Nghiên cứu tỷ lệ, sự phân bố và mức độ kháng kháng sinh của một số chủng trực khuẩn Gram âm sinh beta-lactamase carbapenemase tại Bệnh viện Quân y 103 giai đoạn 2010 - 2013

Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm xác định tỷ lệ, sự phân bố của các chủng Enterobacteriaceae sinh ESBL, carbapenemase phân lập tại Bệnh viện Quân y 103 giai đoạn 2010 - 2013 và xác định mức độ kháng kháng sinh của một số chủng Enterobacteriaceae sinh ESBL phân lập được.

TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 5-2015 NGHIÊN CỨU T LỆ, SỰ PHÂN BỐ VÀ MỨC ĐỘ HÁNG HÁNG SINH CỦA MỘT SỐ CHỦNG TRỰC HU N GRAM ÂM SINH β-LACTAMASE, CARBAPENEMASE TẠI BỆNH VIỆN QUÂN Y 103 GIAI ĐOẠN 2010 - 2013 Hà Thị Thu Vân*; Nguyễn Thái Sơn* T M TẮT Mục tiêu: xác định tỷ lệ, phân bố mức độ kháng kháng sinh số chủng vi khuẩn (VK) sinh ESBL, carbapenemase phân lập Bệnh viện Quân y 103 giai đoạn 2010 - 2013 Vật liệu phương pháp: chủng trực khuẩn Gram (-) gây bệnh đƣợc phân lập Khoa Vi sinh, Bệnh viện Quân y 103 từ tháng 01 - 2010 đến 12 - 2013 Lấy bệnh phẩm, nhuộm soi, ni cấy, phân lập, xác định lồi VK kháng sinh đồ theo hƣớng dẫn WHO Xác định VK sinh ESBL theo kỹ thuật Etest Xác định VK sinh carbapenemase theo nguyên lý Hodge (hƣớng dẫn CLSI) Kết kết luận: 26,6% VK thuộc nhóm Enterobacteriaceae có ESBL (+) Trong số chủng sinh ESBL, cao E coli (36,7%), sau đến E aerogenes (25,4%) Bệnh phẩm có tỷ lệ phân lập đƣợc VK sinh ESBL cao nƣớc tiểu, dịch sinh dục (32,4%), sau đến dịch vết thƣơng, vết mổ (27%) Tỷ lệ VK sinh ESBL cao khoa hồi sức (34,0%), khoa ngoại (32,8%), khoa truyền nhiễm (25,0%), thấp khoa nội (15,7%) Có chủng E coli chủng S marcescens sinh carbapenemase đƣợc phân lập tổng sổ 357 chủng Kiểu kháng đồng thời ≥ 10 kháng sinh đặc trƣng VK sinh ESBL * Từ khóa: ESBL; Carbapenemase; Kháng kháng sinh; Enterobacteriaceae Study of the Proportion, Distribution and Antibiotic Resistance Level of Bacteria Producing ESBL, Carbapenemase in 103 Hospital (Period 2010 - 2013) Summary Objectives: Monitoring the proportion, distribution and antibiotic resistance level of bacteria producing ESBL, carbapenemase in 103 Hospital from 2010 to 2013 Materials and methods: The strains of pathogenic Gram-negative bacilli were isolated at the 103 Hospital in the period from 01 - 2010 to 12 - 2013 Taking swabs, Gram stained, cultured isolates, species identification and antimicrobial susceptibility of bacteria according to WHO guidelines Detected ESBL bacteria by Etest Identify bacteria producing carbapenemase follow Hodge principle (CLSI guidelines ) Results and conclusions: There were 26.6% of strains of ESBL among Enterobacteriaceae isolated * Bệnh viện Quân y 103 Người phản hồi (Corresponding): Hà Thị Thu Vân (havan864@gmail.com) Ngày nhận bài: 19/03/2015; Ngày phản biện đánh giá báo: 14/04/2015 Ngày báo đăng: 06/05/2015 41 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 5-2015 Of the seminarians ESBL, the highest is E coli (36.7%), followed by E aerogenes (24.5%) The specimens with the highest ESBL isolated rate is