Xác định tỷ lệ lậu (N. gonorrhoeae), các tác nhân khác của Hội chứng tiết dịch niệu đạo(HCTDNĐ) và khảo sát độ nhạy cảm kháng sinh của N. gonorrhoeae. Xác định tương đồng giữa nhuộm gram, cấy, PCR, test nhanh trong tìm các nguyên nhân của HCTDNĐ
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 XÁC ĐỊNH TÁC NHÂN GÂY BỆNH CỦA HỘI CHỨNG TIẾT DỊCH NIỆU ĐẠO TẠI BỆNH VIỆN DA LIỄU TP.HCM NĂM 2016 - 2017 Hồ Thị Mỹ Châu*, Châu Văn Trở** TÓM TẮT Mục tiêu: Xác định tỷ lệ lậu (N gonorrhoeae), tác nhân khác Hội chứng tiết dịch niệu đạo(HCTDNĐ) khảo sát độ nhạy cảm kháng sinh N gonorrhoeae Xác định tương đồng nhuộm gram, cấy, PCR, test nhanh tìm nguyên nhân HCTDNĐ Đối tượng phương pháp: Nghiên cứu loạt ca 100 bệnh nhân > 18 tuổi, có HCTDNĐ Bệnh viện Da liễu TP.HCM, từ 9/2016 đến 6/2017 Tất bệnh nhân lấy dịch tiết niệu đạo soi tươi tìm C albican T vaginalis, nhuộm gram tìm hình ảnh N gonorrhoeae, test nhanh tìm C trachomatis, PCR tìm N gonorrhoeae, C trachomatis, M genitalium, U urealyticum, cấy N gonorrhoeae làm kháng sinh đồ Kết quả: Nguyên nhân HCTDNĐ: N gonorrhoeae (51%), C trachomatis (26%), U urealyticum (21%), M genitalium (3%) không rõ (22%) Đồng nhiễm N gonorrhoeae C trachomatis (10%), C trachomatis U urealyticum (5%), N gonorrhoeae U urealyticum 2%, N gonorrhoeae + C trachomatis + U urealyticum (3%) Tương đồng cao nhuộm gram, cấy, PCR tìm N gonorrhoeae (KAPPA > 0,8), Tương đồng test nhanh PCR tim C trachomatis (KAPPA = 0,22) - Tỷ lệ N gonorrhoeae kháng với: Ciprofloxacin (100%), Penicillin (98%), Tetracyclin (98%), Doxycycllin (52%), Cefixim (17,5%), Ceftriaxone (15%) Khơng có chủng Neisseria gonorrhoeae kháng Spectinomycin Azithromycin Kết luận: N gonorrhoeae nguyên nhân thường gặp HCTDNĐ Khi gặp HCTDNĐ nên nhuộm gram tìm hình ảnh N gonorrhoeae, PCR tìm ngun nhân lại 100% N gonorrhoeae nhạy với Spectinomycin Azithromycin Từ khóa: Hội chứng tiết dịch niệu đạo, nhiễm khuẩn lây truyền qua đường tình dục ABSTRACT ETIOLOGY OF URETHRAL DISCHARGE SYNDROME IN HOSPITAL OF DERMATO – VENEREOLOGY OF HCMC FROM 2016 – 2017 Ho Thi My Chau, Chau Van Tro * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Supplement Vol 22 - No 3- 2018: 50- 57 Objectives: To determine percentage of N gonorrhoeae and other etiological agents of urethral discharge syndrome and agreement between methods that were using in hospital of dermato-venereology of HCMC for detection aetiological agents of urethral discharge syndrome and to observe N gonorrhoeae antibiotic resistance in vitro Materials and Methods: 100 men with age over 18 years old presenting with urethral discharge in hospital of Dermato – Venereology of HCMC from 9/2016 to 6/2017 were enrolled Urethral swabs were obtained and processed by gram – stain, wet mount with KOH 10%, rapid test and PCR for the detection of C albican, T.vaginalis, N gonorrhoeae, C.trachomatis, M.genitalium, and U.urealyticum Gonococcal