Đang tải... (xem toàn văn)
Mục đích của đề tài Xác định tác nhân và khảo sát hiệu lực một số loại thuốc hoá học trong phòng trừ thối nhũn trái thanh long (Hylocereus Undatus L.) nhằm xác định tác nhân gây bệnh thối trái thanh long và khảo nghiệm một số loại thuốc hóa học phòng trừ bệnh.
XÁC ĐỊNH TÁC NHÂN VÀ KHẢO SÁT HIỆU LỰC MỘT SỐ LOẠI THUỐC HỐ HỌC TRONG PHỊNG TRỪ THỐI NHŨN TRÁI THANH LONG (HYLOCEREUS UNDATUS L.) Giáo viên hướng dẫn: TS Võ Thị Thu Oanh Sinh viên thực hiện: Ths Nguyễn Thành Hiếu Phạm Quốc Vinh Nội dung báo cáo Phần 1: Mở đầu Phần 2: Vật liệu phương pháp thí nghiệm Phần 3: Kết Phần 4: Kết luận đề nghị Phần 1: Mở đầu Đặt vấn đề Thanh long đem lại hiệu kinh tế cao nâng cao thu nhập đáng kể cho nông dân vùng trồng Thời gian gần đây, thực tế sản xuất xuất loại dịch hại gây ảnh hưởng không nhỏ cho long, bệnh thối nhũn trái long Xuất phát từ yêu cầu thực tiễn đề tài “Xác định tác nhân khảo sát hiệu lực số loại thuốc hố học phòng trừ bệnh thối nhũn trái long (Hylocereus undatus L.)” thực Mục đích yêu cầu Mục đích ➢ Xác định tác nhân gây bệnh thối trái long khảo nghiệm số loại thuốc hóa học phòng trừ bệnh Yêu cầu ➢ Xác định phân lập tác nhân gây bệnh thối nhũn trái ➢ Khảo nghiệm tìm loại thuốc phòng trị bệnh thối nhũn trái hiệu Phần PHƯƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM Thời gian địa điểm thực Vật liệu Phương pháp Thời gian địa điểm thực Thời gian: ✓Đề tài thực từ tháng 02 đến tháng 07 năm 2011 Địa điểm thực hiện: ✓Thí nghiệm thuốc đồng: thực Quơn Long – Chợ Gạo – Tiền Giang ✓Chủng Koch thí nghiệm khác: thực Viện Cây Ăn Quả Miền Nam Vật liệu • Phân lập, ni cấy: đĩa petri, môi trường nuôi cấy PDA NA, giấy thấm, tủ cấy… • Chủng Koch thí nghiệm thuốc ngồi đồng: bình phun, kim tiêm y tế, bơng y tế, kéo… • Các dụng cụ quan sát nấm vi khuẩn: kính hiển vi, lam, lamen, đèn cồn… Phương pháp Phân lập, nuôi cấy Giám định tác nhân nấm Giám định tác nhân vi khuẩn Kiểm chứng tác nhân thơng qua quy trình Koch Phản ứng sinh hóa Khảo sát hiệu số loại thuốc hoá học điều kiện in vitro Khảo sát hiệu số loại thuốc hố học điều kiện ngồi đồng Phân lập, nuôi cấy Thu mẫu bệnh: ● Được thu thập bơng trái có biểu rõ ràng, đựng riêng túi nylon, ghi rõ nơi thu, thời gian thu ● Mỗi vườn thu – trụ, trụ 1-2 trái Xử lý mẫu: ● Mẫu lau cồn 700 ● Cắt thành mảnh 2x2mm,xử lý lại cồn nước cất ● Cấy vào môi trường NA, PDA đặt nhiệt độ phòng quan sát Giám định tác nhân nấm ➢ Nấm sau phân lập giữ mẫu môi trường PDA để quan sát giám định Phương pháp giám định: ➢ Được thực theo tài liệu Clements (1973) ➢ Quan sát tơ nấm, hạch nấm, bào tử … kính hiển vi Kết phản ứng sinh hóa Sau cho tế bào vi khuẩn nuôi 24 tuổi lên lam nhỏ giọt H2O2 vào có tượng sủi bọt khí từ khối vi khuẩn, cho thấy vi khuẩn có enzym catalase phù hợp với kết Schaad (1998) Kết phản ứng sinh hóa Sau nhuộm với dung dịch Iodine tinh bột kết tủa với iot có màu nâu, xuất vùng sáng khơng có kết tủa tinh bột với iot chứng tỏ vi khuẩn có khả thủy phân tinh bột Sau nhuộm Lugol Phân giải citrate Sau ngày cấy môi trường Cimmon’s Citrate Agar dùng để kiểm tra khả sử dụng citrate cho kết dương tính, kết quan sát thông qua đổi màu môi trường từ xanh sang xanh lục Sau ngày chủng Thí nghiệm gây thối nhũn khoai tây Sau 24 chủng vi khuẩn quan sát kết thấy có tượng thối đen xung quanh vùng chủng vi khuẩn cho thấy vi khuẩn có khả gây thối nhũn khoai tây Triệu chứng thối