KỸ THUẬT CHUẨN BỊ TINH TRÙNG CHO PHƯƠNG PHÁP BƠM TINH TRÙNG VÀO BUỒNG TỬ CUNG (IUI)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KỸ THUẬT CHUẨN BỊ TINH TRÙNG CHO PHƯƠNG PHÁP BƠM TINH TRÙNG VÀO BUỒNG TỬ CUNG (IUI) Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Sinh viên thực hiện: PHẠM HỒNG ANH Niên khóa: 2008 – 2012 Tháng 07/2012 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC NƠNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC  KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KỸ THUẬT CHUẨN BỊ TINH TRÙNG CHO PHƯƠNG PHÁP BƠM TINH TRÙNG VÀO BUỒNG TỬ CUNG (IUI) Hướng dẫn khoa học Sinh viên thực ThS.BS HOÀNG THỊ DIỄM TUYẾT PHẠM HOÀNG ANH CNXN LẠI VĂN TẦM Tháng 07/2012 LỜI CẢM ƠN Xin chân thành cảm ơn: Ban Giám Hiệu trường Đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh tạo điều kiện cho suốt thời gian học tập Các thầy cô Bộ môn Công nghệ Sinh học thầy cô trực tiếp giảng dạy suốt bốn năm qua Ban Giám Đốc bệnh viện Từ Dũ Phòng kế hoạch tổng hợp tạo điều kiện cho thực tập tốt nghiệp quý bệnh viện ThS.BS Hoàng Thị Diễm Tuyết - Trưởng khoa Hiếm muộn CNXN Lại Văn Tầm - Trưởng phòng xét nghiệm Nam khoa trực tiếp hướng dẫn giúp đỡ suốt thời gian thực đề tài tốt nghiệp CNSH Nguyễn Thị Hà, CNSH Trần Thị Việt Nga, ThS.KS Lê Thị Thanh Bình, CNXN Điêu Anh Tuấn anh chị phòng xét nghiệm Nam khoa tạo điều kiện hướng dẫn tơi hồn thành tốt đề tài Bạn đồng hành Hứa Thanh Tân - Khoa Công nghệ Sinh học, trường Đại học Quốc tế thực đề tài phòng xét nghiệm Nam khoa toàn thể bạn thân yêu lớp DH08SH hỗ trợ, giúp đỡ động viên suốt thời gian thực đề tài Con thành kính ghi ơn ba mẹ người thân gia đình ln tạo điều kiện động viên suốt trình học tập trường Tháng 07 năm 2012 Phạm Hoàng Anh i TÓM TẮT Bơm tinh trùng vào buồng tử cung (Intrauterine insemination - IUI) gọi thụ tinh nhân tạo, phương pháp điều trị vô sinh - muộn áp dụng phổ biến Cùng với phát triển kỹ thuật này, chuẩn bị tinh trùng đóng vai trò quan trọng khơng thể thiếu hiệu thành cơng IUI Vì lý nên đề tài “Kỹ thuật chuẩn bị tinh trùng cho phương pháp bơm tinh trùng vào buồng tử cung (IUI)” thực nhằm mục đích so sánh chất lượng tinh trùng sau lọc rửa phương pháp swim up phương pháp thang nồng độ không liên tục Đề tài thực 200 mẫu tinh dịch bệnh nhân Đầu tiên, mẫu tinh dịch đánh giá theo tiêu chuẩn nghiêm ngặt Tổ chức y tế giới 2010 (WHO 2010) dựa kết phân tích tinh dịch đồ để lựa chọn phương pháp lọc rửa phù hợp Sau đó, tiến hành chuẩn bị tinh trùng hai phương pháp swim up thang nồng độ không liên tục Mật độ tinh trùng mật độ tinh trùng di động tiến tới trước lọc rửa phương pháp swim up tương ứng 55,87 ± 11,00 x106/ml 18,39 ± 5,92 x106/ml; phương pháp thang nồng độ không liên tục tương ứng 45,51 ± 13,51 x10 6/ml 11,77 ± 5,56 x106/ml Mật độ tinh trùng tổng số tinh trùng di động sau lọc rửa phương pháp swim up tương ứng 9,26 ± 3,96 x106/ml 8,99 ± 3,87 x106/ml; phương pháp thang nồng độ không liên tục tương ứng 11,36 ± 5,68 x106/ml 11,02 ± 5,55 x106/ml Từ kết cho thấy phương pháp thang nồng độ không liên tục cho chất lượng tinh trùng tốt so với phương pháp swim up chất lượng tinh trùng ban đầu thấp ii SUMMARY Intrauterine insemination (IUI), or also known as artificial insemination (AI), is one of the most common methods of infertility treatment nowadays Beside this