Kết quả chẩn đoán bệnh ne ngọn gây hại thuốc lá tại Tây Ninh

Trong năm 2019, bệnh ne ngọn lại bùng phát mạnh và gây hại nặng ở vùng trồng thuốc lá Tây Ninh và làm tiêu hủy hoàn toàn trên 15 ha. Do vậy, việc xác định chính xác đối tượng gây bệnh có vai trò quan trọng trong trồng trọt và phòng trừ bệnh.

Kết nghiên cứu Khoa học BVTV - Số 5/2019 bảo vệ thực vật, Khoa Nông nghiệp Sinh học ứng dụng, Trường Đại học Cần Thơ 82 trang Nguyễn Thị Mỹ Ngân, 2014 Khảo sát khả phòng trị xạ khuẩn vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzae Luận văn tốt nghiệp cao học ngành bảo vệ thực vật Khoa Nông nghiệp Sinh học ứng dụng, trường Đại học Cần Thơ 112 trang Huỳnh Hào Quang, 2018 Khảo sát số chế đối kháng với vi khuẩn Xanthomonas campestris pv citri gây bệnh loét cam, quýt chủng xạ khuẩn triển vọng Luận văn tốt nghiệp cao học ngành bảo vệ thực vật, Khoa Nông nghiệp Sinh học ứng dụng, trường Đại học Cần Thơ 58 trang Vũ Triệu Mân Lê Lương Tề, 1998 Giáo trình bệnh nông nghiệp Nhà Xuất Nông nghiệp Hà Nội 10 Erturul, S., Dửnmez, G., and Takaỗ, S., 2007 Isolation of lipase producing Bacillus sp from olive mill wastewater and improving its enzyme activity Journal of Hazardous Materials, 149(3), 720-724 11 Hsu, S., Lockwood, J., 1975 Powered chitin agar as a selective medium for enumeration of actinomycetes in water and soil Apllied microbiology, 29 (3), 422-426 12 Lam, K.S, 2006 Discovery of novel metabolites from marine Actinomycetes Current Opinion in Microbiology, 9: 245–251 13 Mitra, P., and P Chakrabartty, (2005) An extracellular protease with depilation activity from Streptomyces nogalator Journal of Scientific and Industrial Research, 64 (12), 978 14 Palaniyandi, S A., S H Yang, L Zhang and J W Suh, 2013 Effects of actinobacteria on plant disease suppression and growth promotion Appl Microbiol Biotechnol 97: 9621 - 9636 15 Yan-Min, V., T Da Quun, T Shi Min and Z Ding, 2000 The antagonism of 26 strains Streptomyces sp against several vegetables pathogens Hebaei Agric Univ., 23: 65 - 68 16 Zamanian S., Shahidi Bonjar G.H., Saadoun I., 2005 First report of antibacterial properties of a new (strain 101) against Erwinia carotovora from Iran Biotechnology, 4: 114-120 Phản biện: TS Nguyễn Huy Chung KẾT QUẢ CHẨN ĐOÁN BỆNH NE NGỌN GÂY HẠI THUỐC LÁ TẠI TÂY NINH Results of Diagnotic Curl Leaves and Crooked Tip to The Side Disease on Tobacco Plant in Tay Ninh Province Nguyễn Văn Chín Hà Viết Cƣờng Ngày nhận bài: 15.8.2019 Ngày chấp nhận: 20.9.2019 Abstract In 2019, Tobacco