Mục tiêu nghiên cứu nhằm xác định các đặc điểm về huyết học, tỉ lệ đột biến JAK2V617F trên bệnh nhân đa hồng cầu nguyên phát. Nghiên cứu tiến hành trên tất cả các bệnh nhân chẩn đoán đa hồng cầu nguyên phát theo tiêu chuẩn của WHO 2008 tại Bệnh viện Chợ Rẫy từ tháng 01 năm 2012 đến tháng 01 năm 2013.
Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Số 5 * 2013 Nghiên cứu Y học KHẢO SÁT ĐỘT BIẾN JAK2V617F TRÊN BỆNH NHÂN ĐA HỒNG CẦU NGUN PHÁT TẠI BỆNH VIỆN CHỢ RẪY Bùi Lê Cường*, Tơ Phước Hải*, Lê Hồng Oanh* TĨM TẮT Mục tiêu: Xác định các đặc điểm về huyết học, tỉ lệ đột biến JAK2V617F trên bệnh nhân Đa hồng cầu nguyên phát. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Tất cả các BN chẩn đoán Đa hồng cầu nguyên phát (ĐHCNP) theo tiêu chuẩn của WHO 2008 tại Bệnh viện Chợ Rẫy từ tháng 01 năm 2012 đến tháng 01 năm 2013; nghiên cứu mơ tả hồi cứu. Kết quả: 30 BN được chẩn đốn ĐHCNP có tuổi trung bình 53 (18 – 84) với dấu hiệu chính là đỏ da niêm, nhức đầu, tăng huyết áp. Tỉ lệ nam/nữ 1,14. Nồng độ Hemoglobin trung bình là 18,8g/dl. Tỉ lệ phát hiện đột biến JAK2V617F là 73,3%. Hai nhóm có nồng độ Hemoglobin tương đương nhau, nhóm đột biến có độ tuổi lớn hơn (p0,05). Kết luận: Việc phát hiện ra đột biến JAK2V617F là một bước ngoặc quan trọng trong chẩn đốn các nhóm bệnh thuộc Hội chứng tăng sinh tủy, mở ra thời kỳ nghiên cứu các thuốc điều trị trúng đích đối với các bệnh có đột biến JAK2V617F. Từ khố: Hội chứng tăng sinh tủy (HCTST), Đa hồng cầu ngun phát (TTCNP), JAK2V617F. ABSTRACT CHARACTERISTICS OF THE JAK2V617F MUTATION IN ESSENTIAL THROMBOCYTHEMIA IN CHO RAY HOSPITAL Bui Le Cuong, To Phuoc Hai, Le Hoang Oanh * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 17 ‐ No 5 ‐ 2013: 165 ‐ 168 Objectives: To characterize the features of hematology, the rate of JAK2V617F mutation in Polycythemia vera. Method and patients: A retrospective study was conducted on all patients diagnosed as Polycythemia vera (PV) according to WHO 2008 classification, at Cho Ray from January 2012 to January 2013. Results: A total of 30 ET patients, with the mean age of 53 years (range: 18 – 84 years) with the major symptom of ruddy cyanosis, headache, hypertension. The ratio of male to female is 1.14. Mean hemoglobin concentration is 18,8g/dl. The rate of JAK2V617F mutation was 73.3%. Two groups have the same hemoglobin concentration, mean age with mutation group is higher than one without mutation (p0.05) Conclusions: The detection of JAK2V617F mutation has a very important role in diagnosis of myeloid proliferative neoplasms. It will open the time of research the target drugs for diseases with JAK2V617F mutation. Key words: Myeloid proliferative neoplasms (MPNs), Polycythemia Vera (PV), JAK2V617F. hoặc tất cả các dòng tế bào tạo ra tại tủy. Theo ĐẶT VẤN ĐỀ Tổ chức Y tế thế giới (WHO 2008), nhóm này Hội chứng tăng sinh tủy là một nhóm bệnh bao gồm 7 bệnh: Bạch cầu mạn dòng tủy (CML), của tủy xương do phát triển riêng một dòng * Bệnh viện Chợ Rẫy Tác giả liên lạc: BS. CKI. Bùi Lê Cường ĐT: 0903 850 950 166 Chun Đề Truyền Máu – Huyết Học Email: cuongbuile@yahoo.com Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Số 5 * 2013 Bạch cầu mạn dòng Neutrophil (CNL), Bạch cầu mạn dòng Eosinophil(CEL), Đa hồng cầu nguyên phát (ĐHCNP), Tăng tiểu cầu nguyên phát (TTCNP), Xơ tủy vô căn và Tăng sinh tế bào Mast. Tất cả đều có ngun nhân từ tế bào máu gốc vạn năng sản sinh q mức một hoặc nhiều dòng tế bào, một số bệnh thuộc nhóm này chuyển thành Bạch cầu cấp. Các bệnh Đa hồng cầu ngun phát, Tăng tiểu cầu ngun phát và Xơ tủy vơ căn có thể chuyển dạng lẫn nhau. Nhờ sự tiến bộ về sinh học phân tử và di truyền tế bào, ngày nay người ta đã tìm ra được các đột biến gây ra đối với từng bệnh trong nhóm này. CML là do chuyển đoạn giữa NST số 9 và 22, CNL là do chuyển đoạn giữa NST 15 và 19, CEL liên quan đến đột biến gen PDGFR. Ba bệnh còn lại gồm ĐHCNP, TTCNP và Xơ tủy vơ căn có liên quan đến đột biến gen JAK2 tại vị trí 617, guanine được thay bằng thymidine và kết quả là Valine được thay bằng Phenylalanine. Đột biến này làm xáo trộn dẫn truyền qua trục JAK‐STAT, làm sản sinh quá mức các tế bào máu khơng kiểm sốt được. Nhóm bệnh này có tiên lượng khá tốt, các phương pháp điều trị kinh điển gồm các thuốc Hydroxyurea, Busulfan, Interferon, Bipobroman có thể kiểm sốt được bệnh và kéo dài thời gian sống 10 ‐20 năm. Tuy nhiên, một số trường hợp chuyển sang bệnh lý ác tính như Rối loạn sinh tủy hoặc AML và tử vong, bệnh nhân cũng có thể tử vong do các biến chứng huyết khối hoặc xuất huyết. Tại Việt Nam đã có một số nghiên cứu về đột biến JAK2V617F nhưng cỡ mẫu tương đối nhỏ. Tại Bệnh viện Chợ Rẫy, ĐHCNP là bệnh rất thường gặp với những biểu hiện lâm sàng rất đa dạng, được phát hiện tại nhiều chuyên khoa khác nhau không phải Huyết học. Đa số bệnh nhân được điều trị bằng Hydroxyurea và chống kết tập tiểu cầu. Chúng tơi chưa có thống kê cụ thể về số lượng bệnh nhân và tỉ lệ đột biến JAK2V617F phát hiện được trên nhóm bệnh này. Nghiên cứu này được tiến hành tại Bệnh viện Chợ Rẫy nhằm khảo sát các đặc điểm về Nghiên cứu Y học huyết học và tỉ lệ đột biến JAK2V617F trên bệnh nhân ĐHCNP. ĐỐI TƯỢNG ‐ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu Tiêu chuẩn chọn mẫu Các BN chẩn đoán ĐHCNP theo tiêu chuẩn của WHO 2008 tại BV Chợ Rẫy từ tháng 01 năm 2012 đến tháng 01 năm 2013. Tiêu chuẩn loại trừ ‐ Được chẩn đốn Bạch cầu mạn dòng tủy, Tăng tiểu cầu ngun phát, Tăng sinh tủy mạn tính, Xơ tủy vơ căn. ‐ Khơng có điều kiện tái khám thường xuyên theo lịch hẹn của bệnh viện. ‐ Thân nhân hoặc bệnh nhân không đồng ý tham gia nghiên cứu. Phương pháp nghiên cứu ‐ Thiết kế nghiên cứu: mô tả hồi cứu. Xử lý số liệu ‐ Số liệu thu thập được nhập vào phần mềm Epidata 3.1. Phương pháp thống kê: Sử dụng phần mềm thống kê STATA 10.0. Trình bày kết quả dưới dạng bảng tần số, biểu đồ. ‐ Giá trị các chỉ số được trình bày dưới dạng trung bình và độ lệch chuẩn, kiểm định giữa. 2 giá trị thống kê bằng phép kiểm Student hoặc trình bày dưới dạng phần trăm (%) và kiểm