CHỌN LỌC DÕNG VI KHUẨN Rhizobium TRÊN CÂY ĐẬU PHỤNG

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA NƠNG HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP CHỌN LỌC DÕNG VI KHUẨN Rhizobium TRÊN CÂY ĐẬU PHỤNG Họ tên sinh viên: MANG THỊ NGỌC BÍCH Ngành: Bảo vệ thực vật Niên khố: 2009 – 2013 Tp Hồ Chí Minh, tháng 08 năm 2013 i CHỌN LỌC DÕNG VI KHUẨN Rhizobium TRÊN CÂY ĐẬU PHỤNG Tác giả MANG THỊ NGỌC BÍCH Khóa luận đƣợc đề nghị thực để đáp ứng yêu cầu cấp kỹ sƣ ngành Bảo vệ thực vật Giảng viên hƣớng dẫn: PGS.TS LÊ ĐÌNH ĐƠN Tp Hồ Chí Minh, tháng 08 năm 2013 ii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành tốt khóa luận tốt nghiệp, tơi xin chân thành cảm ơn: Ban giám hiệu trường Đại học Nông Lâm Tp Hồ Chí Minh, Ban chủ nhiệm khoa Nơng Học tất giảng viên truyền đạt kiến thức q báu cho tơi suốt q trình học tập trường PGS.TS Lê Đình Đơn, trường Đại học Nơng Lâm, Tp Hồ Chí Minh hết lòng bảo hướng dẫn tơi suốt q trình thực khóa luận Các anh chị viện nghiên cứu sinh học môi trường, trường Đại học Nông Lâm, Tp Hồ Chí Minh giúp đỡ, hướng dẫn tận tình, góp ý kiến q trình thực khóa luận Các bạn lớp DH09BV bạn Nguyễn Thị Dược chia vui buồn, giúp đỡ cho suốt trình học tập Con xin gửi lời cám ơn sâu sắc đến ba mẹ gia đình ln động viên, hỗ trợ tinh thần vật chất để hồn thành tốt khóa luận Tp Hồ Chí Minh, tháng 08 năm 2013 Sinh viên thực Mang Thị Ngọc Bích iii TĨM TẮT Mang Thị Ngọc Bích, Khoa Nơng Học, trường Đại Học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh Đề tài: “Chọn lọc dòng vi khuẩn Rhizobium đậu phụng” Giáo viên hướng dẫn: PSG.TS Lê Đình Đơn Đề tài thực Viện nghiên cứu sinh học môi trường, trường Đại Học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh Với nội dung nghiên cứu:thứ phân lập, làm chủng vi khuẩn cố định đạm, thứ hai so sánh, đánh giá tuyển chọn dòng vi khuẩn cố định đạm giống đậu phụng VD1-2, VD6, L9804, OMĐP13 Công việc phân lập dựa vào phát triển khuẩn lạc môi trường yeast mannitol agar (YMA) hai môi trường thị YMA + Congo Red YMA + Bromthymol Blue nhiệt độ phòng sau 24 phát triển Sau tiếp tục chọn lọc thông qua việc nhuộm Gram, quan sát kính hiển vi thử số phản ứng sinh hóa đặc trưng Và cơng việc so sánh, đánh giá tuyển chọn dòng vi khuẩn cố định đạm giống đậu phụng Tiến hành chủng vi khuẩn cố định đạm lên riêng lẻ giống đậu phụng: VD1-2, VD6, L9804, OMĐP13 Thí nghiệm bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên, lần lập lại, với nghiệm thức tương ứng với dòng vi khuẩn gồm: TN1.3, TN 2.1, LA 4.4.2, TĐ 5.2, TĐ 6.1 đối chứng khơng có vi khuẩn Kết đạt được: Đã chọn dòng vi khuẩn TN1.3, TN 2.1, LA 4.4.2, TĐ 5.2, TĐ 6.1 21 dòng vi khuẩn phân lập có quan hệ cộng sinh với rễ đậu phụng Và đến ngày thứ 28 sau chủng rễ đậu phụng xuất nốt sần, dòng vi khuẩn TĐ 5.2 TĐ 6.1 cộng sinh mạnh tạo nhiều nốt sần iv MỤC LỤC TRANG TỰA i LỜI CẢM ƠN ii TÓM TẮT iii MỤC LỤC iv DANH SÁCH CHỮ VIẾT TẮT vii DANH SÁCH CÁC BẢNG viii DANH SÁCH CÁC HÌNH ix Chƣơng GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích đề tài 1.3 Yêu cầu đề tài 1.4 