Báo cáo khóa luận tốt nghiệp: Xác định thành phần bệnh hại chính trên cây đậu phộng ngoài đồng, sau thu hoạch và hiệu quả phòng trừ của một số chế phẩm sinh học

Mục tiêu đề tài gồm: Điều tra thành phần bệnh trên đậu phộng giai đoạn đồng ruộng, thu thập và giám định thành phần bệnh nấm gây hại trên hạt đậu phộng sau thu hoạch, xác định mức độ gây hại của từng loại nấm trên mẫu hạt giống thu thập, mô tả đặc điểm hình thái của nấm gây bệnh trên hạt giống và trong môi trường nuôi cấy, xác định sự ảnh hưởng của các tác nhân nấm gây bệnh đến khả năng nảy mầm của hạt giống đậu phộng.

Báo cáo

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP

GVHD: TS Võ Thị Thu Oanh

ThS Bùi Thị Thùy Trang

SVTH: Lê Thị Phương Loan

Khoa: Nông học

Đề tài:

XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN BỆNH HẠI CHÍNH TRÊN CÂY ĐẬU PHỘNG NGOÀI ĐỒNG, SAU THU HOẠCH VÀ HIỆU QUẢ PHÒNG TRỪ CỦA MỘT SỐ CHẾ PHẨM SINH HỌC

Chương 1 Mở đầu

• Hạt đậu phộng lại dễ bị xâm nhiễm và là nơi trú

ẩn của nhiều loài vi sinh vật, đặc biệt là các loài

nấm gây bệnh như Aspergilus spp., Sclerotium spp., Rhizoctonia spp., Rhizopus spp.,…

• Với mục tiêu an toàn, thân thiện với môi trường

và đảm bảo một nền nông nghiệp bền vững Ngày nay, các biện pháp sinh học và sử dụng các chế phẩm sinh học đang được các nước trên thế giới khuyến khích sử dụng.

• Do đó, chúng tôi đã tiến hành thực hiện đề tài:

“Xác định thành phần bệnh hại chính trên cây

đậu phộng ngoài đồng, sau thu hoạch và hiệu quả phòng trừ của một số chế phẩm sinh học”.

• So sánh hiệu quả của một số chế phẩm sinh học trong điều kiện in-vitro và nhà lưới.

Chương 2 Vật liệu và phương pháp

nghiên cứu

Hình 2.1 10 giống đậu phộng đã

được tách vỏ

2.1 Vật liệu

Bảng 2.1 Phả hệ của 10 giống đậu phộng thu thập

5 VD1 Do Viện Cây có dầu chọn thuần từ giống Lỳ địa phương

6 VD7 Chọn lọc từ tập đoàn nhập nội của Úc

7 OMDP13 (Chưa xác định)

8 HL25 ICGSE 56 chọn lọc nhập nội từ IRRI

9 L24 Chọn lọc từ tập đoàn nhập nội từ Trung Quốc

2.2 Thời gian và địa điểm thực hiện đề tài

• Thời gian: từ tháng 3/2011 đến tháng 6/2011

• Địa điểm thực hiện:

+ Điều tra ngoài đồng ruộng tại 2 huyện Châu Thành và Dương Minh Châu của tỉnh Tây Ninh.

+ Nghiên cứu in-vitro tại phòng thí nghiệm Bệnh Cây – bộ môn Bảo Vệ Thực Vật, khoa Nông Học, trường Đại học Nông lâm Tp.HCM.

+ Nghiên cứu nhà lưới tại nhà lưới của Trại Khoa Nông Học, trường Đại học Nông Lâm Tp.HCM.

2.3 Nội dung nghiên cứu

• Điều tra tình hình bệnh hại trên đậu phộng ngoài đồng.

• Thu thập và xác định thành phần nấm bệnh sau thu hoạch của một số giống đậu phộng.

• Đánh giá tỷ lệ nảy mầm của 10 giống đậu phộng thu thập trong điều kiện in-vitro và nhà lưới.

