Luận văn sư phạm Nghiên cứu thành phần hóa học của cây cỏ mật = ERIOCHLOA RAMOSA (

Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Tr Khóa lu n t t nghi p ng đ i h c s ph m hà n i Khoa: Hóa h c - - Hoàng th dung Nghiên c u thành ph n hoá h c c a c m t (Eriochloa ramosa) Khóa lu n t t nghi p đ i h c Chuyên ngành: Hóa h u c Hà n i - 2008 Hoàng Th Thanh Dung K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Tr Khóa lu n t t nghi p ng đ i h c s ph m hà n i Khoa: Hóa h c - Hoàng th dung Nghiên c u thành ph n hoá h c c a c m t (Eriochloa ramosa) Khóa lu n t t nghi p đ i h c Chuyên ngành: Hóa h u c Ng ih ng d n khoa h c TS Phan v n ki m Hà n i - 2008 Hoàng Th Thanh Dung K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p L ic m n Em xin chân thành c m n s đ nhi t tình quý báu c a TS Phan V n Ki m v i cán b Phòng Xúc tác h u c giúp đ em trình nghiên c u hồn thành khố lu n Em c ng g i l i c m n TS Nguy n V n B ng th y cô giáo Khoa Hoá h c Tr ng i h c S ph m Hà N i t n tình d y d chúng em su t b n n m h c t i tr ng M c dù em r t c g ng nh ng th i gian có h n nên khố lu n c a em không tránh kh i nh ng thi u sót Em r t mong nh n đ c a th y cô giáo b n sinh viên d khoá lu n c a em đ c s góp ý c hồn thi n h n Em xin chân thành c m n! Hà N i, tháng n m 2008 Sinh viên Hoàng Th Thanh Dung Hồng Th Thanh Dung K30- Khoa hóa h c ng đ i h c s ph m Hà N i Tr Khóa lu n t t nghi p M cl c L ic m n L i cam đoan M cl c Nh ng ch vi t t t Danh m c s đ hình v M đ u Ch ng 1: T ng quan 1.1 T ng quan v c m t 1.1.1 Mô t 1.1.2 Phân b , sinh thái 1.1.3 B ph n dùng 1.1.4 Tác d ng d c lý 1.1.5 Công d ng 1.2 T ng quan ph 1.2.1 Ph ng pháp chi t……… …………………………… 1.2.2 Các ph 1.3 Các ph ng pháp phân l p h p ch t ng pháp s c ký [4]………………… ng pháp xác đ nh c u trúc h p ch t h u c .9 1.3.1 Ph h ng ngo i (Infrared Spectroscopy) ……………… 10 1.3.2 Ph kh i l 1.3.3 Ph ng (Mass Spectrocopy)……….… 10 c ng h ng t h t nhân (Nuclear Magnetic Resonanc Spectroco-py, NMR) 11 Ch ng 2: it ng ph ng pháp nghiên c u 14 2.1 M u th c v t 14 2.2 Ph ng pháp phân l p h p ch t .14 2.2.1 S c ký l p m ng 14 2.2.2 S c ký l p m ng u ch 14 Hồng Th Thanh Dung K30- Khoa hóa h c ng đ i h c s ph m Hà N i Tr Khóa lu n t t nghi p 2.2.3 S c ký c t( CC 14 2.3 Ph ng pháp xác đ nh c u trúc hóa h c h p ch t .14 2.3.1 i m nóng ch y (mp) 14 2.3.2 Ph kh i l 2.3.3 Ph c ng h ng ( ESI – MS) 15 ng t h t nhân (NMR) 15 2.4 D ng c , thi t b hoá ch t 15 2.4.1 D ng c thi t b chi t 15 2.4.2 D ng c thi t b xác đ nh c u trúc 16 2.4.3 Hoá ch t 16 Ch ng 3: K t qu th o lu n 17 3.1 Thu m u th c v t x lý .17 3.2 Phân l p h p ch t 17 3.3 H ng s v t lý d ki n ph ph c a h p ch t 19 3.3.1 H p ch t 1: Quercetin 3-O- -L-rhamnopyranoside .19 3.3.2 H p ch t 2: Palmatine 20 3.3.3 H p ch t 3: Daucosterol 20 3.4 Xác đ nh c u trúc hóa h c c a h p ch t 21 3.4.1 H p ch t Quercitrin (1)…………………… ……… 21 3.4.2 H p ch t Palmatine (2)……………………… ……… 25 3.4.3 H p ch t Daucosterol (3)……………………… .29 3.4.4 T ng h p c u trúc phân l p… ……… .34 K t lu n……………… .…… Tài li u tham kh o………………….…… .36 Hoàng Th Thanh Dung K30- Khoa hóa h c 35 Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p Nh ng ch vi t t t Ac Nhóm axetyl []D Specific Optical Rotation ( 13 Carbon-13 Nuclear Magnetic Resonance pectroscopy C-NMR Ph c ng h H-NMR quay c c ) ng t h t nhân cacbon 13 Proton Magnetic Resonance Spectroscopy Ph c ng h ng t h t nhân proton Bu Nhóm buty Me Nhóm metyl TCL Thin Layer Chromatography ( S c ký l p m ng ) CC Column Chromatography ( S c ký c t ) DEPT Distortionless Enhancement by Polarisation ESI – MS Electron Spray Ionzation Mass Spectroscopy HSQC Ph c ng h ng h t nhân hai chi u HMBC Heteronuclear Multiple Bond Connectivity HMQC Heteronuclear Multiple Quantum Coherence IR Infrared Spectroscopy ( Ph h ng ngo i ) MS Mass Spectroscopy ( Ph kh i l UV Ph t ngo i Hoàng Th Thanh Dung ng ) K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p L i cam đoan Trong trình hồn thành khố lu n em đ cs h ng d n c a TS Phan V n Ki m em có tham kh o tài li u c a m t s tác gi (đã nêu m c Tài li u tham kh o) Em xin cam đoan k t qu nghiên c u c a riêng em Các s li u k t qu nêu khoá lu n trung th c Nh ng k t qu thu đ trùng v i k t qu công b tr c không c N u sai em xin hoàn toàn ch u trách nhi m Sinh viên Hoàng Th Thanh Dung Hồng Th Thanh Dung K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p