Nghiên cứu bào chế pellet rabeprazol bằng phương pháp bồ dần

Bảng 1.1 Độ tan của rabeprazol natri trong các môi trường 6 Bảng 3.2 Độ chính xác trong ngày và khác ngày của phương pháp định lượng 24 Bảng 3.3 Kết quả thử tương kỵ của rabeprazol nat

TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

Người hướng dẫn:

PGS.TS.: Nguyễn Ngọc Chiến

Nơi thực hiện:

1 Viện Công nghệ Dược phẩm quốc gia

2 Bộ môn Công nghiệp Dược

HÀ NỘI – 2014

Nguyễn Ngọc Chiến - người thầy đã truyền cho tôi tình yêu khoa học qua những giờ giảng bào chế, dìu dắt tôi từ những ngày đầu làm nghiên cứu khoa học, cũng là người trực tiếp hướng dẫn và tận tình chỉ bảo, giúp đỡ tôi hoàn thành khóa luận tốt nghiệp này

Tôi xin chân thành cảm ơn ThS Nguyễn Hạnh Thủy người đã nhiệt tình hướng dẫn, giúp đỡ, giải đáp những thắc mắc, khó khăn mà tôi gặp phải trong suốt thời gian thực hiện khóa luận

Tôi cũng xin gửi lời cảm ơn đến các thầy, cô giáo và các anh, chị kỹ thuật viên Bộ môn Công nghiệp Dược, Viện Công nghệ Dược phẩm Quốc gia - những người đã luôn giúp đỡ và tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong quá trình thực nghiệm

và nghiên cứu để hoàn thành khóa luận này

Tôi cũng xin cảm ơn Ban giám hiệu, các phòng ban, các thầy cô giáo và cán

bộ nhân viên trường Đại học Dược Hà Nội - những người đã dạy bảo và giúp đỡ tôi trong suốt 5 năm học tập tại đây

Cuối cùng, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình và bạn bè đã luôn ở bên động viên khích lệ và giúp đỡ tôi trong suốt thời gian qua

Hà Nội, ngày 01 tháng 05 năm 2014

Sinh viên

Phạm Thị Linh Giang

DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT

DANH MỤC CÁC BẢNG

DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ

ĐẶT VẤN ĐỀ………1

Chương I: TỔNG QUAN 2

1.1 Đại cương về pellet 2

1.1.1 Khái niệm 2

1.1.2 Ưu điểm và hạn chế 2

1.1.3 Các thành phần của pellet 4

1.1.4 Các phương pháp bào chế pellet 4

1.2 Đại cương về rabeprazol natri 6

1.2.1 Công thức cấu tạo 6

1.2.2 Tính chất lí hóa 6

1.2.3 Đặc tính dược lực học 7

1.2.4 Đặc tính dược động học 7

1.2.5 Chỉ định, liều dùng 8

1.2.6 Tác dụng không mong muốn 8

1.2.7 Chống chỉ định 8

1.2.8 Ưu điểm của rabeprazol so với các thuốc khác trong nhóm 8

1.2.9 Các chế phẩm lưu hành trên thị trường 9

1.2.10 Các phương pháp định lượng rabeprazol 9

1.2.11 Một số nghiên cứu về độ ổn định của rabeprazol 11

2.1 Đối tượng nghiên cứu 15

2.2 Nguyên vật liệu và thiết bị 15

2.2.1 Nguyên liệu 15

2.2.2 Thiết bị 15

2.3 Nội dung nghiên cứu 16

2.3.1 Nghiên cứu ảnh hưởng của loại dung môi đến độ ổn định của rabeprazol 16

2.3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng của yếu tố công thức đến một số chỉ tiêu chất lượng của pellet rabeprazol 16

2.4 Phương pháp nghiên cứu 16

2.4.1 Thử tương kỵ của dược chất với các dung môi và dung dịch thử 16

2.4.2 Phương pháp bào chế pellet rabeprazol 17

2.4.3 Phương pháp đánh giá chỉ tiêu chất lượng pellet 18

3.1 Kết quả thẩm định một số chỉ tiêu của phương pháp định lượng đo quang phổ hấp thụ 22

3.1.1 Xác định độ đặc hiệu 22

3.1.2 Độ tuyến tính 22

3.1.3 Độ đúng 23

3.1.4 Độ chính xác 24

3.2 Kết quả thử tương kỵ của rabeprazol natri trong các loại dung môi 25

3.2.1 Kết quả thử tương kỵ của rabeprazol natri trong các dung môi 25

3.2.2 Kết quả thử tương kỵ của rabeprazol natri trong các dung dịch đệm 26

3.2.4 Kết quả thử tương kỵ của rabeprazol natri trong các dung dịch tá dược

kiềm 28

3.3 Kết quả bào chế pellet rabeprazol natri bằng phương pháp bồi dần 30

3.3.1 Kết quả khảo sát các thông số kĩ thuật của quá trình bồi dần 30

3.3.2 Kết quả xây dựng công thức bào chế pellet rabeprazol 30

Chương IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 41

AUC Area under curve (Diện tích dưới đường cong)

HPLC High perfomance liquid chromatography (Sắc ký lỏng hiệu

năng cao ) HPMC Hydroxypropyl methylcellulose

LC/MS Liquid chromatography-mass spectrometry (Sắc ký lỏng kết hợp

khối phổ)

PVP

PPI

Polyvinyl pyrolidon Thuốc ức chế bơm proton

UV Ultraviolet (Quang phổ hấp thụ tử ngoại)

UV-VIS Ultraviolet - Visible spectroscopy (Quang phổ hấp thụ tử ngoại

khả kiến)