development of technique, sperm preparation has play an integral part in the success of IUI The thesis “Technique of semen processing for intrauterine insemination method (IUI)” used 200 semen samples from patients Firstly, semen samples were evaluated according to World Health Organization standard criteria in 2010 and based on the result of the analysis suitable preparation was chosen Secondly, quality of the semen by either swim up or discontinuous density gradient methods was compared The experiment result showed that sperm concentration and motile sperm concentration before sperm preparation of swim up method were 55.87 ± 11.00 x106/ml and 18.39 ± 5.92 x106/ml, respectively; of discontinuous density gradient method were 45.51 ± 13.51 x106/ml and 11.77 ± 5.56 x106/ml, respectively Sperm concentration and total motile sperm count after sperm preparation of swim up method were 9.26 ± 3.96 x106/ml and 8.99 ± 3.87 x106/ml, respectively; and of discontinuous density gradient method were 11.36 ± 5.68 x106/ml and 11.02 ± 5.55 x106/ml, respectively From these results, it was concluded that the sperm quality after discontinuous density gradient preparation was better than the sperm quality after swim up preparation although original semen parameters were lower Keywords: Technique; sperm preparation; intrauterine insemination; IUI iii MỤC LỤC Trang Lời cảm ơn i Tóm tắt ii Summary iii Mục lục iv Danh sách chữ viết tắt vi Danh sách bảng vii Danh sách hình viii Chương MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Yêu cầu 1.3 Nội dung thực Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Cơ sở khoa học 2.1.1 Quá trình hình thành tinh trùng người 2.1.1.1 Cấu trúc tinh trùng 2.1.1.2 Đại cương trình sinh tinh trùng 2.1.2 Tinh dịch 2.1.3 Giới thiệu chung tinh dịch đồ .7 2.1.4 Ngưỡng tham khảo WHO 2010 2.1.5 Đại cương phát triển nang noãn, trưởng thành phóng nỗn 2.1.6 Sinh lý thụ tinh 10 2.1.7 Kỹ thuật bơm tinh trùng vào buồng tử cung (IUI) 12 2.1.7.1 Giới thiệu kỹ thuật IUI 12 2.1.7.2 Các định IUI 12 2.1.7.3 Kết yếu tố ảnh hưởng 13 2.1.7.4 Nhận xét kỹ thuật IUI 13 iv 2.1.8 Phương pháp chuẩn bị tinh trùng cho IUI .14 2.1.8.1 Giới thiệu chung phương pháp chuẩn bị tinh trùng 14 2.1.8.2 Lợi ích phương pháp chuẩn bị tinh trùng 14 2.1.8.3 Lựa chọn phương pháp chuẩn bị tinh trùng 15 2.1.8.4 Hiệu việc chuẩn bị tinh trùng 15 2.2 Cơ sở thực tiễn 15 2.2.1 Các nghiên cứu giới 15 2.2.2 Các nghiên cứu nước 16 Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 3.1 Thời gian địa điểm 17 3.2 Vật liệu nội dung nghiên cứu .17 3.3 Phương pháp nghiên cứu 17 3.3.1 Tinh dịch đồ theo tiêu chuẩn WHO 2010 18 3.3.1.1 Khảo sát đại thể 18 3.3.1.2 Khảo sát vi thể .20 3.3.2 Phương pháp chuẩn bị tinh trùng 30 3.3.2.1 Nguyên tắc chung 30 3.3.2.2 Phương pháp swim up 31 3.3.2.3 Phương pháp thang nồng độ không liên tục 32 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 34 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .38 5.1 Kết luận .38 5.2 Đề nghị 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO 39 PHỤ LỤC v DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT AI : Artificial Insemination - Thụ tinh nhân tạo FSH : Follicle Stimulating Hormone - Hormone kích thích nang trứng HCG : Human Chorionic Gonadotropin - Hormone tiết thai kỳ GnRH : Gonadotropin