định sự khác biệt giữa hai nhóm về mặt thống kê bằng kiểm định chi‐square. ‐ So sánh giá trị của một biến định lượng trên nhiều nhóm khác nhau bằng phân tích Anova, sự khác biệt có ý nghĩa với p 95% (p 18,5 g/dl(nam) > 16,5g/dl(nữ). + Có đột biến JAK2V617F. Tiêu chuẩn phụ + Tủy đồ cho thấy sự tăng sinh. + Nồng độ EPO huyết thanh giảm. Tăng trưởng dòng hồng cầu nội sinh. Chẩn đốn Đa hồng cầu ngun phát khi có 2 tiêu chuẩn chính và 1 tiêu chuẩn phụ hoặc tiêu chuẩn chính đầu tiên và 2 tiêu chuẩn phụ. Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Số 5 * 2013 Bảng 1: Đặc điểm huyết học của 2 nhóm có và khơng có đột biến JAK2V617F Đặc điểm Nồng độ Hb trung bình (g/L) Số lượng BC trung bình (x109/L) Số lượng TC trung bình (x109/L) Đột biến JAK2V617F Có Khơng 18,76±1,69 18,79±0,79 14,79±11,13 8,77 ± 4,41 348,31±142,82 270,25±101,88 Tỉ lệ đột biến gien JAK2V617F Bảng 2: Tỉ lệ đột biến JAK2V617F Số bệnh nhân Tỉ lệ Có đột biến 22 73,3% Khơng đột biến 08 26,7% KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU BÀN LUẬN Đặc điểm bệnh nhân Bước đầu nghiên cứu 30 bệnh nhân Đa hồng cầu nguyên phát tại Bệnh viện Chợ Rẫy, kết quả của chúng tôi tương đương với các tác giả khác trong và ngoài nước khi quan sát thấy tuổi thường gặp nhất là 41 – 62 tuổi, nam nhiều hơn nữ, phần lớn BN được phát hiện đỏ da niêm (92%), tăng huyết áp (70%), nhức đầu (52%), tương đương với kết quả của các tác giả Huỳnh Hương, Berlin NI.(3,2) huyết khối chiếm 10% tương đương với tác giả AM. Vannucchi (7) Lâm sàng Trong nghiên cứu có 30 BN được chẩn đốn ĐHCNP với tuổi trung bình 52,37 ± 16,22 (18 – 84), thường gặp từ 41 – 62 tuổi. Tỉ lệ nam: nữ là 1,14. Đa số BN được phát hiện bệnh với các triệu chứng đỏ da niêm (92%), tăng huyết áp (70%), nhức đầu (52%). Triệu chứng lách to chiếm 43%, ngứa chiếm 14%, huyết khối chiếm 10%, khơng có bệnh nhân có triệu chứng xuất huyết . Cận lâm sàng Đa số bệnh nhân có hình ảnh tủy tăng sinh(87%), nồng độ EPO thấp chiếm tỉ lệ cao(83%). Nồng độ Hemoglobin trung bình 18,77 ± 1,49 g/dl. Số lượng BC trung bình 11,45 ± 5,59x 109/L), trong đó số lượng BC cao nhất là 22,13 x 109/L. Số lượng TC trung bình 327,50 ± 136,05 x 109/L, trong đó số lượng TC cao nhất là 766 x 109/L. Đặc điểm huyết học của 2 nhóm có và khơng có đột biến JAK2V617F Giá trị trung bình của nồng độ hemoglobin, số lượng bạch cầu và tiểu cầu và giữa 2 nhóm có và khơng có đột biến JAK2 được trình bày ở bảng 1. 168 Chuyên Đề Truyền Máu – Huyết Học Nồng độ Hb trung bình là 18,77g/dl tương đương với các tác giả trong nước, cao hơn một số nghiên cứu nước ngồi. Kết quả nghiên cứu của chúng tơi có tỉ lệ bệnh nhân giảm EPO là 83%, cao hơn các nghiên cứu trong và ngoài nước, 87% bệnh nhân có hình ảnh tủy tăng sinh. Khi khảo sát đột biến gien bằng kỹ thuật ASO‐PCR, chúng tơi phát hiện 73,3% BN có mang đột biến JAK2V617F. Kết quả này thấp hơn so với các tác giả Huỳnh Hương, Tefferi A, Zhao R, Baxter EJ(8,3,Error! Reference source not found.,1) tương đương với tác giả Levine(5) . So sánh một số đặc điểm