Bảng 1.1 Độ tan của rabeprazol natri trong các môi trường 6

Bảng 3.2 Độ chính xác trong ngày và khác ngày của phương pháp định lượng 24

Bảng 3.3 Kết quả thử tương kỵ của rabeprazol natri trong dung môi 25 Bảng 3.4 Kết quả thử tương kỵ của rabeprazol natri trong các dung dịch đệm 26 Bảng 3.5 Kết quả thử tương kỵ của rabeprazol natri trong dung dịch đệm

borat pH 9,0 ở các nồng độ dược chất khác nhau

27

Bảng 3.6 Kết quả nghiên cứu sự thay đổi hàm lượng dược chất theo thời gian

trong đệm borat pH 9,0 ở nồng độ 20 µg/ml bằng phương pháp đo quang phổ hấp thụ

pellet sau 4 ngày ở điều kiện 60 0 C

Bảng 3.13 Ảnh hưởng của nồng độ chất rắn đến thời gian và hiệu suất bồi dần 37 Bảng 3.14 Ảnh hưởng của tỷ lệ chất hóa dẻo đến quá trình bào chế pellet 38 Bảng 3.15 Ảnh hưởng của tỷ lệ chất rắn đến quá trình bào chế pellet 39

rabeprazol natri

Hình 3.5 Ảnh hưởng của tỷ lệ tá dược dính tới độ hòa tan của rabeprazol từ

pellet rabeprazol

34

ĐẶT VẤN ĐỀ

Với nhịp sống hiện đại ngày càng căng thẳng cùng với thói quen ăn uống thiếu khoa học, loét dạ dày tá tràng đang dần trở thành bệnh lý khá phổ biến và không ngừng gia tăng ở Việt Nam với tỷ lệ khoảng 10% dân số gây nguy cơ tử vong do các biến chứng như hẹp môn vị, chảy máu dạ dày tá tràng, ung thư Bên cạnh một số biện pháp về chăm sóc sức khỏe, điều chỉnh chế độ ăn uống thì hầu hết các trường hợp điều trị loét dạ dày-tá tràng đều cần đến sự can thiệp của thuốc

Có nhiều nhóm thuốc dùng để điều trị loét dạ dày tá tràng với những cơ chế khác nhau, trong đó, rabeprazol natri là một thuốc thuộc nhóm ức chế bơm proton,

có tác dụng ức chế đặc hiệu sự tăng tiết acid đem lại hiệu quả cao không chỉ trong điều trị loét dạ dày tá tràng mà trong cả các chứng viêm loét thực quản, trào ngược

dạ dày - thực quản… So với các thuốc trong nhóm, rabeprazol natri giảm được tương tác thuốc đáng kể khi dùng kèm các thuốc chuyển hóa mạnh tại gan [27]

Việc bào chế rabeprazol ở dạng pellet có nhiều ưu điểm so với các dạng bào chế khác Đây là dạng thuốc dễ sử dụng, hình thức bắt mắt, độ ổn định và sinh khả dụng ổn định hơn viên nén Trên thực tế, các nghiên cứu về pellet rabeprazol hầu như chưa được công bố nhiều như các nghiên cứu về viên nén [5], [14], [20] hoặc vi

tiểu phân [11], [18], [30], [31] Vì vậy, chúng tôi tiến hành đề tài “Nghiên cứu bào chế pellet rabeprazol bằng phương pháp bồi dần” với mục tiêu:

1 Xây dựng công thức bào chế pellet rabeprazol bằng phương pháp bồi dần

2 Đề xuất tiêu chuẩn cơ sở của pellet rabeprazol

Chương I: TỔNG QUAN 1.1 Đại cương về pellet

1.1.1 Khái niệm

Trong bào chế, pellet được xem là những “hạt thuốc nhỏ” có dạng hình cầu hoặc gần như cầu, thường có đường kính từ 0,25 mm đến 1,5 mm, được hình thành

do quá trình liên kết các tiểu phân dược chất với các tá dược khác nhau [1]

Pellet không phải là một dạng bào chế hoàn chỉnh mà chỉ là những “chế phẩm trung gian” được đóng vào nang cứng hoặc dập thành viên nén Sản phẩm cuối cùng được coi như các hệ phân phối thuốc, xét về khía cạnh bào chế và sinh dược học bào chế, có nhiều ưu điểm hơn so với viên nén và nang thuốc thông thường [1]

 Sử dụng viên nén hoặc nang thuốc bào chế từ pellet bao tan ở ruột sẽ khắc phục được hiện tượng dồn liều hoặc viên không rã như đã từng gặp ở viên nén bao tan trong ruột [1]

 Việc bao màng cho pellet thuận lợi hơn nhiều so với bao màng viên nén hay bao hạt (do pellet có hình cầu) có thể tăng cường bảo vệ dược chất chống lại các tác động bất lợi của môi trường bên ngoài như ẩm, oxy trong không khí Pellet

có khả năng trơn chảy tốt nên dễ dàng thu được viên nén hay nang thuốc có khối lượng hoặc hàm lượng dược chất có độ đồng nhất và độ lặp lại cao [1]

 Có thể kết hợp nhiều loại pellet trong cùng một nang với nhiều mục đích khác nhau như: kết hợp các pellet có màu sắc khác nhau trong cùng một nang, kết

hợp các dược chất tương kị nhau được bào chế thành những pellet riêng biệt nhau [1]

 Ngoài ra còn có thể bào chế các chế phẩm thuốc tác dụng kéo dài từ pellet để tránh được hiện tượng bùng liều có thể gặp ở những dạng thuốc kéo dài chỉ gồm một đơn vị liều duy nhất [1]

 Sử dụng các hạt pellet có thời gian giải phóng dược chất khác nhau trong cùng một nang thuốc có thể giảm sự dao động nồng độ đỉnh của thuốc trong huyết tương (giảm Cmax của thuốc trong huyết tương) nên có khả năng giảm một số tác dụng phụ của thuốc hay gặp khi nồng độ thuốc trong huyết ương cao mà không làm giảm sinh khả dụng của thuốc [17]

