Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm xác định tỷ lệ, sự phân bố của các chủng Enterobacteriaceae sinh ESBL, carbapenemase phân lập tại Bệnh viện Quân y 103 giai đoạn 2010 - 2013 và xác định mức độ kháng kháng sinh của một số chủng Enterobacteriaceae sinh ESBL phân lập được.
Trang 1NGHIÊN CỨU T LỆ, SỰ PHÂN BỐ VÀ MỨC ĐỘ HÁNG HÁNG SINH CỦA MỘT SỐ CHỦNG TRỰC HU N GRAM
ÂM SINH β-LACTAMASE, CARBAPENEMASE
TẠI BỆNH VIỆN QUÂN Y 103 GIAI ĐOẠN 2010 - 2013
Hà Th ị Thu Vân*; Nguyễn Thái Sơn*
T M TẮT
Mục tiêu: xác định tỷ lệ, sự phân bố và mức độ kháng kháng sinh của một số chủng vi khuẩn
(VK) sinh ESBL, carbapenemase phân lập tại Bệnh viện Quân y 103 giai đoạn 2010 - 2013 Vật
liệu và phương pháp: các chủng trực khuẩn Gram (-) gây bệnh được phân lập tại Khoa Vi sinh,
Bệnh viện Quân y 103 từ tháng 01 - 2010 đến 12 - 2013 Lấy bệnh phẩm, nhuộm soi, nuôi cấy, phân lập, xác định loài VK và kháng sinh đồ theo hướng dẫn của WHO Xác định VK sinh ESBL theo kỹ thuật Etest Xác định VK sinh carbapenemase theo nguyên lý Hodge (hướng dẫn của
CLSI) K ết quả và kết luận: 26,6% VK thuộc nhóm Enterobacteriaceae có ESBL (+) Trong số
các chủng sinh ESBL, cao nhất là E coli (36,7%), sau đó đến E aerogenes (25,4%) Bệnh phẩm có tỷ lệ phân lập được VK sinh ESBL cao nhất là nước tiểu, dịch sinh dục (32,4%), sau
đó đến dịch vết thương, vết mổ (27%) Tỷ lệ VK sinh ESBL cao ở khoa hồi sức (34,0%), khoa ngoại (32,8%), khoa truyền nhiễm (25,0%), thấp hơn ở khoa nội (15,7%) Có 5 chủng E coli và
1 chủng S marcescens sinh carbapenemase được phân lập trong tổng sổ 357 chủng Kiểu kháng đồng thời ≥ 10 kháng sinh là đặc trưng của VK sinh ESBL
* Từ khóa: ESBL; Carbapenemase; Kháng kháng sinh; Enterobacteriaceae
Study of the Proportion, Distribution and Antibiotic Resistance Level of Bacteria Producing ESBL, Carbapenemase in 103 Hospital (Period 2010 - 2013)
Summary
Objectives: Monitoring the proportion, distribution and antibiotic resistance level of bacteria producing ESBL, carbapenemase in 103 Hospital from 2010 to 2013 Materials and methods: The strains of pathogenic Gram-negative bacilli were isolated at the 103 Hospital in the period from 01 - 2010 to 12 - 2013 Taking swabs, Gram stained, cultured isolates, species identification and antimicrobial susceptibility of bacteria according to WHO guidelines Detected ESBL bacteria by Etest Identify bacteria producing carbapenemase follow Hodge principle (CLSI guidelines ) Results and conclusions: There were 26.6% of strains of ESBL among Enterobacteriaceae isolated
* Bệnh viện Quân y 103
Người phản hồi (Corresponding): Hà Thị Thu Vân (havan864@gmail.com)
Ngày nhận bài: 19/03/2015; Ngày phản biện đánh giá bài báo: 14/04/2015
Ngày bài báo được đăng: 06/05/2015
