PHÂN LẬP CHẤT TỪ CAO nBUTANOL CỦA THÂN VÀ LÁ THÙ LÙ CẠNH (PHYSALIS ANGULATA L.), HỌ CÀ (SOLANACEAE)

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BỘ MƠN HĨA - - NGUYỄN DUY THANH NGUYỄN THỊ THU SƯƠNG PHÂN LẬP CHẤT TỪ CAO n-BUTANOL CỦA THÂN VÀ LÁ THÙ LÙ CẠNH (PHYSALIS ANGULATA L.), HỌ CÀ (SOLANACEAE) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH: CỬ NHÂN HÓA DƯỢC CÁN BỘ HƯỚNG DẪN Ts TÔN NỮ LIÊN HƯƠNG 12/2015 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BỘ MƠN HĨA - - NGUYỄN DUY THANH NGUYỄN THỊ THU SƯƠNG PHÂN LẬP CHẤT TỪ CAO n-BUTANOL CỦA THÂN VÀ LÁ THÙ LÙ CẠNH (PHYSALIS ANGULATA L.), HỌ CÀ (SOLANACEAE) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH: CỬ NHÂN HĨA DƯỢC CÁN BỘ HƯỚNG DẪN Ts TƠN NỮ LIÊN HƯƠNG 12/2015 LỜI CẢM ƠN  Chúng xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến: GVC Ts Tôn Nữ Liên Hương, cô không cố vấn học tập, người Thầy mà gương cho tận tâm nghiệp trồng Người nghiên cứu khoa học Q Thầy, Cơ, anh chị khóa trước, anh chị học viên cao học, thành viên Lớp Hóa Dược K38 bạn sinh viên phòng thí nghiệm Bộ mơn Hóa, Khoa Khoa học Tự Nhiên, Trường Đại Học Cần Thơ tạo điều kiện thuận lợi, ln động viên, giúp đỡ chúng tơi hồn thành tốt luận văn Cuối biết ơn lời cảm ơn chân thành đến gia đình, đặc biệt Cha, Mẹ tạo điều kiện vật chất, chỗ dựa tinh thần đường học vấn Xin chân thành cảm ơn! Physalis angulata L i Trường Đại Học Cần Thơ Khoa Khoa Học Tự Nhiên Bộ Mơn Hóa Học Cộng Hòa Xã Hội Chủ Nghĩa Việt Nam Độc Lập - Tự Do - Hạnh Phúc  NHẬN XÉT ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN Cán hướng dẫn: Ts Tôn Nữ Liên Hương Đề tài: “Phân lập chất từ cao n-butanol thân Thù lù cạnh (Physalis angulata L.), họ Cà (Solanaceae)” Sinh viên thực hiện: Nguyễn Duy Thanh Nguyễn Thị Thu Sương Lớp: Hóa Dược – Khóa: 38 Nội dung nhận xét: MSSV: B1203503 MSSV: B1203500 a) Nhận xét hình thức LVTN: b) Nhận xét nội dung LVTN (đề nghị ghi chi tiết đầy đủ):  Đánh giá nội dung thực đề tài:  Những vấn đề hạn chế: c) Nhận xét sinh viên tham gia thực đề tài (ghi rõ nội dung sinh viên chịu trách nhiệm thực có): d) Kết luận, đề nghị điểm: Cần Thơ, ngày… tháng… năm 2015 Cán hướng dẫn Ts Tôn Nữ Liên Hương Physalis angulata L ii Trường Đại Học Cần Thơ Khoa Khoa Học Tự Nhiên Bộ Mơn Hóa Học Cộng Hòa Xã Hội Chủ Nghĩa Việt Nam Độc Lập - Tự Do - Hạnh Phúc  NHẬN XÉT ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN Cán phản biện: …………………………………………………………… Đề tài: “Phân lập chất từ cao n-butanol thân Thù lù cạnh (Physalis angulata L.), họ Cà (Solanaceae)” Sinh viên thực hiện: Nguyễn Duy Thanh Nguyễn Thị Thu Sương Lớp: Hóa Dược – Khóa: 38 Nội dung nhận xét: MSSV: B1203503 MSSV: B1203500 a) Nhận xét hình thức LVTN: b) Nhận xét nội dung LVTN (đề nghị ghi chi tiết đầy đủ):  Đánh giá nội dung thực đề tài:  Những vấn đề hạn chế: c) Nhận xét sinh viên tham gia thực đề tài (ghi rõ nội dung sinh viên chịu trách nhiệm thực có): d) Kết luận, đề nghị