PHÂN LẬP HAI HỢP CHẤT TỪ CAO METHANOL CỦA ĐỊA Y Parmotrema tinctorum (Nyl.) Hale THU HÁI TẠI THÀNH PHỐ ĐÀ LẠT, TỈNH LÂM ĐỒNG

Luận văn này đươc ̣ thưc hiện nhằm muc đích nghiên cứu thành phần hó a hoc ̣ trong phân đoan ̣ cao chiết methanol của loà i đia ỵ Parmotrema tinctorum (Nyl.) Hale, được thu hái tai ̣ Thành Phô Đà Lat, tỉnh Lâm Đồng. Hiên nay ̣ ở Viêt Nam ̣ , chưa co nhiề bá cá khoa họ vê thành phầ hó a hoc c ̣ ũng như là hoat ̣ tính sinh họ về loài đia y ṇ à y. Từ phân đoạ cao methanol tổg, qua nhiề lầ n sắ ký bả n mỏ ng và sắ c ký côt, k ̣ ế quả đã phân lâp được 2 hơp ch ̣ ất tinh khiết là orcinol (PT8) và lecanoric acid (PT3). Cấu trúc của các hơp ch ̣ ất được xác đinh ḍ ưa trên c ̣ ác phương pháp phổ nghiêm ̣ 1H-NMR, 13C-NMR, COSY, HSQC, HMBC, MS và so sánh với các tài liệu tham khả o trong nước và ngoài nước.

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BỘ MƠN HĨA - - Nguyễn Văn Mun Lưu Phạm Hải Vương PHÂN LẬP HAI HỢP CHẤT TỪ CAO METHANOL CỦA ĐỊA Y Parmotrema tinctorum (Nyl.) Hale THU HÁI TẠI THÀNH PHỐ ĐÀ LẠT, TỈNH LÂM ĐỒNG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH: CỬ NHÂN HÓA DƯỢC Cần Thơ, 2017 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BỘ MƠN HĨA - - Nguyễn Văn Mun Lưu Phạm Hải Vương PHÂN LẬP HAI HỢP CHẤT TỪ CAO METHANOL CỦA ĐỊA Y Parmotrema tinctorum (Nyl.) Hale THU HÁI TẠI THÀNH PHỐ ĐÀ LẠT, TỈNH LÂM ĐỒNG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH: CỬ NHÂN HÓA DƯỢC CÁN BỘ HƯỚNG DẪN TS NGUYỄN PHÚC ĐẢM Cần Thơ, 2017 LỜI CẢM ƠN  Để hoàn thành luận văn này, chúng em đã nhâ ̣n đươ ̣c rấ t nhiều sự quan tâm, giúp đỡ hỗ trơ ̣ nhiệt tình từ các thầ y cô, gia đin ̀ h và ba ̣n bè Qua đây, chúng em xin gửi lời cảm ơn chân thành nhất: Với lòng biế t ơn sâu sắ c nhấ t, chúng em xin gửi đế n Thầy-TS Nguyễn Phúc Đảm, Giảng viên Khoa Sư phạm, Trường Đại ho ̣c Cầ n Thơ, Thầ y đã tâ ̣n tâm chỉ dẫn chúng em suố t quá trin ̀ h làm luâ ̣n văn tố t nghiệp, Thầ y đã nhiê ̣t tình truyền đa ̣t cho chúng em những kiế n thức và kinh nghiêm quý báu để chúng em đa ̣t đươ ̣c thành này Không chỉ vâ ̣y, đối với chúng em, Thầy một người thân gia điǹ h, quan tâm và da ̣y bảo chúng em, là nguồ n động lực to lớn tiế p thêm sức ma ̣nh tinh thầ n cho chúng em Mô ̣t lầ n nữa, xin chân thành cảm ơn Thầ y Chúng em xin biết ơn Thầy-TS Nguyễn Tro ̣ng Tuân, giảng viên Khoa Khoa ho ̣c Tự nhiên, Trường Đại ho ̣c Cầ n Thơ, Thầy đã nhiệt tình giúp đỡ và hỡ trơ ̣ chúng em về kiến thức, trang thiết bi,̣ hóa chấ t và kinh phí suố t quá trình chúng em thực hiê ̣n Luận văn này Xin cám ơn cô-TS Nguyễn Thi ̣Thu Trâm, Phó Trưởng Khoa Khoa Khoa ho ̣c Cơ bản, Trường Đa ̣i học Y Dươ ̣c Cần Thơ, cô đã kip̣ thời giúp đỡ và hỗ trơ ̣ lúc chúng em gă ̣p khó khăn Xin chân thành cám ơn các thầ y cô Khoa Khoa ho ̣c Tự nhiên và nhiề u thầ y cô khác đã truyền đa ̣t cho chúng em những kiế n thức quý báu, kinh nghiê ̣m hữu ić h nhấ t, là những hành trang quý giá cho chúng em cho hôm và mai sau Chúng em xin gửi đế n những lời cám ơn thân thương dành cho các anh chị và các bạn ở phòng thí nghiệm Hóa sinh-Hữu cơ, Bô ̣ môn Hóa ho ̣c, Khoa Sư pha ̣m, cùng các ba ̣n lớp Hóa Dươ ̣c K40 đã chia sẻ với