khảo sát khả năng kháng nấm men của dịch ép trích trái nhàu

TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG NGUYỄN ANH QUÂN KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG NẤM MEN CỦA DỊCH ÉP TRÍCH TRÁI NHÀU Luận văn tốt nghiệp Ngành: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Cần Thơ, 2013 TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG Luận văn tốt nghiệp Ngành: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Tên đề tài: KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG NẤM MEN CỦA DỊCH ÉP TRÍCH TRÁI NHÀU Giáo viên hướng dẫn: TS Lê Nguyễn Đoan Duy Sinh viên thực hiện: Nguyễn Anh Quân MSSV: LT11611 Lớp: CB1108L1 Cần Thơ, 2013 Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ Luận văn đính kèm theo với tựa đề tài “KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG NẤM MEN CỦA DỊCH ÉP TRÍCH TRÁI NHÀU ” Nguyễn Anh Quân thực báo cáo đƣợc hội đồng chấm luận văn thông qua Giáo viên hƣớng dẫn Giáo viên phản biện Giáo viên phản biện Ts LÊ NGUYỄN ĐOAN DUY Cần thơ, ngày… tháng… năm 2013 Chủ tịch hội đồng Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm i Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu thân Các số liệu kết đƣợc trình bày luận văn trung thực chƣa đƣợc công bố công trình luận văn trƣớc Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm i Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ LỜI CẢM TẠ Trong trình học tập tìm hiểu để hoàn thành luận văn tốt nghiệp, phấn đấu thân, em nhận đƣợc nhiều giúp đỡ, hỗ trợ thầy cô, anh chị bạn với lòng kính trọng biết ơn sâu sắc: Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy Lê Nguyễn Đoan Duy tận tình hƣớng dẫn, giảng dạy, giúp đỡ em thực luận văn dù thầy bận rộn với công việc Đồng thời em gửi lời cảm ơn quý thầy cô Bộ môn Công nghệ thực phẩm cung cấp kiến thức quý báu cho em học tập trƣờng anh chị bạn lớp Công Nghệ Thực Phẩm Liên Thông Khoá 37 nhiệt tình giúp đỡ em suốt thời gian vừa qua Vì thời gian có hạn, nên em chƣa tìm hiểu hết yếu tố ảnh hƣởng đến khả kháng nấm men dịch ép trích trái nhàu nên tránh khỏi thiếu sót Em xin đón nhận ý kiến, đóng góp thầy cô bạn Kính chúc tất quý thầy cô bạn sức khỏe, thành đạt sống Xin chân thành cảm ơn! Cần Thơ, Ngày tháng năm 2013 Sinh viên thực NGUYỄN ANH QUÂN Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm ii Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ TÓM LƢỢC Đề tài thực với mục tiêu khảo sát khả kháng nấm men dịch ép trích trái nhàu….Các yếu tố ảnh hưởng đến khả kháng nấm men khảo sát trái nhàu sống trái nhàu chín, ép trích ngâm trích, có tiệt trùng không tiệt trùng với tỷ lệ pha loãng khác với môi trường Qua thí nghiệm khảo sát khả kháng nấm men dịch trái nhàu với phương pháp ép trích khác nhau, có tiệt trùng không tiệt trùng, nguyên liệu sống nguyên liệu chín có tác dụng kháng nấm men Saccharomyces cerevisiae, khả kháng nấm men có khác biệt tỷ lệ pha loãng với môi trường nuôi cấy: Tỷ lệ 1/1 (1 dịch trích trái nhàu (10ml) / môi trường (10ml)) khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h dịch ép trích trái nhàu sống có hiệu kháng nấm men tốt (không có khuẩn lạc/đĩa) Khả kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h dịch ngâm trích trái nhàu chín 24h tiệt trùng 121 0C 15 phút đạt hiệu kháng nấm men tốt Kết cho thấy hoạt chất sinh học có trái nhàu bền nhiệt khả kháng nấm men không thay đổi Tỷ lệ 1/3 (1 dịch trích trái nhàu (7 ml) / môi trường (13 ml)) khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ép trích trái nhàu sống, dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h tiệt trùng 121 0C 15 phút dịch ngâm trích trái nhàu chín 24h tiệt trùng 121 0C 15 phút có hiệu kháng nấm men tốt, số khuẩn lạc dao động từ – 10/đĩa Dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h có hiệu kháng nấm men yếu số khuẩn lạc dao động từ 10 – 30/đĩa Tỷ lệ 1/6 (1 dịch trích trái nhàu (3,5ml) / môi trường (16,5 ml)) khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ép trích trái nhàu sống, dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h tiệt trùng 121 0C 15 phút dịch ngâm trích trái nhàu chín 24h tiệt trùng 121 0C 15 phút có hiệu kháng nấm men tốt, số khuẩn lạc dao động từ 10 – 20/đĩa Dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h có hiệu kháng nấm men yếu số khuẩn lạc dao động từ 30 – 40/đĩa Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm iii Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM TẠ ii TÓM LƢỢC iii MỤC LỤC iv DANH SÁCH BẢNG vi DANH SÁCH HÌNH vii Chƣơng 1: MỞ ĐẦU 1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Chƣơng 2: LƢỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 TỔNG QUAN VỀ NGUYÊN LIỆU 2.1.1 Giới thiệu nhàu 2.1.2 Giới thiệu Saccharomyces cerevisiae 2.2 TỔNG QUAN VỀ MÔI TRƢỜNG NUÔI CẤY VI SINH 14 2.2.1 Môi trƣờng nuôi cấy nấm men 14 2.2.2 Một số môi trƣờng nuôi cấy vi sinh khác 14 CHƢƠNG PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 3.1 PHƢƠNG TIỆN NGHIÊN CỨU 16 3.1.1 Thời gian địa điểm 16 3.1.2 Hóa chất sử dụng 16 3.1.3 Nguyên liệu môi trƣờng nuôi cấy 16 3.1.4 Dụng cụ, thiết bị 16 3.