Danh m c s đ hình v Hình 1.1 Eriochloa procera (Retz.) C.E.Hubb………………………… Hình 1.2 M t s h Poaceae .5 S đ 3.1 S đ chi t phân đo n c m t .18 S đ 3.2 S đ phân l p ch t 18 S đ 3.3 S đ phân l p ch t 2-3 19 Hình 1.a Ph 1H-NMR c a 1……………………………………… .21 Hình 1.b Ph 13C-NMR c a 1………………………………………… 22 Hình 1.c Ph 13C-NMR ph DEPT c a 1……………………….23 Hình 1.d Ph HSQC c a 1………………………………………… .23 Hình 3.1.e C u trúc hố h c c a 1………………………………… 24 Hình 3.1.f Ph HMBC c a 1………………………………………… 24 Hình 3.2.a C u trúc hố h c c a 2…………………………………… 26 Hình 3.2.b Ph 1H-NMR 13C-NMR c a 2…………………………….27 Hình 3.2.c Ph 13C-NMR ph DEPT c a 2……………………….28 Hình 3.2.d Ph ESI-MS c a 2……………………………………………28 Hình 3.3.a Ph 1H-NMR c a 3………………………………………… 29 Hình 3.3.b Ph 13C-NMR c a 3……………………………………… 30 Hình 3.3.c Ph 13C-NMR ph DEPT c a 3………………… .30 Hình 3.3.d C u trúc hố h c c a ………………………………… .31 Hình 3.3.e Ph HSQC c a 3………… .…………………………….32 Hình 3.3.f Ph HMBC c a 3………………………………………… .33 Hồng Th Thanh Dung K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p M U Vi t Nam n m vùng khí h u nhi t đ i gió mùa H ng n m có l ng m a l n, đ m r t cao trung bình kho ng 80%, nh ng u ki n r t thích h p cho đ ng th c v t phát tri n m nh Do th m th c v t n c ta phát tri n r t phong phú, đa d ng v i kho ng 12000 lồi th c v t, có kho ng 4000 loài đ c nhân dân s d ng làm th o d c Nhi u loài đ c nhân dân s d ng y h c c truy n m c đích khác ph c v đ i s ng c a ng i Ngày đ i s ng c a ng i ngày đ c nâng cao nhiên v i s phát tri n ng i c ng g p ph i r t nhi u c n b nh hi m nghèo Do vi c nghiên c u, tìm ki m h p ch t có ngu n g c t thiên nhiên đ ng d ng y h c, nơng nghi p m c đích khác đ i s ng c a ng i m t nhi m v quan tr ng đ• đ c nhi u nhà khoa h c n c th gi i quan tâm Nh s phát tri n c a khoa h c cơng ngh nhi u h p ch t có ho t tính sinh h c cao có ngu n g c t thiên nhiên đ• đ c tìm th y nhà khoa h c ng d ng đ t o lo i thu c u tr nh ng b nh nan y, hi m nghèo nh : penicilin (1941), artemisinin (1970) Các h p ch t có ho t tính sinh h c nh ng nguyên li u ban đ u cho vi c t ng h p, bán t ng h p lo i thu c m i có tác d ng t t h n vi c u tr b nh hi n Vi c nghiên c u, kh o sát v thành ph n hóa h c c a lo i thu c có giá tr cao c a Vi t Nam tìm nh ng lo i m i có giá tr khoa h c c ng nh ng d ng th c t ph c v cho ng i có ý ngh a r t l n Qua nh m đ t c s khoa h c cho vi c s d ng chúng m t cách h p lý, hi u qu kinh t h n Trên c s đó, tơi ti n hành nghiên c u đ tài: “ Nghiên c u thành ph n hóa h c c a c m t ( Eriochloa ramosa) ’’ Cây c m t ( Eriochloa ramosa ) thu c h lúa ( proceae) m t đ i t ng nghiên c u m i Cây c m t m i ch đ c dùng theo kinh nghi m c a nhân dân đ u tr m t s b nh nh : c m, s t, cúm, s t xu t huy t Khóa lu n t p trung nghiên c u thành ph n hóa h c c a c m t ( Eriochloa ramosa ) t o c s cho nh ng nghiên c u ti p theo đ tìm nh ng ph ng thu c m i Nhi m v c a khoá lu n là: Phân l p m t s h p ch t t c m t Xác đ nh c u trúc hóa h c c a m t s h p ch t phân l p đ c Hồng Th Thanh Dung K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Ch Khóa lu n t t nghi p ng 1: T ng quan 1.1 T ng quan v c m t [1], [5] 1.1.1 Mô t v c m t C m t ( Eriochloa ramosa hay tên đ ng ngh a Eriochloa procera) th o, s ng lâu n m, m c dày đ c Thân r ng n, m c bò dài Thân sinh m c thành b i dày, nh n, có lơng đ t, cao 0,3 - 1,5m Lá m c so le, hình d i, đ u nh n, mép h i nháp; b xoè r ng; l i b r t ng n, có lơng C m hoa m c thành bơng đ n hay phân nhánh, dài – 13cm, cu ng chung m nh, nh n; nh x p l p r t th a, m c so le, h i th ng đ ng, hình b u d c nh n, có lơng c ng đ nh, khơng có mày ngồi, mày m m nh n, mép h i g p l i, có lơng m m; cu ng bơng nh có lơng; hoa d i khơng sinh s n, hoa l ng tính, d t, màu xám bóng, nh , c n nh hình s i; b u thn d t, nh n, có hai vòi nh y, núm nh y phát tri n, màu đen nh t Hình 1.1 Eriochloa procera (Retz.) C.E.Hubb Qu n m mày hoa, góc r t nh n tù, đ u, nh n, d t, vòi t n t i 1.1.2 Phân b , sinh thái C m t (Eriochloa ramosa) m t chi nh c a h lúa (poaceae) g m m t s loài c s ng m t n m, hay nhi u n m, phân b ch y u vùng nhi t đ i Vi t Nam, c m t phân b r i rác vùng đ ng b ng trung du, c ng g p vùng núi th p Cây s ng a sáng, th ng m c đ t m l n v i lo i c khác b•i sơng, ru ng tr ng hoa màu, ven đ ng hay n ng r y Cây m c t h t vào kho ng cu i tháng đ n tháng Sau mùa hoa qu , tàn l i T c đ sinh tr ng chi u