Nghiên cứu hệ thống tái sinh in vitro phục vụ chuyển gen ở cây đậu nho nhe (vigna umbellata)

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM VŨ THU TRANG NGHIÊN CỨU HỆ THỐNG TÁI SINH IN VITRO PHỤC VỤ CHUYỂN GEN Ở CÂY ĐẬU NHO NHE (VIGNA UMBELLATA) LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Thái Nguyên - 2019 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM VŨ THU TRANG NGHIÊN CỨU HỆ THỐNG TÁI SINH IN VITRO PHỤC VỤ CHUYỂN GEN Ở CÂY ĐẬU NHO NHE (VIGNA UMBELLATA) Ngành: Di truyền học Mã số: 8.42.01.21 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Cán hướng dẫn khoa học: GS.TS Chu Hoàng Mậu Thái Nguyên - 2019 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan nội dung trình bày luận văn kết nghiên cứu hướng dẫn trực tiếp GS.TS Chu Hoàng Mậu Các số liệu, kết sử dụng luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Tác giả luận văn Vũ Thu Trang Xác nhận BCN Khoa Xác nhận cán hướng dẫn Nguyễn Thị Tâm GS.TS Chu Hồng Mậu LỜI CẢM ƠN Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn tới GS.TS Chu Hồng Mậu tận tình hướng dẫn, bảo tạo điều kiện tốt giúp tơi thực nghiên cứu hồn thành luận văn thạc sĩ Tôi xin chân thành cảm ơn hỗ trợ Đề tài khoa học-công nghệ cấp Bộ Giáo dục & Đào tạo mang mã số B2017-TNA-38 GS.TS Chu Hoàng Mậu làm chủ nhiệm Tôi xin cảm ơn thầy cô cán Bộ môn Sinh học đại & Giáo dục sinh học, Khoa Sinh học, Trường Đại học Sư phạm – Đại học Thái Nguyên tạo điều kiện, giúp đỡ tơi q trình học tập nghiên cứu để hồn thành khóa học Cuối cùng, tơi xin gửi lời cảm ơn đến gia đình bạn bè động viên giúp đỡ suốt thời gian học tập, nghiên cứu hoàn thành luận văn Tác giả luận văn Vũ Thu Trang MỤC LỤC Tran g Lời cam đoan………………………………………………………… Lời cảm ơn…………………………………………………………… Mục Danh mục hình………………………………………………… mục bảng……………………………………………………… Danh mục chữ viết tắt……………………………………………… Mở ii iii lục………………………………………………………………… Danh i đầu ……………………………………………………………… iv v vi 1 Đặt vấn đề …………………………………………………… Mục tiêu nghiên cứu ……………………………………………… Nội dung nghiên cứu………………………………………… Chương Tổng quan tài liệu……………………………………… 1.1 Cây đậu Nho nhe………………………………………………… 1.1.1 Nguồn gốc, phân loại, đặc điểm sinh học đậu Nho nhe…… 1.1.2 Giá trị dinh dưỡng giá trị sử dụng đậu Nho nhe 1.2 Nuôi cấy mô tế bào thực vật 1.2.1 Cơ sở khoa học kỹ thuật nuôi cấy in vitro mô tế bào thực vật 1.2.2 Môi trường ni cấy tế bào thực vật……………………………… Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn 1.2.3 Các yếu tố đảm bảo thành cơng q trình ni cấy mơ tế bào thực 13 vật………………………………………………………………… 1.3 Hệ thống tái sinh in vitro phục vụ chuyển gen họ Đậu 15 Chương Vật liệu phương pháp nghiên cứu 18 2.1 Vật liệu, địa điểm thời gian nghiên 18 cứu……………………… 2.1.1 Vật liệu thực 18 vật………………………………………………… 2.1.2 Hóa chất, thiết bị……………………………………………… 2.1.3 Địa điểm thời gian nghiên cứu Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ iv thông tin – ĐHTN 18 19 http://lrc.tnu.edu.vn 2.2 Phương pháp nghiên cứu………………………………………… 19 2.2.1 Phương pháp khử trùng hạt, tạo nuôi cấy in vitro 19 2.2.2 Tái sinh chồi đậu Nho nhe từ mô sẹo………………… 20 2.2.3 Tái sinh đa chồi đậu Nho nhe từ mầm chồi ngọn… 21 2.2.4 Môi trường rễ……………………………………………… 22 2.2.5 Ra chế độ chăm sóc……………………………………… 23 2.2.6 Phương pháp xử lý kết tính toán số liệu………………… 24 Chương Kết thảo luận……………………………… 25 3.1 Kết nghiên cứu khử trùng hạt đậu Nho nhe………………… 25 3.2 Tái sinh in vitro đậu Nho