Releasing Hormone - Hormone giải phóng FSH LH ICSI : Intracytoplasmic Sperm Injection - Bơm tinh trùng vào bào tương trứng IUI : Intrauterine Insemination - Bơm tinh trùng vào buồng tử cung IVF : Invitro Fertilization - Thụ tinh ống nghiệm KLT : Không liên tục LH : Luteinizing Hormone - Hormone kích thích hồng thể NST : Nhiễm sắc thể TT : Tinh trùng WHO : World Health Organization - Tổ chức y tế giới vi DANH SÁCH CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1 Ngưỡng tham khảo tối thiểu tinh dịch đồ theo WHO 2010 Bảng 3.1 Bảng qui định độ pha loãng, cách pha vùng đếm tinh trùng 28 Bảng 4.1 Tổng kết thông số trước lọc rửa bệnh nhân 34 Bảng 4.2 So sánh thông số trước lọc rửa hai phương pháp swim up thang nồng độ không liên tục 35 Bảng 4.3 Tổng kết thông số sau lọc rửa bệnh nhân .35 Bảng 4.4 So sánh thông số sau lọc rửa hai phương pháp swim up thang nồng độ không liên tục 36 vii DANH SÁCH CÁC HÌNH Trang Hình 2.1 Cấu trúc tinh trùng Hình 2.2 Quá trình sinh tinh trùng Hình 2.3 Vòi trứng tử cung Hình 2.4 Phản ứng cực đầu tinh trùng xâm nhập vào tế bào trứng 10 Hình 2.5 Kỹ thuật bơm tinh trùng vào buồng tử cung 12 Hình 3.1 Mẫu tinh dịch sau ly giải 18 Hình 3.2 Độ nhớt mẫu tinh dịch > cm 19 Hình 3.3 Đo thể tích tinh dịch cân pipette pasteur 20 Hình 3.4 So màu pH tinh dịch với bảng so màu 20 Hình 3.5 Buồng đếm Neubauer 23 Hình 3.6 Bộ thuốc nhuộm Eosin - Nigrosin bước nhuộm tinh trùng 24 Hình 3.7 Tinh trùng sau nhuộm eosin - nigrosin 24 Hình 3.8 Các kỹ thuật kéo lame 25 Hình 3.9 Bộ nhuộm Papanicolaou 26 Hình 3.10 Các dạng tinh trùng bất thường 27 Hình 3.11 Một số dạng tinh trùng bất thường sau nhuộm Papanicolaou 27 Hình 3.12 Tế bào bạch cầu đơn nhân (13, 15) sau nhuộm Papanicolaou 30 Hình 3.13 Tube ml, 15 ml 14 ml 31 Hình 3.14 Mơi trường Ferticult Flushing 31 Hình 3.15 Mơi trường Sil-Select Plus 32 Hình 3.16 Mẫu tinh trùng sau lọc rửa 33 viii Bảng 4.4 So sánh thông số mẫu tinh trùng sau lọc rửa hai phương pháp swim up thang nồng độ không liên tục Phương pháp chuẩn bị TT Các thông số bệnh nhân Trị số Swim up Thang nồng độ KLT (n = 100) (n = 100) Thể tích mẫu (ml) 0,40 ± 0,06 0,41 ± 0,03 0,230 Mật độ TT (x106/ml) 9,26 ± 3,96 11,36 ± 5,68 0,007 TT di dộng tiến tới (%) 96,93 ± 1,53 96,68 ± 1,79 0,247 Tổng số TT di động tiến tới ( x106/ml) 8,99 ± 3,87 11,02 ± 5,55 0,007 P Trung bình ± Độ lệch chuẩn, TT: Tinh trùng, KLT: Không liên tục P < 0,05: Sự khác biệt có ý nghĩa mặt thống kê dòng Mật độ tinh trùng tổng số tinh trùng di động tiến tới sau lọc rửa phương pháp swim up tương ứng 9,26 ± 3,96 x106/ml 8,99 ± 3,87 x106/ml; phương pháp thang nồng độ không liên tục tương ứng 11,36 ± 5,68 x106/ml 11,02 ± 5,55 x106/ml Kết cho thấy, mật độ tinh trùng tổng số tinh trùng di động tiến tới sau lọc rửa phương pháp thang nồng độ không liên tục cao so với phương pháp swim up chất lượng tinh dịch ban đầu thấp Do tỷ lệ thu hồi tinh trùng cao so với phương pháp swim up nên phương pháp thang nồng độ không liên tục thường thực với mẫu tinh trùng ít, yếu, dị dạng Ngồi ra, điều chỉnh phác đồ thích hợp (bao gồm thể tích lớp lọc, tốc độ thời gian ly tâm).thì phương pháp thang nồng độ liên tục dễ dàng loại bỏ tế bào tròn mảnh vụn tế bào Bên cạnh đó, tinh trùng sau chuẩn bị phương pháp thang nồng độ không liên tục chịu thay đổi trình trữ đơng tinh trùng tốt so