Đang tải... (xem toàn văn)
Hoàng thảo Kèn là một trong những loài lan tuyệt đẹp và quý hiếm. Ở một số nơi trên thế giới nó còn được đưa vào diện được bảo vệ nghiêm ngặt. Tại Việt Nam, cây có mặt ở miền Bắc. Hiện nay, Hoàng thảo Kèn rất ít được tìm thấy trong tự nhiên do bị thu mua và khai thác với số lượng lớn. Nhu cầu ngày càng lớn của thị trường đã khiến giá thành của Hoàng thảo Kèn bị đẩy lên rất cao và trở thành loài ngày càng bị khai thác nhiều. Việc nhân giống Hoàng thảo Kèn theo phương pháp truyền thống rất chậm không đáp ứng đủ nhu cầu thị trường 2. Ngày nay cùng với sự phát triển của công nghệ sinh học thì vi nhân giống (in vitro) là công cụ đắc lực trong việc bảo tồn và phát triển các loài lan quý hiếm. Nhân giống in vitro cho hệ số nhân giống cao cây tạo ra sạch bệnh đồng đều, không tốn diện tích nhân giống. Trong nhân giống in vitro ngoài môi trường nuôi cấy cùng các dinh dưỡng, các chất điều hòa sinh trưởng, nguồn chiếu sáng được sử dụng trong môi trường nuôi cấy thường là ánh sáng đèn huỳnh quang, các loại đèn halogen kim loại, natri cao áp, dây tóc được sử dụng nhằm tăng cường độ sáng. Tuy nhiên những nguồn ánh sáng này bao gồm cả những bước sóng không cần thiết cho sự sinh trưởng của cây trong nuôi cấy in vitro 1, 3, 6, 9. Ánh sáng đơn sắc là một nguồn năng lượng đầy hứa hẹn cho các phòng nuôi cấy mô với khả năng nâng cao quá trình tăng trưởng sinh học nhờ vào ưu điểm kích thước nhỏ,tiêu thụ điện năng ít, cấu trúc rắn, an toàn, ít tỏa nhiệt, tuổi thọ cao. Ánh sáng đơn sắc bao gồm các bước sóng có lợi cho quá trình quang hợp từ đó ảnh hưởng đến quá trình sinh tổng hợp của cây và quá trình nhân nhanh in vitro 4, 5. Hiện nay trên thế giới chưa có tác giả nào tác giả nào nghiên cứu về ảnh hưởng của ánh sáng đơn sắc lên quá trình nhân giống in vitro lan Hoàng thảo Kèn. Từ những lý do trên, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: “Ảnh hưởng của ánh sáng đơn sắc lên quá trình nhân chồi và ra rễ của lan Hoàng thảo Kèn (Dendrobium lituiflorum) in vitro”.
TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN NGUYỄN HOÀNG TÙNG ẢNH HƯỞNG CỦA ÁNH SÁNG ĐƠN SẮC LÊN QUÁ TRÌNH NHÂN CHỒI VÀ RA RỄ CỦA LAN HỒNG THẢO KÈN (Dendrobium lituiflorum) IN VITRO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Ngành: Sư phạm Sinh học PHÚ THỌ, 2019 TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN NGUYỄN HOÀNG TÙNG ẢNH HƯỞNG CỦA ÁNH SÁNG ĐƠN SẮC LÊN QUÁ TRÌNH NHÂN CHỒI VÀ RA RỄ CỦA LAN HOÀNG THẢO KÈN (Dendrobium lituiflorum) IN VITRO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Ngành: Sư phạm Sinh học GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN: Th.S LÊ THỊ MẬN PHÚ THỌ, 2019 i LỜI CẢM ƠN Trong thời gian nghiên cứu hồn thành khóa luận, em nhận giúp đỡ Ban lãnh đạo trường Đại học Hùng Vương, thầy cô Trung tâm nghiên cứu Công nghệ sinh học trường Đại học Hùng Vương tồn thể thầy giáo khoa Khoa học Tự nhiên tạo điều kiện giúp đỡ để em thực hồn khóa luận Đặc biệt, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới cô giáo hướng dẫn Th.S