culture for antibiotic resistance Results: - Etiology of urethral discharge was: N gonorrhoeae (51%), C.trachomatis (26%), U.urealyticum (21%), M.genitalium (3%) and unknown (22%) Co-infection: N gonorrhoeae + C.trachomatis (10%), C.trachomatis + U.urealyticum (5%), N gonorrhoeae + U.urealyticum 2%, N gonorrhoeae + C.trachomatis + * Bệnh viện Da liễu TP.HCM Tác giả liên lạc: TS.BS Châu Văn Trở 50 Bộ môn Da liễu Trường Đại học Y khoa Phạm Ngọc Thạch ĐT: 0919042654 Email: troderma@yahoo.com Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Trường Đại Học Y Khoa Phạm Ngọc Thạch năm 2018 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 Nghiên cứu Y học U.urealyticum (3%) There was high agreement between gram – stain, gonococcal culture, PCR for detection N gonorrhoeae (KAPPA > 0,8) and low agreement between rapid test and PCR for detection C.trachomatis (KAPPA = 0,22) - Percentage of N gonorrhoeae antibiotic resistance was: Ciprofloxacin (100%), Penicillin (98%), Tetracyclin (98%), Doxycycline (52%), Cefixim (17.5%), and Ceftriaxone (15%) None of N gonorrhoeae species was resistance to Spectinomycin and Azithromycin Conclusions: N gonorrhoeae was the most common cause of urethral discharge syndrome We should use gram-stain for detection N gonorrhoeae and PCR for detection other aetiological agents of urethral discharge syndrome There were no species of N gonorrhoeae resistance to Spectinomycin and Azithromycin Key words: Urethral discharge syndrome, sexually transmitted infections ĐẶT VẤN ĐỀ Hội chứng tiết dịch niệu đạo (HCTDNĐ) hội chứng thường gặp nhiễm khuẩn lây truyền qua đường tình dục (NKLQTD) nam giới, nguyên nhân lậu (N gonorrhoeae) khơng lậu(2,12) Nhóm ngun nhân không lậu chủ yếu Chlamydia Trachomatis, Mycoplasma genitalium, Ureaplasma urealyticum, Trichomonas vaginalis, Adenovirus, Herpes simplex virus, E coli, nấm men…(5) Bệnh không gây nguy hiểm đến tính mạng khơng điều trị kịp thời điều trị phác đồ để lại nhiều di chứng như: chít hẹp niệu đạo, viêm tinh hồn, viêm mào tinh hồn dẫn đến vơ sinh(5) Vì việc chẩn đoán tác nhân điều trị triệt để quan trọng Hiện Bệnh viện Da liễu Tp.HCM sử dụng nhiều phương pháp để xác định xác tác nhân gây bệnh nhuộm gram, cấy, PCR để tìm N gonorrhoeae ; test nhanh PCR để tìm C trachomatis Tuy nhiên, mức độ tương đồng phương pháp chưa rõ Do việc sử dụng kháng sinh cách bừa bãi làm tỷ lệ lậu cầu kháng thuốc ngày cao(12) Do đó, cần thường xuyên theo dõi, giám sát tính kháng thuốc vi khuẩn lậu để điều trị bệnh đạt kết cao, cắt đứt nguồn lây cho cộng đồng, không để lại biến chứng di chứng cho bệnh nhân Tại thành phố Hồ Chí Minh thời gian gần chưa có nghiên cứu xác định tác nhân gây bệnh HCTDNĐ, tình trạng kháng thuốc vi trùng lậu Trên sở chúng tơi tiến hành đề tài với mục tiêu: Xác định tỷ lệ nhiễm N gonorrhoeae tác nhân khác HCTDNĐ khảo sát kháng thuốc phòng thí nghiệm vi trùng lậu Xác định tương đồng