Khảo sát khả năng kháng nấm men của dịch ép trích trái nhàu

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG NGUYỀN ANH QUÂN KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG NẤM MEN CỦA DỊCH ÉP TRÍCH TRÁI NHÀU Luận văn tốt nghiệp Ngành: CÔNG NGHỆ THựC PHẨM Cần Thơ, 2013 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG Luận văn tốt nghiệp Ngành: CÔNG NGHỆ THựC PHẨM Tên đề tài: KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG NẤM MEN CỦA DỊCH ÉP TRÍCH TRÁI NHÀU Giảo viên hướng dẫn: TS Lê Nguvễn Đoan Duy Sinh viên thưc hiên: Nguvễn Anh Quân MSSV: LT11611 Lóp: CB1108L1 Cần Thơ, 2013 Luận văn tôt nghiệp Trường Đại Học cần Thơ Luận văn đính kèm theo với tựa đề tài “KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG NẤM MEN CỦA DỊCH ÉP TRÍCH TRÁI NHÀU ” Nguyễn Anh Quân thực báo cáo hội đồng chấm luận văn thông qua Giáo viên hưÓTig dẫn Giáo viên phản biện Giáo viên phản biện Ts LÊ NGUYỄN ĐOAN DUY Cần thơ, ngày tháng năm 2013 Chủ tịch hội đồng Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phàm Luận văn tôt nghiệp Trường Đại Học cần Thơ LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cún thân Các số liệu kết trình bày luận văn trung thực chưa công bố công trình luận văn trước Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phàm Luận văn tôt nghiệp Trường Đại Học cần Thơ LỜI CẢM TẠ Trong trình học tập tìm hiểu để hoàn thành luận văn tốt nghiệp, phấn đấu thân, em nhận đu’ỢC nhiều giúp đỡ, hồ trợ thầy cô, anh chị bạn với lòng kính trọng biết ơn sâu sắc: Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy Lê Nguyễn Đoan Duy tận tình hướng dẫn, giảng dạy, giúp đờ em thực luận văn dù thầy bận rộn với công việc Đồng thời em gửi lời cảm ơn quý thầy cô Bộ môn Công nghệ thực phẩm cung cấp kiến thức quỷ báu cho em học tập trường anh chị bạn lóp Công Nghệ Thực Phẩm Liên Thông Khoá 37 nhiệt tình giúp đỡ em suốt thời gian vừa qua Vì thời gian có hạn, nên em chưa tìm hiếu hết yếu tố ảnh hưởng đến khả kháng nấm men dịch ép trích trái nhàu nên tránh khỏi thiếu sót Em xin đón nhận ý kiến, đóng góp thầy cô bạn Kính chúc tất quý thầy cô bạn sức khỏe, thành đạt sống Xin chân thành cảm ơn! Cần Thơ, Ngày tháng năm 2013 Sinh viên thực NGUYỄN ANH QUÂN Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phàm Luận văn tôt nghiệp Trường Đại Học cần Thơ TÓM LƯỢC Đe tài thực với mục tiêu khảo sát khả kháng nấm men dịch ép trích trái nhàu Các yêu tô ảnh hưởng đên khả kháng nâm men khảo sát trải nhàu sông trải nhàu chín, ép trích ngâm trích, có tiệt trùng không tiệt trùng với tỷ lệ pha loãng khác với môi trường Qua thí nghiệm khảo sát vê khả khảng năm men dịch trải nhàu với phương pháp ẻp trích khác nhau, có tiệt trùng không tiệt trùng, nguyên liệu sông nguyên liệu chín đêu có tác dụng kháng nâm men Saccharomyces cerevisỉae, khả kháng nấm men có khác biệt tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy: Tỷ lệ 1/1 (1 dịch trích trải nhàu (lOml) / ỉ môi trường (ỈOml)) khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h dịch ép trích trái nhàu sống có hiệu kháng nấm men tốt (không có khuân lạc/đĩa) Khả khảng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu song 24h dịch ngâm trích trải nhàu chín 24h tiệt trùng 121 °c 15 phút đạt hiệu khảng nâm men tôt Kêt cho thây hoạt chât sinh học có trải nhàu bền nhiệt khả khảng nấm men không thay đôi Tỷ lệ 1/3 (1 dịch trích trải nhàu (7 ml) / mỏi trường (13 mỉ)) khả khảng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ép trích trải nhàu sống, dịch ngâm trích trải nhàu sống 24h tiệt trùng 121 °c 15 phút dịch ngâm trích trải nhàu chín 24h tiệt trùng 121 °c 15 phút có hiệu khảng nấm men tốt, số khuân lạc dao động từ - 10/đĩa Dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h có hiệu khảng nấm men yếu số khuân lạc dao động từ 10 - 30/đĩa Tỷ lệ 1/6 (1 dịch trích trải nhàu (3,5ml) / môi trường (16,5 mỉ)) khả kháng nâm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ép trích trải nhàu sông, dịch ngâm trích trải nhàu sổng 24h tiệt trùng 121 °c 15 phút dịch ngâm trích trải nhàu chín 24h tiệt trùng 121 °c 15 phút có hiệu kháng nâm men tôt, sô khuân lạc dao động từ 10 - 20/đĩa Dịch ngâm trích trải nhàu sông 24h có hiệu khảng nâm men yêu hon sô khuân lạc dao động từ 30 - 40/đĩa MỤC LỤC Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phàm Luận văn tôt nghiệp 4.1.1 trích Trường Đại Học cần Thơ Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm DANH SÁCH BẢNG DANH SÁCH HÌNH Hình 2.1: Cây Nhàu Nhàu Hình 2.2: Nấm nem Saccharomyces Cerevisiea Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phàm V Luận văn tôt nghiệp Trường Đại Học cần Thơ Chưong 1: MỞ ĐÀU 1.1 ĐẶT VẤN ĐÈ Noni tên Việt Nam nhàu, hoàn toàn thần dược, nhàu từ lâu vị thuốc đông y chữa số bệnh tật, có người ngâm rượu uống để bồi bổ sức khỏe Ở chợ quê đồng sông cửu long, An giang từ xa xưa có quầy rau bán trái nhàu làm thực phẩm Trái nhàu thu hoạch tù’ nhàu - Monrinda citriíblia mọc hoang trồng số địa phưong Nam Bộ Nam Trung Bộ Nhân dân ta ăn nhàu