Nghiên cứu sinh tổng hợp magnesi lactat từ lactobacillus acidophilus

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN MINH NGỌC NGHIÊN CỨU SINH TỔNG HỢP MAGNESI LACTAT TỪ Lactobacillus acidophilus LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP THẠC SĨ HÀ NỘI – 2015 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN MINH NGỌC NGHIÊN CỨU SINH TỔNG HỢP MAGNESI LACTAT TỪ Lactobacillus acidophilus CHUYÊN NGÀNH MÃ SỐ: 607.204.02 Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS Đàm Thanh Xuân HÀ NỘI – 2015 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc tới cô giáo TS Đàm Thanh Xuân hết lòng hướng dẫn, truyền đạt kiến thức quý báu, dành nhiều thời gian, tận tâm bảo giúp đỡ hoàn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn PSG TS Nguyễn Đình Luyện, TS Nguyễn Văn Hải cho học giá trị, nhiệt tình dạy bảo giúp đỡ từ ngày đầu nghiên cứu Tôi xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo kỹ thuật viên Bộ môn Công nghiệp dược nhiệt tình bảo tạo điều kiện thuận lợi cho hoàn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu, Phòng Sau đại học thầy cô, cán nhân viên trường Đại học Dược Hà Nội, Ban Giám hiệu trường Cao đẳng Dược TW Hải Dương tạo điều kiện giúp đỡ suốt trình học tập nghiên cứu trường Cuối cùng, cho gửi lời biết ơn tới gia đình, bạn bè động viên, khích lệ giúp đỡ mặt để có kết ngày hôm Hà Nội, tháng năm 2015 Học viên Nguyễn Minh Ngọc MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC HÌNH DANH MỤC BẢNG ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng TỔNG QUAN 1.1 Magnesi lactat 1.1.1 Đặc điểm 1.1.2 Công dụng 1.1.3 Một số sản phẩm lƣu hành thị trƣờng 1.2 Các phƣơng pháp sản xuất Magnesi lactat 1.2.1 Phƣơng pháp tổng hợp hóa học 1.2.2 Phƣơng pháp sinh học 1.3 Vi khuẩn sinh acid lactic 10 1.3.1 Đặc điểm nhóm vi khuẩn sinh acid lactic 10 1.3.2 Chi Lactobacillus 11 1.3.3 Loài Lactobacillus acidophilus 11 1.3.4 Acid lactic 13 1.3.5 Các yếu tố ảnh hƣởng đến trình lên men sản xuất acid lactic 15 1.4 Các nghiên cứu điều chế Magnesi lactat phƣơng pháp sinh tổng hợp lên men vi sinh vật 15 Chƣơng ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị 22 2.1.1 Nguyên vật liệu 22 2.1.2 Thiết bị sử dụng 24 2.2 Nội dung nghiên cứu 24 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 26 2.3.1 Phƣơng pháp nhân giống nuôi cấy 26 2.3.2 Phƣơng pháp tách chiết Magnesi lactat từ dịch lên men 26 2.3.3 Phƣơng pháp xác định mật độ tế bào vi sinh vật 27 2.3.4 Phƣơng pháp tính hiệu suất tạo sản phẩm Magnesi lactat 29 2.3.5 Phƣơng pháp xác định cấu trúc hóa học sản phẩm 30 2.3.6 Phƣơng pháp kiểm nghiệm Magnesi lactat 31 2.3.7 Phƣơng pháp định lƣợng acid lactic 33 2.3.8 Phƣơng pháp Schoorl – Regenbogen định lƣợng đƣờng 33 2.3.9 Phƣơng pháp xử lý số liệu 34 Chƣơng KẾT QUẢ 35 3.1 Khảo sát lựa chọn số điều kiện ảnh hƣởng đến trình lên men L acidophilus sinh tổng hợp Magnesi lactat 35 3.1.1 Xây dựng phƣơng trình tƣơng quan tuyến tính độ OD600 mật độ tế bào 35 3.1.2 Khảo sát ảnh hƣởng ion Mg2+ trình nuôi cấy L acidophilus 36 3.1.3 Lựa chọn pH thích hợp cho trình nuôi cấy L acidophilus 39 3.1.4 Lựa chọn cách bổ sung Magnesi carbonat vào môi trƣờng nuôi cấy L acidophilus 40 3.1.5 Khảo sát ảnh hƣởng pH trì môi trƣờng nuôi cấy đến hiệu suất thu sản phẩm 41 3.1.6 Khảo sát ảnh hƣởng