phương pháp sử dụng Bệnh viện Da liễu Tp.HCM tìm nguyên nhân HCTDNĐ ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP Thiết kế nghiên cứu Mô tả loạt ca Đối tượng nghiên cứu Dân số mục tiêu Bệnh nhân có HCTDNĐ bệnh viện Da Liễu Tp.HCM Dân số chọn mẫu Bệnh nhân có HCTDNĐ đến khám điều trị bệnh viện Da Liễu Tp.HCM từ tháng 9/2016 đến tháng 6/2017 thỏa tiêu chí chọn mẫu Tiêu chuẩn chọn mẫu Tuổi từ 18 trở lên, đồng ý tham gia nghiên cứu, có chẩn đốn lâm sàng HCTDNĐ (tiết dịch niệu đạo, tiểu buốt, tiểu gắt, tiểu mủ, cảm giác đau khó chịu đường tiểu), khơng uống kháng sinh vòng tháng Tiêu chuẩn loại trừ Bệnh nhân bị bệnh tâm thần, bệnh không kiểm sốt hành vi, người nước ngồi Phương pháp chọn mẫu Chọn mẫu thuận tiện, tiến cứu Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Trường Đại Học Y Khoa Phạm Ngọc Thạch năm 2018 51 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 Phương pháp nghiên cứu Nghiên cứu lâm sàng, xét nghiệm thực Bệnh viện Da liễu Tp HCM từ 01/09/2016 đến 30/06/2017 Các bước tiến hành Khám lâm sàng thu thập liệu dịch tễ học, triệu chứng lâm sàng bệnh Thực xét nghiệm Lấy bệnh phẩm phòng xét nghiệm vi sinh BVDL Tp HCM Soi tươi dịch tiết niệu đạo với dung dịch Nacl 0,9% tìm C Albican T vaginalis Nhuộm Gram tìm sơng cầu gram (-) hình hạt cà phê Test chẩn đốn nhanh miễn dịch sắc ký Kit SD BIOLINE (Hàn Quốc) tìm C trachomatis Multiplex Real-Time PCR để xác định N gonorrhoeae, C trachomatis, M genitalium, U urealyticum Nuôi cấy bệnh phẩm bệnh phẩm môi trường Thayer- Martin định danh N gonorrhoeae làm kháng sinh đồ với kháng sinh: Doxycycline (Dx), Spectomycine (SPT), Ciprofloxacine (Ci), Penicillin (Pn), Ceftriaxone (CRO), Tetracycline (TE), Cefixime (CFM), Azithromycin (AZM), đọc kết kháng sinh đồ theo phương pháp Kirby-bauer Phương pháp xử lý phân tích số liệu Số liệu thu thập nhập phân tích phần mềm SPSS 18.0 Sử dụng hệ số KAPPA để tìm tương đồng phương pháp Y đức Các bước thực nghiên cứu có KẾT QUẢ Trong thời gian từ 01/09/2016 30/06/2017 thu thập 100 bệnh nhân đủ tiêu chuẩn để đưa vào nghiên cứu với kết sau: Một số đặc điểm dịch tễ lâm sàng mẫu nghiên cứu Nhóm tuổi Bảng 1: Phân bố theo nhóm tuổi Nhóm tuổi 18- ≤ 25 26 - 35 36 - 45 ≥ 45 Tổng n 26 46 17 11 100 70, tuổi trung bình nghiên cứu 33,56 ±10, bệnh xuất đa số nhóm 26-35 tuổi (46%) Triệu chứng đường tiểu Bảng 2: Triệu chứng Triệu chứng Rát bỏng Tiểu khó Ngứa Khác (cảm giác đau, rấm rứt khó chịu đường tiểu ) Khơng triệu chứng Hạn chế đề tài Do thời gian thu thập số liệu ngắn nên chọn thiết kế mô tả hàng loạt ca 52 25 25% 23 23% triệu chứng kèm Triệu chứng đường tiểu thường gặp HCTDNĐ rát bỏng (38%), tiểu khó (30%), ngứa (28%) có Kết xét nghiệm tìm ngun nhân hồn tồn giữ bí mật % 38% 30% 28% nhiều triệu chứng, ngược lại số Liễu Tp.HCM Tất bệnh nhân nhóm cứu.Các thơng tin bệnh nhân mã hóa n 38 30 28 Nhận xét: Có số bệnh nhân có đồng thời 23% không triệu chứng đồng ý tự