 Bào chế dưới dạng pellet còn có tác dụng che dấu mùi vị của những dược chất có vị khó chịu bằng cách sử dụng các loại màng bao thích hợp hoặc đóng vào nang [21]

 Hạn chế

 Quy trình bào chế pellet thường kéo dài và chi phí khá cao tùy thuộc vào từng loại thiết bị và phương pháp bào chế được áp dụng Và để bào chế được pellet cần phải có những thiết bị chuyên dụng phù hợp [1]

 Pellet chỉ mới là sản phẩm trung gian Muốn dập viên hay đóng nang thì mức độ đồng nhất về kích thước, tỷ trọng các pellet có ảnh hưởng trực tiếp đến mức

độ đồng nhất về khối lượng và hàm lượng dược chất trong từng viên thuốc [1]

 Hàm lượng dược chất trong mỗi pellet đảm bảo sự đồng nhất về hàm lượng dược chất của nang thuốc Do đó với những pellet có hàm lượng dược chất cao hoặc thấp thì sự sai khác chỉ một vài pellet trong một nang thuốc trong quá trình đóng nang cũng sẽ dẫn đến một sự dao động lớn về hàm lượng dược chất trong viên Do vậy, đối với những dược chất có hoạt lực mạnh cần thêm một lương tá dược pha loãng trơ thích hợp với kích thước của vỏ nang dự trù để đóng pellet đó [1]

 Bào chế pellet rất khó kiểm soát trong quá trình, với phương pháp đùn tạo cầu, việc kiểm soát độ ẩm của khối bột trong quá trình ủ và quá trình đùn gặp khó

khăn do có sự gia nhiệt làm bay hơi dung môi Với phương pháp bồi dần, nếu không điều chỉnh được tốc độ phun dịch hợp lí, pellet có thể bị dính và khó tiến hành tiếp được [17]

1.1.3 Các thành phần của pellet

Pellet có thành phần cơ bản tương tự như viên nén về dược chất và các loại tá dược Các loại tá dược thường được dùng trong bào chế pellet bao gồm: Tá dược độn, tá dược dính, tá dược trơn, tá dược chống dính, tá dược rã, tá dược điều chỉnh

pH, các chất diện hoạt, tá dược tạo cầu, tá dược điều hòa sự chảy, tá dược điều khiển giải phóng dược chất [1]

1.1.4 Các phương pháp bào chế pellet

 Phương pháp đùn - tạo cầu:

Là phương pháp được áp dụng rộng rãi nhất do ưu thế về năng suất và chất lượng pellet thu được Phương pháp này gồm các bước như sau [1]:

 Tạo hỗn hợp bột kép đồng nhất giữa dược chất và tá dược: Dược chất và tá dược được phân chia thành bột có kích thước tiểu phân xác định rồi trộn thành hỗn hợp đồng nhất Tạo khối bột ẩm: Thêm tá dược dính lỏng vào hỗn hợp bột kép và nhào trộn thành khối ẩm có độ dẻo phù hợp để tạo thành các sợi hình trụ

 Đùn khối bột qua sàng với đường kính mắt sàng thích hợp thành các sợi hình trụ, cắt đoạn bằng máy đùn

 Chuyển các đoạn sợi đùn hình trụ thành các pellet bằng máy tạo cầu Làm khô pellet bằng phương pháp thích hợp và lựa chọn pellet có kích thước xác định

Phương pháp này có ưu điểm là tạo pellet cầu, đều, chắc, hiệu suất cao Nhược điểm là đòi hỏi trang thiết bị chuyên dụng, phải kiểm soát nhiều thông số ảnh hưởng đến hiệu suất và chất lượng tạo pellet

 Phương pháp bồi dần:

Là phương pháp được thực hiện bằng sự bồi, bám dần của nhiều lớp dược chất và tá dược liên tiếp lên bề mặt của các nhân có sẵn cho tới khi thu được pellet

có kích thước mong muốn Nhân có sẵn là tinh thể thô của dược chất hay tá dược hoặc có thể là pellet trơ Có thể tiến hành bồi dần bằng dung dịch hoặc hỗn dịch và bồi dần từ bột mịn [1]

- Bồi dần từ bột mịn: Phun tá dược dính đều khắp lên bề mặt các nhân, sau

đó thêm bột mịn dược chất và tá dược hoặc bột mịn dược chất vào khối nhân đã được thấm ẩm Quá trình này lặp lại nhiều lần cho đến khi thu được pellet có kích thước mong muốn Bào chế pellet bằng phương pháp bồi dần từ bột khô có thể sử dụng các loại nồi bao thường hoặc các thiết bị bao kết hợp ly tâm [1]

Phương pháp bồi dần từ bột mịn có ưu điểm là không đòi hỏi trang thiết bị phức tạp nhưng nhược điểm là thời gian tạo pellet kéo dài, hiệu suất không cao khi

sử dụng nồi bao thông thường [1]

- Bồi dần từ dung dịch hoặc hỗn dịch: Dược chất và tá dược được hoà tan hoặc phân tán trong dung môi thích hợp có sẵn tá dược dính đã hoà tan trong đó Sau đó phun dung dịch hoặc hỗn dịch này lên bề mặt các nhân có sẵn Khi dung môi bay hơi thì các chất tan sẽ kết tinh lại và bám dính trên bề mặt của nhân Quá trình này lặp lại nhiều lần cho đến khi thu được pellet có kích thước mong muốn Các thiết bị có thể dùng để bào chế pellet bằng phương pháp bồi dần từ dung dịch hay hỗn dịch là nồi bao thường, hoặc nồi bao cải tiến, hoặc thiết bị bao tầng sôi [1]

