Luận văn: Bước đầu nghiên cứu thành phần hóa học của lá cây đơn tướng quân họ myrtaceae ở Thái Nguyên

Luận văn: Bước đầu nghiên cứu thành phần hóa học của lá cây đơn tướng quân họ myrtaceae ở Thái Nguyên

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM  NÔNG THỊ LIỄU BƯỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CỦA LÁ CÂY ĐƠN TƯỚNG QUÂN ( SYZYGIUM FORMOSUM WALL), HỌ MYRTACEAE Ở THÁI NGUYÊN LUẬN VĂN THẠC SỸ HOÁ HỌC Thái Nguyên - 2009 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM  NÔNG THỊ LIỄU BƢỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CỦA LÁ CÂY ĐƠN TƢỚNG QUÂN ( SYZYGIUM FORMOSUM WALL), HỌ MYRTACEAE Ở THÁI NGUYÊN Chuyên ngành : Hoá học Hữu cơ Mã số : 60.44.27 LUẬN VĂN THẠC SỸ HOÁ HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS. PHẠM THỊ HỒNG MINH Thái Nguyên - 2009 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn LỜI CẢM ƠN Luận văn được hoàn thành tại phòng Hoạt chất Sinh học-Viện Hoá học thuộc Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam. Tôi xin chân thành bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS. TS Phạm Hoàng Ngọc, PGS. TS Phạm Văn Thỉnh, TS. Nguyễn Quyết Tiến, những người thầy đã tận tình hướng dẫn giúp đỡ tôi hoàn thành luận văn. Đăc biệt tôi xin trân trọng cảm ơn thầy trực tiếp hướng dẫn tôi TS.Phạm Thị Hồng Minh đã tận tình từng bước hướng dẫn và giúp đỡ tôi nhiều kiến thức bổ ích và những kinh nghiệm trong nghiên cứu khoa học. Xin chân thành cảm ơn các thầy cô trong khoa Hoá - Trường Đại học Sư phạm Thái Nguyên, các thầy của Trường Đại học Sư phạm Hà Nội và các thầy cô ở Phòng HCSH -Viện KH và CNVN đã tận tình giảng dạy, giúp đỡ và đưa ra nhiều ý kiến quý báu về mặt chuyên môn trong quá trình tôi nghiên cứu và hoàn thành luận văn. Xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu, khoa Sau Đại học Trưòng Đại học Sư phạm Thái Nguyên đã tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tôi trong suốt quá trình học tập và làm luận văn. Tác giả Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Các phương pháp sắc ký CC : Column Chromatography (Sắc ký cột) TLC : Thin-layer Chromatography (Sắc ký lớp mỏng) SKLM : Sắc ký lớp mỏng HPLC : High Performance Liquid Chromatography (Sắc ký lỏng hiệu năng cao) Các phương pháp phổ MS : Mass Spectrometry (Phổ khối lượng) EI-MS : Electron Impact Mass Spectrometry (Phổ khối va chạm electron) (Bắn phá bằng chùm nguyên tử tốc độ cao) FT-IR : Fourier Transform Infrared Spectroscopy (Phổ hồng ngoại biến đổi Fourie) NMR : Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân) 1 H-NMR : Proton Magnetic Resonance Spectrometry (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton) 13 C-NMR : Phổ cộng hưởng từ hạt nhân cacbon-13 DEPT : Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer HSQC : Heteronuclear Single - Quantum Coherence HMBC : Heteronuclear multiple - Bond Correlation Các lĩnh vực khác MIC : Minimum inhibitory concentration (Nồng độ ức chế tối thiểu) HIV : Human Immunodeficiency Virus Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1: Một số hợp chất acetophenon phân lập được từ chi Syzygium 5 Bảng 1.2: Một vài biflavon phân lập được từ chi Syzygium 9 Bảng 1.3: Một số hợp chất flavonoit 10 Bảng 1.4: Một số hợp chất flavonoit có chứa gốc đường 11 Bảng1.5: Các hợp chất chalcon 12 Bảng 1.6: Tritecpen khung ursan 15 Bảng 1.7: Một số hợp chất khác 17 Bảng 2.1: Khối lượng các cặn chiết thu được từ cây đơn tướng quân 30 Bảng 2.2: Kết quả định tính các nhóm chất trong lá cây Đơn tướng quân 32 Bảng 2.3: Kết quả thử hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định các cặn chiết lá cây Đơn tướng quân 35 Bảng 3.1: Độ dịch