Nghiên cứu bào chế thuốc cốm acetylcystein

Mặt khác, đây là dạng bào chế được hay được lựa chọn bởi tính chất dễ sử dụng, mỗi gói thuốc cốm là một đơn vị phân liều, vị ngọt dễ uống phù hợp với cả lứa tuổi trẻ em.. - Thuốc cốm đi

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

1 Viện Công nghệ Dược phẩm Quốc gia

2 Bộ môn Công nghiệp Dược

HÀ NỘI - 2017

LỜI CẢM ƠN

Lời đầu tiên, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành và sâu sắc tới DSCKI

Nguyễn Thị Huyền - người đã nhiệt tình hướng dẫn, giúp đỡ, giải đáp những khó

khăn, thắc mắc mà tôi gặp phải trong suốt thời gian thực hiện khóa luận

Tôi xin chân thành cảm ơn PGS.TS Nguyễn Ngọc Chiến - người đã truyền

lửa tình yêu khoa học, tận tình chỉ bảo và đưa ra những lời khuyên quý báu trong quá trình làm nghiên cứu khoa học để hoàn thành khóa luận tốt nghiệp này

Tôi cũng xin chân thành cảm ơn tới ThS Ngô Quang Trung cùng các anh chị tại Viện Công nghệ Dược phẩm Quốc gia - những người đã luôn dìu dắt, giúp đỡ tôi

từ những ngày đầu làm nghiên cứu khoa học, tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong quá trình làm thực nghiệm và hoàn thành khóa luận

Tôi cũng xin cảm ơn Ban giám hiệu, các phòng ban, các thầy cô giáo và cán

bộ nhân viên trường Đại học Dược Hà Nội - những người đã dạy bảo, truyền dạt những kiến thức quý báu, tình yêu nghề nghiệp trong suốt 5 năm học tập tại đây

Cuối cùng, tôi xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè đã luôn ở bên động viên khích lệ và giúp đỡ tôi trong suốt thời gian qua

Hà Nội, ngày 25 tháng 04 năm 2017 Sinh viên

Trần Thị Hằng

MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT

DANH LỤC CÁC BẢNG TRONG KHÓA LUẬN

DANH MỤC CÁC HÌNH TRONG KHÓA LUẬN

CHƯƠNG I TỔNG QUAN 2

1.1 Đại cương về thuốc cốm 2

1.1.1 Khái niệm 2

1.1.2 Ưu điểm của dạng thuốc cốm so với dạng dung dịch 2

1.1.3 Nhược điểm của dạng thuốc cốm so với dạng dung dịch 2

1.1.4 Các phương pháp bào chế thuốc cốm 2

1.2 Đại cương về acetylcystein 4

1.2.1 Công thức hóa học, tính chất lý hóa của acetylcystein 4

1.2.2 Tác dụng, cơ chế tác dụng, chỉ định, chống chỉ định, liều dùng, tác dụng không mong muốn của acetylcystein 5

1.2.3 Độ ổn định và một số yếu tố ảnh hưởng đến sự ổn định của dược chất acetylcystein 8