Phương pháp bồi dần từ dung dịch hoặc hỗn dịch có ưu điểm là pellet có độ đồng nhất cao về hàm lượng, kích thước và tính chất bề mặt Các đặc tính này rất thuận lợi cho quá trình bao màng pellet tiếp theo Tuy nhiên phương pháp này đòi hỏi thiết bị chuyên dụng mới cho hiệu suất cao [1]

Theo Cole G, Hoganand J, Aulton M, [6] khi tiến bành bao bồi pellet thì có 9 yếu tố thuộc về thông số ảnh hưởng đến chất lượng bao bao gồm: Áp suất phun khí, tốc độ phun dịch bao, khoảng cách từ súng phun đến pellet, hình dạng súng phun, loại súng phun, khả năng tạo thành tia chất lỏng dịch bao từ vòi phun, đường kính

ống dẫn dịch bao vào máy bao, tốc độ thổi gió của thiết bị để sấy khô và nhiệt độ bao

Ngoài 2 phương pháp trên còn có một số phương pháp bào chế pellet khác như phương pháp phun sấy, phương pháp phun đông tụ

1.2 Đại cương về rabeprazol natri

1.2.1 Công thức cấu tạo

- Tên khoa học: 1H-benzimidazole natri [16], [19]

2-({[4-(3-Methoxypropoxy)-3-methyl-2-pyridyl]methyl}sulfinyl) Công thức phân tử: C18H20N3NaO3S

- Khối lượng phân tử: 381,43

Bảng 1.1: Độ tan của rabeprazol natri trong các môi trường [10]

Độ tan của rabeprazol có xu hướng thay đổi theo pH môi trường, khi tăng pH thì độ tan của rabeprazol cũng tăng lên Rabeprazol natri có độ tan tốt nhất trong nhóm các thuốc PPI [34]

 Tính chất hóa học:

Cũng như các dẫn chất của benzimidazol khác, rabeprazol vừa có tính base, vừa

có tính acid và hấp thụ mạnh tia tử ngoại Rabeprazol rất dễ phân hủy trong môi

trường acid [2]

1.2.3 Đặc tính dược lực học

 Tác dụng : Thuốc ức chế đặc hiệu và không hồi phục bơm proton do tác dụng chọn lọc trên tế bào thành dạ dày nên thuốc tác dụng nhanh và hiệu quả hơn các nhóm thuốc khác, tỷ lệ liền sẹo có thể đạt 95% sau 8 tuần điều trị Rất ít ảnh hưởng đến khối lượng dịch vị, sự bài tiết pepsin, yếu tố nội dạ dày và sự co bóp

dạ dày [3]

 Cơ chế tác dụng: Rabeprazol cũng như các chất trong nhóm có cùng

cơ chế tác dụng là ức chế H+/K+ ATPase Khi vào trong cơ thể ở pH < 5, rabeprazol được proton hóa thành 2 dạng: acid sulphenic và sulphenamic Hai chất này gắn thuận nghịch với nhóm sulfhydryl của H+/K+ ATPase ở tế bào thành dạ dày nên ức chế bài tiết acid do bất kì nguyên nhân nào [3]

 Tỷ lệ liên kết với protein huyết tương là 97 % [27]

 Trong cơ thể, rabeprazol được chuyển hóa qua hệ enzym cytocrom P450 của gan Enzym CYP2C19 và CYP3A4 chuyển hóa rabeprazol thành các sản phẩm là thioether, thioether carboxylic acid, sulfon và desmethylthioether Các sản phẩm chuyển hóa được bài xuất 90% qua nước tiểu và phần còn lại qua phân [27]

 Thời gian bán thải khoảng 1 giờ, tăng gấp 2-3 lần đối với bệnh nhân suy gan, 30 % đối với người cao tuổi, 1,6 giờ với người có chuyển hóa qua CYP2C19 chậm [27]

1.2.5 Chỉ định, liều dùng

 Rabeprazol là một chất ức chế bơm proton thuộc nhóm PPI, sử dụng tương tự như omeprazol Dạng bào chế hay sử dụng là viên nén rabeprazol natri ở dạng bao tan trong ruột Thường được uống vào buổi sáng [27]

 Liều dùng là 20 mg mỗi ngày trong vòng 4 đến 8 tuần cho bệnh nhân loét dạ dày – tá tràng hoặc trào ngược dạ dày – thực quản Bệnh nhân có triệu chứng nhưng chưa ăn mòn hoặc chưa viêm loét thực quản với liều 10 hoặc 20 mg mỗi ngày trong 4 tuần Đối với bệnh nhân loét dạ dày – tá tràng tiến triển, dùng liều 20

mg mỗi ngày trong 4 đến 8 tuần đối với loét tá tràng và 6 đến 12 tuần đối với loét

dạ dày Để chống lại Helicobacter, rabeprazol được kết hợp với clarithromycin và

amoxicilin, metronidazol trong phác đồ điều trị, với bệnh nhân hội chứng Zollinger – Ellison, liều bắt đầu là 60 mg mỗi ngày điều chỉnh theo đáp ứng [27]

1.2.6 Tác dụng không mong muốn

 Rối loạn tiêu hóa: buồn nôn, táo bón, tiêu chảy

 Rối loạn thần kinh trung ương: chóng mặt, nhức đầu, ngủ gà (ít gặp)

 Do ức chế tiết acid, pH dạ dày có thể tăng lên, làm cho một số vi khuẩn phát triển gây ung thư [3]

1.2.7 Chống chỉ định

 Mẫn cảm với thuốc

 Loét dạ dày ác tính

 Thận trọng khi mang thai và thời kì cho con bú [3]