nhe…………………………………… 28 3.2.1 Tái sinh chồi đậu Nho nhe từ mô sẹo………………………… 28 3.2.2 Tái sinh chồi đậu Nho nhe từ nách mầm chồi ngọn… 29 3.2.3 Ảnh hưởng BAP đến tái sinh chồi từ chồi in vitro 33 3.2.4 Ảnh hưởng IBA đến khả rễ chồi in vitro……… 37 3.3 Chuyển in vitro môi trường tự nhiên……………………… 39 Kết luận đề nghị………………………………………………… 42 Kết luận…………………………………………………………… 42 Đề nghị…………………………………………………………… 42 Tài liệu tham khảo…………………………………………… 43 Phụ lục ……………………………………………………… 48 Số hóa Trung tâm Học liệu Cơng nghệ thơng tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn DANH MỤC HÌNH Tran g Hình 1.1 Cây đậu Nho nhe…………………………………………… Hình 2.1 Sơ đồ thí nghiệm tổng quát Hình 3.1 Hạt đậu Nho nhe nảy mầm mơi trường GM…………… Hình 3.2 Hình ảnh mơ sẹo từ mảnh sau tuần nuôi cấy môi trường có bổ sung 2,4-D 1mg/l………………………………………… Hình 3.3 Mơ sẹo nuôi cấy môi trường SIM sau tuần…………… 19 27 29 29 Hình 3.4 Nách mầm nuôi cấy môi trường cảm ứng chồi SIM…………………………………………………………………… 30 Hình 3.5 Hình ảnh đa chồi từ chồi sau tuần ni cấy………… Hình 3.6 Biểu đồ biểu diễn tỷ lệ tạo đa chồi chồi tác 31 động 32 BAP kinetine sau Hình 3.7 Tái sinh chồi từ chồi mơi trường SIM sau tuần…………………………………………………………………… 33 … Hình 3.8 Hình ảnh chồi đậu Nho nhe mơi trường chứa BAP 1,5mg/l.……………………………………………………………… 34 … Số hóa Trung tâm Học liệu Cơng nghệ thơng tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn Hình 3.9 Cụm chồi nuôi cấy môi trường tái sinh chồi với BAP 1,5mg/l sau tuần …………………………………………………… Hình 3.10 Cây đậu Nho nhe môi trường chứa IBA 37 39 0,3mg/l………… Hình 3.11 Cây tái sinh in vitro hồn chỉnh để bầu đất……………… 40 Hình 3.12 Cây tái sinh in vitro hoàn chỉnh trồng bầu đất chứa giá thể đất thịt, trấu hun tỷ lệ 2:1 sau 41 tuần…………………………… Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 2.1 Thành phần loại môi trường nuôi cấy dùng cho hệ thống tái sinh từ chồi ngọn………………………………………………… Bảng 2.2 Giá thể nuôi 23 24 Bảng 3.1 Ảnh hưởng nồng độ Javen thời gian khử trùng đến nảy mầm hạt đậu Nho nhe sau ngày nuôi 26 cấy…………………… Bảng 3.2 Ảnh hưởng BAP đến phát sinh chồi đậu Nho 35 nhe… Bảng 3.3 Ảnh hưởng nồng độ IBA tới khả tạo rễ chồi tái sinh……………………………………………………………………… 38 Bảng 3.4 Ảnh hưởng giá thể tới sức sống đậu Nho nhe tái sinh in vitro…………………………………………………………………… Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN 40 http://lrc.tnu.edu.vn 2,00 3,00 4,00 5,00 Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound 292 039 2.6000 2.9057 3.4277 3.1481 3.0000 489 69893 2.00 5.00 3.00 1.00 409 591 3.1667 2.0232 3.1768 2.5370 2.0000 2.386 1.54474 0.00 6.00 6.00 2.25 731 -.093 4.2333 3.5778 4.8888 4.2037 3.5000 3.082 1.75545 2.00 7.00 5.00 3.00 438 -1.292 2.9333 2.4059 3.4608 427 833 28203 427 833 12761 427 833 32050 427 833 25790 Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis 6,00 2.9074 3.0000 1.995 1.41259 0.00 6.00 6.00 2.00 362 283 2.0000 1.5401 2.4599 1.9630 2.0000 1.517 1.23176 0.00 5.00 5.00 2.00 356 -.094 Kết Test Ducan SORE Subset for alpha = 0.05 2.0000 30 1,00 30 2.5667 2.5667 2,00 30 2.6000 2.6000 5,00 30 2.9333 3,00 30 3.1667 4,00 30 IBA Duncana 6,00 Sig N 4.2333 114 128 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 30,000 1.000 427 833 22489 427 833 2.2.2 Chiều dài rễ Descriptives IBA sore 1,00 2,00 3,00 Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Statistic 2.7567 2.4168 3.0966 2.8315 2.7700 829 91025 0.00 4.25 4.25 52 -1.639 4.501 2.5557 2.3627 