instutute collected 07 disease samples with curl leaves and crooked tip to the side symptom in growing tobacco Tay Ninh to diagnose in Research centre for Tropical plant pathology – Vietnam national university of Agriculture Results of diagnosis determined two virus species that cause the same disease symptom on tobacco plant, including Tomato yellow leaf curl Kanchanaburi virus (TYLCkaV) and Pepper yellow leaf curl Indonesia virus (PepYLCIDV) They belong to Begomovirus genus and are spread by insect - Bemisia tabaci Gennadius Pepper yellow leaf curl Indonesia virus is a virus species that is detected the first times in Vietnam Keywords: Tobacco, virus, Begomovirus, Tomato Viện Thuốc yellow leaf curl Kanchanaburi virus (TYLCkaV) and Học Viện Nông nghiệp Việt Nam Pepper yellow leaf curl Indonesia virus (PepYLCIDV) 35 Kết nghiên cứu Khoa học BVTV - Số 5/2019 ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh ne đối tượng gây hại chủ yếu vùng trồng thuốc phía Nam thời gian gần Những năm 2001 – 2004, chúng gây hại nặng 1000 thuốc Tây Ninh làm thiệt hại khoảng 1500 – 1700 nguyên liệu với trị giá 11 tỷ đồng (Nguyễn Văn Biếu, 2003); Năm 2006 – 2007, bệnh tiếp tục gây hại mạnh làm giảm khoảng 60% diện tích trồng thuốc Tây Ninh so với trước năm 2001 Một số vùng trồng chủ lực gần bị xóa sổ hồn tồn huyện Gò Dầu, Dương Minh Châu phần huyện Trảng Bàng (Đoàn Nguyễn Kiến Trúc, 2010) Các kết chẩn đoán bệnh ne Tây Ninh giai đoạn 2001 - 2014 có sai khác đối tượng gây hại Theo kết chẩn đốn Nguyễn Ngọc Bích (2003), bệnh ne gây hại thuốc Tây Ninh Tomato spotted wilt virus (TSWV) gây ra, thuộc chi Tospovirus Tuy nhiên, lây nhiễm trở lại, hầu hết lây nhiễm không biểu triệu chứng bệnh; Đào Đức Thức (2013), bệnh ne Begomovirus gây khơng tìm thấy virus TSWV mẫu bệnh thu thập Tây Ninh; Lê Văn Sơn (2014), 179 mẫu bệnh ne thu thập Tây Ninh, Gia Lai, Đắk Lắk Bình Thuận chẩn đốn PCR nhiễm Begomovirus mà khơng tìm thấy virus Cặp mồi TSWV Trong đó, vùng Gia Lai nhiễm loài virus Ageratum yellow leaf curl virus đối tượng gây hại chủ yếu; Tây Ninh nhiễm loài Tomato yellow leaf curl Kanchanaburi virus xuất phổ biến Trong năm 2019, bệnh ne lại bùng phát mạnh gây hại nặng vùng trồng thuốc Tây Ninh làm tiêu hủy hoàn toàn 15 Do vậy, việc xác định xác đối tượng gây bệnh có vai trò quan trọng trồng trọt phòng trừ bệnh VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU - Cây bệnh ne thu thập huyện Tân Biên – tỉnh Tây Ninh nơi bị nhiễm bệnh nặng Chúng đánh gốc đem trồng nhà lưới