Định nghĩa Elisa, nguyên tắc Elisa, Có hai phương pháp xét nghiệm Elisa, các loại enzyme thường dùng là những nội dung chính trong Bài thuyết trình: Phản ứng Elisa. Mời các bạn cùng tham khảo.
Trang 11 Bùi Th Hà Bùi Th Hà ị ị
2 Nguy n Th Hà Nguy n Th Hà ễ ễ ị ị
3 Võ Th Châu Hà Võ Th Châu Hà ị ị
4 Bùi Ng c H nh Bùi Ng c H nh ọ ọ ạ ạ
5 Bùi Th Ph Bùi Th Ph ị ị ươ ươ ng H nh ng H nh ạ ạ
6 Nguy n Th Bích H nh Nguy n Th Bích H nh ễ ễ ị ị ạ ạ
7 Tr n Ti n H i Tr n Ti n H i ầ ầ ế ế ả ả
8 Tr n Thanh Hoàng Tr n Thanh Hoàng ầ ầ
9 Nguy n Hóa Nguy n Hóa ễ ễ
Đ ng Ng c Tuy t ặ ọ ế
Đ ng Ng c Tuy t ặ ọ ế
Trang 2Ph n ng ả ứ
Elisa
Trang 3Đ nh nghĩa ị
Đ nh nghĩa ị :
E LISA ( EnzymeLinked
ImmunoSorbent Assay_ Xét nghi m h p Xét nghi m h p ệ ệ ấ ấ
trên s k t h p gi a kháng nguyên và ự ế ợ ữ
trên s k t h p gi a kháng nguyên và ự ế ợ ữ
kháng th đ c hi u, ph n ng t o s n ể ặ ệ ả ứ ạ ả
kháng th đ c hi u, ph n ng t o s n ể ặ ệ ả ứ ạ ả
ph m có màu hay phát sáng. Trong đó ẩ
ph m có màu hay phát sáng. Trong đó ẩ
tính ch t h at hóa c a enzyme và đ ấ ọ ủ ộ
tính ch t h at hóa c a enzyme và đ ấ ọ ủ ộ
Trang 4Nguyên t c: ắ
Nguyên t c: ắ
S d ng KT đ n dòng(Mabs) ph ử ụ ơ ủ
S d ng KT đ n dòng(Mabs) ph ử ụ ơ ủ
b m t nh ng đĩa gi ng. N u có s ề ặ ữ ế ế ự
b m t nh ng đĩa gi ng. N u có s ề ặ ữ ế ế ự
hi n di n c a KN trong m u,KN s ệ ệ ủ ẫ ẽ
hi n di n c a KN trong m u,KN s ệ ệ ủ ẫ ẽ
t o ph c h p v i KT c đ nh trên ạ ứ ợ ớ ố ị
t o ph c h p v i KT c đ nh trên ạ ứ ợ ớ ố ị
gi ng và KT t do có g n enzyme t o ế ự ắ ạ
gi ng và KT t do có g n enzyme t o ế ự ắ ạ
thành m t ph c h p ộ ứ ợ
thành m t ph c h p ộ ứ ợ
kép(sandwich).Khi b sung c ch t đ c ổ ơ ấ ặ
kép(sandwich).Khi b sung c ch t đ c ổ ơ ấ ặ
hi u c a enzyme vào gi ng,enzyme xúc ệ ủ ế
hi u c a enzyme vào gi ng,enzyme xúc ệ ủ ế
tác ph n ng th y phân c ch t đ t o ả ứ ủ ơ ấ ể ạ
tác ph n ng th y phân c ch t đ t o ả ứ ủ ơ ấ ể ạ
ra các s n ph m có màu hay phát sáng ả ẩ
ra các s n ph m có màu hay phát sáng ả ẩ
Trang 9Ðĩa plastic sử dụng để tiến hành xét nghiệm ELISA
Trang 10Có hai ph ươ ng pháp xét nghi m ệ
Có hai ph ươ ng pháp xét nghi m ệ
ELISA:
Ph Ph ươ ươ ng pháp ELISA gián ti p(indirect ng pháp ELISA gián ti p(indirect ế ế
ELISA): dùng đ phát hi n kháng th chuyên ể ệ ể
ELISA): dùng đ phát hi n kháng th chuyên ể ệ ể
bi t trong huy t thanh ệ ế
bi t trong huy t thanh ệ ế
Ph Ph ươ ươ ng pháp ELISA tr c ti p( direct ng pháp ELISA tr c ti p( direct ự ự ế ế
ELISA): dùng đ phát hi n kháng nguyên ể ệ
ELISA): dùng đ phát hi n kháng nguyên ể ệ
trong m u xét nghi m ẫ ệ
trong m u xét nghi m ẫ ệ
Trang 11Các lo i enzyme th ạ ườ ng dùng:
Alkaline phosphatase
Peroxydase
Glucoxydase
β galactosidase
Trang 12NG D NG
Ứ NG D NG Ụ
TRONG TH C PH M Ự Ẩ
TRONG TH C PH M Ự Ẩ :
PhPhươương pháp Elisa có th phát hi n và đ nh lng pháp Elisa có th phát hi n và đ nh lểể ệệ ịị ượượng vi ng vi
sinh trong th c ph m trong th i gian vài gi sau khi ự ẩ ờ ờ
sinh trong th c ph m trong th i gian vài gi sau khi ự ẩ ờ ờ
tăng sinh
Phát hi n đ c t trong t o.Phát hi n đ c t trong t o.ệệ ộ ốộ ố ảả
Phát hi n vi khu n E.coli, Salmonella, Phát hi n vi khu n E.coli, Salmonella, ệệ ẩẩ
