Luận án tiến sĩ Y học: Nghiên cứu kiểu hình và kiểu gen ở bệnh nhi beta-thalassemia

Mục đích của luận án nhằm Mô tả kiểu hình lâm sàng, huyết học của bệnh nhi mắc β-thalassemia tại Bệnh viện Nhi trung ương; Xác định đột biến gen β-thalassemia ở trẻ bệnh; Đối chiếu kiểu hình và kiểu gen của trẻ mắc β-thalassemia thể nặng và trung gian tại Bệnh viện nhi trung ương.

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO  BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI NGUYỄN HỒNG NAM NGHIÊN CỨU KIỂU HÌNH VÀ KIỂU GEN Ở BỆNH NHI BETA­THALASSEMIA LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI ­ 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO  BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI                                                         NGUYỄN HOÀNG NAM NGHIÊN CỨU KIỂU HÌNH VÀ KIỂU GEN Ở BỆNH NHI BETA­THALASSEMIA Ngành: Nhi khoa Mã số: 62720135 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Người   hướng   dẫn   khoa  1. PGS.TS BÙI VĂN VIÊN học: 2. TS. DƯƠNG BÁ TRỰC                                                      HÀ NỘI ­ 2019 LỜI CAM ĐOAN Tơi là Nguyễn Hồng Nam, nghiên cứu sinh khóa 30 Trường Đại học  Y Hà Nội, chun ngành Nhi, xin cam đoan: Đây là luận án do bản thân tơi trực tiếp thực hiện dưới sự hướng   dẫn của Thầy  Bùi Văn Viên và thầy Dương Bá Trực Cơng trình này khơng trùng lặp với bất kỳ nghiên cứu nào khác đã  được cơng bố tại Việt Nam Các số  liệu và thơng tin trong nghiên cứu là hồn tồn chính xác,   trung thực và khách quan, đã được xác nhận và chấp thuận của cơ  sở  nơi   nghiên  cứu Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trước pháp luật về những cam kết   Hà Nội, ngày 28 tháng 02 năm 2019 Người viết cam đoan LỜI CẢM ƠN Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến PGS.TS. Bùi Văn Viên và TS.  Dương Bá Trực đã tận tình hướng dẫn, giúp đỡ  để  tơi hồn thành luận án  Tơi xin chân thành cảm  ơn Đảng  ủy, Ban Giám đốc Bệnh viện Nhi   trung ương, tập thể Khoa huyết học lâm sàng, Khoa huyết học xét nghiệm,  Khoa di truyền và sinh học phân tử  đã tạo điều kiện giúp đỡ  tơi trong q   trình thực hiện nghiên cứu Tơi xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu, Khoa Sau đại học trường  Đại học Y Hà Nội đã giúp đỡ và tạo điều kiện thuận lợi cho tơi trong suốt  q trình học tập và nghiên cứu Tơi xin chân thành cảm  ơn các thầy cơ Bộ  mơn Nhi, Đại học Y Hà  Nội đã giúp đỡ tơi trong q trình thực hiện đề tài luận án Tơi cũng xin chân thành cảm  ơn GS.TS Nguyễn Cơng Khanh, người  thầy người cha kính u đã giúp đỡ và động viên tơi rất nhiều trong q trình  làm luận án Tơi cũng xin chân thành cảm  ơn Người Mẹ kính u đã u thương   và động viên tơi rất nhiều Tơi cũng xin chân thành cảm  ơn người Vợ  u q và hai Con ln  sát cánh bên tơi Tơi xin gửi lời cảm  ơn đến các bạn bè, đồng nghiệp đã ln  động   viên, hỗ trợ để tơi hồn thành tốt nhiệm vụ học tập của mình Tơi xin cám  ơn gia đình bệnh nhi cà các chau bệnh nhi đã cộng  tác   để tơi hồn thành nghiên cứu . Chúc các Cháu bênh nhi nhanh hồi phục sức  khỏe                                                                                                                                           Tác giả                                                      Nguyễn Hồng Nam MỤC LỤC Trang  LỜI CAM ĐOAN                                                                                                     5  LỜI CẢM ƠN                                                                                                          6  MỤC LỤC 8     CÁC CHỮ VIẾT TẮT            11      DANH MỤC CÁC BẢNG                                                                                      14  DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ, HÌNH VẼ                                                                 19  ĐẶT VẤN ĐỀ                                                                                                           1 CHƯƠNG    TỔNG QUAN TÀI LIỆU                                                                    5  1.1. Dịch tễ học β ­thalassemia                                                                           5  1.1.1. Phân bố bệnh β­thalassemia trên thế giới                                        5  1.1.2. β­thalassemia ở Việt Nam                                                                 7  1.2. Cơ sở di truyền bệnh β ­thalassemia                                                         8  1.2.1. Hemoglobin bình thường                                                                  8  1.2.2. Các gen mã hóa tổng hợp globin của hemoglobin                            9  1.2.3. Đột biến gen gây bệnh β­thalasemia                                               13  1.2.4. Tần số đột biến gen gây bệnh β­thalassemia ở Việt Nam        18       1.3. Lâm sàng, huyết học β ­thalassemia                                                          19  1.3.1. Phân loại bệnh β­thalassemia                                                          19  1.3.2. Phân loại mới về thalassemia                                                          20  1.3.3. Mang bệnh tiềm ẩn (Silent Carrier)                                                20  1.3.3.1. Lâm sàng                                                                                            20  1.3.3.2. Huyết học                                                                                          20  1.3.4. β­thalassemia nhẹ (β­thalassemia Trait)                                          20  1.3.4.1. Lâm sàng                                                                                            20  1.3.4.2. Huyết học                                                                                          21  1.3.5. β­thalassemia nặng (β­thalassemia major)                                       22  1.3.5.1. Sinh lý bệnh                                                                                       22  1.3.5.2. Lâm sàng                                                                                            24  1.3.5.3. Huyết học                                                                                          26  1.3.6. β­thalassemia trung gian (β­thalassemia intermedia)                       27  1.3.6.1. Lâm sàng                                                                                            27  1.3.6.2. Huyết học                                                                                          29  1.4. Liên quan giữa kiểu gen – kiểu hình β ­thalassemia                                30  1.4.1. Phân loại lâm sàng theo kiểu gen  β­thalassemia                            30  1.4.2. Liên quan giữa kiểu gen – kiểu hình β­thalassemia ẩn                  32 1.4.3. Liên quan giữa kiểu gen ­ kiểu hình  β­thalassemia nhẹ  (β­  thalassemia trait)                      33     1.4.4. Liên quan giữa kiểu gen­kiểu hình  β­thalassemia thể  nặng   (β­thalassemia major)              36     1.4.5. Liên quan giữa kiểu gen­kiểu hình  β­thalassemia thể  trung   gian (β­thalassemia intermedia)                                                                  38  1.5. Khái quát về điều trị và dự phòng β ­thalassemia                                   40  1.5.1. Điều trị                          40      1.5.2. Dự phòng thalassemia                                                                       43 CHƯƠNG    ĐỐI TƯỢNG VÀ  PHƯƠNG  PHÁP  NGHIÊN CỨU                  45  2.1. Đối tượng nghiên cứu                                                                                 45  2.1.1. Đối tượng nghiên cứu                                                                      45  2.1.2. Tiêu chuẩn chẩn đoán                                                                      45  2.1.3. Tiêu chuẩn loại trừ khỏi nghiên cứu                                               45  2.1.4. Cỡ mẫu cần nghiên cứu                                                                   45  2.2. Phương pháp nghiên cứu                                                                           46  2.2.1. Phương pháp nghiên cứu chung                                                       46  2.2.2. Phương pháp lâm sàng                                                                     46  2.2.3. Xét nghiệm huyết học                                                                     46  2.2.4. Xét nghiệm hóa sinh   47   2.2.5. Phát hiện và phân tích đột biến gen β­globin                                  47  2.2.6. Nội dung nghiên cứu và tiêu chuẩn đánh giá                                  50  2.2.6.1. Dịch tễ học lâm sàng bệnh nhân nghiên cứu                                   50  2.2.6.2. Đặc điểm lâm sàng bệnh nhân nghiên cứu                                      