Phát hiện đột biến kháng thuốc của HBV trên bệnh nhân nhiễm HBV mạn tính chưa điều trị bằng kỹ thuật giải trình tự

Nội dung bài viết với mục tiêu xác định đột biến kháng thuốc của HBV trên bệnh nhân nhiễm HBV mạn tính chưa điều trị. Nghiên cứu tiến hành từ tháng 1/2013 đến tháng 9/2014 tiến hành thu thập mẫu huyết thanh từ bệnh nhân nhiễm HBV mạn tính chưa điều trị tại một số phòng khám chuyên khoa gan mật, tiêu hóa tại TP. Cần Thơ.

Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 19 * Phụ Số * 2015 Nghiên cứu Y học PHÁT HIỆN ĐỘT BIẾN KHÁNG THUỐC CỦA HBV TRÊN BỆNH NHÂN NHIỄM HBV MẠN TÍNH CHƯA ĐIỀU TRỊ BẰNG KỸ THUẬT GIẢI TRÌNH TỰ Nguyễn Thị Hải Yến*, Nguyễn Thanh Bảo**, Cao Minh Nga** TÓM TẮT Đặt vấn đề: Các thuốc tương tự nucleos(t)ide nhóm thuốc sử dụng điều trị bệnh viêm gan B mạn tính (nhóm lại Interferon), có tác dụng ức chế trình nhân lên virus Tuy nhiên, sử dụng với thời gian kéo dài, áp lực chọn lọc thuốc dễ làm phát sinh đột biến kháng thuốc virus Tại Việt Nam chưa có nhiều nghiên cứu đột biến kháng thuốc người nhiễm HBV mạn tính chưa điều trị Mục tiêu: Xác định đột biến kháng thuốc HBV bệnh nhân nhiễm HBV mạn tính chưa điều trị Phương pháp: Tiền cứu, mô tả cắt ngang Từ tháng 1/2013 đến tháng 9/2014 tiến hành thu thập mẫu huyết từ bệnh nhân nhiễm HBV mạn tính chưa điều trị số phòng khám chuyên khoa gan mật, tiêu hóa TP Cần Thơ Thực xét nghiệm HBeAg kỹ thuật ELISA, định lượng HBV DNA kỹ thuật Realtime PCR Các mẫu huyết có kết định định lượng HBV DNA > 103 copies/ml giải trình tự xác định đột biến kháng thuốc Kết quả: Có 362 mẫu huyết có tải lượng HBV DNA > 104 copies/ml giải trình tự tìm đột biến kháng thuốc Không phát đột biến có liên quan đến kháng thuốc tương tự nucleos(t)ide Có 29 mẫu có đột biến V207M ( 8% ) Số mẫu huyết có HBeAg (+) 196 mẫu (54,1%) Có 238 mẫu huyết (65,7 %) có tải lượng HBV DNA huyết ≥ 105 copies/ml Tỉ lệ đột biến rtV207M nhóm có tải lượng HBV DNA huyết ≥ 105 copies/ml cao nhóm có tải lượng HBV DNA huyết < 105 copies/ml có ý nghĩa thống kê Khơng ghi nhân mối liên quan đột biến rtM207V với yếu tố tuổi, giới tính tình trạng HBeAg Kết luận: Khơng phát đột biến có liên quan đến kháng thuốc tương tự nucleos(t)de Tỉ lệ đột biến rtV207M 8% Có khác biệt có ý nghĩa thống kê phân bố đột biến nhóm HBV DNA < 105 copies/ml ≥ 105 copies/ml Từ khóa: viêm gan B, đồng phân nucleos(t)ide, đột biến kháng thuốc, nhiễm HBV mạn tính, bệnh nhân chưa điều trị ABSTRACT DETECTION OF ANTIVIRAL DRUGS RESISTANTS MUTANTS OF HEPATITIS B VIRUS AMONG TREATMENT NAÏVE CHRONIC HEPATIS B VIRUS INFECTED PATIENTS BY SEQUENSING Nguyen Thi Hai Yen, Nguyen Thanh Bao, Cao Minh Nga * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 19 - Supplement of No - 2015: 365 - 368 Background: Nucleot(s)ide analogs group is one of two kinds of antiviral drug for treating Hepatitis B (the other one is Interferon), which inhibits effectively the replication of virus However, when long term using, it is easily to emerge drug resistant mutants in virus There have not been many studies in drug resistant mutants of HBV among treatment naïve chronic hepatitis B virus infected patients Objectives: To determine the rates of drug resistant mutants in treatment naïve chronic hepatitis B virus * Khoa Y, Đại học