Giới hạn đề tài Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Vai trò đạm (N) thực vật 2.2 Giới thiệu đậu phụng 2.2.1 Khóa phân loại 2.2.2 Đặc điểm 2.3 Các nguồn cung cấp đạm đất trình cố định đạm đậu phụng 2.3.1 Các nguồn cung cấp đạm đất 2.3.2 Quá trình cố định đạm đậu phụng 2.3.2.1 Khái niệm chung trình cố định đạm 2.3.2.2 Cơ chế trình cố định đạm 2.4 Vi khuẩn nốt sần hình thành nốt sần 2.4.1 Lịch sử phát triển 2.4.2 Đặc điểm 2.4.3 Phân loại 10 2.5 Quá trình hình thành nốt sần 10 2.6 Vi khuẩn chi Rhizobium 12 v 2.6.1 Lịch sử phát triển 12 2.6.2 Phân loại 12 2.6.3 Đặc điểm 13 2.7 Vi khuẩn chi Bradyrhizobium 13 Chƣơng NỘI DUNG, PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 3.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 14 3.1.1 Thời gian nghiên cứu 14 3.1.2 Địa điểm nghiên cứu 14 3.2 Vật liệu thí nghiệm 14 3.2.1 Đối tượng nghiên cứu 14 3.2.2 Thiết bị, dụng cụ hóa chất sử dụng 14 3.2.2.1 Thiết bị dụng cụ 14 3.2.2.2 Hoá chất 15 3.3 Nội dung nghiên cứu 15 3.4 Phương pháp nghiên cứu 15 3.4.1 Phân lập làm chủng vi khuẩn cố định đạm 15 3.4.1.1 Nguồn gốc mẫu phân lập 15 3.4.1.2 Phương pháp theo dõi 15 3.4.1.3 Sơ đồ phân lập 16 3.4.1.4 Quy trình kỹ thuật 16 3.4.2 Thí nghiệm: So sánh, đánh giá tuyển chọn dòng vi khuẩn cố định đạm giống đậu VD1-2, VD6, L9804, OMĐP13 19 3.4.2.1 Mô tả thí nghiệm 19 3.4.2.2 Bố trí thí nghiệm 19 3.4.2.3 Cách lấy tiêu phương pháp theo dõi 19 3.4.2.4 Quy trình kỹ thuật 20 3.5 Xử lý số liệu 21 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 22 4.1 Phân lập làm chủng vi khuẩn cố định đạm 22 4.1.1 Lấy mẫu làm vi khuẩn từ nốt sần đậu phụng 22 4.1.2 Xác định Gram vi khuẩn 26 vi 4.1.3 Thử nghiệm sinh hóa 28 4.2 So sánh, đánh giá tuyển chọn dòng vi khuẩn cố định đạm giống đậu phụng VD1-2, VD6, L9804, OMĐP13 29 4.2.1 So sánh, đánh giá tuyển chọn dòng vi khuẩn cố định đạm giống đậu phụng VD1-2 29 4.2.2 So sánh, đánh giá tuyển chọn dòng vi khuẩn cố định đạm giống đậu phụng VD6 34 4.2.3 So sánh, đánh giá tuyển chọn dòng vi khuẩn cố định đạm giống đậu phụng L9804 39 4.2.4 So sánh, đánh giá tuyển chọn dòng vi khuẩn cố định đạm giống đậu phụng OMĐP13 43 Chƣơng KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 48 5.1 Kết luận 48 5.2 Đề nghị 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO 49 PHỤ LỤC 51 vii DANH SÁCH CHỮ VIẾT TẮT NT: Nghiệm Thức Ctv: Cộng tác viên NSG: Ngày sau gieo YMA: Yeast mannitol agar N: nitơ viii DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng 3.1 Nguồn gốc mẫu phân lập 15 Bảng 3.2 Số thứ tự giếng phản ứng ký hiệu 18 Bảng 4.1 Bảng ký hiệu mẫu phân lập 22 Bảng 4.2 Mô tả đặc điểm màu sắc khuẩn lạc 21 dòng vi khuẩn 23 Bảng 4.3 Kết sau nuôi cấy môi trường thị 25 Bảng 4.4 Kết nhuộm Gram, hình dạng vi khuẩn 27 Bảng 4.5 Kết thử nghệm số phản ứng sinh hóa 28 Bảng 4.6 Chiều cao giống VD1-2 qua ngày theo dõi 30 Bảng 4.7 Kết chiều dài rễ giống VD1-2 qua lần theo dõi 31 Bảng 4.8 Số nốt sần hữu hiệu giống VD1-2 qua ngày theo dõi 32 Bảng 4.9 Chiều cao giống VD6 qua ngày theo dõi 35 Bảng 4.10 Kết chiều dài rễ giống VD6 qua lần theo dõi 36 Bảng 4.11 Số nốt sần hữu hiệu giống VD6 qua ngày theo dõi 37 Bảng 4.12 Chiều cao giống L9804 qua ngày theo dõi 40 Bảng 4.13 Kết chiều dài rễ giống L9804 qua lần theo dõi 41 Bảng 4.14 Số nốt sần hữu hiệu giống L9804 qua ngày theo dõi 42 Bảng 4.15 Chiều cao giống OMĐP13 qua ngày theo dõi 44 Bảng 4.16 Kết chiều dài rễ giống OMĐP13 qua lần theo dõi 45 Bảng 4.17 Số nốt sần hữu hiệu giống OMĐP13 qua ngày theo dõi 46 ix DANH SÁCH CÁC HÌNH Hình 3.1 Vi khuẩn lắc bình tam giác 20 Hình 4.1 Hình dạng, màu sắc số khuẩn lạc sau cấy 24 24 Hình 4.2 Khuần lạc môi trường chứa Congo Red Bromthymol Blue 26 Hình 4.3 Hình dạng chiều dài vi khuẩn nhuộm Gram kính hiển vi 100X 27 Hình 4.4 Kết khả di động 28 Hình 4.5 Kết phản ứng sinh hóa bảng nhựa (giếng số gồm phản ứng sinh H2S sinh Indol) 29 Hình 4.6 Chiều dài rễ nốt sần hữu hiệu 33 Hình 4.7 Chiều cao giống VD6 NSG 32 NSG 34 Hình 4.8 Chiều dài rễ nốt sần hữu hiệu giống VD6 38 Hình 4.9 Chiều cao giống L9804 giai đoạn 13 NSG 39 Hình 4.10 Chiều dài rễ nốt sần 35NSG giống L9804 41 Hình 4.11 Chiều cao giống OMĐP13 giai đoạn 5NSG (hình trái) 25 NSG (hình phải) 43 Hình 4.12 Chiều dài rễ , nốt sần hữu hiệu giống OMĐP13 47 69 Total 17 18.340 Coefficient of Variation = 19.35% Least Significant Difference Test LSD value = 1.175 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 3.033 3.900 1.733 3.000 1.600 1.333 A Mean A Mean B Mean A Mean B Mean B Mean 2= 1= 4= 3= 5= 6= 3.900 3.033 3.000 1.733 1.600 1.333 A A A B B B Chiều cao giống L9804 14 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 10.278 2.056 4.534 0.0149 Within 12 5.440 0.453 Total 17 15.718 Coefficient of Variation = 18.25% Least Significant Difference Test LSD value = 1.197 at alpha = 0.050 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 3.967 4.500 3.900 4.033 3.633 2.100 A Mean A Mean A Mean A Mean A Mean B Mean 2= 4= 1= 3= 5= 6= 4.500 4.033 3.967 3.900 3.633 2.100 A A A A A B Chiều cao giống L9804 17 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 11.738 2.348 16.128 0.0001 Within 12 1.747 0.146 Total 17 13.484 Coefficient of Variation = 7.86% Least Significant Difference Test LSD value = 0.9530 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5.000 5.733 4.733 5.033 AB Mean = A Mean = B Mean = AB Mean = 5.733 A 5.433 AB 5.033 AB 5.000 AB 70 Mean Mean = 5.433 AB Mean = 4.733 B = 3.200 C Mean = 3.200 C Chiều cao giống L9804 20 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 8.887 1.777 4.899 0.0113 Within 12 4.353 0.363 Total 17 13.240 Coefficient of Variation = 10.57% Least Significant Difference Test LSD value = 1.072 at alpha = 0.050 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 5.700 6.667 5.533 5.767 6.167 4.367 AB Mean = 6.667 A A Mean = 6.167 AB B Mean = 5.767 AB AB Mean = 5.700 AB AB Mean = 5.533 B C Mean = 4.367 C Chiều cao giống L9804 23 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 13.207 2.641 5.627 0.0067 Within 12 5.633 0.469 Total 17 18.840 Coefficient of Variation = 10.54% Least Significant Difference