• So sánh hiệu quả của 3 chế phẩm sinh học trong điều kiện in-vitro và nhà lưới.

2.4 Phương pháp nghiên cứu

2.4.1 Điều tra tình hình bệnh hại trên đậu

phộng ngoài đồng

• Phương pháp: ngẫu nhiên mỗi huyện 2 xã, mỗi

xã 3 ruộng, mỗi ruộng quan sát 5 điểm chéo gốc, mỗi điểm quan sát 20 cây, ở giai đoạn quả vào chắc và chuẩn bị thu hoạch.

• Chẩn đoán bệnh: dựa vào triệu chứng biểu hiện bệnh bên ngoài điển hình.

• Chỉ tiêu theo dõi và công thức tính:

TLB (%) = (Số cây bệnh/số cây điều tra)x100

2.4.2 Thu thập và xác định thành phần nấm bệnh sau thu hoạch của một số giống đậu phộng thu thập năm 2011

2.4.2.1 Thu thập mẫu hạt đậu phộng

Thu thập 10 giống đậu phộng còn nguyên vỏ tại Trung tâm giống Nông Nghiệp Tây Ninh - ấp Bình Phong, xã Thái Bình, huyện Châu Thành, tỉnh Tây Ninh.

Mỗi mẫu lấy ngẫu nhiên 10 điểm trong kho bảo quản, thu 100 g mỗi điểm, mỗi giống thu

1000 (g) Sau khi mang về đậu được tách vỏ và lấy ngẫu nhiên hạt để làm mẫu điều tra.

2.4.2.2 Xác định thành phần nấm bệnh sau thu hoạch của một số giống đậu phộng thu thập năm 2011

• Bố trí thí nghiệm: theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên

o Sắp xếp 10 hạt trên 1 đĩa petri;

o 10 giống tương ứng với 10 NT;

o Mỗi giống bố trí 100 hạt chia làm 5 lần lập lại(tương ứng với 10 đĩa petri)

o Tổng số hạt đậu phộng thí nghiệm là 1000 hạt

Hình 2.3 A - Đĩa petri Ф = 9 cm đã được đặt giấy lọc làm ẩm;

B - Đĩa petri Ф = 9 cm đã được đặt giấy lọc làm ẩm và đặt hạt

Chỉ tiêu theo dõi và công thức tính:

o Sau đó tiếp tục cấy chuyền nấm qua môi trường PGA

để tiếp tục định danh loài nấm gây hại.

2.4.3 Đánh giá tỷ lệ nảy mầm của các mẫu đậu phộng thu thập trong điều kiện in-vitro và nhà lưới

2.4.3.1 Đánh giá tỷ lệ nảy mầm của các mẫu đậu phộng thu thập trong điều kiện in-vitro

• Bố trí thí nghiệm: theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên với

10 NT (tương ứng với 10 giống), mỗi giống bố trí 50hạt chia làm 5 lần lập lại (tương ứng 10 đĩa petri).Tổng hạt thí nghiệm là 500 hạt

• Phương pháp: khử trùng hạt bằng HgCl2 10/00 và cồn70° Sau đó gieo hạt trên đĩa petri đã chứa môi trường

sáng, 12h tối

Thời gian theo dõi: 7 NSG Các chỉ tiêu theo dõi:

Hình 2.4 Môi trường thí nghiệm và các dạng hạt theo dõi trong điều

kiện in-vitro; A – Hạt đậu phộng được đặt trong đĩa petri chứa môi trường WA; B – Hạt nảy mầm bình và mầm dị dạng; C – Hạt nảy mầm

bị thối; D – Hạt nảy mầm bị nhiễm nấm

Các công thức tính:

+ Tỷ lệ nảy mầm = (số hạt nảy mầm/số hạt gieo) x 100

+ Tỷ lệ mầm bình thường = (số mầm bình thường/số hạt gieo)x100

+ Tỷ lệ mầm dị dạng = (số mầm dị dạng/số hạt gieo) x 100

+ Tỷ lệ mầm bị thối = (số mầm bị thối/số hạt gieo) x 100

+ Tỷ lệ mầm bị thối = (số mầm bị thối/số hạt gieo) x 100

+ Tỷ lệ mầm nhiễm nấm = (số mầm nhiễm nấm/số hạt gieo)x100

2.4.3.2 Đánh giá tỷ lệ nảy mầm của các mẫu đậu phộng thu thập trong điều kiện nhà lưới

• Bố trí thí nghiệm: theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên với

10 NT (tương ứng 10 giống) và 3 lần lập lại (tươngứng 3 khay) Tổng số khay của thí nghiệm là 30 khay

• Phương pháp: khay nhựa có kích thước 35x50x14

cm, dùng đất sạch cao cấp giàu dinh dưỡng Lavamix

đổ vào khay với chiều cao lớp đất khoảng 7 cm Sau

đó gieo hạt đậu phộng vào khay với 15 hạt trên 1khay, theo 3 hàng, mỗi hàng gieo 5 hạt

Theo dõi và thu thập số liệu ở 14 NSG, chọn ngẫunhiên 10 cây trên 1 NT để đo chiều cao cây.

Các chỉ tiêu theo dõi:

2.4.4 So sánh hiệu quả của các chế phẩm sinh học trong điều kiện in-vitro và nhà lưới

Thí nghiệm được thực hiện trên giống đậu phộng VD1

2.4.4.1 So sánh hiệu quả của các chế phẩm sinh học trong điều kiện in-vitro

• Bố trí thí nghiệm: theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên, mỗi

NT xử lý 100 hạt chia làm 5 lần lập lại (tương ứng 20 đĩa petri) Tổng số hạt thí nghiệm là 400 hạt.

• Thí nghiệm gồm 4 nghiệm thức (NT) như sau:

NT1: Đối chứng (không xử lý chế phẩm sinh học).

NT2: Xử lý bằng chế phẩm NLU-Tri (nồng độ 10%) trong 5 phút.

NT3: Xử lý bằng chế phẩm Chubeca 1.8 DD (nồng độ 10%) trong 5 phút.

NT4: Xử lý bằng chế phẩm E.M (nồng độ 10%) trong 5 phút.

Bảng 2.2 Đặc điểm các chế phẩm sinh học dùng trong

thí nghiệm xử lý hạt giống

STT Tên thuốc Dạng thuốc Tên hoạt chất Nơi sản xuất

1 Chubeca 1.8DD Dung dịch Polyphenol chiết suất từ

cây núc nắc (Oroxylum

indicum) và lá, vỏ cây

liễu (Salix babylonica)

Trung tâm Nghiên Cứu và Phát Triển Công Nghệ Hóa Sinh

2 NLU-Tri Bột Trichoderma viren

(T.41).109 cuf/g

Trường Đại học Nông Lâm Tp.HCM

3 E.M Dung dịch Tổ hợp các vi sinh vật

có ích

Trung tâm Nghiên cứu và Chuyển giao khoa học công nghệ

• Các chỉ tiêu theo dõi và công thức tính:

+Tỷ lệ nảy mầm = (số hạt nảy mầm/số hạt gieo)x100 +Tỷ lệ mầm bình thường = (số mầm bình thường/số hạt gieo)x100

+Tỷ lệ mầm dị dạng = (số mầm dị dạng/số hạt gieo)x100

+Tỷ lệ mầm bị thối = (số mầm bị thối/số hạt gieo)x100

+Tỷ lệ mầm nhiễm nấm = (số mầm nhiễm nấm/số hạt gieo)x100

2.4.4.2 So sánh hiệu quả của các chế phẩm sinh học trong điều kiện nhà lưới

• Bố trí thí nghiệm: theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên, 4 nghiệm thức, 4 lần lập lại (tương ứng với 4 khay), gieo 15 hạt trên 1 khay Tổng số khay thí nghiệm: 16 khay.