Trung tâm Bệnh nhiệt đới - Học Viện Nông nghiệp Việt Nam làm nguồn bệnh chẩn đoán - Chiết tác AND tổng số từ mô phương pháp CTAB (Cetyl trimethyl ammonium bromide) theo mô tả Doyle & Doyle (1987); Chiết tách RNA tổng số kít Trizole Reagents theo hướng dẫn nhà sản xuất Invitrogen, Mỹ Sau kiểm tra điện di gel agarose - Cặp mồi phản ứng sử dụng để phát virus giải trình tự gen Mục đích Kích thước (bp) Tham khảo TYKan-A-F1 TYKan-A-R1 Phát đặc hiệu DNA-A TYLCKanV 698 TTNCBC Nhiệt đới, chưa công bố TYKan-B-F1 TYKan-B-R2 Phát đặc hiệu DNA-B TYLCKanV 402 TTNCBC Nhiệt đới, chưa công bố Krusty Homer Phát đặc hiệu DNA-A Begomovirus ~ 600 Revill et al., 2003 BegoA-For1 BegoA-Rev1 Phát đặc hiệu DNA-A Begomovirus ~ 1200 Hà et al., 2006 Tospo-F3 Tospo-R3 Phát đặc hiệu gen N Tospovirus nhóm I II ~ 600 TTNCBC Nhiệt đới, chưa công bố - Giải trình tự phân tích trình tự gen: Sản phẩm PCR, RT-PCR sau tinh chiết từ gel agarose giải trình tự trực tiếp mồi PCR, RT-PCR (BegoA-For1 BegoA-Rev1) 36 Trình tự gen phân tích phần mềm thơng dụng như: BLAST, CLUSTAL 2.0, MEGA7.0 Kết nghiên cứu Khoa học KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết chạy PCR Năm 2019, tiến hành thu thập BVTV - Số 5/2019 mẫu bệnh ne gây hại thuốc huyện Tân Biên, tỉnh Tây Ninh với triệu chứng bị trùn, vẹo sang bên, mép uốn cong xuống phía dưới, thân khơng có đốm chết hoại Hình Triệu chứng bệnh ne gây hại thuốc Tây Ninh Kết điều tra vùng trồng thuốc Tây Ninh cho thấy bệnh ne gây hại nặng khu vực huyện Tân Biên khu vực khác bị nhiễm bệnh nhẹ Nguyên nhân bệnh gây hại nặng Tân Biên khu vực trồng xen thuốc mì (cây sắn) Vì hầu hết mì bị nhiễm bệnh khảm nặng Sri Lanka Cassava mosaic virus gây Virus thuộc chi Begomovirus truyền qua côn trùng môi giới bọ phấn trắng Các khu vực khác khơng trồng xen với mì bệnh gây hại không đáng kể Dựa kết điều tra triệu chứng xoăn (hình 1) mẫu bệnh thuốc thu thập Tây Ninh nghi ngờ Begomovirus mà khơng phải Tospovirus Vì nay, Begomovirus xuất phổ biến họ cà miền Nam (cà chua, ớt, cà pháo, cà bát) xác định Tomato yellow leaf curl Kanchanaburi virus (TYLKaV) gây Do đó, để xác định bệnh ne nhiễm Begomovirus hay Tospovirus, tiến hành kiểm tra PCR mồi đặc hiệu TYLKaV, Begomovirus Tospovirus A 37 Kết nghiên cứu Khoa học BVTV - Số 5/2019 B C Hình PCR phát Begomovirus TYLCKanV mẫu bệnh Danh tính mẫu đƣợc trình bày Bảng M thang DNA kb (GenRuler kb, Fermentas) Các mẫu không phản ứng A B đƣợc chiết lại DNA thực C Hình RT-PCR phát Tospovirrus thuốc M thang DNA kb (GenRuler kb, Fermentas) Băng