Test LSD value = 1.708 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 6.600 6.933 5.967 6.500 7.900 5.100 ABC Mean = 7.900 A AB Mean = 6.933 AB BC Mean = 6.600 ABC ABC Mean = 6.500 ABC A Mean = 5.967 BC C Mean = 5.100 C Chiều cao giống L9804 26 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 10.504 2.101 3.700 0.0294 Within 12 6.813 0.568 Total 17 17.318 71 Coefficient of Variation = 11.10% Least Significant Difference Test LSD value = 1.341 at alpha = 0.050 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 6.600 7.433 6.167 6.767 8.033 5.733 BC Mean = 8.033 A AB Mean = 7.433 AB BC Mean = 6.767 ABC ABC Mean = 6.600 BC A Mean = 6.167 BC C Mean = 5.733 C Chiều cao giống L9804 29 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 10.269 2.054 3.232 0.0445 Within 12 7.627 0.636 Total 17 17.896 Coefficient of Variation = 11.12% Least Significant Difference Test LSD value = 1.419 at alpha = 0.050 Original Order Ranked Order Mean = 6.867 BC Mean = 8.400 A Mean = 7.867 AB Mean = 7.867 AB Mean = 6.667 BC Mean = 7.100 ABC Mean = 7.100 ABC Mean = 6.867 BC Mean = 8.400 A Mean = 6.667 BC Mean = 6.133 C Mean = 6.133 C Chiều cao giống L9804 32 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 20.476 4.095 6.720 0.0033 Within 12 7.313 0.609 Total 17 27.789 Coefficient of Variation = 9.89% Least Significant Difference Test LSD value = 1.946 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 7.267 9.133 7.167 7.733 9.500 6.567 BC Mean = 9.500 A AB Mean = 9.133 AB C Mean = 7.733 ABC ABC Mean = 7.267 BC A Mean = 7.167 C C Mean = 6.567 C 72 Phụ bảng 4.2: Chiều dài rễ giống L9804 ngày theo dõi Chiều dài rễ giống L9804 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 23.664 4.733 8.223 0.0014 Within 12 6.907 0.576 Total 17 30.571 Coefficient of Variation = 13.99% Least Significant Difference Test LSD value = 1.893 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 6.300 4.533 4.967 7.067 6.000 3.667 AB Mean = 7.067 BC Mean = 6.300 BC Mean = 6.000 A Mean = 4.967 AB Mean = 4.533 C Mean = 3.667 A AB AB BC BC C Chiều dài rễ giống L9804 14 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 33.111 6.622 4.893 0.0113 Within 12 16.240 1.353 Total 17 49.351 Coefficient of Variation = 7.66% Least Significant Difference Test LSD value = 2.069 at alpha = 0.050 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 15.43 14.67 14.83 17.27 16.03 12.83 AB Mean = 17.27 BC Mean = 16.03 BC Mean = 15.43 A Mean = 14.83 AB Mean = 14.67 C Mean = 12.83 A AB AB BC BC C Chiều dài rễ giống L9804 21 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 45.007 9.001 6.455 0.0039 Within 12 16.733 1.394 Total 17 61.740 73 Coefficient of Variation = 6.95% Least Significant Difference Test LSD value = 2.945 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 17.13 16.00 16.13 19.83 17.97 14.93 ABC Mean = 19.83 A BC Mean = 17.97 AB BC Mean = 17.13 ABC A Mean = 16.13 BC AB Mean = 16.00 BC C Mean = 14.93 C Chiều dài rễ giống L9804 28 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 