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 3.2.1 Ép trích ly dịch triết trái nhàu 16 3.2.2 Pha chế môi trƣờng thạch khoai tây 17 3.2.3 Pha chế dung dịch nấm nem 17 3.3 BỐ TRÍ THÍ NGHIỆN 17 3.3.1 Thí nghiệm 1: khảo sát khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu chín (trái nhàu: nƣớc 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy tiệt trùng 121 C 15 phút (ký hiệu: A ) 17 3.3.2 Thí nghiệm 2: khảo sát khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống (trái nhàu: nƣớc 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy tiệt trùng 121 C 15 phút (ký hiệu: B) 19 3.3.3 Thí nghiệm 3: khảo sát khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống (trái nhàu: nƣớc 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy (ký hiệu: M) 20 3.3.4 Thí nghiệm 4: khảo sát khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ép trích trái nhàu sống theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy (ký hiệu: F) 21 Chƣơng 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 24 4.1 KẾT QUẢ THÍ NGHIỆN 24 Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm iv Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ 4.1.1 Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu chín (trái nhàu: nƣớc 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy tiệt trùng 121 0C 15 phút (ký hiệu: A) 24 4.1.2 Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy tiệt trùng 121 0C 15 phút (ký hiệu: B) 25 4.1.3 Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy (ký hiệu: M) 25 4.1.4 Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ép trích trái nhàu sống theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy (ký hiệu: F) 26 4.2 THẢO LUẬN 27 CHƢƠNG V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 29 5.1 KẾT LUẬN 29 5.2 ĐỀ NGHỊ 29 TÀI LIỆU THAM KHẢO viii PHỤ LỤC I Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm v Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ DANH SÁCH BẢNG Bảng 2.1: Thành phần hóa học trái nhàu Bảng 2.2: Thành phần acid amin trái nhàu Bảng 2.3: Thành phần vitamin trái nhàu Bảng 2.4: Thành phần hóa học nấm men 12 Bảng 4.1: Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu chín (trái nhàu: nƣớc 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy tiệt trùng 121 0C 15 phút 24 Bảng 4.2: Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy tiệt trùng 121 0C 15 phút 25 Bảng 4.3: Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy 26 Bảng 4.4: Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ép trích trái nhàu sống theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy 27 Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm vi Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ DANH SÁCH HÌNH Hình 2.1: Cây Nhàu Nhàu Hình 2.2: Nấm nem Saccharomyces Cerevisiea Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm vii Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu chín để so sánh, đối chiếu với thí nghiệm sau Phƣơng pháp thực Lần 1: chuẩn bị 10 đĩa petri 62 ml dịch trích trái nhàu chín, dịch nấm men 0,100g/40ml nƣớc muối sinh lý 0,85% Ký hiệu (A 1: 1) (1 dịch trích trái nhàu (10ml) / môi trƣờng (10ml)) sử dụng ống đong để đong 30 ml dịch ngâm trích trái nhàu 30 ml môi trƣờng cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ để làm môi trƣờng với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trƣờng có pha dịch ngâm trích môi trƣờng pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 oC 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đỗ đĩa ta đỗ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trƣờng đong lại tự nhiên Khi môi trƣờng thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Ký hiệu (A 1: 3) (1 dịch trích trái nhàu (7ml) / môi trƣờng (13ml)) sử dụng ống đong để đong 21 ml dịch ngâm trích trái nhàu 39 ml môi trƣờng cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ để làm môi trƣờng với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trƣờng có pha dịch ngâm trích môi trƣờng pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 oC 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đỗ đĩa ta đỗ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trƣờng đông lại tự nhiên Khi môi trƣờng thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Ký hiệu (A 1: 6) (1 dịch trích trái nhàu (3,5ml) / môi trƣờng (16,5ml)) sử dụng ống đong để đong 10,5 ml dịch ngâm trích trái nhàu 49,5 ml môi trƣờng cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ để làm môi trƣờng với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trƣờng có pha dịch ngâm trích môi trƣờng pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 oC 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đỗ đĩa ta đỗ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trƣờng đông lại tự nhiên Khi môi trƣờng thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Ký hiệu (A Đối chứng) sử dụng 20ml môi trƣờng tiệt trùng đỗ đĩa để đối chứng, để môi trƣờng thạch nguội tự nhiên dùng pipet hút 0,1ml dung dịch nấm men Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm 18 Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Đem tất đĩa vô tủ ủ nhiệt độ 37 oC 48h thi lấy quan sát nhận xét khả kháng nấm men Mọi thao tác đƣợc thực tủ cấy vô trùng Thí nghiệm đƣợc tiến hành với lần lặp lại kết đƣợc lấy giá trị trung bình 3.3.2 Thí nghiệm 2: khảo sát khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống (trái nhàu: nƣớc 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy tiệt trùng 121 C 15 phút (ký hiệu: B) Mục đích: khảo sát khả kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu sống (trái nhàu: nƣớc 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy tiệt trùng 121 0C 15 phút để xác định khả chịu nhiệt kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu sống để so sánh, đối chiếu với thí nghiệm sau Phƣơng pháp thực Lần 1: chuẩn bị 10 đĩa petri 62 ml dịch trích trái nhàu sống, dịch nấm men 0,100g/40ml nƣớc muối sinh lý 0,85% Ký hiệu (B 1: 1) (1 dịch trích trái nhàu (10ml) / môi trƣờng (10ml)) sử dụng ống đong để đong 30 ml dịch ngâm trích trái nhàu sống 30ml môi trƣờng cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ để làm môi trƣờng với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trƣờng có pha dịch ngâm trích môi trƣờng pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 oC 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đỗ đĩa ta đỗ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trƣờng đông lại tự nhiên Khi môi trƣờng thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Ký hiệu (B 1: 3) (1 dịch trích trái nhàu (7ml) / môi trƣờng (13ml)) sử dụng ống đong để đong 21 ml dịch ngâm trích trái nhàu sống 39 ml môi trƣờng cho vào bình tam giác 250 ml, lắc nhẹ để làm môi trƣờng với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trƣờng có pha dịch ngâm trích môi trƣờng pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 oC 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đỗ đĩa ta đỗ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trƣờng đông lại tự nhiên Khi môi trƣờng thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm 19 Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ 0,1ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Ký hiệu (B 1: 6) (1 dịch trích trái nhàu (3,5ml) / môi trƣờng (16,5ml)) sử dụng ống đong để đong 10,5 ml dịch ngâm trích trái nhàu sống 49,5 ml môi trƣờng cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ để làm môi trƣờng với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trƣờng có pha dịch ngâm trích môi trƣờng pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 oC 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đỗ đĩa ta đỗ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trƣờng đông lại tự nhiên Khi môi trƣờng thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Ký hiệu (B Đối chứng) sử dụng 20ml môi trƣờng tiệt trùng đỗ đĩa để đối chứng, để môi trƣờng thạch nguội tự nhiên dùng pipet hút 0,1ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Đem tất đĩa vô tủ ủ nhiệt độ 37 oC 48h thi lấy quan sát nhận xét khả kháng nấm men Mọi thao tác đƣợc thực tủ cấy vô trùng Thí nghiệm đƣợc tiến hành với lần lặp lại kết đƣợc lấy giá trị trung bình 3.3.3 Thí nghiệm 3: khảo sát khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống (trái nhàu: nƣớc 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy (ký hiệu: M) Mục đích: khảo sát khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống (trái nhàu: nƣớc 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy để xác định khả kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu sống để so sánh, đối chiếu với thí nghiệm sau Phƣơng pháp thực Lần 1: chuẩn bị 10 đĩa petri 62 ml dịch trích trái nhàu sống, dịch nấm men 0,100g/40ml nƣớc muối sinh lý 0,85% Ký hiệu (M 1: 1) (1 dịch trích trái nhàu (10ml) / môi trƣờng (10ml)) sử dụng ống đong để đong 30 ml dịch ngâm trích trái nhàu sống 30 ml môi trƣờng cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ để làm môi trƣờng với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trƣờng có pha dịch ngâm trích môi trƣờng pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 oC 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đỗ đĩa