Cần Thơ ** Bộ môn Vi sinh, Khoa Y - Đại học Y Dược TP HCM Tác giả liên lạc: ThS BS Nguyễn Thị Hải Yến ĐT: 0908600366 Email: haiyenydct@yahoo.com Nhiễm 365 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 19 * Phụ Số * 2015 infected patients Methods: Retrospective, cross-sectional description method Sera of chronic hepatitis B virus infected patients were collected at some hepatobiliary and gastrointestinal clinics in CanTho city from January 2013 to December 2014 HBeAg tests were done HBV DNA quantitating were taken by Realtime PCR method Samples with over 103 HBV DNA copies/ml sera were detected drug resistant mutants by sequencing Results: 362 samples with over 103 HBV DNA copies/ml sera of treatment naïve chronic hepatitis B virus infected patients were available for resistant mutants detecting No resistant mutant was detected in these samples 29 samples (8%) with rtV207M mutant was detedcted There were 196 samples (54.1%) with HBeAg positive.There were 238 samples (65.7%) with 103 HBV DNA copies/ml viral load There was a significant association between the ratio of rtV207M mutant and viral loading No relationship was seen between rtV297M mutant and gender or HBeAg status Conclusion: No resistant mutant was detected in these samples The mutant of rtV207M was 8% There was a significant association between the ratio of rtV207M mutant and viral loading Keywords: Hepatitis B (HBV), nucleos(t)ide analogs, drugs-resistant mutation, chronic HBV infection, treatment nạve patient gan mật, tiêu hóa TP Cần Thơ từ tháng 1/2013 ĐẶT VẤN ĐỀ đến tháng 9/2014 Viêm gan B (HBV) vấn đề sức Phương pháp nghiên cứu khỏe quan tâm tồn giới khơng Bệnh nhân chọn vào mẫu nghiên cứu tỉ lệ người nhiễm bệnh cao mà lấy huyết làm xét nghiệm HBeAg biến chứng nguy hiểm bệnh xơ kỹ thuật ELISA bệnh viện Trường Đại gan ung thư tế bào gan Hiện có nhóm học Y Dược Cần Thơ Sau đó, mẫu thuốc sử dụng điều trị HBV Đó tiến hành định lượng HBV DNA kỹ thuật thuốc tương tự nucleos(t)de Intreferon Realtime PCR phòng xét nghiệm Vi sinh Trường Nhóm thuốc tương tự nucleos(t)de có tác dụng ức Đại học Y dược TP Hồ Chí Minh Những mẫu có chế q trình nhân lên virus, tác dụng phụ tải lượng virus > 103 copies/ml tiến hành giải sử dụng chủ yếu điều trị HBV Tuy trình tự đoạn gen P HBV để phát đột nhiên, sử dụng với thời gian kéo dài, áp biến kháng thuốc(9) Kỹ thuật giải trình tự lực chọn lọc thuốc dễ làm phát sinh đột thực viện Pasteur TP Hồ Chí Minh biến kháng thuốc virus, làm giảm hiệu điều trị Tại Việt Nam, có nhiều nghiên cứu đột biến kháng thuốc HBV sau điều trị(1,6,7,8) Riêng người nhiễm HBV mạn tính chưa điều trị, Việt Nam chưa có nhiều nghiên cứu đột biến kháng thuốc Biến số nghiên cứu: giới, tuổi, tải lượng DNA HBV huyết ĐỐI TƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Thiết kế nghiên cứu Trong thời gian từ tháng 1/2013 đến tháng 9/2014, thu thập 362 mẫu huyết bệnh nhân nhiễm HBV mạn tính chưa điều trị, có tải lượng HBV DNA > 103 copies/ml để thực kỹ thuật giải trình tự phát đột biến kháng thuốc Tiền cứu, mô tả cắt ngang Đối tượng nghiên cứu Người nhiễm HBV có HBsAg(+) tháng đến khám số phòng khám chuyên khoa 366 Nhập phân tích số liệu phần mền SPSS 18.0, dùng phép kiểm χ2 để so sánh tỉ lệ với mức có ý nghĩa thống kê p