phân lập vi khuẩncố định đạm hòa tan lân trong đất xám vùng rễ cây bắp trồng ở tỉnh bình dương và bà rịa vũng tàu

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH VI SINH VẬT HỌC PHÂN LẬP VI KHUẨNCỐ ĐỊNH ĐẠM - HÒA TAN LÂN TRONG ĐẤT XÁM VÙNG RỄ CÂY BẮP TRỒNG Ở TỈNH BÌNH DƯƠNG VÀ BÀ RỊA VŨNG TÀU CÁN BỘ HƯỚNG DẪN GS.TS CAO NGỌC ĐIỆP SINH VIÊN THỰC HIỆN NGUYỄN THANH HUY MSSV:3103957 LỚP:VI SINH VẬT K36 Cần Thơ, Tháng 11/2013 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH VI SINH VẬT HỌC PHÂN LẬP VI KHUẨNCỐ ĐỊNH ĐẠM - HÒA TAN LÂN TRONG ĐẤT XÁM VÙNG RỄ CÂY BẮP TRỒNG Ở TỈNH BÌNH DƯƠNG VÀ BÀ RỊA VŨNG TÀU CÁN BỘ HƯỚNG DẪN GS.TS CAO NGỌC ĐIỆP SINH VIÊN THỰC HIỆN NGUYỄN THANH HUY MSSV:3103957 LỚP:VI SINH VẬT K36 Cần Thơ, Tháng 11/2013 PHẦN KÝ DUYỆT CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN (ký tên) (ký tên) GS.TS Cao Ngọc Điệp Nguyễn Thanh Huy DUYỆT CỦA HỘI ĐỒNG BẢO VỆ LUẬN VĂN ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………… Cần Thơ, ngày tháng năm 2013 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG (ký tên) LỜI CẢM TẠ Trong suốt trình học tập trường hoàn thành luận văn nhận giúp đỡ từ thầy cô, bạn bè gia đình nhiều Để có kết hôm nay, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến: - Thầy GS.TS Cao Ngọc Điệp người dành nhiều thời gian, hướng dẫn tận tình, động viên cung cấp nhiều tài liệu, kiến thức quý báu, tạo điều kiện thuận lợi tốt để hoàn thành luận văn - Ban Lãnh đạo Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học, cô Nguyễn Thị Pha cố vấn học tập lớp Vi Sinh Vật Học K36 quan tâm suốt trình học tập thực đề tài - Chị Nguyễn Thị Xuân Mỵ, chị Trần Thị Giang Cán quản lí phòng thí nghiệm Vi Sinh Vật đất Vi Sinh Vật Môi trường truyền đạt kinh nghiệm động viên nhiều thời gian thực đề tài - Gia đình chia sẻ khó khăn, tạo thuận lợi cho yên tâm, có điều kiện tốt để hoàn thành đạt kết suốt trình học tập Một lần nữa, xin gởi lời cảm ơn chân thành đến tất người! Cần Thơ, ngày 25 tháng 11 năm 2013 Sinh viên thực Nguyễn Thanh Huy Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2013 Trường ĐHCT TÓM LƯỢC Bốn mươi chín dòng vi khuẩn phân lập môi trường Burk’s không đạm môi trường NBRIP từ đất vùng rễ bắp trồng đất xám tỉnh Bình Dương Bà Rịa – Vũng Tàu đa số khuẩn lạc có dạng tròn đều, vài dòng vi khuẩn có khuẩn lạc dạng không đều, hầu hết dòng vi khuẩn có dạng que ngắn có khả chuyển động Kiểm tra khả tổng hợp đạm môi trường Burk’s lỏng; khả hòa tan lân khó tan môi trường NBRIP lỏng khả tổng hợp IAA Kết có 49/49 dòng vi khuẩn có khả tổng hợp đạm, hòa tan lân khó tan tổng hợp IAA chiếm tỉ lệ 100% Trong 49 dòng vi khuẩn phân lập khảo sát thì có 6/49 dòng vi khuẩn tổng hợp NH4+ đạt lượng cao là: BDN2 (1,31 mg/l) VDB7c (1,43 mg/l), VDN6a (1,27 mg/l), VTN5c (4,41 mg/l, VDN2a (1,30 mg/l) VDN3a (1,35 mg/l) Có 8/49 dòng vi khuẩn có khả hòa tan lân tốt là: VDN2a (66,66 mg/l), VDB6a ( 71,24 mg/l), dòng VDN7c (83,56 mg/l, BDB4 (70,17 mg/l, VDN7d (91,56 mg/l), VDB6b (61,38 mg/l), VDN4a (66,65 mg/l), VDB5a (64,04 mg/l) Những dòng vi khuẩn có khả tổng hợp IAA cao VDB5a (4,05 mg/l), BDN5 (4,33 mg/l, VDB7e (3,64 mg/l), VDB4 (3,18 mg/l, VDB3b (3,21 mg/l) Từ khóa: Cố định đạm, đất xám, hòa tan lân, tổng hợp IAA Chuyên nghành Vi Sinh Vật học i Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2013 Trường ĐHCT MỤC LỤC Trang PHẦN KÍ DUYỆT LỜI CẢM TẠ TÓM LƯỢC i MỤC LỤC ii DANH SÁCH BẢNG v DANH SÁCH HÌNH vi TỪ VIẾT TẮT vii CHƯƠNG GIỚI THIỆU .1 1.1 Đặt vấn đề .1 1.2 Mục tiêu đề tài .2 1.3 Nội dung nghiên cứu .2 CHƯƠNG LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Sơ lược đất xám 2.1.1 Giới thiệu chung đất xám 2.1.2 Phân loại 2.2 Sơ lược chu trình nitơ, trình cố định đạm vi khuẩn cố định đạm 2.2.1 Sơ lược chu trình nitơ tự nhiên 2.2.2 Quá trình cố định đạm .6 2.2.3 Vi khuẩn cố định đạm 2.3 Sơ lược chu trình lân, trình hòa tan lân vi khuẩn hòa tan lân 2.3.1 Sơ lược chu trình lân tự nhiên 2.3.2 Quá trình hòa tan lân vi khuẩn 2.3.3 Vi khuẩn hòa tan lân .10 2.4 Tình hình nghiên cứu ứng dụng phân vi sinh sản xuất nông nghiệp 11 2.4.1 Tình hình nghiên cứu ứng dụng phân vi sinh giới 11 2.4.2 Tình hình nghiên cứu ứng dụng phân vi sinh nước 11 CHƯƠNG PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 3.1 Thời gian địa điểm 13 Chuyên nghành Vi Sinh Vật học ii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2013 Trường ĐHCT 3.2 Phương tiện thí nghiệm .13 3.2.1 Vật liệu thí nghiệm 13 3.2.2 Dụng cụ trang thiết bị .13 3.2.3 Hóa chất 14 3.3 Phương pháp nghiên cứu .16 3.3.1 Phân lập vi khuẩn 16 3.3.2 Quan sát hình dạng khả chuyển động vi khuẩn 17 3.3.3 Quan sát hình thái, đo kích thước khuẩn lạc 17 3.3.4 Xác định hàm lượng NH4+ vi khuẩn tạo phương pháp Indophenol Blue 17 3.3.5 Xác định khả