nguồn hydratcacbon tới hiệu suất thu sản phẩm 43 3.1.7 Khảo sát ảnh hƣởng nồng độ glucose tới hiệu suất thu sản phẩm 45 3.1.8 Lựa chọn thời điểm thu sản phẩm 47 3.2 Khảo sát lựa chọn số phƣơng pháp điều kiện kết tinh thu sản phẩm Magnesi lactat 50 3.2.1 Khảo sát ảnh hƣởng phƣơng pháp kết tinh 50 3.2.2 Khảo sát ảnh hƣởng nhiệt độ kết tinh 52 3.2.3 Khảo sát ảnh hƣởng thời gian kết tinh 53 3.2.4 Đề xuất quy trình xử lý dịch lên men quy mô phòng thí nghiệm 54 3.3 Xác định cấu trúc kiểm nghiệm sản phẩm thu đƣợc 57 3.3.1 Định tính Magnesi lactat sắc ký lớp mỏng 57 3.3.2 Xác định cấu trúc 57 3.3.4 Kiểm nghiệm sản phẩm Magnesi lactat 58 Chƣơng BÀN LUẬN 59 4.1 Về phƣơng pháp đo OD600 để xác định mật độ tế bào VSV 59 4.2 Về ảnh hƣởng ion Mg2+ môi trƣờng nuôi cấy 60 4.3 Về điều kiện lên men sinh tổng hợp Magnesi lactat 62 4.3.1 Về ảnh hƣởng pH 62 4.3.2 Về phƣơng pháp bổ sung MgCO3 63 4.3.3 Về loại hydratcarbon 64 4.3.4 Về nồng độ đƣờng glucose 65 4.3.5 Về thời gian lên men 67 4.4 Bàn luận phƣơng pháp tinh chế 68 4.4.1 Về phƣơng pháp kết tinh 68 4.4.2 Về nhiệt độ kết tinh 69 4.4.3 Về thời gian kết tinh 69 4.5 Về định tính, xác định cấu trúc kiểm nghiệm sản phẩm Magnesi lactat sinh tổng hợp 70 4.5.1.Về định tính 70 4.5.2 Về cấu trúc sản phẩm Magnesi lactat sinh tổng hợp 71 4.5.3 Về kiểm nghiệm 71 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 73 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT ATCC American Type Culture Collection (Trung tâm giữ giống Quốc gia Mỹ) BP Bristish Pharmacopoeia (Dƣợc Điển Anh) DĐVN Dƣợc Điển Việt Nam h Giờ 1H - Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy H-NMR (Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân proton) IR Infrared Radiation (Phổ hồng ngoại) kl Khối lƣợng MRS de Man, Rogosa, Sharpe (Môi trƣờng nuôi cấy vi khuẩn lactic) L.acidophilus Lactobacillus acidophilus MS Mass spectrometry (Phổ khối lƣợng) OD600 Optical density (Mật độ quang bƣớc sóng 600 nm) PLA Poly acid lactic tt Thể tích USP United States Pharmacopoeia (Dƣợc điển Mỹ) VSV Vi sinh vật DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Quá trình lên men lactic đồng hình (homolactic) dị hình (heterolactic) [7] Hình 1.2 L acidophilus dƣới kính hiển vi quang học (a), kính hiển vi điện tử (b)[5] 11 Hình 3.1 Đồ thị tƣơng quan tuyến tính độ OD600 mật độ tế bào 36 Hình 3.2 Đồ thị ảnh hƣởng Mg2+ dịch nuôi cấy đến OD600 nồng độ acid lactic 38 Hình 3.3 Biến thiên mật độ vi sinh vật (OD600) theo pH môi trƣờng nuôi cấy 39 Hình 3.4 Biểu đồ so sánh hiệu suất tạo Magnesi lactat pH trì môi trƣờng nuôi cấy khác 42 Hình 3.5 Biểu đồ so sánh hiệu suất sinh Magnesi lactat sử dụng nguồn hydratcacbon khác 44 Hình 3.6 Biểu đồ so sánh hiệu suất tạo Magnesi lactat nồng độ glucose khác 46 Hình 3.7 Đồ thị biểu diễn thông số theo thời gian lên men 48 Hình 3.8 Hình dạng tinh thể Magnesi lactat thí nghiệm chụp vật kính 10x 51 Hình 3.9 Sơ đồ quy trình xử lí dịch lên men 55 Hình 4.1 Hình ảnh tinh thể Magnesi lactat chụp qua kính hiển vi quang học 10x 70 DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Một số sản phẩm chứa Magnesi lactat thị trƣờng Bảng 1.2 Khả sinh acid L – lactic D – L lactic sau 48 lên men chủng vi khuẩn L acidophilus DSM 20079 [41] 12 Bảng 2.1 Các nguyên liệu hóa chất 22 Bảng 2.2 Môi trƣờng nhân giống MRS