chúng em nhiề u kinh nghiê ̣m suố t thời gian qua Cuố i cùng, chúng em xin dành hết tình cảm lòng biết ơn cho gia đình và những người thân, đã đợng viên và ln bên ca ̣nh chúng em, là chỗ dựa tinh thầ n vững chắc, cổ vũ chúng em từ những ngày đầ u tiên đèn sách hoàn thành luâ ̣n văn này Chúng em xin chân thành cám ơn và biế t ơn sâu sắ c! NGYỄN VĂN MUN LƯU PHẠM HẢI VƯƠNG i Trường Đại Học Cần Thơ Khoa Khoa Học Tự Nhiên Bộ Mơn Hóa Học Cộng Hòa Xã Hội Chủ Nghĩa Việt Nam Độc Lập - Tự Do - Hạnh Phúc  NHẬN XÉT ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN Cán bộ hướng dẫn: Ts Nguyễn Phúc Đảm Đề tài: Phân lập hai hợp chất từ cao methanol địa y Parmotrema tinctorum (Nyl.) Hale thu hái Thành Phố Đà Lạt, tỉnh Lâm Đồng Sinh viên thực hiện: Nguyễn Văn Mun MSSV: B1401406 Lưu Phạm Hải Vương MSSV: B1401462 Lớp: Hóa Dược – Khóa: 40 Nội dung nhận xét: a Nhận xét về hình thức LVTN: b Nhận xét về nội dung LVTN (đề nghị ghi chi tiết đầy đủ):  Đánh giá nội dung thực hiện đề tài:  Những vấn đề còn hạn chế: c Nhận xét đối với từng sinh viên tham gia thực hiện đề tài: d Kết luận, đề nghị điểm: Cần Thơ, ngày… tháng… năm 2017 Cán bộ hướng dẫn TS Nguyễn Phúc Đảm ii Trường Đại Học Cần Thơ Khoa Khoa Học Tự Nhiên Bộ Mơn Hóa Học Cộng Hòa Xã Hội Chủ Nghĩa Việt Nam Độc Lập - Tự Do - Hạnh Phúc  NHẬN XÉT ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN Cán bộ phản biện: Tên đề tài: : Phân lập hai hợp chất từ cao methanol địa y Parmotrema tinctorum (Nyl.) Hale thu hái Thành Phố Đà Lạt, tỉnh Lâm Đồng Sinh viên thực hiện: Nguyễn Văn Mun Lưu Phạm Hải Vương Lớp: Hóa Dược – Khóa: 40 Nợi dung nhận xét: a Nhận xét về hình thức LVTN: MSSV: B1401406 MSSV: B1401462 b Nhận xét về nội dung LVTN (đề nghị ghi chi tiết đầy đủ): * Đánh giá nội dung thực hiện đề tài: * Những vấn đề còn hạn chế: c Nhận xét đối với từng sinh viên tham gia thực hiện đề tài (ghi rõ từng nợi dung sinh viên chịu trách nhiệm thực hiện nếu có): d Kết luận, đề nghị điểm: Cần Thơ, ngày tháng năm 2017 Cán bộ phản biện iii TÓM TẮT  Luận văn đươ ̣c thực hiện nhằ m mu ̣c đích nghiên cứu thành phầ n hóa ho ̣c phân đoa ̣n cao chiế t methanol loài điạ y Parmotrema tinctorum (Nyl.) Hale, thu hái ta ̣i Thành Phố Đà La ̣t, tỉnh Lâm Đồ ng Hiê ̣n ở Viê ̣t Nam, chưa có nhiều báo cáo khoa học về thành phần hóa ho ̣c cũng hoa ̣t tiń h sinh học về loài điạ y này Từ phân đoạn cao methanol tổng, qua nhiều lầ n sắc ký bản mỏng sắ c ký cô ̣t, kết quả đã phân lâ ̣p hơ ̣p chấ t tinh khiế t orcinol (PT8) lecanoric acid (PT3) Cấu trúc các hơ ̣p chấ t xác đinh ̣ dựa các phương pháp phổ nghiê ̣m 1H-NMR, 13C-NMR, COSY, HSQC, HMBC, MS so sánh với các tài liệu tham khảo nước và ngoài nước iv DANH SÁCH CÁC TỪ VIẾT TẮT  Từ viết tắt Tên viết đầy đủ Proton (1) Nuclear Magnetic Resonance H-NMR 13 C-NMR Carbon (13) Nuclear Magnetic Resonance NMR Nuclear Magnetic Resonance J Coupling constant 𝛿 Chemical shift s Mũi đơn (singlet) d Mũi đôi (doublet) brd Mũi đôi rộng (broad doublet) brs Mũi đơn rộng (broad singlet) ms Mass spectrometry ppm Part per million Hz Hertz (đơn vị đo tần số) UV Ultra violet P tinctorum Parmotrema tinctorum (Nyl.) Hale P grayanum Parmotrema grayanum (Hue.) Hale