hòa tan lân vi khuẩn .20 3.3.6 Khảo sát khả tổng hợp indole-3-acetic acid (IAA) 22 CHƯƠNG KẾT QUẢ THẢO LUẬN .23 4.1 Kết phân lập đặc điểm dòng vi khuẩn vùng rễ phân lập 23 4.1.1 Nguồn gốc kết phân lập vi khuẩn vùng rễ 23 4.1.2 Đặc điểm dòng vi khuẩn phân lập .24 4.2 Khả cố định đạm dòng vi khuẩn môi trường Burk’s .28 4.3 Khả hòa tan lân dòng vi khuẩn môi trường NBRIP .31 4.4 Khả tổng hợp Indole-3-Acetic Acid (IAA) dòng vi khuẩn phân lập 34 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 37 5.1 Kết luận .37 5.2 Đề nghị 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO .39 Chuyên nghành Vi Sinh Vật học iii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2013 Trường ĐHCT PHỤ LỤC Phụ luc 1: Nguồn gốc dòng vi khuẩn đât vùng rễ bắp Bảng 14: Nguồn gốc dòng vi khuẩn phân lập môi trường Burk’s không đạm Bảng 15: Nguồn gốc dòng vi khuẩn phân lập môi trường NBRIP Phụ lục 2: Kết ngày đo đạm, lân IAA Bảng 16: Kết đo đạm (mg NH4+/l) dòng vi khuẩn sau ngày, 4ngày, ngày ngày nuôi môi trường Burk’s không đạm Bảng 17: Kết đo lân (mg P2O5/l) dòng vi khuẩn sau ngày, 10 ngày, 15 ngày 20 ngày nuôi môi trường NBRIP lỏng Bảng 18: Kết đo IAA (mgIAA /l) dòng vi khuẩn sau ngày, ngày, ngày ngày nuôi môi trường NBRIP Burk's lỏng Chuyên nghành Vi Sinh Vật học iv Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2013 Trường ĐHCT DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng 1: Thành phần môi trường Burk không đạm (Park et al., 2005) dùng để phân lập vi khuẩn cố định đạm 14 Bảng 2: Thành phần môi trường NBRIP (Nautiyal, 1999) dùng để phân lập vi khuẩn hòa tan lân 15 Bảng 3: Thành phần dãy đường chuẩn NH4+ 18 Bảng 4: Giá trị đường chuẩn NH4+ 19 Bảng 5: Thành phần dãy đường chuẩn P2O5 21 Bảng 6: Đường chuẩn đo IAA .22 Bảng 7: Nguồn gốc 22 dòng vi khuẩn phân lập môi trường Burk’s 23 Bảng 8: Nguồn gốc 27 dòng vi khuẩn phân lập môi trường NBRIP .23 Bảng 9: Đặc điểm dòng vi khuẩn phân lập 24 Bảng 10: Tỷ lệ (%) đặc điểm khuẩn lạc dòng vi khuẩn .25 Bảng 11: Lượng đạm cố định (mg NH4+/l) 49 dòng vi khuẩn phân lập sau 2, 4, ngày nuôi môi trường Burk không đạm .28 Bảng 12: Lượng lân hòa tan (mg P2O5/l) 35 dòng vi khuẩn phân lập sau 10 ngày nuôi môi trường NBRIP 31 Bảng 13: Khả tổng hợp IAA dòng vi khuẩn nghiệm thức bổ sung tryptopan 34 Chuyên nghành Vi Sinh Vật học v Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2013 Trường ĐHCT DANH SÁCH HÌNH Trang Hình Chu trình nitơ Hình Chu trình lân tự nhiên .8 Hình 3: Phản ứng tạo màu xanh molypdate đường chuẩn 188 Hình Một số dạng khuẩn lạc đĩa petri môi trường đặc 27 Chuyên nghành Vi Sinh Vật học vi Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2013 Trường ĐHCT VDN2a 0,65ijklm 0,37xyz 0,65nopqr 0,62lmno VDN2b 0,59klmno 0,44xy 0,59opqrst 0,72jklm VDB2a 2,46a 2,68ij 0,16xy 0,25rs VDN7a 0,47nopqr 1,84mn 1,59g 0,72jklm VDN7b 0,81ghi 1,87mn 2,34b 1,12c VDN7c 0,44opqrs 1,68nop 1,78defg 0,69klmn VDN7d 0,78hij 1,34rst 1,90cde 0,40q VDN7e 0,75ijk 1,87mn 1,71efg 1,03cdef VDB7a 1,81bcdef 2,90gh 0,47rstuv 0,40q VDB7b 1,68ef 2,52jk 0,78mno 0,50opq VDB7c 0,50mnopq 1,99m 0,22wxy 0,50opq VDB7d 0,44opqrs 2,37kl 0,16xy 0,56nop VDB7e 0,28st 3,64c 0,12xy 0,59mnop BDN1 1,78cdef 2,40kl 1,99c 0,87ghi BDN2 0,81ghi 2,34kl 1,03jkl 0,19s BDN3 0,62jklmn 3,18def 1,21hij 1,09cd BDN4 0,93gh 1,87mn 1,81cdef 0,97defg BDN5 0,28st 4,33a 2,90a 1,09cd BDB1 0,34qrst 2,99fgh 0,19xy 0,78hijk BDB2 0,34qrst 3,27d 0,31uvwx 1,34b BDB3 0,40pqrs 1,78no 0,69mnopq 0,22s BDB4 0,56lmnop 0,93vw 0,84lmn 0,62lmno BDB5 1,65f 2,27l 0,19xy 0,40q ĐC 0,22t 0,22z 0,09y 0,19s CV% 8,54 4,98 8,84 8,24 LSD(0,01) 0,17 0,20 0,19 0,13 Xã Hòa Bình, Xuyên Mộc, BR-VT Xã Long Tân, Đất Đỏ, BR-VT Xã Láng Giêng, Bến Cát, Bình Dương  ĐC : Đối chứng BR-VT: Bà Rịa – Vũng Tàu Những số theo sau cùng chữ khác biệt thống kê mức ý nghĩa 1% tính theo cùng ngày Kết cho thấy tất 51 dòng vi khuẩn có khả tổng hợp lượng IAA Khả tổng hợp IAA dòng vi khuẩn nhìn chung tổng hợp đạt lượng ngày thứ 2, tiếp tục tăng cao vào ngày thứ bắt đầu giảm vào ngày thứ thứ Chuyên nghành Vi Sinh Vật học 35 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2013 Trường ĐHCT Vì vi khuẩn nuôi môi trường thiếu tryptophan chúng hòa hoạt động gene để tổng hợp nên tryptophan, tryptophan tham gia vào tổng hợp IAA Bên cạnh có số vi khuẩn có chế tổng hợp IAA không sử dụng tiền chất tryptophan Trong chất indole-3-glycerol phosphate chuyển sang acid indole3-pyruvic không chuyển qua tryptophan, từ tiền chất chuyển sang chất indole3-acetaldehyde rồi chuyển sang IAA Lượng IAA mức cao ức chế lại vi khuẩn lượng IAA tổng hợp giảm Trong 49 dòng vi khuẩn phân lập khảo sát, phần lớn dòng vi khuẩn phân lập có khả tổng hợp IAA cao ngày VDB5a (4,05 mg/l), BDN5 (4,33 mg/l), VDB7e (3,64 mg/l), VDB4 (3,18 mg/l), VDB3b (3,21 mg/l) Chuyên nghành Vi Sinh Vật học 36 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2013 Trường ĐHCT CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Từ mẫu đất vùng rễ bắp thu tỉnh Bình Dương Bà Rịa Vũng Tàu phân lập 49 dòng vi khuẩn, 22 dòng vi khuẩn moi trường Burk’s không đạm 27 dòng vi khuẩn môi trường NBRIP Tất dòng vi khuẩn có hình que ngắn có khả chuyển động Tất dòng vi khuẩn phân lập khả cố định đạm, hòa tan lân tổng hợp IAA Trong 49 dòng vi khuẩn phân lập khảo sát Những dòng vi khuẩn tổng hợp NH4+ cao dòng BDN2 (1,31 mg/l) phân lập Xã Láng Giêng, Bến Cát, Bình Dương VDB7c (1,43 mg/l) phân lập Xã Long Tân, Đất Đỏ, Bà Rịa – Vũng Tàu VDN6a (1,27 mg/l) phân lập Xã Nghĩa Thành, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu Dòng vi khuẩn VTN5c (4,41 mg/l) phân lập Thành phố Bà Rịa, Bà Rịa – Vũng Tàu VDN2a (1,30 mg/l) phân lập Xã Hòa Bình, Xuyên Mộc, Bà Rịa – Vũng Tàu VDN3a (1,35 mg/l) phân lập Xã Đá Bạc, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu Những dòng vi khuẩn có khả hòa tan lân cao là: VDN2a (66,66 mg/l) phân lập Xã Hòa Bình, Xuyên Mộc, Bà Rịa – Vũng Tàu, VDB6a ( 71,24 mg/l) phân lập Xã Nghĩa Thành, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu dòng VDN7c (83,56 mg/l) phân lập Xã Long Tân, Đất Đỏ, Bà Rịa – Vũng Tàu BDB4 (70,17 mg/l) phân lập Xã Láng Giêng, Bến Cát, Bình Dương, VDN7d (91,56 mg/l) ) phân lập Xã Long Tân, Đất Đỏ, Bà Rịa – Vũng Tàu VDB6b (61,38 mg/l) phân lập Xã Nghĩa Thành, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu VDN4a (66,65 mg/l) phân lập Xã Suối Rao, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu VDB5a (64,04 mg/l) phân lập Thành phố Bà Rịa, Bà Rịa – Vũng Tàu Những dòng vi khuẩn có khả tổng hợp IAA cao VDB5a (4,05 mg/l) phân lập Thành phố Bà Rịa, Bà Rịa – Vũng Tàu, BDN5 (4,33 mg/l) phân lập Xã Láng Giêng, Bến Cát, Bình Dương,, VDB7e (3,64 mg/l) phân lập Xã Long Tân, Đất Đỏ, Bà Rịa – Vũng Tàu, VDB4 (3,18 mg/l) phân lập Xã Suối Rao, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu VDB3b (3,21 mg/l) phân lập Xã Đá Bạc, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu Chuyên nghành Vi Sinh Vật học 37 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2013 Trường ĐHCT 5.2 Đề nghị Thử nghiệm dòng vi khuẩn bắp đánh giá tác động vi khuẩn lên khả phát triển suất bắp trồng khác qui mô nhà lưới đồng, để đến ứng dụng sản xuất phân bón sinh học Khảo sát khả hòa tan kali dòng vi khuẩn vừa có khả cố định đạm vừa có khả hòa tan lân Chuyên nghành Vi Sinh Vật học 38 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2013 Trường ĐHCT TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Cao Ngọc Điệp 2011 Sách chuyên khảo vi khuẩn nội sinh thực vật Nxb Đại học Cần Thơ, tr.43-67 Cao Ngọc Điệp 2008 Giáo trình vi sinh chuyên sâu, Trường Đại học Cần Thơ Lăng Ngọc Dậu, Nguyễn Thị Xuân Mỵ, Cao Ngọc Điệp, 2002, Khả cố định đạm, hòa tan lân sinh tổng hợp IAA vi khuẩn Azospirillum lipoferum, Tuyển tập báo cáo Khoa học Hội nghị toàn Quốc 2007 Nghiên cứu khoa học sống, Quy Nhơn 10-08-2007, NXB KH-KT, tr.445-448 Lê Văn Nhương, Nguyễn Văn Cách, Quản Lê Hà, Trần Liên Hà, Nguyễn Thanh Hằng, Hoàng Đình Hòa, Nguyễn Lan Hương, Ngô Trang Nhung, Khuất Hữu Thanh, Nguyễn Quang Thảo, Phạm Thị Thùy, Phạm Văn Toản 2009 Cơ sở công nghệ sinh học - Tập – Công nghệ vi sinh Nxb Giáo dục Việt Nam, trang 411-418 Tôn Thất Chiểu Lê Thái Bạt 2000 Đất Việt Nam Nxb Nông Nghiệp, trang 252 – 258 Tiếng Anh Baker, W.W., Welch S.A., Chu S and J.F Banfield 1998 Experimental obvervation of the effects of bacteria Mikrobiolohichnyi Zhurnal (Kiev) 29, pp.111-114 Barbe et al., 2004 Nucleic Acids Res., October 28, 32(19):5776-5779 Bilal, R., G Rarul, J.A Qureshi and K.A Malik 1990 Characterization of Azospirillum and related diazotrophus associated with roots of plant growing in saline Soils, world J Microbiol Biotechnol 6, pp 46 – 52 Bloemberg, G.V., B.J Lugtenberg, 2001 Molecular basis of plant growth promotion and biocontrol by rhizobacteria Curr Opin Plant Biol, 4:343-350 Busman, L., J Lamb, G Randall, G Rehm, and M Schmit, 2009 The nature of phosphorus in solids Phosphorus in the Agricultural Environment University of Minnesota Extension, WW-06795-GO Caballero-Mellado, J., M Carcano-Montiel, and M A Mascarua-Esparza, 1993 Field inoculation of wheat (Triticum aestivum) with Azospirillum brasilense under temperate climate, Symbiosis, 13, pp 243-253 Chuyên nghành Vi Sinh Vật học 39 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2013 Trường ĐHCT Chan, Y.K., W.L Barraquio and R Knowles 1994 N2-fixing Pseudomonads and related soil bacteria, FEMS Microbiol Reviews, 13, pp 95-118 Chen, Y P., P.D Rekha., A.B Arun., F.T Shen., W.A Lai and C.C