Lê Thị Mận hướng dẫn tận tình, quan tâm động viên em hồn thành khóa luận Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè, người bên cạnh động viên, giúp đỡ em suốt q trình thực hồn thành khóa luận Em xin chân thành cảm ơn! Phú Thọ, ngày… tháng… năm 2019 Sinh viên thực Nguyễn Hoàng Tùng ii LỜI CAM ĐOAN Tôi đọc hiểu hành vi vi phạm đạo đức học thuật Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu đề tài Tôi thực hiện, đảm bảo trung thực, không vi phạm yêu cầu đạo đức học thuật Mọi giúp đỡ cho việc thực đề tài cảm ơn thơng tin trích dẫn đề tài rõ nguồn gốc phép công bố Phú Thọ, ngày … tháng … năm 2019 Sinh viên thực Nguyễn Hoàng Tùng iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT AC : Than hoạt tính BAP : Benzylamino purine IAA : Indole acetic acid KC : Knudson C NAA : Naphthalen acetic acid MS : Môi trường Murashige & Skoog MT : Môi trường PLSs : Protocorom M1 : Ánh sáng đỏ M2 : Ánh sáng vàng M3 : Ánh sáng xanh iv DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1: Ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc lên khả nhân chồi lan Hoàng thảo Kèn (Dendrobium lituiflorum) 27 Bảng 3.2: Ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc lên số lá/chồi, chiều cao chồi lan Hoàng thảo Kèn (Dendrobium lituiflorum) 28 Bảng 3.3 Ảnh hưởng loại ánh sáng đơn sắc lên q trình rễ lan Hồng thảo Kèn (Dendrobium lituiflorum) 35 DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1 Ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc lên hệ số nhân chồi lan Hồng Thảo Kèn sau tuần ni cấy 34 Biểu đồ 3.2 Ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc lên chiều cao chồi số lá/chồi lan Hoàng Thảo Kèn sau tuần nuôi cấy 34 Biểu đồ 3.3 Ảnh hưởng loại ánh sáng đơn sắc lên chiều dài rễ số rễ/chồi lan Hồng Thảo Kèn sau tuần ni cấy 38 DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Lan Hồng Thảo Kèn thời kì hoa (Dendrobium lituiflorum) Hình 3.1 Cụm chồi lan Hồng Thảo Kèn môi trường sử dụng ánh sáng đơn sắc sau tuần nuôi cấy 30 Hình 3.2 Cụm chồi lan Hồng Thảo Kèn môi trường sử dụng ánh sáng đơn sắc sau tuần nuôi cấy 31 Hình 3.3 Hình ảnh cụm chồi bình ni cấy sau tuần 33 Hình 3.4 Hình ảnh cụm chồi bình ni cấy sau tuần 33 Hình 3.5 Ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc lên trình rễ lan Hồng Thảo Kèn sau tuần ni cấy 36 Hình 3.6 Ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc lên q trình rễ lan Hồng Thảo Kèn sau tuần nuôi cấy 37 v MỤC LỤC PHẦN MỞ ĐẦU ……………………… ………………………………….….1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu đề tài Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn 3.1 Ý nghĩa khoa học 3.2 Ý nghĩa thực tiễn PHẦN NỘI DUNG CHƯƠNG TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU…………………… …3 1.1 Ánh sáng tác động ánh sáng thực vật 1.1.1 Vai trò ánh sáng đời sống 1.1.2 Vai trò ánh sáng đời sống, trình phát sinh hình thái thực vật 1.2 Một số nguồn sáng nhân tạo sử dụng nuôi cấy mô tế bào thực vật 1.3 Giới thiệu chung chi Hoàng Thảo (Dendrobium) lan Hoàng Thảo Kèn (D lituiflorum) 1.3.1 Chi Hoàng Thảo (Dendrobium) 1.3.2 Hoàng Thảo Kèn (D lituiflorum) 1.4 Kỹ thuật nhân giống nuôi cấy mô tế bào thực vật 1.4.1 Khái niệm 1.4.2 Lịch sử phát triển kỹ thuật nhân giống nuôi cấy mô - tế bào thực vật 10 1.4.3.Cơ sở khoa học nuôi cấy mô - tế bào thực vật 11 1.4.4 Các giai đoạn nuôi cấy in vitro 12 1.4.5.Các điều kiện nuôi cấy in vitro 14 1.4.6.Môi trường nuôi cấy 15 vi 1.4.7.