sản phẩm đƣợc mũi tên 38 Kết nghiên cứu Khoa học BVTV - Số 5/2019 Bảng Phát Begomovirus TYLCKaV, Tospovirus PCR dùng mồi đặc hiệu mồi chung Tospo-F3 STT Mẫu TospoR3 TYKa-A-F1 TYKa-B-F1 Krusty & BegoAfor1 & Giải trình & -R1 & -R2 Homer BegoA-Rev1 tự TN1 - + + + + + TN2 - + + + + + TN3 - - - + + + TN4 - + + + Không kiểm tra + + + Không kiểm tra TN5 (noname) TN7 - + + + Không kiểm tra TN10 - - - + + + Ghi chú: +: phản ứng dương tính; -: Phản ứng âm tính Kết kiểm tra PCR mẫu bệnh ne Tây Ninh cho thấy: - Tất mẫu thuốc có triệu chứng ne thu thập Tây Ninh nhiễm Begomovirus dương tính với cặp mồi Krusty/Homer BegoA-For1/BegoA-Rev1 (bảng hình 1) Trong đó: + Có 05 mẫu bệnh gồm TN1, TN2, TN4, TN5 TN7 phản ứng dương tính với cặp mồi đặc hiệu thành phần DNA-A DNA-B TYLCKaV + Hai mẫu TN3, TN10 phản ứng âm tính với cặp mồi đặc hiệu thành phần DNA-A DNA-B TYLCKaV (do hình thành băng khơng đặc hiệu), mẫu nhiễm loại Begomovirus khác - Các mẫu bệnh ne thu thập Tây Ninh khơng nhiễm Tospovirus phản ứng dương tính với cặp mồi Tospo –F3/R3 phản ứng PCR với cặp mồi đặc hiệu DNA-A Begomovirus BegoA-For1/BegoA-Rev1 thể hình 3.2 Định danh Begomovirus giải trình tự gen Sản phẩm PCR tinh chiết từ agarose gel giải trình tự trực tiếp Sau loại bỏ trình tự nhiễu đầu, trình tự mẫu TN1, TN2, TN3 TN10 thu sau: >TN1 (976 bp) - Kết chạy PCR giải trình tự Dựa kết PCR, mẫu chọn để giải trình tự TN1, TN2, TN3 TN10 Kết Hình PCR nhân đoạn DNA-A mẫu thuốc để giải trình tự M thang DNA 1,2 kb (GenRuler kb, Fermentas) ATGTATCACACACCGGCAGGTGTTGTGTGTGTCTGATGTTACTAGAGGCAACGGTATTACTCA TAGAATAGGTAAAAGATTTTGCGTCAAGTCTGTTTATGTTATGGGCAAAATCTGGATGGATGATAA TATTAAATTGAAGAATCACACCAATACTGTTATGTTTTGGCTTGTTCGTGACAGAAGACCTGTTACA 39 Kết nghiên cứu Khoa học BVTV - Số 5/2019 ACCCCATATGGTTTCGGAGAGTTATTCAACATGTATGACAACGAGCCCAGTACTGCAACAATAAA GAACGATCTCAGAGATCGTGTGCAAGTGCTTCATCGTTTCTCAGCATCATTAACCGGTGGTCAAT ATGCCAGCAAGGAACAAGCAGTTATTAAGAAATTTTTTAGAGTTAATAATTATGTTGTCTATAACCA CCAAGAAGCTGCTAAGTATGAAAATCACACTGAGAATGCTTTGTTATTGTATATGGCATGTACTCA TGCCTCTAATCCTGTGTATGCAACTCTTAAGATTAGAATCTACTTTTATGACAATGTCACCAATTAA TAAATATTGAATTTTATTATATGACAATGGTCTACATAATTTGTATTGTCCAATACATCCCATAGTAC ATAATCAGCTGCGCGTATTACATTGTTAATTGAAATTACACCTAAGTTATTCAAATATCTCATACAT TGATTCTTAAACACTCTTAAGAAATGCCATGTCTGAGGTTGTAAAGGAGTCCAAATCCGGAAGATC ATGAAACACTTGTGAATCCCCAACGCCTTCCTGAGGTTGTGGTTGAATTGGATCTGTATCTCCAAA TAGTCGATGTTGTCGTTGAAGGGTCTGCTGTTGTGCTTCAGCACCTTGAAATACAGGGGATTTGG AACCTCCCACATATAGACGCCATTCTGCGCTTGAGCTGCAGTAATGGTTTCCCCTGTGCGTAAAT