với muối để làm thuốc nhuận tràng, chữa lị, điều kinh, trị ho, hen, nhân dân ta dùng rễ nhàu để trị đau lưng, nhức mỏi thể, nhàu để điều trị mụn nhọt, trị lị nói chung nhàu sử dụng thường xuyên Ở số nước Đông Nam Á Campuchia, Thái lan sử dụng trái nhàu mục đích nước ta Năm 1954 Bác sĩ Đặng Văn Hồ bác sĩ y khoa nước ta nghiên cúu sử dụng rễ nhàu để điều trị bệnh cao huyết áp Sau giáo sư viện sĩ Đặng Hồng Vận - Cháu bác sĩ Hồ tiếp tục nghiên cứu sâu tác dụng dược lý dạng bào chế rễ nhàu, năm 2003 xí nghiệp dược phẩm trung ương 25 Tp HCM sản xuất thuốc Upamorin từ rễ cầy nhàu đế điều trị ung thư vòm họng, điều trị viêm gan Các tác giả Rosa Tundis, Monica R.Loizzo, Federca Menicbini, Giancarlo A.statti Francesco tổng hợp công trình nghiên cứu Iridoids 141 tác giả giai đoạn 1986-2007, cho thấy ĩridoids có tác dụng sinh học quan trọng: Tác dụng bảo vệ tế bào thần kinh Tác dụng chống ung thư Tác dụng chống viêm, tăng cường miễn dịch Tác dụng chống oxy hóa Tác dụng lên hệ tim mạch Tác dụng giảm đường huyết Tác dụng kháng khuẩn Iridoids có tác dụng làm lành vết thương, kích thích sản xuất collagen, tăng tiết mật, chống rối loạn tâm thần phụ nữ mãn kinh Iridoids nhóm chất Cyclopenta (C) Pyran Monoterpenoiđs thuộc nhóm Glycosid, thực vất sản xuất chế phòng chống nhiễm khuẩn Iridoids có nhiều loại ba kích, đại, núc nác, nữ lang, cỏ roi ngựa Trong nhàu, có hàm lượng Iridoids cao, ngược lại hàm lượng Iridoids thấp khác Trong hoạt chất sinh học Noni, Iridoids chiếm tới 75% 25% thành phần khác Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phàm Luận văn tôt nghiệp Trường Đại Học cần Thơ 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN cứu Bước đầu khảo sát khả kháng nấm men dịch ép trích ly tù’ trái nhàu để làm tiền đề cho ứng dụng chế biến thực phấm từ trái nhàu bảo quản số loại thực phẩm hoạt chất sinh học tự' nhiên có trái nhàu Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phàm 10 Chương 3: PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu ».Ị>» 3.1 PHƯƠNG TIỆN NGHIÊN cứu 3.1.1 Thòi gian địa điếm Thời gian thực từ ngày 03/01/2013 đến ngày /05/2013 Địa điểm: tiến hành thí nghiệm phòng DI06 thuộc Bộ môn Công Nghệ Thực Phâm Khoa Nông Nghiệp & Sinh Học ứng Dụng - Trường Đại Học cần Thơ 3.1.2 Hóa chất sử dụng Thạch agar (loại thượng hạng mua cửa hàng hóa chất Niềm Nam) Nước cất Nước muối sinh lý 0,85% 3.1.3 Nguyên liệu môi trường nuôi cấy Trái nhàu trồng Huyện Phong Điền - TP cần Thơ Nấm men S.cerevisiae loại làm bánh mì, dạng khô Môi trường thạch khoai tây 3.1.4 Dụng cụ, thiết bị Buồng cấy vô trùng, tủ ủ Cân kỹ thuật Que trang Đèn cồn, bếp điện, bếp gas Pipét Brix kế pH kế Bình tam giác loại 250 ml Đĩa Petri số dụng cụ khác cần dùng phòng thí nghiệm 3.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu 3.2.1 Ép trích ly dịch triết trái nhàu Trái nhàu sau hái bảo quản nơi khô thoáng, tiến hành chọn lựa trái có khối lượng mùa sắc tương thích (quả chín có màu vàng chanh, chín có màu mỡ gà) rủa để tiến hành xử lý nguyên liệu: Tiến hành nghiền khô ép trích ly dịch trái nhàu sau tiến hành lọc giấy lọc Sau lọc xong, tiến hành đo pH Brix, đậy lại giấy bạc bảo quản tủ mát Tiến hành nghiền nuớc với tỉ lệ 1: ngâm trích 24h sau ép trích, tiến hành lọc qua giấy lọc, kiếm tra pH °Brix, đậy lại giấy bạc bảo quản tủ mát pH dịch nhàu dao động không lớn 3,9 - 4,5 °Brix dịch nhàu không cao 2- (dịch ngâm trích), 5-6 (ép trích) 3.2.2 Pha chế môi truừng thạch khoai tây *Công thức: Khoai tây: 200 gr Đường dextrose: 20 gr Thạch agar: 16 gr Nước: 1000 ml *Cách pha: Khoai tây rủa cắt thành hình khối cm, sau chọn rủa chai lọ để dùng Cho khoai vào nồi, thêm nước vừa đủ lít, đun sôi khoảng 15 đến 20 phút, gạn lấy dịch (nuớc chiết khoai tây), thêm nước đến lít Thêm đường, agar - khuấy tay đun nhỏ lửa cho tan hết agar Khử trùng 121 °c 15 phút, sau đế nguội lại nhiệt độ phòng tiến hành đỗ đĩa petri Neu sau thời gian thấy nốt, đốm bề mặt thạch môi truòng chua hoàn toàn đuợc tiệt trùng 3.2.3 Pha chế dung dịch nấm nem Nấm nem Saccharomyces cerevisiae đuợc cho vào 40ml/0,100g dung dịch muối sinh lý, lắc nhẹ đậy nút lại 3.3 BỐ TRÍ THÍ NGHIỆN 3.3.1 Thí nghiệm 1: khảo sát khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu chín (trái nhàu: nước 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng vói môi trưòng nuôi cấy tiệt trùng ỏ’ 121 °c 15 phút (ký hiệu: A) Mục đích: khảo sát khả kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu chín (trái nhàu: nước 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy tiệt trùng 121 °c 15 phút để xác định khả chịu nhiệt kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu chín để so sánh, đối chiếu với thí nghiệm sau Phưong pháp thực Lần 1: chuẩn bị 10 đĩa petri 62 ml dịch trích trái nhàu chín, dịch nấm men 0,100g/40ml nước muối sinh lý 0,85% Ký hiệu (A 1: 1) (1 dịch trích trái nhàu (lOml) / môi trường (10ml)) sử dụng ống đong đế đong 30 ml dịch ngâm trích trái nhàu 30 ml môi trường cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ để làm môi