Đang tải... (xem toàn văn)
Nội dung của bài viết trình bày về ung thư cổ tử cung, xác định tỉ lệ nhiễm HPV, sự phân bố các genotype HPV và các yếu tố liên quan ở những phụ nữ được làm xét nghiệm HPV‐DNA từ dịch phết cổ tử cung. Kết quả nghiên cứu cho thấy, tỉ lệ nhiễm các type HPV nguy cơ cao khá phổ biến, cần có kế hoạch giám sát chặt chẽ những trường hợp này để phát hiện sớm ung thư cổ tử cung.
Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 1 * 2014 SỰ PHÂN BỐ GENOTYPE HPV TRÊN BỆNH NHÂN TẠI BỆNH VIỆN ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Cao Minh Nga*,**, Trần Thiện Tồn** TĨM TẮT Mở đầu: Ung thư cổ tử cung là loại ung thư được xếp hàng thứ hai trong số các ung thư phổ biến của phụ nữ trên thế giới. Ung thư cổ tử cung có liên quan chặt chẽ với nhiễm các type Human papillomavirus (HPV) nguy cơ cao đường sinh dục, cùng với các yếu tố ký chủ và những thay đổi về di truyền/tế bào. Khoảng 50% số người bị ung thư cổ tử cung nhiễm HPV 16. HPV 16 và HPV 18 là hai type gây ung thư cổ tử cung chủ yếu. Mục tiêu: xác định tỉ lệ nhiễm HPV, sự phân bố các genotype HPV và các yếu tố liên quan ở những phụ nữ được làm xét nghiệm HPV‐DNA từ dịch phết cổ tử cung. Phương pháp: Nghiên cứu hồi cứu, mô tả cắt ngang trên các phụ nữ từ 18 ‐ 89 tuổi được lấy mẫu phết cổ tử cung để phát hiện HPV‐DNA tại Bệnh viện Đại học Y Dược TP. HCM trong ba năm, từ 1/7/2010 đến 30/6/2013. Phát hiện HPV‐DNA bằng kỹ thuật real‐time PCR sử dụng mẫu dò Taqman đặc hiệu. Định genotype HPV bằng phương pháp lai phân tử (reverse dot‐blot). Kết quả: Tỷ lệ nhiễm HPV trong nhóm đối tượng nghiên cứu là 18,03%, trong số đó nhiễm các type HPV nguy cơ cao chiếm 79,14%; nhiễm các type HPV nguy cơ thấp và đồng nhiễm cả 2 nhóm đều cho tỉ lệ là 10,43%. Các genotype thường gặp trong nhóm nguy cơ cao là 16, 18, 58; trong nhóm nguy cơ thấp là 11, 81. Đồng nhiễm từ 2 loại genotype trở lên chiếm tỉ lệ khá cao (26,96%). Kết luận: Tỉ lệ nhiễm các type HPV nguy cơ cao khá phổ biến. Cần có kế hoạch giám sát chặt chẽ những trường hợp này để phát hiện sớm ung thư cổ tử cung. Từ khóa: HPV, nhiễm HPV, ung thư cổ tử cung ABSTRACT THE HPV GENOTYPE DISTRIBUTION AMONG WOMEN PATIENTS AT THE UNIVERSITY MEDICAL CENTER IN HO CHI MINH CITY Cao Minh Nga, Tran Thien Toan * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 18 ‐ Supplement of No 1 ‐ 2014: 372 ‐ 377 Background: Cervical Cancer is second most common cancer among women worldwide. Cervical cancer is caused by persistent high‐risk HPV infection, along with host factors and cellular/genetic changes. HPV 16 accounts for approx. 