1.2.8 Ưu điểm của rabeprazol so với các thuốc khác trong nhóm

 Rabeprazol là dẫn chất mới của nhóm benzimidazol có nhiều điều khác biệt

so với các thuốc còn lại trong nhóm Các nghiên cứu in vitro trên động vật chỉ ra

rằng rabeprazol có khả năng ức chế sự bài tiết acid mạnh hơn omeprazol và hiệu quả ức chế tiết acid nhanh hơn omeprazol, lansoprazol, pantoprazol [33]

 Rabeprazol kháng tiết acid nhanh và hiệu lực hơn các thuốc khác trong nhóm Thuốc ức chế hoàn toàn enzym H+/K+ ATPase trong vòng 5 phút, trong khi

đó, thời gian ức chế hoàn toàn enzym H+/K+ ATPase của omeprazol và lansoprazol

là 30 phút và pantoprazol là 45 phút [33]

 Rabeprazol giảm nguy cơ tương tác thuốc khi dùng cùng với các thuốc diazepam, phenytoin, theophyllin, warfarin so với các thuốc trong nhóm, đặc biệt là omeprazol [12], [27]

1.2.9 Các chế phẩm lưu hành trên thị trường

Bảng 1.2: Một số chế phẩm của rabeprazol natri trên thị trường

Dạng bào chế Biệt dược Hãng sản xuất Hàm lượng

Vi nang bao tan

Pellet bao tan

1.2.10 Các phương pháp định lượng rabeprazol

Hiện nay, phương pháp định lượng rabeprazol chưa được đưa vào Dược điển của Mỹ, Anh hay Việt Nam Tuy nhiên, có rất nhiều nghiên cứu đã được tiến hành trên thế giới để tìm phương pháp định lượng rabeprazol natri Trong đó, phương pháp đo quang phổ hấp thụ và HPLC là 2 phương pháp được nghiên cứu rộng rãi nhất

 Phương pháp đo quang phổ hấp thụ

 Đo quang phổ hấp thụ của dung dịch rabeprazol natri trong môi trường NaOH 0,1N tại bước sóng 292 nm Đây là phương pháp đơn giản, nhanh, có thể tiến hành để định lượng rabeprazol natri trong chế phẩm trong quá trình sàng lọc công thức [13]

 Một phương pháp khác là cho rabeprazol tạo phức với 2,3-dicloro-5,6 dicyano-p-benzoquinon (DDQ) và đo quang phổ hấp thụ ở bước sóng 460 nm [15] hoặc tạo phức với 1,2-naphthoquinon-4-sulphonat và đo quang phổ hấp thụ ở bước sóng 453 nm [26]

 Một số tác giả còn sử dụng phương pháp đo quang ở 2 bước sóng khác nhau để định lượng rabeprazol natri trong các dạng bào chế kết hợp [29]

 Phương pháp HPLC: Với ưu điểm về tính chính xác và độ đặc hiệu, HPLC

là phương pháp được nhiều tác giả lựa chọn để định lượng rabeprazol natri trong quá trình sàng lọc công thức cũng như trong các dạng bào chế [8], [9], [24], [25] Ngoài ra, phương pháp HPLC còn được sử dụng để định lượng rabeprazol natri

trong các chế phẩm kết hợp khác [7], [32] (xem phụ lục 1)

 Buchireddy và cộng sự đã tiến hành nghiên cứu phương pháp HPLC

để có thể tách được rabeprazol natri với các sản phẩm phân hủy của nó trong quá trình nghiên cứu độ ổn định của rabeprazol dưới tác động của nhiệt độ, ánh sáng Điều kiện sắc kí như sau: Cột C8 (250 mm × 4,0 mm, kích thước hạt 5,0µm) Tốc độ dòng 1,0 ml/phút Thể tích tiêm 20µl Detector: 280 nm Pha động gồm nước : acetonitril : triethylamin = 55:45:0,25 (Theo tỷ lệ thể tích) [22]

 Osman và cộng sự đã tiến hành nghiên cứu phương pháp HPLC để định lượng rabeprazol natri trong chế phẩm và trong quá trình thử độ ổn định với điều kiện sắc kí: Cột C 18 (150 mm × 3,9 mm, kích thước hạt 4 μm), pha động gồm 0,05 M đệm KH2PO4 pH = 7,0 : methanol : acetonitrile = 5:3:2 ( theo thể tích), tốc

độ dòng là 1,5 mL/phút, detector UV 284 nm, thể tích tiêm 20 μL Thời gian lưu của rabeprazol natri tìm được là 6,6 phút [22]

1.2.11 Một số nghiên cứu về độ ổn định của rabeprazol

Rabeprazol natri có độ tan tốt nhất trong tất cả các dược chất trong nhóm PPIs,

do đó, độ ổn định của nó cũng kém nhất, nó dễ bị phá hủy bởi các tác nhân như độ

ẩm, ánh sáng, nhiệt độ, pH [28], [34], yêu cầu bảo quản nguyên liệu ở nhiệt độ

2-80C Do đó, việc nghiên cứu độ ổn định của rabeprazol có một ý nghĩa hết sức quan trọng trong việc xây dựng công thức cũng như quá trình kiểm nghiệm các chế phẩm

 Yun-Seok Rhee [25] và cộng sự đã tiến hành nghiên cứu mối tương quan giữa sự thay đổi về màu sắc và sự thoái biến của thuốc Thiết bị đo mật độ màu được sử dụng để đánh giá sự thay đổi màu sắc và máy sắc kí HPLC dùng để xác định hàm lượng của thuốc Sự tương kị giữa tá dược và dược chất theo dõi ở 2 điều kiện là 450C, độ ẩm 75% và 600C trong vòng 3 ngày Độ ổn định của 6 công thức bào chế cũng theo dõi trong 2 điều kiện trên trong vòng 4 tuần Sau đó, tiến hành đánh giá mối quan hệ giữa sự thay đổi màu sắc và % sản phẩm phân hủy bằng thiết

bị nói trên Những kết quả thu được cho thấy có thể sử dụng sự thay đổi màu sắc là một công cụ hữu ích, nhanh chóng trong việc đánh giá sự tương tác giữa dược chất

và tá dược cũng như trong việc xây dựng, lựa chọn công thức của các dạng bào chế rắn

