giáo trình miễn dịch học thủy sản

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI ThS KIM VĂN VẠN (Chủ biên) - PGS.TS LÊ THANH HÒA GIÁO TRÌNH MIỄN DỊCH HỌC THỦY SẢN HÀ NỘI - 2009 LỜI NÓI ðẦU Miễn dịch học nói chung ngành khoa học ña dạng rộng lớn, có nhiệm vụ nghiên cứu quy luật chế bảo vệ thể sinh vật suốt trình sống; nghiên cứu tác ñộng hệ thần kinh trung ương việc ñiều hòa miễn dịch; nghiên cứu khả ñáp ứng miễn dịch, yếu tố miễn dịch loại hình miễn dịch thể; quy luật miễn dịch học ñể từ ñó ứng dụng chẩn ñoán, phòng trị bệnh ñể bảo vệ thể sinh vật Hệ thống miễn dịch ñộng vật thủy sản có ñặc tính sinh học chức giống hệ thống miễn dịch ñộng vật bậc cao, có nét ñặc trưng riêng miễn dịch ñộng vật bậc thấp Miễn dịch học thủy sản gắn liền với nhiều công trình nghiên cứu sinh học sinh học phân tử, miễn dịch học sinh lý ứng dụng miễn dịch học nuôi trồng thủy sản Trước phát triển ngành nuôi trồng thủy sản nay, phát triển miễn dịch học thủy sản ngày có vai trò ñóng góp to lớn vào chẩn ñoán, phòng trị bệnh ñối tượng nuôi thủy sản, nâng cao suất phẩm chất sản phẩm thủy sản Vì vậy, việc ñưa giáo trình Miễn dịch học Thủy sản với khái niệm kiến thức nhất, vào giảng dạy trường ðại học, Cao ñẳng - dành cho sinh viên ngành Nuôi trồng thủy sản sinh viên ngành liên quan việc làm cần thiết Chính lẽ ñó, ñã biên soạn giáo trình Miễn dịch học Thủy sản với mong muốn giáo trình giúp ích cho giảng viên, sinh viên ngành Nuôi trồng thủy sản; ñồng thời tài liệu dành cho muốn tìm hiểu lĩnh vực Học phần Miễn dịch học Thủy sản ñược giảng dạy cho sinh viên ngành NTTS chuyên ngành Bệnh học Thủy sản vào học kỳ thứ chương trình ñào tạo Kỹ sư NTTS hệ năm, sau học xong học phần Vi sinh vật ñại cương Học phần gồm tín ñó phần lý thuyết chiếm thời lượng 1,5 tín 0,5 tín dành cho phần thực hành Giáo trình gồm 10 chương, chương ñầu tác giả biên soạn, chương cuối ThS Kim Văn Vạn biên soạn Giáo trình viết dựa phần giảng ThS Kim Văn Vạn (Bộ môn Nuôi trồng thủy sản) Các chương chứa ñựng thông tin: Khái niệm miễn dịch phân loại miễn dịch; thích ứng bảo vệ tự nhiên thể chế miễn dịch không ñặc hiệu; Miễn dịch ñặc hiệu – tế bào quan tham gia ñáp ứng miễn dịch ñặc hiệu; Kháng nguyên; Kháng thể; Phản ứng kết hợp kháng nguyên – kháng thể; Sai lạc miễn dịch – miễn dịch bệnh lý; Kích thích miến dịch dùng nuôi trồng thủy sản; Hệ thống miễn dịch giáp xác; Vaccine cách dùng vaccine Nuôi trồng Thủy sản Giáo trình ñược biên soạn lần ñầu, chắn không tránh khỏi thiếu sót, mong nhận ñược ý kiến ñóng góp quý báu ñộc giả ñể góp phần nâng cao chất lượng giáo trình, phục vụ tốt cho việc dạy học Thư từ góp ý xin gửi ñịa chỉ: bmntts@hua.edu.vn; kvvan@hua.edu.vn; MỤC LỤC LỜI NÓI ðẦU i MỤC LỤC ii DANH MỤC CÁC BẢNG vi DANH MỤC CÁC HÌNH vii BÀI MỞ ðẦU Chương - CÁC KHÁI NIỆM VỀ MIỄN DỊCH VÀ PHÂN LOẠI MIỄN DỊCH 1.1 KHÁI NIỆM MIỄN DỊCH 1.2 CÁC MỨC MIỄN DỊCH 1.3 CÁC LOẠI MIỄN DỊCH 1.3.1 Căn theo tính chất miễn dịch: Miễn dịch gồm có miễn dịch tự nhiên miễn dịch tiếp thu .5 1.3.2 Căn vào tồn mầm bệnh thể có dịch .8 1.3.3 Căn vào mục ñích ñối tượng miễn dịch 1.3.4 Căn vào tính chất ñặc hiệu hay không ñặc hiệu miễn dịch 1.3.5 Căn vào chế, trình ñáp ứng miễn dịch thành phần tham gia .9 Chương - SỰ THÍCH ỨNG BẢO VỆ TỰ NHIÊN CỦA CƠ THỂ VÀ CƠ CHẾ MIỄN DỊCH KHÔNG ðẶC HIỆU 11 2.1 SỰ THÍCH ỨNG BẢO VỆ TỰ NHIÊN CỦA CƠ THỂ 11 2.1.1 Chức da, niêm mạc, dịch tiết tuyến 11 2.1.2 Vai trò gan, lách thận 13 2.1.3 Chức hệ bạch huyết hạch lâm ba 13 2.1.4 Tác dụng máu 13 2.1.5 Hiện tượng viêm 14 2.2 HIỆN TƯỢNG THỰC BÀO 14 2.2.1 Bạch cầu ña nhân trung tính 14 2.2.2 ðại thực bào (Macrophage) 15 2.2.3 ðặc ñiểm hoạt ñộng thực bào 16 2.2.4 Các giai ñoạn thực bào 16 2.3 CÁC YẾU TỐ MIỄN DỊCH DỊCH THỂ KHÔNG ðẶC HIỆU 17 2.3.1 Bổ thể 17 2.3.2 Properdin 18 2.3.3 β-lyzin 18 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………ii 2.3.4 Opsonin 18 2.3.5 Lyzozim 19 2.3.6 Các chất khác 19 Chương - MIỄN DỊCH ðẶC HIỆU - CÁC TẾ BÀO VÀ CƠ QUAN THAM GIA ðÁP ỨNG MIỄN DỊCH ðẶC HIỆU 20 3.1 MIỄN DỊCH ðẶC HIỆU 20 3.1.1 Khái niệm 20 3.1.2 Các giai ñoạn ñáp ứng miễn dịch ñặc hiệu 20 3.1.3 Bản chất miễn dịch ñặc hiệu 22 3.1.4 Phân loại miễn dịch ñặc hiệu 22 3.2 CÁC TẾ BÀO VÀ CƠ QUAN THAM GIA ðÁP ỨNG MIỄN DỊCH ðẶC HIỆU 23 3.2.1 Các quan dạng lympho 23 3.2.2 Các tế bào dạng lympho 26 3.2.3 Vai trò tế bào tham gia ñáp ứng miễn dịch ñặc hiệu 27 3.2.4 Sự hợp tác tế bào trình ñáp ứng miễn dịch ñặc hiệu 31 Chương - KHÁNG NGUYÊN (ANTIGEN) 33 4.1 KHÁNG NGUYÊN 33 4.1.1 ðịnh nghĩa 33 4.1.2 Tính sinh miễn dịch kháng nguyên 33 4.1.3 Tính ñặc hiệu kháng nguyên 35 4.1.4 Hiện tượng cạnh tranh kháng nguyên 35 4.1.5 Các loại kháng nguyên 36 4.2 EPITOPE KHÁNG NGUYÊN 40 4.2.1 Khái niệm epitope 40 4.2.2 Một số ñịnh nghĩa 41 Chương - KHÁNG THỂ DỊCH THỂ (ANTIBODY) 43 5.1 ðẠI CƯƠNG VỀ KHÁNG THỂ DỊCH THỂ 43 5.1.1 ðịnh nghĩa 43 5.1.2 ðặc tính 43 5.1.3 Các loại kháng thể dịch thể ñặc hiệu 43 5.1.4 Cấu trúc globulin miễn dịch 46 5.1.5 Quy luật hình thành kháng thể ñặc hiệu 48 5.1.6 Ảnh hưởng kháng nguyên ñến hình thành kháng thể 