điểm: Cần Thơ, ngày… tháng… năm 2015 Cán phản biện Physalis angulata L iii TÓM TẮT Từ dịch chiết n-butanol thân Thù lù cạnh (Physalis angulata L.) thu huyện Châu Thành, tỉnh Đồng Tháp, hai hợp chất flavonoid quercetin-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside hesperetin-7-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside phân lập phương pháp sắc ký cột pha đảo Cấu trúc hợp chất xác định dựa vào phương pháp phổ nghiệm đại 1D 2D NMR, kết hợp so sánh với tài liệu tham khảo Kết thử hoạt tính sinh học cho thấy nồng độ thử nghiệm ban đầu 200 µg/mL, dịch chiết n-butanol biểu hoạt tính kháng chủng vi sinh vật kiểm định Từ khóa: Physalis angulata L., dịch chiết n-butanol, sắc ký cột pha đảo, kháng vi sinh vật Physalis angulata L iv ABSTRACT The study focused on the aerial parts of Physalis angulata L collected from Dong Thap Province By obtaining the n-butanol extract and using the method of reversed phase column chromatography, two flavonoid glycoside compounds, quercetin-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside and hesperetin-7-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside were isolated The structure of these compounds were determined by a variety spectroscopic methods (1D and 2D NMR spectroscopy) and compared with literature At the initial concentration of 200 µg/mL, the n-butanol extract performed the inhibitory activity against microorganism species Key words: Physalis angulata L., n-butanol extract, reversed phase column chromatography, inhibitory activity Physalis angulata L v MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN i TÓM TẮT iv ABSTRACT v DANH SÁCH BẢNG viii DANH SÁCH HÌNH ix DANH SÁCH PHỤ LỤC x DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT xi CHƯƠNG 1: GIỚI THIỆU 1.1 Lý chọn đề tài 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 1.3.1 Đối tượng nghiên cứu 1.3.2 Phạm vi nghiên cứu 1.4 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Đặc tính thực vật 2.1.1 Giới thiệu Thù lù cạnh 2.1.2 Phân loại khoa học 2.1.3 Mô tả thực vật 2.2 Các công dụng mặt dược tính thù lù cạnh 2.2.1 Y học cổ truyền Việt Nam 2.2.2 Y học dân gian nước 2.3 Tình hình nghiên cứu thuộc lĩnh vực đề tài nước 2.3.1 Các nghiên cứu nước 2.3.2 Các nghiên cứu nước 2.3.2.1 Nghiên cứu thành phần hóa học 2.3.2.2 Nghiên cứu hoạt tính sinh học 10 Physalis angulata L vi CHƯƠNG 3: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 3.1 Phương tiện nghiên cứu 12 3.1.1 Hóa chất 12 3.1.2 Thiết bị dụng cụ 12 3.2 Phương pháp nghiên cứu 12 3.2.1 Phương pháp chiết xuất cô lập hợp chất 12 3.2.2 Phương pháp khảo sát xác định cấu trúc hóa học hợp chất 13 3.2.3 Phương pháp xác định hoạt tính sinh học 13 3.3 Thực nghiệm chiết xuất, điều chế cao thô khảo sát cao n-BuOH 13 3.3.1 Thu hái xử lý mẫu 13 3.3.2 Điều chế cao thô 14 3.3.3 Khảo sát cao n-BuOH 15 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 17 4.1 Hợp chất TL.Bu01 