 C.V Garcia [8] và cộng sự đã nghiên cứu độ ổn định của rabeprazol natri theo thời gian trong 3 môi trường pH khác nhau là đệm phosphat pH = 6,8; đệm phosphat pH = 7,5; đệm borat pH = 9,0 Bằng phương pháp HPLC, tiến hành xác định hàm lượng rabeprazol natri còn lại sau các khoảng thời gian 0 giờ, 1 giờ, 2 giờ từ 900 ml dung dịch đệm ban đầu có lượng rabeprazol natri cao gấp 3 lần trong

1 đơn vị chế phẩm

Kết quả tiến hành ở nhiệt độ 37 0 C cho thấy: Lượng rabeprazol natri giảm

nhanh nhất trong môi trường đệm phosphat pH = 6,8; giảm chậm hơn trong môi trường phosphat pH = 7,5; ở môi trường đệm borat pH = 9,0, hàm lượng rabeprazol

natri giảm chậm và hầu như không thay đổi trong vòng 2 giờ đầu Do đó, đệm borat

pH = 9,0 được chọn làm môi trường cho thí nghiệm thử độ hòa tan

 Một nghiên cứu khác được tiến hành bởi Ren và cộng sự [24] để đánh giá ảnh hưởng của một số tá dược Brij®58, Poloxamer 188, Cremophor RH40, Gelucire 44/14 và PEG 6000 đến sự ổn định của rabeprazol natri trong môi trường

pH = 6,8 (giả dịch ruột) Tiến hành ở 2 nhiệt độ 370C và 600C, sử dụng phương pháp HPLC để định lượng rabeprazol natri còn lại và lượng tạp phân hủy chính là thioether-rabeprazol (sử dụng kĩ thuật LC/MS để xác định tạp phân hủy và hàm lượng của tạp) sau 0 phút, 15 phút, 60 phút Tiến hành song song cùng mẫu đối chiếu không có mặt của tá dược và so sánh kết quả

Nghiên cứu chỉ ra rằng: Việc thêm các tá dược trên góp phần cải thiện độ

ổn định của rabeprazol natri Sự phân hủy của rabeprazol natri khi không có mặt của tá dược tuân theo động học của phản ứng bậc 1 có hằng số k tại 370C và 600C lần lượt là 0,75 và 2,78 giờ -1 Trong tất cả những tá dược được nghiên cứu, Brij®58 cải thiện độ ổn định tốt nhất với hằng số k tại 370C và 600C lần lượt chỉ còn 0,22 và 0,53 giờ -1 Như vậy, chế phẩm rabeprazol natri có chứa các tá dược thích hợp có thể cải thiện độ ổn định của dược chất trong môi trường dịch ruột đồng thời tăng sinh khả dụng của thuốc

1.2.12 Một số nghiên cứu về bào chế pellet rabeprazol

 Muthukumaran M [28] và cộng sự đã tiến hành nghiên cứu pellet rabeprazol bao tan ở ruột thông qua việc đánh giá tỷ lệ của một số tá dược trong công thức nhân tới độ ổn định và khả năng giải phóng dược chất Bên cạnh đó, nghiên cứu khảo sát độ dày của màng bao tan trong ruột ảnh hưởng đến tính kháng acid và giải phóng dược chất từ pellet cũng được tiến hành

Pellet nhân được nghiên cứu bằng cách thay đổi tỷ lệ các tá dược trong công thức Các tá dược được khảo sát cho pellet nhân bao gồm tá dược ổn định natri carbonat, tá dược polyplasdon INF 10, polyplasdon XL 10 Để tránh tương tác giữa pellet nhân và tá dược bao tan trong ruột, pellet được bao lớp cách li bằng Opadry

(tăng khối lượng màng bao là 8-10%) Màng bao tan trong ruột sử dụng polyme Eudragit L100-55 với độ dày màng bao được khảo sát lần lượt là 22, 24, 26, 28% Pellet được xác định hàm lượng, thử độ hòa tan trong 2 môi trường acid HCl pH = 1,2 và đệm phosphat pH = 8 để đánh giá tính kháng acid và khả năng giải phóng dược chất Độ ổn định được nghiên cứu ở điều kiện lão hóa cấp tốc (ở 400C và hàm

ẩm 75%) trong vòng 3 tháng

Kết quả thu được: Khi thay đổi tỷ lệ của các tá dược trong công thức pellet

nhân, khả năng giải phóng dược chất từ pellet thay đổi, công thức F2 (rabeprazol natri 285g, natri carbonat 225g, HPMC 80g, polyplasdon INF 10 150g, talc 100g và 660g nhân đường) cho đồ thị giải phóng dược chất giống với viên đối chiếu nhất Kết quả thử độ ổn định trong vòng 2 tháng ở điều kiện lão hóa cấp tốc của các công thức cho thấy đồ thị độ hòa tan hầu như không thay đổi, hàm lượng và tính kháng acid giảm đi không đáng kể

Với màng bao tan trong ruột, nghiên cứu chỉ ra rằng khi tăng độ dày màng bao

từ 22 đến 26 % thì màng bao không có tính kháng acid, tuy nhiên khi tăng tiếp độ dày màng bao đến 28% thì màng bao có khả năng kháng acid tốt Để đạt hiệu quả tốt hơn, việc tăng độ dày màng bao lên 30% đang được nghiên cứu tiếp

