Nghiên cứu loài vi khuẩn ralstonia solanacearum (smith) gây hại cà chua vụ đông xuân xuân hè ở ninh bình năm 2007 2008

Nghiên cứu loài vi khuẩn ralstonia solanacearum (smith) gây hại cà chua vụ đông xuân xuân hè ở ninh bình năm 2007 2008

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI -------  ------- NGUYỄN NGỌC TẤN NGHIÊN CỨU LOÀI VI KHUẨN RALSTONIA SOLANACEARUM SMITH GÂY HẠI CÀ CHUA VỤ ðÔNG XUÂN – XUÂN HÈ Ở TỈNH NINH BÌNH NĂM 2007 - 2008 LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành: BVTV Mã số: 60.62.10 Người hướng dẫn khoa học: TS. ðỗ Tấn Dũng HÀ NỘI – 2008 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… i LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan, số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn này là trung thực và chưa ñược sử dụng ñể bảo vệ một học vị nào. Tôi xin cam ñoan, mọi sự giúp ñỡ cho việc thực hiện luận văn này ñã ñược cảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn ñều ñược chỉ rõ nguồn gốc. Ninh Bình, ngày…… tháng…….năm 2008 Tác giả Nguyễn Ngọc Tấn Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… ii LỜI CẢM ƠN ðể hoàn thành luận văn này, ngoài sự cố gắng nỗ lực của bản thân, tôi nhận ñược rất nhiều sự quan tâm giúp ñỡ nhiệt tình của các thầy cô, bạn bè, người thân và các cơ quan ñơn vi. Trước tiên tôi xin chân thành cảm ơn các thầy, cô trong khoa Sau ðại học và khoa Nông học ñã trực tiếp giảng dạy, trang bị những kiến thức bổ ích trong suốt thời gian qua. ðặc biệt, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tời thầy giáo TS. ðỗ Tấn Dũng, người ñã tận tình hướng dẫn, giúp ñỡ và ñộng viên tôi trong quá trình thực hiện ñề tài và hoàn thiện luận văn. Cuối cùng, tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới nhân dân ñịa phương huyện Gia Viễn, Yên Khánh, Nho Quan, T.P Ninh Bình ñã giúp ñỡ tôi tận tình trong thời gian thực hiện ñề tài. Ninh bình, ngày… tháng… năm 2008 Tác giả Nguyễn Ngọc Tấn Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… iii MỤC LỤC Lời cam ñoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục các bảng .vi Danh mục các ảnh . viii Danh mục các biểu ñồ .x 1. MỞ ðẦU i 1.1. TỚNH CấP THIếT CủA ñề TàI .1 1.2. MụC ñỚCH, YỜU CầU CủA ñề TàI .2 1.2.1. MụC ñỚCH 2 1.2.2. YỜU CầU .2 1.3. ðịA ñIểM Và THờI GIAN NGHIỜN CứU 3 2. TỔNG QUAN VẤN ðỀ NGHIÊN CỨU .4 2.1. NHỮNG NGHIÊN CỨU NGOÀI NƯỚC .4 2.1.1. LỊCH SỬ NGHIÊN CỨU, MỨC ðỘ PHỔ BIẾN, TÁC HẠI CỦA BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN .4 2.1.2. NGHIÊN CỨU VỀ ðẶC ðIỂM SINH HỌC CỦA LOÀI RALSTONIA SOLANACEARUM SMITH 6 2.1.2.1. TRIỆU CHỨNG TÁC HẠI VÀ MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP PHÁT HIỆN, CHẨN ðOÁN BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN 7 2.1.2.2. NHỮNG NGHIÊN CỨU VỀ ðẶC ðIỂM HÌNH THÁI, ðẶC TÍNH SINH LÝ CỦA LOÀI RALSTONIA SOLANACEARUM SMITH .9 2.1.2.3. NHỮNG NGHIÊN CỨU VỀ XÂM NHIỄM, LAN TRUYỀN VÀ SỰ TỒN TẠI CỦA LOÀI RALSTONIA SOLANACEARUM SMITH .9 2.1.3 NHỮNG NGHIÊN CỨU VỀ PHÒNG CHỐNG BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN DO RALSTONIA SOLANACEARUM SMITH GÂY RA 11 2.1.3.1. BIỆN PHÁP CHỌN, TẠO VÀ SỬ DỤNG GIỐNG KHÁNG BỆNH TRONG PHÒNG CHỐNG BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN 11 2.1.3.2. BIỆN PHÁP CANH TÁC TRONG PHÒNG CHỐNG BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN RALSTONIA SOLANACEARUM SMITH .15 2.1.3.3. BIỆN PHÁP SINH HỌC PHÒNG CHỐNG BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN DO VI KHUẨN RALSTONIA SOLANACEARUM SMITH .17 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… iv 2.2. NHỮNG NGHIÊN CỨU TRONG NƯỚC 20 2.2.1. CÁC NGHIÊN CỨU CƠ BẢN VỀ BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN RALSTONIA SOLANACEARUM SMITH TRÊN MỘT SỐ CÂY TRỒNG .20 2.2.2. NHỮNG NGHIÊN CỨU PHÒNG CHỐNG BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN TRÊN MỘT SỐ CÂY TRỒNG .24 3. VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 3.1. VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU .28 3.2. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 29 3.3. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29 3.3.1. PHƯƠNG PHÁP ðIỀU TRA, NGHIÊN CỨU BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN NGOÀI ðỒNG RUỘNG .29 3.3.1.1. BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN HẠI CÀ CHUA 30 3.3.1.2. ẢNH HƯỞNG CỦA CHẾ ðỘ LUÂN CANH ðẾN BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN HẠI CÀ CHUA .30 3.3.1.3. ẢNH HƯỞNG CỦA ðỊA THẾ DẤT ðẾN BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN HẠI CÀ CHUA .30 3.3.1.4. BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN HẠI KHOAI TÂY 31 3.3.1.5 BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN HẠI LẠC .31 3.3.1.6. BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN HẠI CÀ PHÁO .31 3.3.2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU TRONG PHÒNG 31 3.3.2.1. PHƯƠNG PHÁP CHẨN ðOÁN, PHÂN LY, NUÔI CẤY VI KHUẨN RALSTONIA SOLANACEARUM .31 3.3.2.2. NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ ðẾN KHẢ NĂNG PHÁT TRIỂN CỦA VI KHUẨN RALSTONIA SOLANACEARUM.32 3.3.2.3. NGHIÊN CỨU ðẶC ðIỂM HÌNH THÁI TẾ BÀO VÀ KHUẨN LẠC CỦA CÁC ISOLATES VI KHUẨN RALSTONIA SOLANACEARUM32 3.3.3. PHƯƠNG PHÁP BỐ TRÍ THÍ NGHIỆM TRONG NHÀ LƯỚI 33 3.3.3.1. KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN CỦA MỘT SỐ GIỐNG CÀ CHUA TRONG NHÀ LƯỚI .33 3.3.3.2. NGHIÊN CỨU TÍNH GÂY BỆNH CỦA CÁC DÒNG VI KHUẨN RALSTONIA SOLANACEARUM PHÂN LẬP TRÊN CÁC CÂY KÝ CHỦ KHÁC NHAU 33 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… v 3.3.3.3. KHẢO SÁT KHẢ NĂNG PHÒNG TRỪ BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN HẠI CÀ CHUA BẰNG VI KHUẨN ðỐI KHÁNG TRONG ðIỀU KIỆN CHẬU VẠI 34 3.3.3.4. NGHIÊN CỨU TÍNH ðỘC CỦA CÁC ISOLATE VI KHUẨN RALSTONIA SOLANACEARUM PHÂN LẬP ðƯỢC TRÊN CÁC CÂY KÝ CHỦ .34 3.4. PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU 35 4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 36 4.1. ðIỀU TRA ðÁNH GIÁ MỨC ðỘ PHỔ BIẾN VÀ TÁC HẠI CỦA BỆNH HXVK HẠI MỘT SỐ CÂY TRỒNG Ở NINH BÌNH 36 4.1.1. BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN HẠI CÀ CHUA .36 4.1.2. ðIỀU TRA MỨC ðỘ PHỔ BIẾN VÀ TÁC HẠI CỦA BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN HẠI MỘT SỐ CÂY KÝ CHỦ Ở TỈNH NINH BÌNH 47 4.1.2.1. BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN HẠI LẠC 47 4.1.2.2. BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN HẠI CÀ PHÁO .50 4.1.2.3.BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN HẠI KHOAI TÂY .51 4.2. NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ðẶC TÍNH SINH HỌC CỦA LOÀI RALSTONIA SOLANACEARUM SMITH .55 4.2.1. PHƯƠNG PHÁP PHÂN LI NUÔI CẤY VI KHUẨN GÂY BỆNH .55 4.2.2. ðẶC ðIỂM HÌNH THÁI TẾ BÀO KHUẨN LẠC CỦA VI KHUẨN RALSTONIA SOLANACEARUM SMITH .56 4.2.3. TÌM HIỂU KHẢ NĂNG PHÁT TRIỂN CỦA CÁC DÒNG VI KHUẨN RALSTONIA SOLANACEARUM SMITH TRÊN MÔI TRƯỜNG NHÂN TẠO .59 4.2.4. NGHIÊN CỨU TÍNH GÂY BỆNH CỦA CÁC DÒNG VI KHUẨN GÂY BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN PHÂN LẬP TỪ CÁC CÂY KÝ CHỦ Ở NINH BÌNH .66 4.3. NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG PHÒNG CHỐNG BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN ………… 67 4.3.1. BIỆN PHÁP CANH TÁC .75 4.3.1.1. NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA CHẾ ðỘ LUÂN CANH ðẾN BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN HẠI CÀ CHUA .75 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… vi 4.3.1.2. NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA ðỊA THẾ ðẤT ðẾN BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN HẠI CÀ CHUA .79 4.3.2. BIỆN PHÁP SINH HỌC 80 5. KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ .89 5.1. KẾT LUẬN .89 5.2. ðỀ NGHỊ 90 TÀI LIỆU THAM KHẢO 91 PHỤ LỤC 105 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 4.1: Mức ñộ phổ biến của bệnh HXVK (Ralstonia solanacearum Smith) hại cà chua vụ thu ñông ở tỉnh Ninh Bình năm 2007 39 Bảng 4.2. Mức ñộ phổ biến của bệnh HXVK (Ralstonia solanacearum