Trang 2Of the seminarians ESBL, the highest is E coli (36.7%), followed by E aerogenes (24.5%) The specimens with the highest ESBL isolated rate is urine, genital fluid (32.4%), wound and incision fluid (27%) The rate of ESBL bacteria is high in the ICU (34.0%), surgery (32.8%), infectious diseases department (25.0%) and the least is in the internal medicine departments There were 5 strains
of E coli and 1 strain of S marcescens producing carbanpenemase isolated in 357 strains Style simultaneously resistance from 10 antibiotics is characteristics of ESBL producing bacteria
* Key words: ESBL; Carbapenemase; Antibiotic resistance; Enterobacteriaceae
ĐẶT VẤN ĐỀ
Hiện nay, tình hình kháng kháng sinh
của VK gây bệnh đã trở thành vấn đề
nghiêm trọng của Ngành Y tế và của toàn
xã hội Nhiễm trùng do VK sinh ESBL,
carbapenemase dẫn đến tỷ lệ thất bại cao
sau điều trị và kéo dài ngày nằm viện của
bệnh nhân (BN) Việc theo dõi mức độ
kháng thuốc của VK gây bệnh, đặc biệt
VK sinh ESBL và carbapenemase rất cần
thiết trong điều trị, góp phần tích cực hạn
chế sự lan truyền các VK đa đề kháng
Chúng tôi tiến hành đề tài này nhằm:
- Xác định tỷ lệ, sự phân bố của các
chủng Enterobacteriaceae sinh ESBL,
carbapenemase phân lập tại Bệnh viện
Quân y 103 giai đoạn 2010 - 2013
- Xác định mức độ kháng kháng sinh
của một số chủng Enterobacteriaceae sinh
ESBL phân lập được
ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP
NGHIÊN CỨU
1 Đối tượng nghiên cứu
Các chủng trực khuẩn Gram (-) gây bệnh được phân lập từ BN điều trị tại Bệnh viện Quân y 103 từ 01 - 2010 đến
12 - 2013
2 Phương pháp nghiên cứu
- Nghiên cứu mô tả cắt ngang kết hợp hồi cứu và tiến cứu
- Lấy bệnh phẩm, nhuộm soi, nuôi cấy, phân lập, xác định loài VK và kháng sinh
đồ theo hướng dẫn của WHO [9]
- Xác định VK sinh ESBL theo kỹ thuật hai khoanh giấy kháng sinh khuếch tán trên thạch theo nguyên lý Kirby-Bauer [9]
và hướng dẫn của CLSI và Etest [7]
- Xác định VK sinh carbapenemase theo nguyên lý Hodge và hướng dẫn của CLSI [6]
ẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN
1 Tỷ lệ, sự phân bố của một số chủng Enterobacteriaceae sinh enzym ESBL, carbapenemase phân lập được
Bảng 1: Tỷ lệ sinh ESBL của Enterobacteriaceae phân lập được
NĂM
Trang 3Klebsiella spp 1 3 1/3 2 9 2/9 2 11 18,2 3 18 16,7 8 41 19,5
(N: số chủng VK sinh ESBL; n: số chủng VK phân lập được)
Xét về khả năng sinh ESBL của từng loài VK, E coli là loài có khả năng sinh ESBL cao nhất (36,7%), sau đó đến E aerogenes (25,4%), các loài khác thấp hơn Một số tác giả thấy VK có tỷ lệ sinh ESBL cao là K pneumoniae, E coli [1, 3] Tuy nhiên, tùy vào mô hình bệnh tật ở mỗi bệnh viện, sẽ phân lập được loài VK chiếm ưu thế khác nhau
Bảng 2: Tỷ lệ VK sinh ESBL theo bệnh phẩm
ESBL
Theo nghiên cứu của nhiều tác giả trong và ngoài nước, VK sinh ESBL tập trung chủ yếu ở các bệnh phẩm như nước tiểu, đờm, ở BN phải điều trị kháng sinh dài ngày [1]