lên men 23 Bảng 2.3 Các thiết bị sử dụng 24 Bảng 2.4 Các nồng độ pha loãng để xây dựng đƣờng tƣơng quan tuyến tính độ đục mật độ tế bào 29 Bảng 3.1 Kết xác định mật độ tế bào VSV sống phƣơng pháp đo quang đĩa thạch 35 Bảng 3.2 Kết khảo sát ảnh hƣởng ion Mg2+ đến OD600 khả tạo acid lactic vi sinh vật 37 Bảng 3.3 So sánh hai phƣơng pháp bổ sung MgCO3 vào môi trƣờng nuôi cấy 40 Bảng 3.4 Hiệu suất thu Magnesi lactat nuôi cấy L acidophilus pH khác 42 Bảng 3.5 Hiệu suất tạo Magnesi lactat lên men với loại hydratcacbon khác 43 Bảng 3.6 Kết hiệu suất Magnesi lactat lên men với nồng độ glucose khác 45 Bảng 3.7 Kết khảo sát lƣợng sản phẩm Magnesi lactat thu đƣợc theo thời gian 47 Bảng 3.8 So sánh điều kiện phản ứng hóa học phản ứng điều kiện lên men tạo sản phẩm Magnesi lactat 49 Bảng 3.9 So sánh điều kiện kết tinh khác 51 Bảng 3.10 Lƣợng sản phẩm Magnesi lactat thu đƣợc điều kiện nhiệt độ kết tinh khác 53 Bảng 3.11 Lƣợng sản phẩm Magnesi lactat thu đƣợc điều kiện thời gian kết tinh khác 54 ẾT LUẬN VÀ IẾN NG Ị  Kết luận Sau thời gian thực đề tài, nghiên cứu đạt đƣợc số kết sau: Đã lựa chọn số điều kiện trình nuôi cấy Lactobacillus acidophilus sinh tổng hợp Magnesi lactat quy mô phòng thí nghiệm để nâng cao hiệu suất đạt 72%  Đã xây dựng phƣơng trình tƣơng quan tuyến tính độ OD600 mật độ tế bào với hệ số tƣơng quan R2 = 0,98  Đã khảo sát ảnh hƣởng ion Mg2+ trình nuôi cấy L acidophilus: nồng độ ion Mg2+ từ 0,5% đến 2,0% ảnh hƣởng đến sinh trƣởng, phát triển vi sinh vật làm tăng khả sinh acid lactic vi sinh vật nghiên cứu  Đã lựa chọn đƣợc phƣơng thức bổ sung dần Magnesi cacbonat sau 24 để môi trƣờng nuôi cấy trì pH = 6,0  Đã lựa chọn nguồn hydrat carbon thích hợp glucose với nồng độ 9%, thời điểm thu sản phẩm 72 Đã lựa chọn phƣơng pháp điều kiện trình kết tinh: cô dịch kết tinh 30ml gãi kết tinh – phút đến tạo hỗn dịch đặc, nhiệt độ kết tinh thƣờng 25 – 30oC thời gian kết tinh Đã xác định cấu trúc kiểm nghiệm Magnesi lactat theo tiêu chuẩn Dƣợc Điển Anh 2010  Bằng phổ hồng ngoại (IR), phổ khối lƣợng phân tử (MS), cộng hƣởng từ proton (1H-NMR) xác định công thức muối ngậm nƣớc chứng minh hợp chất nghiên cứu có cấu tạo phù hợp công thức muối Magnesi lactat dihydrat 73  Kiểm nghiệm sản phảm Magnesi lactat đạt tiêu theo tiêu chuẩn Dƣợc Điển Anh 2010 về: định tính ion Mg2+, định tính ion lactat, định lƣợng sản phẩm Magnesi lactat đạt 98,25%  Kiến nghị Để đề tài có tính ứng dụng thực tế, xin đƣa số đề xuất nhƣ sau: - Tiếp tục nghiên cứu trình lên men sinh tổng hợp Magnesi lactat chủng vi khuẩn hay sử dụng công nghiệp khác để nâng cao hiệu suất nhƣ Lactobacillus delbrueckii - Mở rộng nghiên cứu việc sử dụng nguồn nguyên liệu rẻ tiền (phụ phẩm ngành công nghiệp khác, nhƣ rỉ đƣờng, cám gạo…) để phục vụ nâng cấp quy trình sinh tổng hợp Magie lactate lên quy mô lớn, ứng dụng vào sản xuất công nghiệp 74 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt 1.Kiều Hữu Ảnh (1999), Giáo trình vi sinh vật học công nghiệp, tr.40 – 50, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật 2.Ngô Lâm Tuấn Anh (2010), Công nghệ sản xuất acid lactic, tr.41 – 54, Đại Học Sƣ Phạm Kỹ Thuật thành phố Hồ Chí Minh 3.Bộ Y Tế (2012), Dược điển Việt Nam IV, tr.375 4.Nguyễn Hữu Đĩnh, Trần Thị Đà (1999), Ứng dụng số phương pháp phổ nghiên cứu cấu trúc