Bài viết nghiên cứu tiến cứu thử nghiệm lâm sàng ngẫu nhiên có đối chứng trên 102 bệnh nhân (BN) được chia đều vào 2 nhóm nuôi cấy phôi ở điều kiện nồng độ oxy 5% và 20% nhằm so sánh tỷ lệ có thai ở 2 nhóm này.
TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 6-2014 HIỆU QUẢ BƯỚC ĐẦU CỦA PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY PHÔI Ở NỒNG ĐỘ OXY THẤP Nguyễn Thị Minh*; Quản Hoàng Lâm* TÓM TẮT Nghiên cứu tiến cứu thử nghiệm lâm sàng ngẫu nhiên có đối chứng 102 bệnh nhân (BN) chia vào nhóm ni cấy phơi điều kiện nồng độ oxy 5% 20% nhằm so sánh tỷ lệ có thai nhóm Các BN sử dụng FSH để kích thích buồng trứng Chọc hút noãn sau tiêm hCG 36 Cấy noãn với tinh trùng phương pháp IVF ICSI Đánh giá phôi vào ngày nhóm để lựa chọn - phơi ni tiếp Các phơi lại trữ lạnh Kết cho thấy đặc điểm BN, dự trữ buồng trứng, kết kích thích buồng trứng, kết chuyển phơi khơng khác nhóm nghiên cứu Tỷ lệ có thai lâm sàng nhóm ni cấy phơi nồng độ oxy 5% (64,7%) cao có ý nghĩa thống kê so với (45,1%) nhóm ni cấy phơi có nồng độ oxy 20% Tỷ lệ BN có phơi trữ lạnh cao nhóm nồng độ oxy 5% Kết luận: tỷ lệ có thai lâm sàng ni phơi ngày nồng độ oxy 5% cao tỷ lệ có thai nuôi cấy phôi nồng độ oxy 20% * Từ khóa: Ni cấy phơi; Tỷ lệ có thai; Nồng độ oxy thấp 55 TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 6-2014 INITIAL EFFECTS OF EMBRYOS CULTURE IN LOW OXYGEN CONCENTRATION SUMMARY In this prospective randomized clinical study, 102 patients were divided into groups, in which embryos were cultured in 5% and 20% oxygen concentration Objectives: To compare pregnancy rate between groups Method: using FSH to stimulate ovaries Oocytes retrieval after 36 hours’ hCG nd injection Fertilization by conventional IVF or ICSI On the day 2, - embryos were selected to th culture to day in both group Remained embryos were frozen by vitrification method Results: there were no differences in characteristics, ovarian reserve, ovarian stimulation and embryos transfer in both groups Clinical pregnancy rate in 5% oxygen group was 64.7%, significantly higher than 45.1% in 20% oxygen group The number of patient with frozen embryo was higher in the group of 5% oxygen concentration Conclussion: Clinical pregnancy rate on day in 5% oxygen group was higher than that in 20% oxygen group * Key words: Embryo culture; Pregnancy rate; Low oxygen concentration * Học viện Quân y Người phản hồi (Corresponding): Nguyễn Thị Minh (minhn77@gmail.com) Ngày nhận bài: 08/06/2014; Ngày phản biện đánh giá báo: 02/07/2014 Ngày báo đăng: 08/08/2014 ĐẶT VẤN ĐỀ Nghiên cứu thực nghiệm cho thấy nồng độ oxy lòng vòi tử cung chiếm - 8% buồng tử cung < 2% [7] Tuy vậy, lĩnh vực hỗ trợ sinh sản, nuôi cấy phôi với nồng độ oxy 20% thực 30 năm qua Cho đến nay, nhiều trung tâm tiếp tục sử dụng hệ thống nuôi cấy Kết nghiên cứu thực nghiệm cho thấy nồng độ oxy khơng khí ảnh hưởng khơng tốt cho phơi, phản ứng oxy hóa với nồng độ oxy với nồng độ oxy thấp cho kết tương tự Tuy nhiên, số lại cho kết ngược lại [5, 7] Tại Việt Nam, hầu hết trung tâm hỗ trợ sinh sản sử dụng hệ thống tủ nuôi cấy với nồng độ oxy 20%, mà chưa sử dụng tủ cấy nồng độ oxy thấp Chúng thực nghiên cứu nhằm: So sánh tỷ lệ có thai chuyển phôi ngày nuôi cấy nồng độ oxy 5% với nuôi cấy nồng độ oxy 20% ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Nghiên cứu thử nghiệm lâm sàng ngẫu cao tạo gố 0,329 nỗn 475 phơi Nhóm ni cấy phơi E2 ngày (IU/l) nồng độ oxy 20% thu 501 noãn Số nang thứ cấp 13,24 + 17,3 431 phôi (bảng 2) 47,94 + 67,2 47,17 + 50,3 9,63 + 4,8 0,948 0,167 Cả nhóm BN nghiên cứu có độ tuổi thời gian vơ sinh tương đương 58 TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 6-2014 Các số đánh giá dự trữ buồng trứng bao gồm nồng độ FSH, nồng độ LH số lượng nang thứ cấp tương đương nhóm nghiên cứu (p > 0,05) Dự trữ buồng trứng tốt khơng có khác biệt đặc điểm BN nhóm BN nghiên cứu Đặc điểm kích thích buồng trứng Bảng 2: Đặc điểm