chuyển hóa học 13 C NMR của một số sterol trong S. formosum 45 Bảng 3.2: Các số liệu phổ 1 H và 13 C-NMR của SyE3 và 13 C-NMR của lupeol 49 Bảng 3.3: Số liệu phổ cacbon của Sy.E3 (lupeol) và phổ của Sy. E 26 (2,3õ-dihydroxy- lup-20(29)- en-28- oic acid) 60 Bảng 3.4: Số liệu phổ 1 H và 13 C-NMR của hợp chất Sy.E13/7, Sy.E56/22 và Sy.E18I/22 73 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn SƠ ĐỒ Trang Sơ đồ 2.1: Sơ đồ ngâm chiết mẫu cây Đơn tướng quân 29 ( Syzygium formosum Wall)……………………… DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Ảnh 2.1: Cây Đơn tướng quân (Syzygium formosum Wall) 24 Ảnh 2.2: Lá, hoa cây Đơn tướng quân (Syzygium formosumWall) 25 Hình 3.1: Phổ FT-IR chất Lupeol Sy.E 3/12 C 30 H 50 O 51 Hình 3.2: Phổ 1 H-NMRchất Lupeol Sy.E 3/12 C 30 H 50 O 52 Hình 3.3: Phổ 13 C-NMR chất Lupeol Sy.E 3/12 C 30 H 50 O 53 Hình 3.4: Phổ DEPT chất Lupeol Sy.E 3/12 C 30 H 50 O 54 Hình 3.5: Phổ ESI-MS chất Lupeol Sy.E 3/12 C 30 H 50 O 55 Hình 3.6: Phổ HSQC chất Lupeol Sy.E 3/12 C 30 H 50 O 56 Hình 3.7: Phổ HMBC chất Lupeol Sy.E 3/12 C 30 H 50 O 58 Hình 3.8: Phổ 1 H-NMR chất axit ursolic Sy.E 13/7 63 Hình 3.9: Phổ 13 C-NMR chất axit ursolic Sy.E 13/7 64 Hình 3.10: Phổ DEPT chất axit ursolic Sy.E 13/7 65 Hình 3.11: Phổ HSQC chất axit ursolic Sy.E 13/7 66 Hình 3.12: Phổ HMBC chất axit ursolic Sy.E 13/7 67 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn MỤC LỤC Trang Lời cam đoan Lời cảm ơn Danh mục chữ viết tắt dùng trong luận văn Danh mục các hình, bảng và sơ đồ Mở đầu Chương 1 Tổng quan 1 1.1. Khái quát về các thực vật chi Syzygium 3 1.2. Những nghiên cứu hóa thực vật về chi Syzygium 5 1.2.1. Các hợp chất acetophenon 5 1.2.2. Các biflorin 8 1.2.3. Các hợp chất flavonoit 9 1.2.3.1. Hợp chất flavanon 9 1.2.3.2. Các hợp chất flavonoit 10 1.2.4. Các hợp chất chalcon 12 1.2.5. Các hợp chất triterpenoid 13 1.2.5.1. Triterpen khung oleanan 13 1.2.5.2. Triterpen khung ursan 15 1.2.5.3. Triterpen khung lupan 1.2.6. Các hợp chất khác 16 17 1.3. Tình hình nghiên cứu và sử dụng các thực vật Syzygium 20 1.3.1. Những nghiên cứu về cây Syzygium formosum trong nước 20 1.3.2. Cây Syzygium formosum Wall (Đơn tướng quân, Trâm chụm ba) 21 1.3.2.1.Đặc điểm thực vật học, phân bố 21 1.3.2.2. Đặc điểm sinh thái 21 1.3.3. Những ứng dụng của cây Syzygium formosum Wall trong y học cổ truyền Việt Nam 22 Chương 2. Phần thực nghiệm 23 2.1. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu 23 2.1.1. Thu mẫu cây, xác định tên khoa học và phương pháp xử lý mẫu 23 2.1.2. Thử hoạt tính sinh học 26 2.1.3. Phương pháp nghiên cứu, phân lập các hợp chất từ dịch chiết 26 2.1.4. Phương pháp khảo sát cấu trúc hóa học các chất 27 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 2.2. Dụng cụ hóa chất và thiết bị nghiên cứu 27 2.3. Thu nhận các dịch chiết từ cây Syzygium formosum Wall 28 2.3.1. Thu nhận các dịch chiết 28 2.3.2. Khảo sát định tính các dịch chiết 30 2.3.3. Thử hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định 33 2.4. Phân lập và tinh chế các chất 35 2.4.1. Cặn dịch chiết n – hexan 35 2.4.2. Cặn dịch chiết etylaxetat 37 Chương 3. Thảo luận kết quả nghiên cứu 43 3.1. Phát hiện các nhóm chất và thử hoạt tính sinh học dịch chiết của cây Syzygium formosum Wall 43 3.2. Phân lập và nhận dạng các chất từ dịch chiết 44 Kết luận 77 Danh mục các công trình đã công bố có liên quan đến luận văn Tài liệu tham khảo Phụ lục 78 79 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 1 MỞ ĐẦU Nền y dược học cổ truyền ở Việt Nam đã có từ bao đời nay, hiện nay vẫn được coi là một hệ thống kho báu duy nhất có vai trò và tiềm năng to lớn trong sự nghiệp bảo vệ sức khoẻ và phòng chống các