• Thí nghiệm gồm với 4 nghiệm thức (NT) như sau:

o NT1: Đối chứng (không xử lý chế phẩm sinh học)

o NT2: Xử lý bằng chế phẩm NLU-Tri (nồng độ 10%) trong

5 phút.

o NT3: Xử lý bằng chế phẩm Chubeca 1.8DD (nồng độ 10%) trong 5 phút.

o NT4: Xử lý bằng chế phẩm E.M (nồng độ 10%) trong 5 phút.

• Hạt sau khi xử lý được gieo trong khay nhựa với

số lượng 15 hạt trên 1 khay.

• Thời gian theo dõi: 7, 14, 21 NSG.

• Các chỉ tiêu theo dõi:

o Chiều cao cây

Hình 2.5 Cây đậu phộng gieo trong nhà lưới; A – Cây bình thường;

B – Cây dị dạng; C – Mầm bị nhiễm nấm Aspergilus niger Van Tiegh; D – Hạt chết do nấm Aspergilus niger Van Tiegh và

Aspergilus sp.

• Các công thức tính toán:

+ Tỷ lệ cây mọc = (số cây mọc/số hạt gieo)x100

+ Tỷ lệ cây bình thường = (số cây bình thường/số hạtgieo)x100

+ Tỷ lệ cây dị dạng = (số cây dị dạng/số hạt gieo)x100+ Tỷ lệ mầm nhiễm nấm = (số mầm nhiễm nấm/số hạtgieo)x100

+ Tỷ lệ hạt chết = (số hạt chết/số hạt gieo)x100

Hình 2.6 Khu thí nghiệm so sánh hiệu lực thuốc trong điều kiện

nhà lưới

2.3.5 Phương pháp phân tích và xử lý số liệu

• Số liệu thô và số liệu tinh: được ghi chép và tính toán trên phần mềm Microsoft Excel.

• Số liệu tinh được chuyển đổi theo điều kiện chuyển đổi số liệu, sau đó phân tích ANOVA bằng phần mềm thống kê MSTATC 1.2 (1991), dùng phép thử Duncan’s để so sánh mức ý nghĩa giữa các nghiệm thức.

Chương 3 Kết quả nghiên cứu

3.1 Thành phần bệnh hại trên đậu phộng ngoài đồng

Huyện Dương Minh Châu

3 Héo rũ gốc

mốc trắng

Sclerotium rolfsii Sacc

47,17 10,00

Bảng 3.1 Thành phần và mức độ gây hại đậu phộng ngoài đồng tại huyện

Châu Thành và Dương Minh Châu tỉnh Tây Ninh vụ Xuân năm 2011

Hình 3.1 Các bệnh hại chính trên cây đậu phộng điều tra ngoài

đồng; A – Gốc mốc trắng do nấm Sclerotium rolfsii Sacc; B –

Ruộng bị bỏ hoang do bệnh héo rũ gốc mốc trắng; C – Bệnh đốm

nâu trên lá; D – Bệnh đốm nâu và gỉ sắt trên lá

3.2 Thành phần nấm bệnh trên hạt đậu phộng sau thu hoạch thu thập năm 2011

Bảng 3.2 Tỷ lệ nhiễm nấm bệnh của 10 giống đậu phộng điều tra

Bảng 3.3 Thành phần và mức độ phổ biến một số loài nấm gây

hại trên hạt của 10 giống đậu phộng khảo sát

3.2.1 Nấm Pythium sp.

Hình 3.2 Nấm Pythium sp A – Hạt đậu phộng nhiễm

Pythium sp.; B – Khuẩn lạc trên môi trường PGA; C, D –

Tế bào sợi nấm phình to

C

D D

3.2.2 Nấm Macrophomina phaseolina (Tassi) Goidanich

Hình 3.3 Nấm Macrophomina phaseolina (Tassi)