Ứng dụng 19 1.5.Tình hình nghiên cứu 19 1.5.1 Tình hình nghiên cứu giới 19 1.5.2 Tình hình nghiên cứu nước 22 CHƯƠNG II ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP………………25 2.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 24 2.2 Nội dung nghiên cứu 24 2.3 Phương pháp nghiên cứu 24 2.3.1 Phương pháp luận 24 2.3.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 24 2.3.3 Phương pháp thu thập số liệu 25 2.3.4.Phương pháp phân tích xử lý số liệu 26 CHƯƠNG III: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN…………………27 3.1 Ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc lên trình nhân chồi lan Hoàng Thảo Kèn (Dendrobium lituiflorum) in vitro 27 3.2 Ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc lên trình rễ lan Hoàng Thảo Kèn (Dendrobium lituiflorum) in vitro………………………………………………34 KẾT LUẬN & KIẾN NGHỊ……………………………………………… ….40 Kết luận 40 Kiến nghị 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO………………………………………………………41 PHỤ LỤC 44 PHẦN MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Hồng thảo Kèn loài lan tuyệt đẹp quý Ở số nơi giới đưa vào diện bảo vệ nghiêm ngặt Tại Việt Nam, có mặt ở miền Bắc Hiện nay, Hồng thảo Kèn tìm thấy tự nhiên bị thu mua khai thác với số lượng lớn Nhu cầu ngày lớn thị trường khiến giá thành Hoàng thảo Kèn bị đẩy lên cao trở thành loài ngày bị khai thác nhiều Việc nhân giống Hoàng thảo Kèn theo phương pháp truyền thống chậm không đáp ứng đủ nhu cầu thị trường [2] Ngày với phát triển cơng nghệ sinh học vi nhân giống (in vitro) công cụ đắc lực việc bảo tồn phát triển loài lan quý Nhân giống in vitro cho hệ số nhân giống cao tạo bệnh đồng đều, không tốn diện tích nhân giống Trong nhân giống in vitro ngồi mơi trường ni cấy dinh dưỡng, chất điều hòa sinh trưởng, nguồn chiếu sáng sử dụng môi trường nuôi cấy thường ánh sáng đèn huỳnh quang, loại đèn halogen kim loại, natri cao áp, dây tóc sử dụng nhằm tăng cường độ sáng Tuy nhiên nguồn ánh sáng bao gồm bước sóng khơng cần thiết cho sinh trưởng nuôi cấy in vitro [1, 3, 6, 9] Ánh sáng đơn sắc nguồn lượng đầy hứa hẹn cho phòng ni cấy mơ với khả nâng cao q trình tăng trưởng sinh học nhờ vào ưu điểm kích thước nhỏ, tiêu thụ điện ít, cấu trúc rắn, an tồn, tỏa nhiệt, tuổi thọ cao Ánh sáng đơn sắc bao gồm bước sóng có lợi cho q trình quang hợp từ ảnh hưởng đến q trình sinh tổng hợp trình nhân nhanh in vitro [4, 5] Hiện giới chưa có tác giả tác giả nghiên cứu ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc lên trình nhân giống in vitro lan Hoàng thảo Kèn Từ lý trên, tiến hành nghiên cứu đề tài: “Ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc lên trình nhân chồi rễ lan Hoàng thảo Kèn (Dendrobium lituiflorum) in vitro” 2 Mục tiêu đề tài - Đánh giá ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc đến q trình nhân chồi lan Hồng thảo Kèn in vitro - Đánh giá ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc đến q trình rễ lan Hồng thảo Kèn in vtiro Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn 3.1 Ý nghĩa khoa học Kết nghiên cứu đề tài cung cấp dẫn liệu khoa học làm sở đánh giá tác động loại ánh sáng đơn sắc đến khả nhân chồi rễ nuôi cấy mô lan Hoàng Thảo Kèn (Dendrobium lituiflorum) in vitro 3.2 Ý nghĩa thực tiễn Kết nghiên cứu ứng dụng ni cấy mơ lồi lan Hồng Thảo Kèn (Dendrobium lituiflorum), góp phần sản xuất giống có hiệu cao, chất lượng tốt, ứng dụng vào sản xuất, nâng cao hiệu kinh tế địa bàn tỉnh Phú Thọ 39 Từ hình 3.4 biểu đồ 3.3 ta thấy: Như xét hai tiêu: Chiều dài rễ, số rê/chồi sau tuần tuần nghiên cứu ánh sáng đỏ thích hợp cho trình rễ Trong điều kiện ánh sáng này: Chiều dài rễ(sau tuần đạt 0,9cm, sau tuần đạt 2,40cm), số rễ/chồi (sau tuần đạt 1.93 rễ, sau tuần đạt 4,33 rễ) Kết có tương đồng với tác giả Teresa Cybularz- Urban cộng phân tích ảnh hưởng bước sóng ánh sáng lên phát sinh quan lan Cattleya hybrid nuôi cấy in vitro vào năm 2006 Kết cho thấy tốc độ phát sinh quan phụ thuộc vào bước sóng ánh sáng đơn sắc, thí nghiệm với ánh sáng đỏ ánh sáng xanh có hiệu việc phát sinh rễ Kết ghi lại hệ số phát sinh hình thái ánh sáng đỏ cao (đạt 11,7 lần) [20] Kết nhiên cứu có tương đồng với nhóm tác giả Lê Thị Thúy Trần Thị Anh Thoa nghiên cứu ảnh hưởng ánh sáng đèn LED lên sinh trưởng giai đoạn tạo rễ Dendrobium lituiflorum Lindl Dendrobium ShavinWhite Kết xác định ánh sáng đỏ nguồn sáng thích hợp cho q trình sinh trưởng lồi lan D lituiflorum Lindl D Shavin White Cả loài D lituiflorum Lindl D Shavin White in vitro Khi ni cấy ánh sáng đỏ có khả sinh trưởng tốt không ở rễ mà mặt hình thái có tỷ lệ sống cao [9] Sở dĩ có khác biệt q trình rễ ni cấy điều kiện ánh sáng khác vì: Quang hợp ở thực vật cần có ánh sáng khơng phải tia sáng có lợi cho quang hợp giống Quang hợp ở thực vật chủ yếu xảy ở miền ánh sáng: miền ánh sáng đỏ: = 620-700nm miền ánh sáng lam, tím: = 400-480nm [4] Tia đỏ xúc tiến trình hình thành cacbonhidrat Diệp lục a hấp thụ ánh sáng có bước sóng dài (đỏ), diệp lục b hấp thụ ánh sáng có bước sóng ngắn (xanh tím) Cường độ quang hợp tăng vùng ánh sáng đỏ từ xúc tiến trình hình thành protein, kích thích q trình phân bào mạnh mẽ, đặc biệt cảm ứng để hình thành hoocmon thực vật đặc biệt Auxin( hoocmon có vai trò quan trọng phát triển rễ) Điều giải thích cho hiệu vượt trội rễ điều kiện ánh sáng đỏ so với ánh sáng khác Vì ở mơi trường có sử dụng ánh sáng đỏ chiều dài rễ, phát triển rễ đồng [20] 40 KẾT LUẬN & KIẾN NGHỊ Kết luận Ánh sáng đỏ thích hợp cho q trình nhân chồi rễ Trong điều kiện ánh sáng này: Chiều cao chồi (sau tuần đạt 2,21cm, sau tuần đạt 2,56cm), số chồi/chồi (sau tuần đạt 3,26 lá, sau tuần đạt 4,44 lá), Hệ số nhân chồi(sau tuần đạt 1,83 lần, sau tuần đạt 5,45 lần) Chiều dài rễ(sau tuần đạt 0,9cm, sau tuần đạt 