cao c a c m t tu thu c vào n i s ng Nh ng m c đ t tr ng th ng th p cành nhánh g c có xu h ng n m ngang Trong đó, nh ng m c l n v i lúa, ngô, đ u ho c lo i c cao khác có s c nh tranh ánh sáng u cao c a có th đ n 1m ho c h n C m t ngu n th c n c a trâu, bị nh ng có h i cho tr ng Trên th gi i h lúa ( poaceae ) r t phong phú đa dang, đ c bi t lo i lúa ngu n cung c p l ng th c cho ng i Ph n l n h lúa th o s ng m t n m ho c lâu n m, phân b r ng kh p th gi i nh ng ch y u vùng khí h u nhi t đ i Pennisetum setaceum Hoàng Th Thanh Dung Poaceae 10 Longwwod K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p + ietyl ete hi m đ c dùng trình chi t th c v t r t d bay h i, d b c cháy đ c, đ ng th i có xu h ng d chuy n thành peoxit d n Sau chi t dung môi đ c c t b ng máy c t quay nhi t đ không 30o - 40oC v i m t vài hoá ch t ch u nhi t có th th c hi n nhi t đ cao h n b Quá trình chi t H u h t trình chi t đ n gi n đ c phân lo i nh sau: • Chi t ngâm • Chi t s d ng m t lo i thi t b bình chi t Xoclet • Chi t s c v i dung môi n c • Chi t lơi cu n theo h i n c Chi t ngâm m t nh ng ph ng pháp đ c s d ng r ng r•i nh t q trình chi t m u th c v t b i khơng địi h i nhi u cơng s c th i gian Thi t b s d ng m t bình thu tinh v i m t khố đáy đ t o t c đ ch y cho q trình tách r a dung mơi M u th c v t đ c ngâm v i dung môi máy chi t kho ng 24 gi sau ch t chi t đ c l y Nh v y, tu thu c vào m c đích c n chi t mà l a ch n dung mơi cho thích h p th c hi n quy trình h p lý nh m đ t hi u qua cao Ngồi ra, có th d a vào m i quan h c a dung môi ch t hoà tan c a l p ch t mà ta có th tách thơ m t s l p ch t trình chi t 1.2.2 Các ph ng pháp s c ký [3] Ph ng pháp s c ký ph ng pháp ph bi n h u hi u nh t hi n đ c s d ng đ phân l p h p ch t h u c nói chung h p ch t thiên nhiên nói riêng S c ký có pha t nh pha đ ng Trên th gi i hi n ph bi n s d ng pha t nh ch t r n (bao g m lo i ch t h p ph nh silicagel, YMC, ODS, Al2O3 …) pha đ ng đ c s d ng ch t l ng (s c ký l ng), hay ch t khí (s c ký khí) Pha đ ng dùng s c ký l ng dung môi h u c nguyên t c ch t phân c c h n s tan t t dung môi phân c c h n ng c l i ch t phân c c h n s tan t t dung môi phân c c h n • Nguyên t c c a ph ng pháp: Ph ng pháp s c ký d a vào đ khác v l c gi a ch t c n tách v i ch t h p ph h p ph c a dung môi t ng d n t ete d u ho đ n n c Tu thu c vào cách ti n hành s c ký mà ng i ta chia thành ph ng pháp s c ký ch y u sau: a S c ký c t (CC) Hồng Th Thanh Dung 12 K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p ây ph ng pháp ph bi n nh t, ch t h p ph pha t nh bao g m lo i silicagel (đ h t khác nhau) pha th ng c ng nh pha đ o YMC, ODS, Dianion … ch t h p ph đ c nh i vào c t (c t b ng thu tinh hay c t b ng kim lo i inox nh ng ph bi n nh t c t thu tinh) m n c a ch t h p ph h t s c quan tr ng ph n ánh s đ a lý thuy t hay kh n ng tách c a ch t h p ph h t c a ch t h p ph nh s lý thuy t l n kh n ng tách cao ng c l i Tuy nhiên n u ch t h p ph có đ h t nh t c đ dòng ch y gi m Trong m t s tr ng h p l c tr ng tr ng khơng đ l n gây nên hi n t ng t c c t (dung mơi khơng ch y đ c) ng i ta ph i s d ng áp su t v i áp su t trung bình ( MPC) ho c áp su t cao ( HPLC ) Trong s c ký c t t l gi a chi u cao c t ( L) so v i đ ng kính c t (D) r t quan tr ng đ ng th i th hi n kh n ng tách c a c t T l L/D ph thu c vào yêu c u tách t c ph thu c vào h n h p c th Trong s c ký t l gi a qu•ng đ ng c a ch t c n tách so v i qu•ng đ ng đ c c a dung môi g i Rf V i m i ch t s có m t Rf khác Chính nh vào s khác v Rf mà ng i ta tách đ c t ng ch t kh i h n h p ch t Trong s c c t, vi c đ a ch t lên c t h t s c quan tr ng, tu thu c vào l ng ch t d ng ch t mà ng i ta có th đ a ch t lên c t b ng ph ng pháp khác N u l ng ch t nhi u ch y thơ ng i ta th ng ph i t m ch t vào silicagel r i làm khơ, t i hồn tồn sau đ a lên c t N u tách tinh ng i ta hay đ a tr c ti p ch t lên c t b ng cách hoà tan ch t b ng dung môi ch y c t v i m t l ng t i thi u Vi c nh i c t (b ng ch t h p ph ) c ng h t s c quan tr ng Có hai cách đ a ch t h p ph lên c t: • Nh i c t khơ • Nh i c t t b S c ký l p m ng S c ký l p m ng (SKLM) th ng đ c s d ng đ ki m tra đ nh h ng cho s c ký c t S c ký l p m ng đ c ti n hành b n m ng tráng s n silicagel đ nhôm hay đ thu tinh Ngoài vi c s d ng SKLM đ đ nh h ng cho s c ký c t ng i ta dùng s c ký l p m ng đ u ch , thu ch t tr c ti p Có th phát hi n ch t b n