trường với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trường có pha dịch ngâm trích môi trường pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 °c 15 phút Sau tiệt trùng xong, đế nguội tự nhiên tiến hành đồ đĩa, tiến hành đỗ đĩa ta đồ đTa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa đe môi trường đong lại tự nhiên Khi môi trường thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1 ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch đế khô tự' nhiên Ký hiệu (A 1: 3) (1 dịch trích trái nhàu (7ml) / môi trường (13ml)) sử dụng ống đong để đong 21 ml dịch ngâm trích trái nhàu 39 ml môi trường cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ để làm môi trường với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trường có pha dịch ngâm trích môi trường pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 °c 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tụ- nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đỗ đĩa ta đồ mồi đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa đế môi trường đông lại tự nhiên Khi môi trường thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1 ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự' nhiên Ký hiệu (A 1: 6) (1 dịch trích trái nhàu (3,5ml) / môi trường (16,5ml)) sử dụng ống đong đe đong 10,5 ml dịch ngâm trích trái nhàu 49,5 ml môi trường cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ đế làm môi trường với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trường có pha dịch ngâm trích môi trường pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 °c 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đồ đĩa ta đỗ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trường đông lại tự' nhiên Khi môi trường thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1 ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch đế khô tự nhiên Ký hiệu (A Đối chứng) sử dụng 20ml môi trường tiệt trùng đỗ đĩa để đối chứng, để môi trường thạch nguội tự nhiên dùng pipet hút 0,1 ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tụ' nhiên Đem tất đĩa vô tủ ủ nhiệt độ 37 °c 48h thi lấy quan sát nhận xét khả kháng nấm men Mọi thao tác thực tủ cấy vô trùng Thí nghiệm đuợc tiến hành với lần lặp lại kết lấy giá trị trung bình 3.3.2 Thí nghiệm 2: khảo sát khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống (trái nhàu: nước 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng vói môi trưòng nuôi cấy tiệt trùng ỏ’ 121 °c 15 phút (ký hiệu: B) Mục đích: khảo sát khả kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu sống (trái nhàu: nước 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy tiệt trùng 121 °c 15 phút để xác định khả chịu nhiệt kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu sống để so sánh, đối chiếu vói thí nghiệm sau Phuơng pháp thực Lần 1: chuân bị 10 đĩa petri 62 ml dịch trích trái nhàu sống, dịch nấm men 0,100g/40ml nước muối sinh lý 0,85% Ký hiệu (B 1: 1) (1 dịch trích trái nhàu (lOml) / môi trường (10ml)) sử dụng ống đong để đong 30 ml dịch ngâm trích trái nhàu sống 30ml môi trường cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ đế làm môi trường với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trường có pha dịch ngâm trích môi trường pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 °c 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đồ đĩa, tiến hành đỗ đĩa ta đỗ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trường đông lại tự' nhiên Khi môi trường thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1 ml dung dịch nấm men vào đìa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch đế khô tự nhiên Ký hiệu (B 1: 3) (1 dịch trích trái nhàu (7ml) / môi trường (13ml)) sử dụng ống đong đế đong 21 ml dịch ngâm trích trái nhàu sống 39 ml môi trường cho vào bình tam giác 250 ml, lắc nhẹ để làm môi trường với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trường có pha dịch ngâm trích môi trường pha dịch ngâm trích ở’ nhiệt độ 121 °c 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đồ đĩa ta đỗ mồi đìa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa đế môi trường đông lại tự nhiên Khi môi trường thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1 ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Ký hiệu (B 1: 6) (1 dịch trích trái nhàu (3,5ml) / môi trường (16,5ml)) sử dụng ống đong để đong 10,5 ml dịch ngâm trích trái nhàu sống 49,5 ml môi trường cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ đế làm môi trường với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trường có pha dịch ngâm trích môi trường pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 °c 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đồ đĩa ta đỗ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trường đông lại tự' nhiên Khi môi trường thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1 ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch đế khô tự nhiên Ký hiệu (B Đối chửng) sử dụng 20ml môi trường