2,40cm), số rễ/chồi (sau tuần đạt 1,93rễ, sau tuần đạt 4,33 rễ) Kiến nghị Tiếp tục đánh giá ảnh hưởng loại ánh sáng đơn sắc lên giai đoạn quy trình nhân giống lồi lan TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tham khảo Tiếng Việt [1] Nguyễn Tiến Bân, Nguyễn Khắc Khôi, Vũ Xuân Phương (2005), Danh lục lồi thực vật Việt Nam, tập 3, NXB Nơng nghiệp Hà Nội [2] Hoàng Văn Cương, Nguyễn Bá Nam, Trần Công Luận, Bùi Thế Vinh, Dương Tấn Nhựt (2012), “Ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc lên sinh trưởng khả tích lũy hoạt chất saponin thơng qua nuôi cấy mô sẹo Sâm ngọc linh (Pinax vietnamensis Ha et Grushv.) in vitro”, Tạp chí khoa học công nghệ, tr 475-490 [3] Bùi Danh Chung (2015), Nghiên cứu nhân giống in vitro loài lan Hoàng thảo Kèn (Dendrobium lituiflorum), luận văn Thạc sĩ khoa Nông nghiệp trường Học viện Nông nghiệp Việt Nam, Hà Nội [4] Nguyễn Như Khanh, Cao Phi Bằng (2003), Sinh lí học thực vật, Nhà xuất Giáo dục Việt Nam [5] Nguyễn Bá Nam, Nguyễn Đình Lâm, Dương Tuấn Nhựt (2012), “Ảnh hưởng loại mẫu cấy hệ thống chiếu sáng đơn sắc lên khả tái sinh chồi hoa cúc (chrysanthemum morifolium ramat Cv “jimba”) in vitro”, Tạp chí khoa học cơng nghệ, Tr 595-606 [6] Lâm Ngọc Phương, Nguyễn Bảo Vệ, Đỗ Thị Trang Nhã 2005, “Ảnh hưởng cường độ ánh sáng hàm lượng đường sucrose môi trường nuôi cấy đến phát triển chồi dưa hấu tam bội in vitro”, Tạp chí nghiên cứu khoa học Đại học Cần Thơ, Tr 1-8 [7] Nguyễn Thanh Phương, Nguyễn Thị Lý Anh, Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Hồng Thắm (2014), “Ảnh hưởng số loại đèn Led chiếu sáng bình ni cấy đến sinh trưởng, phát triển giống cẩm chướng hồng hạc cấy mơ”,Tạp chí khoa học Phát triển, tr 1015-1022 [8] Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Lý Anh, Nguyễn Thị Phương Thảo (2005), Giáo trình cơng nghệ sinh học nông nghiệp, Nhà xuất Nông nghiệp [9] Lê Thị Thúy, Trần Thị Anh Thoa (2017), “Ảnh hưởng ánh sáng đèn led lên sinh trưởng Dendrobium lituiflorum Lindl Dendrobium ShavinWhite”, Tạp chí Khoa học công nghệ Thực phẩm, tr 68-73 [10].Trần Ngọc Truồi , Nguyễn Đăng Nhật, Nguyễn Văn Đức, Trần Thị Triêu Hà Nguyễn Tiến Long, Lã Thị Thu Hằng (2017), “nghiên cứu ảnh hưởng hệ thống chiếu sáng đơn sắc đến trình nhân giống in vitro hoa chng (Sinningia speciosa)”, tạp chí khoa học & cơng nghệ nông nghiệp, Tập 1(1) [11] Vũ Văn Vụ, Nguyễn Mộng Hùng, Lê Hồng Điệp, (2005), Công nghệ sinh học, tập 2, NXB Giáo Dục Tài liệu tham khảo Tiếng Anh [12] Jaime A Teixeira da Silva (2014), “The response of protocorm-like bodies of nine hybrid Cymbidium cultivars to light-emitting diodes”, Environmental and Experimental Biology, 12, pp 155-159 [13] Kumala Dewi, Yekti Asih Purwestri, Yohana Theresia Maria Astuti, Lila Natasaputra and Parmi (2014), DewiIndonesianetal Journal of Biotechnology, 19(1), pp 33-42 [14] Kim S J., Heo J W., and Paek K Y (2004), “Effects of LEDs on net photosynthetic rate growth and leaf stomata of Chrysanthemum plantlets in vitro”, Sci Hort, pp.143-151 [15] Sultana Umma Habiba, Shimasaki