phân tử, tr.27-99, 296-346, Nhà xuất Giáo Dục 5.Nguyễn Lân Dũng, Phạm Văn Tý, Dƣơng Văn Hợp, Nguyễn Liên Hoa, Định Thúy Hằng, Đào Thị Lƣơng, Nguyễn Thị Hoài Hà, Lê Hoàng Yến, Nguyễn Kim Nữ Thảo, Nguyễn Văn Bắc, Hoàng Văn Vinh (2012), Vi sinh vật học phần I, tr 134 – 137, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật 6.Kiều Thị Hồng (1999), Tối ưu hóa trình lên men sinh tổng hợp Calci lactat, Luận văn tốt nghiệp thạc sỹ dƣợc học, Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội, tr - 15 7.Nguyễn Văn Thanh (2010), Công Nghệ sinh học Dược, tr 100 – 110, Nhà xuất Giáo dục 8.Từ Minh Koóng, Đàm Thanh Xuân (2013), Cơ sở công nghệ sinh học sản xuất dược phẩm, tr 42-54, Nhà xuất Y Học 9.Nguyễn Đức Lƣợng, (1996), Công nghệ vi sinh vật tập 3, Thực phẩm lên men truyền thống, Trƣờng đại học kỹ thuật TP HCM, tr 67 - 69 10.Nguyễn Đình Triệu (2005), Các phương pháp phân tích vật lý hóa lý, tập II, tr 145 – 170, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Tiếng Anh 11 Abrams S A., Chen Z., and Hawthorne K M (2014), “Magnesium metabolism in 4-year-old to 8-year-old children”, J Bone Miner Res 29(1), p 118-122 12 Afsar B and Elsurer R (2014), “The relationship between magnesium and ambulatory blood pressure, augmentation index, pulse wave velocity, total peripheral resistance, and cardiac output in essential hypertensive patients”, J Am Soc Hypertens 8(1), p 28-35 13 Agustin, Van Breugel, Willem Jacob, Peter Paul (2013), “Patent Purac biochem", Patent WO2013/117687, p 1,2 14 Aharon Meir Eyal, Rod Fisher (1998), “A process for the recovery of lactic acid”, Patent WO 1998037050, p 1-10 15 Atlan D., Regis H and Gastaut H (1967), “Treatment of spasmophilia in the adult by magnesium lactate”, Electroencephalogr Clin Neurophysiol 23(4), p 388 16 Baker W L., et al (2009), “Effect of magnesium L-lactate on blood pressure in patients with an implantable cardioverter defibrillator”, Ann Pharmacother 43(4), p 569-576 17 Bautista Gallego, Arroyo-López, Durán-Quintana, Garrido- Fernandez, (2008), “Individual effects of sodium, potassium, Calcium, and magnesium chloride salts on Lactobacillus pentosus and Saccharomyces cerevisiae growth”, Food Prot, 71(7), p.1412-21 18 Ben-Yoseph Eliahu, Kogan Leni, Wajc Samuel, (1999), “Process for preparing lactic acid”, Patent WO 2000017378 A3, p.1-7 19 Bode Harold Eli (1969), “High purity magnesium lactate from steepwater”, Patent US3429777, p.2 20.Bøhmer T., Røseth A., Holm H., Weberg-Teigen L., Wahl L., (1990), “Bioavailability of oral magnesium supplementation in female students evaluated from elimination of magnesium in 24-hour urine”, Magnesium Trace Element p 9, 272-278 21.Breed RS, Dotterrer WD (1916), “The Number of Colonies Allowable on Satisfactory Agar Plates”, Journal of Bacteriology 1(3), p 321–331 22.British Pharmacopoeia Commission (BPC) (2010), Bristish Pharmacopedia, p 1325 23.Cheng Zhen, Gong Weitao, Lin Yuan, Ning Guiling, Pang Hongchang, (2013), “Materials Research Bulletin” 48(3), p 1333 - 1337 24.Coudray C, Rayssiguier Y (2001), “Impact of vegetable products on intake, intestinal absorption and status of magnesium”, Advances in magnesium research: nutrition and health London, p 115-123 25.Council of Europe European (COE) - European Directorate for the Quality of