Bài thuyết trình phản ứng elisa

NHÓM 7 10 Bùi Thị Hà Nguyễn Thị Hà Võ Thị Châu Hà Bùi Ngọc Hạnh Bùi Thị Phương Hạnh Nguyễn Thị Bích Hạnh Trần Tiến Hải Trần Thanh Hoàng Nguyễn Hóa Đặng Ngọc Tuyết Phản ứng Elisa Định nghĩa: ELISA ( Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay_ Xét nghiệm hấp thu miễn dịch liên kết với enzyme) dựa kết hợp kháng nguyên Nguyên tắc: Sử dụng KT đơn dòng(Mabs) phủ bề mặt đĩa giếng Nếu có diện KN mẫu,KN tạo phức hợp với KT cố định giếng KT tự có gắn enzyme tạo thành phức Ðĩa plastic sử dụng để tiến hành xét nghiệm ELISA Có hai phương pháp xét nghiệm ELISA:   Phương pháp ELISA gián tiếp(indirect ELISA): dùng để phát kháng thể chuyên biệt huyết Phương pháp ELISA trực tiếp( direct ELISA): dùng để phát kháng nguyên mẫu xét nghiệm Các loại enzyme thường dùng:     Alkaline phosphatase Peroxydase Glucoxydase β-galactosidase ỨNG DỤNG TRONG THỰC PHẨM :  Phương pháp Elisa phát định lượng vi sinh thực phẩm thời gian vài sau tăng sinh  Phát độc tố tảo  Phát vi khuẩn E.coli, Salmonella, Staphylococcus aureus,sán gan… thực phẩm  Phát chất chloramphenicol (chất không phép có tôm, cá sản phẩm thuỷ sản khác)  Kiểm tra dư lượng kháng sinh thực phẩm,tàn dư thuốc diệt cỏ,thuốc trừ sâu… TRONG Y HỌC:  Là kĩ thuật xét nghiệm HIV nhằm phát kháng nguyên p24  Chuẩn đóan điều trị bệnh viêm gan siêu vi B C,bệnh ung thư  Ứng dụng để phát bệnh A cantonensis (bệnh viêm màng não) loại giun kí sinh phổi chuột gây  Xác định tỉ lệ nhiễm kí sinh trùng sốt rét miền Trung-Tây Nguyên Đối với trồng, vật nuôi    Chuẩn đoán bệnh Tristeza(tác nhân gây bệnh héo rũ) cam quýt Giám định diện BBTV(Banana Bunchy Top Virus) gây bệnh chùn đọt chuối Phát kháng thể chống Mycoplasma hyopnewmonia(MH) heo bộ KIT Elisa Thí nghiệm kiểm tra sốt dengue KIT Elisa ELISA Activity The ELISA Method Partially purified, inactivated HIV antigens pre-coated onto an ELISA plate Patient serum which contains antibodies If the patient is HIV+, then this serum will contain antibodies to HIV, and those antibodies will bind to the HIV antigens on the plate Anti-human immunoglobulin coupled to an enzyme This is the second antibody, and it binds to human antibodies Chromogen or substrate which changes color when cleaved by the enzyme attached to the second antibody Positive ELISA Test Negative ELISA Test Ưu điểm:  Ưu điểm quan trọng phương pháp ELISA độ nhạy cao, phát phức hợp nhỏ KN_KT, cho phép phát sớm tác nhân gây bệnh giai đoạn sớm mầm bệnh xâm nhiễm  Nhanh,thao tác đơn giản  Rẻ tiền, tốn sinh phẩm,hóa chất,số lượng mẫu lớn, thích hợp với việc phân tích nguyên liệu thô Nhược điểm: độ xác không cao Tài liệu tham khảo  Nguyễn Lân Dũng.1997.Vi sinh vật học.Nxb GD  Glick BR, Jackj P 1994 Molecular Biotechnology ASM Press Washington D.C USA Chopra VL, Anwan N 1990 Genetic Engineering and Biotechnology Oxford and IBH Publishing CO.PVT, Ltd UK Một số đề tài giáo viên sinh viên trường ĐH Nông Lâm www.sinhhocvietnam.com http://elearning.hueuni.edu www.genprice.com      THE END [...]... của BBTV(Banana Bunchy Top Virus) gây bệnh chùn đọt chuối Phát hiện kháng thể chống Mycoplasma hyopnewmonia(MH) ở heo bộ KIT Elisa Thí nghiệm kiểm tra sốt dengue bằng bộ KIT Elisa ELISA Activity The ELISA Method Partially purified, inactivated HIV antigens pre-coated onto an ELISA plate Patient serum which contains antibodies If the patient is HIV+, then this serum will contain antibodies to HIV, and... second antibody, and it binds to human antibodies Chromogen or substrate which changes color when cleaved by the enzyme attached to the second antibody Positive ELISA Test Negative ELISA Test Ưu điểm:  Ưu điểm quan trọng nhất của phương pháp ELISA là độ nhạy cao, có thể phát hiện được phức hợp nhỏ KN_KT, cho phép phát hiện sớm tác nhân gây bệnh ở giai đoạn sớm khi mầm bệnh mới xâm nhiễm  Nhanh,thao...Các loại enzyme thường dùng:     Alkaline phosphatase Peroxydase Glucoxydase β-galactosidase ỨNG DỤNG TRONG THỰC PHẨM :  Phương pháp Elisa có thể phát hiện và định lượng vi sinh trong thực phẩm trong thời gian vài giờ sau khi tăng sinh  Phát hiện độc tố trong tảo  Phát hiện vi khuẩn E.coli, Salmonella, Staphylococcus... thực phẩm,tàn dư thuốc diệt cỏ,thuốc trừ sâu… TRONG Y HỌC:  Là một trong các kĩ thuật xét nghiệm HIV nhằm phát hiện kháng nguyên p24  Chuẩn đóan và điều trị bệnh viêm gan siêu vi B và C,bệnh ung thư  Ứng dụng để phát hiện bệnh A cantonensis (bệnh viêm màng não) do loại giun kí sinh ở phổi chuột gây ra  Xác định tỉ lệ nhiễm kí sinh trùng sốt rét ở miền Trung-Tây Nguyên Đối với cây trồng, vật nuôi ... xét nghiệm ELISA Có hai phương pháp xét nghiệm ELISA:   Phương pháp ELISA gián tiếp(indirect ELISA) : dùng để phát kháng thể chuyên biệt huyết Phương pháp ELISA trực tiếp( direct ELISA) : dùng... hyopnewmonia(MH) heo bộ KIT Elisa Thí nghiệm kiểm tra sốt dengue KIT Elisa ELISA Activity The ELISA Method Partially purified, inactivated HIV antigens pre-coated onto an ELISA plate Patient serum.. .Phản ứng Elisa Định nghĩa: ELISA ( Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay_ Xét nghiệm hấp thu miễn dịch liên kết với