tiệt trùng đỗ đĩa để đối chứng, để môi trường thạch nguội tự nhiên dùng pipet hút 0,1 ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Đem tất đĩa vô tủ ủ nhiệt độ 37 °c 48h thi lấy quan sát nhận xét khả kháng nấm men Mọi thao tác thực tủ cấy vô trùng Thí nghiệm tiến hành với lần lặp lại kết lấy giá trị trung bình 3.3.3 Thí nghiệm 3: khảo sát khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống (trái nhàu: nước 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng vói môi trường nuôi cấy (ký hiệu: M) Mục đích: khảo sát khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống (trái nhàu: nước 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy để xác định khả kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu sống để so sánh, đối chiếu với thí nghiệm sau Phuơng pháp thực Lần 1: chuẩn bị 10 đĩa petri 62 ml dịch trích trái nhàu sống, dịch nấm men 0,100g/40ml nước muối sinh lý 0,85% Ký hiệu (M 1: 1) (1 dịch trích trái nhàu (lOml) / môi trường (lOml)) sử dụng ống đong đế đong 30 ml dịch ngâm trích trái nhàu sống 30 ml môi trường cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ để làm môi trường với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trường có pha dịch ngâm trích môi trường pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 °c 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đồ đĩa ta đồ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trường đong lại tự nhiên Khi môi trường thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1 ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Ký hiệu (M 1: 3) (1 dịch trích trái nhàu (7ml) / môi trường (13ml)) sử dụng ống đong để đong 21 ml dịch ngâm trích trái nhàu sống 39 ml môi trường cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ đế làm môi trường với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trường có pha dịch ngâm trích môi trường pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 °c 15 phút Sau tiệt trùng xong, đế nguội tự nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đỗ đĩa ta đỗ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trường đông lại tụ - nhiên Khi môi trường thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1 ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Ký hiệu (M 1: 6) (1 dịch trích trái nhàu (3,5 ml) / môi trường (16,5 ml)) sử dụng ống đong để đong 10,5 ml dịch ngâm trích trái nhàu sống 49,5 ml môi trường cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ để làm môi trường với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trường có pha dịch ngâm trích môi trường pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 °c 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự’ nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đồ đĩa ta đồ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa đe môi trường đông lại tự nhiên Khi môi trường thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1 ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự’ nhiên Ký hiệu (M Đối chứng) sử dụng 20 ml môi trường tiệt trùng đỗ đĩa để đối chúng, để môi trường thạch nguội tự nhiên dùng pipet hút 0,1 ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tụ- nhiên Đem tất đĩa vô tủ ủ nhiệt độ 37 khả kháng nấm men °c 48h thi lấy quan sát nhận xét Mọi thao tác thực tủ cấy vô trùng Thí nghiệm tiến hành với lần lặp lại kết lấy giá trị trung bình 3.3.4 Thí nghiệm 4: khảo sát khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ép trích trái nhàu sống theo tỷ lệ pha loãng vói môi trường nuôi cấy (ký hiệu: F) Mục đích: khảo sát khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevỉsiae dịch ép trích trái nhàu sống (trái nhàu: nước 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy đế xác định khả kháng nấm men dịch ép trích trái nhàu sống để so sánh, đối chiếu với thí nghiêm sau Phưong pháp thực Lần 1: chuẩn bị 10 đĩa petri 62 ml dịch trích trái nhàu sống, dịch nấm men 0,100g/40ml nước muối sinh lý 0,85% Ký hiệu (F 1: 1) (1 dịch trích trái nhàu (lOml) /1 môi trường (10ml)) sử dụng ống đong đế đong 30ml dịch ngâm trích trái nhàu sống 30ml môi trường cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ để làm môi trường với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trường có pha dịch ngâm trích môi trường pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 °c 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đồ đĩa ta đồ mồi đTa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trường đông lại tự nhiên Khi môi trường thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1 ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch đế khô tự' nhiên Ký hiệu (F 1: 3) (1 dịch trích trái nhàu (7 ml) / môi trường (13 ml)) sử dụng ống đong để đong 21 ml dịch ngâm trích trái nhàu sống 39 ml môi trường cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ đế làm môi trường với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trường có pha dịch ngâm trích môi trường pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 °c 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tụ- nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đỗ đĩa ta đỗ mồi đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trường đông lại tự nhiên Khi môi trường thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1 ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự' nhiên Ký hiệu (F 1: 6) (1 dịch trích trái nhàu (3,5ml) / môi trường (16,5 ml)) sử dụng ống đong đế đong 10,5 ml dịch ngâm trích trái nhàu sống 49,5 ml môi trường cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ đế làm môi trường với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trường có pha dịch ngâm trích môi trường pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 °c 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đồ đĩa, tiến hành đồ đĩa ta đỗ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trường đông lại tự' nhiên Khi môi trường thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1 ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch đế khô tự nhiên Ký hiệu (F Đối chứng) đỗ đĩa đối chứng 20ml môi trường, đế môi trường thạch nguội tụ- nhiên dùng pipet hút 0,1 ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch đế khô tự nhiên Đem tất đĩa vô tủ ủ nhiệt độ 37 khả kháng nấm men °c 48h thi lấy quan sát nhận xét Mọi thao tác thực tủ cấy vô trùng Thí nghiệm tiến hành với lần lặp lại kết lấy giá trị trung bình Chưong 4: KÉT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 KÉT QUẢ THÍ NGHIỆM 4.1.1 Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisme dịch ngâm trích trái nhàu chín (trái nhàu: nước 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy tiệt trùng 121 °c 15 phút (ký hiệu: A) Ket khảo sát khả kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu chín tiệt trùng 121°c theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy có kháng nấm nem Tuy nhiên khả kháng nấm men thay đối theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy Mầu 1: (1 dịch trích trái nhàu (lOml) / môi trường (10ml)): có khả kháng nấm men tốt với lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc nhiều 2/đĩa Mầu 1: (1 dịch trích trái nhàu (7 ml) / môi trường (13 ml)): có khả kháng nấm men tốt với lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc 2/đĩa Mầu 1: (1 dịch trích trái nhàu (3,5ml) / môi trường (16,5 ml)): có khả kháng nấm men không tốt tỷ lệ 1/3 Với lần thí nghiệm lập lại, số khuân lạc 10 nhiều hon 20 khuẩn lạc/đĩa Mầu đối chứng: nấm men phát triển khắp bề mặt thạch Bảng 4.1: Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu chín (trái nhàu: nước 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy tiệt trùng 121 oc 15 phút stt SỐ lần thí nghiệm Lần Lần 'l Lần Bố trí thí nghiệm Mầu A đối chứng Mầu A 1: Mầu A 1: Mầu A 1: Mầu A đối chúng Mầu A 1: Mầu A 1: Mầu A 1: Mầu A đối chứng Mầu A 1: Mầu A 1: Mầu A 1: Ket thí nghiệm Nấm men phát triến toàn bề mặt đĩa Có khuẩn lạc nhỏ Có nhiều hon khuan lạc Có nhiều hon 10 khuẩn lạc Nấm men phát triển toàn bề mặt đĩa Có khuẩn lạc nhỏ Có khuẩn lạc nhỏ Có nhiều hon 20 khuẩn lạc Nấm men phát triến toàn bề mặt đĩa Không có khuẩn lạc Có khuẩn lạc nhỏ Có nhiều 20 khuấn lạc Hình kết quà thí nghiệm (Hình Ị , phụ lục ỉ ) 4.1.2 Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy tiệt trùng 121 °c 15 phút (ký hiệu: B) Ket khảo sát khả kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu sống tiệt trùng 121 °c theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy có khả kháng nấm nem tưong tự dịch ngâm trích trái nhàu chín tiệt trùng 121°c theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy Tuy nhiên khả kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu sống tiệt trùng 121°c yếu hon thay đối theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy Mau A 1: (1 dịch trích trái nhàu (lOml) / môi trường (10ml)): có khả kháng nấm men tốt với lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc tù' - 2/đĩa Mau A 1: (1 dịch trích trái nhàu (7 ml) / môi trường (13 ml)): có khả kháng nấm men tốt với lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc 10/đĩa Mau A 1: (1 dịch trích trái nhàu (3,5ml) / môi trường (16,5 ml)): có khả kháng nấm men không tốt mẫu (A 1:3) Với lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc hon 20/đĩa Mầu đối chứng: nấm men phát triển khắp bề mặt thạch Bảng 4.2: Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h theo tỷ lệ pha loãng vói môi trường nuôi cấv tiệt trùng 121 15 phút °c stt Số lần thí nghiệm Lần Lần Lần Bố trí thí nghiệm Mầu B đối chứng Mầu B 1: Mầu B 1: Mầu B 1: Mầu B đối chứng Kết thí nghiệm Mầu B 1: Mầu B 1: Mầu B 1: Mầu B đối chứng Có nhiều khuấn lạc nhỏ Có nhiều 10 khuẩn lạc nhỏ Có nhiều 20 khuấn lạc nhở Nấm men phát triên toàn bề mặt đĩa Mầu B 1: Mầu B 1: Mầu B 1: Có nhiều khuấn lạc nhỏ Có nhiều 10 khuấn lạc nhỏ Có nhiều 20 khuẩn lạc nhỏ Nấm men phát triên toàn bề mặt đĩa Không có khuẩn lạc Có nhiều 10 khuấn lạc nhỏ Có nhiều 20 khuấn lạc nhỏ Nấm men phát triên toàn bề mặt đĩa Hình