59.271 11.854 15.016 0.0001 Within 12 9.473 0.789 Total 17 68.744 Coefficient of Variation = 4.71% Least Significant Difference Test LSD value = 2.215 at alpha = 0.010 &k2S Original Order Ranked Order Mean = 20.83 A Mean = 21.43 A Mean = 17.00 C Mean = 20.83 A Mean = 17.47 BC Mean = 19.37 AB Mean = 21.43 A Mean = 17.47 BC Mean = 19.37 AB Mean = 17.00 C Mean = 16.97 C Mean = 16.97 C Chiều dài rễ giống L9804 35 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 51.196 10.239 9.830 0.0006 Within 12 12.500 1.042 Total 17 63.696 Coefficient of Variation = 5.12% Least Significant Difference Test LSD value = 2.546 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 21.70 18.13 19.20 22.37 20.27 AB Mean = 22.37 A C Mean = 21.70 AB BC Mean = 20.27 ABC A Mean = 19.20 BC ABC Mean = 18.13 C 74 Mean = 17.90 C Mean = 17.90 C Chiều dài rễ giống L9804 42 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 49.798 9.960 9.743 0.0007 Within 12 12.267 1.022 Total 17 62.065 Coefficient of Variation = 4.91% Least Significant Difference Test LSD value = 2.521 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean = 22.27 A Mean = 23.13 A Mean = 18.87 B Mean = 22.27 A Mean = 19.73 B Mean = 20.80 AB Mean = 23.13 A Mean = 19.73 B Mean = 20.80 AB Mean = 18.87 B Mean = 18.70 B Mean = 18.70 B Phụ bảng 4.3: Số nốt sần hữu hiệu giống L9804 ngày theo dõi Số nốt sần hữu hiệu giống L9804 28 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 86.278 17.256 20.707 0.0000 Within 12 10.000 0.833 Total 17 96.278 Coefficient of Variation = 38.21% Least Significant Difference Test LSD value = 2.276 at alpha = 0.010 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= Ranked Order 7.000 A Mean = 7.000 A 1.333 BC Mean = 2.333 B 2.333 B Mean = 2.000 BC 1.667 BC Mean = 1.667 BC 2.000 BC Mean = 1.333 BC 0.0000 C Mean = 0.0000 C Số nốt sần hữu hiệu giống L9804 35 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 309.833 61.967 25.940 0.0000 Within 12 28.667 2.389 Total 17 338.500 75 Coefficient of Variation = 18.93% Least Significant Difference Test LSD value = 3.855 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 13.00 A 10.67 AB 6.667 C 8.333 BC 10.33 ABC 0.0000 D Mean = 13.00 A Mean = 10.67 AB Mean = 10.33 ABC Mean = 8.333 BC Mean = 6.667 C Mean = 0.0000 D Số nốt sần hữu hiệu giống L9804 42 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 483.333 96.667 56.129 0.0000 Within 12 20.667 1.722 Total 17 504.000 Coefficient of Variation = 13.12% Least Significant Difference Test LSD value = 3.273 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 17.00 A 12.67 B 8.333 C 10.67 BC 11.33 BC 0.0000 D Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 5= 4= 3= 6= 17.00 A 12.67 B 11.33 BC 10.67 BC 8.333 C 0.0000 D 76 Phụ lục 5: So sánh, đánh giá tuyển chọn dòng vi khuẩn cố định đạm giống đậu phụng OMĐP13 Phụ bảng 5.1: Chiều cao giống OMĐP13 ngày theo dõi Chiều cao giống OMĐP13 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 0.476 0.095 7.142 0.0026 Within 12 0.160 0.013 Total 17 0.636 