với mẫu tinh trùng chuẩn bị phương pháp swim up (Allamaneni ctv, 2005) Theo Yamamoto ctv (1997), chất lượng tinh trùng sau lọc rửa phương pháp swim up thấp so với phương pháp thang nồng độ không liên tục Mật độ tinh trùng sau lọc rửa hai phương pháp 7,3 ± 2,2 x106/ml 11,3 ± 3,1 x106/ml (P < 0,05) Kết cho thấy, tỷ lệ thu hồi tinh trùng phương pháp thang nồng độ không liên tục cao so với phương pháp swim up 36 Vào năm 2005, Allamaneni ctv báo cáo chất lượng tinh trùng thu phương pháp thang nồng độ không liên tục tốt so với phương pháp swim up Tổng số tinh trùng di động thu sau lọc rửa phương pháp thang nồng độ không liên tục phương pháp swim up tương ứng 32,2 x106/ml 17,6 x106/ml (với tỷ lệ thu hồi tinh trùng tương ứng 69,2 % 50,0 %) Chất lượng tinh trùng sau lọc rửa phụ thuộc vào chất lượng tinh dịch (thể tích, mật độ độ di động tiến tới) mà phụ thuộc vào kinh nghiệm kỹ nhân viên phòng thí nghiệm khơng lựa chọn phương pháp từ ban đầu hay không cẩn thận q trình thao tác làm thất mẫu loại bỏ không triệt để tinh trùng chết, tế bào khác mảnh vụn tế bào Trước chuẩn bị tinh trùng nên chọn số vòng quay lực ly tâm thích hợp Tốt phòng xét nghiệm nên ấn định thời gian lực ly tâm cần thiết để thu cặn theo mong muốn Khi mật độ tinh trùng thấp điều chỉnh cách tăng thời gian lực ly tâm để tăng tối đa hội thu tinh trùng Không vượt trội so với phương pháp swim up tỷ lệ thu hồi tinh trùng, phương pháp thang nồng độ khơng liên tục kỹ thuật đơn giản nhanh chóng Đồng thời, qui trình thực thống nên kết lọc rửa từ phương pháp thang nồng độ khơng liên tục thường ổn định Ngồi ra, mức độ lây nhiễm thành phần tinh dịch vào mẫu tinh trùng sau chuẩn bị với phương pháp swim up thường cao so với phương pháp thang nồng độ không liên tục Tuy nhiên, phương pháp có ưu nhược điểm khác nên tùy đối tượng mẫu mà lựa chọn phương pháp thích hợp nhằm thu chất lượng tinh trùng tốt nhất, đồng thời cô đặc mẫu tinh trùng thể tích nhỏ, đảm bảo mang lại hiệu thành công IUI Ở đây, mật độ tinh trùng tổng số tinh trùng di động sau lọc rửa hai thơng số quan tâm chúng có liên quan đến tỷ lệ thụ thai (Dương Khuê Tú ctv, 2009) Tuy nhiên, hiệu IUI phụ thuộc vào tỷ lệ tinh trùng có hình dạng bình thường, tuổi người vợ, kỹ thuật bơm, dụng cụ bơm tinh trùng,…Và hạn chế đề tài chưa khảo sát yếu tố 37 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Chất lượng tinh trùng sau lọc rửa phương pháp thang nồng độ không liên tục tốt so với phương pháp swim up chất lượng ban đầu yếu Mật độ tinh trùng tổng số tinh trùng di động thu sau lọc rửa phương pháp swim up tương ứng 9,26 ± 3,96 x106/ml 8,99 ± 3,87 x106/ml; phương pháp thang nồng độ không liên tục tương ứng 11,36 ± 5,68 x106/ml 11,02 ± 5,55 x106/ml Khảo sát đặc tính tinh trùng (được mô tả tinh dịch đồ) lên chất lượng tinh trùng hiệu IUI sở để bác sĩ lâm sàng tư vấn cho bệnh nhân lựa chọn phương pháp điều trị thích hợp 5.2 Đề nghị Có thể điều chỉnh tốc độ thời gian ly tâm hai phác đồ quay 1.200 vòng/10 phút 1.500 vòng/5 phút bước rửa qui trình chuẩn bị tinh trùng Nên tiến hành rửa lần (ly tâm lần) qui trình thực phương pháp thang nồng độ khơng liên tục mẫu tinh trùng yếu để tránh làm tổn thương đến tinh trùng ảnh hưởng lực ly tâm Cần khảo sát thêm thông số hình dạng bình thường tinh trùng đánh giá chất lượng mẫu sau lọc rửa có mối liên quan