thị Thanh Nhàn tận tình hướng dẫn, bảo tạo điều kiện giúp đỡ tơi q trình nghiên cứu hồn thành luận văn Trong q trình nghiên cứu, nhận giúp đỡ Trần Thị Hồng kĩ thuật viên Phịng thí nghiệm Công nghệ tế bào thực vật - Khoa Sinh học Trường Đại học Sư phạm – Đại học Thái Nguyên Viện Khoa học sống – Đại học Nông lâm – Đại học Thái Nguyên Tôi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ q báu Tơi xin chân thành cảm ơn thầy cô Bộ môn Sinh học đại Giáo dục sinh học, phận Sau đại học thuộc Phòng đào tạo - Trường Đại học Sư phạm – Đại học Thái Nguyên tạo điều kiện thuận lợi cho q trình học tập hồn thành luận văn Tơi xin bày tỏ lời biết ơn đến gia đình, bạn bè động viên, khuyến khích giúp đỡ tơi tiến trình học tập hồn thành luận văn Trong q trình hồn thiện luận văn khơng tránh khỏi sai sót, tơi mong nhận đóng góp q báu để luận văn hồn thiện Tôi xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, tháng năm 2018 Tác giả luận văn Nguyễn Thị Khuyên ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC .iii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC CÁC BẢNG v DANH MỤC CÁC HÌNH vi MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu đề tài Nội dung nghiên cứu Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Sơ lược ngô 1.1.1 Đặc điểm sinh học ngô 1.1.2 Giá trị dinh dưỡng kinh tế ngô nếp 1.2 Hạn phản ứng ngô trước tác động hạn 1.2.1 Hạn tính chống chịu stress oxy hóa 1.2.2 Cơ sở sinh lý, sinh hóa sinh học phân tử tính chịu hạn ngơ .8 1.3 Anthocyanin vai trị chuyển hóa dạng oxy hoạt hóa 11 1.3.1 Vai trò anthocyanin thực vật bị hạn 11 1.3.2 Gen điều hoà tổng hợp anthocyanin ngô 14 Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.1 Vật liệu 18 2.2 Hoá chất, thiết bị địa điểm nghiên cứu 18 2.2.1 Hóa chất 18 2.2.2 Thiết bị 18 2.2.3 Địa điểm nghiên cứu 18 2.3 Phương pháp nghiên cứu 19 2.3.1 Phương pháp gây hạn nhân tạo 19 iii 2.3.2 Phương pháp tách chiết RNA tổng số 19 2.3.3 Phương pháp RT- PCR 20 2.3.4 Tạo vector tái tổ hợp 21 2.3.5 Biến nạp vector tái tổ hợp vào tế bào khả biến chủng E.coli DH5 21 2.3.6 Kiểm tra sản phẩm tách dòng 21 2.3.7 Tách plasmid 21 2.3.8 Phương pháp xác định trình tự gen 23 2.3.9 Phương pháp xử lý số liệu 23 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 24 3.1 Kết phân lập gen Lc từ giống ngô nếp địa phương NH 24 3.1.1 Kết tách dòng phân tử mang gen Lc từ giống NH 24 3.1.2 Kết xác định trình tự nucleotide gen Lc giống ngô nếp NH 26 3.2 Đặc điểm trình tự gen Lc giống ngơ nếp địa phương NH 26 3.2.1 So sánh trình tự gen Lc giống NH với trình tự GenBank 26 3.2.2 Phân tích tương đồng gen Lc giống NH với gen khác họ bHLH 33 3.3 Đặc điểm trình tự protein Lc suy diễn giống ngơ nếp địa phương NH .34 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO 40 iv DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt ABA ANR ANS APX bHLH Bp C1 cDNA CHS DEPC CLP DFR DNA dNTPs DRE EDTA EREBP GSH LEA Lc /LC iv LcF/LcR MGPT MYB MYC mRNA NADP PCR RNA RT- PCR ROS SOD Sol TF Cs v DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Thành phần phản ứng PCR 20 Bảng 2.2 Thành phần dung dịch tách plasmid 22 Bảng 3.1 Các vị trí sai khác nucleotid gen Lc giống NH với trình tự GenBank 32 Bảng 3.2 Bảng hệ số tương đồng di truyền gen Lc giống NH trình tự GenBank 33 Bảng 3.3 Sự sai khác amino acid protein Lc suy diễn giống NH với trình tự GenBank 36 Bảng 3.4 Bảng hệ số tương đồng di truyền protein Lc suy diễn giống NH số trình tự GenBank v 38 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Cấu trúc aglucon anthocyanin 11 Hình 1.2 Vai trị chất chống oxy hóa anthocyanin 13 Hình 1.3 Ba nhóm gen điều hịa tham gia tổng hợp anthocyanin ngơ .15 Hình 1.4 Cấu trúc không gian protein bHLH 16 Hình 1.5 Các vùng chức nhân tố bHLH 16 Hình 3.1 Hình ảnh điện di kiểm tra sản phẩm RT- PCR gen Lc 24 Hình 3.2 Hình ảnh điện di kiểm tra plasmid (A) sản phẩm clony- PCR (B) 25 Hình 3.3 Hình ảnh điện di kiểm tra plasmid tái tổ hợp BamHI (B) .25 Hình 3.4 Ảnh blast trình tự nucleotid gen Lc giống NH NCBI .26 Hình 3.5 So sánh trình tự nucleotid gen Lc giống NH trình tự khác GenBank 31 Hình 3.6 Sơ đồ hình mơ tả mối quan hệ di truyền gen Lc giống ngô NH với gen thuộc họ bHLH 33 Hình 3.7 So sánh trình tự amino acid suy diễn protein Lc giống NH trình tự GenBank 35 Hình 3.8 Sơ đồ hình mơ tả mối quan hệ di truyền protein Lc suy diễn giống ngô NH với trình tự GenBank vi 38 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận - Đã khuếch đại tách dịng thành cơng trình tự gen Lc từ mRNA kỹ thuật RT-PCR từ giống ngô nếp địa phương NH Kích thước gen Lc phân lập dài 1833bp - Gen Lc phân lập mã hóa cho 610 amino acid với 14 vị trí nucleotide sai khác so với trình tự NM001111869 trình tự KJ726800; vị trí sai khác so với trình tự M26227 Trình tự gen có tương đồng 99,23% - 99,56% so với tình tự gen thuộc họ bHLH - Phân tử protein Lc suy diễn có tương đồng với trình tự thuộc họ bHLH cơng bố GenBank từ 96,2% - 98% với amino acid sai khác so với trình tự mã số NM001111869 KJ726800, amino acid sai khác so với trình tự mã số M26227 Đề nghị Tiếp tục nghiên cứu biểu hiện, chức điều hòa gen Lc gen cấu trúc tham gia sinh tổng hợp anthocyanin ngô bị hạn 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt Lê Trần Bình, Lê Thị Muội (1998), Phân lập gen tách dòng chống chịu ngoại cảnh bất lợi lúa, Nhà xuất Đại học quốc gia, Hà Nội Lê Huy Hàm, Đồn Đình Long, Lê Thu Về, Đỗ Năng Vịnh (2003), “Nghiên cứu hồn thiện quy trình sản xuất dịng ngô kỹ thuật nuôi cấy bao phấn”, Báo cáo khoa học toàn quốc, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, 754- 760 Nguyễn Thế Hùng, Nguyễn Thiện Huyên, Nguyễn Văn Lộc, Bùi Mạnh Cường (2010), “Kết chọn tạo giống ngô nếp lai (Zea mays ceraina kalesh) giai đoạn 2005- 2008 trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội”, Tạp chí Khoa học Phát triển, 8(6), 890- 899 Nguyễn Thị Thúy Hường (2011), Phân lập, tạo đột biến điểm gen P5C liên quan đến tính chịu hạn thử nghiệm chuyển gen vào đậu tương, Luận án Tiến sĩ Sinh học, Đại học