1.2.4 Sự thủy phân của acetylcystein và các biện pháp khắc phục sự thủy phân của acetylcystein 9

1.2.5 Một số dạng bào chế của acetylcystein 11

1.2.6 Các phương pháp định lượng acetylcystein 11

1.2.7 Một số công trình nghiên cứu về acetylcystein 12

CHƯƠNG II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13

2.1 Đối tượng nghiên cứu 14

2.2 Nguyên vật liệu và thiết bị 14

2.2.1 Nguyên liệu 14

2.2.2 Thiết bị 14

2.3 Nội dung nghiên cứu 15

2.3.1 Nghiên cứu ảnh hưởng của tá dược chống oxy hóa đến độ ổn định của

acetylcystein 15

2.3.2 Đánh giá một số chỉ tiêu chất lượng thuốc cốm được bào chế 15

2.4 Phương pháp nghiên cứu 15

2.4.1 Khảo sát tương kỵ giữa dược chất và tá dược 15

2.4.2 Phương pháp bào chế thuốc cốm acetylcystein 15

2.4.3 Phương pháp đánh giá chỉ tiêu chất lượng thuốc cốm 16

2.4.4 Phương pháp khảo sát độ ổn định của thuốc cốm acetylcystein 17

2.4.5 Phương pháp đánh giá khả năng hòa tan của thuốc cốm acetylcystein 18

CHƯƠNG III KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 20

3.1 Kết quả thẩm định một số chỉ tiêu của phương pháp định lượng acetylcystein 20

3.1.1 Độ đặc hiệu 20

3.1.2 Độ tuyến tính 23

3.1.3 Độ đúng và lặp lại 23

3.2 Kết quả thử tương kỵ của dược chất và các loại tá dược 25

3.3 Kết quả bào chế thuốc cốm acetylcystein 26

3.3.1 Kết quả ảnh hưởng của cách phối hợp dược chất trong công thức 26

3.3.2 Kết quả ảnh hưởng của chất chống oxy hóa đến sự ổn định của dược chất 28

3.3.3 Kết quả khảo sát tỷ lệ tá dược acid ascorbic 29

3.3.4 Kết quả khảo sát tỷ lệ tá dược acid citric 31

3.3.5 Kết quả khảo sát tỷ lệ tá dược BHT 32

3.3.6 Kết quả khảo sát sự kết hợp của các tá dược chống oxy hóa 34

3.4 Kết quả đánh giá khả năng hòa tan của mẫu bào chế 37

3.5 Xây dựng tiêu chuẩn cơ sở cho thuốc cốm acetylcystein bào chế được 38

CHƯƠNG IV KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 39

TÀI LIỆU THAM KHẢO

DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT

(Dƣợc điển Anh)

(High Performance Liquid Chromatography)

(Dƣợc điển Mỹ)

DANH MỤC BẢNG TRONG KHÓA LUẬN

Bảng 1.1: Một số dạng bào chế và biệt dược của acetylcystein 11

Bảng 2.1: Các nguyên liệu sử dụng 14

Bảng 2.2: Thành phần thuốc cốm acetylcystein 15

Bảng 3.1: Độ đúng và độ lặp lại của phương pháp HPLC 24

Bảng 3.2: Kết quả thử tương kỵ của dược chất acetylcystein và các loại tá dược 25

Bảng 3.3: So sánh cách phối hợp dược chất 26

Bảng 3.4: Kết quả định lượng sau 4 tuần của 2 mẫu thử CT1 và CT2 27

Bảng 3.5: Ảnh hưởng của tá dược chống oxy hóa tới cảm quan và hàm lượng của thuốc cốm 28

Bảng 3.6: Ảnh hưởng của tá dược chống oxy hóa acid ascorbic tới cảm quan và hàm lượng của thuốc cốm 30

Bảng 3.7: Ảnh hưởng của tá dược chống oxy hóa acid citric tới cảm quan và hàm lượng thuốc cốm 31

Bảng 3.8: Ảnh hưởng của tá dược chống oxy hóa BHT tới cảm quan và hàm lượng thuốc cốm 32

Bảng 3.9: Kết quả khảo sát sự phối hợp các loại tá dược chống oxy hóa 34

Bảng 3.10: Kết quả chênh lệch hàm lượng acetylcystein trong các mẫu tại thời điểm ban đầu so với thời điểm lão hóa 4 tuần, 8 tuần, 12 tuần 35

Bảng 3.11: So sánh hàm lượng của mẫu bào chế và mẫu đối chiều tại các thời điểm ban đầu và các thời điểm sau lão hóa 4 tuần, 8 tuần, 12 tuần 38

Bảng 3.12: Độ hòa tan của acetylcystein trong mẫu CT25 sau thời gian hòa tan 5 phút, 10 phút và 15 phút 38

Bảng 3.13: Đề xuất tiêu chuẩn cơ sở cho thuốc cốm acetylcystein bào chế được 39

DANH MỤC CÁC HÌNH TRONG KHÓA LUẬN

Hình 1.1: Sơ đồ quy trình sản xuất thuốc cốm bằng phương pháp xát hạt ướt 3

Hình 1.2: Công thức cấu tạo của acetylcystein 4

Hình1.3: Cơ chế tiêu nhày của acetylcystein 5

Hình 1.4: Cơ chế giải độc paracetamol của acetylcystein 6

Hình 3.1: Sắc ký đồ mẫu trắng 20

Hình 3.2: Sắc ký đồ mẫu placebo 21

Hình 3.3: Sắc ký đồ của mẫu chuẩn 22

Hình 3.4: Sắc ký đồ mẫu thử 21

Hình 3.5: Mối tương quan giữa diện tích pic và nồng độ dung dịch acetylcystein 23

Hình 3.6: Đồ thị biểu hiện hàm lượng acetylcystein của thuốc cốm bào chế so với thuốc cốm đối chiều (Acemuc) tại các thời điểm ban đầu và sau lão hóa 4 tuần, 8 tuần, 12 tuần 36

Hình 3.7: Đồ thị biểu hiện hàm lượng acetylcystein của thuốc cốm bào chế khi hòa tan tại các thời điểm 5 phút, 10 phút, 15 phút 37