49 5.1.7 Cơ chế hình thành kháng thể dịch thể ñặc hiệu 51 5.2 KHÁNG THỂ ðƠN DÒNG 52 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………iii 5.2.1 Khái niệm 52 5.2.2 Nguyên tắc phương pháp sản xuất kháng thể ñơn dòng thể 52 5.2.3 Ưu ñiểm lợi ích phương pháp sản xuất kháng thể ñơn dòng 54 5.3 CƠ CHẾ PHÂN TỬ CỦA SỰ HÌNH THÀNH KHÁNG THỂ 55 5.3.1 Khái niệm di truyền học khu hệ gen immunoglobulin 55 5.3.2 Cơ chế phân tử sản xuất kháng thể tế bào lympho B 56 5.3.3 Tái tổ hợp tạo lớp/nhóm kháng thể khác 59 Chương - PHẢN ỨNG KẾT HỢP KHÁNG NGUYÊN - KHÁNG THỂ 61 6.1 PHẢN ỨNG NGƯNG KẾT 61 6.1.1 Nguyên lý 61 6.1.2 Các loại phản ứng ngưng kết 61 6.2 PHẢN ỨNG KẾT TỦA 63 6.2.1 Nguyên lý 63 6.2.2 Các loại phản ứng kết tủa 63 6.3 PHẢN ỨNG KẾT HỢP BỔ THỂ 66 6.4 PHẢN ỨNG TRUNG HÒA 67 6.4.1 Phản ứng trung hòa ñộc tố 67 6.4.2 Phản ứng trung hòa virus 68 6.5 CÁC PHẢN ỨNG SỬ DỤNG KHÁNG THỂ ðÁNH DẤU 68 6.5.1 Phản ứng miễn dịch huỳnh quang (Immuno-fluorescent test) 68 6.5.2 Phản ứng miễn dịch ñánh dấu enzym (ELISA - Enzym - Linking - Immunosorbent Assay) 69 6.5.3 Phương pháp Immunoperoxidase 71 6.5.4 Phương pháp Western Blotting 71 Chương - SAI LẠC MIỄN DỊCH - MIỄN DỊCH BỆNH LÝ 73 7.1 SAI LẠC MIỄN DỊCH 73 7.1.1 Dung nạp miễn dịch (Immune tolerance) 73 7.1.2 Hiện tượng tự miễn dịch (autoimmunity) bệnh tự miễn dịch (autoimmune disease) 74 7.1.3 Thiếu hụt miễn dịch (immuno-deficiency) 75 7.2 MIỄN DỊCH BỆNH LÝ 77 7.2.1 Hiện tượng mẫn (hypersensitivity) 77 7.2.2 Các bệnh phức hợp miễn dịch 83 Chương - KÍCH THÍCH MIỄN DỊCH DÙNG TRONG NUÔI TRỒNG THỦY SẢN 86 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………iv 8.1 KHÁI NIỆM CHẤT KÍCH THÍCH MIỄN DỊCH VÀ NHỮNG ƯU ðIỂM CỦA CHẤT KÍCH THÍCH MIỄN DỊCH DÙNG TRONG NUÔI TRỒNG THỦY SẢN 86 8.2 CÁC LOẠI VÀ CÁCH DÙNG KÍCH THÍCH MIỄN DỊCH 86 8.3 QUẢN LÝ CÁC CHẤT KÍCH THÍCH MIỄN DỊCH 86 8.4 ỨC CHẾ MIỄN DỊCH 87 8.5 XÁC ðỊNH CHẤT KÍCH THÍCH MIỄN DỊCH 87 8.6 MỘT SỐ CHẤT KÍCH THÍCH MIỄN DỊCH HAY DÙNG 87 8.6.1 Glucan 87 8.6.2 Kích thích miễn dịch khác 88 Chương - HỆ THỐNG MIỄN DỊCH Ở GIÁP XÁC 90 9.1 CÁC LOẠI TẾ BÀO HEMOCYTE TRONG MÁU CỦA GIÁP XÁC 90 9.2 CƠ CHẾ HÀNG RÀO Ở GIÁP XÁC 90 9.3 SỰ GHI NHẬN KHÔNG ðẶC HIỆU 91 9.4 ðÁP ỨNG MIỄN DỊCH KHẨN CẤP 91 9.4.1 Thực bào 91 9.4.2 Hình thành hạt vây bắt 91 9.4.3 Cytotoxicity 91 9.4.4 Phản ứng ñông kết 91 9.4.5 Hệ thống phenol oxidase 92 9.5 PROTEIN HOẶC PEPTID KHÁNG KHUẨN 92 Chương 10 - VACCINE VÀ CÁCH DÙNG VACCINE TRONG NUÔI TRỒNG THỦY SẢN 93 10.1 CÁC KHÁI NIỆM CƠ BẢN VỀ VACCINE 93 10.2 VACCINE DÙNG TRONG NUÔI TRỒNG THỦY SẢN 95 10.2.1 Phát triển vaccine phòng bệnh nhiễm khuẩn cá 96 10.2.2 Phương pháp dùng vaccine 97 10.2.3 Các loại vaccine 99 10.2.4 Chất bổ trợ 99 10.2.5 Những yếu tố ảnh hưởng ñến ñáp ứng miễn dịch vaccine 99 10.2.6 Ảnh hưởng bệnh lên ñáp ứng tới vaccine 100 TÀI LIỆU THAM KHẢO 101 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………v DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1-1 Phân biệt miễn dịch tiếp thu chủ ñộng miễn dịch tiếp thu bị ñộng .8 Bảng 3-1 So sánh tế bào lympho T tế bào lympho B 31 Bảng 5-1 Khả tái tổ hợp hình thành gen hoàn chỉnh sản xuất kháng thể dịch thể có kháng nguyên kích thích 59 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………vi DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 2-1 Bạch cầu ña nhân trung tính 14 Hình 2-2 ðại thực bào không hoạt ñộng ñại thực bào ñã ñược hoạt hóa 16 Hình 2-3 Sơ ñồ mô tả trình thực bào 17 Hình 3-1 Sơ ñồ thể trình ñáp ứng miễn dịch ñặc hiệu .21 Hình 3-2 Vị trí tuyến ức cá 25 Hình 3-3 Quá trình biệt hóa Lympho T thành lớp phụ trình ñáp ứng miễn dịch ñặc hiệu .30 Hình 4-1 Sơ ñồ cho nhận máu người 37 Hình 4-2 Kháng nguyên thân O kháng nguyên lông H .38 Hình 4-3 Minh họa epitope kháng nguyên 41 Hình 5-1 Cấu trúc phân tử IgG IgM 44 Hình 5-2 Cấu trúc phân tử IgA .45 Hình 5-3 Kháng thể ñặc hiệu IgG tác dụng phân cắt enzym Papain pepsin 47 Hình 5-4 Sơ ñồ hình thành kháng thể 48 Hình 5-4 Tóm tắt quy trình sản xuất kháng thể ñơn dòng 54 Hình 5-5 Cấu trúc phân tử kháng thể 56 Hình 5-6 Cơ chế phân tử tái tổ hợp gen tổng hợp chuỗi nặng H 57 Hình 5-7 Cơ chế phân tử tái tổ hợp gen tổng hợp chuỗi nhẹ L 58 Hình 6-1 Phản ứng ngưng kết .62 Hình 6-2 Phản ứng ngưng kết hồng cầu thụ ñộng 63 Hình 6-3a Phản ứng kết tủa vòng 64 Hình 6-3b Phương pháp làm phản ứng Ascoli 64 Hình 6-4 Miễn dịch khuếch tán ñơn (A) miễn dịch khuếch tán kép (B) ống nghiệm 65 Hình 6-5 Phản ứng kết tủa khuếch tán phiến kính 66 Hình 6-6 Nguyên lý phản ứng kết hợp bổ thể (Theo Ian R Tizard 2004) 67 Hình 6-7 ELISA gián tiếp (Ian R Tizard 2004) 70 Hình 6-8 ELISA sandwich (Ian R Tizard 2004) 71 Hình 7-1 Thử dị ứng penixilin 80 Hình 10-1 Tiêm vaccine cho cá 97 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………vii BÀI MỞ ðẦU SƠ LƯỢC LỊCH SỬ PHÁT TRIỂN CỦA MIỄN DỊCH HỌC Ngay từ thời cổ ñại, cách ñây 2000 năm trước công nguyên, người Trung quốc người ðông Nam Á ñã biết dùng vẩy ñậu mùa khô xát vào người lành thổi vào mũi ñể phòng bệnh ñậu mùa Tuy nhiên, lịch sử phát triển miễn dịch học