Bảng 3: Tỷ lệ VK sinh ESBL theo các khoa lâm sàng
(Χ2 = 10,45; p = 0,015)
Kết quả của chúng tôi tương đồng với nhiều nghiên cứu trong và ngoài nước đều cho thấy VK sinh ESBL thường gặp ở những khoa có BN nặng, có can thiệp thủ thuật
và có dụng cụ xâm lấn (đặt catheter tĩnh mạch) thở máy phẫu thuật, BN phải nằm viện lâu ngày, sử dụng kháng sinh kéo dài [1, 2]
Trang 4Bảng 4: Các VK Enterobacteriaceae sinh carbapenemase phân lập được
PHÂN LẬP ĐƯỢC
SỐ VK KHÁNG CARBAPENEM
SỐ VK SINH CARBAPENEMASE
Các chủng sinh carbapenemase hiếm gặp hơn chủng sinh ESBL và còn ít được nghiên cứu, các chủng này mới được chú ý vài năm gần đây Đây là những VK nguy hiểm, vì chúng kháng lại hầu hết kháng sinh, kể cả những kháng sinh được ưu tiên sử dụng để điều trị VK sinh ESBL [5, 8]
Những VK này chủ yếu phân lập được từ bệnh phẩm như máu, nước tiểu, các loại dịch vết thương, vết mổ, đờm - dịch rửa phế quản Các chủng sinh carbapenemase phân lập được trong nghiên cứu kháng lại với hầu hết kháng sinh hiện có, trừ 2 chủng
E coli phân lập từ nước tiểu còn nhạy với fosfomycin Trong tương lai, các chủng VK này gia tăng sẽ là vấn đề nan giải của Ngành Y tế
2 Mức độ kháng kháng sinh của các VK sinh ESBL và carbapenemase
Biểu đồ 1: So sánh mức độ kháng thuốc của E coli sinh và không sinh ESBL N: số chủng kháng kháng sinh
(AMC: amoxicilin + clavulanic; AN: amikacin; ATM: aztreonam; CAZ: ceftazidime CIP: ciprofloxacine; CRO: ceftriaxone; CTX: cefotaxime; CXM: cefuroxime;
DO: doxycycline; FEP: cefepime; IMP: imipenem; LEV: levofloxacine)
Trang 5Tỷ lệ kháng kháng sinh của các chủng
sinh ESBL cao hơn rõ rệt so với chủng
không sinh ESBL, các chủng không sinh
ESBL kháng kháng sinh ở mức < 40%,
trong khi các chủng sinh ESBL đa số
kháng > 80% với kháng sinh Kết quả này
phù hợp với nghiên cứu của nhiều tác giả
khác đã công bố về tính kháng thuốc của
chủng VK sinh ESBL [1, 3]
11.1
14.3
33.8 21.4
33.3
33.3
41.3 64.3
0.0
20.0
40.0
60.0
80.0
%
Năm
Kháng 6-7 KS Kháng 8-9 KS Kháng 10 KS trở lên
Biểu đồ 2: Kiểu đa kháng kháng sinh của
E coli ESBL (+)
Tỷ lệ E coli sinh ESBL kháng đa kháng
sinh cao hơn hẳn so với E coli không
sinh ESBL
Kết quả cho thấy đặc trưng của E coli
sinh ESBL giai đoạn 2010 - 2013 là kháng
≥ 10 kháng sinh với các phân nhóm khác
nhau Nghiên cứu khác tại Bệnh viện
Quân y 103 trước năm 2010 cho thấy các
chủng sinh ESBL kháng 8 kháng sinh là
đặc trưng và tăng dần về tỷ lệ trong trực
khuẩn Gram (-) phân lập được [4] Chúng
tôi theo dõi từ năm 2010 - 2013 thấy tỷ lệ
VK Enterobacteriaceae sinh ESBL kháng
6 - 8 kháng sinh giảm dần, kháng ≥ 10
kháng sinh tăng dần Điều này là do các
chủng VK sinh ESBL gần đây đã gia tăng
mức độ kháng thuốc nên tỷ lệ chủng