m ng b ng đèn t ngo i, b ng ch t hi n màu đ c tr ng cho t ng l p ch t ho c s d ng axit H2SO4 10% 1.3 T ng quan v ph ng pháp xác đ nh c u trúc c a h p ch t h uc xác đ nh c u trúc c a h p ch t h u c ng i ta s d ng ph ng pháp m nóng ch y ph ng pháp ph nh ng quan tr ng nh t d a vào ph ng pháp ph Tùy thu c vào c u trúc hoá h c c a t ng h p ch t mà ng i ta s d ng nh ng ph ng pháp ph khác C u trúc ph c t p yêu c u ph i h p ph ng pháp ph cao Trong m t s tr ng Hoàng Th Thanh Dung 13 K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p h p đ xác đ nh xác c u trúc hố h c c a h p ch t ng i ta ph i d a vào ph ng pháp b sung khác nh đ d ch chuy n hoá hoá h c k t h p v i ph ng pháp s c ký so sánh… 1.3.1 Ph h ng ngo i (Infrared Spectroscopy) Ph h ng ngo i đ c xác đ nh d a vào s khác v dao d ng c a liên k t phân t h p ch t d i s kích thích c a tia t ngo i M i ki u liên k t s đ c tr ng b i m t vùng b c sóng khác Chính v y, d a vào k t qu ph h ng ngo i ng i ta có th xác đ nh đ c nhóm ch c đ c tr ng Ví d : Dao đ ng hố tr c a nhóm OH t nhóm hydroxyl 3300 3450 cm-1, c a nhóm cacbonyl C=O kho ng 1700-1750 cm-1, c a nhóm ete C-O-C vùng 1020-1100 cm-1, N - H (3400-3500 cm-1) … c bi t vùng d i 700 cm-1 g i vùng vân tay đ c s d ng đ nh n d ng h p ch t h u c theo ph ng pháp so sánh tr c ti p 1.3.2 Ph kh i l ng (Mass Spectrocopy) Ph kh i l ng (ph MS) đ c s d ng ph bi n đ xác đ nh c u trúc hoá h c c a h p ch t h u c • Nguyên t c c a ph ng pháp là: D a vào s phân nhánh ion c a phân t ch t d i s b n phá c a chùm ion bên ngồi Ngồi ion phân t , ph MS cịn cho pic ion m nh khác mà d a vào ng i ta có th xác đ nh đ c c ch phân m nh d ng l i đ c c u trúc hoá h c c a h p ch t Hi n có r t nhi u lo i ph kh i l ng: a Ph EI-MS (Electron Impact Ionization Mass Spectrocopy) Ph EI-MS d a vào s phân m nh ion d i tác d ng c a chùm ion b n phá v i n ng l ng khác nhau, ph bi n 70 ev b Ph ESI (Electron Spray Ionization Mass Spectrocopy) Ph ESI g i ph phun mù n t Ph đ c th c hi n v i n ng l ng b n phá th p h n nhi u so v i ph EI-MS ph thu đ c ch y u pic ion phân t pic đ c tr ng cho s phá v liên k t có n ng l ng th p d b phá v c Ph FAB ( Fast Atom Bombardment Mass Spectrocopy) Nguyên t nhanh v i s b n phá nhanh n ng l ng th p ph c ng d thu đ c pic ion phân t d Ph kh i l ng phân gi i cao (High Resolution Mass Spectrocopy) Ph cho phép xác đ nh pic ion phân t ho c ion m nh v i đ xác cao K t qu kh i l ng phân gi i cao v i k t qu phân tích nguyên t s cho phép kh ng đ nh xác cơng th c c a h p ch t h u c Ngồi hi n ng i ta cịn s d ng k t h p ph ng pháp s c ký k t h p v i kh i ph Ph ng pháp đ c bi t hi u qu s d ng th vi n ph đ so sánh nh n d ng h p ch t Hoàng Th Thanh Dung 14 K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p 1.3.3 Ph c ng h ng t h t nhân (Nuclear Magnetic Resonanc Spectrocopy, NMR) Ph c ng h ng t h t nhân (NMR) m t ph ng pháp ph hi n đ i h u hi u nh t hi n đ c dùng đ xác đ nh c u trúc hoá h c c a h p ch t h u c nói chung h p ch t thiên nhiên nói riêng V i vi c s d ng k t h p k thu t ph NMR chi u chi u nhà nghiên c u có th xác đ nh xác c u trúc c a h p ch t, k c c u trúc l p th c a phân t • Nguyên lý chung c a ph ng pháp ph NMR: Là s c ng h ng khác c a h t nhân t (1H 13C ) d i tác d ng c a t tr ng S c ng h ng khác đ c bi u di n b ng đ d ch chuy n hoá h c (chemical shift) Ngoài ra, đ c tr ng c a phân t đ c xác đ nh d a vào t ng tác spin gi a h t nhân t v i (spin coupling) a Ph 1H-NMR Trong ph 1H-NMR đ d ch chuy n hoá h c ( ) c a proton đ c xác đ nh thang ppm t ppm đ n 14 ppm tu thu c vào m c đ lai hoá c a nguyên t c ng nh đ c tr ng riêng c a t ng phân t M i lo i proton c ng h ng m t tr ng khác D a vào nh ng đ c tr ng c a đ d ch chuy n hoá h c c ng nh t ng tác coupling mà ng i ta có th xác đ nh đ c c u trúc hoá h c c a h p ch t b Ph 13C-NMR [4] Ph cho tín hi u v ch ph c a cacbon M i nguyên t cacbon s c ng h ng t tr ng khác cho tín hi u v ch ph khác Nh ng pic có c ng đ nh t ng ng v i ngun t cacbon khơng đính v i hiđro cịn pic có c ng đ l n ng v i ng v i ngun t cacbon đính v i m t hay nhi u nguyên t hiđro Thang đo cho Ph 13C-NMR c ng đ c tính b ng ppm v i d i thang đo r ng h n so v i ph proton ( t ppm đ n 240 ppm ) c Ph DEPT (Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer) Ph cho ta nh ng tín hi u ph phân lo i C khác Trên ph DEPT tín hi u c a C b c bi n m t Tín hi u ph c a