CCATACTTATGACAATTAATGCTTACGTAATACGAACAGCCACAGTCTAAGTC >TN2 (976 bp) ATGTATCACACACCGGCAGGTGTTGTGTGTGTCTGATGTTACTAGAGGCAACGGTATTACTCA TAGAATAGGTAAAAGATTTTGCGTCAAGTCTGTTTATGTTATGGGCAAAATCTGGATGGATGATAA TATTAAATTGAAGAATCACACCAATACTGTTATGTTTTGGCTTGTTCGTGACAGAAGACCTGTTACA ACCCCATATGGTTTCGGAGAGTTATTCAACATGTATGACAACGAGCCCAGTACTGCAACAATAAA GAACGATCTCAGAGATCGTGTGCAAGTGCTTCATCGTTTCTCAGCATCATTAACCGGTGGTCAAT ATGCCAGCAAGGAACAAGCAGTTATTAAGAAATTTTTTAGAGTTAATAATTATGTTGTCTATAACCA CCAAGAAGCTGCTAAGTATGAAAATCACACTGAGAATGCTTTGTTATTGTATATGGCATGTACTCA TGCCTCTAATCCTGTGTATGCAACTCTTAAGATTAGAATCTACTTTTATGACAATGTCACCAATTAA TAAATATTGAATTTTATTATATGACAATGGTCTACATAATTTGTATTGTCCAATACATCCCATAGTAC ATAATCAGCTGCGCGTATTACATTGTTAATTGAAATTACACCTAAGTTATTCAAATATCTCATACAT TGATTCTTAAACACTCTTAAGAAATGCCATGTCTGAGGTTGTAAAGGAGTCCAAATCCGGAAGATC ATGAAACACTTGTGAATCCCCAACGCCTTCCTGAGGTTGTGGTTGAATTGGATCTGTATCTCCAAA TAGTCGATGTTGTCGTTGAAGGGTCTGCTGTTGTGCTTCAGCACCTTGAAATACAGGGGATTTGG AACCTCCCACATATAGACGCCATTCTGCGCTTGAGCTGCAGTAATGGTTTCCCCTGTGCGTAAAT CCATACTTATGACAATTAATGCTTACGTAATACGAACAGCCACAGTCTAAGTC >TN3 (967 bp) ACTGGGAAGGCCCTTTGCGTTTCCGATGTCACAAGAGGTAATGGTATTACGCACAGAGTTGGT AAAAGATTCTGTGTGAAATCTGTATATATTATAGGCAAAGTTTGGATGGACGAAAACATCAAGTCG AAGAACCACACTAACAATGTCATGTTCTGGCTGGTTCGTGACCGGCGACCTGTTACTACGCCGTA TGGCTTCGGAGAGTTGTTCAACATGTATGATAATGAACCCAGTACAGCAACTATCAAGAACGATCT TCGTGATCGTGTGCAGGTGTTACATCGTTTTTCAGCTACAGTCACTGGTGGTCAGTACGCAAGCA AGGAACAAGCAATCGTGAAGAGATTTTTTAGAGTTAACAACTATGTTGTTTATAATCATCAGGAAG CAGCAAAATATGAAAATCACACTGAAAATGCATTATTGTTGTATATGGCATGTACTCATGCATCTAA TCCTGTATACGCGACATTGAAAATTCGCATTTACTTCTACGACAATGTAACAAATTAATAAAGTTTG AATTTTATTATGTGCAACTGCTTTGCGTACACTGTCTGTTCAAGTACATCCCACAAAACACAATTTA CTGCTCTAATTACATTGTTTATTGACACGACGCCTAAATTGGACAGATATCTAAGTACATTGTTCTT AAATACTCTTAAGAAATGCCAAATCTGAGGACGTAAACGAGTCCAGATGTGGAAGATTAAAAAACA 40 Kết nghiên cứu Khoa học BVTV - Số 5/2019 CTTGTGAATCCCCAGCGCTTTCCTCAGGTTGTGGTTGAACTGGATTTGTACTTCCATGTAGTCCAT GTCGGTGTTGTACCCTCTGCTGCTGTGCCTCAGCACCTTGAAATAGAGGGGATTGGGAACCTTC CAAATATAGACGCCATTCTGCGCCTGAGCTGCAGTGATGTACTCCCCGGTGCGAAAATCCATATC CATGACAGTTAATACTGAGGTAATATGAGCAGCCGCAGTCTAAGTCA >TN10 (967 bp) ACTGGGAAGGCCCTTTGCGTTTCCGATGTCACAAGAGGTAATGGTATTACGCACAGAGTTGGT AAAAGATTCTGTGTGAAATCTGTATATATTATAGGCAAAGTTTGGATGGACGAAAACATCAAGTCG AAGAACCACACTAACAATGTCATGTTCTGGCTGGTTCGTGACCGGCGACCTGTTACTACGCCGTA TGGCTTCGGAGAGTTGTTCAACATGTATGATAATGAACCCAGTACAGCAACTATCAAGAACGATCT TCGTGATCGTGTGCAGGTGTTACATCGTTTTTCAGCTACAGTCACTGGTGGTCAGTACGCAAGCA AGGAACAAGCAATCGTGAAGAGATTTTTTAGAGTTAACAACTATGTTGTTTATAATCATCAGGAAG