Tiếp tục nghiên cứu bào chế viên nén hai lớp amoxicilin và acid clavulanic giải phóng kéo dài

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI TRẦN THỊ THÚY MÃ SINH VIÊN: 1101518 TIẾP TỤC NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NÉN HAI LỚP AMOXICILIN VÀ ACID CLAVULANIC GIẢI PHÓNG KÉO DÀI KHÓA LUẬN TỐT NGHI

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

TRẦN THỊ THÚY

MÃ SINH VIÊN: 1101518

TIẾP TỤC NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NÉN HAI LỚP AMOXICILIN VÀ ACID CLAVULANIC GIẢI PHÓNG

KÉO DÀI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ

HÀ NỘI – 2016

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

TRẦN THỊ THÚY

MÃ SINH VIÊN: 1101518

TIẾP TỤC NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NÉN HAI LỚP AMOXICILIN VÀ ACID CLAVULANIC GIẢI PHÓNG

KÉO DÀI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ

Người hướng dẫn:

ThS Lê Đình Quang Nơi thực hiện:

1 Viện Công nghệ dược phẩm Quốc Gia

2 Bộ môn Hóa Phân Tích và Độc Chất

3 Bộ môn Công nghiệp dược

4 Bộ môn Hóa Đại cương - Vô cơ

HÀ NỘI – 2016

Vô cơ, Bộ môn Hóa Phân tích và Độc Chất đã giúp đỡ và tạo điều kiện tốt nhất cho

em trong quá trình làm thực nghiệm tại bộ môn

Xin gửi lời cảm ơn chân thành tới: Ban giám hiệu Nhà Trường, cùng toàn thể các thầy cô và cán bộ các phòng ban Trường Đại học Dược Hà Nội đã dạy dỗ, chỉ bảo, giúp đỡ em trong suốt thời gian học tập tại trường

Cuối cùng, em cũng xin cảm ơn tới gia đình, bạn bè những người đã luôn luôn ở bên khuyến khích, động viên để em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp này

Em xin chân thành cảm ơn!