CH CH3 n m v phía c a CH2 v phía ph DEPT 135 Cịn ph DEPT 90 ch xu t hi u ph c a CH d Ph 2D-NMR ây k thu t ph chi u cho phép xác đ nh t ng tác c a h t nhân t c a phân t không gian chi u M t s k thu t ch y u th ng đ c s d ng nh sau: • Ph HMQC (Heteronuclear Multiple Quantum Coherence) Hồng Th Thanh Dung 15 K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p Các t ng tác tr c ti p C-H đ c xác đ nh nh t ng tác ph Trên ph tr c ph 1H-NMR tr c 13C-NMR Các t ng tác HMQC n m đ nh ô vng ph • Ph 1H-1H COSY(HOMCOSY) 1H-1H Chemical Shift Corrolation Spectroscopy: Ph bi u di n t ng tác H-H ch y u c a proton đính v i C li n k Chính nh ph mà ph n c a phân t đ c n i ghép l i v i • Ph HMBC (Heteronuclear Multiple Bond Connectivity): Ph bi u di n t ng tác xa c a H C phân t Do d a vào vi c phân tích ph mà t ng ph n c a phân t c ng nh toàn b phân t đ c xác đ nh v c u trúc • Ph NOESY (Nuclear Overhauser Effect Spectroscopy): Ph bi u di n t ng tác xa không gian c a proton không k đ n liên k t mà ch tính đ n kho ng cách nh t đ nh không gian D a vào k t qu ph có th xác đ nh đ c c u trúc không gian c a phân t Ch ng 2: it ng Các ph ng pháp nghiên c u 2.1 M u th c v t Cây c m t (Eriochloa ramosa) đ c thu hái t i ông Anh, Hà N i vào tháng n m 2006 M u đ c ông Ngô V n Tr i giám đ nh M u tiêu b n đ c l u gi t i Vi n D c li u B Y T 2.2 Ph ng pháp phân l p h p ch t 2.2.1 S c ký l p m ng (TLC) S c ký l p m ng đ c th c hi n b n m ng tráng s n DC-Alufolien 60 F254 ( Merck 1,05715), RP18 F254s (Merck) Phát hi n ch t b ng đèn t Hoàng Th Thanh Dung 16 K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p ngo i hai b c sóng 254 nm 368 nm ho c dùng thu c th dung d ch H2SO4 10% đ c phun đ u lên b n m ng, s y khơ r i h nóng b p n t đ n hi n màu 2.2.2 S c ký l p m ng u ch S c ký l p m ng u ch th c hi n b n m ng tráng s n Silicagel 60G F254 (Merck, ký hi u 105875), phát hi n v t ch t b ng đèn t ngo i hai b c sóng 254 nm 368 nm, ho c c t rìa b n m ng đ phun thu c th dung d ch H2SO4 10%, h nóng đ phát hi n v t ch t, ghép l i b n m ng nh c đ xác đ nh vùng ch t, sau c o l p Silicagel có ch t gi i h p ph b ng dung mơi thích h p 2.2.3 S c ký c t (CC) S c ký c t đ c ti n hành v i ch t h p ph Silicagel pha th ng pha đ o Silicagel pha th ng có c h t 0,040 - 0,063 mm (240-430 mesh) Silicagel pha đ o ODS ho c YMC (30-50 ?m, FuJisilisa Chemical Ltd) 2.3 Ph ng pháp xác đ nh c u trúc hoá h c h p ch t 2.3.1 i m nóng ch y (Mp) i m nóng ch y đ c đo máy Kofler micro-hotstage c a Vi n Hóa h c H p ch t Thiên nhiên 2.3.2 quay c c [?]D quay c c đ c đo máy JASCO DIP-1000 KUY polarimeter c a Vi n Hóa h c, Vi n Khoa h c Công ngh Vi t Nam 2.3.3 Ph kh i l ng (ESI-MS) Ph kh i l ng phun mù n t (Electron Spray Ionization mass spectra) đ c đo máy AGILENT 1100 LC-MSD Trap c a Vi n Hoá h c H p ch t Thiên nhiên, Vi n Khoa h c Công ngh Vi t Nam 2.3.4 Ph c ng h ng t nhân (NMR) Ph c ng h ng t nhân (NMR): 1H-NMR (500 MHz) 13C-NMR (125 MHz) đ c đo máy Bruker AM500 FT-NMR Spectrometer, Vi n Hóa h c, Vi n Khoa h c Công ngh Vi t Nam 2.4 D ng c , thi t b hoá ch t[2], [3] 2.4.1 D ng c thi t b chi t Các d ng c thi t b dùng cho tách chi t tinh ch ch t s ch đ c s d ng bao g m: • Bình chi t 30 lít • Máy c t quay chân khơng • èn t ngo i b c sóng 254 368 nm • T s y chân khơng • Máy s y • Micropipet • Bình s c ký lo i phân tích u ch Hoàng Th Thanh Dung 17 K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p • C t s c ký pha th ng lo i đ ng kính • C t s c ký pha ng c trung áp • Máy phun dung d ch thu c th • B p n 2.4.2 D ng c thi t b xác đ nh c u trúc • Máy ph c ng h ng t h t nhân NMR AM500 FT - NMR spectro meter • Máy s c ký l ng cao áp ghép n i kh i ph ( ESI ) AGILENT 1100 LC-MSD Trap spectrometer • Thi t b đo m nóng ch y Kofler micro- hostage • Thi t b đo đ quay c c JASCO 2.4.3 Hố ch t • Silicagel 60 (0,04- 0,063mm) Merck • Silicagel pha đ o ODS ho c YMC ( 30-50 m, FuJisilisa Chemical Ltd) • B n m ng tráng s n pha th ng DC- Alufolien 60 F254 (Merck 1.05715) • B n m ng tráng s n pha ng c RP18 F254s ( Merck) • Các lo i dung môi h u c nh metanol, etanol, etyl axetat, clorofom, hexan, axeton lo i hoá ch t tinh t c a Merck Ch ng 3: K t qu th o lu n 3.1 Thu m u th c v t x lý M u c m t đ c r a s ch ph i khơ bóng râm sau s y khơ nghi n thành b t khô 3.2 Phân l p h p ch t t c m t Cây c m t đ c ph i khô, nghi n nh thu đ c 0,8 kg b t khơ Sau m u đ c ngâm chi t v i metanol D ch chi t metanol đ c lo i dung môi d i áp su t gi m thu đ c 21 gam d ch cô metanol B sung n c c t vào d ch cô này, l c đ u r i l n l t chi t v i n-hexan, clorofom, n-butanol Các d ch chi t đ c c t lo i dung môi d i áp su t gi m thu đ c 2,2 gam Hồng Th Thanh Dung 18 K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p d ch cô n-hexan, 3,5 gam d ch cô clorofom, 5,0 gam d ch cô etyl axetat 4,5 gam d ch cô n-butanol T phân đo n d ch cô etyl axetat, sau ti n hành phân l p s c ký c t k t h p gi a silicagel pha th ng pha đ o thu đ c h p ch t (12 mg) d i d ng ch t b t có màu vàng T phân đo n clorofom (3,5 gam), sau ti n hành phân l p b ng ph ng pháp s c ký c t nh i silicagel v i h dung môi CHCl3-MeOH ( t 20:1 đ n 1:2 v/v) thu đ c b n phân đo n ký hi u F1 ( 0.5 g ), F2 ( 0.8 g ), F3 ( 1.0 g), F4 ( 1.2 g) H p ch t ( 8,0 mg ) nh n đ c d i d ng k t tinh màu vàng t phân đo n F2 sau ti n hành phân l p c t s c ký YMC v i h dung môi MeOH : H2O 8/2 Phân đo n F4 ti p t c đ c phân l p b ng s c ký c t nh i silicagel v i h dung môi r a gi i CHCl3- EtOAc (10:1, v/v) thu đ c h p ch t ( 20.0 mg ) d i d ng ch t k t tinh khơng màu Hồng Th Thanh Dung 19 K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p S đ 3.2 S đ phân l p ch t S đ 3.3 S đ phân l p ch t – 3.3 H ng s v t lý d ki n ph c a h p ch t 3.3.1 H p ch t 1: Quercetin 3-O- ?-L-rhamnopyranoside (quercitrin)[6] Là ch t b t k t tinh màu vàng, nhi t đ nóng ch y 182-185oC; (C21H20O11) 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) ? (ppm): 6,21 (1H, d, J = 1.5 Hz, H-6), 6,38 (1H, d, J = 1.5 Hz, H-8), 7,35 (1H, d, J = 2,0 Hz, H-2'), 6,92 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-5'), 7,32 (1H, dd, J = 8,5, 2,0 Hz, H-6'), 5,37(1H, d, J = 1,5 Hz, H-1''), 4,23 (1H, dd, J = 2,0, 3,0 Hz, H-2''), 3,76 (1H, dd, J = 3,0, 9,5 Hz, H-3''), 3,56 (1H, dd, J = 9,5, 9,5 Hz, H-4''), 3,43 (1H, m, H-5'') 0,97 (3H, d, J = 6,0 Hz, H-6'') 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) ? (ppm): 159.29 (C-2), 136,21 (C-3), 179,61 (C-4), 163,53 (C-5), 99,81 (C-6), 165,81 (C-7), 94,73 (C-8), 158.18 (C-9), 105,89 (C-10), 122,97 (C-1'), 116,96 (C-2'), 146,35 (C-3'), 149,75 (C-4'), 116,37 (C-5'), 122,86 (C-6'), 103,51 (C-1''), 72,01 (C-2''), 72,12 (C-3''), 73,26 (C-4''), 71,88 (C-5'') 17,62 (C-6'') 3.3.2 H p ch t 2: Palmatine Là ch t r n màu vàng, nhi t đ nóng ch y 204-205oC; ESI m/z: (positive) 352 [M]+ (C21H22O4N) 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) ? (ppm): 7.58 (s, H-1), 7.01 (s, H-4), 3.28 (t, J = 6.0 Hz, H-5), 4.94 (t, J = 6.0 Hz, H-6), 9.73 (s, H-8), 8.00 (d, J = 9.5 Hz, H-11), 8.06 (d, J = 9.5 Hz, H-12), 8.75 (s, H-13), 3.92, 3.98, 4.06 4.20 (4 x OCH3) 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) ? (ppm): 109.89 (C-1), 150.75 (C-2), 151.79 (C-3), 112.21 (C-4), 129.93 (C-4a), 27.77 (C-5), 57.31 (C-6), 146.22 (C-8), 123.13 (C-8a), 153.69 (C-9), 145.54 (C-10), 124.49 (C-11), 127.90 (C-12), 135.10 (C-12a), 121.20 (C-13), 139.56 (C-13a), 120.30 (C-13b), 57.09 (2-OCH3), 57.59 (3-OCH3), 62.55 (9-OCH3),và 56.66 (10-OCH3) 3.3.3 H p ch t 3: Daucosterol Hồng Th Thanh Dung 20 K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p Là ch t b t không màu, nhi t đ nóng ch y 283-2860 C, ESI m/z: (positive) 577 [M + H]+ (C35H60O6) 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) ? (ppm): 3,52 (1H, dd, J = 11,7, 5.1 Hz, H-3), 5,35 (1H, br d, J = 5.0 Hz, H-6), 0,68 (3H, s, H-18), 1,00 (3H, s, H-19), 0,92 (3H, d, J = 6,5 Hz, H-21), 0,84 (3H, t, J = 7,6 Hz, H-26), 0,81 (3H, d, J = 6,8 Hz, H-28), 0,83 (3H, d, J = 7,3 Hz, H-29), 4,30 (1H, d, J = 7,8 Hz, H-1’) 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) ? (ppm): 36,8 (t, C-1), 31,3 (t, C-2), 76,9 (d, C-3), 39,3 (t, C-4), 140,4 (s, C-5), 121,1 31,4 (t, C-7), (d, C-6), 31,3 (d, C-8), 49,9 (d, C-9), 36,1 (s, C-10), 20,5 (t, C-11), 38,2 (t, C-12), 41,8 (s, C-13), 55,2 (d, C-14), 25,4 (t, C-15), 29,2 (t, C-16), 56,0 (d, C-17), 11,6 (q, C-18), 19,0 (q, C-19), 35,4(d, C-20), 18,5 (q, C-21), 33,3 (t, C-22), 27,7 (t, C-23), 45,0 (d, C-24), 28,9 (d, C-25), 19,6 (q, C-26), 18,9 (d, C-27), 22,5 (d, C-28), 11,7 (q, C-29), 100,7 (d, C-1’), 73,4 (d, C-2’), 76,7 (d, C-3’), 70,0 (d, C-4’), 76,6 (d, C-5’), 61,0 (t, C-6’) 3.4 Xác đ nh c u trúc hóa h c c a h p ch t 3.4.1 H p ch t 1: Quercetin 3-O-?