kháng 6 - 8 kháng sinh đang dịch chuyển sang kháng 10 kháng sinh Các chủng VK kháng ≥ 10 kháng sinh là đặc trưng của chủng sinh ESBL và là chỉ thị nhận dạng khi làm kháng sinh đồ (p < 0,01)
Biểu đồ 3: Mức độ kháng thuốc của
E aerogenes sinh và không sinh ESBL
VK E aerogenes sinh ESBL có tỷ lệ
kháng cao với hầu hết kháng sinh, trừ imipenem
ẾT LUẬN
Qua khảo sát 357 chủng Enterobacteriaceae phân lập từ BN điều trị tại Bệnh viện Quân
y 103 từ tháng 01 - 2010 đến 12 - 2013, chúng tôi rút ra một số kết luận:
- Tỷ lệ, sự phân bố của các chủng
carbapenemase phân lập được:
+ VK có tỷ lệ sinh ESBL cao nhất là E coli (36,7%), sau đó là E aerogenes (25,4%)
+ Bệnh phẩm phân lập được nhiều VK sinh ESBL nhất là nước tiểu - dịch sinh dục (32,4%), sau đó đến dịch vết thương - vết mổ (27%), đờm (26,1%)
+ Khoa phân lập được VK sinh ESBL với tỷ lệ cao là hồi sức (34,0%), các khoa ngoại (32,8%)
Trang 6+ Có 5 chủng E coli và 1 chủng
S marcescens sinh carbapenemase được
phân lập trong tổng sổ 357 chủng
Enterobacteriaceae
- Mức độ kháng kháng sinh của một số
chủng trực khuẩn Gram (-) phân lập được:
+ Các chủng VK sinh ESBL kháng kháng
sinh cao hơn các chủng không sinh
β-lactamase phổ rộng và kháng hầu hết với
kháng sinh hiện có (trừ imipenem)
+ Các chủng sinh β-lactamase phổ rộng
thường kháng ≥ 10 kháng sinh
TÀI LIỆU THAM HẢO
1 Trần Thị Ngọc Anh Nghiên cứu khả
năng sinh β-lactamase phổ rộng và tính
kháng kháng sinh của một số trực khuẩn
Gram (-) phân lập được tại Bệnh viện Nhi
Đồng 2 từ năm 2007 - 2010 Luận văn Thạc
sỹ Y học Học viện Quân y 2011
2 Trần Đỗ Hùng, Phạm Đức Thọ Nghiên
cứu một số trực khuẩn Gram (-) sinh men
β-lactamase phổ mở rộng phân lập tại Bệnh
viện Đa khoa Thành phố Cần Thơ Y học thực
hành 2003, 3 (864)
3 Võ Thị Chi Mai, Ngô Thị Quỳnh Hoa,
Huỳnh Công Lý và CS Trực khuẩn đường
ruột tiết β-lactamase phổ rộng (ESBL) gây nhiễm khuẩn và chiếm cư đường ruột phân lập tại Bệnh viện Chợ Rẫy Tạp chí Y học TP
HCM 2010, 14 (2), tr.685
4 Nguyễn Thái Sơn, Nguyễn Văn Việt,
Lê Thu Hồng, Hà Thị Thu Vân Nghiên cứu
đặc điểm kháng kháng sinh của các VK sinh ESBL phân lập tại Bệnh viện Quân y 103 giai đoạn 2007 - 2009 Tạp chí Y học Việt Nam
2010, 376 (2), tr.245-251
5 Anne Marie Queenan, Karen Bush
Carbapenemases: the Versatile β-lactamases
Clin Microbiol Rev 2007, 20 (3), pp.440-458
6 CLSI Performance standards for
antimicrobial susceptibility testing Twenty-Third Infomational Supplement 2013, 30 (1), pp.53-57
7 Comican MG, Marshall SA, Jones RN
Detection of Extended Spectrum β-lactamase (ESBL) - producing strains by the Etest ESBL screen
J Clin Microbiol 1996, 34 (8), pp.1880-1884
8 David M Livermore Current epidemiology
and growing resistance of Gram -negative pathogens Korean J Intern Med 2012, 27, pp.128-142
9 Valdepite J et al Basic laboratory
procedures in clinical bacteriology WHO
2013, Second edition