Thái Nguyên Trần Thị Phương Liên, Nguyễn Đăng Tôn, Lương Thị Thu Hường, Bùi Mạnh Cường, Ngô Hữu Tình (2005), “Phân lập gen dehydrin ngơ”, Tạp chí Công nghệ Sinh học, 3(3), 347-352 Trần Thị Phương Liên (2010), Protein tính chống chịu thực vật, Nhà xuất Khoa học tự nhiên công nghệ, 346tr Nguyễn Đức Lương, Dương Văn Sơn, Lương Văn Hinh (2000), Giáo trình ngơ, Nhà xuất Nơng nghiệp Chu Hồng Mậu, Ngơ Việt Anh (2005), “Đánh giá chất lượng hạt khả phản ứng hạn số giống ngô địa phương miền núi”, Tạp chí Nơng nghiệp & Phát triển Nơng thơn số 66, 20- 22 40 Phạm Đồng Quảng, Lê Quí Tường, Nguyễn Quốc Lý (2005), “Kết điều tra giống trồng nước năm 2003 – 2004”, Tạp chí Khoa học cơng nghệ nơng nghiệp phát triển nông thôn, 56- 62 10 Dương Văn Sơn (1996), Nghiên cứu số vật liệu ngô chịu hạn nhập nội sử dụng công tác chọn tạo giống, Luận án PTS khoa học nông nghiệp 11 Phạm Thị Lý Thu, Phạm Văn Thợi, Lê Huy Hàm, Đỗ Năng Vịnh (2005), “Nghiên cứu xây dựng hệ thống tái sinh sử dụng cho biến nạp gen ngơ”, Tạp chí Sinh học, số 3, 27- 35 12 Ngơ Hữu Tình, Bùi Mạnh Cường, Ngô Thị Minh Tâm, Ngụy Hương Lan, Đinh Cơng Chính, Lê Trần Bình, Đinh Thị Phịng (2003), “Chọn tạo dịng ngơ kỹ thuật ni cấy bao phấn”, Báo cáo khoa học toàn quốc, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, 862- 865 13 Tổng cục thống kê (8/2017), Niên giám thống kê 2016, Nhà xuất Thống kê, Hà Nội 14 Phan Thị Vân, Ngô Hữu Tình, Luân Thị Đẹp (2005), “Đánh giá nhanh khả chịu hạn dòng tổ hợp ngô lai luân giao giai đoạn phương pháp gây hạn nhân tạo, Tạp chí Nơng nghiệp phát triển nông thôn, 2, 31-34 Tiếng Anh 15 Adir N, Zer H, Scholat S, Ohad I (2003), “Photoinhibition - a historical perspective”, Photosynth Res, 76 (1-3), 343–370 16 Agati G, Matteini P, Goti A, Tattini M (2007), “ Chloroplast located flavonoids can scavenge singlet oxygen”, New Phytol, 174 (1), 77–89 17 Batool F, Sabir S.M, Rocha J.B.T, Shah A.H, Saify Z.S, Ahmed S.D (2010), “ Evaluation of antioxidant and free radical scavenging activities of fruit extract from Zanthoxylum alatum: a commonly used spice from Pakistan”, Pak J Bot, 42(6), 4299-4311 41 18 Belinky P.A, Flikshtein N, Lechenko S, Gepstein S, Dosoretz C.G (2003), “Reactive oxygen species and induction of lignin peroxidase in phanerochaete chrysosporium”, Appl Environ Microbiol, 69(11), 6500– 6506 19 Bell D.R, Gochenaur K (2006), “Direct vasoactive and vasoprotective properties of anthocyanin rich extracts”, J Appl Physiol., 100(4), 1164- 1170 20 Bovy A, Schijlen E, Hall R.D (2007), “Metabolic engineering of flavonoids in tomato (Solanum lycopersicum): the potential for metabolomics”, Metabolomics, 3, 399– 412 21 Bray E.A (1993), “Molecular responses to water deficit”, Plant Physiol, 103(4), 1035- 1040 22 Cai Z.Q, Slot M, Fan Z.X (2005), “Leaf development and photosynthetic properties of three tropical tree species with delayed greening”, Photosynthetica, 43, 91– 98 23 Daniel J.Dennis, Sisu Han, Carol Schuurmans (2018), “bHLH transcription factors in