Hà Nội, ngày 12 tháng 5 năm 2016

Sinh viên

Trần Thị Thúy

MỤC LỤC

DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT

DANH MỤC CÁC BẢNG

DANH MỤC CÁC HÌNH, ĐỒ THỊ

ĐẶT VẤN ĐỀ 1

CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 2

1.1 Đại cương về amoxicilin 2

1.1.1 Công thức hóa học 2

1.1.2 Tính chất lý hóa của amoxicilin 2

1.1.3 Dược động học 3

1.1.4 Cơ chế tác dụng 3

1.1.5 Phổ tác dụng 4

1.1.6 Chỉ định 4

1.1.7 Chống chỉ định 4

1.1.8 Tác dụng không mong muốn 4

1.1.9 Liều dùng, cách dùng 5

1.1.10 Thận trọng 5

1.1.11 Tương tác thuốc 5

1.2 Kali clavulanat 5

1.2.1 Công thức hóa học 5

1.2.2 Tính chất lý hóa 5

1.2.3 Dược động học 6

1.2.4 Cơ chế tác dụng 6

1.3 Độ ổn định của amoxicilin và kali clavulanat 6

1.4 Thuốc giải phóng kéo dài 7

1.4.1 Khái niệm thuốc tác dụng kéo dài 7

1.4.2 Ưu điểm, nhược điểm 7

1.4.3 Phân loại các hệ tác dụng kéo dài 8

1.4.4 Phương pháp bào chế 9

1.4.5 Một số nghiên cứu liên quan đến amoxicilin giải phóng kéo dài 9

1.5 Một vài chế phẩm chứa amoxicilin và acid clavulanic trong nước 14

CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15

2.1 Nguyên liệu, thiết bị 15

2.1.1 Nguyên liệu 15

2.1.2 Thiết bị nghiên cứu 16

2.2 Nội dung 16

2.3 Đối tượng nghiên cứu 16

2.4 Phương pháp nghiên cứu 16

2.4.1 Phương pháp bào chế 16

2.4.2 Phương pháp đánh giá chất lượng viên hai lớp chứa amoxicilin 18

CHƯƠNG III THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 23

3.1 Thẩm định phương pháp định lượng amoxicilin bằng phương pháp đo quang 23

3.1.1 Xác định bước sóng hấp thụ cực đại 23

3.1.2 Độ tuyến tính 23

3.1.3 Độ đúng, độ lặp lại 24

3.2 Khảo sát giải phóng hoạt chất từ viên đối chiếu Augmentin SR 1000mg/62,5mg 25

3.3 Khảo sát ảnh hưởng của công thức bào chế đến GP dược chất 27

3.3.1 Khảo sát ảnh hưởng của tỷ lệ magnesi stearat lên giải phóng dược chất 27

3.3.2 Khảo sát ảnh hưởng của tỷ lệ HPMC K100LV và HPMC K4M 30

3.3.3 Khảo sát ảnh hưởng của acid citric lên GP amoxicilin 32

3.3.4 Khảo sát ảnh hưởng của tỷ lệ Avicel PH 102 rã trong, rã ngoài 34

3.4 Khảo sát ảnh hưởng của một số yếu tố quy trình đến % GP dược chất…… 36

3.4.1 Khảo sát ảnh hưởng của kích thước lưới rây 36

3.5 Khảo sát %GP dược chất từ viên nén 2 lớp amoxicilin và kali clavulanat 38

TÀI LIỆU THAM KHẢO

PMAA Acid polymethacrylic

DANH MỤC CÁC BẢNG

Bảng 1.1: Một số chế phẩm chứa amoxicilin và acid clavulanic trên thị trường VN14Bảng 2.1: Các nguyên liệu, tá dược sử dụng trong bào chế 15Bảng 2.2: Các nguyên liệu, tá dược được dùng trong kiểm nghiệm 15Bảng 3.1: Nồng độ amoxicilin và mật độ quang tại bước sóng 272nm 23

Bảng 3.4: % GP của amoxicilin và kali clavulanat từ viên đối chiếu 26Bảng 3.5: CT khảo sát ảnh hưởng của tỷ lệ magnesi stearat 28

Bảng 3.15: CT M8 viên nén amoxicilin và kali clavulanat 38Bảng 3.16: % GP amoxicilin và % GP kali clavulanat trong mẫu 39

DANH MỤC HÌNH, ĐỒ THỊ

Hình 2.1: Sơ đồ quy trình bào chế lớp GPKD 17Hình 3.1: Phổ hấp thụ UV-VIS của dung dịch amoxicilin 23Hình 3.2: Mối tương quan giữa mật độ quang và nồng độ 24Hình 3.3: Đồ thị % GP amoxicilin theo thời gian của VĐC 26Hình 3.4: Đồ thị % GP kali clavulanat theo thời gian của VĐC 27Hình 3.5: Đồ thị % GP amoxicilin từ CT M1, M2, M3 29Hình 3.6: Đồ thi % GP amoxicilin từ CT M2, M4, M5, M6 31Hình 3.7: Đồ thi % GP amoxicilin từ CT M6, M7, M8, M9 33Hình 3.8: Đồ thị % GP amoxicilin từ CT M8, M10, M11 35

ĐẶT VẤN ĐỀ

Việc sử dụng rộng rãi, lạm dụng kháng sinh làm cho các vi khuẩn kháng thuốc, ảnh hưởng đến hiệu quả điều trị và gây tốn kém cho bệnh nhân Hiện nay, thực trạng kháng kháng sinh đã mang tính toàn cầu và đặc biệt nổi trội ở các nước đang phát triển như Việt Nam

Amoxicilin là kháng sinh phổ rộng, tác dụng trên cả 2 loại vi khuẩn gram âm

và gram dương nhưng không bền với -lactamase Để amoxicilin bền với lactamase, đồng thời mở rộng phổ kháng khuẩn một cách hiệu quả đối với nhiều vi khuẩn thông thường đã kháng lại amoxicilin, người ta thường phối hợp amoxicilin với các chất ức chế -lactamase là acid clavulanic [4], [10]

Amoxicilin thuộc nhóm -lactama, là kháng sinh phụ thuộc thời gian, không

có tác dụng hậu kháng sinh, thời gian bán thải ngắn (1-1,5 giờ) [4] Vì vậy, để đảm bảo điều trị cần duy trì nồng độ thuốc trong máu trên nồng độ ức chế tối thiểu Đối với các dạng bào chế quy ước cần tăng số lần sử dụng trong ngày [12] Điều này có thể làm cho bệnh nhân khó tuân thủ điều trị, nồng độ trong huyết tương không đều dẫn đến tình trạng kháng thuốc Để khác phục những nhược điểm trên amoxicilin được bào chế dưới dạng thuốc giải phóng kéo dài [1]

Hiện nay, chế phẩm thuốc TDKD amoxicilin/acid clavulanic do các công ty trong nước sản xuất chưa thấy xuất hiện trên thị trường

Các nghiên cứu bào chế trên quy mô phòng thí nghiệm trước đây do không

có thiết bị nên được tiến hành thủ công trên máy dập viên một lớp [6] vì vậy khó khăn trong việc tiến hành bào chế viên cũng như kiểm soát các thông số quy trình

Với ý nghĩa trên, chúng tôi thực hiện đề tài: “Tiếp tục nghiên cứu bào chế

viên nén hai lớp chứa amoxicilin và acid clavulanic giải phóng kéo dài” với mục

tiêu: Xây dựng công thức bào chế viên nén hai lớp chứa amoxicilin và kali clavulanat GPKD trên máy dập viên hai lớp có đồ thị GP tương đương với viên đối chiếu

CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN

1.1 Đại cương về amoxicilin

Amoxicilin là một kháng sinh bán tổng hợp, có phổ rộng, thuộc nhóm aminobenzylpenicilin