loại dịch bệnh phục vụ cho nhân dân. Từ nhiều thế kỷ nay, những chế phẩm y học cổ truyền được coi như một kho tàng dược liệu quí báu. Đảng và Nhà nước đã xây dựng một chiến lược phát triển y học cổ truyền trong đó y tế phối hợp với các ngành khoa học tự nhiên, các tổ chức xã hội nghiên cứu, kế thừa, bảo tồn và phát triển nhằm xây dựng nền y dược học Việt Nam ngày càng khoa học hiện đại nhằm nâng cao tính khoa học và phát huy y học cổ truyền trong công tác chăm sóc sức khoẻ nhân dân. Việt Nam nằm trong vùng khí hậu nhiệt đới nên được thừa hưởng nguồn thiên nhiên vô cùng phong phú và đa dạng sinh học với nhiều loài dược liệu quí. Các hợp chất thiên nhiên thể hiện hoạt tính sinh học rất phong phú và là một trong những định hướng để con người có thể tổng hợp tìm ra nhiều loại thuốc mới chống lại các bệnh hiểm nghèo, các chất bảo quản thực phẩm cũng như các chế phẩm phục vụ nông nghiệp có hoạt tính cao mà không ảnh hưởng đến môi sinh. Việc sử dụng các loại thuốc thảo dược theo cách cổ truyền hay từ các hợp chất nguồn gốc tự nhiên có xu hướng ngày càng tăng đã chiếm một vị trí quan trọng trong nền y học. Chế phẩm thảo dược dù chỉ có một loại dược liệu nhưng lại là hỗn hợp của nhiều hợp chất khác nhau và trong mọi trường hợp hầu hết đều chưa xác định rõ hoạt chất của từng chất. Vì vậy, những bài thuốc sử dụng thảo dược là đối tượng để cho các nhà khoa học nghiên cứu một cách đầy đủ về bản chất các hoạt chất có trong cây cỏ thiên nhiên. Từ đó định Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 2 hướng cho việc nghiên cứu, chiết xuất để tìm ra các loại thuốc mới hay bằng con đường tổng hợp để tạo ra những chất có hoạt chất trong việc chữa trị nhiều loại bệnh. Chính vì vậy việc nghiên cứu thành phần hóa học từ những cây cỏ thiên nhiên có một ý nghĩa khoa học và thực tiễn cao. Gần đây, việc nghiên cứu và chiết xuất thành công axit shikimic từ cây Hồi Lạng sơn (Illicium verum), đó là nguyên liệu chính để sản xuất tamiflu (oseltamivir photphat) làm thuốc trị dịch cúm gia cầm H5N1, hay như chè Mallotus từ cây Ngũ gia bì (Mallotus apellta) trong việc hỗ trợ và điều trị ung thư ở Việt Nam… Những kết quả nói trên có phần đóng góp xứng đáng của các nhà khoa học thuộc nhiều chuyên ngành như sinh học, hoá học, công nghệ học v.v . Tiếp tục theo hướng nghiên cứu nói trên, cây Đơn tướng quân có tên khoa học Syzygium formosum Wall họ Myrtaceae thuộc loại thực vật của Việt nam, lại là cây thuốc dân gian nên được chọn làm đề tài nghiên cứu cho luận văn này. Cây Đơn tướng quân mới được nghiên cứu sơ bộ về tác dụng dược học cho biết lá cây có tác dụng kháng sinh mạnh. Theo kinh nghiệm dân gian lá cây có tác dụng tiêu độc, chống dị ứng [4], chữa mẩn ngứa, các chứng viêm họng cấp và mạn, chữa viêm bàng quang [2]. Nhằm đóng góp một phần hiểu biết thêm về thành phần hóa học của cây thuốc dân gian, đề tài: “ Bƣớc đầu nghiên cứu thành phần hoá học của lá cây Đơn tƣớng quân ( Syzygium formosum Wall) họ Myrtaceae ở Thái Nguyên” là nội dung chính của luận văn. [...]... Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 24 Ảnh 2.1: cây đơn tướng quân Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 25 Ảnh 2.2: lá và hoa cây đơn tướng quân Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 26 Bộ phận mẫu được thái nhỏ đem sấy ở nhiệt độ 110 0C trong 15 phút để diệt men, sau đó hong khô ở nơi thoáng mát hoặc sấy ở nhiệt... sinh của lá cây, nhưng hiểu biết về thành phần hoá học của cây này hầu như chưa được nghiên cứu đến Nhiệm vụ của luận văn là phân lập và xác định cấu trúc hoá học của các chất phân lập được trong lá cây Đơn tướng quân (Syzygium formosum Wall) bằng các phương pháp vật lý, hoá