Young 2006 Phosphate solubilizing bacteria from subtropical soil and their tricalcium phosphate solubilizing abilities Applied Soil Ecology Volume 34, issue 1, pp.3341 Daane, L.L, I Harjono, S.M Bams, L.A Launen, N.J Palleroni and M.M Haggblo 2002 PAH degradation by Paenibacillus spp And description of Paenibacillus naphthalenovorans sp Nov., a naphthalene-degrading bacterium from the rhizosphere of salt marsh plant Int.J.Syst Evol Microbiol 52:131-139 Gilck, B R 1995 The enhancement of plant growth by free – living bacteria Can J Microbial 41, pp 109-117 Goldstein, A.H 1994 Involvement of quinoprotein glucose dehydrogenase in solubilization of exogenous phosphate by gram- negative bacteria In: TorrianiGorini, A., E Yagil, S Silver Phosphate in microoganisms: Cellular and Molecular Biology Washinton, DC ASM Press, pp.197-203 Hilda, R and R Fraga 2000 Phosphate solubilizing bacteria and their role in plant growth promotion Biotech Adv 17, pp.319-359 Illmer, P., and F Schinner 1992 Solubilization of inorganic phosphates by microoganisms isolated from forest soil Soil biol biochem 24, pp.89-95 Katznelson, H., E.A Peterson and J.W Rovatt 1962 Phosphate dissolving microoganisms on seed and in the root zone of plants Can J Bot 40, pp.1181-6 Keiichi Goto, Rieko Fujita, Yuko Kato, Mika Asahara and Akira Yokota, 2004 International Journal of Sytematic and Evolution Microbiology, pp.419-427 Kpomblekou, K and M.A Tabatabai 1994 Effect of organic acids on release of phosphorus from phosphate rocks Soil Sci 158, pp.442-453 Nautiyal 1999 An efficient microbiological growth medium for screening phosphate solubilizing microorganisms, FEMS Microbiology letters 170, pp.265-270 Ohtake, H., H Wu, K Imazu, Y Ambe, J Kato, and A Kuroda 1996 Bacterial phosphonate degradation, phosphite oxidation and polyphosphate accumulation A Res conserv and Recycling 18, pp 125-135 Chuyên nghành Vi Sinh Vật học 40 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2013 Trường ĐHCT Park, M.C., J Kim, Y Yang 2005 Isolation and characterization of diazotrophic growth promotion bacteria from Rhizophere of agricultural crop of Korea Microbiogical Research, 160, pp 127-133 Smibert, R.M and N R Krieg, 1994 Phenotypic characterization In Methods for General and Molecular Bacteriology, pp.607-654 Sperberg, J.I 1958 The incidence of apatite-solubilizing organisms in the rhizosphere and soil Australian Journal of Agriculrural and Resourse Economics 9, pp.778 Trang web http://vi.wikipedia.org/wiki/T%C3%A2y_Ninh/dat xam/ (7/6/2013) http://dayhocblog.wordpress.com/2013/03/16/chu-trinh-sinh-dia-hoa-va-sinh-quyen/ (7/6/2013) http://luanvan.net.vn/luan-van/luan-van-nghien-cuu-phan-lap-va-tuyen-chon-vi-sinhvat-phan-giai-phosphate-kho-tan-tren-dat-bazan-nau-do-o-dak-lak-22040/ (7/6/2013) http://123doc.vn/document/71406 (7/6/2013) Chuyên nghành Vi Sinh Vật học 41 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học PHỤ LỤC Phụ lục 1: Nguồn gốc dòng vi khuẩn đât vùng rễ bắp Bảng 14: Nguồn gốc dòng vi khuẩn phân lập môi trường Burk’s không đạm Số TT Vi khuẩn VDB1a Nguồn gốc dòng vi khuẩn Xã Kim Long, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu VDB1b Xã Kim Long, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu VDB2 Xã Hòa Bình, Xuyên Mộc, Bà Rịa – Vũng Tàu VDB3a Xã Đá Bạc, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu VDB3b Xã Đá Bạc, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu VDB3c Xã Đá Bạc, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu VDB3d Xã Đá Bạc, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu VDB4 Xã Suối Rao, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu VDB5a Thành phố Bà Rịa, Bà Rịa – Vũng Tàu 10 VDB5b Thành phố Bà Rịa, Bà Rịa – Vũng Tàu 11 VDB6a Xã Nghĩa Thành, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu 12 VDB6b Xã Nghĩa Thành, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu 13 VDB7a Xã Long Tân, Đất Đỏ, Bà Rịa – Vũng Tàu 14 VDB7b Xã Long Tân, Đất Đỏ, Bà Rịa – Vũng Tàu 15 VDB7c Xã Long Tân, Đất Đỏ, Bà Rịa – Vũng Tàu 16 VDB7d Xã Long Tân, Đất Đỏ, Bà Rịa – Vũng Tàu 17 VDB7e Xã Long Tân, Đất Đỏ, Bà Rịa – Vũng Tàu 18 BDB1 Xã Láng Giêng, Bến Cát, Bình Dương 19 BDB2 Xã Láng Giêng, Bến Cát, Bình Dương 20 BDB3 Xã Láng Giêng, Bến Cát, Bình Dương 21 BDB4 Xã Láng Giêng, Bến Cát, Bình Dương 22 BDB5 Xã Láng Giêng, Bến Cát, Bình Dương Bảng 15: Nguồn gốc dòng vi khuẩn phân lập môi trường NBRIP Số TT Vi khuẩn VDN1a Nguồn gốc dòng vi khuẩn Xã Kim Long, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu VDN1b Xã Kim Long, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu VDN1c Xã Kim Long, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu VDN2a Xã Hòa Bình, Xuyên Mộc, Bà Rịa – Vũng