Coefficient of Variation = 20.18% Least Significant Difference Test LSD value = 0.2844 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 0.5333 0.7000 0.7333 0.5000 0.7000 0.2667 AB A A AB A B Mean Mean Mean Mean Mean Mean = 0.7333 A = 0.7000 A = 0.7000 A = 0.5333 AB = 0.5000 AB = 0.2667 B Chiều cao giống OMĐP13 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 7.612 1.522 7.099 0.0026 Within 12 2.573 0.214 Total 17 10.185 Coefficient of Variation = 19.99% Least Significant Difference Test LSD value = 1.154 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean = 2.033 BC Mean = 3.333 A Mean = 2.267 ABC Mean = 2.733 AB Mean = 2.733 AB Mean = 2.333 ABC Mean = 2.333 ABC Mean = 2.267 ABC Mean = 3.333 A Mean = 2.033 BC Mean = 1.200 C Mean = 1.200 C Chiều cao giống OMĐP13 11 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 9.223 1.845 3.957 0.0237 Within 12 5.593 0.466 Total 17 14.816 Coefficient of Variation = 19.35% 77 Least Significant Difference Test LSD value = 1.214 at alpha = 0.050 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 3.200 3.733 4.133 3.167 4.567 2.367 BC Mean = AB Mean = AB Mean = BC Mean = A Mean = C Mean = 4.567 4.133 3.733 3.200 3.167 2.367 A AB AB BC BC C Chiều cao giống OMĐP13 14 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 7.904 1.581 3.271 0.0430 Within 12 5.800 0.483 Total 17 13.704 Coefficient of Variation = 15.26% Least Significant Difference Test LSD value = 1.236 at alpha = 0.050 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 4.200 4.167 5.133 4.300 5.733 3.800 BC Mean = BC Mean = AB Mean = BC Mean = A Mean = C Mean = 5.733 5.133 4.300 4.200 4.167 3.800 A AB BC BC BC C Chiều cao giống OMĐP13 17 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 10.238 2.048 4.573 0.0145 Within 12 5.373 0.448 Total 17 15.611 Coefficient of Variation = 12.12% Least Significant Difference Test LSD value = 1.191 at alpha = 0.050 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 5.633 5.367 5.667 5.100 6.933 4.433 B BC B BC A C Mean Mean Mean Mean Mean Mean 5= 3= 1= 2= 4= 6= 6.933 A 5.667 B 5.633 B 5.367 BC 5.100 BC 4.433 C 78 Chiều cao giống OMĐP13 20 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 13.971 2.794 4.749 0.0126 Within 12 7.060 0.588 Total 17 21.031 Coefficient of Variation = 12.22% Least Significant Difference Test LSD value = 1.364 at alpha = 0.050 Original Order Ranked Order Mean = 6.867 A Mean = 7.500 A Mean = 6.300 AB Mean = 6.867 A Mean = 6.700 AB Mean = 6.700 AB Mean = 5.367 BC Mean = 6.300 AB Mean = 7.500 A Mean = 5.367 BC Mean = 4.933 C Mean = 4.933 C Chiều cao giống OMĐP13 23 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 18.792 3.758 8.362 0.0013 Within 12 5.393 0.449 Total 17 24.185 Coefficient of Variation = 9.79% Least Significant Difference Test LSD value = 1.671 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 7.833 6.900 7.167 5.733 8.133 5.333 A Mean = 8.133 A ABC Mean = 7.833 A AB Mean = 7.167 AB BC Mean = 6.900 ABC A Mean = 5.733 BC C Mean = 5.333 C Chiều cao giống OMĐP13 26 