Goidanich; A – Hạt đậu phộng nhiễm nấm; B – Khuẩn lạc trên môi trường PGA; C, D – Các vi hạch màu đen

3.2.3 Nấm Aspergilus flavus Link

Hình 3.4 Nấm Aspergilus flavus Link; A – Hạt đậu

phộng nhiễm nấm; B – Khuẩn lạc trên mỗi trường PGA;

C, D – Cành bào tủ phân sinh và bào tủ phân sinh

3.2.4 Nấm Aspergilus niger Van Tiegh

Hình 3.5 Nấm Aspergilus niger Van TieghA – Hạt đậu

phộng nhiễm nấm; B – Khuẩn lạc trên môi trường PGA;

C, D – Cành bào tủ phân sinh và bào tử phân sinh

3.2.5 Nấm Aspergilus parasiticus Speare

Hình 3.6 Nấm Aspergilus parasiticus Speare; A –

Hạt nhiễm nấm; B – Khuẩn lạc trên môi trường PGA;

C, D – Cành bào tủ phân sinh và bào tử phân sinh

3.2.6 Nấm Aspergilus sp.

Hình 3.7 Nấm Aspergilus sp.; A – Hạt nhiễm nấm; B – Khuẩn

lạc trên môi trường PGA; C, D – Cành bào tử phân sinh và bào

tử phân s inh

3.2.7 Nấm Rhizopus sp.

Hình 3.8 Nấm Rhizopus sp.

A – Hạt nhiễm nấm; B – Tản nấm trên môi trường

PGA; C – Rễ giả; D – Túi và bào tủ túi

3.2.8 Nấm Sclerotium rolfsii Sacc

Hình 3.9 Nấm Sclerotium rolfsii Sacc; A – Tản nấm phát

triển trên hạt đậu phộng; B – Tản nấm trên môi trường PGA;

C, D – Hạch nấm

Bảng 3.4 Tỷ lệ nhiễm của từng loài nấm trên 10 giống

đậu phộng khảo sát

3.3 Tỷ lệ nảy mầm của các mẫu hạt đậu phộng thu thập trong điều kiện in-vitro và

nhà lưới

3.3.1 Tỷ lệ nảy mầm của các mẫu hạt đậu phộng trong điều kiện in-vitro

Mầm nhiễm nấm

Mầm nhiễm nấm/Hạt nảy mầm

VD7 84 c 6 e 28 b 52 c 78 cd 92,86 GV3 96 a 12 c 24 bc 72 a 96 a 100

GV10 84 c 22 b 38 a 26 f 82 bc 97,62 GV12 94 ab 44 a 24 bc 26 f 86 b 91,49

Bảng 3.5 Khả năng nảy mầm của 10 giống đậu phộng thu thập trong điều

kiện in-vitro ở giai đoạn 7 ngày sau gieo

Ghi chú: giá trị trong cùng một cột mang các chữ cái giống nhau thì không khác nhau nghĩa về mặt thống

kê ở mức α = 0,01.

3.3.2 Tỷ lệ nảy mầm của các mẫu đậu phộng trong điều kiện

nhà lưới

STT Giống TLNM

(%)

CCC (cm)

Số nhánh (nhánh)

Số lá (lá)

8,18 0,55

Bảng 3.6 Tỷ lệ nảy mầm và khả năng sinh trưởng của 10 giống

đậu phộng ở giai đoạn 14 ngày sau gieo

Ghi chú: giá trị trong cùng một cột mang các chữ cái giống nhau thì không khác nhau ý nghĩa

về mặt thống kê.