Smith) hại cà chua vụ ñông xuân ở tỉnh Ninh Bình năm 2007 – 2008 43 Bảng 4.3. Mức ñộ phổ biến của bệnh HXVK (Ralstonia solanacearum Smith) hại cà chua vụ xuân hè ở tỉnh Ninh Bình năm 2008 44 Bảng 4.4: Tình hình bệnh HXVK hại lạc (Ralstonia solanacearum Smith) vụ xuân năm 2008 ở tỉnh Ninh Bình 48 Bảng 4.5: Tình hình bệnh HXVK trên cà pháo .51 Bảng 4.6: Tình hình bệnh HXVK hại khoai tây vụ ñông 2007 54 Bảng 4.7: Một số ñặc ñiểm hình thái khuẩn lạc và tế bào của các dòng vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith gây bệnh HXVK trên môi trường nhân tạo 58 Bảng 4.8: Ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy ñến sự phát triển của của các dòng vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith 59 Bảng 4.9: Ảnh hưởng của pH môi trường nuôi cấy ñến sự phát triển của của các dòng vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith 63 Bảng 4.10: Ảnh hưởng của nhiệt ñộ ñến sự phát triển của các dòng vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith .65 Bảng 4.11: Nghiên cứu tính gây bệnh của các dòng vi khuẩn Ralstonia solanacearum phân lập từ các cây kí chủ trên cây cà chua .67 Bảng 4.12: Tính gây bệnh của các dòng vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith trên một số cây kí chủ 69 Bảng 4. 13: Ảnh hưởng của chế ñộ luân canh ñến bệnh héo xanh vi khuẩn hại cà chua vụ thu ñông (Gia Viễn, Ninh Bình năm 2007) .76 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… viii Bảng 4. 14: Ảnh hưởng của chế ñộ luân canh ñến bệnh héo xanh vi khuẩn hại cà chua vụ xuân hè (Gia Viễn, Ninh Bình năm 2008) .78 Bảng 4. 15: Ảnh hưởng của ñịa thế ñất ñến bệnh HXVK hại cà chua vụ xuân hè năm 2007, Gia Vượng, Gia Viễn 80 Bảng 4.16 : Khảo sát khả năng kháng bệnh héo xanh vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith của một số giống cà chua 82 Bảng 4.17: Khảo sát khả năng hạn chế bệnh héo xanh vi khuẩn của chế phẩm Bacillus subtilis trong ñiều kiện chậu vại 86 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… ix DANH MỤC CÁC ẢNH Ảnh 4.1. Cây cà chua bị bệnh héo xanh vi khuẩn 39 Ảnh 4.2: Triệu chứng bó mạch cây cà chua bị bệnh héo xanh vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith .40 Ảnh 4.3. Cắt ngang thân cây cà chua bị bệnh héo xanh vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith .40 Ảnh 4.4. Dòng dịch vi khuẩn trong phương pháp xác ñịnh nhanh bệnh héo xanh vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith 41 Ảnh 4.5 a. Cây lạc bị bệnh héo xanh vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith 49 Ảnh 4.5 b. Cây lạc bị bệnh héo xanh vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith.50 Ảnh 4.6: Cây cà pháo bị bệnh héo xanh vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith 53 Ảnh 4.7. Cắt ngang thân cây cà pháo bị bệnh héo xanh vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith .53 Ảnh 4.8 a: Cây khoai tây bị bệnh héo xanh vi khuẩn 54 Ảnh 4.8 b: Cây khoai tây bị bệnh héo xanh vi khuẩn 54 Ảnh 4.9 : Sự phát triển của vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith trên môi trường SPA .61 Ảnh 4.10: Sự phát triển của vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith trên môi trường TZC 62 Ảnh 4.11: Sự phát triển của vi khuẩn ñối kháng Bacillus subtilis trên môi trường SPA .63 Ảnh 4.12: Cây cà pháo bi bệnh héo xanh vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith trong lây nhiễm chéo 70 Ảnh 4.13: Thí nghiệm lây nhiễm bệnh héo xanh vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith trên lạc 71 Ảnh 4.14: Thí nghiệm lây nhiễm bệnh héo xanh vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith trên cà chua .71 . hành nghiên cứu ñề tài: “ Nghiên cứu loài vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith gây hại cà chua vụ ñông xuân – xuân hè ở tỉnh Ninh Bình năm 2007- 2008 .. NGUYỄN NGỌC TẤN NGHIÊN CỨU LOÀI VI KHUẨN RALSTONIA SOLANACEARUM SMITH GÂY HẠI CÀ CHUA VỤ ðÔNG XUÂN – XUÂN HÈ Ở TỈNH NINH BÌNH NĂM 2007 - 2008 LUẬN VĂN THẠC