Tàu VDN2b Xã Hòa Bình, Xuyên Mộc, Bà Rịa – Vũng Tàu VDN3a Xã Đá Bạc, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu VDN3b Xã Đá Bạc, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu VDN3c Xã Đá Bạc, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu VDN3d Xã Đá Bạc, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu 10 VDN4a Xã Suối Rao, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu 11 VDN4b Xã Suối Rao, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu 12 VDN5a Thành phố Bà Rịa, Bà Rịa – Vũng Tàu 13 VDN5b Thành phố Bà Rịa, Bà Rịa – Vũng Tàu 14 VDN5c Thành phố Bà Rịa, Bà Rịa – Vũng Tàu 15 VDN6a Xã Nghĩa Thành, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu 16 VDN6b Xã Nghĩa Thành, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu 17 VDN6c Xã Nghĩa Thành, Châu Đức, Bà Rịa – Vũng Tàu 18 VDN7a Xã Long Tân, Đất Đỏ, Bà Rịa – Vũng Tàu 19 VDN7b Xã Long Tân, Đất Đỏ, Bà Rịa – Vũng Tàu 20 VDN7c Xã Long Tân, Đất Đỏ, Bà Rịa – Vũng Tàu 21 VDN7d Xã Long Tân, Đất Đỏ, Bà Rịa – Vũng Tàu 22 VDN7e Xã Long Tân, Đất Đỏ, Bà Rịa – Vũng Tàu 23 BDN1 Xã Láng Giêng, Bến Cát, Bình Dương 24 BDN2 Xã Láng Giêng, Bến Cát, Bình Dương 25 BDN3 Xã Láng Giêng, Bến Cát, Bình Dương 26 BDN4 Xã Láng Giêng, Bến Cát, Bình Dương 27 BDN5 Xã Láng Giêng, Bến Cát, Bình Dương Phụ lục 2: Kết ngày đo đạm, lân IAA Bảng 16: Kết đo đạm (mg NH4+ /l) dòng vi khuẩn sau ngày, 4ngày, ngày ngày nuôi môi trường Burk’s không đạm Dòng Vi khuẩn ĐC VDN1a VDN1b VDN1c VDN2a VDN2b VDN3a VDN3b VDN3c VDN3d VDN4a VDN4b VDN5a VDN5b VDN5c VDN6a VDN6b VDN6c VDN7a VDN7b VDN7c VDN7d VDN7e BDN1 BDN2 BDN3 BDN4 BDN5 VDB1a VDB1b VDB2a VDB3a VDB3b VDB3c VDB3d VDB4 VDB5a VDB5b VDB6a VDB6b VDB7a VDB7b VDB7c VDB7d VDB7e BDB1 BDB2 BDB3 BDB4 BDB5 Ngày Lần I 0,06 0,45 0,40 0,10 0,22 0,27 0,33 0,14 0,47 0,35 0,43 0,30 0,33 0,56 0,25 0,49 0,45 0,41 0,65 0,44 0,72 0,44 0,37 0,82 0,57 0,51 0,36 0,40 0,26 0,36 0,61 0,59 0,51 0,57 0,43 0,65 0,64 0,56 0,60 0,66 0,72 0,49 0,68 0,46 0,64 0,63 0,74 0,72 0,34 0,35 Lần II 0,06 0,48 0,38 0,08 0,21 0,27 0,32 0,15 0,48 0,33 0,42 0,30 0,36 0,56 0,25 0,52 0,44 0,42 0,63 0,47 0,69 0,43 0,36 0,83 0,57 0,49 0,34 0,39 0,26 0,37 0,61 0,61 0,50 0,54 0,43 0,64 0,66 0,56 0,56 0,65 0,72 0,51 0,71 0,48 0,65 0,62 0,72 0,71 0,36 0,35 Ngày Lân III 0,04 0,46 0,40 0,09 0,21 0,30 0,33 0,14 0,48 0,34 0,42 0,29 0,36 0,54 0,26 0,50 0,45 0,42 0,65 0,48 0,70 0,42 0,35 0,84 0,55 0,50 0,31 0,42 0,27 0,34 0,64 0,61 0,51 0,55 0,44 0,66 0,64 0,54 0,57 0,64 0,72 0,50 0,70 0,47 0,62 0,61 0,73 0,73 0,35 0,36 Lần I 0,16 1,24 1,16 0,86 0,97 0,81 1,01 0,77 1,15 0,77 1,24 0,74 1,15 1,12 0,64 1,24 0,81 0,67 1,11 1,01 1,15 1,14 1,01 0,98 1,32 0,83 0,80 1,04 0,84 0,98 0,95 0,94 1,04 0,95 0,63 1,00 0,93 1,00 1,05 1,07 1,24 1,28 1,41 1,34 1,15 1,04 0,98 1,01 1,04 1,04 Lần II 0,18 1,20 1,17 0,84 0,95 0,83 0,95 0,76 1,12 0,74 1,28 0,77 1,18 1,15 0,69 1,27 0,83 0,63 1,08 1,00 1,14 1,07 1,00 0,95 1,31 0,84 0,83 1,04 0,91 0,97 0,97 0,91 1,08 0,94 0,60 0,94 1,03 0,98 1,10 1,07 1,27 1,34 1,45 1,24 1,18 0,97 0,98 1,03 1,01 1,10 Ngày Lân III 0,16 1,20 1,15 0,84 0,98 0,82 1,03 0,77 1,11 0,70 1,24 0,74 1,14 1,12 0,63 1,29 0,77 0,66 1,04 1,03 1,18 1,11 1,05 1,00 1,29 0,90 0,80 1,05 0,83 0,98 1,00 0,91 1,10 1,01 0,59 1,04 0,97 0,98 1,10 1,07 1,28 1,22 1,44 1,25 1,14 0,93 0,94 1,03 0,97 1,05 Lần I 0,08 0,60 0,27 0,51 0,32 0,77 0,71 0,55 0,29 0,57 0,16 0,62 0,52 0,35 4,35 0,60 0,21 0,36 0,22 0,25 0,12 0,15 0,20 0,18 0,22 0,22 0,18 0,32 0,29 0,15 0,27 0,36 0,33 0,15 0,12 0,27 0,21 0,25 0,23 0,22 0,29 0,26 0,46 0,26 0,56 0,39 0,18 0,23 0,18 0,39 Lần II 0,09 0,64 0,29 0,53 0,36 0,76 0,79 0,61 0,26 0,54 0,19 0,68 0,49 0,36 4,48 0,61 0,23 0,38 0,16 0,27 0,11 0,15 0,19 0,18 0,22 0,23 0,17 0,32 0,25 0,13 0,23 0,32 0,36 0,16 0,13 0,22 0,21 0,27 0,25 0,25 0,30 0,25 0,46 0,27 0,60 0,39 0,17 0,27 0,17 0,38 Ngày Lân III 0,10 0,62 0,30 0,54 0,40 0,79 0,75 0,57 0,27 0,57 0,16 0,67 0,53 0,39 4,40 0,65 0,22 0,39 0,16 0,27 0,13 0,18 0,22 0,16 0,23 0,22 0,17 0,32 0,26 0,13 0,23 0,37 0,32 0,16 0,12 0,25 0,17 0,23 0,24 0,23 0,32 0,27 0,51 0,29 0,57 0,37 0,17 0,25 0,16 0,39 Lần I 0,11 0,47 0,38 0,55 1,32 0,60 1,38 0,56 0,27 0,56 0,30 0,58 0,68 0,42 0,53 0,36 0,33 0,26 0,25 0,29 0,21 0,42 0,25 0,38 0,36 0,47 0,29 0,34 0,47 0,12 0,12 0,12 0,21 0,18 0,22 0,30 0,26 0,33 0,42 0,44 0,34 0,52 0,25 0,29 0,36 0,22 0,32 0,30 0,34 0,33 Lần II 0,14 0,47 0,38 0,62 1,29 0,67 1,30 0,59 0,29 0,56 0,27 0,55 0,67 0,47 0,59 0,34 0,33 0,29 0,21 0,23 0,25 0,34 0,23 0,40 0,37 0,44 0,29 0,36 0,49 0,14 0,18 0,14 0,22 0,18 0,24 0,25 0,26 0,30 0,38 0,40 0,34 0,56 0,21 0,29 0,36 0,21 0,25 0,27 0,33 0,33 Lân III 0,11 0,47 0,40 0,58 1,30 0,62 1,37 0,59 0,30 0,56 0,32 0,52 0,66 0,41 0,59 0,33 0,32 0,26 0,22 0,25 0,23 0,38 