Mục tiêu nghiên cứu nhằm xác định các đặc điểm về huyết học, tỉ lệ đột biến JAK2V617F trên bệnh nhân đa hồng cầu nguyên phát. Nghiên cứu tiến hành trên tất cả các bệnh nhân chẩn đoán đa hồng cầu nguyên phát theo tiêu chuẩn của WHO 2008 tại Bệnh viện Chợ Rẫy từ tháng 01 năm 2012 đến tháng 01 năm 2013.
Trang 1Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Số 5 * 2013
Chuyên Đề Truyền Máu – Huyết Học
166
KHẢO SÁT ĐỘT BIẾN JAK2V617F TRÊN BỆNH NHÂN
ĐA HỒNG CẦU NGUYÊN PHÁT TẠI BỆNH VIỆN CHỢ RẪY
Bùi Lê Cường*, Tô Phước Hải*, Lê Hoàng Oanh*
TÓM TẮT
Mục tiêu: Xác định các đặc điểm về huyết học, tỉ lệ đột biến JAK2V617F trên bệnh nhân Đa hồng cầu
nguyên phát.
Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Tất cả các BN chẩn đoán Đa hồng cầu nguyên phát (ĐHCNP)
theo tiêu chuẩn của WHO 2008 tại Bệnh viện Chợ Rẫy từ tháng 01 năm 2012 đến tháng 01 năm 2013; nghiên cứu mô tả hồi cứu.
Kết quả: 30 BN được chẩn đoán ĐHCNP có tuổi trung bình 53 (18 – 84) với dấu hiệu chính là đỏ da niêm,
nhức đầu, tăng huyết áp. Tỉ lệ nam/nữ 1,14. Nồng độ Hemoglobin trung bình là 18,8g/dl. Tỉ lệ phát hiện đột biến JAK2V617F là 73,3%. Hai nhóm có nồng độ Hemoglobin tương đương nhau, nhóm đột biến có độ tuổi lớn hơn (p<0,05), số lượng BC và tiểu cầu cao hơn (p>0,05).
Kết luận: Việc phát hiện ra đột biến JAK2V617F là một bước ngoặc quan trọng trong chẩn đoán các nhóm
bệnh thuộc Hội chứng tăng sinh tủy, mở ra thời kỳ nghiên cứu các thuốc điều trị trúng đích đối với các bệnh có đột biến JAK2V617F.
Từ khoá: Hội chứng tăng sinh tủy (HCTST), Đa hồng cầu nguyên phát (TTCNP), JAK2V617F.
ABSTRACT
CHARACTERISTICS OF THE JAK2V617F MUTATION IN ESSENTIAL THROMBOCYTHEMIA
IN CHO RAY HOSPITAL
Bui Le Cuong, To Phuoc Hai, Le Hoang Oanh * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 17 ‐ No 5 ‐ 2013: 165 ‐
168
Objectives: To characterize the features of hematology, the rate of JAK2V617F mutation in Polycythemia
vera.
Method and patients: A retrospective study was conducted on all patients diagnosed as Polycythemia vera
(PV) according to WHO 2008 classification, at Cho Ray from January 2012 to January 2013.
Results: A total of 30 ET patients, with the mean age of 53 years (range: 18 – 84 years) with the major
symptom of ruddy cyanosis, headache, hypertension. The ratio of male to female is 1.14. Mean hemoglobin concentration is 18,8g/dl. The rate of JAK2V617F mutation was 73.3%. Two groups have the same hemoglobin concentration, mean age with mutation group is higher than one without mutation (p<0.05), white blood cell count and platelet of mutation group are higher (p>0.05)
Conclusions: The detection of JAK2V617F mutation has a very important role in diagnosis of myeloid
proliferative neoplasms. It will open the time of research the target drugs for diseases with JAK2V617F mutation.
Key words: Myeloid proliferative neoplasms (MPNs), Polycythemia Vera (PV), JAK2V617F.
