Nghiên cứu tác dụng hỗ trợ điều trị gút trên thực nghiệm của hạt cần tây (apium graveolens l , apiaceae)

BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI TRẦN THỊ BÍCH NGỌC NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG HỖ TRỢ ĐIỀU TRỊ GÚT TRÊN THỰC NGHIỆM CỦA HẠT CẦN TÂY (APIUM GRAVEOLENS L., APIACEAE) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ HÀ NỘI – 2014 BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI TRẦN THỊ BÍCH NGỌC NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG HỖ TRỢ ĐIỀU TRỊ GÚT TRÊN THỰC NGHIỆM CỦA HẠT CẦN TÂY (APIUM GRAVEOLENS L., APIACEAE) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Ngƣời hƣớng dẫn: TS. Nguyễn Thùy Dương DS. Vũ Thị Phương Thảo Nơi thực hiện: Bộ môn Dược lực HÀ NỘI - 2014 LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành khóa luận này, tôi đã nhận được sự giúp đỡ rất nhiều của thầy cô, bạn bè và người thân. Trước tiên, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS. Nguyễn Thùy Dương và DS. Vũ Thị Phương Thảo, những người thầy đã luôn quan tâm, giúp đỡ, hướng dẫn và động viên tôi trong suốt quá trình hoàn thành đề tài này. Xin chân thành cảm ơn các thầy, cô và anh chị kĩ thuật viên Bộ môn Dược lực, đã giúp đỡ và tạo điều kiện cho tôi trong suốt quá trình nghiên cứu và thực hiện đề tài. Xin chân thành cảm ơn các cán bộ phòng đào tạo, các bộ môn, phòng ban khác của trường Đại học Dược Hà Nội. Lời cuối cùng, tôi xin gửi lời cảm ơn đến gia đình và bạn bè, những người đã luôn động viên, giúp đỡ và đóng góp ý kiến cho tôi hoàn thành khóa luận này. Hà Nội, tháng 5, năm 2014. Sinh viên Trần Thị Bích Ngọc MỤC LỤC LI C DANH MC CÁC BNG DANH MC CÁC HÌNH DANH MC CÁC KÍ HIU, CH VIT TT T V 1 NG QUAN 2 1.1. I  BNH GÚT 2 1.1.1. Định nghĩa 2 1.1.2. Quá trình sinh tổng hợp acid uric 2 1.1.3. Cơ chế bệnh sinh của gút 3 1.1.4. Cơ chế gây viêm cấp của tinh thể urat 3 1.1.5. Thuốc sử dụng trong điều trị gút và tăng acid uric máu 4 1.1.5.1. Thuốc chống viêm 4 1.1.5.2. Thuốc giảm tổng hợp acid uric…………………………………………… 6 1.1.5.3. Thuốc gây tăng thải acid uric 7 1.1.5.4. Thuốc tiêu acid uric 8 1.2. TNG QUAN V CÂY CN TÂY 8 1.2.1. Tên gọi 8 1.2.2. Đặc điểm thực vật 9 1.2.3. Phân bố 10 1.2.4. Thành phần hóa học của hạt cần tây 10 1.2.5. Tác dụng sinh học của hạt cần tây 13 1.2.6. Công dụng của hạt cần tây 15 U 16 2.1. NGUYÊN LIU NGHIÊN CU 16 2.1.1. Dược liệu nghiên cứu 16 2.1.2. Chuẩn bị dịch chiết dược liệu 16 N NGHIÊN CU 17 2.2.1. Động vật thí nghiệm 17 2.2.2. Hóa chất, thuốc thử 17 2.2.3. Thiết bị 18 2.3. NI DUNG NGHIÊN CU 19 2.4. U 20 2.4.1. Phương pháp đánh giá tác dụng hạ acid uric huyết thanh trên mô hình gây tăng acid uric cấp thực nghiệm. 