-L-rhamnopyranoside ( quercitrin ) Là ch t b t vô đ nh hình màu vàng, nhi t đ nóng ch y 183-185oC; quay c c [?]25D +187o (MeOH, c 0,5) Ph h ng ngo i IR (KBr) cho nh ng tín hi u c a nhóm ch c đ c tr ng t i ?max: 3454,8 (OH), 3081,8, 3024,4, 2931,2, 2852,3 (CH), 1672,7 (C=O), 1457,4 (C=C), 1087,1 (C-O-C) Ph 1H-NMR (500 MHz, CD3OD): xu t hi n tín hi u doublet t i ? 6,22 (1H, d, J = 2,0 Hz, H-6) 6,38 (1H, d, J = 2,0 Hz, H-8) đ c tr ng cho hai proton nh t c a vòng th m th c v trí Ba tín hi u c a vịng C th 1, 3, c ng đ c xác đ nh t i ? 7,35 (1H, d, J = 2,0 Hz, H-2’), 6,93 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-5’) 7,32 (1H, dd, J = 8,5, 2,0 Hz, H-6’) v i h t ng tác d ng ABX Tín hi u c a proton g n vào cacbon anome t i ? 5,37(1H, d, J = 1,5 Hz, H-1”) tín hi u cịn l i ? 4,23 (1H, dd, J = 2,0, 3,0 Hz, H-2”), 3,76 (1H, dd, J = 3,0, 9,5 Hz, H-3”), 3,56 (1H, dd, J = 9,5, 9,5 Hz, H-4”), 3,43 (1H, m, H-5”) 0,96 (3H, d, J = 6,0 Hz, H-6”) thu c vào phân t đ ng rhamnopyranozit.[6] Hình 3.1.a Ph 1H-NMR c a Ph 13C-NMR: xu t hi n tín hi u c a 21 cacbon, 15 cacbon đ c tr ng cho vòng A, B C c a flavon, tín hi u thu c vào phân t rhamnopyranozit Các thông tin thu đ c ph 1H-NMR đ c ki m ch ng b ng ph 13C-NMR ph DEPT, khung aglycon m t flavon v i tín hi u ? 158,53 (C-2), 136,24 (C-3), 179,65 (C-4), 163,21 (C5), 99,81 (C-6), 165,88 (C-7), 94,71 (C-8), 159,31 (C-9), 105,90 (C-10), 122,99 (C-1’), 116,37 (C-2’), 146,41 (C-3’), 149,79 (C-4’), 116,95 (C-5’) Hoàng Th Thanh Dung 21 K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p 122,86 (C-6’); phân t đ ng rhamnoz xác đ nh b ng tín hi u ? 103,55 (C-1”), 72,02 (C-2”), 72,14 (C-3”), 73,27 (C-4”), 71,90 (C-5”) 17,64 (C6”) i u d nh n phân t đ ng rhamnoz s có m t c a nhóm metyl b c hai ?C 17,64/?H 0,96 (3H, d, J = 6,0 Hz), c ng nh h ng s t ng tác c a proton c a cacbon anome r t nh (J = 1,5 Hz) ch ng t c u hình equatorial c a proton Hình 3.1.b Ph 13C-NMR c a Hình 3.1.c Ph 13C-NMR ph DEPT c a Hình 3.1.d C u trúc hố h c c a Hình 3.1.e Ph HSQC c a Hình 3.1.f Ph HMBC c a Ph kh i l ng ( ESI-MS) c a c ng xu t hi n pic ion t i m/z: 447 [MH]-, 449 [M+H]+ hoàn tồn t ng ng phù h p v i cơng th c c ng C21H20O11c a Các d ki n ph NMR c a h p ch t phù h p hoàn toàn v i d ki n ki n ph t ng ng c a quercetin-3-O-?-L-rhamnopyranozit (quercitrin) [1] 3.4.2 H p ch t 2: Palmatine Là ch t r n màu vàng, nhi t đ nóng ch y 204-205oC; ESI m/z: (positive) 352 [M]+ (C21H22O4N) Ph 1H-NMR: xu t hi n tín hi u singlet t i ? 7,01, 7,58, 8,75 9,73 c a proton c a vòng th m Hai proton vòng th m n m v trí octo v i đ c xác đ nh b i hai tín hi u doulet t i ? 8,06 8,00 v i h ng s t ng tác J = 9,5 Hz Ngồi cịn có hai nhóm metylen t i ? 3,28 (2H, t, J = 6,0 Hz) 4,94 (2H, t, J = 6,0 Hz) V i giá tr c a h ng s t ng tác b ng 6,0 Hz ch ng t hai nhóm metylen n m li n k Tín hi u t i ? 4, 94 ppm ch ng t nhóm metylen n i v i nguyên t nit , c ng nh tín hi u c ng h ng t i ? 9,73 (giá tr đ• d ch chuy n m nh v phía tr ng th p so v i tín hi u c a proton vịng th m khác) ch ng t cacbon CH= c ng đ c n i v i nguyên t nit [8] Ngồi ph 1H-NMR cịn xu t hi n tín hi u c a nhóm methoxy t i ? 3,92; 3,98; 06 4,20 Nh ng d ki n cho th y m t h p ch t alkanoid có khung Protober [8] Hồng Th Thanh Dung 22 K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p Hình 4.2.a C u trúc hoá h c c a Ph 13C-NMR: xu t hi n tín hi u c a 21 cacbon nhóm methoxyl đ c xác đ nh t i ? 57,59; 57,09; 56,66 62,55 17 tín hi u cịn l i thu c vào khung Protober Hai nhóm metylen nh t r t đ c tr ng cho khung đ c xác đ nh t i C-5 (? 27,77) C-6 (? 57,31) Các giá tr ph c a hoàn toàn phù h p v i giá tr ph t ng ng c a palmatin, m t h p ch t có m t nhi u lo i [8] Giá tr thu đ c ph ESI-MS v i s xu t hi n pic m/z: (positive) 352 [M]+ t ng ng v i công th c c ng C21H22O4N c a palmatin ây c ng l n đ u tiên h p ch t đ c tìm th y t c m t Hình 4.2.b Ph 1H-NMR 13C-NMR c a Hình 3.2.c Ph 13C-NMR ph DEPT c a Hình 3.2.d Ph ESI-MS c a 3.4.3 H p ch t 3: Daucosterol H p ch t nh n đ c d i d ng ch t b t không màu Ph 1H-NMR c a có d ng ph c a m t h p ch t steroid-glycozit xu t hi n tín hi u c a m t n i đôi th ba l n t i ? 5,35 (1H, br d, J = 5.0 Hz, H-6), tín hi u c a proton anome t i ? 4,30 (1H, d, J = 7,8 Hz, H-1’), tín hi u c a nhóm metyl n hình c a h p ch t có khung sterol t i ? 