ĐẶT VẤN ĐỀ

Thuốc cốm là dạng bào chế xuất hiện phổ biến trên thị trường Mặt khác, đây

là dạng bào chế được hay được lựa chọn bởi tính chất dễ sử dụng, mỗi gói thuốc cốm là một đơn vị phân liều, vị ngọt dễ uống phù hợp với cả lứa tuổi trẻ em Ngoài

ra, thuốc cốm ở dạng rắn nên ít xảy ra tương kỵ hóa học đồng thời cũng bền vững

về mặt hóa học hơn so với chế phẩm dạng lỏng Vì vậy, đối với những dược chất kém bền trong môi trường lỏng thì thuốc cốm là dạng bào chế hay được lựa chọn

Đã từ lâu, acetylcystein (NAC) được biết đến với tác dụng chủ yếu là một loại thuốc tiêu đờm, một triệu chứng bệnh khá phổ biến ở nước ta

NAC là một dược chất tan tốt trong nước, nhưng lại dễ bị thủy phân Do đó,

để đảm bảo độ ổn định của NAC, một dạng bào chế hay được nghĩ tới đó là dạng thuốc rắn (thuốc cốm) Bởi thuốc rắn (thuốc cốm) thường ổn định về mặt hóa học, ít xảy ra tương tác hơn so với dạng thuốc dung dịch Ngoài ra, dạng thuốc cốm có kỹ thuật bào chế khá đơn giản, dễ đóng gói, vận chuyển

Vì vậy, để đảm bảo độ ổn định của NAC là một yếu tố quyết định đến chất lượng cũng như hiệu quả điều trị của dạng thuốc bào chế Chính vì vậy, chúng tôi thực hiện đề tài:

“ Nghiên cứu bào chế thuốc cốm acetylcystein”

Với các mục tiêu sau:

 Xây dựng được công thức thuốc cốm acetylcystein ổn định

 Đề xuất được một số chỉ tiêu chất lượng của thuốc cốm bào chế

CHƯƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Đại cương về thuốc cốm

1.1.1 Khái niệm

Thuốc cốm là dạng thuốc rắn có dạng hạt nhỏ, xốp hay sợi ngắn xốp, thường dùng để uống với một ít nước hay một chất lỏng thích hợp, hoặc pha thành dung dịch, hỗn dịch hay siro Thuốc cốm chứa một hoặc nhiều dược chất, ngoài ra còn có thêm tá dược như tá dược độn, tá dược dính, tá dược điều hương, điều vị, tá dược màu [1]

1.1.2 Ưu điểm của dạng thuốc cốm so với dạng dung dịch

- Kỹ thuật bào chế đơn giản, không đòi hỏi trang thiết bị phức tạp, dễ đóng gói, vận chuyển

- Thuốc cốm đi từ dược chất rắn nên ổn định về mặt hóa học, vì vậy việc kiểm soát các thông số liên quan đến những biến đổi hóa học của dược chất đơn giản hơn so với dạng thuốc dung dịch

- Thuốc cốm ở dạng rắn nên ít xảy ra tương tác, tương kỵ hơn so với dạng thuốc dung dịch

- Mỗi gói thuốc là một đơn vị phân liều nên dễ sử dụng

1.1.3 Nhược điểm của dạng thuốc cốm so với dạng dung dịch

- Diện tích bề mặt tiếp xúc lớn nên dễ bị hút ẩm, oxy hóa giảm hàm lượng

1.1.4 Các phương pháp bào chế thuốc cốm

Có 2 phương pháp tạo cốm: phương pháp xát hạt qua rây, phương pháp phun sấy [1], [4]

1.1.4.1 Phương pháp xát hạt qua rây:

Đây là phương pháp đơn giản, dễ thực hiện, trải qua các bước:

Hình 1.1: Sơ đồ quy trình sản xuất thuốc cốm bằng phương pháp xát hạt ướt

- Trộn bột kép: Các nguyên liệu ban đầu được cân, xay, nghiền, rây được trộn khô theo nguyên tắc đồng lượng để đồng nhất hỗn hợp [1], [4]

- Tạo khối ẩm, xát hạt: Trộn bột kép với tá dược dính lỏng để liên kết các tiểu phân bột Tỷ lệ, loại tá dược dính, loại thiết bị, thời gian nhào trộn cần được xác định cho từng công thức cụ thể Sau khi trộn bột ẩm, xát hạt qua cỡ rây thích hợp (1,0-2,0 mm) [1], [4]

hoặc thấp hơn tùy từng loại dược chất Sửa hạt qua cỡ rây quy định để loại bỏ bột mịn và vón cục làm cho kích thước hạt đồng nhất [1]