Medicines (EDQM) (2005), Sodium (S)-lactat solution, European pharmacopoeia 5.0, 2438-2439 26.Dumont (1965), “Treatment of uterine pain in pregnancy with magnesium lactate”, Lyon Med 213(21), p 1571-1582 27.Fagerbakke, K M., Norland, S., and Heldal, M (1999), “The inorganic ion content of native aquatic bacteria”, Can J Microbiol 45(4), p 304-311 28.FAO/ WHO (1989), Report of the 15th session of the codex committee on food additives, the United Nations 29.Firoz M, Graber M (2001), “Bioavailability of US commercial magnesium preparations”, Magnes Res, p 14:257-262 30.Friedrich Widdel (2010), “Theory and Measurement of Bacterial Growth”, Grundpraktikum Mikrobiologie, Sem (B.Sc.), Universität Bremen, p 4-11 31 Garvie Ellen (1967), “Production of L(+) lactic acid and D(-) lactic acid in cultrures of some lactic acid and bacteria with a special study of Lactobacillus acidophilus NCDO2”, J.Dairy Res, p 34, 31 32.Gomes A.M.P., Malcata F.X (1999), “Bifidobacterium spp and Lactobacillus acidophilus: biological, biochemical, technological and therapeutical properties relevant for use as probiotics”, Trends Food Sci Technol 10, p 139-157 33.Hatice yavuzdurmaz (2007), Isolation, characterization, determination of probiotic properties of lactic acid bacteria from human milk, Master of science in Food Engineering, p.1 - 40 34.Heldal M., et al (2012), “Mg2+ as an indicator of nutritional status in marine bacteria”, ISME J 6(3), p 524-530 35.Index Merck (2001), 13th Edition, , Merck & Co, Whitehouse Station, New Jersey, USA, p.1654 36.J.H Litchefield (1996), “Microbiological production of acid lactic”, Advances in applied microbiology, vol.12, p.532 37.Jan Van Krieken, el al (2005), “Process for the preparation of lactic acid or lactate from a magnesium lactate comprising medium”, Patent US 7705180 B2, p.1-15 38.Jan Van Krieken, el al (2007), “Method for preparing an organic amine-lactic acid complex”, Patent CN 101426755 B, p 1-10 39.Johnson S (2001), “The multifaceted and widespread pathology of magnesium deficiency”, Med Hypotheses, p 56, 163-170 40.Kairesalo T., et al (1995), “The role of bacteria in the nutrient exchange between sediment and water in a flow-through system”, Microb Ecol 29(2), p 129-144 41.Kamila Goderska, Jacek Nowak, Zbigniew Czarnecki (2008), “Comparison of the growth of lactobacillus acidophilus and bifidobacterium bifidum species in media supplemented with selected saccharides including prebiotics”, Acta Sci Pol., Technol Aliment 7(2)/ 42.Kolomaznik, A Blaha, S Saha, L Saha, (1995), “Manufacture of magnesium lactate”, Czech Rep, Patent CZ 279449, p.1-8 43.Kozaki M., Uchimura T & Okada S (1992), “Experimental manual of lactic acid bacteria”, Asakurasyoten, Tokyo, Japan, p 1-10 44.L.A Schelef (1994), “Antimicrobial effects of lactates”, A review, J of food protection vol.57, p 445 – 450 45.Lambert P A., Hancock I C., and Baddiley J (1975), “Influence of alanyl ester residues on the binding of magnesium ions to teichoic acids”, Biochem J 151(3), p 671-676 46.Levrat Verny, Coudray C., Bellanger J., Lopez H., Demigne C., Rayssiguier Y., Remesy C (1999), “Wholewheat flour ensures higher mineral absorption and bioavailability than white wheat flour in rats”, Br J Nutr ; 82, p 17-21 47.Lindberg J.S., Zobitz