thực bắt ñầu từ Edward Jenner (1749-1820) lần ñầu tiên dùng mụn ñậu bò ñem chủng cho người năm 1796 Mặc dù rõ chế, phương pháp dùng mụn ñậu bò ñem chủng cho người ñể phòng chống bệnh ñậu mùa ông ñã cứu ñược nhiều người thoát khỏi chứng bệnh nguy hiểm Chất mụn ñậu ñược ông lấy từ bò bị bệnh ñậu, ñó ông gọi chất vacxin (vaccine) (xuất phát từ chữ vacca có nghĩa bò cái) ðến thời Louis Pasteur (1822-1895), miễn dịch học thực phát triển theo ñúng nghĩa Ông nghiên cứu sâu miễn dịch ñưa quy luật “dùng ñộc trị ñộc” tức nhiều loại vi sinh vật bị làm yếu ñi, ñưa vào thể kích thích thể sinh miễn dịch chống lại vi sinh vật cường ñộc loại Ông tìm vaccine tụ huyết trùng gà (1877), vaccine nhiệt thán (1863), vaccine dại (1885) … Ông ñã ñi sâu nghiên cứu chế miễn dịch ñã có nhiều cống hiến vĩ ñại Lịch sử phát triển miễn dịch học gắn liền với nhiều công trình nghiên cứu vĩ ñại nhà khoa học, với ñó nhiều giải nobel ñã ñược dành tặng cho ñóng góp to lớn nghiệp nghiên cứu họ Dưới ñây số nhà khoa học với ñóng góp họ phát triển miễn dịch học: - Emil Adolf von Behring (1822-1895), nhà khoa học người ðức, ñã ñề xướng thực miễn dịch học ứng dụng, chữa trị thành công số bệnh huyết liệu pháp, ñặc biệt ñối với bệnh bạch hầu (diphtheria); Ông ñược nhận giải Nobel năm 1901 - Metchnikoff (1845-1916) nhà bác học Nga ñã tình cờ tìm tượng thực bào (1884), ông ñã dành ñời ñể nghiên cứu xây dựng học thuyết thực bào, ñặt móng cho loại hình miễn dịch thực bào Ông ñược nhận giải thưởng Nobel năm 1908 với Ehrlich (1854-1915) - Nhà hoá sinh học người ðức ñã ñề xướng thuyết miễn dịch dịch thể, nghiên cứu sâu kháng thể dịch thể - Richet (1850-1935), nhà khoa học người Pháp ñã phát hiện tượng choáng phản vệ (anaphylaxis) (1902) tượng dị ứng khác, ñặt móng nghiên cứu dị ứng học miễn dịch bệnh lý Nhờ cống hiến ông ñược giải thởng Nobel năm 1913 - Jules Bordet (1870-1961), người Bỉ, tìm hiểu nhiều chế bệnh lý miễn dịch phát triển hướng chẩn ñoán vi sinh vật phương pháp huyết học Ông người cống hiến nhiều cho việc nghiên cứu tác nhân gây bệnh ho gà (whooping cough vi khuẩn B pertussis gây ra) Ông ñược nhận giải thưởng Nobel năm 1930 - Năm 1909, Karl Landsteiner (1868-1943) - nhà khoa học người Áo ñã tìm nhóm máu, sau ñó phát hapten kháng nguyên Rheusus máu, ñặt móng cho loại hình miễn dịch: miễn dịch vô trùng Suốt ñời, ông ñể tâm nghiên cứu nhóm máu, hoá sinh học kháng nguyên yếu tố miễn dịch tồn hệ thống tuần hoàn Năm 1943, Landsteiner ñã hệ thống hoá miễn dịch làm hai loại: miễn dịch dịch thể miễn dịch qua trung gian tế bào Ông ñược giải thưởng Nobel năm 1930 với nhà khoa học người Bỉ - Jules Bordet Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………1 - Năm 1905, Fiesinger phát tượng tự miễn dịch loại hình miễn dịch chống lại thân Sau ñại chiến giới lần thứ I, nhiều nhà nghiên cứu phát loại thải mảnh ghép thể khác có nguyên nhân miễn dịch Do ñó loại hình miễn dịch qua trung gian tế bào ñời ñã giúp người có phương pháp chống lại miễn dịch việc cấy ghép quan - Max Theiler (1899-1972) nghiên cứu tác nhân lỵ a-míp vaccine, vấn ñề bệnh học miễn dịch học sốt xuất huyết (Dengue) viêm não Nhật Bản (Encephlomyelitis) Ông ñược nhận giải thưởng Nobel năm 1951 Trong 40 năm gần ñây với phát triển khoa học hỗ trợ ngành khoa học khác, miễn dịch học ñã có bước tiến vượt bậc kể phát minh, phát lĩnh vực miễn dịch học phân tử (molecular immunology) ðội ngũ nhà nghiên cứu miễn dịch học ngày ñông có nhiều cống hiến to lớn, nhiều người ñã nhận ñược giải thưởng Nobel - Năm 1958, Peter Brian Medawar (1915-1987) giải thích tượng miễn dịch dung nạp Sir Frank Macfarlane Burnet, nhà khoa học người Australia, ñã có nhiều cống hiến nghiên cứu dung nạp miễn dịch ñề xuất thuyết chọn lọc “clôn” việc hình thành kháng thể, ông nhận giải thưởng Nobel năm 1960 với Medawar - Tiếp theo, ñó nghiên cứu phát cấu trúc di truyền bề mặt tế bào vai trò chúng trình nhận biết kháng nguyên ñiều hoà miễn dịch tập thể nhà khoa học Jean Dausset người Pháp, Baruj Benacerraf George D Snell người Mỹ ñã giúp hiểu biết sâu chế miễn dịch Cả ông ñược nhận giải thưởng Nobel năm 1980 - Những năm 1975, Niels K Jerne (ðan Mạch), Georges J.F Kohler (ðức) Cesar Milstein (Achentina) ñã xây dựng luận thuyết ñặc thù kiểm soát miễn dịch nêu lên phương pháp sản xuất kháng thể ñơn dòng, mở hướng ñiều trị nhiều bệnh nghiên cứu miễn dịch học phân tử, ñã giúp họ nhận giải thưởng Nobel năm 1984 - Trong khía cạnh giải thích ña dạng kháng thể, Susumu Tonegawa (Nhật Bản) ñã ñưa luận thuyết ñảo gen xếp gen tạo nên loại hình kháng thể khác thể Ông nhận giải thưởng Nobel năm 1987 - Hai ông Joseph E Murray E Donnall Thomas người Mỹ ñã nghiên cứu cấy ghép quan tuỷ xương, giải vấn ñề miễn dịch học ghép quan, có cống hiến ñó, hai ông ñược giải thưởng Nobel năm 1990 Ngày nay, với phát triển vượt bậc khoa học kỹ thuật tiến thành tựu ñã ñạt ñược, miễn dịch học ñang ñược phát triển cách mạnh mẽ theo nhiều hướng khác nghiên cứu loại vaccine hệ mới, miễn dịch cấy ghép quan, miễn dịch ung thư, di truyền miễn