nguyên ký cam kết tham gia nghiên % 26% 46% 17% 11% 100% Nhận xét: Tuổi thấp 18 tuổi, lớn qui trình chẩn đốn Bệnh viện Da nghiên cứu giải thích đầy đủ đến Kết nhuộm Gram, soi tươi Bảng 3: Kết nhuộm gram soi tươi Căn nguyên Song cầu gram (-) hình hạt cà phê T Vaginalis C Albican Không xác định nguyên nhân Tổng n % 42 42% 0% 0% 58 58% 100 100% Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Trường Đại Học Y Khoa Phạm Ngọc Thạch năm 2018 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 Nhận xét: 100 mẫu bệnh phẩm nhuộm gram soi tươi có 42 mẫu (42%) song cầu gram (-) hình hạt cà phê Kết test nhanh tìm C trachomatis: Bảng 4: Kết test nhanh C trachomatis Dương tính Âm tính Tổng n 96 100 % 4% 96% 100% Nhận xét: 100 mẫu bệnh phẩm thực test nhanh, kết cho thấy mẫu (4%) dương tính với C trachomatis Kết cấy tìm N gonorrhoeae Bảng 5: Kết cấy tìm N gonorrhoeae N gonorrhoeae Dương tính Âm tính Tổng n 46 54 100 % 46% 54% 100% Nhận xét: Có 46% mẫu bệnh phẩm dương tính với N gonorrhoeae Kết PCR (Multiplex Real-Time PCR): Tất 100 mẫu bệnh phẩm làm Multiplex Real-Time PCR để xác định tác nhân N gonorrhoeae, C trachomatis, M genitalium, U urealyticum Bảng 6: Kết PCR (n = 100) Căn nguyên N gonorrhoeae C trachomatis M genitalium U urealyticum Khơng tìm thấy ngun nhân n 50 26 21 22 % 50% 26% 3% 21% 22% Nhận xét: PCR xác định N gonorrhoeae 50%, C trachomatis 26%, U urealyticum 21%, M genitalium 3% có 22% mẫu khơng tìm thấy nguyên nhân Tỉ lệ nguyên nhân kết hợp phương pháp Nguyên nhân 100 trường hợp mắc HCTDNĐ N gonorrhoeae chiếm tỷ lệ cao 51%, C trachomatis 26%, U urealyticum 21%, M genitalium 3% 22% khơng tìm thấy ngun nhân Nghiên cứu Y học Bảng 7: Tỉ lệ nguyên nhân kết hợp phương pháp Căn nguyên N gonorrhoeae C trachomatis M genitalium U urealyticum Khơng tìm thấy nguyên nhân n 51 26 21 22 % 51% 26% 3% 21% 22% Tỉ lệ bệnh nhân đồng nhiễm nhiều nguyên nhân Bảng 8: Tỉ lệ bệnh nhân đồng nhiễm Căn nguyên n % N gonorrhoeae 36 36% C trachomatis 8% M genitalium 3% U urealyticum 11 11% N gonorrhoeae + C trachomatis 10 10% N gonorrhoeae + U urealyticum 2% C trachomatis + U urealyticum 5% N gonorrhoeae + C trachomatis + U urealyticum 3% Khơng tìm thấy ngun nhân 22 22% Tổng 100 100% Nhận xét: Khi phối hợp phương pháp, chúng tơi tìm thấy tỉ lệ bệnh nhân nhiễm nguyên nhân: lậu 36%, C trachomatis 8%, U urealyticum 11%, M genitalium 3% ; tỷ lệ đồng nhiễm nguyên: lậu + C trachomatis 10%, lậu + U urealyticum 2%, C trachomatis + U urealyticum 5%; tỷ lệ đồng nhiễm nguyên lậu + C trachomatis + U urealyticum 3% có 22% trường hợp khơng xác định nguyên nhân Sự tương đồng xét nghiệm chẩn đoán nguyên nhân HCTDNĐ So sánh kết nhuộm Gram PCR tìm N gonorrhoea Bảng 9: So sánh kết nhuộm Gram PCR tìm N gonorrhoeae Tìm lậu Nhuộm Gr (+) Nhuộm Gr (-) Tổng PCR (+) 42 50 PCR (-) 50 50 Tổng 42 58 100 Nhận xét: Chỉ số KAPPA = 0,84 Có tương đồng tốt phương pháp PCR nhuộm gram tìm N gonorrhoeae, (p