M.M., Poindexter J.R., Pak C.Y.C., (1990), “Magnesium bioavailability from magnesium citrate and magnesium oxide”, J Am Coll Nutr p 9, 48-55 48.Marcus J.A.W., Vorage (2009), “Metal lactate powder and method for preparation”, Patent US 8337867 B2, p.1-20 49.McBride B F., et al (2006), “An evaluation of the impact of oral magnesium lactate on the corrected QT interval of patients receiving sotalol or dofetilide to prevent atrial or ventricular tachyarrhythmia recurrence”, Ann Noninvasive Electrocardiol 11(2), p 163-169 50.Moncrief M B and Maguire M E (1999), “Magnesium transport in prokaryotes”, J Biol Inorg Chem 4(5), p 523-527 51.Moon S.H, Tsai S.P (1998), “An intergrated bioconversion process for production of L – Lactic acid from starchy potato feed stocks”, Applied biochemistry and biotechnology, vol 70 – 72 52.Morris M.E (1987), “Absorption of magnesium from orally administered magnesium sulfate in man”, Clin Toxicol, p 25, 371-382 53.Mühlbauer B., Schwenk M., Coram W.M., Antonin K.H., Etienne P., Bieck P.R., Douglas F.L , (1991), “Magnesium-L-aspartate-HCl and magnesium-oxide: bioavailability in healthy volunteers”, Eur J Clin Pharmacol p 40, 437-438 54.Peter Johannes Marie Baets, el al (2013), “Process for the fermentative production of lactic acid from a plant extract the presence of a caustic magnesium salt”, Patent WO 2013/087901 A1, p.1-16 55.R James Kirkpatrick (1975), “Crystal Growth from the Melt: A Review”, American Mineralogist, p.798-814 56.R.M Dominguw (1998), “Optimization of the L – lactic acid production as feedstock for the polymers formation”, Polymer preprints, American Chemical society, Division of polymer chemistry No.1, Vol 39, p 282 – 283 57.Rayssiguier Y, Mazur A, Durlach J , (2001), “Advances in Magnesium Research, Nutrition and health London”, John Libbey & Company Limited England, p 455 58.Roanoke (2002), “Package insert Mag-Tab SR (magnesium L lactate)”, Niche Pharmaceuticals, p.1-40 59.Roman,J., Gniewosz M., Mantorska J (2009), “Comparison of magnesium binding, growth, and acidifying activities of Lactobacillus brevis and Lactobacillus plantarum in an environment containing higher concentration of magnesium”, Acta Scientiarum Biotechnologia Vol No ISSN 1644-065X, p 27-36 Polonorum - 60.Sabatier M., Arnaud M.J., Kastenmayer P., Rytz A., Barclay D.V., ( 2002), “Meal effect on magnesium bioavailability from mineral water in healthy women”, Am J Clin Nutr, p 75, 65-71 61.Saris N E., et al (2000), “Magnesium An update on physiological, clinical and analytical aspects”, Clin Chim Acta 294(1-2), p 1-26 62.Schimatschek HF, Rempis R (2001), “Prevalence of hypomagnesemia in an unselected German population of 16,000 individuals”, Magnes Res p 283-290 63.Sreepriva Vedantam (2012), “Crystallization: Key thermodynamic, kinetic and hydrodynamic aspects”, Sadhana 38, p 1287–1337 64.Steidl L and Ditmar R (1991), “Osteoporosis treated with magnesium lactat”, Acta Univ Palacki Olomuc Fac Med 129, p 99-106 65.Steidl L., Tolde I and Svomova V (1987), “Metabolism of magnesium and zinc in patients treated with antiepileptic drugs and with magnesium lactat”, Magnesium 6(6), p 284-295 66.Steidl L., Tolde I and Svomova V (1988), “Innovation of the antiepileptic therapy with magnesium lactate”, Acta Univ Palacki