50% of all cervical cancers worldwide. HPV 16 and HPV 18 are the most prevalent carcinogenic types Objectives: In order to investigate the HPV infection rate, the genotype distribution of HPV and the correlation factors among women which were tested HPV‐DNA from cervical samples Methods: Retrospective, descriptive and cross‐sectional method from cervical samples of women 18 to 89 years of age at University Medical Center HCM city. Data of HPV genotypes and of some other factors from July 1st, 2010 to June 31th, 2013 were analyzed. Detecting HPV‐DNA by real‐time PCR method with specific probe Taqman. HPV genotyping was done by dot blot hybridization. Results: the HPV infected rate was 18.03%, widespread high risk HPV types were 79.14% and low risk * BM Vi sinh – Khoa Y – Đại học Y Dược TP. HCM** Khoa XN ‐ Bệnh viện Đại học Y Dược TP. HCM Tác giả liên lạc: PGS. TS. Cao Minh Nga ĐT: 0908361512 Email: pgscaominhnga@yahoo.com 372 Chuyên Đề Nội Khoa Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 1 * 2014 Nghiên cứu Y học HPV types were 10.43%, confection of both groups was 10.43%. The common HPV genotypes in high risk group were 16, 18, 58; in low risk group were 11, 81. Confection of more one HPV genotypes were 26.96%. Conclusions: The HPV 16 and HPV infected rate was high. These cases need finding the changes in the cells of the cervix by Pap test to detected early cervical cancer. Keywords: HPV, HPV infection, cervical cancer. ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư cổ tử cung là một trong những bệnh ung thư liên quan đến nhiễm vi sinh vật. Từ thập niên 70 của thế kỷ XX, human papillomavirus (HPV) được coi như một trong những tác nhân gây biến đổi tế bào cổ tử cung (dị sản cổ tử cung), tiền đề của ung thư cổ tử cung. Khoảng trên 90% trường hợp ung thư cổ tử cung được phát hiện có liên quan đến nhiễm ‐ Xác định tỉ lệ nhiễm HPV trên các đối tượng phụ nữ có chỉ định xét nghiệm tại Bệnh viện Đại Học Y Dược TP. HCM cơ sở 1. ‐ Tìm hiểu sự phân bố các genotype HPV. ‐ Tìm hiểu mối liên quan giữa nhiễm HPV và các yếu tố khác. ĐỐI TƯỢNG ‐ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thiết kế nghiên cứu Mơ tả hồi cứu và thiết kế cắt ngang HPV(1,4). Theo ước tính của Tổ chức Y tế Thế giới Đối tượng nghiên cứu: (WHO), trong các ngun nhân của ung thư cổ Phụ nữ từ 18 trở lên, được làm xét nghiệm phết cổ tử cung để phát hiện và định genotype HPV tại Phòng Sinh học phân tử ‐ Khoa Xét nghiệm ‐ Bệnh viện Đại Học Y Dược TP. HCM (cơ sở 1) trong 3 năm, từ 1/7/2010 đến 30/6/2013. tử cung ở phụ nữ thì 82% là có liên quan đến nhiễm HPV ở các nước đang phát triển. Nhiều nghiên cứu trên thế giới đã khẳng định sự liên quan mật thiết giữa HPV và ung thư cổ tử cung. Ngồi ra HPV còn có vai trò trong ung thư vùng hậu mơn, âm hộ, âm đạo và dương vật cũng như một số ung thư vùng hầu họng. HPV có khoảng 120 type, trong đó có các type nguy cơ cao thường gây ung thư và các type nguy cơ thấp ít khi gây tiến triển đến ung thư. Tại Việt Nam, ung thư cổ tử cung chiếm tỉ lệ cao nhất trong tổng số các loại ung thư và là loại ung thư sinh dục thường gặp nhất và chiếm tỉ lệ 53,5% các loại ung thư ở nữ giới. Đây là bệnh lý ác tính có tỷ lệ mắc đứng hàng đầu ở phụ nữ miền Nam và hàng thứ tư ở phụ nữ miền Bắc. Theo thống kê về ghi nhận tần suất ung thư ở thành phố Hồ Chí Minh (1998) thì thành phố có thêm 28,6 người/100.000 phụ nữ mắc bệnh này mỗi năm(1). Như vậy, việc tìm hiểu về tình trạng nhiễm các genotype HPV ở phụ nữ là vấn đề rất đáng quan tâm. Chúng tơi tiến hành nghiên cứu này nhằm mục đích: Nhiễm Phương pháp nghiên cứu: Phát hiện HPV‐DNA bằng phương pháp Real‐time PCR. Đối với những trường hợp có HPV‐DNA (+): định genotype HPV bằng kỹ thuật lai phân tử (Reverse dot‐blot), có thể phát hiện được 24 genotype của HPV, gồm: 8 type nguy cơ thấp (6, 11, 42, 43, 61, 70, 71, 81) và 16 type nguy cơ cao (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 82). Ghi nhận số liệu vào “Bảng thu thập số liệu”. Xử lý số liệu bằng phần mềm SPSS 17.0 và vẽ biểu đồ bằng Excel 2010. KẾT QUẢ Có 638 phụ nữ được làm xét nghiệm phát hiện HPV‐DNA, chúng tôi ghi nhận được kết quả như sau: Tuổi Các bệnh nhân nữ trong lơ nghiên cứu được phân bố theo các nhóm tuổi như sau (Biểu đồ 1) 373 Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 1 * 2014 Tỉ lệ nhiễm các genotype HPV Từ 115 phết cổ tử cung có HPV‐DNA (+), chúng tơi xác định được 158 chủng HPV. Sự phân bố genotype HPV được thể hiện ở bảng 1. Bảng 1: Phân bố tỉ lệ nhiễm các genotype HPV (n=158) Genotype HPV Biểu đồ 1: Phân bố tỉ lệ nhiễm HPV theo nhóm tuổi Tỉ lệ nhiễm HPV Type Type 11 Type 42 Type 61 Type 81 Type 16 Type 18 Type 33 Type 35 Type 45 Type 51 Type 52 Type 53 Type 58 Type 59 Type 68 Tổng cộng Số lượng Nguy thấp 17 1 Nguy cao 38 29 24 158 Tỷ lệ % 1,90 10,76 0,63 0,63 3,16 24,05 18,35 5,70 5,06 3,16 3,80 4,43 0,63 15,19 1,90 0,63 100,00 Biểu đồ 2: Tỉ lệ nhiễm HPV là 18,03% (115/638 trường hợp) Tình hình nhiễm các type HPV theo nhóm nguy cơ Tỉ lệ Genotype HPV Bảng 2: Tỉ lệ nhiễm các type HPV theo nhóm nguy cơ (n=115) Nhóm nguy Nguy cao Nguy thấp Đồng nhiễm nhóm Tổng Tần suất 91 12 12 115 % 79,14 10,43 10,43 100 Nhận xét: Nhóm nguy cơ cao (NCC) chiếm tỉ lệ cao nhất: 79,14%. Mối liên hệ giữa nhiễm HPV và các genotype theo lứa tuổi Tỷ lệ nhiễm các genotype HPV trên một mẫu bệnh phẩm Một bệnh phẩm có thể nhiễm 1 hay nhiều genotype trong một lần xét nghiệm xác định genotype HPV (Biểu đồ 3). 