neural development, disease, and reprogramming”, Sciencedirect, 10.1016 24 Feller A, Hernandez J.M, Grotewold E (2006), “An ACT-like domain participates in the dimerization of several plant basic-helix-loop-helix transcription factors”, J Biol Chem, 281(39), 28964- 28974 25 Gould K.S, Lister C (2006), Flavonoid functions in plants Flavonoids: Chemistry, Biochemistry and Applications, CRC Press, Taylor and Francia, Boca Raton, FL, USA, 397- 441 26 Gould K S, Davies K, Winefield C (2008), Anthocyanins: biosynthesis, functions, and applications, New York: Springer Science and Business Media, LLC 27 Grove C.A, De Masi F, Barrasa M.I, Newburger D.E, Alkema M J, Bulyk M L, Walhout A J (2009), “A multiparameter network reveals extensive 42 divergence between C.elegans bHLH transcription factors”, Cell, 138 (2), 314– 327 28 Hartmann U, Sagasser M, Mehrtens F, Stracke R, Weisshaar B (2005), “Differential combinatorial interactions of cis-acting elements recognized by R2R3-MYB, BZIP, and BHLH factors control light-responsive and tissue-specific activation of phenylpropanoid biosynthesis genes”, Plant Mol Biol., 57(2), 155- 171 29 Hernandez J.M, Heine G.F, Irani N.G, Feller A, Kim M.G, Matulnik T, Chandler V, Grotewold E (2004), “Different mechanisms participate in the R-dependent activity of the R2R3 MYB transcription factor C1”, J Biol Chem., 279(46), 48205- 48213 30 Hernandez J.M (2006), “Combinatorial transcriptional regulation of the maize flavonoid pathway: Understanding the old players and discovering new ones”, The Degree Doctor of Philosophy, The Ohio State University 31 Hoch W.A, Singsaas E.L, McCown B.H (2003), “Resorption protection Anthocyanins facilitate nutrient recovery in autumn by shielding leaves from potentially damaging light levels”, Plant Physiol, 133(3), 1296– 1305 32 Hongxia Wang, Jun Yang, Min Zhang, Weijuan Fan, Nurit Firon, Sitakanta Pattanaik, Ling Yuan, Peng Zhang (2016), “Altered phenylpropanoid metabolism in the Maize Lc-expressed sweet potato (Ipomoea batatas) affects storage root development”, Scientific Reports, (18645), doi:10.1038/srep18645 33 Hooijmaijers C.A.M, Gould K.S (2007), “Photoprotective pigments in red and green gametophytes of two New Zealand liverworts”, New Zeal J Bot, 45, 451- 461 34 Hu X, Wu X, Li C, Lu M, Liu T, Wang Y, Wang W (2012), “Abscisic 43 acid refines the synthesis of chloroplast proteins in maize (Zea mays) in response to drought and light”, PloS One, 7(11): e49500 doi: 10.1371 35 Hughes N.M, Neufeld H.S, Burkey K.O (2005), “Functional role of anthocyanins in high-light winter leaves of the evergreen herb Galax urceolata”, New Phytol, 168 (3), 575- 587 36 Hughes T.R (2011), “A handbook of transcription factors”, Subcellular Biochemistry 52 doi 10.1007/978-90-481-9069-0_1, © Springer Science Business Media BV Jaramillo R.E, Nord E.A, Chimungu J.G, Brown K.M, Lynch J.P (2013), 37 “Root cortical burden influences drought tolerance in maize”, Ann Bot., 112(2), 429- 437 38 Jiang