 Rakesh N và cộng sự [23] đã tiến hành nghiên cứu pellet rabeprazol bao tan

ở ruột sử dụng NaOH làm tá dược ổn định Công thức cho pellet nhân bao gồm: pellet trơ 400 g, dược chất rabeprazol natri 50g, HPMC E15 5g, NaOH 5g, nước cất 200g Pellet được bào chế bằng phương pháp bồi dần từ nhân trơ Sau đó, pellet được tiến hành bao cách ly bằng HPMC E15, magnesi oxid, oxid sắt đỏ, nước cất với độ dày màng bao khoảng 10% Có 4 công thức màng bao tan trong ruột được nghiên cứu với các loại polyme khác nhau: Công thức A sử dụng polyme là Eudragit L30D55, công thức B sử dụng kết hợp 2 loại polyme là Eudragit L30D55

và Eudragit NE30D (tỷ lệ 9:1), công thức C sử dụng HPMC P55 làm polyme và công thức D sử dụng Eudragit L30D55 tăng đến 15% khối lượng sau đó bao tiếp với HPMC P55 Màng được bao tăng 25% so với khối lượng nhân Sau đó tiến hành

thử độ hòa tan trong 2 môi trường là 0,1N HCl (trong vòng 2 giờ) và đệm phosphat

pH = 8,0 (hút mẫu tại 10, 20, 30, 45 phút)

Kết quả thu được:

Tính kháng acid của các màng bao tan trong ruột được khảo sát ở trên tăng dần theo thứ tự: A < C < B < D Tuy nhiên, khi chuyển sang môi trường kiềm khả năng giải phóng dược chất ra khỏi pellet lại tăng theo thứ tự: B, A, D, C Màng bao

ở công thức B có kết hợp thêm polyme giải phóng chậm, do đó khả năng giải phóng dược chất giảm so với công thức A chỉ dùng đơn độc Eudragit Các polyme acrylic bao tan ở ruột trước khi hòa tan vào môi trường kiềm thì xảy ra hiện tượng gel hóa gây tích tụ thuốc trong pellet nên giải phóng dược chất chậm hơn, khi dùng kết hợp với HPMC P55 với Eudragit thì tránh được hiện tượng này do đó khả năng giải phóng dược chất của màng bao A chậm hơn D Màng bao C cho kết quả giải phóng dược chất từ pellet tốt nhất do HPMC P55 là dẫn xuất của cellulose nên tan nhanh

và giải phóng dược chất tốt

Chương II: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 Đối tượng nghiên cứu

Pellet rabeprazol natri

2.2 Nguyên vật liệu và thiết bị

2.2.1 Nguyên liệu

Bảng 2.1: Các nguyên liệu sử dụng

2.2.2 Thiết bị

 Máy bao phim tầng sôi mini Caleva

 Máy khuấy từ RH Basic

 Cân kĩ thuật Satorius

 Cân phân tích

 Cân đo hàm ẩm Ohaus

 Tủ sấy 370C

 Máy siêu âm Ultrasonic LC 60H

 Máy đo pH Toledo

 Máy thử độ hòa tan Pharma Phest

 Máy đo quang Hitachi U 1900

2.3 Nội dung nghiên cứu

2.3.1 Nghiên cứu ảnh hưởng của loại dung môi đến độ ổn định của rabeprazol

 Dung môi hữu cơ

 Các môi trường pH khác nhau

 Dung dịch các tá dược kiềm

2.3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng của yếu tố công thức đến một số chỉ tiêu chất lượng của pellet rabeprazol

2.4 Phương pháp nghiên cứu

2.4.1 Thử tương kỵ của dược chất với các dung môi và dung dịch thử

2.4.1.1 Thử tương kỵ của rabeprazol natri trong các dung môi

Cân chính xác khoảng 0,1 g rabeprazol cho vào ống nghiệm thủy tinh trong suốt dung tích khoảng 30 ml có nắp xoắn, cho 20 ml dung môi vào, đậy nút kính, lắc đều cho tan hết, để ở nhiệt độ và độ ẩm phòng thí nghiệm và quan sát sự thay đổi màu của dịch trong ống nghiệm

2.4.1.2 Thử tương kỵ của rabeprazol natri trong các môi trường pH

Pha các dung dịch: Đệm pH 1,2 (dung dịch acid hydroclorid); đệm phosphat

pH 3,0; đệm phosphat pH = 5,0; đệm phosphat pH = 7,0; đệm phosphat pH = 9,0 và đệm borat pH = 9,0 theo Dược điển Mỹ Tiến hành tương tự như trên mục 2.4.1.1

để quan sát sự thay đổi màu của dịch trong ống nghiệm

2.4.1.3 Thử tương kỵ của rabeprazol natri trong dung dịch các tá dược kiềm

Pha các dung dịch tá dược kiềm có nồng độ 3% kl/tt Tiến hành tương tự như mực 2.4.1.1 để quan sát sự thay đổi màu của dịch trong ống nghiệm

2.4.2 Phương pháp bào chế pellet rabeprazol

Bào chế pellet rabeprazol bằng phương pháp bồi dần:

 Quy mô: Mỗi mẻ tiến hành với khoảng 10,0 g pellet nhân

 Pellet rabeprazol natri gồm các thành phần như trong bảng 2.2

Bảng 2.2 : Thành phần của dịch bồi dần

 Phương pháp bào chế

 Pha hỗn dịch bồi dần: hòa tan hoặc phân tán tá dược kiềm và chất hóa dẻo vào lượng nước trong công thức trong cốc có mỏ 100 ml, ngâm trương nở tá dược dính, sử dụng máy khuấy từ, khuấy nhẹ cho đến khi tá dược dính hòa tan hoàn toàn Cho từ từ dược chất vào, khuấy cho đến tan hết Rây talc và các chất rắn còn lại qua rây 125 µm rồi phân tán dần vào dịch trên bằng phương pháp tạo hỗn dịch Duy trì khuấy trộn trong quá trình bao