3,52 (1H, dd, J = 11,7, 5.1 Hz, H-3), 0,68 (3H, s, H-18), 1,00 (3H, s, H-19), 0,92 (3H, d, J = 6,5 Hz, H-21), 0,84 (3H, t, J = 7,6 Hz, H-26), 0,81 (3H, d, J = 6,8 Hz, H-28) 0,83 (3H, d, J = 7,3 Hz, H-29) Hình 3.3.a Ph 1H-NMR c a Hình 5.3.b Ph 13C-NMR c a3 Hình 5.3.c Ph 13C-NMR ph DEPT c a Hình 3.3.d C u trúc hố h c c a Hoàng Th Thanh Dung 23 K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p Ph 13C-NMR c a xu t hi n tín hi u c a 35 cacbon có 29 cacbon thu c khung sterol cacbon thu c vào phân t đ ng glucopyranose N i đơi t i v trí C-5/C-6 có giá tr đ d ch chuy n hoá h c n hình t i ? 140,4 (s, C-5) 121,1 nhóm hydroxyl t i C-3 đ c xác đ nh b i tín hi u t i ? 76,9 Phân t đ ng glucopyranose đ c xác đ nh b i tín hi u t i ? 100,7 (d, C-1’), 73,4 (d, C-2’), 76,7 (d, C-3’), 70,0 (d, C-4’), 76,6 (d, C-5’), 61,0 (t, C-6’) T t c gía tr ph NMR c a hồn tồn trùng kh p v i giá tr ph t ng ng c a h p ch t daucosterol, m t h p ch t steroid glycozit có m t nhi u loài th c v t.[9] Ngoài ra, d ki n ph NMR c a h p ch t đ c xác đ nh b ng ph 2D - NMR bao g m ph HSQC HMBC Trên ph HMBC t ng tác c a H-1’ v i C-3 đ• m t l n n a kh ng đ nh phân t đ ng n i v i C-3 b ng liên k t ete Hình 5.3.e Ph HSQC c a Hình 33.f Ph HMBC c a 3.4.4 T ng h p ch t đ• phân l p Quercitrin Palmatine Daucosterol K t lu n Sau th i gian nghiên c u khoá lu n t t nghi p v i đ tài: ’’Nghiên c u thành ph n hoá h c c a c m t ( Eriochloa ramosa)’’ tơi d• thu đ c nh ng k t qu sau: Phân l p h p ch t t d ch chi t metanol b ng ph ng pháp nh : S c ký l p m ng, s c ký l p m ng u ch , s c ký c t T d ch chi t metanol c a c m t, h p ch t tinh t đ c phân l p h p ch t: Quercetin 3-O-?-L-rhamnopyranoside (quercitrin), Palmatine, Daucosterol Trong l n đ u tiên h p ch t palmatine đ c tìm th y t c m t Hồng Th Thanh Dung 24 K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p C u trúc c a c c h p ch t: Quercetin 3-O-?-L-rhamnopyranoside (quercitrin), Palmatine, Daucosterol đ c xác đ nh nh vào ph ng pháp m nóng ch y, ph kh i l ng, đ c bi t ph ng pháp ph hi n đ i nh : ph c ng h ng t h t nhân 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT 90, DEPT 135, HSQC, HMBC, HMQC… Tài li u tham kh o Ti ng vi t [1] Huy Bích, ng Quang Trung, Bùi Xuân Ch ng, Nguy n Th ng Dong, Trung àm, Ph m V n Hi n, V Ng c L , Ph m Duy Mai, Ph m Kim M•n, ồn Th Nhu, Nguy n T p, Tr n Toàn (2003), Cây thu c đ ng v t làm thu c Vi t Nam, Quy n 1, nxb KHKT, tr – 492 [2] Phan T ng S n, Lê ng Doanh (1976, 1977), Th c hành hóa h c h u c , t p 1, 2; nxb KHKT Hà N i [3] Nguy n H u nh, ình R•ng (2003) Hoá h c h u c 1, Nxb GD Ti ng anh [4] Agrawal, P K., carbon-13 NMR of flavonoids, Elsevier Science Publishers B V 1989, pp 154-155, 334-335 [5] Bich D H., Trung D Q., Chuong B X., Dong N T., Dam D T., Hien P V., Lo V., N., Mai P D., Man P K., Nhu D T., Tap N., and Toan T., 2004 Medicinal plants and animals in Vietnam, Hanoi Science and Technology Publisher, 1st edition, vol I, pp 827-828 [6] Imperato, F., 1994 Luteolin 8-C-rhamnoside-7-O-rhamnoside from Pteris cretica Phytochemistry, 37, pp 589-590 [7] Kim D S., Chang Y J., Zedk U., Zhao P., Liu Y Q., and Yang C R., 1995 Dammarane saponins from Panax ginseng., Phytochemistry, 40(5), pp 1493-1497 Hoàng Th Thanh Dung 25 K30- Khoa hóa h c Tr ng đ i h c s ph m Hà N i Khóa lu n t t nghi p [8] Min, Y D., Yang, M C., Lee, K H., Kim, K R., Choi, S U., and Lee, K R., 2006 Protoberberine alkaloids and their reversal activity of P-gp expressed multidrug resistance (MDR) from the rhizome of Coptis japonica Makino Archives of Pharmacal Research, 29, pp 757-761 [9] Voutquenne L., Lavaud C., Massiot G., Sevenet T., Hadi H A., 1999 Cytotoxic polyisoprenes and glycosides of long-chain fatty alcohols from Dimocarpus fumatus Phytochemistry, 50, pp 63-69 Hoàng Th Thanh Dung 26 K30- Khoa hóa h c ... tơi ti n hành nghiên c u đ tài: “ Nghiên c u thành ph n hóa h c c a c m t ( Eriochloa ramosa) ’’ Cây c m t ( Eriochloa ramosa ) thu c h lúa ( proceae) m t đ i t ng nghiên c u m i Cây c m t m i... 13C-NMR (1 25 MHz, CD3OD) ? (ppm): 109.89 (C-1), 150.75 (C-2), 151.79 (C-3), 112.21 (C-4), 129.93 (C-4a), 27.77 (C-5), 57.31 (C-6), 146.22 (C-8), 123.13 (C-8a), 153.69 (C-9), 145.54 (C-10), 124.49 (C-11),... 158,53 (C-2), 136,24 (C-3), 179,65 (C-4), 163,21 (C5), 99,81 (C-6), 165,88 (C-7), 94,71 (C-8), 159,31 (C-9), 105,90 (C-10), 122,99 (C-1’), 116,37 (C-2’), 146,41 (C-3’), 149,79 (C-4’), 116,95 (C-5’)