urine, genital fluid (32.4%), wound and incision fluid (27%) The rate of ESBL bacteria is high in the ICU (34.0%), surgery (32.8%), infectious diseases department (25.0%) and the least is in the internal medicine departments There were strains of E coli and strain of S marcescens producing carbanpenemase isolated in 357 strains Style simultaneously resistance from 10 antibiotics is characteristics of ESBL producing bacteria * Key words: ESBL; Carbapenemase; Antibiotic resistance; Enterobacteriaceae ĐẶT VẤN ĐỀ Hiện nay, tình hình kháng kháng sinh VK gây bệnh trở thành vấn đề nghiêm trọng Ngành Y tế toàn xã hội Nhiễm trùng VK sinh ESBL, carbapenemase dẫn đến tỷ lệ thất bại cao sau điều trị kéo dài ngày nằm viện bệnh nhân (BN) Việc theo dõi mức độ kháng thuốc VK gây bệnh, đặc biệt VK sinh ESBL carbapenemase cần thiết điều trị, góp phần tích cực hạn chế lan truyền VK đa đề kháng Chúng tiến hành đề tài nhằm: - Xác định tỷ lệ, phân bố chủng Enterobacteriaceae sinh ESBL, carbapenemase phân lập Bệnh viện Quân y 103 giai đoạn 2010 - 2013 - Xác định mức độ kháng kháng sinh số chủng Enterobacteriaceae sinh ESBL phân lập ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tƣợng nghiên cứu Các chủng trực khuẩn Gram (-) gây bệnh đƣợc phân lập từ BN điều trị Bệnh viện Quân y 103 từ 01 - 2010 đến 12 - 2013 Phƣơng pháp nghiên cứu - Nghiên cứu mô tả cắt ngang kết hợp hồi cứu tiến cứu - Lấy bệnh phẩm, nhuộm soi, ni cấy, phân lập, xác định lồi VK kháng sinh đồ theo hƣớng dẫn WHO [9] - Xác định VK sinh ESBL theo kỹ thuật hai khoanh giấy kháng sinh khuếch tán thạch theo nguyên lý Kirby-Bauer [9] hƣớng dẫn CLSI Etest [7] - Xác định VK sinh carbapenemase theo nguyên lý Hodge hƣớng dẫn CLSI [6] ẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN Tỷ lệ, phân bố số chủng Enterobacteriaceae sinh enzym ESBL, carbapenemase phân lập đƣợc Bảng 1: Tỷ lệ sinh ESBL Enterobacteriaceae phân lập đƣợc NĂM 2010 LOẠI VK 2011 2012 TỔNG 2013 N n % N n % N n % N n % N n % E coli 29 31,0 12 31 38,7 16 46 34,8 25 63 39,7 62 169 36,7 E aerogenes 12 16,7 16 25,0 14 35,7 17 23,5 15 59 25,4 42 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 5-2015 Klebsiella spp 1/3 2/9 11 18,2 18 16,7 41 19,5 Citrobacter 1/5 0/2 1/2 12 25,0 23 21,7 VK khác 0 22 28 10,7 10 10 65 7,8 13 54 24,1 18 80 22,5 28 108 27,2 36 120 30,0 95 357 26,6 Tổng (N: số chủng VK sinh ESBL; n: số chủng VK phân lập được) Xét khả sinh ESBL loài VK, E coli lồi có khả sinh ESBL cao (36,7%), sau đến E aerogenes (25,4%), lồi khác thấp Một số tác giả thấy VK có tỷ lệ sinh ESBL cao K pneumoniae, E coli [1, 3] Tuy nhiên, tùy vào mơ hình bệnh tật bệnh viện, phân lập đƣợc loài VK chiếm ƣu khác Bảng 2: Tỷ lệ VK sinh ESBL theo bệnh phẩm ESBL BỆNH PHẨM n + % Nƣớc tiểu - dịch sinh dục 108 35 32,4 Dịch vết thƣơng - vết mổ 111 30 27,0 Đờm - dịch rửa phế quản 23 26,1 Máu 85 18 21,2 Dịch não tuỷ, dịch khớp, dịch màng phổi 16 18,8 Khác 14 21,4 Tổng 357 95 26,6 Theo nghiên cứu nhiều tác giả nƣớc, VK sinh ESBL tập trung chủ yếu bệnh phẩm nhƣ nƣớc tiểu, đờm, BN phải điều trị kháng sinh