với tỷ lệ thành công IUI Cần cẩn trọng trình thao tác tuân thủ nghiêm ngặt hướng dẫn an tồn phòng xét nghiệm mẫu tinh dịch chứa tác nhân lây nhiễm 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Phan Kim Ngọc Phạm Văn Phúc 2006 Công nghệ sinh học người động vật Nhà xuất giáo dục Tp HCM Bùi Thị Tôn Thất 2010 Phương pháp chuẩn bị tinh trùng cho IUI (IntraUterine Insemination) Luận văn kĩ sư Công nghệ sinh học, Đại học Nông Lâm Tp HCM Dương Khuê Tú, Cổ Phí Thị Ý Nhi Hồng Thị Diễm Tuyết 2009 Liên quan số lượng tinh trùng di động thành công bơm tinh trùng vào buồng tử cung (IUI) Y học Tp HCM Hồ Mạnh Tường Vương Thị Ngọc Lan 2002 Thụ tinh nhân tạo Nhà xuất y học Tp HCM Hồ Mạnh Tường, Đặng Quang Vinh Vương Thị Ngọc Lan 2011 Thụ tinh ống nghiệm Nhà xuất giáo dục Việt Nam Tài liệu tiếng nước Allamaneni S.S.R., Agarwal A., Rama S., Ranganathan P., Sharma R.K 2005 Comparative study on density gradients and swim up preparation techniques utilizing neat and cryopreserved spermatozoa Asian J Androl (1): 86 - 92 Brasch J.G., Rawlins R., Tarchala S and Radwanska E 1994 The relations between total motile sperm count and the success of intrauterine insemination Fertil Steril 62: 150 - 154 Burr R.W., Siegberg R., Flaherty S., Wang X.J and Matthews C.D 1996 The influence of sperm morphology and the number of motile sperm inseminated on the outcome of intrauterine insemination combined with mild ovarian stimulation Fertil Steril 65: 127 - 132 39 Berg U., Brucker C and Berg F.D 1997 Effect of motile sperm count after swim - up on outcome of intrauterine insemination Fertil Steril 67: 747 750 10 Centola G.M., Herko R., Andolina E., Weisensel S 1998 Comparison of sperm separation methods: effect on recovery, motility, motion parameters, and hyperactivation Fertil Steril 70: 1173 - 1178 11 Huang H.Y., Lee C.L., Lai Y.M., Change M.Y., Wang H.S., Change S.Y and Soong Y.K 1996 The impact of the total motile sperm count on the success of intrauterine insemination with husband’s spermatozoa J Assist Reprod Genet 13: 56 - 63 12 Horvath P., Bohrer M., Shelden R and Kemmann E 1989 The relationship of sperm parameters to cycle fecundity in superovulated woman undergoing intrauterine insemination Fertil Steril 52: 288 - 294 13 Yamamoto Y., Maenosono S., Okada H., Miyagawa I., Sofikitis N 1997 Comparisons of sperm quality, morphometry and function among human sperm populations recovered via SpermPrep II filtration, swim-up and Percoll density gradient methods Andrologia 29: 303 - 313 14 Wainer R 2004 Influence of the number of motile spermatozoa inseminated and of their morphology on the success of intrauterine insemination Human Reproduction 19(9): 2060 - 2065 15 World Health Organization 2010 WHO laboratory manual for the Examination and processing of human semen, fifth edition World Health Organization Tài liệu từ internet 16 http://www.ivftudu.com.vn/article/1115/ (21/05/2012) 17 http://www.ivftudu.com.vn/article/1183/ (27/05/2012) 18 http://www.ivftudu.com.vn/article/1273/ (15/05/2012) 19 http://www.ivftudu.com.vn/article/1286/ (30/05/2012) 20 http://www.seadropblog/gtslh/sinhlyhocsinhduc (31/05/2012) 40 PHỤ LỤC Dụng cụ - Trang thiết bị phòng xét nghiệm Nam khoa, Khoa Hiếm muộn, bệnh viện Từ Dũ A B C D E F A: Lame lamell; B: Micropipette; C: Đầu côn; D: Pipette pasteur; E: Hộp Nune; F: Máy bách phân G H I J K F L G: Máy ly tâm; H: Kính hiển vi; I: Tủ cấy CO2; J: Tủ ấm; K: Tủ cấy vi sinh; L: Cân Bảng số liệu thu thập thông số mẫu tinh trùng trước sau lọc rửa phương pháp swim up Phương pháp swim up STT Trước lọc rửa Họ tên bệnh nhân Sau lọc rửa TT MĐ DĐ TT MĐ DĐ (ml) (x106/ml) (%) (ml) (x106/ml) (%) 54 36 0,3 97 TRẦN ĐÌNH VINH 1976 PHẠM THÀNH ĐƯỢC 1976 1,7 45 38 0,3 12 97 TRẦN PHONG VŨ 1974 1,4 60 36 0,5 10 97 TRẦN MƯỜI 1971 40 20 0,3 97 ĐẶNG ĐỦ 1974 58 36 0,4 97 TRẦN HỮU TIẾN 1980 1,3 60 28 0,5 10 95 NGUYỄN NGỌC BÍCH 1971 1,6 73 40 0,3 14 95 PHẠM THANH GIANG 1983 68 30 0,3 95 LA MINH THỌ 1981 63 29 0,4 97 10 TRẦN VĂN CHẮC 1956 54 13 0,4 12 94 11 VÕ VĂN BÌNH 1967 58 27 0,5 90 12 HÀ MINH CẢNH 1975 43 22 0,5 90 13 CAO MAI 1977 39 25 0,3 95 14 NGÔ VĂN HÙNG 1966 52 21 0,4 10 95 15 HỒ VĂN THỦY 1983 57 33 0,5 95 16 NGUYỄN MINH PHÁT 1971 63 43 0,3 94 17 VÕ CHÍ ĐẠT 1986 1,5 65 48 0,3 10 98 18 LÊ HOÀI ĐỨC 1975 51 32 0,4 14 97 19 BẠCH VĂN CÔNG 1980 52 35 0,4 95 20 NGUYỄN VĂN HOÀN 1976 63 37 0,4 15 97 21 PHẠM ĐỨC CẢNH 1978 0,8 58 40 0,4 10 97 22 BÙI VĂN TUYỂN 1975 1,8 60 29 0,4 14 96 23 NGUYỄN VĂN TRÒ 1988 42 33 0,5 97 24 TRẦN TRUNG KIÊN 1984 54 33 0,5 98 25 TRẦN ANH TÚ 1984 NGUYỄN QUANG SÁU 1978 69 36 0,3 98 66 29 0,4 98 26 Phương pháp swim up STT Trước lọc rửa Họ tên bệnh nhân TT MĐ (ml) (x10 /ml) Sau lọc rửa DĐ TT MĐ DĐ (%) (ml) (x10 /ml) (%) 27 HUỲNH LÂM ANH 1982 53 33 0,4 95 28 NGUYỄN VĂN LÂM 1969 48 30 0,4 10 98 29 LÊ QUANG NAM 1988 1,4 71 40 0,3 10 97 30 ĐÀO DUY TÀI 1978 56 38 0,3 98 31 VI QUANG VINH 1989 50 30 0,3 97 32 PHẠM HỒNG THÔNG 1982 56 32 0,4 10 98 33 108 28 0,3 10 95 78 30 0,5 95 35 BÙI HỒNG SƠN 1979 NGUYỄN VĂN ĐƯƠNG 1981 NGUYỄN VĂN LONG 1981 44 29 0,4 13 96 36 HOÀNG VĂN THẢO 1977 2,1 46 29 0,4 10 97 37 ĐẶNG CHẾ LINH 1979 2,4 67 32 0,4 15 95 38 TRỊNH BÁ NGÀ 1987 54 28 0,5 10 95 39 NGUYỄN ĐỨC KẾ 1977 51 42 0,5 97 40 PHẠM VIỆT CHƯƠNG 1981 48 22 0,5 98 41 TÔ VĂN VÂN 1972 56 39 0,5 95 42 PHAN QUANG HÒA 1983 53 30 0,4 97 43 NGUYỄN THANH HẢI 1971 43 30 0,4 98 44 TRƯƠNG CÔNG ANH 1984 1,9 57 34 0,4 10 96 45 TẠI VĂN DIỆN 1979 1,6 55 30 0,4 12 95 46 NGUYỄN VĂN TÂM 1974 54 28 0,4 98 47 1,4 48 26 0,4 12 97 64 35 0,4 22 98 49 NGUYỄN VĂN TUẤN 1979 ĐẶNG QUANG THANH 1980 NGUYỄN NGỌC THƠ 1987 48 26 0,4 97 50 PHẠM CÔNG TOÀN 1981 40 14 0,3 95 51 LƯ NGỌC DUY 1983 1,6 44 29 0,3 10 97 52 ĐÀO BẰNG 1987 66 33 0,4 98 34 48 Phương pháp swim up STT Trước lọc rửa Họ tên bệnh nhân TT MĐ (ml) (x10 /ml) Sau lọc rửa DĐ TT MĐ DĐ (%) (ml) (x10 /ml) (%) 57 33 0,5 97 54 BÙI NGUYỄN PHÚ QUỐC 1975 NGUYỄN VĂN BÌNH 1973 1,3 60 28 0,4 10 97 55 TRẦN NGỌC HOÀNG 1975 1,7 51 35 0,4 14 98 56 1,6 60 39 0,4 10 97 68 40 0,4 12 98 0,8 64 40 0,4 98 57 30 0,4 98 60 TRẦN THANH BÌNH 1981 NGUYỄN THANH TÙNG 1984 TRẦN ĐỨC NGUYÊN 1962 NGUYỄN THANH TÙNG 1984 TRẦN VĂN QUÁ 1961 1,7 46 36 0,4 10 98 61 CAO ANH KHOA 1980 44 33 0,4 97 62 NGUYỄN ANH PHI 1981 60 25 0,4 97 63 VÕ NGỌC BẮC 1980 1,8 51 28 0,4 10 98 64 TRẦN THANH LINH 1986 57 36 0,4 12 98 65 PHẠM THỊ TRÀ MY 1979 4,2 65 36 0,5 18 98 66 ĐINH DOÃN ĐĂNG 1983 60 34 0,4 98 67 LÊ DUY THỤC 1976 66 37 0,5 98 68 48 34 0,4 98 1,5 59 36 0,4 14 98 70 ĐỖ NHẬT LAM 1988 NGUYỄN LONG TRUNG 1986 NGUYỄN VĂN LE 1979 1,4 65 34 0,5 12 98 71 LÊ THANH HOÀNG 1986 48 33 0,5 98 72 NGUYỄN ĐẮC NAM 1984 1,6 72 42 