CAGCAAAATATGAAAATCACACTGAAAATGCATTATTGTTGTATATGGCATGTACTCATGCATCTAA TCCTGTATACGCGACATTGAAAATTCGCATTTACTTCTACGACAATGTAACAAATTAATAAAGTTTG AATTTTATTATGTGCAACTGCTTTGCGTACACTGTCTGTTCAAGTACATCCCACAAAACACAATTTA CTGCTCTAATTACATTGTTTATTGACACGACGCCTAAATTGGACAGATATCTAAGTACATTGTTCTT AAATACTCTTAAGAAATGCCAAATCTGAGGACGTAAACGAGTCCAGATGTGGAAGATTAAAAAACA CTTGTGAATCCCCAGCGCTTTCCTCAGGTTGTGGTTGAACTGGATTTGTACTTCCATGTAGTCCAT GTCGGTGTTGTACCCTCTGCTGCTGTGCCTCAGCACCTTGAAATAGAGGGGATTGGGAACCTTC CAAATATAGACGCCATTCTGCGCCTGAGCTGCAGTGATGTACTCCCCGGTGCGAAAATCCATATC CATGACAGTTAATACTGAGGTAATATGAGCAGCCGCAGTCTAAGTCA - Kết phân tích trình tự phả hệ Sử dụng phần mềm BLAST, chúng tơi tìm kiếm chuỗi gần gũi Genbank mẫu virus TN1, TN2, TN3 TN10 dựa trình tự thu Kết tìm kiếm trình bày bảng cho thấy: + Hai mẫu virus TN1 TN2 đồng trình tự 100% với đồng trình tự từ 94,8 đến 99,6 % Tomato yellow leaf curl Kanchanaburi virus (TYLCKaV) + Hai mẫu virus TN3 TN10 đồng trình tự 100% với đồng trình tự từ 96,4 đến 99,3% Pepper yellow leaf curl Indonesia virus (PepYLCIDV) Phân tích phả hệ bảng hình mẫu TN1và TN2 phân nhóm chặt cụm lồi TYLCKaV; mẫu TN3 TN10 phân nhóm chặt cụm lồi PepYLCIDV Bảng Các Begomovirus gần gũi GenBank mẫu virus thu thập thuốc Tây Ninh 2019 qua tìm kiếm Blast (chỉ trình bày mẫu virus gần gũi nhất) Mẫu bệnh Virus Tomato yellow leaf curl Kanchanaburi TN1, Tomato yellow leaf curl TN2 Kanchanaburi Tomato yellow leaf curl Kanchanaburi Ký chủ Quốc Gia Mã GenBank Phần trăm Mức đồng đoạn so trình sánh (%) tự Eggplant Việt Nam KU569608 100 99,59 Tomato Cambodia KR073094 100 99,59 Eggplant Việt Nam DQ641702 100 98,57 41 Kết nghiên cứu Khoa học Mẫu bệnh BVTV - Số 5/2019 Ký chủ Virus Tomato yellow leaf curl Kanchanaburi Tomato yellow leaf curl Kanchanaburi sánh (%) tự 98,46 Tomato Thái Lan AF511529 100 94,78 Ớt Indonesia LC051114 100 99,28 Ớt Indonesia LC051115 100 99,17 Ageratum Indonesia AB267838 100 97,0 Ớt Indonesia LC051113 100 96,9 Indonesia DQ083765 100 96,38 Pepper yellow leaf curl Indonesia virus Indonesia virus trình 100 Indonesia virus Pepper yellow leaf curl đoạn so DQ169054 Pepper yellow leaf curl TN10 Indonesia virus Mức đồng Việt Nam Indonesia virus Pepper yellow leaf curl GenBank Phần trăm Tomato Pepper yellow leaf curl TN3, Quốc Gia Mã Cà chua Bảng Các Begomovirus GenBank đƣợc sử dụng để phân tích phả hệ với mẫu TN1, TN2, TN3 TN10 STT Tên virus Viết tắt Mã gen bank Nguồn gốc Genome Abutilon mosaic virus AbMV X15983 Mỹ B African cassava mosaic virus ACMV AF126802 Uganda B Ageratum