P praesorediosum Parmotrema praesorediosum (Nyl.) Hale Rf Retention factor SKC Sắc ký cột SKLM Sắc ký lớp mỏng DPPH 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl ABTS 2,2’-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic) acid HSQC Heternonuclear Single Quantum Correlation HMBC Heteronuclear Multiple Bond Correlation COSY Correlation Spectroscopy v MỤC LỤC  LỜI CẢM ƠN i NHẬN XÉT CỦA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN ii NHẬN XÉT CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN iii TÓM TẮT iv DANH SÁCH CÁC TỪ VIẾT TẮT v MỤC LỤC vi DANH SÁCH BẢNG viii DANH SÁCH HÌNH .ix DANH SÁCH SƠ ĐỒ .x DANH SÁCH PHỤ LỤC xi CHƯƠNG 1: GIỚI THIỆU 1.1 Lý chọn đề tài 1.2 Mục đích nghiên cứu: 1.3 Nội dung nghiên cứu: CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN 2.1 Tổng quan thực vật học điạ y 2.1.1 Đặc điểm địa y 2.1.2 Công dụng địa y 2.2 Chi Parmotrema 2.2.1 Mô tả thực vật 2.2.2 Thành Phần hóa học chi Parmotrema .4 2.3 Địa y Parmotrma tinctorum (Nyl.) Hale 12 2.3.1 Phân loại thực vật 12 2.3.2 Mô tả thực vật 2.3.3 Phân bố 12 2.3.4 Thành phần hóa học 12 2.3.5 Hoạt tính sinh học 13 CHƯƠNG 3: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ THỰC NGHIỆM 18 3.1 Phương tiện nghiên cứu 18 3.1.1 Thời gian địa điểm 18 3.1.2 Hóa chất 18 3.1.3 Thiết bị dụng cụ 18 3.2 Khảo sát nguyên liệu 19 3.3 Phương pháp nghiên cứu 19 3.3.1 Tách chiết hợp chất hữu khỏi 19 vi 3.3.2 Điều chế cao methanol tổng 19 3.3.3 Phương pháp cô lập 20 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 30 4.1 Biện luận cấu trúc hợp chất PT8: 30 4.2 Biện luận cấu trúc hợp chất PT3: 31 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 36 5.1 Kết luận 36 5.2 Kiến nghị 36 TÀI LIỆU THAM KHẢO 37 PHỤ LỤC 39 vii DANH SÁCH BẢNG  Bảng 2.1: Một số cấu trúc hóa học Parmotrema tinctorum 14 Bảng 2.2: Nồng độ ức chế chủng nấm tối thiểu các cao địa y 15 Bảng 2.3: Hoạt tính kháng khuẩn P Tinctorum 16 Bảng 2.4: Nồng độ ức chế vi khuẩn tối thiểu (MIC) các cao địa y 16 Bảng 2.5: Nồng độ ức chế chủng nấm tối thiểu các cao địa y 16 Bảng 3.1: Kết SKLM cao methanol sắc ký nhanh - cột khô từ cao methanol 20 Bảng 3.2: kết sắc ký nhanh-cột khô từ phân đoạn 22 Bảng 3.3: Kết sắc ký cột khô từ phân đoạn 8.11 .24 Bảng 3.4: Kết sắc ký cột khô phân đoạn 12 26 Bảng 3.5: Kết sắc ký cột phân đoạn 12.4 27 Bảng 4.1: So sánh liệu phổ hợp chất PT8 với orcinol 31 Bảng 4.2: Phổ NMR PT3 34 Bảng 4.3: So sánh liệu phổ hợp chất PT3 với lecanoric acid 35 viii 50 Phụ lục 2.6: Phổ 13C-NMR dãn rộng PT3 Phụ lục 2.7: Phổ COSY PT3 51 Phụ lục 2.8: Phổ COSY dãn rộng PT3 52 Phụ lục 2.9: Phổ HSQC PT3 53 Phụ lục 2.10: Phổ HSQC dãn rộng PT3 54 Phụ lục 2.11: Phổ HMBC PT3 55 Phụ lục 2.12: Phổ HMBC dãn rộng PT3 56 Phụ lục 2.13: Phổ HMBC dãn rộng PT3 57 Phụ lục 2.14: Phổ HMBC dãn rộng PT3 58 Phụ lục 3.1: Phổ 1H-NMR PT3 PHỤ LỤC 3: CÁC PHỔ CỦA 4-(2,4-DIHYDROXY-6METHYLBENZOYL)OXY-2-HYDROXY-6-METHYLBENZOIC ACID (PT3) ĐƯỢC ĐO TRONG DUNG MÔI DMSO-D6 59 60 Phụ lục 3.2: Phổ 1H-NMR dãng rộng PT3 61 Phụ lục 3.3: Phổ 1H-NMR dãng rộng PT3 62 Phụ lục 3.4: Phổ 13C-NMR PT3 63 Phụ lục 3.5: Phổ 13C-NMR dãng rộng PT3 64 Phụ lục 3.6: Phổ 13C-NMR dãng rộng PT3