1.1.4.2 Phương pháp phun sấy:

Phương pháp này thường dùng để bào chế cốm tan, cốm thuốc từ dịch chiết dược liệu

Nguyên lý: Phun một dung dịch hoặc hỗn dịch các nguyên liệu dưới dạng sương

mù hoặc giọt nhỏ để bốc hơi trong một buồng không khí nóng, các giọt nhỏ được sấy khô ngay lập tức thành các tiểu phân hình cầu Kích thước tiểu phân phụ thuộc vào kích thước vòi phun, tốc độ phun và nồng độ dung dịch, hỗn dịch Các tiểu phân này sẽ được tách khỏi hỗn hợp bằng cách thổi qua các cyclon [4]

- Ưu điểm: cốm tạo thành có hình gần giống hình cầu, có khả năng chảy và tính chịu nén cao

- Nhược điểm: không áp dụng được với dược chất kém bền với nhiệt, và chi phí sản xuất cao

1.2 Đại cương về acetylcystein

1.2.1 Công thức hóa học, tính chất lý hóa của acetylcystein

- Công thức cấu tạo:

Hình 1.2: Công thức cấu tạo của acetylcystein

- Tên khoa học: Acid (R) - 2 - acetamido - 3 - sulfanylpropanoic [3]

- NAC tồn tại dưới dạng bột kết tinh màu trắng hoặc tinh thể không màu, tan nhiều trong nước và alcol, gần như không tan trong methylen chlorid [3]

- Tính chất hóa học:

các tác nhân như: ion kim loại, oxy [15]

1.2.2 Tác dụng, cơ chế tác dụng, chỉ định, chống chỉ định, liều dùng, tác dụng không mong muốn của acetylcystein

1.2.2.1 Tác dụng, cơ chế tác dụng

a, Tác dụng

- Thuốc tiêu chất nhày [6], [10]

- Thuốc giải độc quá liều paracetamol [6], [16]

- NAC cũng được dùng tại chỗ để điều trị bệnh không có nước mắt hay còn được gọi là chứng khô mắt [6]

- Ngoài ra, NAC còn có tác dụng với Aspergillus và Fusarium spp Trên invitro, NAC được sử dụng kết hợp với Gliotoxin trong điều trị nấm Candida sp [8], [25]

- Đến nay, NAC đã được phát hiện thêm một vài tác dụng mới đáng lưu ý như: hỗ trợ điều trị HIV – AIDS, cai nghiện, điều trị nấm, chống lão hóa, chống ung thư,

vẫn tiếp tục đang được nghiên cứu [12], [13], [18]

b, Cơ chế tác dụng

- Cơ chế tiêu nhày: Thuốc cắt đứt các cầu nối disulfur của các glycoprotein, làm giảm độ quánh của đờm trong đường hô hấp, từ đó tạo thuận lợi để tống đờm ra ngoài bằng động tác ho, dẫn lưu tư thế hoặc phương pháp cơ học [6], [17]

Hình 1.3: Cơ chế tiêu nhày của NAC

Do đó, NAC được chỉ định với vai trò thuốc tiêu nhày trong một số bệnh như xơ gan tuyến tụy, bệnh lý hô hấp có đờm nhày, quánh (viêm phế quản cấp, mãn tính)

- Cơ chế giải độc quá liều paracetamol: Tác dụng làm thuốc giải độc dùng bảo vệ và chống độc cho gan khi sử dụng quá liều paracetamol thông qua việc duy trì hoặc

khôi phục nồng độ glutathion của gan Glutathion là chất cần thiết để làm bất hoạt chất chuyển hóa trung gian của paracetamol trong đó có N–acetyl–p- benzoquinonimin (NAPQI) một chất rất độc với gan Glutathion giúp chuyển hóa NAPQI thành chất không độc và đào thải ra ngoài Khi sử dụng quá liều paracetamol (6-10 g/ ngày đối với người bình thường và 3-4 g/ ngày đối với bệnh nhân có bệnh lý trên gan), một lượng rất lớn NAPQI được tạo ra vì con đường chuyển hóa chính (liên hợp với glutathion và sulfat) trở nên bão hòa Trong trường hợp đó, nếu sử dụng NAC, NAC sẽ chuyển hóa thành L – Cystein, kích thích gan tổng hợp glutathion, từ đó làm tăng sự liên hợp do đó làm tăng thải trừ NAPQI Do

đó, với việc sử dụng NAC có thể bảo vệ được gan nếu bắt đầu điều trị trong vòng

12 giờ sau khi quá liều paracetamol [8],[9],[10]