yellow vein virus AYVV X74516 Singapore M Bean dwarf mosaic virus BDMV M88179 Mỹ B Bean golden mosaic virus BGMV 88686 Brazil B Clerodendrum golden mosaic virus ClGMV DQ641692 Việt Nam B Corchorus golden mosaic virus CoGMV DQ641688 Việt Nam B Corchorus yellow vein virus CoYVV AY727903 Việt Nam B Erectites yellow mosaic virus ErYMV DQ641698 Việt Nam B 10 Indian cassava mosaic virus ICMV AJ314739 Ân Độ B 42 Kết nghiên cứu Khoa học STT Tên virus BVTV - Số 5/2019 Viết tắt Mã gen bank Nguồn gốc Genome 11 Ipomoea yellow vein virus IYVV AJ132548 M 12 Kudzu mosaic virus KuMV DQ641690 Việt Nam B 13 Loofa yellow mosaic virus LYMV AF509739 Việt Nam B 14 Mimosa yellow leaf curl virus MiYLCV DQ641695 Việt Nam M 15 Mungbean yellow mosaic India virus MYMIV AY271893 Ấn Độ B 16 Mungbean yellow mosaic virus MYMV AJ132575 Ấn Độ B 17 Papaya leaf curl China virus PaLCuCNV DQ641700 Việt Nam M 18 Soybean crinkle leaf virus SbCLV AB050781 Japan M 19 Squash leaf curl China virus SLCCNV AF509743 Việt Nam B 20 Sweet potato leaf curl virus SPLCV AF104036 Mỹ M 21 Tobacco leaf curl Yunnan virus TbLCYNV AJ566744 Trung Quốc M 22 Tomato leaf curl Laos virus ToLCLV AF195782 Lào M 23 Tomato leaf curl Malaysia virus ToLCMV AF327426 Malaysia M 24 Tomato leaf curl Philippines virus ToLCPV AB050597 Philippines M 25 Tomato leaf curl Taiwan virus ToLCTWV U88692 Đài Loan! M 26 Tomato leaf curl Vietnam virus ToLCVV DQ641705 Việt Nam M 27 Tomato leaf curl virus ToLCV S53251 Australia M 28 Tomato yellow leaf curl Thailand virus TYLCTHV AY514630 Thái Lan B 29 Tomato yellow leaf curl Vietnam virus TYLCVNV DQ641697 Việt Nam M 30 Tomato yellow leaf curl virus TYLCV AB116629 Nhật Bản M Ghi chú: B (bipartite): virus có gen kép; M (Monopartite): virus có gen đơn\ Cây xây dựng Neighbough Joining (NJ) truyền xác định dựa Kimura tham số Giá trị phương pháp với khoảng cách di mơ hình thay bootrap (%) với 1000 lần lặp lại rõ gốc nhánh (chỉ thể giá trị >50%), Thanh bar thể khoảng cách di truyền Các mẫu virus thuốc thu Tây Ninh đánh dấu 43 Kết nghiên cứu Khoa học Như vậy, kết chẩn đoán bệnh ne gây hại thuốc Tây Ninh Tomato yellow leaf curl Kanchanaburi virus Pepper yellow leaf curl Indonesia virus gây Trong đó, PepYLCIDV loài virus lần phát thấy Việt Nam Virus thuộc chi Begomovirus truyền qua côn trùng môi giới bọ phấn trắng (Muhammad Naeem Sattar, 2012) Kết chẩn đoán bệnh năm 2019 phù hợp với kết nghiên cứu tác giả Đào Đức Thức (2013), Viện Công nghệ sinh học năm 2011 – 2014 nhận định bệnh gây hại đồng ruộng BVTV - Số 5/2019 Kanchanaburi virus Pepper yellow leaf curl Indonesia virus Các loài virus thuộc chi Begomovirus truyền qua côn trùng môi giới bọ phấn trắng Trong đó, Pepper yellow leaf curl Indonesia virus loài virus lần phát thấy Viêt Nam TÀI LIỆU THAM KHẢO Nguyễn Văn Biếu, 2003 Bệnh ne gây hại thuốc tỉnh phía Nam Nguyễn Ngọc Bích, 2004 Bước đầu nghiên cứu số bệnh virus gây hại thuốc tỉnh Tây Ninh Luận văn Thạc sĩ Nông nghiệp – Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh Lê Văn Sơn, 2014 Nghiên cứu tạo giống thuốc kháng bệnh khảm thuốc xoăn đọt kỹ thuật chuyển gen Báo cáo tổng hợp kết KHCN đề tài - Chương trình KHCN cấp nhà nước Đào Đức Thức, 2013 Đánh giá, chọn lọc số dòng, giống thuốc có khả chống chịu số bệnh virus đồng ruộng phía Nam Báo cáo tổng kết đề tài – Tổng công ty Thuốc Việt Nam Đồn Ngun Kiến Trúc, 2010 Theo dõi tình hình sâu bệnh hại thuốc làm sở dự báo tư vấn phòng trừ cho tỉnh phía Nam Báo cáo tổng kết đề tài - Tổng công ty Thuốc Việt Nam Ha, C., Coombs, S., Revill, P., Harding, R., Vu, M., & Dale, J., 2008 Molecular characterization of begomoviruses and DNA satellites from Vietnam: additional evidence that the New World geminiviruses were present in the Old World prior to continental separation Journal of General Virology, 89(1), 312-326 Revill, P A., Ha, C V., Porchun, S C., Vu, M Hình Cây phả hệ dựa đoạn BegoAFor1/BegoA-Rev1 KẾT LUẬN Kết chẩn đoán bệnh vẹo gây hại thuốc Tây Ninh năm 2019 xác định loài virus gây triệu chứng bệnh, Tomato yellow leaf curl 44 T., & Dale, J L., 2003 The complete nucleotide sequence of two distinct geminiviruses infecting cucurbits in Vietnam Archives of virology, 148(8), 1523-1541 Muhammad Naeem Sattar, 2012 Diversity and Interactions of Begomoviruses and Their Associated DNA-Satellites Faculty of Natural Resources and Agricultural Sciences Department of Plant Biology and Forest Genetics Phản biện: TS Hà Minh Thanh ... Triệu chứng bệnh ne gây hại thuốc Tây Ninh Kết điều tra vùng trồng thuốc Tây Ninh cho thấy bệnh ne gây hại nặng khu vực huyện Tân Biên khu vực khác bị nhiễm bệnh nhẹ Nguyên nhân bệnh gây hại nặng... Các kết chẩn đốn bệnh ne Tây Ninh giai đoạn 2001 - 2014 có sai khác đối tượng gây hại Theo kết chẩn đốn Nguyễn Ngọc Bích (2003), bệnh ne gây hại thuốc Tây Ninh Tomato spotted wilt virus (TSWV) gây. .. virus thuốc thu Tây Ninh đánh dấu 43 Kết nghiên cứu Khoa học Như vậy, kết chẩn đoán bệnh ne gây hại thuốc Tây Ninh Tomato yellow leaf curl Kanchanaburi virus Pepper yellow leaf curl Indonesia