Amoxicilin ở dạng bột mịn có đặc tính trơn chảy kém, bị tác động bởi ẩm và nhiệt nên trên thị trường nguyên liệu amoxicilin thường ở dạng hạt compact [3]

1.1.2 Tính chất lý hóa của amoxicilin

1.1.2.1 Tính chất vật lý

Amoxicilin trihydrat

- Dạng bột tinh thể màu trắng hoặc gần trắng, vị đắng

- Khó tan trong nước (1/370), alcol (1/2000), thực tế không tan trong ether, carbon tetrachlorid, chloroform, dầu, tan trong các dung dịch acid hoặc hydroxyd kiềm loãng [3]

- Điểm chảy: 194°C [3] [28]

Natri amoxicilin

- Dạng bột màu trắng hoặc gần như trắng

- Tan tốt trong nước, ít tan trong cồn ethanol tuyệt đối và aceton [13]

1.1.2.2 Tính chất hóa học

- Tính chất của amino acid

- Tan được trong dung dịch acid hay kiềm loãng

- Phản ứng với thuốc thử Ninhydrin (hoặc thuốc thử Fehling)

- Bị phân hủy nhanh ở độ ẩm cao và nhiệt độ trên 37°C [3]

- Amoxicilin có ba giá trị pKa: 2,63; 7,55 và 9,64 ở 23°C[19]

- Dung dịch amoxicilin trihydrat 2mg/mL trong nước có pH: 3,5 - 5,5 dung dịch natri amoxicilin 10% trong nước có pH: 8- 10 [13]

- Hoạt hóa enzyme tự phân giải murein hydroxylase làm tăng phân hủy vách

tế bào vi khuẩn Kết quả là vi khuẩn bị tiêu diệt [2]

E coli, Proteus mirabilis, Salmonella, Shigella spp

- Bị bất hoạt bởi β-lactamase, tính đến năm 2000, các chủng đã kháng amoxicilin: Pseudomonas, một số vi khuẩn đường ruột (E coli, Salmonella typhi, Shigella, Klebsiella, Enterobacter, Proteus…)[4], [26], [28]

1.1.6 Chỉ định

- Nhiễm khuẩn đường hô hấp trên Nhiễm khuẩn đường hô hấp dưới do liên cầu khuẩn, phế cầu khuẩn, tụ cầu khuẩn không tiết penicilinase và H influenzae

- Nhiễm khuẩn đường tiết niệu không biến chứng

- Bệnh lậu

- Nhiễm khuẩn đường mật

- Nhiễm khuẩn da, cơ do liên cầu khuẩn, tụ cầu khuẩn, E coli nhạy cảm với amoxicilin [2], [4]

1.1.7 Chống chỉ định

- Người bệnh có tiền sử dị ứng với bất kỳ loại penicilin nào [4]

1.1.8 Tác dụng không mong muốn

- Thường gặp: Ngoại ban (3 – 10%)

- Ít gặp: Buồn nôn, nôn, ỉa chảy, ban đỏ, ban dát sần và mày đay, đặc biệt là

hội chứng Stevens - Johnson

- Hiếm gặp: Tăng nhẹ SGOT, kích động, vật vã, lo lắng, mất ngủ, lú lẫn, thay đổi ứng xử và/hoặc chóng mặt, thiếu máu, giảm tiểu cầu, ban xuất huyết giảm tiểu cầu, tăng bạch cầu ưa eosin, giảm bạch cầu, mất bạch cầu hạt [4]

- Theo dõi định kỳ chức năng gan thận trong suốt quá trình trị dài ngày

- Kiểm tra tiền sử dị ứng, phát hiện và xử lý các phản ứng quá mẫn

- Thận trọng với phụ nữ có thai và đang cho con bú [4]

1.1.11 Tương tác thuốc

- Nifedipin làm tăng hấp thu amoxicilin

- Alopurinol làm tăng khả năng phát ban của amoxicilin

- Probenecid làm giảm thải trừ amoxicilin

- Đối kháng với các chất kìm khuẩn như cloramphenicol, tetracyclin

- Làm giảm thải trừ methotrexat qua thận, gây độc hoặc gây suy thận

- Tỷ lệ xuất hiện viêm gan và vàng da ứ mật cao hơn khi dùng amoxicilin phối

hợp với acid clavulanic [4], [28]

1.2.3 Dược động học

Dễ hấp thu qua đường uống, không bị ảnh hưởng bởi thức ăn, tốt nhất là uống sau khi ăn Nồng độ acid clavulanic trong huyết thanh đạt tối đa sau 1-2 giờ

uống thuốc SKD của acid clavulanic qua đường uống là 75% [4], [11]

Acid clavulanic phân bố vào phổi, dịch phế quản, dịch ổ bụng, dễ dàng qua nhau thai và thải qua sữa mẹ ở nồng độ thấp Thuốc ít phân bố vào đờm, nước bọt Khả năng liên kết với protein trong huyết tương từ 22-30% ở nồng độ 1-100g/mL [4], [11]