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 17.353 3.471 8.629 0.0011 Within 12 4.827 0.402 Total 17 22.180 Coefficient of Variation = 8.61% 79 Least Significant Difference Test LSD value = 1.581 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 8.200 7.500 7.667 6.633 8.567 5.633 AB Mean = AB Mean = AB Mean = BC Mean = A Mean = C Mean = 8.567 8.200 7.667 7.500 6.633 5.633 A AB AB AB BC C Chiều cao giống OMĐP13 29 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 16.783 3.357 4.550 0.0147 Within 12 8.853 0.738 Total 17 25.636 Coefficient of Variation = 11.05% Least Significant Difference Test LSD value = 1.528 at alpha = 0.050 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 8.467 8.133 7.633 7.033 9.167 6.200 AB Mean = AB Mean = BC Mean = BC Mean = A Mean = C Mean = 9.167 8.467 8.133 7.633 7.033 6.200 A AB AB BC BC C Chiều cao giống OMĐP13 32 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 11.878 2.376 3.110 0.0498 Within 12 9.167 0.764 Total 17 21.045 Coefficient of Variation = 10.68% Least Significant Difference Test LSD value = 1.555 at alpha = 0.050 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 8.833 8.500 7.833 7.667 9.367 6.900 AB Mean = 9.367 A AB Mean = 8.833 AB ABC Mean = 8.500 AB BC Mean = 7.833 ABC A Mean = 7.667 BC C Mean = 6.900 C 80 Phụ bảng 5.2: Chiều dài rễ giống OMĐP13 ngày theo dõi Chiều dài rễ giống OMĐP13 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 36.956 7.391 4.688 0.0132 Within 12 18.920 1.577 Total 17 55.876 Coefficient of Variation = 15.56% Least Significant Difference Test LSD value = 2.234 at alpha = 0.050 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 7.600 6.300 8.833 10.33 8.900 6.467 BC Mean = C Mean = AB Mean = A Mean = AB Mean = C Mean = 10.33 A 8.900 AB 8.833 AB 7.600 BC 6.467 C 6.300 C Chiều dài rễ giống OMĐP13 14 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 131.629 26.326 7.419 0.0022 Within 12 42.580 3.548 Total 17 174.209 Coefficient of Variation = 10.76% Least Significant Difference Test LSD value = 4.698 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 16.23 13.70 20.17 19.50 20.60 14.83 ABC Mean = 20.60 A C Mean = 20.17 A A Mean = 19.50 AB AB Mean = 16.23 ABC A Mean = 14.83 BC BC Mean = 13.70 C Chiều dài rễ giống OMĐP13 21 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 121.780 24.356 22.727 0.0000 Within 12 12.860 1.072 Total 17 134.640 81 Coefficient of Variation = 5.50% Least Significant Difference Test LSD value = 2.582 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 19.13 15.27 21.47 20.73 21.07 15.33 A Mean B Mean A Mean A Mean A Mean B Mean 3= 5= 4= 1= 6= 2= 21.47 21.07 20.73 19.13 15.33 15.27 A A A A B B Chiều dài rễ giống OMĐP13 28 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 84.716 16.943 12.107 0.0002 Within 12 16.793 1.399 Total 17 101.509 Coefficient of Variation = 5.97% Least Significant Difference Test LSD value = 2.950 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 19.97 17.47 21.83 21.70 21.53 16.33 AB BC A A A C Mean Mean