ta Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm 20 Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ đỗ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trƣờng đong lại tự nhiên Khi môi trƣờng thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Ký hiệu (M 1: 3) (1 dịch trích trái nhàu (7ml) / môi trƣờng (13ml)) sử dụng ống đong để đong 21 ml dịch ngâm trích trái nhàu sống 39 ml môi trƣờng cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ để làm môi trƣờng với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trƣờng có pha dịch ngâm trích môi trƣờng pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 oC 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đỗ đĩa ta đỗ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trƣờng đông lại tự nhiên Khi môi trƣờng thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Ký hiệu (M 1: 6) (1 dịch trích trái nhàu (3,5 ml) / môi trƣờng (16,5 ml)) sử dụng ống đong để đong 10,5 ml dịch ngâm trích trái nhàu sống 49,5 ml môi trƣờng cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ để làm môi trƣờng với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trƣờng có pha dịch ngâm trích môi trƣờng pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 oC 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đỗ đĩa ta đỗ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trƣờng đông lại tự nhiên Khi môi trƣờng thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Ký hiệu (M Đối chứng) sử dụng 20 ml môi trƣờng tiệt trùng đỗ đĩa để đối chứng, để môi trƣờng thạch nguội tự nhiên dùng pipet hút 0,1ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Đem tất đĩa vô tủ ủ nhiệt độ 37 oC 48h thi lấy quan sát nhận xét khả kháng nấm men Mọi thao tác đƣợc thực tủ cấy vô trùng Thí nghiệm đƣợc tiến hành với lần lặp lại kết đƣợc lấy giá trị trung bình 3.3.4 Thí nghiệm 4: khảo sát khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ép trích trái nhàu sống theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy (ký hiệu: F) Mục đích: khảo sát khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ép trích trái nhàu sống (trái nhàu: nƣớc 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm 21 Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ với môi trƣờng nuôi cấy để xác định khả kháng nấm men dịch ép trích trái nhàu sống để so sánh, đối chiếu với thí nghiệm sau Phƣơng pháp thực Lần 1: chuẩn bị 10 đĩa petri 62 ml dịch trích trái nhàu sống, dịch nấm men 0,100g/40ml nƣớc muối sinh lý 0,85% Ký hiệu (F 1: 1) (1 dịch trích trái nhàu (10ml) /1 môi trƣờng (10ml)) sử dụng ống đong để đong 30ml dịch ngâm trích trái nhàu sống 30ml môi trƣờng cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ để làm môi trƣờng với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trƣờng có pha dịch ngâm trích môi trƣờng pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 oC 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đỗ đĩa ta đỗ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trƣờng đông lại tự nhiên Khi môi trƣờng thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Ký hiệu (F 1: 3) (1 dịch trích trái nhàu (7 ml) / môi trƣờng (13 ml)) sử dụng ống đong để đong 21 ml dịch ngâm trích trái nhàu sống 39 ml môi trƣờng cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ để làm môi trƣờng với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trƣờng có pha dịch ngâm trích môi trƣờng pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 oC 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đỗ đĩa ta đỗ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trƣờng đông lại tự nhiên Khi môi trƣờng thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Ký hiệu (F 1: 6) (1 dịch trích trái nhàu (3,5ml) / môi trƣờng (16,5 ml)) sử dụng ống đong để đong 10,5 ml dịch ngâm trích trái nhàu sống 49,5 ml môi trƣờng cho vào bình tam giác 250ml, lắc nhẹ để làm môi trƣờng với dịch trích trái nhàu đậy lại nút Sau đem tiệt trùng môi trƣờng có pha dịch ngâm trích môi trƣờng pha dịch ngâm trích nhiệt độ 121 oC 15 phút Sau tiệt trùng xong, để nguội tự nhiên tiến hành đỗ đĩa, tiến hành đỗ đĩa ta đỗ đĩa khoảng 20ml/đĩa, xoay nhẹ đĩa để môi trƣờng đông lại tự nhiên Khi môi trƣờng thạch nguội đông đặc lại ta tiến hành cấy nấm men, dùng pipet hút 0,1ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm 22 Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ Ký hiệu (F Đối chứng) đỗ đĩa đối chứng 20ml môi trƣờng, để môi trƣờng thạch nguội tự nhiên dùng pipet hút 0,1ml dung dịch nấm men vào đĩa, sau dùng que trang tiến hành trang dịch nấm men bề mặt thạch để khô tự nhiên Đem tất đĩa vô tủ ủ nhiệt độ 37 oC 48h thi lấy quan sát nhận xét khả kháng nấm men Mọi thao tác đƣợc thực tủ cấy vô trùng Thí nghiệm đƣợc tiến hành với lần lặp lại kết đƣợc