20 2.4.2. Phương pháp đánh giá tác dụng ức chế xanthin oxidase in vitro và in vivo 21 2.4.3. Phương pháp đánh giá tác dụng chống viêm thực nghiệm 24 2.4.3.1. Đánh giá tác dụng chống viêm cấp trên mô hình gây phù bàn chân chuột bằng carrageenan 24 2.4.3.2.Phương pháp đánh giá tác dụng chống viêm trên mô hình gây viêm màng hoạt dịch khớp gối 25 2.4.4. Phương pháp xử lý số liệu 26 T QU 27 3.1. KT QU    NG H ACID URIC CA CAO TOÀN PHN HT CN TÂY 27 3.2. KT QU NG C CH XO IN VITRO VÀ IN VIVO CA CAO TOÀN PHN HT CN TÂY 29 3.2.1. Kết quả đánh giá tác dụng ức chế XO in vitro của cao toàn phần hạt cần tây29 3.2.2. Kết quả đánh giá tác dụng ức chế XO in vivo của cao toàn phần hạt cần tây…………… 30 3.3. KT QU    NG CHNG VIÊM CA CAO TOÀN PHN HT CN TÂY 32 3.3.1. Kết quả đánh giá tác dụng chống viêm trên mô hình gây phù bàn chân chuột bằng carrageenan 32 3.3.2. Kết quả đánh giá tác dụng chống viêm trên mô hình gây viêm màng hoạt dịch khớp gối… 34 N 37 4.1. V TÁC DNG H ACID URIC CA CAO TOÀN PHN HT CN TÂY  37 4.2. V TÁC DNG C CH XANTHIN OXIDASE CA CAO TOÀN PHN HT CN TÂY 38 4.3. V TÁC DNG CHNG VIÊM CA CAO TOÀN PHN HT CN TÂY 41 KT LU XUT 44 TÀI LIU THAM KHO DANH MỤC CÁC BẢNG STT Ký hiệu Tên bảng Trang 1 1.1 Các hp cht flavonoid có trong ht cn tây 11 2 2.1 Thành phn mu chng và mu th 21 3 2.2  viêm da trên triu chng 26 4 3.1 Kt qu ng h acid uric ca cao toàn phn ht c uric cp 28 5 3.2 Kt qu ng c ch XO in vitro ca cao toàn phn ht cn tây 29 6 3.3 Kt qu ng c ch XO in vivo ca cao toàn phn ht cn tây 31 7 3.4 Kt qu ng chng viêm trên mô hình gây phù bàn chân chut bng carrageenan 33 8 3.5 Kt qu ng chng viêm trên mô hình gây viêm màng hot dch khp gi bng tinh th natri urat 35 DANH MỤC CÁC HÌNH STT Ký hiệu Tên hình Trang 1 1.1 Qúa  2 2 1.2  gây viêm ca tinh th urat 4 3 1.3  chng viêm ca NSAIDs và glucocorticoid 6 4 1.4 Cây cn tây (Apium graveolens L.) 9 5 1.5 Khung cu trúc ca các hp cht flavonoid có trong ht cn tây 11 6 2.1 Quy trình chit xut cao toàn phn ht cn tây 17 7 2.2 Thit k nghiên cu 19 8 2.3 Quy trình thí nghing h acid uric p bng kali oxonat 20 9 2.4 Quy trình thí nghing c ch XO in vitro 22 10 2.5 ng chng viêm trên mô hình gây phù bàn chân chut bng carrageenan 24 11 3.1 Kt qu ng h acid uric ca cao toàn phn ht cp 28 12 3.2 Kt qu ng c ch XO in vivo ca cao toàn phn ht cn tây 34 13 3.3 Kt qu ng chng viêm trên mô hình gây phù bàn chân chut bng carrageenan 35 DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT XO : xanthin oxidase NSAIDs : non steroidal anti  inflammatory drug 1 ĐẶT VẤN ĐỀ Gút là mt bnh ri lon chuyn hóa vi biu hin  máu. Ti Vit Nam, vi s phát trin ca kinh t xã h     dinh ng thiu hp lý, bnh gút ngày càng tr nên ph bi [3]. Bnh  c th cp và mu có nhng triu ch     di, khó vn  làm ng không nh ti chng cuc sng ca bnh nhân. Vic s dng các thuc hóa c ging viêm, h acid uric máu mc dù cho hiu qu cao song vn còn hn ch v tác dng không mong mun và giá thành, nht là khi bnh nhân phi dùng thuc lâu dài. Vit Nam vi nguc liu cây thuc c s d u tr bnh gút. Mt s nghiên cu c thc hin nhm tìm kim nhc liu mi có kh u tr gút, n nhic liu có kh c ch hong ca enzym xanthin oxidase in vitro,  cây cn tây (Apium graveolens L., h Cn, Apiaceae) [19], [25]. Mt khác, trong y hc c truyn, cn t  u tr bnh thng phong (bnh gút theo y hc c truyn) và các bnh liên quan v kh p khp, viêm khp [8], [13], [20].  