dịch, Trong hoàn cảnh dân số giới gia tăng nhanh chóng, kéo theo ñó nhu cầu lương thực thực phẩm tăng nhanh không kém, ñó ñộng lực không nhỏ thúc ñẩy phát triển ngành kinh tế nông nghiệp chăn nuôi, trồng trọt, ñặc biệt sản phẩm với chất lượng cao, công nghệ mới, giàu chất dinh dưỡng Khoa học kỹ thuật ñại ñã ñưa vào sản xuất, nuôi trồng nhiều giống mới, nhiều vật nuôi có chất lượng cao, ña dạng thành phần dinh dưỡng, giúp cho loài người có thêm nhiều vị Nuôi trồng thủy sản ngành kinh tế nông nghiệp có phát triển nhanh chóng vượt bậc, cung cấp cho người sản Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………2 Macrogard ñược dùng tiêm xoang bụng với liều 0,2 ml/cá 20 g (pha nước muối sinh lý), liều tiêm khác thay ñổi nồng ñộ Liều 0,2 mg/cá cho hiệu tốt tuần Macrogard ñược trộn thức ăn cho cá với liều 1-2g/kg thức ăn cho ăn 15 tuần ñều nâng cao miễn dịch không ñặc hiệu không thấy thay ñổi hàm lượng haematocrit tế bào bạch cầu b Glucan khác Laminaran ñược lấy từ tảo Laminaria hyperborea, ñược xem chất kích thích miễn dịch tác dụng cá chép cảm nhiễm vi khuẩn Edwardsiella tarda Laminaran hòa tan nước hấp thu vào thể cá qua ruột Nấm glucan: Schizophyllan chiết từ nấm Schizophyllum commune Scleroglucan chiết từ nấm Sclerotium glucanicum Chúng ñược biết tác nhân kháng u kích thích miễn dịch ñộng vật ðối với cá chép ñược tiêm liều ngày bảo hộ ñược cá chống lại E tarda, lô ñối chứng không dùng kích thích miễn dịch bị chết vi khuẩn vòng ngày Liều tiêm ñối với Schizophyllan mg/kg cá Scleroglucan mg/kg cá, cá ñược tiêm thành bụng, kích thích miễn dịch ñược pha nước muối sinh lý glucan ñược thử nghiệm cá Yellowtail 38-50g/con biện pháp tiêm thành bụng mũi vòng ngày với liều 2-10 mg/kg cá, sau ngày mũi tiêm 2, cá ñược cảm nhiễm Streptococcosis cho thấy có liên quan liều dùng ñến khả bảo hộ Nâng cao ñược hoạt ñộng tế bào tiền thận, tăng sản sinh lysozim Nhưng liều kích thích miễn dịch lại không bảo hộ ñược cảm nhiễm vi khuẩn Pasteurella piscicida (vì vi khuẩn nhân lên ñược tế bào thực bào) 8.6.2 Kích thích miễn dịch khác a Peptide FK-565 tetrapeptide tổng hợp từ lactoyl-tetrapeptid ñược chiết từ nấm Streptomyces olivaceogriceus FK-565 kích thích trực tiếp tế bào lympho T cần tiêm thành bụng với liều 1mg/kg ngày trước cảm nhiễm A salmonicida ñã cho hiệu (nâng cao ñược tỷ lệ sống sót so với lô ñối chứng không dùng FK-565) FK-565 hoạt ñộng chất bổ trợ với bacterin, liều 20-25 mg/kg thể trọng nâng cao ñược ñáp ứng kháng thể, ñặc biệt liều bacterin thấp FK-565 không hoạt ñộng biện pháp ngâm KLP-602 chất kích thích miễn dịch, ñối với cá ñược tiêm 2-3 lần/ ngày cho ñáp ứng miễn dịch cao cá ñược tiêm lần/ ngày ðối với KLP-602 cho thời gian bảo hộ ngắn ISK chuỗi polypeptide ngắn, ñược sản xuất Nga ñược dùng cho người cho gia cầm ñược dùng cho cá chép Hung Cá hồi ñược tiêm với liều 33-50 mg/kg nâng cao ñược hoạt ñộng thực bào ISK nâng cao ñược miễn dịch không ñặc hiệu, ñặc biệt tăng số lượng bạch cầu b Levamisole: loại thuốc ñược dùng phổ biến ñể tẩy giun sán cho trâu bò, cừu Levamisole có khả kích thích miễn dịch, hoạt ñộng chất bổ trợ Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………88 ðối với cá hồi, liều thấp (tiêm 0,5 mg/kg) có tác dụng kích thích miễn dịch ñặc hiệu không ñặc hiệu, liều cao gây ức chế miễn dịch ñặc hiệu, liều cao ức chế miễn dịch ñặc hiệu miễn dịch không ñặc hiệu ðối với cá chép, levamisole có tác dụng kích thích miễn dịch phương pháp tiêm lẫn cho ăn Cho cá ăn - mg/kg cá/ngày cách ngày cho ăn lần (6 liều 15 ngày) cho thấy lượng bạch cầu tăng, tăng khả thực bào, tăng hàm lượng lysozim huyết Tiêm thành bụng dùng liều - 10 mg/kg cá lần ngày có tác dụng kích thích miễn dịch, tăng liều lên 15-20 mg/kg thường xuyên gây ức chế miễn dịch ðối với cá chẽm (sea bass): levamisole có tác dụng ngâm nồng ñộ 1mg/l 30 phút có tác dụng tăng miễn dịch giảm tỷ lệ chết nhiễm Pasteurella piscicida nhân tạo c Ascogen: chất chiết từ nấm, có tên thương mại Aquagen có tác dụng nâng cao lượng bạch cầu hoạt ñộng Ở Anh, Mỹ dùng Ascogen làm chất kích thích miễn dịch cho lợn, gia cầm cho sinh trưởng tốt, hệ số thức ăn thấp (FCR), chất bổ sung thức ăn nên không ñòi hỏi ñăng ký ðối với Ascogen trộn thức ăn cho cá với liều kg/tấn thức ăn Liều thích hợp với cá chép kg/tấn thức ăn, cá vàng 2,5 kg/tấn thức ăn, cá trê kg/tấn thức ăn, cá hồi 2,5kg/tấn thức ăn phù hợp 5kg/tấn cho kết Cá rô phi, cá ñối, cá mè kg/tấn phù hợp nâng cao ñược tốc ñộ sinh trưởng, giảm lượng thức ăn tiêu tốn (FCR thấp) giảm tỷ lệ chết d Natri alginate: ñược chiết từ tảo nâu Undaria pinnatifida, chúng hòa tan acid, bảo vệ thể chống lại vi khuẩn E tarda cá chép, có hiệu tế bào thực bào thận trước Câu hỏi ôn tập: Chất kích thích miễn dịch gì? Trong nuôi trồng thủy sản, chất kích thích miễn dịch có ưu ñiểm gì? Các phương pháp sử dụng chất kích thích miễn dịch nuôi trồng thủy sản? Trình bày tóm tắt chất kích thích miễn dịch thường ñược sử dụng nuôi trồng thủy sản? Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………89 Chương HỆ THỐNG MIỄN DỊCH Ở GIÁP XÁC Hệ thống miễn dịch giáp xác thiếu thành phần ñặc hiệu ñặc ñiểm trí nhớ miễn dịch Trong máu giáp xác có số tế bào làm nhiệm vụ miễn dịch không ñặc hiệu gọi Hemocyte, có khả thực bào, khả vây bắt kháng nguyên sản sinh chất kháng khuẩn ñể di chuyển trung hòa phần tử ngoại lai tác nhân gây bệnh Hầu hết ñáp ứng miễn dịch giáp xác theo chế miễn dịch không ñặc hiệu 9.1 CÁC LOẠI TẾ BÀO HEMOCYTE TRONG MÁU CỦA GIÁP XÁC Dựa vào hình dạng xuất khả bắt màu loại tế bào mà chia thành: Tế bào Hyaline; Tế bào dạng bán hạt; Tế bào dạng hạt Mỗi loại tế bào có chức riêng Tế bào Hemocyte dạng Hyaline có khả thực bào, loại tế bào hạt ñược tìm thấy giáp xác thuộc họ decapod, số lượng tế bào loại cao hay thấp phụ thuộc vào loài Tế bào có ñặc trưng di chuyển nhanh Tế bào Hemocyte dạng bán hạt: có hạt nhỏ tế bào chất giống tế bào dạng hạt ñộng vật có xương sống Những tế bào ñáp ứng thành tế bào polysaccharide vi khuẩn β1,3 glucan nấm Chúng có liên quan ñến trình ghi nhận giải phóng hệ thống hoạt ñộng Prophenol-oxidase (PPO) có khả vây bắt phần tử ngoại lai Tế bào Hemocyte dạng hạt: Loại tế bào xuất hạt lớn tế bào chất ðiều gợi ý vai trò sản xuất, dự trữ tiết chất kháng khuẩn Vai trò thứ tế bào dạng hạt dự trữ Prophenol oxidase ñây thành phần hàng rào phản ứng giáp xác Những tế bào bị gây β-1,3 glucan, Lypopolysaccharides Peptidoglucan từ vi sinh vật ñể giải phóng prophenol oxidase Khi hoạt hóa phenol oxidase catalyses oxy hóa phenol thành bán quinon quinon gây ñộc cho vi sinh vật 9.2 CƠ CHẾ HÀNG RÀO Ở GIÁP XÁC Quá trình quan trọng miễn dịch giáp xác việc ghi nhận xâm nhập vi sinh vật không tự ghi nhận ðiều ñược thực hemocyte (dạng bán hạt) protein plasmatic Trên ghi nhận vật chất lạ ngoại lai, phản ứng miễn dịch (thực bào, vây bắt, diệt, kết dính hệ thống prophenol oxidase: PPO) ñược hoạt hóa Hơn phản ứng miễn dịch ảnh hưởng ñến kháng khuẩn, hầu hết protein peptid ñã ñược nhận dạng Hiệu ứng ñược giải phóng vào máu nơi phá hủy vi sinh vật xâm nhập Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………90 9.3 SỰ GHI NHẬN KHÔNG ðẶC HIỆU Ở tôm Lypopolysaccharide 180-kDa ngưng kết vi sinh vật nâng cao thực bào kết hợp bề mặt tế bào máu hemocyte phần tử ngoại lai (như opsonin) Một protein thứ 2, β glucan kết hợp protein (BGBP), protein plasma mà kết hợp với β glucan thường thể thành tế bào nấm Phản ứng kết hợp với bề mặt tế bào máu hemocyte kích thích giải phóng tế bào hemocyte dạng hạt Dưới có mặt canxi tế bào plasma nồng ñộ hạt ñược hoạt hóa dẫn ñến hoạt hóa phenol oxidase 9.4 ðÁP ỨNG MIỄN DỊCH KHẨN CẤP 9.4.1 Thực bào Thực bào ñược tìm thấy tất ñộng vật Ở ñộng vật bậc thấp, ñộng vật không xương sống chúng có chức dinh dưỡng, ñộng vật bậc cao chúng chuyên hóa vai trò hàng rào chống lại nhiễm khuẩn Tế bào thực bào ñược chuyên hóa ñể tiêu hóa vật chất ñặc biệt sau vi sinh vật công Trong giáp xác tế bào Hemocyte loại Hyaline ñảm bảo chức Vai trò ban ñầu làm rõ thành phần ngoại lai thể gồm: virrus, vi khuẩn, nấm 9.4.2 Hình thành hạt vây bắt Khi giáp xác bị nhiễm số lượng lớn vi sinh vật, khả tế bào thực bào, hình thành hạt xuất kết dính tế bào Các vi sinh vật xuyên vào nhiều lớp hemocytes, hạt trở nên melanize hóa hoạt ñộng phenol oxidase vật chủ Khi ký sinh lớn nuốt thực bào, nhiều tế bào hemocyte gắn phần tử ngoại lai từ hệ tuần hoàn thông qua trình gọi vây bắt Các tế bào hemocyte dạng bán hạt tế bào ñầu tiên phản ứng với thành phần ngoại lai vây bắt xâm nhiễm Về chế mà phần tử ngoại lai vi sinh vật bị phân chia sau bị vây bắt hemocyte chưa ñược biết rõ 9.4.3 Cytotoxicity ðộng vật máu nóng sản sinh tế bào bạch cầu chuyên biệt có khả diệt tế bào khối u tế bào nhiễm virus Những tế bào gọi tế bào diệt tự nhiên (NK) Một số tế bào hemolympho giáp xác có tế bào hemocyte ñặc biệt, giống tế bào diệt tự nhiên ñộng vật bậc cao có khả diệt tế bào ngoại lai, tế bào u 9.4.4 Phản ứng ñông kết Ở giáp xác có hệ thống tuần hoàn mở, vết thương phải ñược gắn ñể dừng trình máu, ngăn chặn xâm nhập vi sinh vật vào thể Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………91 Ở tôm trình ñông máu ñòi hỏi phải có protein plasma thành phần tế bào Protein plasma gây ñông máu có tên protein ñông máu (CP) Nó xuất có liên quan ñến nồng ñộ cao hemolympho Quá trình ñông máu giáp xác khác với trình ñông máu ñộng vật bậc cao bên cạnh mô bị tổn thương, có mặt Lypopolysaccharide vi sinh vật kích thích cho giải phóng transglutaminase từ tế bào Hyaline, gây trình ñông máu 9.4.5 Hệ thống phenol oxidase Kí sinh trùng vi sinh vật xuyên vào thể giáp xác thông qua chỗ tổn thương tạp nhiễm thức ăn Một số tác nhân gây bệnh giống nấm xuyên vào thể thường việc tiết men proteinases chế khác ðáp ứng với men proteinases thể ñiểm ñen vỏ chuyển thành màu ñen nâu ðây melanin, sản phẩm cuối hệ thống phenol oxidase Enzyme catalyse ô xy hóa phenol thành quinine, sau hình thành melanin Sự ô xy hóa sản phẩm hình thành melanin, phản ứng ñộc cho vi sinh vật 9.5 PROTEIN HOẶC PEPTID KHÁNG KHUẨN Hệ thống miễn dịch giáp xác ñáp ứng việc sản xuất protein peptid mà trình hoạt ñộng kháng khuẩn chống lại tác nhân nhiễm Sự diện ñặc ñiểm peptid kháng khuẩn giáp xác cho ñến ñược nghiên cứu Có loại peptid kháng khuẩn ñã ñược phân lập từ tế bào máu hemocyte plasma tôm he chân trắng ðặc ñiểm sinh hóa cấu trúc chúng thể chúng không liên quan ñến peptid khác ñã mô tả trước Do chúng ñược ñặt tên penaidin sau tên giống Penaeus Nghiên cứu vai trò penaedin miễn dịch giáp xác ñang ñược thực nghiên cứu nhận dạng ñặc trưng peptid kháng khuẩn khác tôm Câu hỏi ôn tập: Trình bày hệ thống miễn dịch giáp xác? Trình bày tóm tắt hàng rào miễn dịch tôm? Nêu chức năng, nhiệm vụ tế bào Heymocyte giáp xác? Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………92 Chương 10 VACCINE VÀ CÁCH DÙNG VACCINE TRONG NUÔI TRỒNG THỦY SẢN Trước ñây, vaccine thường ñược sử dụng nuôi trồng thủy sản ngày nuôi trồng thủy sản phát triển, ñặc biệt việc phát triển nuôi thâm canh cao sản thường nhiễm tác nhân gây bệnh quan trọng, hàng năm mát khoảng 10% ñộng vật thủy sản nuôi nhiễm bệnh truyền nhiễm, vụ dịch bệnh thường xuyên xảy ra, nhiều bệnh xử lý ñược thuốc, hóa chất Hóa chất, kháng sinh xử lý ñược số bệnh vi khuẩn ký sinh trùng gây ra, thường ñể lại hậu gây tồn dư kháng sinh, hóa chất sản phẩm làm ảnh hưởng ñến sức khỏe người tiêu dùng, sinh chủng vi khuẩn kháng thuốc ðặc biệt bệnh tác nhân vi rút thường thuốc ñiều trị Do phát triển nuôi thủy sản thường phải cân nhắc biện pháp phòng bệnh ñiều trị Trong ñó việc sử dụng vaccine ñể phòng bệnh cho ñộng vật thủy sản cần thiết Xong ñể sử dụng có hiệu cần nắm ñược khái niệm vaccine, loại vaccine, ñiều kiện cần vaccine cách dùng vaccine cho ñộng vật thủy sản 10.1 CÁC KHÁI NIỆM CƠ BẢN VỀ VACCINE Vaccine, dù dạng tồn nào, cho dù ñó vaccine nguyên thể, tức vaccine chứa nguyên vẹn tế bào vi sinh vật (vi khuẩn hay virus chẳng hạn), hay vaccine phân tử, tức vaccine ñơn chứa thành phần protein có tính kích thích miễn dịch, ñều mang chức chung tạo miễn dịch cho thể người ñộng vật, phòng chống lại bệnh truyền nhiễm nhiều tác nhân gây hại khác Khái niệm chung: Nói ñến vaccine, phải nói ñến yếu tố ñịnh tính miễn dịch chế phẩm ñược chọn làm vaccine ñó Yếu tố ñịnh tính miễn dịch thành phần protein ñặc biệt có bề mặt tác nhân gây bệnh, hay bề mặt chế phẩm vaccine tác nhân gây bệnh ñó Thành phần ñặc biệt có chất protein ñược gọi kháng nguyên (antigen), gen hay số gen vi sinh vật ñịnh tổng hợp nên Những gen chịu trách nhiệm việc sản xuất thành phần protein có tính kích thích miễn dịch ñược gọi gen kháng nguyên Gen kháng nguyên này, nguyên tắc, ñược tách ra, ghép vào hệ thống vector thích ứng ñó, sử dụng ñể biểu thị sản xuất protein gen kháng nguyên ñó ñể làm vaccine Tất phải ñược lựa chọn phù hợp, thu ñược protein có tính kích thích miễn dịch mong muốn ban ñầu protein nguyên gốc Protein tái tổ hợp ñược sản xuất ra, nhiều khi, có tính kháng nguyên miễn dịch, không vaccine chống lại tác nhân gây bệnh cần phòng trừ Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………93 Những vaccine ñược tạo kỹ thuật gen (nghĩa chịu thao tác trực tiếp gen), ñược gọi vaccine tái tổ hợp gen, hay vắn tắt vaccine công nghệ gen Thành phẩm vaccine thuộc loại ñược coi vaccine thuộc hệ Những vaccine thuộc hệ cũ gì? ðó loại vaccine tạo phương pháp cổ ñiển (truyền thống) ðể ñược vaccine, thành phẩm ñã có bị biến ñổi chất (và gen) không chịu thao tác trực tiếp Vaccine gì? Dù nữa, vaccine cổ ñiển hay vaccine hệ (ñại diện vaccine công nghệ gen), ñược ñịnh nghĩa góc ñộ miễn dịch, vaccine phải chế phẩm sinh học vi sinh vật hay tế bào chứa tác nhân gây bệnh hay sản phẩm chúng (kể vật liệu di truyền ADN hay ARN chúng), ñược làm giảm ñộc lực hay vô ñộc phương pháp lý, hoá, hay sinh học (ñối với vaccine cổ ñiển), phương pháp sinh học phân tử (ñối với vaccine hệ mới), lúc ñó chúng không khả gây bệnh ñối với ñối tượng ñược hưởng vaccine (là người ñộng vật), ñưa vào thể phương pháp khác nhau, ñều có khả kích thích thể sinh miễn dịch thuộc loại hình miễn dịch dịch thể (humoral immunity) hay miễn dịch qua trung gian tế bào (cellular-mediated immunity) Như vậy, nói ñến vaccine phải nói ñến khả gây miễn dịch Một thành phẩm ñó chế phẩm sinh học không gây miễn dịch bảo vệ thể mong muốn không ñược coi vaccine Miễn dịch gì? Trong thể ñã tiếp nhận vaccine, miễn dịch ñược tạo huy ñộng toàn hệ thống miễn dịch tham gia, bao gồm hệ thống miễn dịch trung ương hệ thống miễn dịch ngoại biên, tham gia nhiều loại tế bào có thẩm quyền miễn dịch khác Cơ thể chịu kích thích kháng nguyên (do vaccine ñưa ñến), ñã cảm ứng sản xuất loại protein có chức bảo vệ thành phần tham gia tạo nên miễn dịch cho thể, gọi kháng thể (antibody) ðiều kiện cần vaccine: Một vaccine phải có ñủ ñiều kiện chính: an toàn, vô trùng có hiệu lực An toàn tiêu chuẩn ñánh giá sử dụng vaccine ñối tượng ñược hưởng, tức vaccine không ñược gây bệnh gây phản ứng có hại Vô trùng tức vaccine chứa hay vài loại kháng nguyên ñược chọn làm vaccine mà không bị nhiễm tạp loại khác Hiệu lực: ðiều quan trọng vaccine phải có hiệu lực, tức vaccine phải kích thích sinh miễn dịch