Kazuhiko, Monjurul Ahasan, Meskatul Alam (2014), “Effects of different light quality on growth and development of protocorm like bodies (PLBs) in Dendrobium kingianum cultured in vitro”, Bangladesh research publications journal, pp 223-227 [16] S.Dutta Gupta, B Jatothu (2013) Fundamentals and applications of lightemitting diodes (LEDs) in in vitro plant growth and morphogenensis Plant Biotechnol Rep, 7, pp 211-220 [17] Nagata T & Takebe (1987), Toshiyuki Nagata National Institute for Basic Biology 38 Nishigonaka, Myodaijicho Okazaki, 444 Japan, Planta, pp 92-301 [18] Ruey- Chi Jao, Wei Fang (2004), Effects of Frequency and Duty Ratio on the Growth of Potato Plantletts In Vitro Using Light-emitting Diodes, Hort Science, 39(2), pp 375-379 [19] Sultana Umma Habiba, Shimasaki Kazuhiko (2014), “Effects of different light quality on growth and development of protocorm-like bodies (plbs) in dendrobium kingianum cultured in vitro”, Bangladesh research publications journa, 10 (2), pp 223-227 [20] Teresa Cybularz-Urban, Ewa Hanus-Fajerska, Adam Świderski (2007), Effect of light wavelength on in vitro organogenesis of a cattleyahybrid, Acta biologica cracoviensia series botanica, 49 (1), pp 113-118 [21] Vandita Billore1, Monica Jain and Penna Suprasanna, “Monochromic radiation through light-emitting diode (LED) positively augments in vitro shoot regeneration in Orchid (Dendrobium sonia)”, Can J Biotech, (2), pp 50-58 [22] Wongnok A, Piluek C, Techasilpitak T, Tantivivat S (2008), “Effect of light emitting diodes on micropropagation of Phalaenopsis orchids”, Acta Hortic (8), pp 149-156 PHỤ LỤC Phụ lục 01 Ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc đến nhân chồi lan Hồng Thảo Kèn in vitro sau tuần ni cấy CT Lần lặp Số chồi ban đầu ĐC 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 TB Red TB Green TB Yelow 3 TB Sau tuần nuôi cấy Số chồi Chiều cao tuần chồi 106 1.89 99 2.1 103 1.92 102.67 1.97 116 2.34 106 2.21 107 2.08 109.67 2.21 104 1.93 108 2.04 101 1.82 104.33 1.93 105 2.03 88 2.15 107 2.1 100 2.09 Số lá/ Chồi 3.26 2.34 2.16 2.59 3.56 2.96 3.25 3.26 3.03 2.76 2.16 2.65 2.87 3.04 3.18 3.03 Anova: Single Factor cho số lá/chồi sau tuần SUMMARY Groups DC Đỏ Xanh Vàng Count 3 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 0.909958 1.321133 Total 2.231092 Sum Average Variance 7.76 2.586667 0.348133 9.77 3.256667 0.090033 7.95 2.65 0.1983 9.09 3.03 0.0241 df MS F 0.303319 4.836723 0.165142 11 Anova: Single Factor cho chiều cao chồi sau tuần P-value F crit 0.218631 4.066181 hệ số nhân 1.77 1.65 1.71 1.71 1.93 1.77 1.78 1.83 1.73 1.8 1.67 1.74 1.75 1.46 1.78 1.67 SUMMARY Groups DC Đỏ Xanh Vàng Count 3 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 0.144825 0.091066667 Total 0.235891667 Anova: Single Factor Sum Average 5.91 1.97 6.63 2.21 5.79 1.93 6.28 2.093333 df MS 0.048275 0.011383 Variance 0.0129 0.0169 0.0121 0.003633 F 4.240849 P-value F crit 0.045399 4.066181 11 Hệ số nhân sau tuần chồi SUMMARY Groups DC Đỏ Xanh Vàng Count 4 4 Sum 6.83 7.31 