0,27 0,37 0,36 0,47 0,27 0,37 0,48 0,18 0,15 0,11 0,22 0,21 0,27 0,26 0,27 0,33 0,41 0,41 0,34 0,52 0,27 0,26 0,34 0,19 0,33 0,32 0,36 0,34 Số liệu xử lý thống kê đạm theo ngày: ANOVA (ngày 2) F bảng Nguồn NT Sai số Tổng df 49 100 149 SS 4.405204 0.015929 4.421133 MS 0.089902 0.000159 F tính 564.38 5% 1.22 1% 1.32 ANOVA (ngày 4) F bảng Nguồn NT Sai số Tổng df 49 100 149 SS 6.942886 0.080526 7.023411 MS 0.141692 0.000805 F tính 175.96 5% 1.22 1% 1.32 ANOVA (ngày 6) F bảng Nguồn NT Sai số Tổng df 49 100 149 SS 53.4801 0.045193 53.52529 MS 1.091431 0.000452 F tính 2415.07 5% 1.22 F tính 355.21 5% 1.22 1% 1.32 ANOVA (ngày 8) F bảng Nguồn NT Sai số Tổng df 49 100 149 SS 8.165089 0.046912 8.212001 MS 0.166634 0.000469 1% 1.32 Bảng 17: Kết đo lân (mg P2O5/l) dòng vi khuẩn sau ngày, 10 ngày, 15 ngày 20 ngày nuôi môi trường NBRIP lỏng Ngày Ngày 10 Ngày 15 Ngày 20 Dòng Vi khuẩn I II III I II III I II III I II III ĐC VDN1a VDN1b VDN1c VDN2a VDN2b VDN3a VDN3b VDN3c VDN3d VDN4a VDN4b VDN5a VDN5b VDN5c VDN6a VDN6b VDN6c VDN7a VDN7b VDN7c VDN7d VDN7e BDN1 BDN2 BDN3 BDN4 BDN5 VDB1a VDB1b VDB2a VDB3a VDB3b VDB3c VDB3d VDB4 VDB5a VDB5b VDB6a VDB6b VDB7a VDB7b VDB7c VDB7d VDB7e BDB1 BDB2 BDB3 BDB4 BDB5 2,03 30,78 45,03 38,97 41,91 44,84 25,53 45,16 40,22 32,59 56,91 57,59 40,28 48,84 61,28 38,22 59,50 23,34 25,53 19,47 56,78 51,97 44,22 41,66 59,28 27,09 20,91 43,91 48,16 33,16 29,59 27,28 33,09 25,53 27,09 29,09 39,03 24,22 41,91 48,09 42,66 48,59 25,36 55,09 49,66 73,41 29,47 53,16 48,22 48,28 2,16 30,59 45,16 39,09 41,78 45,03 25,66 45,28 40,34 32,66 56,97 57,47 40,41 48,91 61,47 38,09 59,66 23,28 25,72 19,22 56,84 51,97 44,41 41,66 59,41 27,22 21,16 43,91 48,22 33,47 29,53 27,16 32,84 25,47 27,16 28,99 44,03 24,34 42,03 48,34 41,97 48,94 25,66 55,22 49,03 73,59 29,47 53,09 48,41 48,28 2,16 30,72 45,22 39,03 41,91 44,97 25,59 45,03 40,28 32,72 56,97 57,53 40,47 49,03 61,47 38,16 59,72 23,16 25,66 19,16 56,66 51,78 44,41 41,72 59,41 27,09 20,97 44,03 48,16 34,91 29,59 27,16 32,97 25,47 26,97 29,11 39,34 24,34 42,09 48,28 42,09 48,97 25,28 55,28 49,47 73,53 29,53 53,34 48,28 48,22 1,22 62,88 24,27 45,80 66,70 41,98 29,76 58,23 24,41 40,38 55,52 25,38 30,73 37,12 45,73 70,24 48,72 19,06 39,20 18,85 83,58 31,98 59,55 37,60 31,70 56,08 30,31 31,22 57,05 28,78 24,76 31,91 37,05 29,76 21,28 15,52 29,90 30,24 71,15 69,55 62,88 70,31 55,03 62,88 70,31 9,97 67,74 51,35 70,17 63,23 1,15 63,09 23,99 45,52 66,63 41,91 29,62 57,95 24,27 40,38 55,31 25,03 30,45 37,12 45,87 70,10 48,65 19,48 39,13 18,51 83,65 31,84 59,48 37,60 31,91 56,22 30,17 31,01 56,84 28,78 24,90 31,84 37,19 29,90 21,15 15,45 29,97 30,31 71,22 69,48 62,95 70,31 55,03 62,95 70,31 9,97 68,02 49,41 70,10 63,09 1,28 62,95 24,13 45,80 66,63 42,12 29,69 58,16 24,20 40,31 55,38 25,10 30,52 37,19 45,59 70,10 48,78 19,41 38,99 18,85 84,06 32,05 59,62 37,67 31,98 56,42 30,31 31,28 56,98 28,85 24,62 31,63 37,05 29,76 21,42 15,59 30,10 30,10 71,35 69,48 63,09 70,38 54,83 63,09 70,24 9,97 67,81 51,08 70,24 63,23 2,05 40,66 26,91 45,10 43,23 49,06 32,05 55,24 32,67 34,76 60,59 18,09 42,88 43,92 43,23 13,92 57,95 59,20 32,33 32,88 43,65 90,59 47,47 56,63 46,49 36,22 16,56 41,70 55,52 43,78 34,48 38,02 35,24 41,49 55,52 47,26 60,38 34,48 41,42 55,87 46,28 54,41 9,62 49,13 52,26 46,42 28,44 55,87 31,84 49,69 2,05 40,45 26,91 45,10 42,95 49,13 31,91 55,45 32,40 34,90 60,45 18,02 42,95 43,85 43,23 14,06 57,81 59,13 32,12 32,81 43,37 93,30 56,77 56,77 46,63 36,22 16,56 41,49 55,52 43,85 34,41 38,02 35,24 41,28 55,24 47,33 60,38 34,62 41,28 55,94 46,15 54,55 9,90 48,99 52,05 46,15 28,23 55,94 31,77 49,62 1,91 40,45 26,91 45,17 43,09 49,20 31,91 55,24 32,74 34,62 60,59 17,81 43,23 43,85 43,16 13,99 57,88 59,34 32,33 32,95 43,72 90,80 45,38 56,84 46,70 36,28 16,63 41,63 55,38 43,65 34,69 38,09 35,03 41,35 55,10 47,12 60,59 34,41 41,42 55,94 46,08 54,69 9,90 48,92 52,12 46,22 28,37 55,94 31,98 49,83 1,40 26,11 40,45 43,89 56,37 48,03 26,37 54,26 53,06 35,48 61,53 40,96 44,36 46,05 64,52 17,45 52,37 26,25 29,24 22,67 67,21 38,47 53,89 35,35 62,99 52,42 19,68 39,24 62,93 44,97 45,16 43,38 45,41 38,60 45,73 49,17 64,27 34,08 39,17 66,69 40,85 21,72 51,40 63,76 26,96 29,49 28,92 49,11 27,64 17,10 1,40 26,31 40,40 44,08 53,44 47,91 26,56 54,01 53,01 35,54 61,34 40,74 44,20 45,86 64,46 17,45 52,23 26,18 29,24 22,74 66,88 38,60 53,89 35,10 62,68 52,36 19,62 39,17 62,99 45,35 44,97 43,44 45,41 38,66 45,86 49,24 64,01 36,94 39,04 66,62 40,64 21,85 51,46 63,57 26,94 29,24 28,73 50,13 27,90 17,13 1,21 26,37 40,51 44,17 49,75 48,01 26,50 54,30 53,06 35,97 61,26 40,70 44,33 45,82 64,59 17,39 52,42 26,18 29,24 22,93 67,01 38,73 53,69 35,17 61,15 52,29 19,49 39,17 62,87 45,22 45,10 43,31 45,41 38,79 45,97 