Chuyển hóa của acid clavulanic trên cơ thể người chưa được nghiên cứu đầy

đủ Khi nghiên cứu trên chuột và chó, người ta nhận thấy chất chuyển hóa chính là 1-amino-4-hydroxybutan-2-on Chất chuyển hóa này cũng được tìm thấy trong nước tiểu của người khi sử dụng thuốc theo đường uống [10]

Thải trừ chủ yếu qua đường tiết niệu bằng cách lọc qua cầu thận Khoảng 40% thuốc được thải dưới dạng còn hoạt tính Thời gian bán thải của kali clavulanat khoảng 1giờ Probenecid không ảnh hưởng đến thải trừ của kali clavulanat [4], [10]

30-1.2.4 Cơ chế tác dụng

Bản thân kali clavulanat có hoạt tính kháng khuẩn yếu nhưng có cấu trúc lactam gần giống với penicilin nên thuốc ái lực cao và liên kết mạnh với -lactamase: thuốc gắn vào enzym sau đó biến đổi cấu trúc của enzym Vì vậy, enzym không còn khả năng hoạt động [3], [4], [10]

-1.3 Độ ổn định của amoxicilin và kali clavulanat

Amoxicilin dễ bị phân hủy ở độ ẩm cao và nhiệt độ > 37oC [3]

Amoxicilin trihydrat ổn định nhất trong môi trường axid, ở khoảng pH 5,8- 6,5 Khi tăng pH độ ổn định của amoxicilin giảm đi Các muối trong môi trường đệm phosphat và citrat cũng là chất xúc tác cho phản ứng phân hủy amoxicilin [15], [21]

Amoxicilin kém ổn định dễ bị thủy phân trong môi trường acid dạ dày pH 1,2 [29]

Kali clavulanat rất dễ bị phân hủy bởi nhiệt độ và độ ẩm [18]

Clavulanat bị thủy phân trong dung dịch nước và ổn định nhất ở khoảng pH trung tính và được chứng minh là 6,39, bị phân hủy mạnh ở vùng pH acid hoặc kiềm [11] Vì vậy, độ ổn định của hỗn hợp hai thành phần amoxicilin/clavulanat chủ yếu phụ thuộc vào clavulanat Các muối trong dung dịch đệm phosphat, acetat

và borat đều xúc tác cho phản ứng phân hủy clavulanat [16]

Amoxicilin và clavulanat đều giảm độ ổn định khi tăng độ cứng của nước (tốc độ phân hủy của clavulanat cao hơn ở tất cả các độ cứng trong môi trường trung tính không có kim loại) Tuy nhiên trong môi trường trung tính có kim loại thì tốc độ phân hủy của amoxicilin cao hơn clavulanat [11]

1.4 Thuốc giải phóng kéo dài

1.4.1 Khái niệm thuốc tác dụng kéo dài

Thuốc TDKD là những chế phẩm có khả năng kéo dài quá trình giải phóng

và hấp thu dược chất từ dạng thuốc nhằm duy trì nồng độ dược chất trong máu, trong vùng điều trị một thời gian dài với mục đích kéo dài thời gian điều trị, giảm số lần dùng thuốc cho người bệnh, giảm tác dụng không mong muốn, nâng cao hiệu

quả điều trị của thuốc [1]

1.4.2 Ưu điểm, nhược điểm

 Ưu điểm:

- Duy trì nồng độ DC trong máu trong vùng điều trị, giảm dao động nồng độ thuốc trong máu (tránh hiện tượng đỉnh-đáy) giảm tác dụng không mong muốn (TDKMM)

- Giảm số lần dùng thuốc, đảm bảo sự tuân thủ của bệnh nhân, nâng cao hiệu quả điều trị, đặc biệt ở bệnh nhân mãn tính, phải điều trị dài ngày

- Nâng cao SKD do thuốc được hấp thu đều đặn, triệt để [1]

và sự thay đổi sinh học của bệnh nhân có thể dẫn đến thất bại trong đáp ứng lâm sàng

- Không phải dược chất nào cũng chế được dưới dạng GPKD [1]

1.4.3 Phân loại các hệ tác dụng kéo dài

Có nhiều dạng thuốc tác dụng kéo dài dùng theo đường uống với các cơ chế giải phóng khác nhau [1], [23]:

 Hệ khuếch tán:

- Hệ màng bao khuếch tán

- Hệ cốt trơ cốt khuếch tán

 Hệ hòa tan:

- Hệ màng bao hòa tan

- Cốt thân nước và cốt ăn mòn

 Hệ thẩm thấu

 Hệ trao đổi ion

 Một vài nét về hệ cốt thân nước HPMC

 Nguyên tắc cấu tạo: phối hợp dược chất với HPMC (một cốt mang thuốc)

Sau khi uống, cốt sẽ hòa tan trong đường tiêu hóa để GPDC

 Cơ chế GP dược chất từ cốt hòa tan:

- Cốt thấm nước và hòa tan lớp dược chất ở bề mặt cốt

- HPMC trương nở tạo thành hàng rào gel kiểm soát quá trình GP dược chất

- Môi trường hòa tan khuyếch tán qua lớp gel thấm vào trong cốt, hòa tan dược chất và cốt

- Dung dịch dược chất khuyếch tán qua lớp gel ra môi trường bên ngoài [1]

khung polyme sẽ quyết định tỷ lệ hydrat hóa HPMC và loại HPMC (khả năng hydat hóa và tạo gel tăng theo chiều loại F < loại E < loại K)

- Mỗi loại HPMC lại được chia ra thành nhiều loại nhỏ hơn phụ thuộc vào độ nhớt của dung dịch tạo ra Ví dụ: HPMC loại K được chia ra K100LV, K4M, K15M, K100M, theo chiều độ nhớt tăng dần

- Tan trong nước lạnh, trương nở tạo dung dịch nhớt, khó tan trong nước nóng

- HPMC thường được sử dụng làm TD tạo cốt trong viên nén, TD tạo màng bao phim và TD dính [22]

1.4.4 Phương pháp bào chế

 Dập thẳng

 Tạo hạt ướt

 Tạo hạt khô [1]

1.4.5 Một số nghiên cứu liên quan đến amoxicilin giải phóng kéo dài

Trần Văn Đạt (2013) [7] đã nghiên cứu về hệ giải phóng thuốc tại dạ dày triển khai ở qui mô phòng thí nghiệm Đây là viên amoxicilin 500mg nổi trong dạ dày theo cơ chế sinh khí Tá dược sinh carbonic là natri hydrocarbonat, kiểm soát giải phóng là hỗn hợp ba loại HPMC Viên được bào chế theo phương pháp dập thẳng Tác giả đã khảo sát được ảnh hưởng của các tá dược đến khả năng giải phóng, khả năng nổi, tiền nổi của viên Công thức bào chế viên nén nổi bao gồm amoxicilin 500mg, HPMC K100LV 120mg, HPMC K4M 120mg HPMC K15M 40mg, natri hydrocarbonat 50mg, magnesi stearat 5mg, talc 5mg Viên nén bào chế nổi được trong 8 giờ trên mô hình thử nghiệm

Trương Hồng Hạnh [8] và Nguyễn Thị Hoài Thương (2015) [9] bước đầu triển khai nghiên cứu vi cầu kết dính niêm mạc dạ dày ở qui mô phòng thí nghiệm

Vi cầu được bào chế theo phương pháp trao đổi ion cố định gel Tác giả đã khảo sát được các yếu tố thuộc về công thức và qui trình bào chế ảnh hưởng tới chất lượng vi

cầu Vi cầu bào chế được thử kết dính sinh học in vitro, đóng nang với hàm lượng

250mg Công thức vi cầu được lựa chọn amoxicilin trihydrat 5g, natri alginat 1,3g, HPMC K100 M 0,1g, PEO 0,05g, Aerosil 0,4g, nước vừa đủ 100mL, môi trường

nhỏ giọt là dung dịch calci clorid 10% phối hợp chitosan 0,1% với các thông số thời gian ngâm vi cầu 15 phút, nhiệt độ sấy 45oC, sấy đến độ ẩm ≤ 3%

Wardrop J và cộng sự (1998) [32] đã nghiên cứu, xây dựng CT viên nhai đa lớp chứa amoxicilin và kali clavulanat, khảo sát độ ổn định về ẩm khi so sánh với viên Augmentin Có 3 công thức được khảo sát: CT 1 gồm hai lớp với nhân là kali clavulanat và lớp ngoài là amoxicilin, CT 2 gồm 3 lớp với lớp nhân là kali clavulanat, lớp ở giữa là Avicel và lớp ở ngoài cùng là amoxicilin, CT 3 tương tự như CT 2 nhưng lớp giữa là Avicel và 20% acid stearic Viên nén được sản xuất với quy mô phòng thí nghiệm theo phương pháp dập thẳng Kết quả cho thấy, độ ổn định về hàm ẩm của amoxicilin trong các viên dập đa lớp tương đương viên đối chiếu (VĐC), trong khi độ ổn định của kali clavulanat tăng lên CT 3 gồm 3 lớp nhân là kali clavulanat, lớp ở giữa là Avicel và 20% acid stearic và lớp ở ngoài cùng

là amoxicilin với cho kết quả tốt nhất

Storm K.H và cộng sự (2006) đã nghiên cứu bào chế viên nén hai lớp amoxicilin/kali clavulanat có màng bao Tác giả khảo sát các tỷ lệ amoxicilin/kali clavulanat trong viên, tỷ lệ amoxicilin trong hai lớp, lựa chọn các tá dược và tỷ lệ thích hợp cho CT Tác giả đề xuất một số CT đã nghiên cứu, trong đó có công thức chứa amoxicilin và acid clavulanic hàm lượng lần lượt là 1000mg và 62,5mg Lớp GPN có khối lượng 900mg chứa kali clavulanat (tương đương với 62,5mg acid clavulanic) và amoxicilin trihydrat (tương đương 562,5mg amoxicilin), TD siêu rã SSG với tỷ lệ 2% Lớp GPKD có khối lượng 700mg chứa amoxicilin ở dạng muối natri (tương đương 437,5mg amoxicilin), sử dụng gôm xanthan (2%) và acid citric (11%) giúp kéo dài GP dược chất Cả hai lớp được bào chế bằng phương pháp tạo hạt khô Viên sau đó được bao, với TD tạo màng là HPMC phối hợp loại 6 cps và