học hiện đại 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 2.1.1 Thu mẫu cây, xác định tên khoa học và phương pháp xử lý mẫu Nguyên liệu để nghiên cứu. .. [13] 1.3.1 Những nghiên cứu về cây Syzygium formosum Wall trong nước Cây đơn tướng quân (Syzygium formosum Wall) là loài thực vật có ở Việt Nam, nhân dân hay dùng lá cây này để chữa một số bệnh Song cho đến nay chưa thấy có tài liệu nào công bố về thành phần hóa học của cây Đơn tướng quân ngoại trừ công bố tác dụng kháng khuẩn của lá cây này Những nghiên cứu sơ bộ đã cho biết trong lá cây có 2-3% tinh... cứu là lá cây Đơn tướng quân Mẫu cây tươi được thu hái vào tháng 2/2009 tại Thái Nguyên được rửa sạch Mẫu cây đem nghiên cứu hoá thực vật đã được TS Ninh Khắc Bản (Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật - Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam) giám định tên khoa học là Syzygium formosum Wall họ Sim Myrtaceae Ngoài ra còn có tên gọi theo địa phương là cây trâm chụm ba, cây rau chiếc Số hóa bởi Trung tâm Học. .. dụng dược lý của cây như: vỏ và rễ cây không có tính kháng sinh, nhưng lá tươi, lá già hoặc lá non, lá úa, lá rụng và nụ thì đều có tính kháng sinh mạnh Mùa đông kháng sinh tập trung Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 21 nhiều ở lá Tính kháng sinh của lá tươi và lá khô không bị phá hủy cũng như khi phơi ở ngoài nắng, để khô trong râm , khi sấy khô ở 70 oC hay... cách thủy ở 100oC trong nửa giờ Dịch chiết từ lá cây đơn tướng quân có tác dụng với vi khuẩn Gram (+), nhưng không có tác dụng với vi khuẩn Gram (-).[3] 1.3.2 Cây Syzygium formosum Wall (Đơn tướng quân, cây Trâm chụm ba,trâm đẹp) 1.3.2.1 Đặc điểm thực vật học, phân bố Cây Đơn tướng quân có tên khoa học là Syzygium formosum Wall thuộc họ Mytaceae Ngoài ra cây còn tên khác theo địa phương là cây Trâm... Những ứng dụng của cây Syzygiumformosum Wall Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 22 trong y học cổ truyền Việt Nam Cây Đơn tướng quân (Syzygium formosum Wall) có nhiều tác dụng trong việc điều trị bệnh Nhân dân thường thu hái lá bánh tẻ quanh năm Lá được phơi khô hay dùng lá tươi để dùng dần [ 4] Theo kinh nghiệm dân gian, nhân dân hay dùng lá sắc lấy nước... viêm họng đỏ, viêm phế quản cấp và mãn tính [4], và chữa viêm bàng quang [2] Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 23 CHƯƠNG 2 PHẦN THỰC NGHIỆM Cây Đơn tướng quân (Syzygium formosum Wall) còn gọi là cây chụm ba là cây thuốc được sử dụng trong y học dân gian Việt Nam để chữa trị một số bệnh mẩn ngứa, mề đay, dị ứng Ngoài ra còn được dùng để trị các chứng viêm họng... HO O 1.3 Tình hình nghiên cứu và sử dụng các thực vật Syzygium Ở mục 1.2 đề cập đến những nghiên cứu hoá thực vật của chi Syzygium đã chỉ ra tính đa dạng về thành phần hoá học, bao gồm các flavonoit, tritecpenoit, chancol với cấu trúc rất phong phú và đa dạng Từ loài S Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 20 formosanum là thực vật đặc hữu ở Đài Loan người ta... thuốc sát trùng để rửa mụn nhọt, lở loét và ghẻ lở Gần đây Viện đông y áp dụng vối chữa một số bệnh về đường ruột, viêm họng, bệnh ngoài da [4] Lá cây Đơn tướng quân Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 5 (S formosum) vẫn được nhân dân sắc nước uống để chữa mẩn ngứa, mề đay, dị ứng [4] Dùng ngoài để tắm ghẻ, có thể dùng chữa viêm họng đỏ, viêm phế quản cấp và . BƢỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CỦA LÁ CÂY ĐƠN TƢỚNG QUÂN ( SYZYGIUM FORMOSUM WALL), HỌ MYRTACEAE Ở THÁI NGUYÊN Chuyên ngành : Hoá học. Bƣớc đầu nghiên cứu thành phần hoá học của lá cây Đơn tƣớng quân ( Syzygium formosum Wall) họ Myrtaceae ở Thái Nguyên là nội dung chính của luận văn.