dài ngày [1] Bảng 3: Tỷ lệ VK sinh ESBL theo khoa lâm sàng KHOA ESBL n (+) % Hồi sức 53 18 34,0 Các khoa ngoại 134 44 32,8 Truyền nhiễm 68 17 25,0 Các khoa nội 102 16 15,7 (Χ2 = 10,45; p = 0,015) Kết tƣơng đồng với nhiều nghiên cứu nƣớc cho thấy VK sinh ESBL thƣờng gặp khoa có BN nặng, có can thiệp thủ thuật có dụng cụ xâm lấn (đặt catheter tĩnh mạch) thở máy phẫu thuật, BN phải nằm viện lâu ngày, sử dụng kháng sinh kéo dài [1, 2] 43 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 5-2015 Bảng 4: Các VK Enterobacteriaceae sinh carbapenemase phân lập đƣợc SỐ VK PHÂN LẬP ĐƢỢC SỐ VK KHÁNG CARBAPENEM E coli 169 K pnemiomae LOẠI VK SỐ VK SINH CARBAPENEMASE (-) (+) 16 11 41 2 S marcescens 22 1 E aerogenes 59 2 VK khác 66 5 357 27 21 Tổng Các chủng sinh carbapenemase gặp chủng sinh ESBL đƣợc nghiên cứu, chủng đƣợc ý vài năm gần Đây VK nguy hiểm, chúng kháng lại hầu hết kháng sinh, kể kháng sinh đƣợc ƣu tiên sử dụng để điều trị VK sinh ESBL [5, 8] Những VK chủ yếu phân lập đƣợc từ bệnh phẩm nhƣ máu, nƣớc tiểu, loại dịch vết thƣơng, vết mổ, đờm - dịch rửa phế quản Các chủng sinh carbapenemase phân lập đƣợc nghiên cứu kháng lại với hầu hết kháng sinh có, trừ chủng E coli phân lập từ nƣớc tiểu nhạy với fosfomycin Trong tƣơng lai, chủng VK gia tăng vấn đề nan giải Ngành Y tế Mức độ kháng kháng sinh VK sinh ESBL carbapenemase Biểu đồ 1: So sánh mức độ kháng thuốc E coli sinh không sinh ESBL N: số chủng kháng kháng sinh (AMC: amoxicilin + clavulanic; AN: amikacin; ATM: aztreonam; CAZ: ceftazidime CIP: ciprofloxacine; CRO: ceftriaxone; CTX: cefotaxime; CXM: cefuroxime; DO: doxycycline; FEP: cefepime; IMP: imipenem; LEV: levofloxacine) 44 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 5-2015 Tỷ lệ kháng kháng sinh chủng sinh ESBL cao rõ rệt so với chủng không sinh ESBL, chủng không sinh ESBL kháng kháng sinh mức < 40%, chủng sinh ESBL đa số kháng > 80% với kháng sinh Kết phù hợp với nghiên cứu nhiều tác giả khác công bố tính kháng thuốc chủng VK sinh ESBL [1, 3] 80.0 % 64.3 60.0 55.6 40.0 33.3 20.0 0.0 kháng - kháng sinh dịch chuyển sang kháng 10 kháng sinh Các chủng VK kháng ≥ 10 kháng sinh đặc trƣng chủng sinh ESBL thị nhận dạng làm kháng sinh đồ (p < 0,01) Kháng 6-7 KS 41.7 33.3 25.0 41.3 33.8 25.0 11.1 2010 2011 2012 Kháng 8-9 KS 21.4 Kháng 10 KS trở lên 14.3 2013 Năm Biểu đồ 2: Kiểu đa kháng kháng sinh E coli ESBL (+) Tỷ lệ E coli sinh ESBL kháng đa kháng sinh cao hẳn so với E coli không sinh ESBL Kết cho thấy đặc trƣng E coli sinh ESBL giai đoạn 2010 - 2013 kháng ≥ 10 kháng sinh với phân nhóm khác Nghiên cứu khác Bệnh viện Quân y 103 trƣớc năm 2010 cho thấy chủng sinh ESBL kháng kháng sinh đặc trƣng tăng dần tỷ lệ trực khuẩn Gram (-) phân lập đƣợc [4] Chúng theo dõi từ năm 2010 - 2013 thấy tỷ lệ VK Enterobacteriaceae sinh ESBL kháng - kháng sinh giảm dần, kháng ≥ 10 kháng sinh tăng dần Điều chủng VK sinh ESBL gần gia tăng mức độ kháng thuốc nên tỷ lệ chủng Biểu đồ 3: Mức độ kháng thuốc E aerogenes sinh không sinh ESBL VK E aerogenes sinh ESBL có tỷ lệ kháng cao với hầu hết kháng