 Sấy nhân đường ở 45 – 500C bằng máy bao phim mini Caleva trong 15 phút

 Tiến hành bồi theo các thông số sau cho tới khi hết dịch bồi

Bảng 2.3: Các thông số thiết bị trong quá trình bồi dần

 Các chỉ tiêu đánh giá cho pellet nhân:

 Hình thức: cầu đều, bề mặt nhẵn  Độ hòa tan

 Hàm lượng

2.4.3 Phương pháp đánh giá chỉ tiêu chất lượng pellet

2.4.3.1 Hình thức: quan sát bằng mắt

2.4.3.2 Hiệu suất bào chế pellet nhân

Hiệu suất bào chế pellet được tính theo công thức:

=a × M

m × 100%

Trong đó: H: Hiệu suất tạo pellet

a: Hàm lượng dược chất trong pellet M: Khối lượng pellet tạo thành

m: Khối lượng dược chất trong dịch bồi

2.4.3.3 Độ ẩm: Xác định hàm ẩm bằng phương pháp mất khối lượng

do làm khô, t0C = 1000C đến khi khối lượng không đổi

2.4.3.4 Định lượng hàm lượng dược chất trong pellet:

Phương pháo đo quang phổ hấp thụ

Sử dụng phương pháp đo quang tại bước sóng 292 nm, so sánh mật độ quang của mẫu thử và mẫu chuẩn để tính hàm lượng rabeprazol natri trong pellet

 Tiến hành

 Mẫu thử: Nghiền khoảng 2 g pellet thành bột mịn Cân chính xác một lượng

bột (mt) tương ứng khoảng 50 mg dược chất cho vào bình định mức 50 ml, thêm 15ml dung dịch NaOH 0,1N và siêu âm 10 phút cho tan hết Bổ sung dung dịch NaOH 0,1N đến vạch và lọc qua giấy lọc Bỏ 5ml dịch lọc đầu, rồi hút chính xác 10,0 ml dịch lọc cho vào bình định mức 100 ml, thêm dung dịch NaOH 0,1N đến vạch, lắc đều Hút chính xác 5,0 ml dịch này cho vào bình định mức 50 ml, thêm dung dịch NaOH 0,1N đến vạch, lắc đều

 Mẫu chuẩn: Cân chính xác một lượng khoảng 50 mg (mc) dược chất cho

vào bình định mức 50 ml, thêm 15ml dung dịch NaOH 0,1N và siêu âm 5 phút cho tan hết Bổ sung dung dịch NaOH 0,1N đến vạch, lọc qua màng 0,45µm Bỏ 5ml dịch lọc đầu, rồi hút chính xác 10,0 ml dịch lọc cho vào bình định mức 100, thêm dung dịch NaOH 0,1N đến vạch, lắc đều Hút chính xác 5,0 ml dịch này cho vào bình định mức 50,0 ml, thêm dung dịch NaOH 0,1N đến vạch, lắc đều

 Mẫu trắng: Dung dịch NaOH 0,1N

 Hàm lượng dược chất trong mẫu thử được tính bằng cách so sánh với mẫu chuẩn có nồng độ đã biết theo công thức:

D × m × 100%

Trong đó:

Dt Mật độ quang của mẫu thử

Dc Mật độ quang của mẫu chuẩn

mt Khối lượng bột pellet

mc Khối lượng của chất chuẩn

 Thẩm định một số chỉ tiêu của phương pháp đo quang phổ hấp thụ:

 Chuẩn bị mẫu:

 Mẫu trắng: Dung dịch NaOH 0,1N

 Mẫu chuẩn: Pha tương tự mẫu chuẩn trong phương pháp định lượng

bằng quang phổ hấp thụ ở mục 2.4.3.4a

 Các mẫu chuẩn chứa tá dược: Chuẩn bị một hỗn hợp các tá dược

chính trong công thức ở tỷ lệ trung bình trong khoảng khảo sát gồm: PVP K30, nhân đường, talc, PEG 6000, NaOH Cân chính xác 0,5 g rabeprazol natri và một lượng tương ứng hỗn hợp bột trên, cho vào bình định mức 50 ml, thêm 30ml dung dịch NaOH 0,1N, siêu âm, bổ sung thể tích đến vạch Lọc và pha loãng dịch lọc bằng NaOH 0,1N đến các nồng độ 80%, 100%, 120% so với nồng độ của dược chất trong mẫu chuẩn

 Mẫu trắng chứa tá dược: Tiến hành như các mẫu chuẩn chứa tá dược

nhưng không thêm dược chất

Độ đặc hiệu: Quét phổ của mẫu thử và mẫu trắng chứa tá dược để phát hiện

cực đại hấp thụ của dược chất

Độ đúng: Tiến hành với 3 nồng độ 8, 10, 12 µg/ml (tương ứng 80, 100,

120% so với nồng độ định lượng), mỗi nồng độ tiến hành 9 mẫu pha từ 3 dung dịch gốc khác nhau Xác định độ đúng nhờ so sánh giá trị thu được so với giá trị nồng độ theo lí thuyết

Độ chính xác trong ngày và khác ngày: Tiến hành với 3 nồng độ 8, 10, 12

µg/ml, mỗi nồng độ 5 mẫu Tính giá trị trung bình và RSD So sánh độ chính xác giữa 3 ngày

2.4.3.5 Đánh giá khả năng giải phóng dược chất từ pellet (n=3)

Đánh giá độ ổn định của dược chất trong môi trường hòa tan:

 Pha dung dịch đệm boric pH = 9,0 theo Dược điển Mĩ

 Cân chính xác khoảng 0,2237g dược chất và tá dược với tỉ lệ theo công thức cho vào bình định mức 100,0 ml có sẵn 30ml đệm boric 9.0 Siêu âm 15 phút Thêm đệm đủ đến vạch, lắc đều Lọc qua giấy lọc