Mean Mean Mean Mean 3= 4= 5= 1= 2= 6= 21.83 A 21.70 A 21.53 A 19.97 AB 17.47 BC 16.33 C Chiều dài rễ giống OMĐP13 35 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 95.867 19.173 15.941 0.0001 Within 12 14.433 1.203 Total 17 110.300 Coefficient of Variation = 5.33% Least Significant Difference Test LSD value = 2.735 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 22.40 18.00 22.10 22.13 22.07 16.70 A Mean B Mean A Mean A Mean A Mean B Mean 1= 4= 3= 5= 2= 6= 22.40 22.13 22.10 22.07 18.00 16.70 A A A A B B 82 Chiều dài rễ giống OMĐP13 42 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 76.118 15.224 11.300 0.0003 Within 12 16.167 1.347 Total 17 92.285 Coefficient of Variation = 5.55% Least Significant Difference Test LSD value = 2.895 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 22.60 18.20 22.27 22.33 22.27 17.83 A Mean B Mean A Mean A Mean A Mean B Mean 1= 4= 5= 3= 2= 6= 22.60 22.33 22.27 22.27 18.20 17.83 A A A A B B Phụ bảng 5.2: Nốt sần hữu hiệu giống OMĐP13 ngày theo dõi Nốt sần hữu hiệu giống OMĐP13 28 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 14.500 2.900 5.800 0.0060 Within 12 6.000 0.500 Total 17 20.500 Coefficient of Variation = 47.14% Least Significant Difference Test LSD value = 1.764 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 1.333 AB Mean = 1.333 AB Mean = 2.000 A Mean = 1.333 AB Mean = 3.000 A Mean = 0.0000 B Mean = 3.000 A 2.000 A 1.333 AB 1.333 AB 1.333 AB 0.0000 B Nốt sần hữu hiệu giống OMĐP13 35 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 78.667 15.733 10.892 0.0004 Within 12 17.333 1.444 Total 17 96.000 83 Coefficient of Variation = 30.05% Least Significant Difference Test LSD value = 2.997 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean = 4.000 B Mean = 7.000 A Mean = 4.333 AB Mean = 5.000 AB Mean = 3.667 B Mean = 4.333 AB Mean = 5.000 AB Mean = 4.000 B Mean = 7.000 A Mean = 3.667 B Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Nốt sần hữu hiệu giống OMĐP13 42 NSG ANALYSIS OF VARIANCE TABLE Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 1670.667 334.133 107.400 0.0000 Within 12 37.333 3.111 Total 17 1708.000 Coefficient of Variation = 14.70% Least Significant Difference Test LSD value = 4.399 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean 1= 2= 3= 4= 5= 6= 7.000 C 7.000 C 10.67 C 17.00 B 30.33 A 0.0000 D Mean Mean Mean Mean Mean Mean 5= 4= 3= 1= 2= 6= 30.33 A 17.00 B 10.67 C 7.000 C 7.000 C 0.0000 D ... chất để hồn thành tốt khóa luận Tp Hồ Chí Minh, tháng 08 năm 2013 Sinh viên thực Mang Thị Ngọc Bích iii TĨM TẮT Mang Thị Ngọc Bích, Khoa Nơng Học, trường Đại Học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh Đề tài:... thí nghiệm 14 3.2.1 Đối tượng nghiên cứu 14 3.2.2 Thi t bị, dụng cụ hóa chất sử dụng 14 3.2.2.1 Thi t bị dụng cụ 14 3.2.2.2 Hoá chất 15 3.3 Nội... đạm phân lập rễ đậu phụng Giống đậu phụng: VD1-2, VD6, L9804, OMĐP13 3.2.2 Thi t bị, dụng cụ hóa chất sử dụng 3.2.2.1 Thi t bị dụng cụ - Tủ cấy vô trùng, tủ sấy, tủ lạnh, nồi hấp, đĩa petri, pipet,