49,31 63,85 32,48 42,36 66,62 40,70 21,91 51,48 63,82 26,82 29,17 28,79 48,34 27,90 17,20 Số liệu xử lý thống kê đạm theo ngày: ANOVA (ngày 5) F bảng Nguồn NT Sai số Tổng df 49 100 149 SS 55723.68 3.562243 55727.24 MS 1137.218 0.035622 F tính 31924.21 5% 1.22 1% 1.32 ANOVA (ngày 10) F bảng Nguồn NT Sai số Tổng df 49 100 149 SS 33349.16 74.74923 33423.91 MS 680.5952 0.747492 F tính 910.50 5% 1.22 1% 1.32 ANOVA (ngày 15) F bảng Nguồn NT Sai số Tổng df 49 100 149 SS 27192.92 18.76846 27211.69 MS 554.9575 0.187685 F tính 2956.86 5% 1.22 F tính 1526.58 5% 1.22 1% 1.32 ANOVA (ngày 20) F bảng Nguồn NT Sai số Tổng df 49 100 149 SS 32923.39 44.01383 32967.41 MS 671.906 0.440138 1% 1.32 Bảng 18: Kết đo IAA (mg IAA /l) dòng vi khuẩn sau ngày, ngày, ngày ngày nuôi môi trường NBRIP Burk’s lỏng Dòng Vi khuẩn ĐC VDN1a VDN1b VDN1c VDN2a VDN2b VDN3a VDN3b VDN3c VDN3d VDN4a VDN4b VDN5a VDN5b VDN5c VDN6a VDN6b VDN6c VDN7a VDN7b VDN7c VDN7d VDN7e BDN1 BDN2 BDN3 BDN4 BDN5 VDB1a VDB1b VDB2a VDB3a VDB3b VDB3c VDB3d VDB4 VDB5a VDB5b VDB6a VDB6b VDB7a VDB7b VDB7c VDB7d VDB7e BDB1 BDB2 BDB3 BDB4 BDB5 Ngày Ngày Ngày Ngày I II III I II III I II III I II III 0,19 0,65 0,56 0,75 0,65 0,56 0,75 0,93 1,03 0,47 0,56 0,37 0,47 0,84 0,37 0,75 0,84 0,84 0,37 0,84 0,47 0,75 0,65 1,87 0,84 0,65 0,93 0,28 1,96 1,78 2,34 1,87 1,68 1,78 1,87 1,96 1,78 0,37 1,78 1,96 1,78 1,68 0,47 0,37 0,28 0,37 0,28 0,47 0,56 1,68 0,19 0,84 0,75 0,75 0,65 0,56 0,84 0,93 0,84 0,47 0,75 0,37 0,47 0,75 0,56 0,65 0,93 0,65 0,56 0,75 0,37 0,75 0,84 1,68 0,75 0,65 0,84 0,37 1,78 1,59 2,34 1,78 1,78 1,87 1,87 1,96 1,87 0,37 1,87 1,78 1,87 1,68 0,65 0,37 0,28 0,37 0,28 0,47 0,65 1,59 0,28 0,75 0,56 0,75 0,65 0,65 0,75 1,03 0,93 0,47 0,56 0,37 0,37 0,65 0,56 0,75 1,03 0,84 0,47 0,84 0,47 0,84 0,75 1,78 0,84 0,56 1,03 0,19 1,68 1,68 2,71 1,87 1,68 1,87 1,87 1,96 1,78 0,19 1,78 1,96 1,78 1,68 0,37 0,56 0,28 0,28 0,47 0,28 0,47 1,68 0,19 1,03 1,12 0,37 0,28 0,47 0,37 0,47 1,21 0,47 0,93 0,28 0,47 1,59 0,56 1,40 1,59 1,59 1,78 1,78 1,78 1,21 1,87 2,43 2,24 3,18 1,96 4,39 2,34 2,34 2,71 2,99 3,18 2,71 2,52 3,08 4,02 1,40 2,62 1,50 2,90 2,62 1,96 2,52 3,64 2,99 3,18 1,78 1,03 2,34 0,19 1,12 1,12 0,56 0,47 0,37 0,37 0,47 1,12 0,56 0,65 0,28 0,65 1,50 0,56 1,40 1,40 1,50 1,87 1,87 1,68 1,40 1,78 2,43 2,34 3,27 1,87 4,30 2,24 2,15 2,71 3,08 3,27 2,90 2,71 3,18 4,21 1,68 2,52 1,68 2,99 2,43 2,15 2,34 3,55 3,08 3,27 1,87 0,93 2,24 0,28 0,93 1,21 0,47 0,37 0,47 0,56 0,56 1,40 0,56 0,84 0,47 0,47 1,59 0,56 1,31 1,50 1,59 1,87 1,96 1,59 1,40 1,96 2,34 2,43 3,08 1,78 4,30 2,24 2,24 2,62 3,08 3,18 2,80 2,62 3,27 3,93 1,78 2,43 1,50 2,80 2,52 1,87 2,24 3,74 2,90 3,36 1,68 0,84 2,24 0,09 1,78 2,24 0,47 0,56 0,65 0,56 0,37 1,59 0,56 1,78 0,47 0,37 1,59 0,56 1,78 1,96 1,87 1,50 2,24 1,68 2,06 1,59 1,96 1,12 1,31 1,78 2,80 0,84 0,28 0,09 1,03 0,75 1,03 1,50 0,56 0,37 1,21 0,37 0,65 0,37 0,84 0,28 0,19 0,09 0,19 0,37 0,65 0,84 0,19 0,09 1,87 2,15 0,47 0,65 0,56 0,65 0,37 1,68 0,65 1,96 0,37 0,56 1,87 0,56 1,96 1,96 1,68 1,59 2,24 1,78 1,87 1,68 2,15 0,93 1,21 1,78 3,08 0,84 0,28 0,19 1,12 0,65 1,03 1,31 0,47 0,47 1,31 0,47 0,65 0,56 0,75 0,19 0,09 0,19 0,28 0,28 0,75 0,84 0,19 0,09 2,15 2,34 0,56 0,75 0,56 0,56 0,47 1,78 0,47 1,87 0,37 0,65 1,78 0,56 1,87 1,87 1,96 1,68 2,52 1,87 1,78 1,87 1,87 1,03 1,12 1,87 2,80 0,93 0,28 0,19 1,03 0,75 0,93 1,21 0,47 0,47 1,21 0,47 0,56 0,47 0,75 0,19 0,19 0,09 0,09 0,28 0,65 0,84 0,19 0,19 1,03 0,65 0,37 0,56 0,65 0,47 0,56 0,65 0,47 1,21 0,37 0,56 1,68 0,56 0,84 1,12 0,93 0,65 1,12 0,65 0,47 1,03 0,84 0,19 1,12 0,93 1,03 0,75 1,12 0,19 0,84 0,84 0,75 0,75 0,84 0,93 0,75 0,19 0,84 0,37 0,56 0,47 0,47 0,56 0,75 1,40 0,28 0,65 0,37 0,19 1,03 0,75 0,47 0,65 0,75 0,56 0,47 0,65 0,65 1,03 0,37 0,56 1,78 0,65 0,93 1,03 0,93 0,75 1,12 0,65 0,37 1,03 0,84 0,19 1,12 1,03 1,12 0,84 1,21 0,28 0,75 0,93 0,75 0,65 0,75 1,03 0,65 0,28 0,93 0,37 0,47 0,56 0,65 0,56 0,84 1,31 0,19 0,65 0,37 0,19 1,12 0,65 0,56 0,65 0,75 0,47 0,47 0,65 0,65 1,12 0,37 0,56 1,59 0,56 0,93 1,03 0,93 0,75 1,12 0,75 0,37 1,03 0,93 0,19 1,03 0,93 1,12 0,75 1,12 0,28 0,93 0,75 0,84 0,84 0,75 0,93 0,56 0,19 0,84 0,47 0,47 0,47 0,56 0,65 0,75 1,31 0,19 0,56 0,47 Số liệu xử lý thống kê đạm theo ngày: ANOVA (ngày 2) F bảng Nguồn NT Sai số Tổng df 49 100 149 SS 4.405204 0.015929 4.421133 MS 0.089902 0.000159 F tính 564.38 5% 1.22 1% 1.32 ANOVA (ngày 4) F bảng Nguồn NT Sai số Tổng df 49 100 149 SS 162.7583 0.873439 163.6317 MS 3.321597 0.008734 F tính 380.29 5% 1.22 1% 1.32 ANOVA (ngày 6) F bảng Nguồn NT Sai số Tổng df 49 100 149 SS 76.674 0.809387 77.48339 MS 1.564776 0.008094 F tính 193.33 5% 1.22 F tính 82.91 5% 1.22 1% 1.32 ANOVA (ngày 8) F bảng Nguồn NT Sai số Tổng df 49 100 149 SS 14.4309 0.355198 14.78609 MS 0.294508 0.003552 1% 1.32 [...]