sinh, trừ imipenem ẾT LUẬN Qua khảo sát 357 chủng Enterobacteriaceae phân lập từ BN điều trị Bệnh viện Quân y 103 từ tháng 01 - 2010 đến 12 - 2013, rút số kết luận: - Tỷ lệ, phân bố chủng Enterobacteriaceae sinh ESBL, carbapenemase phân lập đƣợc: + VK có tỷ lệ sinh ESBL cao E coli (36,7%), sau E aerogenes (25,4%) + Bệnh phẩm phân lập đƣợc nhiều VK sinh ESBL nƣớc tiểu - dịch sinh dục (32,4%), sau đến dịch vết thƣơng vết mổ (27%), đờm (26,1%) + Khoa phân lập đƣợc VK sinh ESBL với tỷ lệ cao hồi sức (34,0%), khoa ngoại (32,8%) 45 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 5-2015 + Có chủng E coli chủng S marcescens sinh carbapenemase đƣợc phân lập tổng sổ 357 chủng Enterobacteriaceae ruột tiết β-lactamase phổ rộng (ESBL) gây nhiễm khuẩn chiếm cƣ đƣờng ruột phân lập Bệnh viện Chợ Rẫy Tạp chí Y học TP HCM 2010, 14 (2), tr.685 - Mức độ kháng kháng sinh số chủng trực khuẩn Gram (-) phân lập đƣợc: Nguyễn Thái Sơn, Nguyễn Văn Việt, Lê Thu Hồng, Hà Thị Thu Vân Nghiên cứu đặc điểm kháng kháng sinh VK sinh ESBL phân lập Bệnh viện Quân y 103 giai đoạn 2007 - 2009 Tạp chí Y học Việt Nam 2010, 376 (2), tr.245-251 + Các chủng VK sinh ESBL kháng kháng sinh cao chủng không sinh βlactamase phổ rộng kháng hầu hết với kháng sinh có (trừ imipenem) + Các chủng sinh β-lactamase phổ rộng thƣờng kháng ≥ 10 kháng sinh TÀI LIỆU THAM HẢO Trần Thị Ngọc Anh Nghiên cứu khả sinh β-lactamase phổ rộng tính kháng kháng sinh số trực khuẩn Gram (-) phân lập đƣợc Bệnh viện Nhi Đồng từ năm 2007 - 2010 Luận văn Thạc sỹ Y học Học viện Quân y 2011 Trần Đỗ Hùng, Phạm Đức Thọ Nghiên cứu số trực khuẩn Gram (-) sinh men βlactamase phổ mở rộng phân lập Bệnh viện Đa khoa Thành phố Cần Thơ Y học thực hành 2003, (864) Võ Thị Chi Mai, Ngô Thị Quỳnh Hoa, Huỳnh Công Lý CS Trực khuẩn đƣờng 46 Anne Marie Queenan, Karen Bush Carbapenemases: the Versatile β-lactamases Clin Microbiol Rev 2007, 20 (3), pp.440-458 CLSI Performance standards for antimicrobial susceptibility testing TwentyThird Infomational Supplement 2013, 30 (1), pp.53-57 Comican MG, Marshall SA, Jones RN Detection of Extended Spectrum β-lactamase (ESBL) - producing strains by the Etest ESBL screen J Clin Microbiol 1996, 34 (8), pp.1880-1884 David M Livermore Current epidemiology and growing resistance of Gram-negative pathogens Korean J Intern Med 2012, 27, pp.128-142 Valdepite J et al Basic laboratory procedures in clinical bacteriology WHO 2013, Second edition  ... TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tƣợng nghiên cứu Các chủng trực khuẩn Gram (-) g y bệnh đƣợc phân lập từ BN điều trị Bệnh viện Quân y 103 từ 01 - 2010 đến 12 - 2013 Phƣơng pháp nghiên cứu - Nghiên. .. lệ, phân bố chủng Enterobacteriaceae sinh ESBL, carbapenemase phân lập Bệnh viện Quân y 103 giai đoạn 2010 - 2013 - Xác định mức độ kháng kháng sinh số chủng Enterobacteriaceae sinh ESBL phân lập... cho th y đặc trƣng E coli sinh ESBL giai đoạn 2010 - 2013 kháng ≥ 10 kháng sinh với phân nhóm khác Nghiên cứu khác Bệnh viện Quân y 103 trƣớc năm 2010 cho th y chủng sinh ESBL kháng kháng sinh