về huyết học giữa 2 nhóm có và khơng có đột biến JAK2V617F, chúng tơi ghi nhận hai nhóm có nồng độ Hemoglobin trung bình tương đương nhau, nhóm đột biến có độ tuổi lớn hơn (p0,05). KẾT LUẬN Qua nghiên cứu 30 bệnh nhân Đa hồng cầu tiên phát tại Bệnh viện Chợ Rẫy, chúng tơi rút ra một số kết luận sau: Bệnh gặp ở cả 2 giới, nam nhiều hơn nữ, độ tuổi thường gặp là 41 ‐62 tuổi, nồng độ Hb trung bình18,77g/dl, 73,3% bệnh nhân có đột biến JAK2V617F, 83% bệnh nhân giảm EPO, 87% bệnh nhân có hình ảnh tủy tăng sinh, nhóm có đột biến có độ tuổi cao hơn có ý nghĩa thống kê. Việc phát hiện ra đột biến JAK2V617F là một bước ngoặc quan trọng trong chẩn đốn các nhóm bệnh thuộc Hội chứng tăng sinh tủy, mở ra thời kỳ nghiên cứu các thuốc điều trị trúng đích đối với các bệnh có đột biến JAK2V617F. TÀI LIỆU THAM KHẢO Baxter EJ., Scott LM., Campbell PJ. (2005), ʺAcquired mutation of the tyrosine kinase JAK2 in human myeloproliferative disordersʺ, Lancet., 365, pp. 1054‐1061. Nghiên cứu Y học Berlin NI. (1975), ʺDiagnosis and classification of the polycythemiasʺ, Semin Haematol 12, pp. 339‐351. Huỳnh Hương, Phan Thị Xinh (2012). “Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và đột biến gen JAK2V617F trên bệnh nhân Đa hồng cầu nguyên phát” Kralovics R., Passamonti F., Buser AS. (2005), ʺ A gain‐of‐ function mutation of JAK2 in myeloproliferative disordersʺ, N Engl J Med, 352, pp. 1779‐1790. Levine RL., Wadleigh M., Cools J. (2005), ʺActivating mutation in the tyrosine kinase JAK2 in polycythemia vera, essential thrombocythemia, and myeloid metaplasia with myelofibrosisʺ, Cancer Cell, 7, pp. 387‐397. Messinezy M, Westwood NB, El‐Hemaidi I (2002), ʺSerum erythropoietin values in erythrocytoses and in primary thrombocythaemiaʺ, British Journal of Haematology, 117, pp. 47‐ 53. Vannucchi AM, Antonioli E, Guglielmelli P (2007), ʺProspective identification of high‐risk polycythemia vera patients based on JAK2V617F allele burdenʺ, Leukemia, 21, pp. 1952–1959. Zhao R, Xing S, Li Z, Fu X, Li Q, Krantz SB et al (2005). Identification of acquired JAK2 mutation in polycythemia vera. J Biol Chem ; 280: 22788‐ 22792 Ngày nhận bài báo: 30 tháng 7 năm 2013 Ngày phản biện: 16 tháng 8 năm 2013 Ngày bài báo được đăng: 22 tháng 10 năm 2013 169 Chuyên Đề Truyền Máu – Huyết Học ... 270,25±101,88 Tỉ lệ đột biến gien JAK2V617F Bảng 2: Tỉ lệ đột biến JAK2V617F Số bệnh nhân Tỉ lệ Có đột biến 22 73,3% Không đột biến 08 26,7% KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU BÀN LUẬN Đặc điểm bệnh nhân Bước đầu nghiên cứu 30 bệnh nhân Đa hồng ... Nghiên cứu này được tiến hành tại Bệnh viện Chợ Rẫy nhằm khảo sát các đặc điểm về Nghiên cứu Y học huyết học và tỉ lệ đột biến JAK2V617F trên bệnh nhân ĐHCNP. ĐỐI TƯỢNG ‐ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ... Bước đầu nghiên cứu 30 bệnh nhân Đa hồng cầu ngun phát tại Bệnh viện Chợ Rẫy, kết quả của chúng tơi tương đương với các tác giả khác trong và ngồi nước khi quan sát thấy tuổi thường gặp nhất là 41 – 62 tuổi, nam nhiều hơn