cho thể Tính hiệu lực, thực chất mức ñộ biểu gây miễn dịch kháng nguyên Vaccine có hiệu lực cao hay thấp, tức nói ñến mức ñộ gây miễn dịch vaccine ñó Với thể ñã ñược miễn dịch, vi sinh vật gây bệnh thật xâm nhập vào, chúng không thực ñược trình gây bệnh nhanh chóng bị loại trừ khỏi thể Tóm lại vaccine yếu tố khởi phát trình ñáp ứng miễn dịch, kháng nguyên thành phần vaccine Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………94 Như miễn dịch cho người ñộng vật ñược người tạo ñưa vào thể chế phẩm sinh học bán sinh học, gọi vaccine ñể gây miễn dịch, tập dượt cho thể thực trình ñáp ứng miễn dịch chống lại tác nhân gây bệnh, chúng thâm nhập vào lần sau ñó Trong tự nhiên, người ñộng vật bị bệnh không chết mà qua khỏi, thể hình thành miễn dịch Một ñiều lưu ý tính ñặc hiệu miễn dịch: Không phải vaccine gây miễn dịch chung chống lại tác nhân gây bệnh Vaccine tạo có nguồn gốc từ tác nhân gây bệnh có tác dụng tạo kháng thể cho miễn dịch chống lại tác nhân gây bệnh ñó 10.2 VACCINE DÙNG TRONG NUÔI TRỒNG THỦY SẢN Sự phát triển nhanh chóng ngành nuôi trồng thủy sản thời gian gần ñây, mà ñặc biệt nuôi thâm canh ñã dẫn ñến phát triển bệnh dịch gây thiệt hại không nhỏ cho người nuôi Cũng theo ñó, loại thuốc hóa chất ñược sử dụng ngày nhiều ñã gây không phiền toái như: tồn dư kháng sinh, tồn dư chất ñộc hại sản phẩm ảnh hưởng ñến sức khỏe người tiêu dùng; việc sử dụng không hợp lý loại thuốc dễ làm phát sinh tính kháng thuốc, gây khó khăn công tác phòng trị bệnh; ñặc biệt gây ô nhiễm môi trường nuôi Hiện công tác phòng trị bệnh cho loài ñộng vật thủy sản nuôi, ñồng thời giúp nâng cao hiệu nuôi việc sử dụng biện pháp sinh học ñang ñược khuyến khích phát triển mở rộng Các biện pháp ñược sử dụng phổ biến sử dụng chất kích thích miễn dịch, vaccine, loại chế phẩm sinh học Việc sử dụng vaccine ñược dựa nguyên lý ñưa sinh vật ngoại lai ñó (vi khuẩn, virus) vào thể ñộng vật, từ ñó thể sinh ñáp ứng miễn dịch chống lại loại bỏ sinh vật ngoại lai ñó khỏi thể Nếu thể ñộng vật thủy sản ñược tái tiếp xúc với sinh vật ngoại lai ñó ñáp ứng miễn dịch hình thành ñể chống lại ðiều ñáp ứng nhớ hay ñó miễn dịch thu ñược Vaccine có vai trò ñóng tác nhân gây bệnh không gây bệnh, xâm nhập vào thể kích thích thể sinh miễn dịch Vaccine thương mại ñầu tiên dùng cho nuôi trồng thủy sản ñược cấp giấy phép Mỹ vào năm 1970 Vaccine phòng bệnh ERM (Enteric Redmouth Yersinia ruckeri) bệnh vi khuẩn vibrio (V anguillarum, V ordalii) Bệnh Furunculosis (A salmonicida) Ở Scotland cho ñến năm 1980 vaccine dùng cho nuôi trồng thủy sản ñược sử dụng Ban ñầu vaccine ñược dùng dạng vaccine chết (diệt tác nhân gây bệnh formalin) việc sử dụng biện pháp ngâm mang lại hiệu miễn dịch chưa cao sau ñó vaccine ñược bổ sung thêm chất bổ trợ dùng ñể tiêm ñã nâng cao ñược hiệu miễn dịch Hiện vaccine ñược dùng nhiều hệ thống nuôi, ñối với lứa nuôi dùng vaccine ñể phòng - bệnh thường dùng vaccine ña giá Vaccine thương mại chống lại bệnh Vibriosis, Furunculosis, Yersiniosis, Pasteurellosis, Edwardsiellosis, Streptococcosis, Cold water Vibriosis, Winter Ulcer Disease Lactococcosis ñang ñược sử dụng nhiều loại vaccine ñang ñược thử nghiệm Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………95 Chính việc dùng vaccine phòng bệnh nhiễm khuẩn ñã giảm lượng kháng sinh ñáng kể Nauy năm 2004 giảm từ 47 kháng sinh xuống Tuy nhiên bệnh ñều ñã ñược khống chế thành công việc dùng vaccine ñơn giản ðể nâng cao hiệu cần phải hiểu ñáp ứng miễn dịch cá, nhận dạng ñược tác nhân gây bệnh… 10.2.1 Phát triển vaccine phòng bệnh nhiễm khuẩn cá Cân nhắc dùng vaccine nuôi trồng thủy sản ñó chi phí, hiệu an toàn Vaccine phải có ñủ thời gian bảo vệ chống lại bệnh ñiều kiện nuôi thâm canh Cần phải cân nhắc tất biến chứng tác nhân gây bệnh, tuổi/thời gian ñộng vật nhiễm bệnh, ñường ñưa vaccine vào thể loại vaccine (vaccine chết, vaccine nhược ñộc, vaccine tái tổ hợp) Vaccine thương mại dùng cho nuôi trồng thủy sản hầu hết vaccine chết Vaccine sống nhược ñộc ñang ñược thử nghiệm Bất dùng vaccine nhược ñộc phải quan tâm ñến trở lại ñộc lực tác nhân gây bệnh tự nhiên Vậy việc xin giấy phép cho việc dùng vaccine nhược ñộc nuôi trồng thủy sản khó khăn Nhiều vaccine nhược ñộc ñã ñược sử dụng thành công người (vaccine sởi, vaccine bại liệt) ñộng vật nuôi (bệnh dại chó, mèo) Gần ñây người ta phát triển vaccine tái tổ hợp a Tác nhân gây bệnh Hiệu phòng bệnh biện pháp sinh học ñược nâng lên khi: Có hiểu biết ñầy ñủ hàng rào phòng vệ thể Bệnh có xảy hay không phụ thuộc vào thể ký chủ tác nhân gây bệnh: sức khỏe ký chủ, ñộc lực tác nhân gây bệnh, hàng rào phòng ngự tự nhiên thể với tác nhân gây bệnh Tác nhân gây bệnh muốn gây ñược bệnh cần phải trải qua: khả xâm nhập gắn ñược vào tế bào ký chủ, nhân nhanh tác nhân gây bệnh cách vượt qua ñược hàng rào phòng vệ ñặc hiệu không ñặc hiệu gây thiệt hại cho ký chủ Mục ñích vaccine gây ñáp ứng miễn dịch dài việc kích thích thành phần nhớ ñáp ứng miễn dịch ñặc hiệu Vaccine bảo vệ lại bệnh không bảo vệ lại nhiễm Ví dụ tác nhân tồn thể b ðánh giá vaccine Một vaccine ñược dùng nuôi trồng thủy sản trước ñược phát tán rộng cần phải ñược ñánh giá: ðánh giá bể kính ñánh giá thực ñịa - ðánh giá bể kính ñược thực lô sản xuất: an toàn, hiệu Hiện ñánh giá hiệu ñược thực thông qua tỷ lệ sống sót liên quan: Tỷ lệ chết lô dùng vaccine RPS = x 100 Tỷ lệ chết lô ñối chứng RPS: Related Percentage Survival ðối với ñánh giá hiệu yêu cầu: tỷ lệ chết ñối chứng >60%, biến ñộng bể [...]