6.95 6.67 Average 1.7075 1.8275 1.7375 1.6675 Variance 0.002025 0.005358 0.002425 0.019492 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 0.0555 0.0879 df 12 MS 0.0185 0.007325 F 5.525597 Total 0.1434 15 P-value F crit 0.106849 3.490295 Phụ lục 02 Ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc đến nhân chồi lan Hoàng Thảo Kèn in vitro sau tuần nuôi cấy CT ĐC TB Red TB Green TB Yelow TB Sau tuần nuôi cấy Số chồi ban đầu số chồi tuần Chiều cao chồi Số lá/ Chồi 60 258 2.37 60 276 2.46 60 303 2.22 60 279 2.35 60 329 2.67 60 318 2.56 60 334 2.44 60 327 2.56 60 308 2.06 60 278 2.36 60 297 2.11 60 294.33 2.18 60 305 2.36 60 301 2.41 60 319 2.5 60 308.33 2.42 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total 3.95 3.12 2.57 3.21 4.58 4.41 4.32 4.44 4.02 3.56 3.68 3.75 3.76 4.23 3.82 3.94 hế số nhân chồi sau tuần Anova: Single Factor SUMMARY Groups DC Đỏ Xanh Vàng Hệ số nhân Count 4 4 SS 1.391975 0.499815 1.89179 Sum Average Variance 18.6 4.65 0.095 21.8 5.45 0.012407 19.622222 4.90555556 0.042654 20.555556 5.13888889 0.016543 df MS F P-value 0.46399177 11.13993 0.000877 12 0.04165123 15 F crit 3.490295 4.3 4.6 5.05 4.65 5.48 5.3 5.57 5.45 5.13 4.63 4.95 4.90 5.08 5.02 5.32 5.13 Anova: Single Factor cho số lá/chồi sau tuần SUMMARY Groups DC Đỏ Xanh Vàng ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total Count 3 3 SS 2.29643333 1.24486667 Sum 9.64 13.31 11.26 11.81 df 3.5413 Average 3.213333 4.436667 3.753333 3.936667 MS 0.765478 0.155608 Variance 0.482633 0.017433 0.056933 0.065433 F P-value F crit 4.91926 0.031835 4.066181 11 Anova: Single Factor cho chiều cao chồi sau tuần SUMMARY Groups DC Đỏ Xanh Vàng Count 3 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 0.22586667 0.1176 Total 0.34346667 Sum Average Variance 7.05 2.35 0.0147 7.67 2.556667 0.013233 6.53 2.176667 0.025833 7.27 2.423333 0.005033 df MS 0.075289 0.0147 11 F P-value F crit 5.121693 0.028799 4.066181 Phụ lục 03 Ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc đến nhân chồi lan Hoàng Thảo Kèn in vitro sau tuần nuôi cấy CT Lần lặp ĐC TB Green TB Red TB Yelow Số rễ 27 23 29 26.3 28 26 28 27.3 30 28 29 29 29 25 24 26 3 TB Số mẫu ban đầu 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 Rễ/chồi Số mẫu rễ 1.8 1.53 1.93 1.76 1.87 1.73 1.87 1.82 1.87 1.93 1.93 1.93 1.67 1.6 1.73 13 15 12 13.3 14 15 13 14 15 15 15 15 14 13 12 13 tỉ lệ rễ 86.67 100 80 88 93.3 100 86.67 93.3 100 100 100 100 93.3 86.67 80 86 Anova: Single Factor cho Số rễ/chồi sau tuần SUMMARY Groups DC Xanh Đỏ Vàng Count 3 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 0.072593 0.165926 Total 0.238519 Sum 5.266667 5.466667 5.8 5.2 df Average 1.755556 1.822222 1.933333 1.733333 Variance 0.041481 0.005926 0.004444 0.031111 MS F 0.024198 5.166667 0.020741 11 P-value F crit 0.380901 4.066181 Chiều dài rễ 0.34 0.41 0.38 0.3 0.39 0.53 0.43 0.45 0.76 0.93 1.02 0.90 0.75 0.56 0.48 0.59 Anova: Single Factor cho Chiều dài rễ sau tuần SUMMARY Groups DC Xanh Đỏ Vàng Count 3 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 