ĐẶT VẤN ĐỀ
Hội chứng tăng sinh tủy là một nhóm bệnh
của tủy xương do phát triển riêng một dòng
hoặc tất cả các dòng tế bào tạo ra tại tủy. Theo
Tổ chức Y tế thế giới (WHO 2008), nhóm này bao gồm 7 bệnh: Bạch cầu mạn dòng tủy (CML),
* Bệnh viện Chợ Rẫy
Tác giả liên lạc: BS. CKI. Bùi Lê Cường ĐT: 0903 850 950 Email: cuongbuile@yahoo.com
Trang 2Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Số 5 * 2013 Nghiên cứu Y học
Chuyên Đề Truyền Máu – Huyết Học 167
Bạch cầu mạn dòng Neutrophil (CNL), Bạch cầu
mạn dòng Eosinophil(CEL), Đa hồng cầu
nguyên phát (ĐHCNP), Tăng tiểu cầu nguyên
phát (TTCNP), Xơ tủy vô căn và Tăng sinh tế
bào Mast. Tất cả đều có nguyên nhân từ tế bào
máu gốc vạn năng sản sinh quá mức một hoặc
nhiều dòng tế bào, một số bệnh thuộc nhóm này
chuyển thành Bạch cầu cấp. Các bệnh Đa hồng
cầu nguyên phát, Tăng tiểu cầu nguyên phát và
Xơ tủy vô căn có thể chuyển dạng lẫn nhau.
Nhờ sự tiến bộ về sinh học phân tử và di
truyền tế bào, ngày nay người ta đã tìm ra được
các đột biến gây ra đối với từng bệnh trong
nhóm này. CML là do chuyển đoạn giữa NST số
9 và 22, CNL là do chuyển đoạn giữa NST 15 và
19, CEL liên quan đến đột biến gen PDGFR. Ba
bệnh còn lại gồm ĐHCNP, TTCNP và Xơ tủy vô
căn có liên quan đến đột biến gen JAK2 tại vị trí
617, guanine được thay bằng thymidine và kết
quả là Valine được thay bằng Phenylalanine.
Đột biến này làm xáo trộn dẫn truyền qua trục
JAK‐STAT, làm sản sinh quá mức các tế bào
máu không kiểm soát được. Nhóm bệnh này có
tiên lượng khá tốt, các phương pháp điều trị
kinh điển gồm các thuốc Hydroxyurea,
Busulfan, Interferon, Bipobroman có thể kiểm
soát được bệnh và kéo dài thời gian sống 10 ‐20
năm. Tuy nhiên, một số trường hợp chuyển
sang bệnh lý ác tính như Rối loạn sinh tủy hoặc
AML và tử vong, bệnh nhân cũng có thể tử vong
do các biến chứng huyết khối hoặc xuất huyết.
Tại Việt Nam đã có một số nghiên cứu về
đột biến JAK2V617F nhưng cỡ mẫu tương đối
nhỏ.
Tại Bệnh viện Chợ Rẫy, ĐHCNP là bệnh rất
thường gặp với những biểu hiện lâm sàng rất đa
dạng, được phát hiện tại nhiều chuyên khoa
khác nhau không phải Huyết học. Đa số bệnh
nhân được điều trị bằng Hydroxyurea và chống
kết tập tiểu cầu. Chúng tôi chưa có thống kê cụ
thể về số lượng bệnh nhân và tỉ lệ đột biến
JAK2V617F phát hiện được trên nhóm bệnh này.
Nghiên cứu này được tiến hành tại Bệnh
viện Chợ Rẫy nhằm khảo sát các đặc điểm về
huyết học và tỉ lệ đột biến JAK2V617F trên bệnh nhân ĐHCNP.
ĐỐI TƯỢNG ‐ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu
Tiêu chuẩn chọn mẫu
Các BN chẩn đoán ĐHCNP theo tiêu chuẩn của WHO 2008 tại BV Chợ Rẫy từ tháng 01 năm
2012 đến tháng 01 năm 2013.
Tiêu chuẩn loại trừ
‐ Được chẩn đoán Bạch cầu mạn dòng tủy, Tăng tiểu cầu nguyên phát, Tăng sinh tủy mạn tính, Xơ tủy vô căn.
‐ Không có điều kiện tái khám thường xuyên theo lịch hẹn của bệnh viện.
‐ Thân nhân hoặc bệnh nhân không đồng ý tham gia nghiên cứu.
Phương pháp nghiên cứu
‐ Thiết kế nghiên cứu: mô tả hồi cứu.
Xử lý số liệu
‐ Số liệu thu thập được nhập vào phần mềm Epidata 3.1.
Phương pháp thống kê: Sử dụng phần mềm thống kê STATA 10.0.