lấy giá trị trung bình Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm 23 Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ Chƣơng 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ***** 4.1 KẾT QUẢ THÍ NGHIỆM 4.1.1 Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu chín (trái nhàu: nƣớc 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy tiệt trùng 121 0C 15 phút (ký hiệu: A) Kết khảo sát khả kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu chín đƣợc tiệt trùng 1210C theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy có kháng nấm nem Tuy nhiên khả kháng nấm men thay đổi theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy Mẫu 1: (1 dịch trích trái nhàu (10ml) / môi trƣờng (10ml)): có khả kháng nấm men tốt với lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc nhiều 2/đĩa Mẫu 1: (1 dịch trích trái nhàu (7 ml) / môi trƣờng (13 ml)): có khả kháng nấm men tốt với lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc 2/đĩa Mẫu 1: (1 dịch trích trái nhàu (3,5ml) / môi trƣờng (16,5 ml)): có khả kháng nấm men không tốt tỷ lệ 1/3 Với lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc 10 nhiều 20 khuẩn lạc/đĩa Mẫu đối chứng: nấm men phát triển khắp bề mặt thạch Bảng 4.1: Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu chín (trái nhàu: nƣớc 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy tiệt trùng 121 0C 15 phút stt Số lần thí nghiệm Lần Lần Lần Bố trí thí nghiệm Kết thí nghiệm Mẫu A đối chứng Nấm men phát triển toàn bề mặt đĩa Mẫu A 1: Mẫu A 1: Mẫu A 1: Mẫu A đối chứng Mẫu A 1: Mẫu A 1: Mẫu A 1: Mẫu A đối chứng Mẫu A 1: Mẫu A 1: Mẫu A 1: Có khuẩn lạc nhỏ Có nhiều khuẩn lạc Có nhiều 10 khuẩn lạc Nấm men phát triển toàn bề mặt đĩa Có khuẩn lạc nhỏ Có khuẩn lạc nhỏ Có nhiều 20 khuẩn lạc Nấm men phát triển toàn bề mặt đĩa Không có khuẩn lạc Có khuẩn lạc nhỏ Có nhiều 20 khuẩn lạc Hình kết thí nghiệm (Hình 1, phụ lục I) Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm 24 Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ 4.1.2 Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy tiệt trùng 121 0C 15 phút (ký hiệu: B) Kết khảo sát khả kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu sống đƣợc tiệt trùng 1210C theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy có khả kháng nấm nem tƣơng tự dịch ngâm trích trái nhàu chín tiệt trùng 1210C theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy Tuy nhiên khả kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu sống đƣợc tiệt trùng 1210C yếu thay đổi theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy Mẫu A 1: (1 dịch trích trái nhàu (10ml) / môi trƣờng (10ml)): có khả kháng nấm men tốt với lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc từ – 2/đĩa Mẫu A 1: (1 dịch trích trái nhàu (7 ml) / môi trƣờng (13 ml)): có khả kháng nấm men tốt với lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc 10/đĩa Mẫu A 1: (1 dịch trích trái nhàu (3,5ml) / môi trƣờng (16,5 ml)): có khả kháng nấm men không tốt mẫu (A 1: 3) Với lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc 20/đĩa Mẫu đối chứng: nấm men phát triển khắp bề mặt thạch Bảng 4.2: Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy tiệt trùng 121 0C 15 phút stt Số lần thí nghiệm Lần Lần Lần Bố trí thí nghiệm Kết thí nghiệm Mẫu B đối chứng Mẫu B 1: Nấm men phát triển toàn bề mặt đĩa Không có khuẩn lạc Mẫu B 1: Có nhiều 10 khuẩn lạc nhỏ Mẫu B 1: Có nhiều 20 khuẩn lạc nhỏ Mẫu B đối chứng Nấm men phát triển toàn bề mặt đĩa Mẫu B 1: Có nhiều khuẩn lạc nhỏ Mẫu B 1: Có nhiều 10 khuẩn lạc nhỏ Mẫu B 1: Mẫu B đối chứng Có nhiều 20 khuẩn lạc nhỏ Nấm men phát triển toàn bề mặt đĩa Mẫu B 1: Có nhiều khuẩn lạc nhỏ Mẫu B 1: Có nhiều 10 khuẩn lạc nhỏ Mẫu B 1: Có nhiều 20 khuẩn lạc nhỏ Hình kết thí nghiệm (Hình 2, phụ lục I) 4.1.3 Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy (ký hiệu: M) Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm 25 Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ Kết khảo sát khả kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy có khả kháng nấm nem tƣơng tự dịch ngâm trích trái nhàu chín dịch ngâm trích trái nhàu sống tiệt trùng 1210C theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy Tuy nhiên khả kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu sống yếu dịch ngâm trích trái nhàu chín dịch ngâm trích trái nhàu sống tiệt trùng 1210C thay đổi theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy Mẫu B 1: (1 dịch trích trái nhàu (10ml) / môi trƣờng (10ml)): có khả kháng nấm men tốt với lần thí nghiệm lập lại, khuẩn lạc/đĩa Mẫu B 1: (1 dịch trích trái nhàu (7 ml) / môi trƣờng (13 ml)): có khả kháng nấm men tốt với lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc 10 nhiều 30/đĩa Mẫu B1: (1 dịch trích trái nhàu (3,5ml) / môi trƣờng (16,5 ml)): có khả kháng nấm men không tốt mẫu (B 1: 3) Với lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc 30 nhiều 40/đĩa Mẫu đối chứng: nấm men phát triển khắp bề mặt thạch Bảng 4.3: Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy stt Số lần thí nghiệm Lần Lần Lần Bố trí thí nghiệm Kết thí nghiệm Mẫu M đối chứng Mẫu M 1: Mẫu M 1: Nấm men phát triển toàn bề mặt đĩa Không có khuẩn lạc Có nhiều 30 khuẩn lạc nhỏ Mẫu M 1: Mẫu M đối chứng Mẫu M 1: Mẫu M 1: Mẫu M 1: Mẫu M đối chứng Có nhiều 40 khuẩn lạc nhỏ Nấm men phát triển toàn bề mặt đĩa Không có khuẩn lạc Có nhiều 10 khuẩn lạc nhỏ Có nhiều 40 khuẩn lạc nhỏ Nấm men phát triển toàn bề mặt đĩa Mẫu M 1: Không có khuẩn lạc Mẫu M 1: Mẫu M 1: Có nhiều 10 khuẩn lạc nhỏ Có nhiều 30 khuẩn lạc nhỏ Hình kết thí nghiệm (Hình 3, phụ lục II) 4.1.4 Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ép trích trái nhàu sống theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy (ký hiệu: F) Kết khảo sát khả kháng nấm men dịch ép trích trái nhàu sống theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy có khả kháng nấm nem tƣơng tự dịch ngâm trích trái nhàu chín dịch ngâm trích trái nhàu sống tiệt trùng 1210C Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm 26 Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy Tuy nhiên khả kháng nấm men dịch ép trích trái nhàu sống yếu dịch ngâm trích trái nhàu chín dịch ngâm trích trái nhàu sống tiệt trùng 1210C thay đổi theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy Mẫu M 1: (1 dịch trích trái nhàu (10ml) / môi trƣờng (10ml)): có khả kháng nấm men tốt với lần thí nghiệm lập lại, khuẩn lạc/đĩa Mẫu M 1: (1 dịch trích trái nhàu (7 ml) / môi trƣờng (13 ml)): có khả kháng nấm men tốt với lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc nhiều 10/đĩa Mẫu M 1: (1 dịch trích trái nhàu (3,5ml) / môi trƣờng (16,5 ml)): có khả kháng nấm men không tốt tỷ lệ 1/3 Với lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc 20/đĩa Mẫu đối chứng: nấm men phát triển khắp bề mặt thạch Bảng 4.4: Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ép trích trái nhàu sống theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy stt Số lần thí nghiệm Lần Lần Lần Bố trí thí nghiệm Mẫu F đối chứng Mẫu F 1: Mẫu F 1: Kết thí nghiệm Nấm men phát triển tốt Không có khuẩn lạc Có nhiều khuẩn lạc nhỏ Mẫu F 1: Có nhiều 20 khuẩn lạc nhỏ Mẫu F đối chứng Mẫu F 1: Mẫu F 1: Mẫu F 1: Mẫu F đối chứng Mẫu F 1: Nấm men phát triển tốt Không có khuẩn lạc Có nhiều 10 khuẩn lạc nhỏ Có nhiều 20 khuẩn lạc nhỏ Nấm men phát triển tốt Không có khuẩn lạc Mẫu F 1: Có nhiều 10 khuẩn lạc nhỏ Mẫu F 1: Có nhiều 20 khuẩn lạc nhỏ Hình kết thí nghiệm (Hình 4, phụ lục II) 4.2 THẢO LUẬN Qua thí nghiệm khảo sát khả kháng nấm men dịch trái nhàu với phƣơng pháp ép trích khác nhau, có tiệt trùng không tiệt trùng, nguyên liệu sống nguyên liệu chín có tác dụng kháng nấm men Saccharomyces cerevisiae, khả kháng nấm men có khác biệt tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm 27 Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ Kết nghiên cứu phù hợp với số kết nghiên cứu khác có liên quan đến tác dụng kháng sinh trái nhàu: Theo kết số nghiên cứu khác, noni ức chế phát triển số vi khuẩn, chẳng hạn nhƣ Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Proteus morgaii, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Helicobacter pylori, vi khuẩn Salmonella Shigella (Atkinson, 1956) Tác giả công bố tác dụng chống vi khuẩn diện hợp chất phenolic nhƣ acubin, Lasperuloside, scopoletin anthraquinones khác Theo nghiên cứu khác hoạt động kháng khuẩn nhóm: (1) vi khuẩn: Bacillus subtilis, Escherichia coli, Micrococcus luteus, Sarcina thể vàng, Staphilococcus aureus, (2) nấm: Aspergillus niger, Candida albicans, Saccharomyces sake đƣợc xác định cách xét nghiệm khuếch tán đĩa ủ 24 42-44 0C, sau tiến hành đo đƣờng kính vùng ức chế Kết đƣờng kính kháng khuẩn là: Bacillus subtilis 14,0 mm, Escherichia coli 12,5 mm, Micrococcus luteus 13,0 mm , Sarcina 6,8 mm, Candida albicans 7,5 mm, Saccharomyces sake 6,3 mm (W Xiang et al, 2008) Dịch nhàu có khả kháng nấm men dịch nhàu có hoạt tính sinh học Iridoids, tác dụng sinh học Nhàu nhàu chủ yếu Iridoids định, có 16 loại Iridoids (Roso, 2008) Tác dụng kháng sinh: Isoplumericin, Plumericin, Galioside, Gardenoside, Gentiopicroside có tác dụng kháng với nhiều loại vi khuẩn nhƣ tụ cầu trùng vàng, E.coli, Bacillus Các Acibin, Aleuropein, Arbortristoside A C Lucidumoside có tác dụng ức chế virus hô hấp Các Plumericin, Isoplumericin, Epoxygaertnroside, Methoxy - Gaertnroside có tác dụng ức chế ký sinh trùng amip, ký sinh trùng sốt rét (Roso, 2008 ) Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm 28 Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ CHƢƠNG V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ ***** 5.1 KẾT LUẬN Sau tiến hành thí nghiệm khảo sát khả kháng nấm men dịch ép trích trái nhàu với tỉ lệ pha loãng dịch nhàu có tiệt trùng tiệt trùng, dịch ép trích ngâm trích, trái nhàu sống trái nhàu chín, rút đƣợc kết luận sau: Tỷ lệ 1/1 (1 dịch trích trái nhàu (10ml) / môi trƣờng (10ml)) khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h dịch ép trích trái nhàu sống có hiệu kháng nấm men tốt (không có khuẩn lạc/đĩa) Khả kháng nấm men dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h dịch ngâm trích trái nhàu chín 24h đƣợc tiệt trùng 121 0C 15 phút đạt đƣợc hiệu kháng nấm men tốt Kết cho thấy hoạt chất sinh học có trái nhàu bền nhiệt khả kháng nấm men không thay đổi Tỷ lệ 1/3 (1 dịch trích trái nhàu (7 ml) / môi trƣờng (13 ml)) khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ép trích trái nhàu sống, dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h đƣợc tiệt trùng 121 0C 15 phút dịch ngâm trích trái nhàu chín 24h đƣợc tiệt trùng 121 0C 15 phút có hiệu kháng nấm men tốt, số khuẩn lạc dao động từ – 10/đĩa Dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h có hiệu kháng nấm men yếu số khuẩn lạc dao động từ 10 – 30/đĩa Tỷ lệ 1/6 (1 dịch trích trái nhàu (3,5ml) / môi trƣờng (16,5 ml)) khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ép trích trái nhàu sống, dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h đƣợc tiệt trùng 121 0C 15 phút dịch ngâm trích trái nhàu chín 24h đƣợc tiệt trùng 121 0C 15 phút có hiệu kháng nấm men tốt, số khuẩn lạc dao động từ 10 – 20/đĩa Dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h có hiệu kháng nấm men yếu số khuẩn lạc dao động từ 30 – 40/đĩa 5.2 ĐỀ NGHỊ Vì thời gian có hạn trang thiết bị hạn chế nên chƣa thể tiến hành tiến hành nghiên cứu hết tất yếu tố ảnh hƣởng đến khả kháng nấm men dịch trích trái nhàu Vì nghiên cứu tiếp tục thí nghiệm sau: Khảo sát yếu tố ảnh hƣởng đến khả kháng nấm men dịch ép trích trái nhàu Khảo sát khả kháng khuẩn số loại vi khuẩn gây bệnh nhƣ: Staphylococcus aureus, Salmonella, Bacillus subtilis Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm 29 Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt Đỗ Tất Lợi, 2004, Những thuốc vị thuốc Việt Nam - Nhà xuất Y học Đỗ Tất Lợi, 2006, Những thuốc động vật làm thuốc - Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Nguyễn Đức Lƣợng, 2002, THÍ NGHIỆM CÔNG NGHỆ SINH HỌC, Tập 2, Trƣờng Đại Học Bách Khoa TP.HCM Lƣơng Đức Phẩm, 1998, Công nghệ vi sinh vật NXB Nông Nghiệp Nhan Minh Trí, Teshome Edae Jiru, Naznin Sultana, Michael Wawire, 2001, FERMENTATION PROCESSING Hoạt tính kháng khuẩn thực vật Úc khô trực tiếp nhanh chóng kiểm tra Tạp chí Úc nghiệm Sinh học 34, 17-26 Thành phần hóa học Morinda citrifolia ức chế trình oxy hóa copperinduced lipoprotein mật độ thấp Tạp chí Nông nghiệp Hóa học thực phẩm 52, 5843-5848 Tài liệu tiếng anh Chunhieng, M.T., 2003 De'veloppement de nouveaux ALIMENTS sante ' Tropicale: ứng dụng `la noix du Bre'sil Bertholettia excelsa et au de Cambodge Morinda Tiến sĩ luận án, INPL, Pháp Chunheng, T., Hay, L & Montet, D (2004) Nghiên cứu chi tiết nƣớc thành phần noni (Morinda) trái từ Campuchia Trái 60, 13-24 DITTMAR, A., 1993 Morinda L.-Sử dụng địa Samoa thuốc Tạp chí loại thảo mộc, gia vị thực vật Y học 1, 77-92 Heinicke, R.M., 1985 Các thành phần hoạt tính dƣợc lý Noni Morton, J.F năm 1992 Các Noni biển, hay Ấn Độ dâu (Morinda citrifolia, Rubiaceae) số ngƣời thân'''' đầy màu sắc Sinh thái Botony 46, 241256 Nelson, S.C năm 2001 Trồng trọt Noni Hawaii Trái Nuts 4, 1-4 Rosa Tundis, Monica R.Loizzo, Federca Menicbini, Giancarlo A.statti Francesco Thành phần Antitubercular từ phần hexane Morinda L (Rubiaceae) Phytotherapic nghiên cứu 16, 683-685 Wang, MY, Tây, BJ, Jensen, CJ, Nowicki, D., Su, C., Palu, AK & nderson, G (2002) Morinda (noni): Một tài liệu gần đâynhững tiến nghiên cứu noni Acta Pharmacol Sin 23 (12), 1127-1141 Các trang Wed: http:// www.nonisai.com/ingles/benef-e.htm http:// www.naturia.per.sg/buloh/plants/morinda.htm http://www.NoniHealth.com/Information Center http://www.suckhoelavang.vn/iridois-trong-noni/a39632.html http://www.morindabill.com http://www.nonivina.com http//www.thaythuoccuaban.com/vithuoc/noni.htm Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm viii Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ PHỤ LỤC Hình ảnh kết thí nghiệm 1: khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu chín ( trái nhàu : nƣớc 1: 1) 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy tiệt trùng 121 oC 15 phút Hình Hình ảnh kết thí nghiệm 2: khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy tiệt trùng 121 oC 15 phút Hình Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm I Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ Hình ảnh kết thí nghiệm 3: Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ngâm trích trái nhàu sống 24h theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy Hình Hình ảnh kết thí nghiệm 4: Khả kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae dịch ép trích trái nhàu sống theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy Hình Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm II [...]