phát tric liu này thành ch phu tr gút, cn p tác dng ca cây cng vt thc nghim.  Vit Nam hin  nghiên cc tri u tr gút ca cây cn tây. Vi mong mun góp ph u tr và d phòng tái phát bnh gút bng thuc có ngun g c liu d    khoa h   Nghiên cứu tác dụng hỗ trợ điều trị gút trên thực nghiệm của hạt cần tây (Apium graveolens L., Apiaceae) c thc hin vi ba mc tiêu: 1.  tác dng h acid uric ca ht cn tây trên thc nghim. 2.  tác dng c ch xanthin oxidase in vitro và in vivo ca ht cn tây. 3. ng chng viêm ca ht cn tây trên thc nghim. [...]... graveolens L có 3 thứ sau [13]: - A .graveolens L var secalium Alef (cần tây cho l ): trồng nhiều ở Trung Quốc, Việt Nam và các nƣớc Đông Nam Á khác - A .graveolens L var dulce (Miller) Pers (cần tây cho cuống): trồng nhiều ở vùng ôn đới ấm của châu Âu hay châu Á (tây Liên bang Nga, Ucraina… - A .graveolens L var rapaceum (Miller) Gaudin (cần tây cho củ): trồng ở châu Âu Nhìn chung, tất cả các loại cần. .. viêm trên thực nghiệm [25] Một nghiên cứu khác đƣợc công bố cho thấy tác dụng chống viêm tốt của luteolin - một flavonoid có trong cần tây trên thực nghiệm [49] Các nghiên cứu thực hiện trên mô hình gây viêm loét dạ dày cũng cho thấy cần tây cho tác dụng chống viêm tốt 14 1.2.5.2 Tác dụng hạ acid uric máu Dịch chiết ether dầu hỏa và dịch chiết methanol từ hạt cần tây có tác dụng hạ acid uric máu Nghiên. .. chất trên thấy: tinh dầu có trong hạt cần tây chủ yếu l limonen và β-selinen, sedanolid, sedanenolid, 3nB…Trong đ , 3nB và sedanoid l những hợp chất có nhiều tác dụng sinh học: 3nB có tác dụng hạ huyết áp, chống viêm, bảo vệ gan, chống ung thƣ và l m giảm độc tính của acrylamid Sedanoid có tác dụng giải độc gan, chống loét dạ dày - tá tràng, chống oxy hóa 1.2.4.3 Coumarin Các nghiên cứu về cần tây. .. cinnamaldehyd từ cần tây l m bất hoạt vi khuẩn Salmonella enteric kháng kháng sinh [30] Dịch chiết hạt cần tây có tác dụng chống vi khuẩn Helicobacter pylori, một trong những nguyên nhân gây loét dạ dày - tá tràng [47] 15 1.2.5.6 Tác dụng hạ huyết áp Nghiên cứu in vitro cho thấy, dịch chiết methanol hạt cần tây có tác dụng ức chế men chuyển angiotensin Tuy nhiên, tác dụng này còn kém xa so với lisinopril... do, chống oxy hóa mạnh Đáng l u , trong cần tây có 2 flavonoid l apigenin và kaempferol đã đƣợc chứng minh có tác dụng ức chế enzym xanthin oxidase [45] 1.2.5.4 Tác dụng chống ung thư Năm polyacetylen trong dịch chiết cần tây đƣợc chứng minh có tác dụng gây độc tế bào gồm: falcarinol, falcarindiol, panaxydiol, 8-O-methylfalcarindiol Khả năng này đã đƣợc đánh giá bằng xét nghiệm V-PI annexin Falcarinol... 