Olomuc Fac Med 120, p 271-282 67.Stendig-Lindberg G (2001), “The Israel Society for Research on Magnesium in Biology and Medicine: proceedings of the first meeting”, Isr Med Assoc J 3(10), p 783-786 68.Wolf F I and Cittadini A (2003), “Chemistry and biochemistry of magnesium”, Mol Aspects Med 24(1-3), p 3-9 69.Womersley R A (1958), “Metabolic effects of prolonged intravenous administration of magnesium lactate to the normal human”, J Physiol 143(2), p 300-306 70.Emanuel V., Adrian V., Ovidiu P., Gheorghe, (2005), “Isolation of a Lactobacillus plantarum strain used for obtaining a product for the preservation of fodders”, African Journal of Biotechnology 4(5), p 403408 71.Feillet-Coudray C, Rayssiguier Y (2005), “Magnesium: physiology, dietary sources and requirements”, Encycl Nutr., 2nd Edition Oxford, UK: Elsevier, p 191–195 72.Vormann J (2003), “Magnesium: nutrition and metabolism”, Mol Aspects Med (24), p 27-37 73.Guerrier Y (1967), “Magnesium lactate in the treatment of pharyngo-laryngeal paresthesia”, J Fr Otorhinolaryngol Audiophonol Chir Maxillofac 16(4), p 289-290 74.Novinyuk Ludmila (RU), Способ получения пищевой добавки лактата and магния (RU 2402241), http://www.findpatent.ru/patent/240/2402241.html accessed from PHỤC LỤC Phụ lục Phổ hồng ngoại Magnesi lactat Phụ lục Phổ khối Magnesi lactat Phụ lục Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân proton Magnesi lactat Phụ lục Phiếu kiểm nghiệm Magnesi lactat Phụ lục Cơ chế cách chuyển hóa loại Carbohydrat khác L acidophilus (A) Pathway reconstruction as predicted by transcriptional profiles PTS, red; GPH, yellow; ABC, green (B) Genetic loci of interest: man, glucose–mannose; Fru, fructose; Suc, sucrose; raff, raffinose; Lac, lactose–galactose loci; tre, trehalose; CCR, carbon catabolite repression loci [...]... phẩm chứa Magnesi lactat, tuy nhiên nguyên liệu hoàn toàn nhập khẩu từ nƣớc ngoài Với mong muốn đƣợc góp phần vào các nghiên cứu sản xuất nguyên liệu trong nƣớc, chúng tôi chọn đề tài: Nghiên cứu sinh tổng hợp Magnesi lactat từ Lactobacillus acidophilus , với các mục tiêu sau: - Khảo sát và lựa chọn một số điều kiện ảnh hưởng đến quá trình sinh tổng hợp Magnesi lactat khi nuôi cấy Lactobacillus acidophilus. .. Ngoài các nghiên cứu về sinh tổng hợp, Magnesi lactat còn đƣợc tổng hợp bằng phƣơng pháp hóa học dùng làm nguyên liệu trong công nghệ thực phẩm, tổng hợp Magnesi lactat từ acid lactic và Mg(OH)2 [13], [23], [74] 20 Mặc dù Magnesi lactat đã và đang đƣợc sử dụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực nhƣng hiện tại Việt Nam chƣa có nghiên cứu quy trình sản xuất đã công bố nào liên quan đến sản xuất Magnesi lactat. .. Magnesi lactat từ acid lactic và Magnesi hydroxyd [13], [23], [74] Phƣơng pháp đƣợc áp dụng rộng rãi tạo Magnesi lactat cho các ngành công nghiệp tổng hợp chất phụ gia thực phẩm, chất dẻo [48], [74] Phƣơng pháp tổng hợp hóa học có ƣu điểm là: Dễ thu đƣợc Magnesi lactat từ acid lactic, trong đó acid lactic lại đƣợc tổng hợp nhiều nguồn khác nhau [7], [6]; Chi phí sản xuất thấp; Thời gian ngắn tổng hợp ngắn... sung Magnesi dƣới dạng thuốc Hiệu quả của các dạng thuốc còn phụ thuộc nhiều vào sinh khả dụng của các dạng muối Magnesi [20], [52] Các dạng muối Magnesi vô cơ có sinh khả dụng dao động từ 2% (Magnesi