Hình 1.4: Cơ chế giải độc paracetamol của NAC

1.2.2.2 Chỉ định, chống chỉ định:

Chỉ định [6]:

- Được dùng làm thuốc tiêu nhày trong các trường hợp xơ gan tuyến tụy, bệnh lý hô hấp có đờm nhày quánh như trong viêm phế quản cấp và mạn, làm sạch thường quy trong mở khí quản

- Điều trị chứng khô mắt (viêm kết mạc khô, hội chứng Sjogren)

- Được dùng làm thuốc giải độc paracetamol trong các trường hợp cụ thể sau:

+ Bệnh nhân dùng đơn thuần paracetamol 150 mg/kg (hoặc 7,5 g ở người lớn) và không thể đo được nồng độ paracetamol trong vòng 8 giờ sau khi uống

+ Bệnh nhân không nhớ thời điểm uống và nồng độ paracetamol > 10 mcg/ml + Bệnh nhân có triệu chứng lâm sàng tổn thương tế bào gan (tăng nhẹ AST, ACT, suy gan cấp nặng), tiền sử uống quá mức paracetamol

+ Bệnh nhân dùng liều lặp lại quá mức, có những yếu tố nguy cơ tổn thương gan do paracetamol và nồng độ paracetamol trong huyết thanh > 10 mcg/ml

Chống chỉ định [6], [24]:

- Người có tiền sử hen

- Quá mẫn với acetylcystein

1.2.2.3 Liều dùng

Làm tiêu chất nhày:

- Phun mù 3-5 ml dung dịch 20% hoặc 6-10 ml dung dịch 10% qua một mặt nạ hoặc đầu vòi phun, 3-4 lần/ngày Có thể phun mù 1-10 ml dung dịch 20% hoặc 2-20 ml dung dịch 10% cách 2-6 giờ/lần [6]

- Hoặc nhỏ trực tiếp vào khí quản từ 1-2 ml dung dịch 10-20% mỗi giờ 1 lần [6]

- Hoặc uống với liều 200 mg, 3 lần/ngày, dưới dạng hòa tan trong nước Trẻ em dưới 2 tuổi uống 200 mg/ngày, ngày chia 2 lần Trẻ em từ 2-6 tuổi uống 200 mg, 2 lần/ ngày [6], [17]

Điều trị khô mắt có tiết chất nhày bất thường:

- Thường dùng dạng dung dịch 5% cùng với hypromelose, dùng tại chỗ, nhỏ 1-2 giọt, 3-4 lần/ngày [6]

Giải độc quá liều paracetamol

- Tiêm truyền tĩnh mạch: liều đầu tiên 150 mg/kg thể trọng, dưới dạng dung dịch 20% trong 200 ml glucose 5%, tiêm tĩnh mạch trong 15 phút Tiếp theo, truyền nhỏ giọt tĩnh mạch 50 mg/kg trong 500 ml glucose, trong 4 giờ tiếp theo Lưu ý, đối với trẻ em phải thay đổi thể tích dịch truyền tĩnh mạch

- Đường uống: liều đầu tiên là 140 mg/kg thể trọng, dùng trong dung dịch 5%, tiếp theo cách 4 giờ uống 1 lần với liều 70 mg/kg thể trọng và uống tất cả thêm 17 lần [6], [22]

1.2.2.4 Tác dụng không mong muốn

- Tác dụng không mong muốn thường gặp: buồn nôn

- Ít gặp: buồn ngủ, ù tai, nhức đầu, mề đay, phát ban

- Hiếm gặp: Co thắt phế quản kèm theo phản ứng phản vệ toàn thân (sốt, rét run, ) [6], [24]

1.2.3 Độ ổn định và một số yếu tố ảnh hưởng đến sự ổn định của dược chất acetylcystein

1.2.3.1 Độ ổn định

Độ ổn định của thuốc là khả năng của thuốc (nguyên liệu hoặc thành phẩm) bảo quản trong điều kiện xác định giữ được những đặc tính vốn có về vật lý, hóa học, vi sinh, tác dụng dược lý và độc tính trong thời gian quy định của tiêu chuẩn chất lượng thuốc [1]

1.2.3.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến độ ổn định của dược chất acetylcystein

a, Bản chất của dược chất

- Độ ổn định của chế phẩm trước hết phụ thuộc vào bản chất của dược chất Dược chất có nhóm chức ester, amid, vòng lacton, vòng lactam, vòng amid, dễ bị thủy phân Dược chất có nhóm chức phenol, catechol, nhóm chức thiol, aldehyd, dễ bị oxy hóa Nhiều dược chất còn có thể bị chuyển hóa đồng phân quang học hoặc đồng phân hình học, sự chuyển hóa như vậy ảnh hưởng đến sự hấp thu, phân bố, chuyển hóa, thải trừ và còn có thể làm thay đổi tác dụng dược lý của dược chất [5], [7]