0,4 16 98 73 DƯƠNG MINH TUẤN 1986 1,9 47 29 0,4 16 98 74 BÙI CHÍ THANH 1981 1,6 60 35 0,4 10 98 75 69 33 0,5 98 60 34 0,4 98 77 NGUYỄN VĂN YÊN 1973 TRƯƠNG THÀNH LONG 1970 NGUYỄN VĂN HUY 1981 53 34 0,4 98 78 TRẦN MINH HẢI 1982 58 37 0,4 16 98 53 57 58 59 69 76 Phương pháp swim up STT 79 Trước lọc rửa Họ tên bệnh nhân TT MĐ (ml) (x10 /ml) 1,9 Sau lọc rửa DĐ TT MĐ DĐ (%) (ml) (x10 /ml) (%) 58 36 0,4 12 98 61 37 0,4 16 98 56 29 0,4 98 81 HỒ VĂN THANH 1983 NGUYỄN HUỲNH CHÍ TÂM 1981 NGUYỄN QUỐC VIỆT 1979 82 ĐINH VĂN THÀNH 1982 43 35 0,4 98 83 DƯƠNG VĂN VĂN 1986 39 26 0,4 98 84 CAO MINH TUẤN 1991 45 38 0,4 98 85 NGUYỄN VĂN HIỂN 1988 54 39 0,4 98 86 PHAN VĂN TUẤN 1972 1,7 61 35 0,4 15 98 87 PHẠM NGỌC TIẾN 1981 1,5 47 26 0,4 98 88 ĐINH THANH HẢI 1979 68 39 0,4 18 98 89 LÊ VĂN DƯƠNG 1978 1,8 54 37 0,4 16 97 90 ĐẶNG VĂN HÙNG 1975 42 34 0,5 14 97 91 LÊ CHÍ HIẾU 1986 1,7 43 29 0,4 12 98 92 NGUYỄN VĂN TUẤN 1982 51 30 0,4 97 93 LÊ PHÚ THỌ 1974 78 55 0,3 14 98 94 57 29 0,4 96 35 21 0,4 97 96 LÊ VĂN HOAN 1986 DƯƠNG VŨ ĐINH LONG 1983 THÁI KIM ĐIỀN 1973 42 32 0,4 98 97 NGUYỄN NGỌC VŨ 1982 1,3 57 35 0,4 98 98 NGUYỄN VĂN TOÀN 1981 40 30 0,4 98 99 NGUYỄN NGỌC HIỀN 1976 43 24 0,4 95 100 BÙI TUẤN ANH 1979 83 30 0,5 98 80 95 TT: Thể tích; MĐ: Mật độ; DĐ: Di động Bảng số liệu thu thập thông số mẫu tinh trùng trước sau lọc rửa phương pháp thang nồng độ không liên tục Phương pháp thang nồng độ không liên tục STT Trước lọc rửa Họ tên bệnh nhân Sau lọc rửa TT MĐ DĐ TT MĐ DĐ (ml) (x106/ml) (%) (ml) (x106/ml) (%) 101 NGUYỄN VĂN PHÀN 1978 1,5 41 22 0,4 18 95 102 ĐẶNG NGỌC QUÝ 1983 1,9 42 24 0,4 16 96 103 LÊ ANH KIỆT 1977 1,2 62 24 0,4 16 95 104 1,6 45 27 0,4 14 97 1,9 51 36 0,4 17 98 106 NGUYỄN LÂM HÒA 1980 NGUYỄN QUÝ QUYẾT 1981 NGUYỄN VĂN NGA 1970 25 22 0,5 18 97 107 LÊ MINH CHÍ 1964 1,7 51 33 0,5 16 98 108 ĐẶNG ĐÌNH QUÂN 1972 4,3 30 16 0,4 12 90 109 LÊ QUÝ LONG 1981 1,8 58 27 0,4 19 98 110 1,3 57 20 0,4 18 97 5,1 33 12 0,4 13 90 67 32 0,5 14 97 2,1 57 30 0,4 16 97 1,5 38 28 0,4 12 98 45 27 0,4 15 97 116 NGUYỄN CHÍ HÙNG 1982 NGUYỄN THÀNH TRUNG 1981 VŨ DUY KHANG 1980 NGUYỄN THANH TÙNG 1984 PHẠM HOÀNG TUÂN 1983 NGUYỄN TRỌNG NGHĨA 1985 BÙI VĂN THÀNH 1983 14 11 0,4 0,5 95 117 ĐOÀN QUANG HUY 1976 25 15 0,4 97 118 NGUYỄN BÁ HỌC 1984 1,4 28 29 0,4 12 97 119 HÀ DUY TĨNH 1971 1,2 54 40 0,5 18 97 120 VŨ TIẾN ĐÔNG 1986 34 14 0,4 90 121 HOÀNG HIỆP 1980 31 10 0,4 97 122 VÕ NGỌC PHÚ 1990 4,2 42 28 0,4 16 98 123 TRẦN ĐỨC HÙNG 1985 58 27 0,4 18 97 124 LÊ VĂN TRỰC 1985 NGUYỄN CÔNG KHANH 1981 20 11 0,4 95 36 15 0,4 97 105 111 112 113 114 115 125 Phương pháp thang nồng độ không liên tục STT Trước lọc rửa Họ tên bệnh nhân TT MĐ (ml) (x10 /ml) 128 HOÀNG ANH TUẤN 1978 QUÁCH VĂN KHUYÊN 1969 VÕ ANH KIỆT 1985 129 Sau lọc rửa TT MĐ DĐ (%) (ml) (x10 /ml) (%) 68 0,4 95 36 15 0,4 92 27 16 0,4 97 HOÀNG VĂN THỦY 1983 48 17 0,4 95 130 NGUYỄN VĂN NGA 1980 4,1 22 22 0,4 16 95 131 VÕ PHƯỚC SANG 1988 2,5 65 26 0,5 24 98 132 LÊ ANH NGƯỢM 1983 4,9 60 12 0,4 18 95 133 HÀ VIỆT TUYÊN 1982 1,5 49 26 0,4 16 98 134 LÊ DUY THỤC 1976 1,3 66 37 0,5 16 98 135 NGUYỄN KIẾN PHI 1970 1,4 61 30 0,4 16 98 136 NGUYỄN VĂN LONG 1979 2,1 50 28 0,4 21 98 137 TĂNG VĂN UYÊN 1990 1,4 49 32 0,4 18 98 138 TÔ VĂN CƯỜNG 1984 1,5 45 27 0,4 14 98 139 27 18 0,4 95 48 30 0,4 96 141 NGUYỄN ĐỨC TUẤN 1977 NGUYỄN TUẤN THANH 1982 VŨ TẤT