374 Mối liên hệ giữa nhóm tuổi và tỉ lệ nhiễm HPV Bảng 3: Liên hệ giữa nhóm tuổi và tỉ lệ nhiễm HPV (n=115) Nhóm tuổi 18 – 29 (n=119) 30 – 59 (n=194) >50 (n=129) Tổng Tần suất 30 67 18 115 % 26,25 34,54 13,95 100 Chun Đề Nội Khoa Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 1 * 2014 Nhận xét: Nhóm tuổi 30‐59 nhiễm HPV với tỉ lệ cao nhất (34,54%). Phân bố nhóm genotype HPV NCC – NCT theo nhóm tuổi Bảng 4: Phân bố nhóm genotype cao – thấp theo nhóm tuổi (n=115) Nhóm tuổi 18 – 29 (n=30) 30 – 59 (n=67) >50 (n=18) Tổng Nhóm NCC Nhóm NCT Cả nhóm Tần suất % Tần suất % Tần suất % 19 63,33 20,00 16,67 57 85,00 7,50 7,50 14 90 77,77 12 0,00 13 22,23 Nhận xét: Ở mọi nhóm tuổi, nhiễm HPV nhóm NCC đều chiếm tỉ lệ cao, đặc biệt là ở nhóm tuổi 30‐59 (85%). BÀN LUẬN Về tuổi của bệnh nhân Qua biểu đồ 1, chúng ta thấy: Tuổi của đối tượng nghiên cứu tập trung ở nhóm 30 – 49 tuổi (61,13%), tiếp theo là nhóm trên 50 tuổi (30,41%), nhóm tuổi từ 18 – 29 chiếm tỷ lệ thấp nhất (18,65%). Về tỉ lệ nhiễm HPV Trong 638 mẫu bệnh phẩm được làm xét nghiệm, tỷ lệ nhiễm HPV là 18,03% (115 trường hợp) (Biểu đồ 2). Tỉ lệ này cao hơn hẳn so với một số tác giả trong và ngồi nước(7,8,11,12,13). Sự khác biệt có thể là do tiêu chuẩn chọn mẫu. Các tác giả trên chọn mẫu nghiên cứu trong một cộng đồng dân cư, có thể có hoặc chưa có bệnh lý về phụ khoa. Trong nghiên cứu của chúng tôi, bệnh phẩm được thu nhận tại cơ sở y tế, nơi bệnh nhân đến để kiểm tra những bất thường đã hiện hữu, do vậy tỷ lệ nhiễm HPV của chúng tôi cao hơn so với các nghiên cứu khác. Về tỷ lệ genotype HPV Phân bố tỉ lệ nhiễm các genotype HPV trên một mẫu bệnh phẩm Số liệu nghiên cứu (Biểu đồ 3) cho thấy, có 73,04% bệnh nhân nhiễm 1 type và 26,96% bệnh nhân đồng nhiễm từ 2 type HPV trở lên, Nhiễm Nghiên cứu Y học trong đó có 1 trường hợp đồng nhiễm 4 type. Kết quả này có tỉ lệ đồng nhiễm thấp hơn so với nghiên cứu của tác giả M Dai(4) tại Trung Quốc (30,6%), và cao hơn so với nghiên cứu của JN I Vet(12) tại Indonesia (20,7%). Có thể lí giải cho điều này là do kĩ thuật sử dụng trong các nghiên cứu là khác nhau. Kỹ thuật Reverse Dot Blot trong nghiên cứu của chúng tơi và kỹ thuật Reverse Line Blot trong nghiên cứu của M Dai có tỉ lệ đồng nhiễm cao (30,6% và 26,96%), trong khi kết quả giải trình tự ‐ tỉ lệ đồng nhiễm chỉ chiếm 14%. Phân bố tỉ lệ nhiễm các genotype HPV nguy cơ cao và nguy cơ thấp Kết quả nghiên cứu của chúng tôi cho thấy, một mẫu bệnh phẩm có thể nhiễm 1 hay đồng nhiễm nhiều loại genotype cho 1 lần xét nghiệm định type. Trong 115 mẫu bệnh phẩm có HPV (+), chúng tơi có 158 lượt HPV/115 trường hợp (Bảng 1). Các type HPV nguy cơ cao: HPV 16 chiếm tỷ lệ cao nhất (24,05%), tiếp theo là HPV 18 (18,35%) và HPV 58 (15,19%). Các type nguy cơ thấp: HPV 11 chiếm tỷ lệ cao nhất (10,76%), kế đến là HPV 