S, Zhang D, Wang L, Pan J, Liu Y, Kong X, Zhou Y, Li D (2013), “A maize Calcium-dependent protein kinases gene, ZmCPK4, positively regulated abscisic acid signaling and enhanced drought stress in transgenic Arabidopsis”, Plant Physiol Biochem, 71: 112- 120 39 Kawano T (2003), “Roles of the reactive oxygen speciesgenerating peroxidase reactions in plant defense and growth induction”, Plant Cell Rep, 21(9), 829– 837 40 Klimecka M, Muszynska G (2007), “Structure and functions of plant calcium- dependent protein kinases”, Acta Biochim Polonica, 54(2), 219- 233 41 Kong J.M, Chia L.S, Goh N.K, Chia T.F, Brouillard R (2003), “Analysis and biological activities of anthocyanins”, Phytochemistry, 64(5), 923-933 42 Lemons D, McGinnis W (2006), “Genomic evolution of Hox gene clusters”, Science, 313 (5795), 1918- 1922 43 Mas-Droux C, Curien G, Robert-Genthon M, Laurencin M, Ferrer J.L, Dumas R (2006), “A novel organization of ACT domains in allosteric 44 enzymes revealed by the crystal structure of Arabidopsis aspartate kinase”, Plant Cell, 18(7), 1681- 1692 44 Merzlyak M.N, Chivkunova O.B, Solovchenko A.E, Naqvi K.R (2008), “Light absorption by anthocyanins in juvenile, stressed, and senescing leaves”, J Exp Bot., 59(14), 3903- 3911 45 Miller G, Shulaev V, Mittler R (2008), “Reactive oxygen signaling and biotic stress”, Physiol Plant, 133(3), 481- 489 46 Morgenstern B, Atchley W.R (1999), “Evolution of bHLH transcription factors: Modula evolution by domain shuffling?”, Mol Biol Evol, 16(12), 1654- 1663 47 Neill S.O, Gould K.S, Kilmartin P.A, Mitchell K.A, Markham K.R (2002), “Antioxidant capacities of green and cyanic leaves in the sun species, Quintinia serrata”, Functional Plant Biology, 29, 1437– 1443 48 Noda Y, Kneyuki T, Igarashi K, Mori A, Packer L (2000), “Antioxidant activity of nasunin, an anthocyanin in eggplant peels”, Toxicology, 148(2-3), 119- 123 49 Owen J.B, Butterfield D.A (2010), “Measurement of oxidized/reduced glutathione ratio”, Methods Mol Biol., 648, 269- 277 50 Pattanaik S, Xie C.H, Kong Q, Shen K.A, Yuan L (2006), “Directed evolution of plant basic helix-loop-helix transcription factors for the improvement of transactivational properties”, Biochim Biophys Acta., 1759(6), 308- 318 51 Pattanaik S, Xie C.H, Yuan L (2008), “The interaction domains of the plant MYC-like bHLH transcription factors can regulate the transactivation strength”, Planta, 227(3), 707- 715 52 Peter Thompson (2005), “Speciality corns: Waxy, High Amylose, High Oil, and High Lysine Corn”, http ://o hio line.osuu.edu/agffact/0112.html 53 Polle A (2001), “Dissecting the superoxide dismutase-ascorbate peroxidase-glutathione pathway in chloroplasts by metabolic modelling 45 Computer simulations as a step towards flux analysis”, Plant Physiol, 126(1), 445– 462 54 Poustka F, Irani N.G, Feller A, Lu Y, Pourcel L, Frame K, Grotewold E (2007), “Trafficking pathway for anthocyanins overlaps with the endoplasmic reticulum to vacuole protein sorting route in