kết thí nghiệm (Hình 2, phụ lục ỉ) 4.1.3 Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy (ký hiệu: M) Kết khảo sát khả kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi truờng nuôi cấy có khả kháng nấm nem tương tự dịch ngâm trích trái nhàu chín dịch ngâm trích trái nhàu sống tiệt trùng 121°c theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy Tuy nhiên khả kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu sống yếu hon dịch ngâm trích trái nhàu chín dịch ngâm trích trái nhàu sống tiệt trùng 121°c thay đổi theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy Mầu B 1: (1 dịch trích trái nhàu (lOml) / môi trường (10ml)): có khả kháng nấm men tốt với lần thí nghiệm lập lại, khuẩn lạc/đĩa Mầu B 1:3(1 dịch trích trái nhàu (7 ml) / môi trường (13 ml)): có khả kháng nấm men tốt với lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc hon 10 nhiều 30/đĩa Mầu Bl: (1 dịch trích trái nhàu (3,5ml) / môi trường (16,5 ml)): có khả kháng nấm men không tốt mẫu (B 1: 3) Với lần thí nghiệm lập lại, số khuấn lạc 30 nhiều 40/đĩa Mau đối chứng: nấm men phát triển khắp bề mặt thạch Bảng 4.3: Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy stt số lần thí nghiệm Lần Lần Lần Bố trí thí nghiệm Mầu M đối chứng Mầu M 1: Mầu M 1: Mầu M 1: Mầu M đối chứng Mầu M 1: Mầu M 1: Mầu M 1: Mầu M đổi chứng Mầu M 1: Mầu M 1: Mầu M 1: Ket thí nghiệm Nấm men phát triến toàn bề mặt đĩa Không có khuẩn lạc Có nhiều 30 khuẩn lạc nhỏ Có nhiều 40 khuân lạc nhỏ Nấm men phát triến toàn bề mặt đĩa Không có khuẩn lạc Có nhiều 10 khuấn lạc nhỏ Có nhiêu 40 khuân lạc nhỏ Nấm men phát triến toàn bề mặt đĩa Không có khuân lạc Có nhiêu 10 khuân lạc nhỏ Có nhiều 30 khuân lạc nhỏ Hình kết thí nghiệm (Hình 3, phụ lục II) 4.1.4 Khá kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ép trích trái nhàu sống theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy (ký hiệu: F) Ket khảo sát khả kháng nấm men dịch ép trích trái nhàu sống theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy có khả kháng nấm nem tương tự dịch ngâm trích trái nhàu chín dịch ngâm trích trái nhàu sống tiệt trùng 121°c theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy Tuy nhiên khả kháng nấm men dịch ép trích trái nhàu sống yếu hon dịch ngâm trích trái nhàu chín dịch ngâm trích trái nhàu sống tiệt trùng 121°c thay đổi theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy Mầu M 1: (1 dịch trích trái nhàu (lOml) / môi trường (10ml)): có khả kháng nấm men tốt với lần thí nghiệm lập lại, khuẩn lạc/đĩa Mầu M 1: (1 dịch trích trái nhàu (7 ml) / môi trường (13 ml)): có khả kháng nấm men tốt với lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc nhiều o/đĩa Mầu M 1: (1 dịch trích trái nhàu (3,5ml) / môi trường (16,5 ml)): có khả kháng nấm men không tốt tỷ lệ 1/3 Với lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc 20/đĩa Mầu đối chúng: nấm men phát triển khắp bề mặt thạch Bảng 4.4: Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae cua dịch ép trích trái nhàu sống theo tỷ lệ pha loãng vói môi trưòng nuôi cấy stt o J Số lần thí nghiệm Lần Lần Lần Bố trí thí nghiệm Mau F đối chứng McẫuF 1: Mầu F 1: McẫuF 1:6 Mầu F đối chứng Mầu F 1: Mầu F 1: McẫuF 1:6 Mau F đối chứng Mầu F 1: Mầu F 1: McẫuF 1:6 Ket thí nghiệm Nấm men phát triển tốt Không có khuẩn lạc Có nhiêu hon khuân lạc nhỏ Có nhiều 20 khuẩn lạc nhỏ Nấm men phát triên tốt Không có khuân lạc Có nhiều 10 khuẩn lạc nhỏ Có nhiều 20 khuẩn lạc nhỏ Nấm men phát triển tốt Không có khuân lạc Có nhiều hon 10 khuấn lạc nhỏ Có nhiều 20 khuẩn lạc nhỏ Hình két thí nghiệm ịHình 4, phụ lục II) 4.2 THẢO LUẬN Qua thí nghiệm khảo sát khả kháng nấm men dịch trái nhàu với phương pháp ép trích khác nhau, có tiệt trùng không tiệt trùng, nguyên liệu sống nguyên liệu chín có tác dụng kháng nấm men Saccharomyces cerevisiae, khả kháng nấm men có khác biệt tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy Kết nghiên cứu phù họp với số kết nghiên cứu khác có liên quan đến tác dụng kháng sinh trái nhàu: Theo kết số nghiên cứu khác, noni ức chế phát triển số vi khuân, hạn Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Proteus morgaii, Bacillus subtỉlỉs, Escherichia coỉi, Heỉicobacter pylori, vi khuân Saỉmoneỉỉa Shigeỉỉa (Atkinson, 1956) Tác giả công bố tác dụng chống vi khuẩn diện họp chất phenolic acubin, L- asperuloside, scopoletin anthraquinones khác Theo nghiên cún khác hoạt động kháng khuẩn nhóm: (1) vi khuẩn: BaciUus subtilis, Escherichia coli, Micrococcus ỉuteus, Sarcina vàng, Staphilococcus aureus, (2) nấm: Aspergiỉlus nỉger, Candida albicans, Saccharomyces sake xác định cách xét nghiệm khuếch tán đĩa ủ 24 42-44 °c, sau tiến hành đo đường kính vùng ức chế Kết đường kính kháng khuân là: Baciỉlus subtilis 14,0 Ìĩim, Escherichia coli 12,5 mm, Micrococcus luteus 13,0 mm , Sarcina 6,8 min, Candida albicans 7,5 min, Saccharomyces sake 6,3 mm (W Xiang et al, 2008) Dịch nhàu có khả kháng nấm men dịch nhàu có hoạt tính sinh học Iridoids, tác dụng sinh học Nhàu nhàu