- Công thức phân tử của acetylcystein có nhóm –SH (thiol) Trong không khí, gốc thiol bị oxy hóa bởi oxy tạo thành dialkyl disulfid [2]:

2 R-SH + ½ O2 → R – S – S – R + H2O (dialkyl disulfid)

- Quá trình oxy hóa diễn ra như sau [28], [29]:

- Dựa vào phương trình Arrhenius, bằng thực nghiệm lão hóa cấp tốc người ta có thể tham khảo để dự đoán chính xác hơn về tuổi thọ của thuốc trên cơ sở xác định mức độ suy giảm hàm lượng dược chất trong quá trình vận chuyển và bảo quản [5]

c, Độ ẩm

Độ ẩm không khí cao cũng như hàm ẩm của hạt sau khi sấy chưa đạt sẽ tạo điều kiện cho nấm mốc phát triển, hơn nữa độ ẩm cao còn thúc đẩy nhanh sự phân hủy, làm giảm hàm lượng, làm thay đổi tính chất lý học của dược chất [5]

1.2.4 Sự thủy phân của acetylcystein và các biện pháp khắc phục sự thủy phân của acetylcystein

1.2.4.1 Sự thủy phân của acetylcystein

- Trong môi trường acid (HCl), NAC thủy phân tạo thành muối cystein và acid acetic [7], [28], [29]:

- Trong môi trường base, NAC thủy phân tạo thành muối của cystein và acetat [7], [28], [29]:

- Sự có mặt của ion kim loại có trong dung dịch cũng xúc tác quá trình oxy hóa của NAC (ASH) Quá trình oxy hóa xảy ra như sau [7]:

1.2.4.2 Các biện pháp khắc phục sự thủy phân cho acetylcystein

- Hạn chế tiếp xúc giữa NAC và không khí: sử dụng bao bì kín, tránh ẩm, tránh thấm khí

- Dạng bào chế được lựa chọn là dạng rắn NAC rất dễ bị thủy phân trong môi trường dung dịch Vì vậy, để ổn định NAC, dạng bào chế rắn có nhiều ưu điểm hơn

so với dạng bào chế dung dịch vì hạn chế phản ứng thủy phân, hạn chế sự ảnh hưởng của pH dung dịch tới tốc độ thủy phân dược chất, hạn chế được tiếp xúc của ion kim loại từ bao bì với NAC Tốc độ oxy hóa của NAC phụ thuộc rất nhiều vào

pH của dung dịch, pH aicd hoặc base NAC đều bị thủy phân với tốc độ rất nhanh [28], [29]

- Sử dụng các chất chống oxy hóa: Chất chống oxy hóa có vai trò là một chất dễ bị oxy hóa hơn, do đó bảo vệ được dược chất, giúp dược chất ổn định hơn Điều đó thể

1.2.5 Một số dạng bào chế của acetylcystein

Các dạng bào chế thường gặp là: thuốc bột, thuốc cốm, viên nén sủi bọt, viên nang, dung dịch xông hít, thuốc tiêm, thuốc nhỏ mắt [6]

Bảng 1.1: Một số dạng bào chế và biệt dược của acetylcystein

Acetylcystein 200 mg

Mekophar N-Acetyl-L-Cystein

Mucomyst – 10 Inhalation

Acemuc 200 mg

Vietnam

1.2.6 Các phương pháp định lượng acetylcystein

1.2.6.1 Phương pháp đo iod (BP 2013)

Tiến hành: Cho 20 ml dung dịch acid acetic băng vào một thể tích dung dịch thuốc

chứa khoảng 0,4 g NAC và chuẩn độ bằng dung dịch iod 0,05 M cho tới khi dung dịch xuất hiện màu vàng nhạt thì kết thúc

1,0 ml dung dịch iod 0,05 M tương đương với 16,32 mg NAC

1.2.6.2 Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC)

Tiến hành: Theo nghiên cứu của tác giả Shaikh Sana và cộng sự tiến hành định

lượng NAC trong dạng Syrup uống như sau [23]:

0,05 bằng dung dịch acid phosphoric) Tỷ lệ dung dịch đệm : Acetolnitril =

80 : 20

* Cách xác định tạp phân hủy của NAC:

- Dựa vào sắc ký đồ của NAC, so sánh giữa hình ảnh của mẫu ban đầu và mẫu sau lão hóa có thể xác định được tạp phân hủy cũng như đánh giá mức độ phân hủy của dược chất có trong mỗi mẫu thuốc cốm

- Thời gian lưu của pic dược chất khoảng 4,3 phút

- Thời gian lưu của pic tạp khoảng 5 phút

1.2.7 Một số công trình nghiên cứu về acetylcystein

Trong bằng sáng chế WO 2010090612 A1, Bilgic Mahmut đã đề cập đến chế phẩm kết hợp của NAC và Vitamin C Theo Bilgic Mahmut, sự kết hợp của NAC với vai trò là một chất làm giảm nhày và Vitamin C như một chất chống oxy hóa được kết hợp trong một dạng đơn liều, góp phần làm gia tăng hiệu quả điều trị Ngoài ra trong dạng bào chế trên còn có sự phối hợp của một số loại tá dược khác như tá dược làm ngọt, tá dược tạo hương, chất kết dính như PVP, PEG, các chất ổn định được lựa chọn như EDTA disodium, acid citric, hoặc sự kết hợp giữa chúng [19]

Theo nghiên cứu của Leo Pavliv và cộng sự được nêu ra trong bằng sáng chế

US 20070049640A1, acetylcystein là một chất không ổn định, dễ bị oxy hóa, bị thủy phân trong điều kiện dung dịch và tiếp xúc với không khí Khi đó thường giải

quyết vấn đề độ ổn định bằng cách lựa chọn sử dụng chất tạo hệ chelat, giúp cô lập các ion kim loại, tăng sự ổn định của acetylcystein Tuy nhiên, EDTA được sử dụng trong công thức với vai trò là tạo phức chelat lại có thể gây ra tác dụng không mong muốn trên người và động vật Một trong những tác dụng không mong muốn này bao gồm giả nồng độ calci huyết có thể dẫn đến tử vong, hạ calci máu, hạ huyết áp Ngoài ra, EDTA cũng gây ra độc tính trên sự phát triển sinh sản ở động vật thí nghiệm EDTA cũng có liên quan đến sự co thắt phế quản khi được dùng làm chất bảo quản trong dung dịch xịt Vì những tác dụng không mong muốn trên của EDTA, nên thận trọng khi dùng EDTA trong công thức bào chế đối với những bệnh nhân suy thận, nhiễm độc gan, lao phổi và chức năng tim mạch suy yếu [20]

Ngoài ra, acetylcystein còn được bào chế dưới dạng chế phẩm cốm sủi bọt Federico Stroppolo và cộng sự đã nghiên cứu bào chế công thức cốm sủi bọt acetylcystein Trong công thức sủi bọt chứa ít nhất 50% tỷ lệ khối lượng/khối lượng của NAC, ít nhất 20% tỷ lệ khối lượng/khối lượng của muối carbonat hoặc bicarbonat và một số tá dược làm ngọt, tạo hương, và tá dược độn Đối với các tá dược tạo bọt, natri bicarbonat hay được lựa chọn sử dụng trong công thức bào chế các chế phẩm có dạng sủi bọt [26]

Acetylcystein còn được sử dụng rộng rãi ở dạng thuốc phun mù A.Rieutord

và cộng sự đã thực hiện các thí nghiệm để đánh giá sự tương hợp của NAC với netilmicin và betamethason trong dung dịch NAC được trộn với netilmicin, betamethason và để 1 giờ ở nhiệt độ phòng, kết quả cho thấy không có sự thay đổi

pH của hỗn hợp và không có dấu hiệu giảm nồng độ 1 trong 3 dược chất Như vậy, hỗn hợp ổn định trong thời gian 1 giờ, đủ để cho y tá hoặc bệnh nhân thực hiện các thao tác chuẩn bị và sử dụng thuốc Đồng thời, kết quả này có thể hướng tới bào chế thuốc phun mù kết hợp 3 thành phần: NAC, netilmicin, betamethason [21]

CHƯƠNG II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu

Thuốc cốm acetylcystein

Thuốc cốm đối chiếu: Acemuc 200 mg - Sanofi Synthelabo Vietnam

2.2 Nguyên vật liệu và thiết bị

2.2.1 Nguyên liệu

Bảng 2.1: Các nguyên liệu sử dụng

2.2.2 Thiết bị

 Cân kỹ thuật Sartorius TE3102S (Đức)

 Cân phân tích Sartorius TE3102S

 Cân đo hàm ẩm MB23 (Ohaus Mỹ)

 Tủ sấy tĩnh DAIHAN (Hàn Quốc)

 Tủ lão hóa cấp tốc CONTHERM (New Zealand)

