Ung thư cổ tử cung là bệnh ung thư phổ biến thứ 3 ở phụ nữ trên toàn thế giới. Nhiễm các type HPV nguy cơ cao là yếu tố nguy cơ quan trọng nhất gây ung thư cổ tử cung. Việc phát hiện và định type HPV ngày càng trở nên quan trọng trong việc sàng lọc ung thư cổ tử cung và điều trị tiền ung thư.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Nghiên cứu Y học NGHIÊN CỨU TỶ LỆ NHIỄM HPV VÀ SỰ PHÂN BỐ CÁC TYPE HPV Ở BỆNH NHÂN KHÁM PHỤ KHOA TẠI BỆNH VIỆN ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Nguyễn Hữu Huy1, Lê Minh Khôi1,2, Nguyễn Thị Băng Sương1,2, Nguyễn Hồng Bắc1,2 TĨM TẮT Mục tiêu: Ung thư cổ tử cung bệnh ung thư phổ biến thứ phụ nữ toàn giới Nhiễm type HPV nguy cao yếu tố nguy quan trọng gây ung thư cổ tử cung Việc phát định type HPV ngày trở nên quan trọng việc sàng lọc ung thư cổ tử cung điều trị tiền ung thư Xác định tỷ lệ nhiễm phân bố type HPV bệnh nhân khám phụ khoa Bệnh viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu cắt ngang mô tả 715 bệnh nhân đến khám phụ khoa Bệnh viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Các đối tượng tham gia nghiên cứu khám phụ khoa, xét nghiệm định type HPV kỹ thuật lai phân tử Reverse Dot Blot Kết quả: Tỷ lệ nhiễm HPV bệnh nhân khám phụ khoa bệnh viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh 16,5% Tỷ lệ nhiễm type HPV chiếm 58,47%, đồng nhiễm type chiếm 18,64%, nhiễm ≥3 type trở lên chiếm 11,02%, dương tính khơng định type chiếm 11,86% Trong nhóm HPV nguy cao, type HPV 16 dương tính chiếm tỷ lệ cao 23,72% sau HPV 52 chiếm tỷ lệ 13,46% Kết luận: Tỷ lệ nhiễm HPV bệnh nhân đến khám phụ khoa Bệnh viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh 16,5%, phân bố tỷ lệ nhiễm type HPV tương tự nơi khác nước giới Từ khóa: HPV, ung thư cổ tử cung, HPV genotyping ABSTRACT STUDY ON HPV PREVALENCE AND DISTRIBUTION OF HPV TYPES IN PATIENTS AT UNIVERSITY MEDICAL CENTER HO CHI MINH CITY Nguyen Huu Huy, Le Minh Khoi, Nguyen Thi Bang Suong, Nguyen Hoang Bac * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Vol 25 - No - 2021: 270 - 274 Objective: The goal of this study was to determine HPV prevalence and distribution of HPV types in patients at University Medical Center Ho Chi Minh City Methods: In A cross-sectional study was conducted on 715 patients at University Medical Center Ho Chi Minh City All subjects have taken an pelvic examination to get clinical findings, a sample for examining HPV infection by Reverse Dot Blot hybridization assay Results: The prevalence of HPV infection on patients at University Medical Center Ho Chi Minh City was 16.5% Infection by type was 58.47%, coinfection with types is 18.64%; co-infection of ≥ types was 11.02% and 11.86 % positive but can not typing In the high risk HPV group, HPV type of 16 was highest (22.73%), the second were type 52 (13.46%) Conclusions: The prevalence of HPV infection in patients at University Medical Center Ho Chi Minh City was 16.5% and there is similarity in HPV types distribution in Vietnam and in an other regions Keywords: HPV, cervical cancer, HPV genotyping 2Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Bệnh viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: PGS.TS.BS Nguyễn Thị Băng Sương ĐT:0913281386 Email: suongnguyenmd@gmail.com 270 Chuyên Đề Sản Phụ Khoa Nghiên cứu Y học ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư cổ tử cung (CTC) bệnh ung thư phổ biến thứ phụ nữ tồn giới, ước tính có 569.847 trường hợp mắc 311.365 ca tử vong năm 2018 Khoảng 4.177 trường hợp ung thư cổ tử cung chẩn đoán năm khoảng 2.420 ca tử vong ung thư hàng năm Việt Nam (dữ liệu GLOBOCAN 2018)(1) Ung thư CTC có liên quan chặt chẽ với nhiễm type Human papilloma virus (HPV) nguy cao đường sinh dục Có 150 type Human Papilloma virus phát hiện, đó, type 16, 18, 31, 33, 35, 45, 52 58 nhóm týp nguy cao thường gặp cổ tử cung(2) Virus xâm nhập vào biểu mô cổ tử cung tạo nên biến đổi tế bào diễn tiến kéo dài từ 10 đến 20 năm với biểu từ tổn thương viêm nhiễm đơn giản đến tân sinh biểu mô, ung thư chỗ xâm lấn Do đó, việc phát sớm tế bào học, xét nghiệm Human papilloma virus cần thiết, giúp tăng khả dự phòng, điều trị sớm tổn thương cổ tử cung nhằm giảm tỷ lệ tử vong bệnh nghiên cứu triển khai vaccine phòng ngừa Human papilloma virus phụ nữ trẻ tuổi(3) Nghiên cứu cộng đồng ghi nhận tỷ lệ nhiễm Human papilloma virus khoảng 10% kết khác tùy theo vùng, miền, quốc gia giới tỷ lệ Châu Phi 22,12%, Châu Mỹ chiếm 12,95%, Châu Âu Châu Á vào khoảng 8%(4).Tại Việt Nam có tỷ lệ mắc HPV tương đối cao, theo nghiên cứu Lục Thị Vân Bích (2011) khu vực TP Hồ Chí Minh ghi nhận tỷ lệ nhiễm HPV 19,97%(5) Theo nghiên cứu Lê Quang Vinh (2015) khu vực Hà Nội ghi nhận tỷ lệ nhiễm HPV 9,73%(6) Do đó, việc phát xác định type HPV có vai trị vơ quan trọng việc đánh giá nguy ung thư cổ tử cung số ung thư đường sinh dục khác Xuất phát từ thực tế đó, chúng tơi tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu tỷ lệ nhiễm phân bố type Human papilloma virus bệnh nhân khám phụ khoa bệnh viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Chuyên Đề Sản Phụ Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Minh” có nghĩa giá trị lớn cho việc xây dựng đồ dịch tể học chủng HPV Việt Nam làm sở cho chương trình phịng chống ung thư cổ tử cung hiệu hơn, với mục tiêu xác định tỷ lệ nhiễm HPV sinh dục, type HPV bệnh nhân đến khám Bệnh viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh ĐỐITƯỢNG- PHƯƠNG PHÁPNGHIÊNCỨU Đối tượng nghiên cứu Trong khoảng thời gian từ tháng 01 năm 2019 đến tháng 11 năm 2020, thu thập (khảo sát) 715 bệnh nhân đến khám phụ khoa bệnh viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh đưa vào nhóm nghiên cứu Tiêu chuẩn chọn Phụ nữ có quan hệ tình dục Hiện khơng có thai Khơng thụt rửa âm đạo trước xét nghiệm Không đặt thuốc điều trị phụ khoa trước ngày Khi xét nghiệm khơng thời kỳ hành kinh Khơng quan hệ tình dục trước xét nghiệm ngày Phương pháp nghiên cứu Thiết kế nghiên cứu Nghiên cứu cắt ngang mô tả Cỡ mẫu Cỡ mẫu tính theo cơng thức cho nghiên cứu mô tả ước lượng tỷ lệ: n≥ z (1 ) / 2 p.q d với p= 10%, d=0,05 nên tính cỡ mẫu 139 ca bệnh Quy trình thực định type HPV Thu nhận bệnh phẩm: dịch phết cổ tử cung Tách chiết DNA tổng số phương pháp Phenol- chloroform Thực phản ứng Real-time PCR máy Agilent AriaMx Sản phẩm PCR dương tính sử dụng để 271 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 định type HPV kỹ thuật lai phân tử Reverse Dot Blot với Probe lai đặc hiệu cho 16 type nguy cao (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 82) type nguy thấp (6, 11, 42, 43, 61, 70, 71, 81) cố định sẵn màng lai Biodyne C Tín hiệu dương tính phát qua phản