10 Luteolin-7-Oapiosyl glucosid Luteolin-7-Oglucosid Các flavonoid có trong cần tây chủ yếu có khung flavon, l dẫn xuất của apigenin hoặc luteolin Apigenin và dẫn chất l nhóm chất có tác dụng sinh học mạnh với nhiều tác dụng quan trọng nhƣ tác dụng chống viêm, chống ngƣng tập tiểu cầu, chống ung thƣ 13 1.2.4.2 Tinh dầu Hạt cần tây chứa 2 - 3% tinh dầu [13] Kết quả định l ợng tinh dầu trong hạt cần. .. coumarin, trong đó 11 chất thuộc nhóm fruocoumarin, 6 chất thuộc nhóm coumarin glycoside và 5 chất thuộc nhóm coumarin đơn giản 1.2.5 Tác dụng sinh học của hạt cần tây 1.2.5.1 Tác dụng chống viêm Nhiều nghiên cứu gần đây trên động vật thực nghiệm đã chứng minh tác dụng chống viêm tốt của dịch chiết cần tây Nghiên cứu của Mencherini T và cộng sự đã chứng minh các flavonoid trong l cần tây có tác dụng. .. hình 1.3) Chỉ định: Điều trị gút đã chống chỉ định với NSAIDs và colchicin [17 ], [31] Tác dụng không mong muốn: Glucocorticoid thƣờng gây loãng xƣơng, loét dạ dày tá tràng, ph , tăng huyết áp và các rối loạn khác [2]  Colchicin Cochicin l alkaloid của cây Cholchicum autumnale đƣợc sử dụng cho bệnh đau khớp từ thế kỉ 16 6 Tác dụng: Thuốc có tác dụng tốt trong đau do gút, không có tác dụng trong trƣờng... Falcarinol đƣợc chứng minh l hoạt chất có độc tính rõ rệt trên dòng tế bào bạch cầu lympho trong bệnh u lympho cấp Dịch chiết cần tây cũng chứng tỏ tác dụng diệt tế bào ung thƣ gan [35] 1.2.5.5 Tác dụng kháng khuẩn Dịch chiết cần tây có tác dụng kháng khuẩn mạnh Theo nghiên cứu của Magrinya và cộng sự , dịch chiết cần tây có tác dụng kháng Staphylococus carnosus [24] Theo một nghiên cứu khác, carvacrol và... giảm l n l ợt 44% và 31% so với l chứng [14] 1.2.5.3 Tác dụng chống oxy hóa Năm 200 6, một nghiên cứu đã chứng minh rằng dịch chiết rễ và l cần tây có tác dụng dọn dẹp các gốc tự do và l m giảm cƣờng độ lipoperoxy hóa trong liposome Dịch chiết n-butanol của cần tây cho hiệu quả chống oxy hóa cao nhất [11] Một nghiên cứu công bố năm 2011 cho thấy hợp chất phenolic trong hạt cần tây có tác dụng khử .  Nghiên cứu tác dụng hỗ trợ điều trị gút trên thực nghiệm của hạt cần tây (Apium graveolens L. , Apiaceae) c thc hin vi ba mc tiêu: 1.  tác dng h acid uric ca ht cn tây. DƢỢC HÀ NỘI TRẦN THỊ BÍCH NGỌC NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG HỖ TRỢ ĐIỀU TRỊ GÚT TRÊN THỰC NGHIỆM CỦA HẠT CẦN TÂY (APIUM GRAVEOLENS L. , APIACEAE) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Ngƣời hƣớng. NỘI TRẦN THỊ BÍCH NGỌC NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG HỖ TRỢ ĐIỀU TRỊ GÚT TRÊN THỰC NGHIỆM CỦA HẠT CẦN TÂY (APIUM GRAVEOLENS L. , APIACEAE) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ HÀ NỘI