Staphylococcus aureus,sán lá gan… trong th c ph m.ự ẩ
Staphylococcus aureus,sán lá gan… trong th c ph m.ự ẩ
Phát hi n ch t chloramphenicol (ch t không đPhát hi n ch t chloramphenicol (ch t không đệệ ấấ ấấ ượược c
phép có trong tôm, cá và các s n ph m thu s n ả ẩ ỷ ả
phép có trong tôm, cá và các s n ph m thu s n ả ẩ ỷ ả
khác)
Ki m tra d lKi m tra d lểể ư ượư ượng kháng sinh trong th c ph m,tàn ng kháng sinh trong th c ph m,tàn ựự ẩẩ
Trang 13TRONG Y H C: Ọ
TRONG Y H C: Ọ
Là m t trong các kĩ thu t xét nghi m HIV Là m t trong các kĩ thu t xét nghi m HIV ộ ộ ậ ậ ệ ệ
nh m phát hi n kháng nguyên p24 ằ ệ
nh m phát hi n kháng nguyên p24 ằ ệ
Chu n đóan và đi u tr b nh viêm gan siêu vi Chu n đóan và đi u tr b nh viêm gan siêu vi ẩ ẩ ề ề ị ệ ị ệ
B và C,b nh ung th ệ ư
B và C,b nh ung th ệ ư
Ứ Ứ ng d ng đ phát hi n b nh ng d ng đ phát hi n b nh ụ ụ ể ể ệ ệ ệ ệ A. cantonensis
(b nh viêm màng não) do lo i giun kí sinh ệ ạ ở
(b nh viêm màng não) do lo i giun kí sinh ệ ạ ở
ph i chu t gây ra ổ ộ
ph i chu t gây ra ổ ộ
Xác đ nh t l nhi m kí sinh trùng s t rét Xác đ nh t l nhi m kí sinh trùng s t rét ị ị ỉ ệ ỉ ệ ễ ễ ố ố ở ở
mi n TrungTây Nguyên ề
mi n TrungTây Nguyên ề
Trang 14 Đ i v i cây tr ng, v t nuôi Đ i v i cây tr ng, v t nuôi ố ớ ố ớ ồ ồ ậ ậ
Chu n đoán b nh Tristeza(tác nhân gây b nh héo Chu n đoán b nh Tristeza(tác nhân gây b nh héo ẩẩ ệệ ệệ rũ) trên cây cam quýt
Giám đ nh s hi n di n c a BBTV(Banana Giám đ nh s hi n di n c a BBTV(Banana ịị ự ệự ệ ệệ ủủ
Bunchy Top Virus) gây b nh chùn đ t chu i.ệ ọ ố
Bunchy Top Virus) gây b nh chùn đ t chu i.ệ ọ ố
Phát hi n kháng th ch ng Mycoplasma Phát hi n kháng th ch ng Mycoplasma ệệ ểể ốố
hyopnewmonia(MH) heo.ở
hyopnewmonia(MH) heo.ở
Trang 15bộ KIT Elisa
Thí nghiệm kiểm tra sốt dengue bằng bộ KIT Elisa
Trang 16Patient serum which contains antibodies. If the patient is HIV+, then this serum will contain antibodies to HIV, and those antibodies will bind to the HIV antigens on the plate.
Antihuman immunoglobulin coupled to an enzyme. This is the second antibody, and it binds to human antibodies.
Chromogen or substrate which changes color when cleaved by the enzyme attached to the second antibody.
ELISA Activity The ELISA Method
Trang 17u đi m:
là đ nh y cao, có th phát hi n độ ạ ể ệ ược ph c h p ứ ợ
nh KN_KT, cho phép phát hi n s m tác nhân gây ỏ ệ ớ
b nh giai đo n s m khi m m b nh m i xâm ệ ở ạ ớ ầ ệ ớ
nhi m.ễ
R ti n, ít t n sinh ph m,hóa ch t,s lR ti n, ít t n sinh ph m,hóa ch t,s lẻ ềẻ ề ốố ẩẩ ấ ố ượấ ố ượng m u ng m u ẫẫ
l n, r t thích h p v i vi c phân tích đ i v i nguyên ớ ấ ợ ớ ệ ố ớ
li u thô.ệ
Nhược đi m:ể
Trang 18Tài li u tham kh o ệ ả
Nguy n Lân Dũng.1997.Vi sinh v t h c.Nxb GD Nguy n Lân Dũng.1997.Vi sinh v t h c.Nxb GD ễ ễ ậ ọ ậ ọ
Glick BR, Jackj P. 1994. Molecular Biotechnology. ASM Press. Washington D.C. USA
Chopra VL, Anwan N. 1990. Genetic Engineering and Biotechnology. Oxford and IBH Publishing
CO.PVT, Ltd. UK
M t s đ tài c a giáo viên và sinh viên trM t s đ tài c a giáo viên và sinh viên trộ ố ềộ ố ề ủủ ườường ĐH ng ĐH Nông Lâm
www.sinhhocvietnam.com
http://elearning.hueuni.edu
www.genprice.com
Trang 19THE END