Trình bày kết quả dưới dạng bảng tần số, biểu đồ.
‐ Giá trị các chỉ số được trình bày dưới dạng trung bình và độ lệch chuẩn, kiểm định giữa.
2 giá trị thống kê bằng phép kiểm Student hoặc trình bày dưới dạng phần trăm (%) và kiểm định sự khác biệt giữa hai nhóm về mặt thống kê bằng kiểm định chi‐square.
‐ So sánh giá trị của một biến định lượng trên nhiều nhóm khác nhau bằng phân tích Anova, sự khác biệt có ý nghĩa với p < 0,05.
‐ Mức độ tương quan giữa hai biến được biểu thị bằng hệ số tương quan r, xác lập đồ thị tương quan và phương trình hồi qui tuyến tính.
Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê khi khoảng tin cậy > 95% (p < 0,05).
Trang 3Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Số 5 * 2013
Chuyên Đề Truyền Máu – Huyết Học
168
Tiêu chuẩn chẩn đoán ĐHCNP theo WHO
2008:
Tiêu chuẩn chính
+ Hb > 18,5 g/dl(nam) > 16,5g/dl(nữ).
+ Có đột biến JAK2V617F.
Tiêu chuẩn phụ
+ Tủy đồ cho thấy sự tăng sinh.
+ Nồng độ EPO huyết thanh giảm.
Tăng trưởng dòng hồng cầu nội sinh.
Chẩn đoán Đa hồng cầu nguyên phát khi có
2 tiêu chuẩn chính và 1 tiêu chuẩn phụ hoặc tiêu
chuẩn chính đầu tiên và 2 tiêu chuẩn phụ.
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
Đặc điểm bệnh nhân
Lâm sàng
Trong nghiên cứu có 30 BN được chẩn đoán
ĐHCNP với tuổi trung bình 52,37 ± 16,22 (18 –
84), thường gặp từ 41 – 62 tuổi. Tỉ lệ nam: nữ là
1,14. Đa số BN được phát hiện bệnh với các triệu
chứng đỏ da niêm (92%), tăng huyết áp (70%),
nhức đầu (52%).
Triệu chứng lách to chiếm 43%, ngứa chiếm
14%, huyết khối chiếm 10%, không có bệnh
nhân có triệu chứng xuất huyết .
Cận lâm sàng
Đa số bệnh nhân có hình ảnh tủy tăng
sinh(87%), nồng độ EPO thấp chiếm tỉ lệ
cao(83%).
Nồng độ Hemoglobin trung bình 18,77 ±
1,49 g/dl. Số lượng BC trung bình 11,45 ± 5,59x
109/L), trong đó số lượng BC cao nhất là 22,13 x
109/L. Số lượng TC trung bình 327,50 ± 136,05 x
109/L, trong đó số lượng TC cao nhất là 766 x
109/L.
Đặc điểm huyết học của 2 nhóm có và
không có đột biến JAK2V617F
Giá trị trung bình của nồng độ hemoglobin,
số lượng bạch cầu và tiểu cầu và giữa 2 nhóm có
và không có đột biến JAK2 được trình bày ở
bảng 1.
Bảng 1: Đặc điểm huyết học của 2 nhóm có và không
có đột biến JAK2V617F
Nồng độ Hb trung
Số lượng BC trung bình (x10 9 /L) 14,79±11,13 8,77 ± 4,41
Số lượng TC trung bình (x10 9 /L) 348,31±142,82 270,25±101,88
Tỉ lệ đột biến gien JAK2V617F Bảng 2: Tỉ lệ đột biến JAK2V617F
Có đột biến Không đột biến
Tỉ lệ 73,3% 26,7%
BÀN LUẬN
Bước đầu nghiên cứu 30 bệnh nhân Đa hồng cầu nguyên phát tại Bệnh viện Chợ Rẫy, kết quả của chúng tôi tương đương với các tác giả khác trong và ngoài nước khi quan sát thấy tuổi thường gặp nhất là 41 – 62 tuổi, nam nhiều hơn
nữ, phần lớn BN được phát hiện đỏ da niêm (92%), tăng huyết áp (70%), nhức đầu (52%), tương đương với kết quả của các tác giả Huỳnh Hương, Berlin NI.(3,2) huyết khối chiếm 10% tương đương với tác giả AM. Vannucchi (7) Nồng độ Hb trung bình là 18,77g/dl tương đương với các tác giả trong nước, cao hơn một
số nghiên cứu nước ngoài.