chủ yếu Tridoids định, có 16 loại Iridoids (Roso, 2008) Tác dụng kháng sinh: Isoplumericin, Pĩumericin, Gaĩioside, Gardenoside, Gentiopicroside có tác dụng kháng với nhiều loại vi khuẩn tụ cầu trùng vàng, E.coỉi, Bacỉllus Các Acibin, Aleuropein, Arbortristoside A c Lucidumoside có tác dụng ức chế virus hô hấp Các Plumericin, Isoplumericin, Epoxygaertnroside, Methoxy - Gaertnroside có tác dụng ức chế ký sinh trùng amip, kỷ sinh trùng sốt rét (Roso, 2008 ) CHƯƠNG V KÉT LUẬN VÀ ĐÈ NGHỊ ^^^ 5.1 KÉT LUẬN Sau tiến hành thí nghiệm khảo sát khả kháng nấm men dịch ép trích trái nhàu với tỉ lệ pha loãng dịch nhàu có tiệt trùng tiệt trùng, dịch ép trích ngâm trích, trái nhàu sống trái nhàu chín, rút kết luận sau: Tỷ lệ 1/1 (1 dịch trích trái nhàu (lOml) / môi trường (10ml)) khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h dịch ép trích trái nhàu sống có hiệu kháng nấm men tốt (không có khuẩn lạc/đĩa) Khả kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h dịch ngâm trích trái nhàu chín 24h tiệt trùng 121 °c 15 phút đạt hiệu kháng nấm men tốt Ket cho thấy hoạt chất sinh học có trái nhàu bền nhiệt khả kháng nấm men không thay đối Tỷ lệ 1/3 (1 dịch trích trái nhàu (7 ml) / môi trường (13 ml)) khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ép trích trái nhàu sống, dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h tiệt trùng 121 °c 15 phút dịch ngâm trích trái nhàu chín 24h tiệt trùng 121 °c 15 phút có hiệu kháng nấm men tốt, số khuẩn lạc dao động tù' - o/đĩa Dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h có hiệu kháng nấm men yếu số khuẩn lạc dao động từ 10 - 30/đia Tỷ lệ 1/6(1 dịch trích trái nhàu (3,5ml) / môi trường (16,5 ml)) khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ép trích trái nhàu sống, dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h tiệt trùng 121 °c 15 phút dịch ngâm trích trái nhàu chín 24h tiệt trùng 121 °c 15 phút có hiệu kháng nấm men tốt, số khuẩn lạc dao động tù' 10 - 20/đĩa Dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h có hiệu kháng nấm men yếu số khuẩn lạc dao động từ 30 - 40/đia 5.2 ĐÈ NGHỊ Vì thời gian có hạn trang thiết bị hạn chế nên chưa tiến hành tiến hành nghiên cứu hết tất yếu tố ảnh hưởng đến khả kháng nấm men dịch trích trái nhàu Vì nghiên cúu tiếp tục thí nghiệm sau: Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến khả kháng nấm men dịch ép trích trái nhàu Khảo sát khả kháng khuân số loại vi khuân gây bệnh như: Staphyỉococcus aureus, Saỉmonelỉa, Bacillus subtilis Luận văn tôt nghiệp Trường Đại Học cần Thơ TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt Đỗ Tất Lợi, 2004, Những thuốc vị thuốc Việt Nam - Nhà xuất Y học Đồ Tất Lợi, 2006, Những thuốc động vật làm thuốc - Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Nguyễn Đức Lượng, 2002, THÍ NGHIỆM CÔNG NGHỆ SINH HỌC, Tập 2, Truông Đại Học Bách Khoa TP.HCM Lương Đức Phẩm, 1998, Công nghệ vi sinh vật NXB Nông Nghiệp Nhan Minh Trí, Teshome Edae Jiru, Naznin Sultana, Michael Wawire, 2001, FERMENTATION PROCESSING Hoạt tính kháng khuẩn thực vật úc khô trực tiếp nhanh chóng kiểm tra Tạp chí úc nghiệm Sinh học 34, 17-26 Thành phần hóa học Morinda citriíolia ức chế trình oxy hóa copperinduced lipoprotein mật độ thấp Tạp chí Nông nghiệp Hóa học thực phẩm 52,5843-5848 Tài liệu tiếng anh Chunhieng, M.T., 2003 DeVeloppement de nouveaux ALIMENTS sante ' Tropicale: ứng dụng 'la noix du Bre'sil Bertholettia excelsa et au de Cambodge Morinda Tiến sĩ luận án, INPL, Pháp Chunheng, T., Hay, L & Montet, D (2004) Nghiên cứu chi tiết nước thành phần noni (Morinda) trái từ Campuchia Trái 60, 13-24 DITTMAR, A., 1993 Morinda L.-Sử dụng địa Samoa thuốc Tạp chí loại thảo mộc, gia vị thực vật Y học 1, 77-92 Heinicke, R.M., 1985 Các thành phần hoạt tính dược lý Noni Morton, J.F năm 1992 Các Noni biển, hay Án Độ dâu (Morinda citriíòlia, Rubiaceae) số người thân"" đầy màu sắc Sinh thái Botony 46, 241- 256 Nelson, s.c năm 2001 Trồng trọtNoni ỞHawaii Trái Nuts 4, 1-4 Rosa Tundis, Monica R.Loizzo, Federca Menicbini, Giancarlo A.statti Francesco Thành phần Antitubercular từ phần hexane Morinda L (Rubiaceae) Phytotherapic nghiên cứu 16, 683-685 Wang, MY, Tây, BJ, Jensen, CJ, Novvicki, D., Su, c., Palu, AK & nderson, G (2002) Morinda (noni): Một tài liệu gần đâynhừng tiến nghiên CÚOI noni Acta Pharmacol Sin 23 (12), 1127-1141 Các trang Wed: http:// vrvrvr nonisai com/ingles/benef-e htm http:// www.imtLiria.per.sg/bLiloh/plants/monnda.htm http://\vVI’vr ■NoniHealth com/Infonnation Center \\itỹ://www.suckhoeỉavang.vn/iridoỉs-trong-noni/a39632.htmỉ http://vrvrvr.morindabill.com http://vrwvr.nonivina.com http//vrvr vr.thavthuoccuaban.com/vithuoc/noni.htm Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phàm 37 Luận văn tôt nghiệp Trường Đại Học cần Thơ PHỤ LỤC Hình ảnh kết thí nghiệm 1: khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu chín (trái nhàu : nước 1: 1) 24h theo tỷ lệ Hình Hình ảnh kết thí nghiệm 2: khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi Hình Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phàm ỉ [...]