50  2.2.6.3. Đặc điểm về cận lâm sàng                                                               53  2.2.6.4. Đột biến gen β­globin                                                                       54  2.2.7. Phương pháp thu thập số liệu                                                         55  2.2.8. Phương pháp xử lý số liệu                                                              55  2.2.9. Sơ đồ nghiên cứu          56      2.3. Đạo đức nghiên cứu                                                                                    57 CHƯƠNG    KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU                                                                 58  3.1. Kiểu hình lâm sàng, huyết học  β ­ Thalassemia                                      58  3.1.1. Một số đặc điểm dịch tễ học lâm sàng                                           58  3.1.2. Đặc điểm kiểu hình lâm sàng bệnh nhân β­thalassemia           60       3.1.3. Cận lâm sàng                 65      3.1.3.1. Đặc điểm về kiểu hình huyết học                                                    65  3.1.3.2. Đặc điểm về hóa sinh                                                                       70  3.2. Kiểu gen ở bệnh nhi  β­thalassemia                                                         72 3.2.1. Các đột biến gen HBB phát hiện  ở bệnh nhân β­thalassemia                                                 72      3.2.2. Phân bố đột biến gen theo vị trí và chức năng gen                         73  3.2.3. Phân bố đột biến gen HBB theo kiểu gen                                       75  3.2.4. Phân bố đột biến gen β­thalassemia theo dân tộc                           77  3.3. Đối chiếu kiểu gen­kiểu hình β ­ thalassemia                                          80 3.3.1. Đối chiếu giữa kiểu gen­ kiểu hình lâm sàng theo mức độ   bệnh                                         80     3.3.2. Đối chiếu kiểu gen với chỉ số  huyết học thể nặng và trung   gian                                          85     CHƯƠNG    BÀN LUẬN                                                                                          87  4.1. Kiểu hình lâm sàng, huyết học β ­ Thalassemia                                       87 140.    Cao A, Galanello R, Rosatelli MC (1994). Genotype – Phenotype            correlation in β­thalassemia. Blood Rev, 8 : 1 ­12 141.    Galaneello R, Dessi R, Melis MA, et al (1989). Molecular analysis             of β­thalassemia intermedia in Sardania. Blood, 74 : 823 ­827 142.    Pirastu M, Kan YW, Galanello R, Cao A (1984). Multiple            mutations produced delta – β zero – thalassemia in Sardania            Sciences, 293 : 929 – 930 143.     Quirolo K, Vichinsky E (2004). Hemoglobin disorders. In : Behrman             RE., Kliegman RM., Jenson HB. (eds). Nelson Textbook of Pediatrics,             17th edi., Saunders : 1623 ­  1634.     PHỤ LỤC PHIẾU THU THẬP SỐ LIỆU BỆNH NHÂN THALASSEMIA BỆNH ÁN MẪU Ngày lập phiếu:  / / Mã bệnh án:  Ngày vào viện:   / / THƠNG TIN CHUNG * Họ và tên:  * Giới tính:     Nam [  ], Nữ [   ] * Ngày tháng năm sinh:      Tuổi: 0­ 12 tháng [  ]; 2t [  ]; 2­5t [   ], 5­10t [  ], 11­ 15t [  ]; >15t [  ] * Dân tộc: Kinh [  ];  Ít người [  ];  Dân tộc nào: * Địa chỉ: Xã: Huyện: Tỉnh: * Điện thoại liên lạc: * Họ và tên bố: Tuổi: Nghề nghiệp: Dân tộc: * Họ và tên mẹ: Tuổi: Nghề nghiệp: Dân tộc: * Số anh, chị, em ruột:  Con thứ mấy [   ], số bị bệnh [  ] LÂM SÀNG * Lý do vào viện: * Tuổi phát hiện biểu hiện bệnh: , 10cm [  ] * Gan to: Có [   ];Khơng rõ [   ],  cm; 1­3cm [  ]; 3­5cm [  ], >5cm [  ] * Biến dạng xương: Có [   ]; Khơng rõ [   ] Bộ mặt Thalassemia: Rõ [   ]; Vừa phải [   ]; Khơng [   ] * Da, niêm mạc: ­ Da xạm: Rõ [  ];  Không rõ [   ] ­ Niêm mạc lợi: Xám xỉn [  ]; Hồng [   ];  Nhợt   nhạt  [  ] ­ Xuất huyết da:  Có [   ]; Khơng [  ] * Chiều cao: cm    So với chuẩn: Bình thường [   ];  Giảm ­1SD [  ]; Giảm ­2SD [   ] * Cân nặng: kg    So với chuẩn: Bình thường [   ];  Giảm ­1SD [  ]; Giảm ­2SD [   ] * Tuổi bắt đầu phải truyền máu: ; Không phải truyền máu [   ] Trước 1t [   ]; 1­3t [   ]; 3­5t [   ]; >5t [   ] * Số lần truyền máu/ năm: 1­2 lần [   ]; 3­5 lần [   ]; >5 lần [   ] CẬN LÂM SÀNG * SLHC (T/ l): * Hb (g/ l): β  ­Thal: nặng Hb 6­7g [     ]; trung gian Hb 8­10g   [   ]    Thiếu máu nhẹ: 9­12g/l [   ];  vừa 6­9g/l [   ]; nặng