CCC: Chiều cao cây TLNM: Tỷ lệ nảy mầm

3.4 Ảnh hưởng của các chế phẩm sinh học đến khả năng phòng trừ nấm bệnh trên hạt giống đậu phộng

trong điều kiện in-vitro và nhà lưới

3.4.1 Ảnh hưởng của các chế phẩm sinh học đến khả năng

phòng trừ nấm bệnh trên hạt giống đậu phộng trong điều

kiện in-vitro

Nghiệm thức

Tỷ lệ (%)

Hạt nhiễm nấm

Hạt nảy mầm

Mầm bình thường

Mầm dị dạng

Mầm bị thối

Mầm nhiễm nấm

Bảng 3.7 Ảnh hưởng của 3 loại chế phẩm sinh học đến tỷ lệ nhiễm nấm và khả

năng nảy mầm của hạt đậu phộng trong điều kiện in-vitro ở 7 ngày sau gieo

3.4.2 Ảnh hưởng của các chế phẩm sinh học đến khả năng phòng trừ nấm bệnh trên hạt giống đậu phộng trong điều kiện nhà lưới

Mầm nhiễm nấm

Hạt không mọc Đối chứng 50,00 bc 41,67 8,33 16,67 a 30,00 b

Bảng 3.8 Ảnh hưởng của 3 loại chế phẩm sinh học đến khả năng nảy

mầm của hạt đậu phộng trong điều kiện nhà lưới ở 21 ngày sau gieo

Bảng 3.9 Ảnh hưởng của 3 loại chế phẩm sinh học đến khả năng

sinh trưởng của cây đậu phộng trong điều kiện nhà lưới ở 21

ngày sau gieo

Chiều cao cây

(cm)

Số nhánh (nhánh)

Số lá (lá)

Chương 4 Kết luận và đề nghị

4.1 Kết luận

• Ngoài đồng, xác định được 3 loại bệnh chính gây hạiphổ biến ở cả huyện Châu Thành và Dương MinhChâu là đốm nâu, rỉ sắt, và héo rũ gốc mốc trắng

• Xác định được 8 loài nấm gây hại chủ yếu trên hạt

đậu phộng: Pythium sp., Macrophomina phaseolina (Tassi) Goidanich, Aspergilus flavus Link, Aspergilus

Aspergillus sp., Rhizopus sp., Sclerotium rolfsii Sacc.

• Qua các kết quả điều tra cho thấy nấm Sclerotium

rolfsii Sacc có khả năng lan truyền từ giai đoạn cây

ngoài đồng sang hạt đậu phộng sau thu hoạch

• Giống đậu phộng VD1 có tỷ lệ nhiễm nấm bệnh caonhất Giống L14 có tỷ lệ nhiễm nấm thấp nhất, tỷ lệnảy mầm và khả năng sinh trưởng tốt nhất trong điềukiện nhà lưới.

• Trong 3 chế phẩm dùng để xử lý hạt giống đậu phộngtrước khi gieo trồng, thì chế phẩm nấm đối khángNLU – Tri và chế phẩm tổ hợp các vi sinh vật hữu íchE.M có hiệu quả trong điều kiện in-vitro và điều kiệngieo trồng trong nhà lưới

• Chế phẩm tổ hợp dầu thực vật Chubeca 1.8 DDkhông phù hợp với việc xử lý hạt giống trực tiếptrước khi gieo trồng

4.2 Đề nghị

• Tiếp tục điều tra bệnh hại trên đậu phộng ở nhiều giai đoạn khác nhau trước và sau thu hoạch với diện tích rộng hơn để có kết luận rõ hơn về bệnh hại đậu phộng trong giai đoạn đồng ruộng và sự truyền bệnh từ giai đoạn đồng ruộng sang hạt

giống đậu phộng sau thu hoạch.

• Tiếp tục nghiên cứu hiệu lực của 3 chế phẩm sinh học nấm đối kháng NLU – Tri, tổ hợp dầu thực vật Chubeca 1.8 DD và tổ hợp các vi sinh vật có ích E.M để có kết quả rõ hơn.

Cám ơn thầy, cô và các bạn

đã chú ý lắng nghe!!!