 Máy đo pH Sartorius Mettle Toledo (Mỹ)

 Máy thử độ hòa tan Pharmatest (Đức)

 Máy sắc ký lỏng hiệu năng cao AGILENT 1260 (Agilent Technology – Mỹ)

2.3 Nội dung nghiên cứu

2.3.1 Nghiên cứu ảnh hưởng của tá dược chống oxy hóa đến độ ổn định của acetylcystein

2.3.2 Đánh giá một số chỉ tiêu chất lượng thuốc cốm được bào chế

 Cảm quan: màu sắc, mùi

 Hàm ẩm

 Định lượng hàm lượng acteylcystein

2.4 Phương pháp nghiên cứu

2.4.1 Khảo sát tương kỵ giữa dược chất và tá dược

Trộn đều NAC và mỗi loại tá dược đem khảo sát theo tỷ lệ dược chất/tá dược

= 1/1,5 (với tá dược độn) hoặc 1/0,25 (với các loại tá dược khác) Hỗn hợp dược chất và tá dược sau khi trộn đều theo tỷ lệ thích hợp, được cho vào ống nghiệm thủy tinh trong suốt, trung tính, sạch, khô, nút kín Các ống nghiệm trên được bảo quản ở

tuần Sau khoảng thời gian trên, quan sát khối bột, định lượng hàm lượng NAC ở các mẫu và so sánh với mẫu đối chiếu chỉ chứa NAC trong cùng điều kiện

2.4.2 Phương pháp bào chế thuốc cốm acetylcystein

Bào chế thuốc cốm acetylcystein bằng phương pháp xát hạt ướt cho hạt trơ sau đó phối hợp với dược chất

- Quy mô: mỗi mẫu tiến hành với 5 đơn vị phân liều tương ứng với 15 g hạt cốm

- Thuốc cốm acetylcystein gồm các thành phần như bảng 2.2

Bảng 2.2: Thành phần thuốc cốm acetylcystein

Acid ctric, BHT

Thay đổi

Phương pháp bào chế:

- Bước 1: Rây, cân nguyên liệu

- Bước 2: Trộn các nguyên liệu bằng chày cối theo nguyên tắc đồng lượng (trừ dược chất và acid ascorbic)

- Bước 3: Thêm từ từ ethanol tuyệt đối nhào ẩm vừa đủ

- Bước 4: Xát hạt qua rây 1000

- Bước 6: Sửa hạt qua rây 1000

- Bước 7: Trộn hạt với dược chất và tá dược acid ascorbic (nếu có)

Bảo quản trong túi PE kín, đặt trong lọ thủy tinh tối màu để thử trong điều kiện lão hóa cấp tốc

Các chỉ tiêu đánh giá cho cốm:

 Hình thức

 Hàm ẩm

 Hàm lượng

2.4.3 Phương pháp đánh giá chỉ tiêu chất lượng thuốc cốm

2.4.3.1 Hình thức: Quan sát bằng mắt thường (trạng thái của hạt cốm, mùi, màu

sắc)

2.4.3.2 Độ ẩm: Xác định hàm ẩm bằng phương pháp mất khối lượng do làm khô,

2.4.3.3 Định lượng hàm lượng dược chất trong thuốc cốm

+ Dung môi pha mẫu: Hòa tan 1,36 g kali hydrophosphat trong 1000 ml nước, điều chỉnh pH tới 3,0 bằng acid phosphoric đậm đặc

+ Dung dịch chuẩn: Cân chính xác khoảng 0,1 g acetylcystein chuẩn vào bình định mức 100 ml, hòa tan và pha loãng tới vạch bằng dung môi pha mẫu, lắc, lọc qua màng 0,45 µm Bỏ 20 ml dịch lọc đầu Hút 10 ml dịch lọc vào bình định mức 100

ml, pha loãng tới vạch bằng dung môi pha mẫu, lắc đều

+ Hàm lượng dược chất trong mẫu thử được tính bằng cách so sánh với mẫu chuẩn theo công thức:

2.4.4 Phương pháp khảo sát độ ổn định của thuốc cốm acetylcystein

- Để khảo sát sơ bộ về độ ổn định của thuốc cốm NAC, các mẫu thuốc được đặt trong điều kiện lão hóa cấp tốc tại nhiệt độ : 40 ± 2ºC và độ ẩm: 75 ± 5%

- Bao bì trên thị trường là vật liệu bao gồm 3 lớp:

+ Bao bì tiếp xúc trực tiếp với thuốc cốm: vật liệu foil thường để dùng đóng gói những sản phẩm nhạy cảm với oxy và độ ẩm