81 (3,16%) và HPV 6 (1,90%). Kết quả của chúng tơi có sự khác biệt với nghiên cứu của nước ngồi(1,4) nhưng khơng khác biệt với nghiên cứu của các tác giả Việt Nam(7,11,13) ‐ các type thường gặp nhất là 16, 18, 58. Qua đó, ta có thể thấy sự phân bố các type HPV là khác nhau tùy thuộc vào dân tộc và vùng địa lý. Qua kết quả trên ta thấy type 16 ln giữ vai trò quan trọng, ln xuất hiện trong 3 type hay gặp nhất. Nghiên cứu của chúng tôi không ghi nhận bất cứ trường hợp nào nhiễm genotype HPV 56. Tác giả Vũ Thị Nhung(13) ghi nhận được 3 trường hợp nhiễm HPV type 56, Phạm Thị Hồng Anh(8): có 7 trường hợp, Trần Thị Lợi(11) không ghi nhận được trường hợp nào nhiễm HPV type 56. Như vậy, tần suất nhiễm type HPV 56 ở Việt Nam rất thấp. Từ các ghi nhận trên, chúng ta có thể ứng dụng vào việc xây dựng các xét nghiệm định type cho phù hợp với tần suất các type HPV ở Việt Nam. 375 Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 1 * 2014 Phân bố tình hình nhiễm các type HPV theo nhóm nguy cơ. Nghiên cứu của chúng tơi (Bảng 2) cho thấy, tỷ lệ nhiễm các type HPV nguy cơ cao là 79,14% ‐ chiếm tỷ lệ cao nhất, tiếp theo là nhiễm cả 2 nhóm vừa nguy cơ cao vừa nguy cơ thấp (chiếm 10,43%), nhiễm type HPV nguy cơ thấp (10,43%). Kết quả này tương tự với các nghiên cứu trong và ngoài nước(4,8,11,13): tỷ lệ nhiễm các type nguy cơ cao là cao nhất, chiếm tỷ lệ vượt trội hơn rất nhiều so với type nguy cơ thấp và chúng giữ vai trò quan trọng trong ung thư cổ tử cung, do đó việc tầm sốt ung thư cổ tử cung nên đặt trọng tâm vào việc phát hiện sớm các type HPV nguy cơ cao. Các type HPV nguy cơ thấp chiếm tỷ lệ thấp và chỉ gây những mụn cóc hoặc khối u lành tính. Phân bố các genotype HPV nguy cơ cao – nguy cơ thấp theo nhóm tuổi Ở cả 3 nhóm tuổi, nhiễm HPV nhóm NCC ln ln chiếm tỷ lệ cao nhất (63,33% ‐ 18,35% ‐ 77,77%); nhiễm các type HPV nhóm NCT và đồng nhiễm cả 2 nhóm có tỷ lệ thay đổi nhưng đều thấp hơn hẳn tỉ lệ nhiễm nhóm NCC. Về mối liên hệ giữa nhiễm HPV và một số yếu tố khác Có tất cả 16 type HPV được phát hiện. Trong đó, nhóm nguy cơ cao chiếm đa số là type 16, 18 và 58; nhóm nguy cơ thấp chiếm đa số là type 11 và 81. Liên quan giữa HPV và nhóm tuổi Trong 115 trường hợp có kết quả HPV (+) (Bảng 3), nhóm tuổi 30 – 59 có tỷ lệ nhiễm HPV cao nhất (34,54%), tiếp theo là nhóm tuổi 18 ‐ 29 (26,25%). Nhóm tuổi trên 50 có tỷ lệ nhiễm HPV thấp nhất (13,95%). Kết quả này tương đồng với kết quả nghiên cứu của Giuliano A.R.(6) (22,7%), và có sự khác biệt với các nghiên cứu khác của các tác giả trong và ngoài nước về đỉnh tuổi nhiễm HPV theo nhóm tuổi. JN I Vet(12): nhóm tuổi 35 – 44 chiếm tỷ lệ cao nhất (15,2%), Vũ Thị Nhung(13): tỷ lệ nhiễm HPV tập trung cao nhất trong nhóm tuổi