15 cps, chất hóa dẻo polyethylen glycol (PEG) [30]

Sahasathian T và cộng sự (2010) đã khảo sát ảnh hưởng của một số yếu tố đến hiệu suất tạo nang (HSTN), khả năng nổi, kết dính, % giải phóng DC của nang alginat nổi, kết dính, GPKD chứa amoxicilin Nghiên cứu chỉ ra tạo nang bằng dung dịch amoxicilin trong alginat cho HSTN cao hơn dạng hỗn dịch, nang được bao với

chitosan cho HSTN cao hơn khi không bao Sự có mặt của gelatin trong nang và nồng độ chitosan cao (1%) cũng làm tăng HSTN tuy nhiên làm cho nang không cầu Nang được bao chitosan thì nổi tốt, tốt nhất khi nồng độ chitosan là 0,5% Gelatin làm giảm khả năng nổi Tăng lượng amoxicilin không ảnh hưởng đến khả năng nổi nhưng làm giảm độ kết dính của nang CT tốt nhất dùng chitosan 0,5 %, không có gelatin có thể kéo dài GP dược chất tới 6 giờ trong dịch vị [27]

Patil D.M và cộng sự (2011) đã nghiên cứu và đánh giá viên nổi hai lớp chứa amoxicilin trihydrat Lớp GPN chứa amoxicilin hàm lượng 50 mg, được khảo sát tỷ lệ SSG Kết quả cho thấy với hàm lượng cao của SSG, amoxicilin GP nhanh hơn, với tỷ lệ 8% SSG, 99% hoạt chất GP sau 1 giờ Lớp GPN ngay sau đó được sử dụng để kết hợp với lớp GPKD để xây dựng viên nén nổi hai lớp Trong đó, lớp GPKD chứa 200mg amoxicilin, sử dụng tá dược sủi bọt là NaHCO3, được khảo sát ảnh hưởng của các loại polyme là HPMC K4M và HPMC K15M và Na CMC Kết quả cho thấy khi tỷ lệ của tá dược sủi bọt tăng thì thời gian tiền nổi, thời gian nổi giảm và ngược lại Công thức tối ưu chứa 32% HPMC K4M kết hợp với 16% NaCMC cho thời gian nổi dài nhất và GP hoạt chất tốt nhất [24]

Songsurang K và cộng sự (2011) đã nghiên cứu và đánh giá ảnh hưởng của

tá dược EC, chitosan và β-cyclodextrin đến viên nén giải phóng kéo dài chứa

amoxicilin Amoxicilin được tạo hạt với EC, rây chọn kích thước phù hợp, sau đó

trộn với các tá được lactose, magnesi stearat, chitosan, cyclodextrin rồi tiến hành dập viên Kết quả cho thấy khi sử dụng EC, dược chất GPKD nhưng sử dụng hạt có kích thước 75-100µm giúp dược chất GPKD hơn Viên nén qui ước giải phóng 100% hoạt chất trong vòng 1 giờ trong khi viên nén sử dụng tá dược EC, chitosan cho mức độ giải phóng hoạt chất khoảng 23%, 50% và 93% sau 1, 3, 6 giờ Ba tỷ lệ

DC và EC được khảo sát là 1:2, 1:1 và 2:1 cho độ hòa tan khác biệt không lớn, tuy nhiên tỷ lệ 1:1 cho GP dược chất tốt nhất được sử dụng để tiếp tục khảo sát Khảo sát chitosan dùng riêng hoặc phối hợp với β-cyclodextrin với các tỷ lệ khác nhau cho kết quả β-cyclodextrin không giúp kéo dài GP đối với amoxicilin [29]

Ranade và cộng sự (2012) đã nghiên cứu ảnh hưởng của polyme và TD sủi bọt đến thời gian tiền nổi, thời gian nổi, khả năng GPDC và một số đặc tính lý hóa khác của viên nổi hai lớp chứa amoxicilin và bột Aloe vera Lớp chứa Aloe vera được giữ cố định và khảo sát ảnh hưởng của TD lên lớp amoxicilin Hai polyme HPMC K4M và HPMC K100M được khảo sát ở các tỷ lệ 90:10, 85:15, 80:20, 70:30 Tá dược sủi bọt gồm natri hydrocarbonat và acid citric được khảo sát ở các tỷ

lệ 3:1 và 4:1 Ngoài ra, tỷ lệ giữa polyme và TD sủi bọt cũng được nghiên cứu Kết quả cho thấy viên chứa tỷ lệ 85:15 của HPMC K4M và HPMC K100M cùng với tỷ

lệ các TD sủi bọt là 4:1 cho viên có thời gian tiền nổi là 25 ± 2 giây, thời gian nổi trên 8 giờ và amoxicilin giải phóng được 97% sau 8 giờ là CT tốt nhất [25]