ứng màu Xử lý phân tích số liệu Sử dụng phần mềm SPSS version 20.0 cho phân tích thống kê Y đức Nghiên cứu thông qua Hội đồng Đạo đức nghiên cứu Y sinh học Đại học Y Dược TP HCM, số 55/GCN-HĐĐĐ, ngày 5/12/2020 KẾT QUẢ Tỷ lệ nhiễm HPV Nghiên cứu Y học Bảng cho thấy phụ nữ có độ tuổi 25 tuổi có tỷ lệ nhiễm HPV cao so nhóm tuổi khác, nhóm tuổi 26 - 35 tuổi; thấp nhóm phụ nữ 35 tuổi khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê, p >0,05 Tỷ lệ nhiễm HPV đơn type đa type Bảng 2: Tỷ lệ nhiễm HPV đơn type đa type Kết định type type type ≥ type Không định type Tổng số Số lượng 69 22 13 14 118 Tỷ lệ % 58,47 18,64 11,02 11,86 100 Bảng cho thấy: nhiễm type HPV chiếm đa số với 69/118 ca (58,47%), đồng nhiễm type có 22/118 ca (18,64%), nhiễm ≥3 type trở lên có 14/118 ca (11,02%), 14/118 ca (11,86%) dương tính khơng định type thuộc type ngồi 24 type xác định xét nghiệm Bảng 3: Tỷ lệ nhiễm type HPV (n = 156) Type HPV Hình 1: Tỷ lệ HPV- DNA (+) bệnh nhân đến khám Bệnh viện Đại học Y Dược TPHCM Qua khảo sát 715 phụ nữ độ tuổi từ 19 đến 78 tuổi, ghi nhận có 118 trường hợp dương tính với HPV, chiếm tỷ lệ 16,5% Có 83,5% trường hợp âm tính với HPV (Hình 1) Tỷ lệ nhiễm HPV theo nhóm tuổi Bảng 1: Liên quan tình trạng nhiễm HPV với nhóm tuổi Tuổi HPV dương tính n (%) ≤ 25 26– 35 > 35 Tổng (21,6) 34 (16,9) 76 (15,9) 118 (16,5) 272 HPV âm tính n (%) 29 (78,4) 167 (83,1) 401 (84,1) 597 (83,5) Tổng n (%) 37 (100) 201 (100) 477 (100) 715 (100) HPV 16 HPV 18 HPV 31 HPV 35 HPV 39 HPV 45 HPV 51 HPV 52 HPV 53 HPV 56 HPV 58 HPV 59 HPV 66 HPV 68 HPV HPV 11 HPV 42 HPV 43 HPV 61 HPV 70 HPV 71 HPV 81 Tổng số Số type HPV Tỷ lệ (%)/ số type xác định HPV đuợc xác dịnh 37 23,72 15 9,62 1,92 2,56 2,56 2,56 10 6,41 21 13,46 4,49 3,21 1,28 3,85 5,13 3,21 5,13 5,13 1,28 0,64 1,28 0,64 1,28 0,64 156 100 Từ Bảng 3, phát 22 type HPV số 24 type xác định Chuyên Đề Sản Phụ Khoa Nghiên cứu Y học kỹ thuật Trong nhóm HPV nguy cao, type HPV 16 dương tính chiếm tỷ lệ cao 23,72% sau HPV 52 chiếm tỷ lệ 13,46% cịn nhóm HPV nguy thấp HPV type HPV type 11 chiếm tỷ lệ 5,13% BÀN LUẬN Trong nghiên cứu phát 16,5% trường hợp bị nhiễm HPV qua kỹ thuật Reverse Dot Blot, kết phù hợp với tần suất nhiễm HPV nước, nước khu vực giới Theo nghiên cứu Lục Thị Vân Bích (2011) khu vực TP Hồ Chí Minh ghi nhận tỷ lệ nhiễm HPV 19,97%(5) Theo nghiên cứu Lê Quang Vinh (2015) khu vực Hà Nội ghi nhận tỷ lệ nhiễm HPV 9,73%(6) Tham khảo nghiên cứu giới, ghi nhận tỷ lệ nhiễm HPV phụ nữ khu vực Châu Á dao động khoảng 10%, theo nghiên cứu tác giả Liu SS (2011) tỷ lệ nhiễm HPV Trung Quốc 10% theo nghiên cứu tác giả Johnson DC (2014) tỷ lệ nhiễm HPV Nepal 9,6%(7,8) Kết khu vực dao động không cao quốc gia Châu Á có điều kiện sống, sinh hoạt, tình trạng kinh tế tương đồng nhau, có chịu ảnh hưởng văn hóa Phương Đơng, có hành vi quan hệ tình dục, lối sống tương đối lành mạnh, tình trạng kinh tế xã hội phát triển, điều kiện chăm sóc y tế khơng khác nhiều, tình trạng tổn thương cổ tử cung phát Tỷ lệ nhiễm HPV phụ thuộc vào độ tuổi, quốc gia khác nhau, tùy vào vùng miền quốc gia, giới đối tượng tham gia nghiên cứu, địa điểm thực hiện, kỹ thuật sinh học phân tử để xác định tình trạng nhiễm HPV, điều kiện trang thiết bị xét nghiệm đại, kỹ thuật viên lành nghề kỹ thuật lấy mẫu bệnh phẩm Khi phân tích tỷ lệ nhiễm HPV theo độ tuổi độ tuổi