sau 24 chủng Kết phản ứng sinh hóa STT Đặc điểm Ghi Phản ứng Catalase + Khả thủy phân tinh bột + Khả phân hủy citrate + Gây thối nhũn khoai tây + Ghi chú: + phản ứng dương tính, - phản ứng âm tính Kết phản ứng sinh hóa Phản ứng Catalase dương tính phù hợp với kết giám định vi khuẩn theo Schadd (1988), Goszcynska (2000) Khả gây thối nhũn khoai tây kết thí nghiệm trình bày phù hợp với kết Goszcynska (2000) nói khả gây thối nhũn khoai tây giám định vi khuẩn Erwinia sp điều kiện phòng thí nghiệm Tóm lại: qua kết giám định kết luận dòng vi khuẩn Vk5 thuộc chi vi khuẩn Erwinia sp dựa vào số đặc điểm Nhuộm gram, quan sát hình dạng vi khuẩn nấm Hình : Hình dạng vi khuẩn nhuộm gram Hình : Hình dạng khuẩn lạc vi khuẩn Hình Bào tử nấm Rhizopus sp Hình Nấm Rhizopus ni cấy PDA Kết khảo sát hiệu số loại thuốc hoá học điều kiện in vitro Nghiệm thức Starner 20WP Ditacin 8L Avalon 8WP Đường kính vòng vô khuẩn NSC NSC NSC NSC 5,00 c 5,00 b 5,00 b 5,00 c 6,13 a 6,53 a 7,07 a 7,60 a 5,00 c 5,00 b 5,00 b 5,00 c Poner 40T Kasuran 47WP 5,00 c 5,00 c 5,00 b 5,00 b 5,00 b 5,00 b 5,00 c 5,00 c Norshield 86.2WP Bacillus Đối chứng Mức ý nghĩa CV% 5,00 c 5,57 b 6,13 a ** 0,66 5,00 b 6,50 a 6,53 a ** 0,52 5,00 b 7,07 a 7,07 a ** 1,94 5,00 c 7,33 b 7,60 a ** 1,72 Mức độ kháng vi khuẩn nghiệm thức Nghiệm thức Phân cấp vòng vơ khuẩn 1NSC 1NSC 1NSC 1NSC Starner 20WP 0 0 Ditacin 8L 1 2 Avalon 8WP Poner 40T Kasuran 47WP Norshield 86.2WP Bacillus Đối chứng 0 0 1 0 0 1 0 0 2 0 0 2 Kết khảo sát ảnh hưởng số loại thuốc hoá học đến tỷ lệ thối Nghiệm thức Tỷ lệ thối (%) Sau phun lần Sau phun lần Starner 20WP 33,04 a 27,84 a Ditacin 8L 5,71 c 0,00 d Avalon 8WP 4,66 c 0,00 d Biogreen 0,61 d 0,00 d Poner 40T 5,28 c 6,86 c Kasuran 47WP 0,00 d 18,05 b Coc 85WP 9,25 bc 15,56 b Bacillus 14,62 b 21,10 ab Đối chứng 25,42 a 29,17 a ** ** 14,38 11,81 Mức ý nghĩa CV(%) Phần KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ KẾT LUẬN Trong tác nhân phân lập trái long có dòng vi khuẩn tác nhân nấm tác nhân phụ gây bệnh thối nhũn đầu trái long Qua giám định theo tài liệu Clements (1973) nấm phân lập nấm Rhizopus sp KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Vi khuẩn quan sát kính hiển vi nhuộm gram có dạng hình roi, gram âm có tên Erwinia sp.(Shchaad, 1988 Goszcynska, 2000) Các loại thuốc Ditacin , Avalon Biogreen có hiệu tốt làm giảm tỷ lệ bơng thối điều kiện ngồi đồng KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ ĐỀ NGHỊ Cần tiếp tục tiến hành thêm thí nghiệm để định danh vi khuẩn gây thối nhũn trái long Tiến hành thí nghiệm nhiều loại thuốc phòng trị bệnh thối đầu trái long Phun loại thuốc Ditacin , Avalon Biogreen có kết hợp với rút râu sớm sau hoa nở (thụ phấn hoàn toàn) điều kiện mùa mưa làm giảm tỷ lệ bệnh Cám ơn thầy cô bạn ý theo dõi ! ... xuất loại dịch hại gây ảnh hưởng không nhỏ cho long, bệnh thối nhũn trái long Xuất phát từ yêu cầu thực tiễn đề tài Xác định tác nhân khảo sát hiệu lực số loại thuốc hố học phòng trừ bệnh thối nhũn. .. nhũn trái long (Hylocereus undatus L.) thực Mục đích yêu cầu Mục đích ➢ Xác định tác nhân gây bệnh thối trái long khảo nghiệm số loại thuốc hóa học phòng trừ bệnh Yêu cầu ➢ Xác định phân lập tác. .. nấm Giám định tác nhân vi khuẩn Kiểm chứng tác nhân thơng qua quy trình Koch Phản ứng sinh hóa Khảo sát hiệu số loại thuốc hoá học điều kiện in vitro Khảo sát hiệu số loại thuốc hố học điều kiện