Deep Mala và cộng sự (2014) đã nghiên cứu và đánh giá viên nén hai lớp chứa amoxicilin và kali clavulanat GPN Lớp thứ nhất chứa amoxicilin (575mg), lớp thứ hai chứa kali clavulanat (340mg) Cả hai lớp đều được bào chế bằng phương pháp tạo hạt khô Tá dược siêu rã cros povidon được thêm vào lớp thứ nhất và cellulose vi tinh thể (MCC) được thêm vào lớp thứ hai để đảm bảo cả hai hoạt chất

GP cùng thời điểm Khảo sát ảnh hưởng của hai tá dược này lên GP hoạt chất cho thấy viên chứa MCC và cros povidon ở tỷ lệ 2:9 cho viên % GPDC tốt nhất (99,09% đối với amoxicilin và 99,18% với kali clavulanat) [14]

Liu T và cộng sự (2014) đã nghiên cứu bào chế nanogel gắn amoxicilin Nanogel poly (methacrylic acid) (PMAA) được bào chế theo phương pháp kết tủa polyme Cho acid methacrylic (MAA) phản ứng với ethylen glycol dimethacrylat (EGDMA) với chất xúc tác 2,2′-azobisisobutyronitril (AIBN) trong môi trường

CH3CN Nanogel tạo thành sau đó được gắn amoxicilin bằng phương pháp ngâm trong dung dịch nước muối sinh lý Kết quả cho thấy, trong môi trường đệm pH 7,4,

hệ nano kéo dài giải phóng dược chất Tốc độ giải phóng hoạt chất phụ thuộc vào tỷ

lệ EGDMA Khi tăng tỷ lệ này, lớp gel bên ngoài nano trở nên đặc hơn, tốc độ giải phóng hoạt chất giảm đi Nanogel cũng có tác dụng có tác dụng bảo vệ hoạt chất: amoxicilin khi gắn trong nano bền vững hơn sơ với amoxicilin nguyên liệu ở tất cả các giá trị pH từ 1-13 [20]

Wu Z và cộng sự (2015) đã nghiên cứu bào chế nano amoxicilin gắn màng

HP Một amino acid có tên là NQA (một thành phần nằm trên màng HP) kết hợp

với acid myristic tạo thành sản phẩm có tên: MNQA Polyme hóa hỗn hợp amoxicilin và MNQA để tạo thành nano có chứa amoxicilin và MNQA, rửa sạch nano tạo thành với ethanol loại bỏ hoàn toàn amoxicilin và MNQA để tạo ra nano đánh dấu đôi (không còn amoxicilin và MNQA) Nano đánh dấu đôi sau đó được

gắn trở lại với amoxicilin để tạo thành nano amoxicilin gắn được với màng HP

thông qua các vị trí đánh dấu (vị trí trống trên nano) Kết quả cho thấy, nano đánh dấu đôi lưu tại dạ dày kéo dài hơn 3 giờ, trong khi nano không đánh dầu chỉ nằm tai

dạ dày 30 phút, nano amoxicilin giải phóng hoạt chất kéo dài hơn 8 giờ (khoảng 70%) và không phụ thuộc pH môi trường (mẫu amoxicilin thường giải phóng 90% sau 1 giờ) [33]

1.5 Một vài chế phẩm chứa amoxicilin và acid clavulanic trong nước

Tại Việt Nam, nhiều công ty nghiên cứu bào chế sản phẩm thuốc phối hợp

chứa hai thành phần amoxicilin và kali clavulanat Dạng bào chế chủ yếu là viên nén, thuốc bột pha hỗn dịch, thuốc tiêm Một số chế phẩm chứa amoxicilin và kali clavulanat được trình bày trong bảng 1.1:

Bảng 1.1: Một số chế phẩm chứa amoxicilin và acid clavulanic trên thị trường VN

HL (Amoxicilin/Acid Clavulanic)

Dạng bào chế

CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP

NGHIÊN CỨU 2.1 Nguyên liệu, thiết bị

2.1.1 Nguyên liệu

Bảng 1.1: Các nguyên liệu, tá dược sử dụng trong bào chế

1 Amoxicilin trihydrat 86,26% (dạng compact) Trung Quốc TCNSX

Bảng 2.2: Các nguyên liệu, tá dược được dùng trong kiểm nghiệm

4 Acid phosphoric đặc Merck (Đức) Dùng cho HPLC

5 Kali dihydrophosphat Merck (Đức) Dùng cho HPLC

2.1.2 Thiết bị nghiên cứu

Máy dập viên hai lớp SHAKTI (Ấn Độ),

Cân phân tích Sartorius TE 3102S (Đức)