... quả khảo sát khả năng kháng nấm men của dịch ép trích trái nhàu sống theo các tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy có khả năng kháng nấm nem tương tự dịch ngâm trích trái nhàu chín và dịch ngâm trích trái nhàu sống đã tiệt trùng ở 121°c theo các tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy Tuy nhiên khả năng kháng nấm men của dịch ép trích trái nhàu sống yếu hon dịch ngâm trích trái nhàu chín và dịch. .. thí nghiệm khảo sát khả năng kháng nấm men của dịch ép trích trái nhàu với các tỉ lệ pha loãng của dịch nhàu có tiệt trùng và không có tiệt trùng, giữa dịch ép trích và ngâm trích, giữa trái nhàu sống và trái nhàu chín, có thể rút ra được các kết luận sau: Tỷ lệ 1/1 (1 dịch trích trái nhàu (lOml) / 1 môi trường (10ml)) khả năng kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae của dịch ngâm trích trái nhàu sống... khả năng kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae của dịch ép trích trái nhàu sống theo các tỷ lệ pha loãng cùng vói môi trường nuôi cấy (ký hiệu: F) Mục đích: khảo sát khả năng kháng nấm nem Saccharomyces cerevỉsiae của dịch ép trích trái nhàu sống (trái nhàu: nước là 1: 1) trong 24h theo các tỷ lệ pha loãng cùng với môi trường nuôi cấy đế xác định khả năng kháng nấm men của dịch ép trích trái nhàu sống... trong 24h và dịch ép trích trái nhàu sống là có hiệu quả kháng nấm men tốt nhất (không có khuẩn lạc/đĩa) Khả năng kháng nấm men của dịch ngâm trích trái nhàu sống trong 24h và dịch ngâm trích trái nhàu chín trong 24h được tiệt trùng ở 121 °c trong 15 phút cũng đạt được hiệu quả kháng nấm men tốt Ket quả này cho thấy hoạt chất sinh học có trong trái nhàu rất bền nhiệt và khả năng kháng nấm men không thay... nhiên khả năng kháng nấm men của dịch ngâm trích trái nhàu sống yếu hon dịch ngâm trích trái nhàu chín và dịch ngâm trích trái nhàu sống đã tiệt trùng ở 121°c và thay đổi theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy Mầu B 1: 1 (1 dịch trích trái nhàu (lOml) / 1 môi trường (10ml)): có khả năng kháng nấm men tốt nhất với 3 lần thí nghiệm lập lại, không có khuẩn lạc/đĩa Mầu B 1:3(1 dịch trích trái nhàu. .. nấm nem Saccharomyces cerevisiae của dịch ngâm trích trái nhàu sống trong 24h theo các tỷ lệ pha loãng cùng với môi trường nuôi cấy (ký hiệu: M) Kết quả khảo sát khả năng kháng nấm men của dịch ngâm trích trái nhàu sống trong 24h theo các tỷ lệ pha loãng với môi truờng nuôi cấy có khả năng kháng nấm nem tương tự dịch ngâm trích trái nhàu chín và dịch ngâm trích trái nhàu sống đã tiệt trùng ở 121°c theo... dịch muối sinh lý, lắc nhẹ và đậy nút bông lại 3.3 BỐ TRÍ THÍ NGHIỆN 3.3.1 Thí nghiệm 1: khảo sát khả năng kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae của dịch ngâm trích trái nhàu chín (trái nhàu: nước là 1: 1) trong 24h theo các tỷ lệ pha loãng cùng vói môi trưòng nuôi cấy và tiệt trùng ỏ’ 121 °c trong 15 phút (ký hiệu: A) Mục đích: khảo sát khả năng kháng nấm men của dịch ngâm trích trái nhàu chín (trái. .. 1/3 (1 dịch trích trái nhàu (7 ml) / 3 môi trường (13 ml)) khả năng kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae của dịch ép trích trái nhàu sống, dịch ngâm trích trái nhàu sống trong 24h được tiệt trùng ở 121 °c trong 15 phút và dịch ngâm trích trái nhàu chín trong 24h được tiệt trùng ở 121 °c trong 15 phút đều có hiệu quả kháng nấm men tốt, số khuẩn lạc dao động tù' 2 - 1 o/đĩa Dịch ngâm trích trái nhàu. .. kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae của dịch ngâm trích trái nhàu sống (trái nhàu: nước là 1: 1) trong 24h theo các tỷ lệ pha loãng cùng vói môi trường nuôi cấy (ký hiệu: M) Mục đích: khảo sát khả năng kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae của dịch ngâm trích trái nhàu sống (trái nhàu: nước là 1: 1) trong 24h theo các tỷ lệ pha loãng cùng với môi trường nuôi cấy để xác định khả năng kháng nấm men của. .. nhiên khả năng kháng nấm men của dịch ngâm trích trái nhàu sống đã được tiệt trùng ở 121°c yếu hon và thay đối theo tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy Mau A 1: 1 (1 dịch trích trái nhàu (lOml) / 1 môi trường (10ml)): có khả năng kháng nấm men tốt nhất với 3 lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc tù' 0 - 2/đĩa Mau A 1: 3 (1 dịch trích trái nhàu (7 ml) / 3 môi trường (13 ml)): có khả năng kháng nấm men ... ảnh hưởng đến khả kháng nấm men dịch trích trái nhàu Vì nghiên cúu tiếp tục thí nghiệm sau: Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến khả kháng nấm men dịch ép trích trái nhàu Khảo sát khả kháng khuân số... tài thực với mục tiêu khảo sát khả kháng nấm men dịch ép trích trái nhàu Các yêu tô ảnh hưởng đên khả kháng nâm men khảo sát trải nhàu sông trải nhàu chín, ép trích ngâm trích, có tiệt trùng không... tiến hành thí nghiệm khảo sát khả kháng nấm men dịch ép trích trái nhàu với tỉ lệ pha loãng dịch nhàu có tiệt trùng tiệt trùng, dịch ép trích ngâm trích, trái nhàu sống trái nhàu chín, rút kết