... đích: khảo sát khả năng kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae của dịch ngâm trích trái nhàu sống (trái nhàu: nƣớc là 1: 1) trong 24h theo các tỷ lệ pha loãng cùng với môi trƣờng nuôi cấy để xác định khả năng kháng nấm men của dịch ngâm trích trái nhàu sống để so sánh, đối chiếu với các thí nghiệm sau Phƣơng pháp thực hiện Lần 1: chuẩn bị 10 đĩa petri và 62 ml dịch trích trái nhàu sống, dịch nấm men. .. trích trái nhàu sống đã tiệt trùng ở 1210C theo các tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy Tuy nhiên khả năng kháng nấm men của dịch ngâm trích trái nhàu sống yếu hơn dịch ngâm trích trái nhàu chín và dịch ngâm trích trái nhàu sống đã tiệt trùng ở 1210C và thay đổi theo tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy Mẫu B 1: 1 (1 dịch trích trái nhàu (10ml) / 1 môi trƣờng (10ml)): có khả năng kháng nấm men. .. 4.1.2 Khả năng kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae của dịch ngâm trích trái nhàu sống trong 24h theo các tỷ lệ pha loãng cùng với môi trƣờng nuôi cấy và tiệt trùng ở 121 0C trong 15 phút (ký hiệu: B) Kết quả khảo sát khả năng kháng nấm men của dịch ngâm trích trái nhàu sống đã đƣợc tiệt trùng ở 1210C theo các tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy có khả năng kháng nấm nem tƣơng tự dịch ngâm trích trái. .. đích: khảo sát khả năng kháng nấm men của dịch ngâm trích trái nhàu sống (trái nhàu: nƣớc là 1: 1) trong 24h theo các tỷ lệ pha loãng cùng với môi trƣờng nuôi cấy và tiệt trùng ở 121 0C trong 15 phút để xác định khả năng chịu nhiệt và kháng nấm men của dịch ngâm trích trái nhàu sống để so sánh, đối chiếu với các thí nghiệm sau Phƣơng pháp thực hiện Lần 1: chuẩn bị 10 đĩa petri và 62 ml dịch trích trái nhàu. .. dung dịch muối sinh lý, lắc nhẹ và đậy nút bông lại 3.3 BỐ TRÍ THÍ NGHIỆN 3.3.1 Thí nghiệm 1: khảo sát khả năng kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae của dịch ngâm trích trái nhàu chín (trái nhàu: nƣớc là 1: 1) trong 24h theo các tỷ lệ pha loãng cùng với môi trƣờng nuôi cấy và tiệt trùng ở 121 0 C trong 15 phút (ký hiệu: A ) Mục đích: khảo sát khả năng kháng nấm men của dịch ngâm trích trái nhàu chín... cerevisiae của dịch ngâm trích trái nhàu sống trong 24h theo các tỷ lệ pha loãng cùng với môi trƣờng nuôi cấy (ký hiệu: M) Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm 25 Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ Kết quả khảo sát khả năng kháng nấm men của dịch ngâm trích trái nhàu sống trong 24h theo các tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy có khả năng kháng nấm nem tƣơng tự dịch ngâm trích trái nhàu chín và dịch. .. NGHIỆM 4.1.1 Khả năng kháng nấm nem Saccharomyces cerevisiae của dịch ngâm trích trái nhàu chín (trái nhàu: nƣớc là 1: 1) trong 24h theo các tỷ lệ pha loãng cùng với môi trƣờng nuôi cấy và tiệt trùng ở 121 0C trong 15 phút (ký hiệu: A) Kết quả khảo sát khả năng kháng nấm men của dịch ngâm trích trái nhàu chín đã đƣợc tiệt trùng ở 1210C theo các tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy có sự kháng nấm nem... nuôi cấy để xác định khả năng kháng nấm men của dịch ép trích trái nhàu sống để so sánh, đối chiếu với các thí nghiệm sau Phƣơng pháp thực hiện Lần 1: chuẩn bị 10 đĩa petri và 62 ml dịch trích trái nhàu sống, dịch nấm men 0,100g/40ml nƣớc muối sinh lý 0,85% Ký hiệu (F 1: 1) (1 dịch trích trái nhàu (10ml) /1 môi trƣờng (10ml)) sử dụng ống đong để đong 30ml dịch ngâm trích trái nhàu sống và 30ml môi... ép trích trái nhàu sống theo các tỷ lệ pha loãng cùng với môi trƣờng nuôi cấy (ký hiệu: F) Kết quả khảo sát khả năng kháng nấm men của dịch ép trích trái nhàu sống theo các tỷ lệ pha loãng với môi trƣờng nuôi cấy có khả năng kháng nấm nem tƣơng tự dịch ngâm trích trái nhàu chín và dịch ngâm trích trái nhàu sống đã tiệt trùng ở 1210C Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm 26 ... (1 dịch trích trái nhàu (7 ml) / 3 môi trƣờng (13 ml)): có khả năng kháng nấm men tốt với 3 lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc đều hơn 10/đĩa Mẫu A 1: 6 (1 dịch trích trái nhàu (3,5ml) / 6 môi trƣờng (16,5 ml)): có khả năng kháng nấm men không tốt bằng mẫu (A 1: 3) Với 3 lần thí nghiệm lập lại, số khuẩn lạc đều hơn 20/đĩa Mẫu đối chứng: nấm men phát triển khắp bề mặt thạch Bảng 4.2: Khả năng kháng