Cân kĩ thuật Sartorius TE 3102S (Đức)

Máy đo độ cứng Pharma - Test (Đức)

Hệ thống máy HPLC Agilent Technologies 1260 Infinitive (Mỹ)

Máy thử độ hòa tan Pharma – Test (Đức)

Máy đo quang Hitachi U-1900 (Nhật Bản)

Máy đo pH Metler Toledo 412 (Đức)

Chậu siêu âm Ultrasonic LC 60H

Bình định mức, chày, cối sứ, rây, pipet

2.2 Nội dung

 Xây dựng phương pháp định lượng amoxicilin bằng phương pháp đo quang

 Khảo sát đồ thị GP của viên đối chiếu Augmentin SR 1000/62,5mg

 Khảo sát ảnh hưởng của yếu tố công thức đến GP amoxicilin

 Khảo sát ảnh hưởng của một số yếu tố quy trình đến GP amoxicilin

 Khảo sát GP amoxicilin và acid clavulanic từ viên nén 2 lớp bào chế được

2.3 Đối tượng nghiên cứu

 Viên đối chiếu Augmentin SR 1000/62,5mg viên phóng thích chậm amoxicilin/acid clavulanic, số lô sản xuất 1865, hạn sử dụng 05/01/2017

 Viên nén hai lớp amoxicilin và kali clavulanat giải phóng kéo dài

2.4 Phương pháp nghiên cứu

2.4.1 Phương pháp bào chế

Tiến hành bào chế 200 viên đối với mỗi công thức theo quy trình như sau:

 Lớp giải phóng nhanh:

- Tá dược: talc, magnesi stearat

- Dược chất: amoxicilin trihydrat, kali clavulanat (hạt compact)

- Các TD được rây qua rây 0,15mm, cân, trộn rồi trộn đều (trộn đồng lượng) với dược chất

 Lớp giải phóng kéo dài: tạo hạt khô

- Tá dược: HPMC K100LV, HPMC K4M, Avicel PH102, Aerosil, acid citric, magnesi stearat

- Dược chất: Natri amoxicilin

- Các tá dược rây qua rây 0,15mm, cân: HPMC K100LV, HPMC K4M, 70% Avicel PH 102, 70% magnesi stearat (khối lượng của

tá dược đó theo công thức), Aerosil,, acid citric sau đó trộn đều với natri amoxicilin để tạo hạt khô (trộn đồng lượng), rồi phối hợp hạt khô với 30% Avicel PH 102 và 30% magnesi stearat còn lại

Hình 2.1: Sơ đồ quy trình bào chế lớp GPKD

 Quy trình dập viên:

- Sử dụng chày cối caplet kích thước 22,5mm x 11mm, lực dập

thích hợp để được viên có độ cứng 15 kP

- Dập viên trên máy dập viên 2 lớp như sau:

+ Cối phân phối hạt 1: lớp GPN

+ Cối phân phối 2: lớp GPKD

+ Để ổn định 24 giờ trước khi đánh giá tiêu chuẩn chất

lượng viên

2.4.2.1 Định lượng bằng phương pháp đo quang

Dùng phương pháp đo quang ở 272nm (λmax), so sánh D thử, D chuẩn và dựa vào nồng độ mẫu chuẩn để tính nồng độ mẫu thử, từ đó suy ra hàm lượng dược chất

trong viên

Mẫu chuẩn: Dung dịch amoxicilin 200µg/ml trong nước cất Cân chính xác

khoảng 100mg natri amoxicilin vào bình định mức 100ml, thêm 80ml nước cất, siêu

âm 15 phút, bổ sung nước cất đến vạch được dung dịch gốc amoxicilin 1mg/ml Từ dung dịch gốc amoxicilin 1mg/ml, hút 10ml cho vào bình 50 ml, bổ sung nước cất vừa đủ 50ml, lọc (qua màng lọc 0,45µm) được dung dịch chuẩn amoxicilin

200μg/ml

Mẫu thử (định lượng): cân 10 viên, tính khối lượng trung bình, nghiền thành

bột mịn Cân chính xác lượng bột tương ứng với khoảng 400mg amoxicilin, cho vào bình định mức 200ml, thêm 180 ml nước cất, siêu âm 15 phút, bổ sung vừa đủ 200ml Lọc và bỏ 20ml dịch lọc đầu Hút lấy 10 ml dịch lọc cho vào bình định mức

100 ml, bổ sung nước cất vừa đủ 100 ml, lọc (qua màng lọc 0,45µm) được dung

Trong đó: Cth, Cch lần lượt là nồng độ mẫu thử và mẫu chuẩn

Dth, Dch lần lượt là độ hấp thụ của mẫu thử và mẫu chuẩn

mc là khối lượng cân của mẫu thử

mtb là khối lượng trung bình viên

mnh là khối lượng hoạt chất ghi trên nhãn

HL là hàm lượng % của amoxicilin