... truyền miễn dịch học v.v… Ứng dụng ñể chẩn ñoán, phòng chống bệnh và bảo vệ cơ thể Miễn dịch học liên quan chặt chẽ với các ngành khoa học khác như: hoá học, hoá sinh học, sinh lý học, tế bào học, vật lý học, huyết thanh học, phóng xạ học, vi sinh vật học, sinh học phân tử… 1.3 CÁC LOẠI MIỄN DỊCH 1.3.1 Căn cứ theo tính chất miễn dịch: Miễn dịch gồm có miễn dịch tự nhiên và miễn dịch tiếp thu a Miễn dịch. .. ñiều hòa miễn dịch Nghiên cứu các khả năng ñáp ứng miễn dịch, các yếu tố miễn dịch của cơ thể ñáp ứng theo các loại hình: miễn dịch dịch thể, miễn dịch qua trung gian tế bào và miễn dịch thực bào Mặt khác, miễn dịch học còn nghiên cứu ứng dụng các quy luật ñó trong: - Các phản ứng huyết thanh học, - Phản ứng dị ứng học, - Phản ứng hoá miễn dịch học, - Miễn dịch học phân tử, - Phóng xạ miễn dịch học, -... v.v… khả năng miễn dịch còn phụ thuộc vào các yếu tố di truyền loài, chủng, giống Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………4 Khoa học nghiên cứu về miễn dịch nói chung ñược gọi là miễn dịch học (general immunology) Nếu nghiên cứu về cơ chế tác ñộng phân tử và ảnh hưởng của yếu tố di truyền (hệ gen) lên miễn dịch, thì khoa học ñó ñược gọi là miễn dịch học phân tử (molecular... thanh v.v… Miễn dịch này có tính chất ñặc dị, tức là cơ thể ñộng vật miễn dịch ñối với vi sinh vật gây bệnh nhất ñịnh nhưng vẫn còn tính cảm thụ ñối với vi sinh vật gây bệnh khác Miễn dịch thu ñược chia làm 2 loại: miễn dịch thu ñược chủ ñộng và miễn dịch thu ñược bị ñộng: Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………6 - Miễn dịch thu ñược chủ ñộng: Là miễn dịch thu ñược... nhau giữa miễn dịch tiếp thu chủ ñộng nhân tạo và miễn dịch tiếp thu bị ñộng nhân tạo? 4 Phân biệt miễn dịch ñặc hiệu và miễn dịch không ñặc hiệu? Miễn dịch nào là miễn dịch sinh lý, miễn dịch bệnh lý? Cho ví dụ? Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………10 Chương 2 SỰ THÍCH ỨNG BẢO VỆ TỰ NHIÊN CỦA CƠ THỂ VÀ CƠ CHẾ MIỄN DỊCH KHÔNG ðẶC HIỆU Trong cuộc sống cơ thể sinh... hoàn chỉnh? 4 Trình bày tóm tắt các yếu tố miễn dịch dịch thể không ñặc hiệu? Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………19 Chương 3 MIỄN DỊCH ðẶC HIỆU - CÁC TẾ BÀO VÀ CƠ QUAN THAM GIA ðÁP ỨNG MIỄN DỊCH ðẶC HIỆU ðọc chương này người ñọc cần nắm ñược khái niệm miễn dịch ñặc hiệu, các giai ñoạn của ñáp ứng miễn dịch ñặc hiệu, bản chất, phân loại miễn dịch ñặc hiệu Các... thống miễn dịch của cá, về cơ bản, có những ñặc tính sinh học và chức năng giống hệ thống miễn dịch bậc cao của ñộng vật máu nóng, nhưng cũng có những nét ñặc trưng riêng của miễn dịch của ñộng vật bậc thấp, máu lạnh Miễn dịch học của cá gắn liền với hàng nghìn công trình nghiên cứu sinh học và sinh học phân tử, miễn dịch học sinh lý và chức năng và ứng dụng miễn dịch học trong nuôi trồng thuỷ sản Hệ... chế ñáp ứng miễn dịch ñể bảo vệ cơ thể, do vậy chúng ñược gọi là “các tế bào có thẩm quyền miễn dịch hoặc “các tế bào mang thông tin miễn dịch Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………23 Các cơ quan và các tế bào có thẩm quyền miễn dịch hợp lại ñược gọi là “hệ thống miễn dịch của cơ thể” hay “hệ miễn dịch a Cơ quan dạng lympho trung tâm Là nơi mà quá trình biệt... vào cơ chế, quá trình ñáp ứng miễn dịch và các thành phần tham gia a Loại hình miễn dịch thực bào Dựa trên hiện tượng thực bào do các tế bào có khả năng thực bào ñảm nhận ñó là các ñại thực bào, tiểu thực bào Miễn dịch này có tính chất sinh lý và không ñặc hiệu b Loại hình miễn dịch kiểu dịch thể Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………9 Là miễn dịch do các cơ quan... dịch ñể chống lại chúng b Miễn dịch chống virus: Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình Miễn dịch học Thuỷ sản ……………………8 Là loại miễn dịch do virus kích thích hình thành và mục ñích là chống virus c Miễn dịch chống nấm: Một số nấm cũng có khả năng kích thích cơ thể sinh miễn dịch, nếu thành phần nào kích thích (ví dụ: khuẩn ty hay bào tử) thì cơ thể sinh miễn dịch chống lại thành phần ñó, miễn ... phát triển cho miễn dịch học, ñó miễn dịch học cho ñộng vật nói chung miễn dịch học thủy sản nói riêng LỊCH SỬ PHÁT TRIỂN CỦA MIỄN DỊCH HỌC THỦY SẢN: Các nghiên cứu miễn dịch học thủy sản bắt ñầu... LOẠI MIỄN DỊCH 1.3.1 Căn theo tính chất miễn dịch: Miễn dịch gồm có miễn dịch tự nhiên miễn dịch tiếp thu a Miễn dịch tự nhiên (còn gọi miễn dịch bẩm sinh, miễn dịch chủng loại hay miễn dịch. .. nghiên cứu sinh học sinh học phân tử, miễn dịch học sinh lý ứng dụng miễn dịch học nuôi trồng thủy sản Trước phát triển ngành nuôi trồng thủy sản nay, phát triển miễn dịch học thủy sản ngày có vai