Arabidopsis and contributes to the formation of vacuolar inclusions”, Plant Physiol, 145(4), 1323– 1335 55 Radicella J.P, Turks D, Chandler V.L (2005), “Cloning and nucleotid sequence of a cDNA encoding B-Peru, a regulatory protein of the anthocyanin pathway in maize”, Plant Mol Biol, 17(1), 127– 130 56 Ray H, Yu M, Auser P, Blahut-Beatty L, McKersie B, Bowley S, Westcott N, Coulman B, Lloyd A, Gruber M.Y (2003), “Expression of anthocyanins and proanthocyanidins after transformation of alfalfa with maize Lc”, Plant Physiol, 132(3), 1448- 1463 57 Rhodes D (2008), Anthocyanin biosynthesis (maize and Arbidopsis genes), http://www.hort.purdue.edu/rhodcv/hort640c/secprod/se00013.htm 58 Stintzing F.C, Carle R (2004), “Functional properties of anthocyanins and betalains in plants, food, and in human nutrition”, Trends in Food Science & Technology, 15(1), 19– 38 59 Szankowski I, Li H, Flachowsky H, Fischer T.C, Hanke M.V, Forkmann G, Treutter D, Schwab W, Hoffmann T (2007), “Maize Lc transcription factor enhances biosynthesis of anthocyanins, distinct proanthocyanidins and phenylpropanoids in apple (Malus domestica Borkh)”, Planta, 226(5), 1243- 1254 60 Tanyolaỗ D, Ekmekỗi Y, ĩnalan (2007), Changes in photochemical and antioxidant enzyme activities in maize (Zea mays L.) leaves exposed to excess copper”, Chemosphere, 67(1), 89– 98 46 61 Winkel-Shirley B (2001),” Flavonoid biosynthesis: a colorful model for genetics, biochemistry, cell biology, and biotechnology”, Plant Physiol, 126(2), 485- 493 62 Winkel-Shirley B (2002), “Biosynthesis of flavonoids and effects of stress”, Curr Opin Plant Biol, 5(3), 218- 223 63 Zimmermann I.M, Heim M.A, Weisshaar B, Uhrig J.F (2004), “Comprehensive identification of Arabidopsis thaliana MYB transcription factors interacting with R/B-like BHLH proteins”, Plant J, 40(1), 22- 34 Tài liệu mạng 64 Hernández J, Alegre L, Breusegem F.V, Sergi Munné-Bosch S (2009), http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1360138509000429 65 http://www.nal.usda.gov/fnic/foodcomp/search 66 The Oxford English Dictionary (2007), http://www.websters-onlinedictionary.org/definitions/maize?cx 67 Trung tâm nghiên cứu ngô Bắc Kinh (2005), http://petikam.tripod.com/id11.html 68 US Grains Council, Value Enhanced Grains Quality Report (2001), http://www.vegrains.org/english/varieties-waxycorn.htm 47 ... sắc tố anthocyanin gen liên quan Xuất phát từ lý trên, lựa chọn đề tài ? ?Phân lập gen mã hóa protein Lc điều hịa sinh tổng hợp anthocyanin từ ngơ nếp địa phương? ?? Mục tiêu đề tài Phân lập phân tích... PHẠM NGUYỄN THỊ KHUYÊN PHÂN LẬP GEN MÃ HÓA PROTEIN Lc ĐIỀU HỊA SINH TỔNG HỢP ANTHOCYANIN TỪ CÂY NGƠ NẾP ĐỊA PHƯƠNG Ngành: Di truyền học Mã ngành: 8.42.01.21 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Người hướng... trình tự gen Lc điều hịa sinh tổng hợp anthocyanin từ ngơ nếp địa phương Nội dung nghiên cứu - Tạo dòng gen Lc từ giống ngô nếp địa phương chịu hạn tốt Nà Hạo (NH): Tách chiết mRNA tổng số, khuếch