kết kích thích buồng trứng p Tổng liều FSH trung bình 2107,14 + 492,9 2214,10 + 617,3 0,344 Nồng độ E2 ngày tiêm hCG 6126,86 + 3434,7 5145,2 + 3662,4 0,170 Tổng số noãn 515 501 Số noãn trung bình 10,1 + 3,6 9,82 + 4,3 Tổng số phôi 475 431 9,31 + 3,5 8,45 + 3,9 Số phơi thu 0,729 0,244 Sự khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê tổng liều FSH sử dụng, nồng độ E2 ngày tiêm hCG, số noãn chọc hút số phơi tạo thành nhóm nghiên cứu (p > 0,05) Chứng tỏ dự trữ buồng trứng BN hai nhóm tương đương Kết chuyển phôi Bontekoe nghiên cứu với 2.422 BN cho kết tỷ lệ có thai thai nhi sống khỏe mạnh nhóm ni cấy phơi với nồng độ oxy thấp cao nhóm ni cấy phôi nồng độ oxy 20% [1] Trong nghiên cứu này, thời gian theo dõi BN đến sinh ngắn nên chưa có kết luận tỷ lệ sinh sống tỷ lệ bất thường thai nhóm có khác khơng Tuy nhiên, kết bước đầu, khả quan tỷ lệ có thai lâm sàng số đánh giá thành công phương pháp thụ tinh ống nghiệm Trong nhóm ni cấy phơi nồng độ oxy 5%, 82,4% BN có phơi trữ lạnh, nhóm ni cấy phơi nồng độ 20% có 72,5% BN có phơi trữ lạnh Như vậy, nồng độ oxy thấp tạo điều kiện cho phôi phát triển tốt hơn, chất lượng tốt nên số lượng BN có phơi trữ lạnh cao Tuy nhiên, nghiên cứu bước đầu chưa có thời gian theo dõi nên chưa đánh giá chất lượng phôi trữ lạnh KẾT LUẬN Tỷ lệ có thai lâm sàng ni phơi ngày nồng độ oxy 5% cao tỷ lệ có thai nuôi cấy phôi nồng độ oxy 20% TÀI LIỆU THAM KHẢO Bontekoe S, Mantikou E, van Wely M et al Bảng 3: Kết chuyển phôi có thai Low oxygen concentrations for embryo culture in assisted reproductive technologies Cochrane p Số phơi chuyển trung bình 3,57 + 0,9 3,55 + 0,6 0,163 Niêm mạc tử cung 12,13 + 2,7 (mm) 11,45 + 2,1 0,166 Tỷ lệ có thai Tỷ lệ BN có phơi trữ lạnh 64,7% (33/51) 45,1% (23/51) 0,024 82,4% 72,5% 0,041 Số phôi chuyển trung bình, độ dày niêm mạc tử cung nhóm khác khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Tuy nhiên, tỷ lệ có thai nhóm phơi ni cấy nồng độ oxy thấp 5% 64,7%, cao có ý nghĩa thống kê so với nhóm phơi ni cấy nồng độ 20% (45,1%) (p < 0,05) Kết nghiên cứu phân tích gộp 59 Database of Systematic Reviews 2012, Issue Art No: CD008950 DOI:10.1002/14651858.CD008950 2012 James W.Catt, Michael Henman Toxic effects of oxygen on human embryo development Human Reproduction 2000, Vol 15, (Suppl 2), pp.199-206 Javier I García, Soledad Sepúlveda, Luis Noriega-Hoces Beneficial effect of reduced oxygen concentration with transfer of blastocysts in IVF patients older than 40 years old Health 2010, Vol 2, No 9, pp.1010-1017 John C.M.Dumoulin, Chantal J.J.Meijers, Marijke Bras Effect of oxygen concentration TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 6-2014 on human in-vitro fertilization and embryo culture Human Reproduction, 1999, Vol 14, No 2, pp.465-469 Kovacic B, Vlaisavljevic V Influence of atmospheric versus reduced oxygen concentration on development of human blastocysts in vitro: A prospective study on sibling oocytes Reproductive Biomedicine Online 2008, 17 (2), pp.229-236 Kovacic B Culture systems: low-oxygen culture Methods Mol Biol 2012, 912, pp.249-272 Meintjes M, Hill K, Johnston S The effect of lowered incubator oxygen tension on implantation, pregnancy and cryopreservation rates in a predominantly Day-5 embryo transfer program Fertility and Sterility 2000, 74, Suppl (3), p.256 60 ... thống tủ nuôi cấy với nồng độ oxy 20%, mà chưa sử dụng tủ cấy nồng độ oxy thấp Chúng thực nghiên cứu nhằm: So sánh tỷ lệ có thai chuyển phơi ngày nuôi cấy nồng độ oxy 5% với nuôi cấy nồng độ oxy 20%... tiếp tục sử dụng hệ thống nuôi cấy Kết nghiên cứu thực nghiệm cho thấy nồng độ oxy khơng khí ảnh hưởng khơng tốt cho phơi, phản ứng oxy hóa với nồng độ oxy với nồng độ oxy thấp cho kết tương tự Tuy... kết bước đầu, khả quan tỷ lệ có thai lâm sàng số đánh giá thành công phương pháp thụ tinh ống nghiệm Trong nhóm ni cấy phơi nồng độ oxy 5%, 82,4% BN có phơi trữ lạnh, nhóm ni cấy phơi nồng độ