... của đất và an toàn cho môi trường là rất cần thiết Vì vậy, đề tài Phân lập vi khuẩn cố định đạm - hòa tan lân từ đất vùng rễ cây bắp ở đất xám tỉnh Bình Dương và tỉnh Bà Rịa - Vũng Tàu. ” thực hiện nhằm phân lập những dòng vi khuẩn có khả năng cố định đạm và hòa tan lân 1.2 Mục tiêu đề tài Phân lập và tuyển chọn được những dòng vi khuẩn sống ở đất vùng rễ bắp có khả năng cố định đạm, hòa tan lân. .. vùng rễ Từ 8 mẩu đất vùng rễ ở tỉnh Bà Rịa -Vũng Tàu và ở tỉnh Bình Dương đã phân lập được 49 dòng vi khuẩn Trong số 49 dòng vi khuẩn đã phân lập, số dòng được phân lập từ mẫu rễ ở tỉnh Bà Rịa -Vũng Tàu là 29 dòng (trong đó 22 dòng trên môi trường NBRIP và 17 dòng trên môi trường Burk’s) và ở Bình Dương phân lập được 10 dòng (trong đó có 5 dòng trên môi trường NBRIP và 5 dòng trên môi trường Burk’s)... cố định đạm, hòa tan lân tốt và tổng hợp indole-3-acetic acid (IAA) 1.3 Nội dung nghiên cứu Phân lập, tuyển chọn các dòng vi khuẩn có hoạt tính cố định đạm - hòa tan lân và tổng hợp IAA từ đất vùng rễ của cây bắp ở Bình Dương và Bà Rịa Vũng Tàu Đánh giá khả năng cố định đạm, hòa tan lân và tổng IAA của các dòng vi khuẩn được tuyển chọn Chuyên nghành Vi Sinh Vật học 2 Vi n NC&PT Công nghệ Sinh học... dòng vi khuẩn phân lập trên môi trường Burk’s Số TT Nơi thu mẩu Số mẩu Số dòng vi khuẩn phân lập được 1 Bình Dương 1 5 dòng vi khuẩn 2 Bà Rịa -Vũng Tàu 7 17 dòng vi khuẩn Bảng 8: Nguồn gốc của 27 dòng vi khuẩn phân lập trên môi trường NBRIP Số TT Nơi thu mẩu Số mẩu Số dòng vi khuẩn phân lập được 1 Bình Dương 1 5 dòng vi khuẩn 2 Bà Rịa -Vũng Tàu 7 22 dòng vi khuẩn Chuyên nghành Vi Sinh Vật học 23 Vi n... và ứng dụng phân vi sinh trong sản xuất nông nghiệp 2.4.1 Tình hình nghiên cứu và ứng dụng phân vi sinh trên thế giới Thế giới đã có nhiều nghiên cứu và ứng dụng vi sinh vật cố định đạm, hòa tan lân trên cây trồng Trong đó nhiều nghiên cứu cho thấy vi c sử dụng phân sinh học có chủng vi khuẩn cố định đạm và hòa tan lân có thể thay thế một lượng phân hóa học đáng kể Sản phẩm phân bón vi sinh cố định... ĐHCT phóng P và sản phẩm hữu cơ thông qua phosphohydrolase, cung cấp cho tế bào những chất dinh dưỡng cần thiết (Goldstein, 1994) 2.3.3 Vi khuẩn hòa tan lân Trong đất, vi khuẩn hòa tan lân hiện diện với số lượng khác nhau Chúng gồm cả dòng hiếu khí và dòng kỵ khí, thường thấy dòng hiếu khí nằm trong đất (Sperberg, 1958) Mật độ của vi khuẩn hòa tan lân trong vùng rễ cao hơn so với đất ngoài vùng rễ (Katzelson... chiên mao ở cực, có khả năng di chuyển tốt trong nước, không có khả năng tạo bào tử, là vi khuẩn sống tự do (Chan, 1994) Clostridium là vi khuẩn hình que, sinh bào tử, sống tự do trong đất và nước, có thể sinh trưởng và phát triển trong điều kiện yếm khí (Lê Văn Nhương et al., 2009) 2.3 Sơ lược về chu trình lân, quá trình hòa tan lân và vi khuẩn hòa tan lân 2.3.1 Sơ lược về chu trình lân trong tự nhiên... 2.3.2 Quá trình hòa tan lân của vi khuẩn Một vài loài vi khuẩn có khả năng khoáng hóa và hòa tan lân hữu cơ và vô cơ tương ứng (Hilda và Fraga, 2000) Cơ chế chủ yếu của sự hòa tan P vô cơ là hoạt động tổng hợp acid hữu cơ của vi sinh vật và giảm pH đất (Kpomblekou và Tabatabai, 1994) Theo nghiên cứu của Halder et al., (1990) cho thấy những acid hữu cơ phân lập từ Rhizobium leguminosarum hòa tan một lượng... trường và phòng thí nghiệm Vi Sinh Vật đất thuộc Vi n Nghiên cứu và Phát triển Công nghệ Sinh học, trường Đại học Cần Thơ Thời gian thực hiện từ tháng 8/2013 đến tháng 11/2013 3.2 Phương tiện thí nghiệm 3.2.1 Vật liệu thí nghiệm Mẫu đất vùng rễ của cây bắp ở đất xám tỉnh Bình Dương một mẫu và bảy mẫu đất lấy tỉnh Bà Rịa - Vũng Tàu Mỗi mẫu lấy 100g đất ( cách vùng rễ 0,8mm) được trữ nhiệt độ phòng,... trường phân lập đễ trữ mẫu ròng Bước 3: chọn lọc dòng vi khuẩn có khả năng cố định đạm và hòa tan lân: - Cấy chuyển những dòng vi khuẩn đã ròng khi phân lập trên môi trường NBRIP sang môi trường Burk’s (không đạm) - Cấy chuyển những dòng vi khuẩn đã ròng khi phân lập trên môi trường Burk’s (không đạm) sang môi trường NBRIP - Đĩa môi trưởng đã cấy mẫu được ủ trong tủ ủ vi sinh 2-3 ngày để vi khuẩn ... đất an toàn cho môi trường cần thiết Vì vậy, đề tài Phân lập vi khuẩn cố định đạm - hòa tan lân từ đất vùng rễ bắp đất xám tỉnh Bình Dương tỉnh Bà Rịa - Vũng Tàu. ” thực nhằm phân lập dòng vi. .. Kết phân lập đặc điểm dòng vi khuẩn vùng rễ phân lập 4.1.1 Nguồn gốc kết phân lập vi khuẩn vùng rễ Từ mẩu đất vùng rễ tỉnh Bà Rịa -Vũng Tàu tỉnh Bình Dương phân lập 49 dòng vi khuẩn Trong. .. Phân lập, tuyển chọn dòng vi khuẩn có hoạt tính cố định đạm - hòa tan lân tổng hợp IAA từ đất vùng rễ bắp Bình Dương Bà Rịa Vũng Tàu Đánh giá khả cố định đạm, hòa tan lân tổng IAA dòng vi khuẩn