oxyd) đến 20% (Magnesi clorua) [29], [47], [53], Magnesi hữu cơ nhƣ Magnesi L lactat có sinh khả dụng cao hơn (41%) [58] Ngoài tác dụng chữa bệnh, Magnesi lactat còn là nguyên liệu sản xuất Calci lactat, ... Giang Magnesi lactat dihydrat 470 mg Pyridoxin hydroclorid 5 mg Viên nén Viên nén bao đƣờng Glomed Imexpharm Mekophar Sanofi-Aventis Calci lactogluconat 29,40 g Calci lactobionat Viên nang mềm 6,40 g Magnesi lactat dihydrat 5,00 g 6 Hasco 1.2 Cá phƣơng pháp sản uất Magnesi lactat 1.2.1 Phương pháp tổng hợp hóa học Bằng các phƣơng pháp tổng hợp hóa học các nhà khoa học đã nghiên cứu tổng hợp đƣợc Magnesi. .. dụng Magnesi hydroxyd làm tác nhân trung hòa [37] Ben - Yoseph Eliahu và các cộng sự (1999) sản xuất Magnesi lactat từ vi sinh vật bằng phƣơng pháp lên men đƣờng, điều chỉnh pH về 6,5 bằng cách thêm Magnesi hydroxyd, nhiệt độ 50°C [18] Aharon Meir Eyal, Rod Fisher (1998) sản xuất Magnesi lactat thông qua việc sinh tổng hợp acid lactic trong quá trình lên men của vi khuẩn thuộc chi Lactobacillus, loài Lactobacillus. .. để thu đƣợc 9,5% Magnesi lactat [54] 19 Jan Van Krieken và các cộng sự (2007) đã điều chế Magnesi lactat bằng cách sử dụng một trong các hợp chất của Magnesi là Magnesi hydroxyd, Magnesi oxyd, Magnesi carbonat duy trì môi trƣờng lên men các carbohydrat ở pH 5 – 7 với chủng vi khuẩn thích hợp [38] Jan Van Krieken và các cộng sự (2005) đã kết tinh đƣợc Magnesi lactat rất tinh khiết từ dịch lên men nguồn... lỗ lọc… 1.4 Các nghiên cứu về điều chế Magnesi lactat bằng phƣơng pháp sinh tổng hợp lên men vi sinh vật Peter Johannes Marie Baets và các cộng sự (2013) đã sản xuất Magnesi lactat bằng cách lên men vi khuẩn sinh lactic B coagulans trong môi trƣờng chứa nguồn nguyên liệu thực vật, lá cây Cọ dầu nhiệt đới (Elaeis guineen-sis và Elaeis oleifera), có chứa 0,5% đến 9,5% carbohydrat và Magnesi hydroxyd... sản phẩm ch a Magnesi lactat trên thị trường T n iệt ƣợ Dạng sử dụng Th nh phần 1 Puramex MG Nguyên liệu Magnesi L - lactat dihydrat 2 Mag-Tab SR Viên bao giải phóng kéo dài Magnesi L - lactat dihydrat 84 mg STT 3 4 5 6 7 8 9 Magne B6 Stada Magnesi lactat dihydrat 180 mg Ống dung dịch Magnesi pidolat uống 936 mg 10 ml Pyridoxin hydroclorid 10,0 mg Magnesi B6 Magne B6 Glomed Magnesi B6 VB Magnesi B6 Magne... acid lactic, polylactid (nhựa sinh học PLA) là những sản phẩm thông dụng ứng dụng rộng rãi trong các ngành: dƣợc, thực phẩm, chất dẻo Phƣơng pháp tổng hợp hóa học Magnesi lactat thƣờng tạo ra dạng racemic Trong khi đó, phƣơng pháp vi sinh có thể tạo sản phẩm dạng L với hiệu suất cao và thân thiện với môi trƣờng Với các ƣu điểm của phƣơng pháp sinh tổng hợp, sản xuất Magnesi lactate bằng kỹ thuật lên men ... chứa Magnesi lactat, nhiên nguyên liệu hoàn toàn nhập từ nƣớc Với mong muốn đƣợc góp phần vào nghiên cứu sản xuất nguyên liệu nƣớc, chọn đề tài: Nghiên cứu sinh tổng hợp Magnesi lactat từ Lactobacillus. .. g Magnesi lactat dihydrat 5,00 g Hasco 1.2 Cá phƣơng pháp sản uất Magnesi lactat 1.2.1 Phương pháp tổng hợp hóa học Bằng phƣơng pháp tổng hợp hóa học nhà khoa học nghiên cứu tổng hợp đƣợc Magnesi. .. lọc… 1.4 Các nghiên cứu điều chế Magnesi lactat phƣơng pháp sinh tổng hợp lên men vi sinh vật Peter Johannes Marie Baets cộng (2013) sản xuất Magnesi lactat cách lên men vi khuẩn sinh lactic B