2.7486 2.5587 2.5150 267 51679 1.37 3.63 2.26 42 -.123 323 2.5927 2.2908 2.8946 2.6400 2.6700 654 80851 0.00 4.00 4.00 81 -1.070 2.821 Std Error 16619 427 833 09435 427 833 14761 427 833 4,00 5,00 6,00 Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis 2.7010 2.5441 2.8579 2.7043 2.7050 177 42023 1.67 3.74 2.07 35 -.075 1.370 2.5480 2.2575 2.8385 2.5811 2.5800 605 77806 0.00 4.00 4.00 1.00 -.819 3.013 1.7020 1.4166 1.9874 1.7244 2.0000 584 76440 0.00 3.00 3.00 50 -.764 828 07672 427 833 14205 427 833 13956 427 833 Kết Test Ducan chieudaire N IBA Duncan Subset for alpha = 0.05 a 6.00 30 5.00 30 2.5103 2.00 30 2.5557 30 2.5927 4.00 30 2.7010 1.00 30 2.7567 3.00 1.6687 1.000 Sig Means for groups in homogeneous subsets are 247 displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 30.000 2.3 Kết phân tích sau tuần 2.3.1 Số rễ /mẫu sau tuần Descriptives IBA sore 1,00 2,00 Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Statistic 2.5667 2.0415 3.0919 2.5370 2.0000 1.978 1.40647 0.00 6.00 6.00 2.00 292 039 2.6000 3.1785 3.8215 3.5000 Std Error 25679 427 833 28203 3,00 4,00 5,00 Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range 3.0000 741 86103 2.00 5.00 3.00 1.00 174 -.491 3.5000 2.0232 3.1768 2.5370 2.0000 2.386 1.54474 0.00 6.00 6.00 2.25 731 -.093 4.5000 3.9303 5.0697 4.4444 4.0000 2.328 1.52564 3.00 7.00 4.00 3.00 562 -1.209 3.3000 2.6710 3.9290 3.1667 3.0000 2.838 1.68462 1.00 9.00 8.00 427 833 15720 427 833 27854 427 833 30757 Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis 6,00 2.00 1.438 3.410 2.1667 1.6378 2.6955 2.1296 2.0000 2.006 1.41624 0.00 5.00 5.00 2.00 387 -.623 427 833 25857 427 833 Kết Test Ducan sore Subset for alpha = 0.05 30 30 2.1667 2.5667 2.5667 2,00 30 2.6000 2.6000 5,00 30 3,00 30 4,00 30 IBA Duncana 6,00 1,00 N Sig 3.3000 3.3000 3.5000 4.5000 272 061 589 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 30,000 2.3.2 Chiều dài rễ Descriptives IBA sore 1,00 Mean 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound Statistic 2.9837 2.6191 3.3482 Std Error 17825 2,00 3,00 4,00 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum 3.0772 3.1600 953 97634 0.00 4.30 4.30 61 -1.894 4.573 2.8313 3.0546 3.4734 3.2641 3.2150 314 56073 2.25 4.30 2.05 79 -.073 -.763 3.2640 2.4938 3.1689 2.8589 2.7900 817 90395 0.00 4.50 4.50 83 -.527 2.335 3.6733 3.5169 3.8298 3.6430 3.6200 175 41890 3.13 4.90 427 833 16504 427 833 10237 427 833 07648 Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis 5,00 6,00 1.77 57 1.051 1.147 2.8940 2.5768 3.2112 2.9378 2.7900 721 84935 0.00 4.50 4.50 1.04 -.959 3.595 2.7647 2.3436 3.1857 2.8248 3.0000 1.271 1.12754 0.00 4.67 4.67 1.03 -1.290 1.849 Kết Test Ducan sore Subset for alpha = 0.05 IBA Duncana 6,00 30 2.7647 2,00 30 2.8313 2.8313 5,00 30 2.8940 2.8940 1,00 30 2.9837 2.9837 3,00 30 4,00 30 N 3.2640 3.2640 3.6733 427 833 15507 427 833 20586 427 833 Sig .366 070 061 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 30,000 2.4 Kết phân tích sau tuần 2.4.1 Số rễ /mẫu sau tuần Descriptives IBA sore 1,00 2,00 3,00 Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Statistic 2.5667 2.0415 3.0919 2.5370 2.0000 1.978 1.40647 0.00 6.00 6.00 2.00 292 039 2.7333 3.2601 4.0065 3.6111 3.5000 999 99943 2.00 6.00 4.00 1.00 383 -.265 3.6333 2.1537 3.3129 2.6852 2.5000 2.409 1.55216 0.00 6.00 6.00 Std Error 25679 427 833 28338 427 833 18247 4,00 5,00 6,00 Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Lower Bound Confidence Upper Bound Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis 2.25 479 -.372 4.7000 4.1527 5.2473 4.6667 4.0000 2.148 1.46570 3.00 7.00 4.00 3.00 351 -1.288 3.3333 2.8301 3.8365 3.3519 3.0000 1.816 1.34762 0.00 6.00 6.00 1.00 -.389 918 2.2667 1.6954 2.8379 2.2407 2.0000 2.340 1.52978 0.00 5.00 5.00 2.00 445 -.682 427 833 26760 427 833 24604 427 833 27930 427 833 Kết Test Ducan sore Subset for alpha = 0.05 30 2.2667 1,00 30 2.5667 2,00 30 2.7333 5,00 30 3,00 30 4,00 30 IBA Duncana 6,00 N 2.7333 3.3333 3.3333 3.6333 4.7000 Sig .225 098 406 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 30,000 2.4.2 Chiều dài rễ Descriptives IBA 1.00 Statistic Mean 95% Std Error 3.0937 Lower Bound 2.7236 Upper Bound 3.4637 18095 Confidence Interval for Mean 5% Trimmed Mean chieudaire 3.1994 Median 3.3150 Variance 982 Std Deviation 99108 Minimum 00 Maximum 4.30 Range Interquartile Range Skewness Kurtosis 4.30 61 -2.081 427 5.091 833 2.00 3.2083 Mean 95% Lower Bound 3.1628 Upper Bound 3.5665 21847 Confidence Interval for Mean 5% Trimmed Mean 3.3533 Median 3.2900 292 Variance 54057 Std Deviation Minimum 2.50 Maximum 4.50 2.00 Range 77 Interquartile Range Skewness Kurtosis 3.00 95% Lower Confidence Bound Interval for Upper Mean Bound Median -.536 833 9869 2.7615 3.6552 3.2130 3.0000 1.432 Variance 1.19662 Std Deviation 00 Minimum 6.00 Maximum 6.00 Range 1.67 Interquartile Range Skewness Kurtosis 047 427 1.064 833 4.4623 08287 Mean 95% Lower Confidence Bound Interval for Upper Mean Bound 5% Trimmed Mean Số hóa Trung tâm 427 3.3647 Mean 5% Trimmed Mean 4.00 177 4.2928 4.6318 4.4485 4.3350 Median Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn .206 Variance 45390 Std Deviation Minimum 3.67 Maximum 5.50 Range 1.83 66 Interquartile Range 552 427 -.082 833 Skewness Kurtosis 5.00 3.2697 Mean 95% Lower Confidence Bound Interval for Upper Mean Bound 5% Trimmed Mean Median 2.8597 3.6796 3.2811 3.1000 1.205 Variance 1.09786 Std Deviation 00 Minimum 6.00 Maximum 6.00 Range 1.20 Interquartile Range Skewness Kurtosis 6.00 20044 -.163 427 2.457 833 2.8833 21799 Mean 95% Lower Confidence Bound Interval for Upper Mean Bound 5% Trimmed Mean Median Variance 2.4375 3.3292 2.9444 3.0000 1.426 1.19397 Std Deviation 00 Minimum 5.00 Maximum 5.00 Range 1.50 Interquartile Range Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn Skewness Kurtosis Kết Test Ducan -1.169 427 1.671 833 chieudaire N IBA Duncan Subset for alpha = 0.05 a 6.00 30 2.8833 1.00 30 3.0937 2.00 30 3.2083 30 3.2697 3.00 30 3.3647 4.00 30 5.00 085 Sig Means for groups in homogeneous subsets are 4.4623 1.000 displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 30.000 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn ... sĩ là: Nghiên cứu hệ thống tái sinh in vitro phục vụ chuyển gen đậu Nho nhe (Vigna umbellata) Mục tiêu nghiên cứu Xác định hệ thống tái sinh đa chồi in vitro phục vụ chuyển gen đậu Nho nhe Nội... Kết nghiên cứu khử trùng hạt đậu Nho nhe ……………… 25 3.2 Tái sinh in vitro đậu Nho nhe ………………………………… 28 3.2.1 Tái sinh chồi đậu Nho nhe từ mô sẹo………………………… 28 3.2.2 Tái sinh chồi đậu Nho nhe từ... SƯ PHẠM VŨ THU TRANG NGHIÊN CỨU HỆ THỐNG TÁI SINH IN VITRO PHỤC VỤ CHUYỂN GEN Ở CÂY ĐẬU NHO NHE (VIGNA UMBELLATA) Ngành: Di truyền học Mã số: 8.42.01.21 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Cán hướng dẫn