Kết quả nghiên cứu của chúng tôi có tỉ lệ bệnh nhân giảm EPO là 83%, cao hơn các nghiên cứu trong và ngoài nước, 87% bệnh nhân có hình ảnh tủy tăng sinh.
Khi khảo sát đột biến gien bằng kỹ thuật ASO‐PCR, chúng tôi phát hiện 73,3% BN có
mang đột biến JAK2V617F. Kết quả này thấp
hơn so với các tác giả Huỳnh Hương, Tefferi A, Zhao R, Baxter EJ(8,3,Error! Reference source not found.,1) tương đương với tác giả Levine(5) .
So sánh một số đặc điểm về huyết học giữa 2
nhóm có và không có đột biến JAK2V617F,
chúng tôi ghi nhận hai nhóm có nồng độ Hemoglobin trung bình tương đương nhau, nhóm đột biến có độ tuổi lớn hơn (p<0,05), số
Trang 4Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Số 5 * 2013 Nghiên cứu Y học
Chuyên Đề Truyền Máu – Huyết Học 169
lượng BC và tiểu cầu cao hơn nhưng sự khác
biệt không có ý nghĩa thống kê(p>0,05).
KẾT LUẬN
Qua nghiên cứu 30 bệnh nhân Đa hồng cầu
tiên phát tại Bệnh viện Chợ Rẫy, chúng tôi rút ra
một số kết luận sau: Bệnh gặp ở cả 2 giới, nam
nhiều hơn nữ, độ tuổi thường gặp là 41 ‐62 tuổi,
nồng độ Hb trung bình18,77g/dl, 73,3% bệnh
nhân có đột biến JAK2V617F, 83% bệnh nhân
giảm EPO, 87% bệnh nhân có hình ảnh tủy tăng
sinh, nhóm có đột biến có độ tuổi cao hơn có ý
nghĩa thống kê.
Việc phát hiện ra đột biến JAK2V617F là một
bước ngoặc quan trọng trong chẩn đoán các
nhóm bệnh thuộc Hội chứng tăng sinh tủy, mở
ra thời kỳ nghiên cứu các thuốc điều trị trúng
đích đối với các bệnh có đột biến JAK2V617F.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1 Baxter EJ., Scott LM., Campbell PJ. (2005), ʺAcquired mutation
of the tyrosine kinase JAK2 in human myeloproliferative
disordersʺ, Lancet., 365, pp. 1054‐1061.
2 Berlin NI. (1975), ʺDiagnosis and classification of the
polycythemiasʺ, Semin Haematol 12, pp. 339‐351.
3 Huỳnh Hương, Phan Thị Xinh (2012). “Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và đột biến gen JAK2V617F trên bệnh nhân Đa hồng cầu nguyên phát”
4 Kralovics R., Passamonti F., Buser AS. (2005), ʺ A gain‐of‐
function mutation of JAK2 in myeloproliferative disordersʺ, N
Engl J Med, 352, pp. 1779‐1790.
5 Levine RL., Wadleigh M., Cools J. (2005), ʺActivating mutation in the tyrosine kinase JAK2 in polycythemia vera, essential thrombocythemia, and myeloid metaplasia with
myelofibrosisʺ, Cancer Cell, 7, pp. 387‐397.
6 Messinezy M, Westwood NB, El‐Hemaidi I (2002), ʺSerum erythropoietin values in erythrocytoses and in primary
thrombocythaemiaʺ, British Journal of Haematology, 117, pp. 47‐
53.
7 Vannucchi AM, Antonioli E, Guglielmelli P (2007), ʺProspective identification of high‐risk polycythemia vera
patients based on JAK2V617F allele burdenʺ, Leukemia, 21, pp.
1952–1959.
8 Zhao R, Xing S, Li Z, Fu X, Li Q, Krantz SB et al (2005). Identification of acquired JAK2 mutation in polycythemia vera. J Biol Chem ; 280: 22788‐ 22792
Ngày nhận bài báo: 30 tháng 7 năm 2013 Ngày phản biện: 16 tháng 8 năm 2013 Ngày bài báo được đăng: 22 tháng 10 năm 2013