TUẤN 1986 2,1 39 29 0,5 20 98 142 LÊ THANH HOÀNG 1986 1,4 48 33 0,5 16 97 143 NGUYỄN HỒNG 1985 48 27 0,4 97 144 TƠ ANH TUẤN 1980 1,7 60 17 0,4 18 98 145 NGUYỄN HỮU TRÍ 1985 2,1 65 33 0,4 22 98 146 1,2 66 30 0,5 12 98 3,4 60 27 0,5 18 98 148 NGUYỄN VĂN TUẤN 1980 NGUYỄN DUY THÀNH 1985 ĐOÀN ĐỨC NGỌC 1978 22 18 0,4 97 149 PHẠM ĐỨC DÂN 1983 1,5 53 36 0,4 15 98 150 TRƯƠNG BÁ THIỆN 1987 28 15 0,4 98 151 ĐOÀN PHƯỚC SANG 1975 3,1 30 27 0,4 16 97 126 127 140 147 DĐ Phương pháp thang nồng độ không liên tục STT Trước lọc rửa Họ tên bệnh nhân TT MĐ (ml) (x10 /ml) NGUYỄN MINH PHẢI 1980 HOÀNG HUỲNH HẢI NAM 1982 BÙI BÁ PHƯỚC 1980 1,3 161 NGUYỄN VĂN BÌNH 1979 NGUYỄN HỒNG QUỐC 1984 NGUYỄN VĂN HIẾU 1979 PHẠM NGUYỄN PHƯỚC ĐỨC 1973 TRẦN VĂN BÁ 1985 TRẦN MINH NGỌC VIỆT 1978 HUỲNH PHONG ANH 1987 162 NGUYỄN VĂN BÁO 1981 163 Sau lọc rửa TT MĐ DĐ (%) (ml) (x10 /ml) (%) 60 40 0,4 18 98 1,5 60 35 0,4 16 98 1,5 39 30 0,4 14 98 30 17 0,4 98 1,8 45 29 0,5 20 98 1,8 57 33 0,4 16 98 47 30 0,4 14 97 62 27 0,4 95 46 33 0,4 95 1,3 38 29 0,4 12 98 1,1 42 28 0,4 14 96 TẠ VĂN ÁNH 1979 39 25 0,4 98 164 VÒNG CHÚNG PHÚC 1986 53 23 0,4 97 165 LÊ THANH BÌNH 1984 49 25 0,4 98 166 LÂM HOÀNG NGHĨA 1989 1,3 69 25 0,4 16 96 167 TRƯƠNG VĂN BẢN 1983 1,4 69 29 0,4 12 98 168 ĐINH VŨ 1982 1,3 51 30 0,4 14 97 169 VÕ MINH TÂM 1976 NGUYỄN THÀNH NHÂN 1974 TRẦN VĂN RAU 1986 LỘ PHÚ MINH QUANG 1975 ĐOÀN HOÀI VŨ 1975 1,3 48 23 0,4 10 98 1,3 40 28 0,4 12 98 1,2 56 18 0,4 96 22 15 0,4 95 51 16 0,4 97 ĐINH BẠT KIM 1992 TRƯƠNG QUỐC DŨNG 1986 BÙI VĂN PHÚC 1991 0,5 54 25 0,4 98 38 19 0,4 97 42 21 0,4 98 152 153 154 155 156 157 158 159 160 170 171 172 173 174 175 176 DĐ Phương pháp thang nồng độ không liên tục STT Trước lọc rửa Họ tên bệnh nhân TT MĐ (ml) (x10 /ml) Sau lọc rửa DĐ TT MĐ DĐ (%) (ml) (x10 /ml) (%) 177 TRẦN THỌ PHI 1969 57 28 0,4 96 178 LÊ QUỐC VIỆT 1986 17 0,4 95 179 29 12 0,4 92 1,3 60 34 0,4 14 98 53 15 0,4 96 182 TRẦN ĐẠI PHƯỚC 1964 TRƯƠNG THÀNH LONG 1970 NGUYỄN QUỐC HƯNG 1970 NGUYỄN VĂN HUY 1981 1,5 53 34 0,4 16 98 183 TRẦN VĂN CHÂU 1977 1,5 46 34 0,4 18 97 184 HUỲNH VĂN KHOA 1982 42 27 0,4 97 185 ĐỖ TẤN LINH 1984 1,4 48 28 0,4 12 98 186 PHẠM XUÂN CƯỜNG 1971 36 26 0,4 96 187 NGUYỄN HẢI CHÂU 1988 41 18 0,4 96 188 ĐỖ HOÀNG ANH 1974 46 20 0,4 97 189 DƯƠNG VĂN HỮU 1982 1,2 34 25 0,4 10 96 190 46 27 0,4 98 1,4 51 33 0,4 14 97 1,4 53 30 0,4 14 98 1,2 41 27 0,4 10 97 1,7 0,5 92 1,3 53 29 0,4 10 97 196 SƠN NGỌC DINH 1979 HUỲNH CÔNG TRUNG 1983 NGUYỄN THẾ ĐĂNG KHOA 1980 CHU HÒA 1984 NGUYỄN TRUNG PHẠM TRƯỜNG 1982 NGUYỄN THANH NĂNG 1982 NGUYỄN MINH TUẤN 1974 62 22 0,4 96 197 NGUYỄN MINH KHÔI 1988 1,3 38 24 0,4 10 97 198 PHAN VĂN BÌNH 1978 59 28 0,4 98 199 BÙI MINH HUY 1982 1,2 46 27 0,4 10 98 200 ĐINH VĂN THÀNH 1982 43 35 0,4 10 98 180 181 191 192 193 194 195 TT: Thể tích; MĐ: Mật độ; DĐ: Di động ... Thị Việt Nga, ThS.KS Lê Thị Thanh Bình, CNXN Điêu Anh Tuấn anh chị phòng xét nghiệm Nam khoa tạo điều kiện hướng dẫn tơi hồn thành tốt đề tài Bạn đồng hành Hứa Thanh Tân - Khoa Công nghệ Sinh... ii Summary iii Mục lục iv Danh sách chữ viết tắt vi Danh sách bảng vii Danh sách hình viii Chương MỞ ĐẦU 1.1... xúc với trứng, điểm tiếp xúc ly giải tạo điều kiện thuận lợi cho đầu tinh trùng xâm nhập vào khoang quanh noãn 10 Khi tinh trùng xâm nhập vào tế bào trứng, tiếp nhận màng bào tương trứng, dẫn đến