0.489167 0.0862 Total 0.575367 Sum Average Variance 1.13 0.376667 0.001233 1.35 0.45 0.0052 2.71 0.903333 0.017433 1.79 0.596667 0.019233 df MS F P-value 0.163056 15.13277 0.001163 0.010775 F crit 4.066181 11 Anova: Single Factor cho Tỉ lệ rễ sau tuần SUMMARY Groups DC xanh Đỏ Vàng Count 3 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 311.1111 385.1852 Total 696.2963 Sum Average Variance 266.6667 88.88889 103.7037 280 93.33333 44.44444 300 100 260 86.66667 44.44444 df MS F 103.7037 4.153846 48.14815 11 P-value F crit 0.171539 4.066181 Phụ lục 04 Ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc đến nhân chồi lan Hồng Thảo Kèn in vitro sau tuần ni cấy CT Lần lặp ĐC TB Green TB Red TB Yelow TB 3 3 Số mẫu ban đầu 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 Số rễ 27 23 29 26.3 28 26 28 27.3 30 28 29 29 29 25 24 26 Số rễ 58 64 63 61.7 58 60 62 60 67 63 64 64.67 60 59 61 60 Rễ/chồi 3.87 4.27 4.2 4.1 3.87 4.13 4.47 4.2 4.35 4.33 3.93 4.07 tỉ lệ rễ Chiều dài 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 2.11 1.89 2.22 2.07 1.93 2.21 2.03 2.05 2.42 2.36 2.44 2.40 1.98 2.21 2.24 2.14 Anova: Single Factor cho số rễ/chồi sau tuần SUMMARY Groups DC Xanh Đỏ Vàng Count 3 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 0.193704 0.174815 Total 0.368519 Sum Average 12.33333 4.111111 12 12.93333 4.311111 12 df MS 0.064568 0.021852 11 Variance 0.045926 0.017778 0.019259 0.044444 F P-value F crit 5.954802 0.097981 4.066181 Anova: Single Factor cho Chiều dài rễ sau tuần SUMMARY Groups DC Xanh Đỏ Vàng ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total Count 3 3 SS 0.236733 0.140667 Sum 6.22 6.17 7.22 6.43 df 0.3774 Average 2.073333 2.056667 2.406667 2.143333 Variance 0.028233 0.020133 0.001733 0.020233 MS F P-value 0.078911 4.487836 0.039754 0.017583 F crit 4.066181 11 Anova: Single Factor Cho tỉ lệ rễ sau tuần SUMMARY Groups DC Xanh Đỏ Vàng ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total Count 3 3 SS Sum 300 300 300 300 df Average Variance 100 100 100 100 MS 0 11 0 F 65535 P-value #DIV/0! F crit 4.066181 Phụ lục 05: Các bình ni cấy môi trường ánh sáng đơn sắc ĐC M1 M2 M3 Phú Thọ, ngày tháng 05 năm 2019 Ý kiến giảng viên Sinh viên thực hướng dẫn (Kí ghi rõ họ tên) Th.S Lê Thị Mận (Kí ghi rõ họ tên) Nguyễn Hồng Tùng ... CỨU VÀ THẢO LUẬN…………………27 3.1 Ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc lên trình nhân chồi lan Hoàng Thảo Kèn (Dendrobium lituiflorum) in vitro 27 3.2 Ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc lên trình rễ lan Hoàng. .. tài: Ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc lên trình nhân chồi rễ lan Hoàng thảo Kèn (Dendrobium lituiflorum) in vitro 2 Mục tiêu đề tài - ánh giá ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc đến q trình nhân chồi lan. .. NGUYỄN HOÀNG TÙNG ẢNH HƯỞNG CỦA ÁNH SÁNG ĐƠN SẮC LÊN QUÁ TRÌNH NHÂN CHỒI VÀ RA RỄ CỦA LAN HOÀNG THẢO KÈN (Dendrobium lituiflorum) IN VITRO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Ngành: Sư phạm Sinh học