17 4.1.1 Đặc tính TL.Bu01 17 4.1.2 Nhận danh hợp chất TL.Bu01 17 4.2 Hợp chất TL.Bu04 22 4.2.1 Đặc tính TL.Bu04 22 4.2.2 Nhận danh hợp chất TL.Bu04 22 4.3 Kết thử hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định 28 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 30 5.1 Kết luận 30 5.2 Kiến nghị 30 TÀI LIỆU THAM KHẢO 31 PHỤ LỤC 33 Physalis angulata L vii DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng 2.1 Một số thành phần hóa học phân lập từ Thù lù cạnh Bảng 3.1 Kết sắc ký cột Diaion HP-20 cao n-BuOH 15 Bảng 3.2 Kết sắc ký cột pha đảo phân đoạn F4 16 Bảng 3.3 Kết sắc ký cột pha đảo phân đoạn F3 16 Bảng 4.1 Dữ kiện phổ 1H NMR, 13C NMR DEPT TL.Bu01 20 Bảng 4.2 Bảng số liệu phổ 1D NMR TL.Bu01 Rutin 21 Bảng 4.3 Dữ kiện phổ 1H NMR, 13C NMR, DEPT HMBC TL.Bu04 26 Bảng 4.4 Bảng số liệu phổ 1D NMR TL.Bu04 Hesperidin 27 Bảng 4.5 Hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định cao chiết phân đoạn theo phương pháp pha loãng đa nồng độ xác định MIC (µg/mL) 31 Physalis angulata L viii Phụ Lục Phụ lục 2.6 Phổ DEPT giãn rộng TL.Bu01 Physalis angulata L 41 Phụ Lục PHỤ LỤC 3: CÁC PHỔ CỦA TL.BU04 (HESPERIDIN) Phụ lục 3.1a Phổ 1H NMR TL.Bu04 Physalis angulata L 42 Phụ Lục Phụ lục 3.1b Phổ 1H NMR TL.Bu04 Physalis angulata L 43 Phụ Lục Phụ lục 3.2a Phổ 1H NMR giãn rộng TL.Bu04 Physalis angulata L 44 Phụ Lục Phụ lục 3.2b Phổ 1H NMR giãn rộng TL.Bu04 Physalis angulata L 45 Phụ Lục Phụ lục 3.3 Phổ 13C NMR TL.Bu04 Physalis angulata L 46 Phụ Lục Phụ lục 3.4a Phổ 13C NMR giãn rộng TL.Bu04 Physalis angulata L 47 Phụ Lục Phụ lục 3.4b Phổ 13C NMR giãn rộng TL.Bu04 Physalis angulata L 48 Phụ Lục Phụ lục 3.5 Phổ DEPT TL.Bu04 Physalis angulata L 49 Phụ Lục Phụ lục 3.6 Phổ DEPT giãn rộng TL.Bu04 Physalis angulata L 50 Phụ Lục Phụ lục 3.7 Phổ HMBC TL.Bu04 Physalis angulata L 51 Phụ Lục H2'; H5'; H6' → C2 H8 → C6 H6 → C8 H6; H8 → C10 H2'; H5'; H6' → C3'; C4' H6; H8 → C7; C5; C9 Phụ lục 3.8a Phổ HMBC giãn rộng TL.Bu04 Physalis angulata L 52 Phụ Lục H2 → C1' 4'−OCH3 → C4' H1'' → C7 H3e → C4 H2 → C4 H3a → C4 Phụ lục 3.8b Phổ HMBC giãn rộng TL.Bu04 Physalis angulata L 53 Phụ Lục H1''' → C6'' Phụ lục 3.8c Phổ HMBC giãn rộng TL.Bu04 Physalis angulata L 54 Phụ Lục H6''' → C5'''; C4''' H3a → C2 Phụ lục 3.8d Phổ HMBC giãn rộng TL.Bu04 Physalis angulata L 55 ... ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BỘ MƠN HĨA - - NGUYỄN DUY THANH NGUYỄN THỊ THU SƯƠNG PHÂN LẬP CHẤT TỪ CAO n-BUTANOL CỦA THÂN VÀ LÁ THÙ LÙ CẠNH (PHYSALIS ANGULATA L.), HỌ CÀ (SOLANACEAE). .. hóa học Thù lù cạnh Việt Nam cơng việc có ý nghĩa cấp thiết Vì lý đó, chúng tơi lựa chọn thực đề tài tôt nghiệp Phân lập chất từ cao n-butanol thân Thù lù cạnh (Physalis angulata L.), họ Cà (Solanaceae) ... Bộ: Cà (Solanales) Họ: Cà (Solanaceae) Chi: Thù lù (Physalis) Loài: Physalis angulata 2.1.3 Mô tả thực vật Thân: Thù lù loài thực vật thân thảo, phân nhánh nhiều, chiều cao thân từ 50 – 100 cm Thân