2.4.3.1. Hình thức: quan sát bằng mắt.
2.4.3.2. Hiệu suất bào chế pellet nhân.
Hiệu suất bào chế pellet được tính theo công thức:
=a × M
m × 100%
Trong đó: H: Hiệu suất tạo pellet
a: Hàm lượng dược chất trong pellet M: Khối lượng pellet tạo thành.
m: Khối lượng dược chất trong dịch bồi.
2.4.3.3. Độ ẩm: Xác định hàm ẩm bằng phương pháp mất khối lượng do làm khô, t0C = 1000C đến khi khối lượng không đổi.
2.4.3.4. Định lượng hàm lượng dược chất trong pellet: Phương pháo đo quang phổ hấp thụ
Sử dụng phương pháp đo quang tại bước sóng 292 nm, so sánh mật độ quang của mẫu thử và mẫu chuẩn để tính hàm lượng rabeprazol natri trong pellet.
Tiến hành
Mẫu thử: Nghiền khoảng 2 g pellet thành bột mịn. Cân chính xác một lượng bột (mt) tương ứng khoảng 50 mg dược chất cho vào bình định mức 50 ml, thêm 15ml dung dịch NaOH 0,1N và siêu âm 10 phút cho tan hết. Bổ sung dung dịch NaOH 0,1N đến vạch và lọc qua giấy lọc. Bỏ 5ml dịch lọc đầu, rồi hút chính xác 10,0 ml dịch lọc cho vào bình định mức 100 ml, thêm dung dịch NaOH 0,1N đến vạch, lắc đều. Hút chính xác 5,0 ml dịch này cho vào bình định mức 50 ml, thêm dung dịch NaOH 0,1N đến vạch, lắc đều.
Mẫu chuẩn: Cân chính xác một lượng khoảng 50 mg (mc) dược chất cho vào bình định mức 50 ml, thêm 15ml dung dịch NaOH 0,1N và siêu âm 5 phút cho tan hết. Bổ sung dung dịch NaOH 0,1N đến vạch, lọc qua màng 0,45µm. Bỏ 5ml dịch lọc đầu, rồi hút chính xác 10,0 ml dịch lọc cho vào bình định mức 100, thêm dung dịch NaOH 0,1N đến vạch, lắc đều. Hút chính xác 5,0 ml dịch này cho vào bình định mức 50,0 ml, thêm dung dịch NaOH 0,1N đến vạch, lắc đều.
Mẫu trắng: Dung dịch NaOH 0,1N.
Hàm lượng dược chất trong mẫu thử được tính bằng cách so sánh với mẫu chuẩn có nồng độ đã biết theo công thức:
% =D ×
D × m × 100%
Trong đó:
Dt Mật độ quang của mẫu thử Dc Mật độ quang của mẫu chuẩn mt Khối lượng bột pellet
Thẩm định một số chỉ tiêu của phương pháp đo quang phổ hấp thụ:
Chuẩn bị mẫu:
Mẫu trắng: Dung dịch NaOH 0,1N.
Mẫu chuẩn: Pha tương tự mẫu chuẩn trong phương pháp định lượng bằng quang phổ hấp thụ ở mục 2.4.3.4a.
Các mẫu chuẩn chứa tá dược: Chuẩn bị một hỗn hợp các tá dược chính trong công thức ở tỷ lệ trung bình trong khoảng khảo sát gồm: PVP K30, nhân đường, talc, PEG 6000, NaOH. Cân chính xác 0,5 g rabeprazol natri và một lượng tương ứng hỗn hợp bột trên, cho vào bình định mức 50 ml, thêm 30ml dung dịch NaOH 0,1N, siêu âm, bổ sung thể tích đến vạch. Lọc và pha loãng dịch lọc bằng NaOH 0,1N đến các nồng độ 80%, 100%, 120% so với nồng độ của dược chất trong mẫu chuẩn.
Mẫu trắng chứa tá dược: Tiến hành như các mẫu chuẩn chứa tá dược nhưng không thêm dược chất.
Độ đặc hiệu: Quét phổ của mẫu thử và mẫu trắng chứa tá dược để phát hiện cực đại hấp thụ của dược chất.
Độ đúng: Tiến hành với 3 nồng độ 8, 10, 12 µg/ml (tương ứng 80, 100, 120% so với nồng độ định lượng), mỗi nồng độ tiến hành 9 mẫu pha từ 3 dung dịch gốc khác nhau. Xác định độ đúng nhờ so sánh giá trị thu được so với giá trị nồng độ theo lí thuyết.
Độ chính xác trong ngày và khác ngày: Tiến hành với 3 nồng độ 8, 10, 12 µg/ml, mỗi nồng độ 5 mẫu. Tính giá trị trung bình và RSD. So sánh độ chính xác giữa 3 ngày.
2.4.3.5. Đánh giá khả năng giải phóng dược chất từ pellet (n=3) Đánh giá độ ổn định của dược chất trong môi trường hòa tan:
Pha dung dịch đệm boric pH = 9,0 theo Dược điển Mĩ.
Cân chính xác khoảng 0,2237g dược chất và tá dược với tỉ lệ theo công thức cho vào bình định mức 100,0 ml có sẵn 30ml đệm boric 9.0. Siêu âm 15 phút. Thêm đệm đủ đến vạch, lắc đều. Lọc qua giấy lọc.
Hút chính xác 1,0 ml dịch lọc cho vào bình định mức 100,0 ml. Thêm đệm boric pH = 9,0 đến vạch. Lắc đều trong quá trình.
Đo quang dung dịch trên tại các thời điểm 0 giờ, 3 giờ, 8 giờ ở các bước sóng 290nm.
Điều kiện thử hòa tan: - Thiết bị: cánh khuấy. - Tốc độ quay: 75 vòng/phút.
- Môi trường: 900 ml dung dịch đệm borat pH = 9,0. - Nhiệt độ: 37 ± 0,50C.
- Thời gian lấy mẫu: 10, 15, 20, 30, 45, 60 phút.
Tiến hành:
- Cân chính xác lượng pellet ứng với 20mg dược chất và thử độ hòa tan theo điều kiện trên.
- Mẫu chuẩn: Được pha tới nồng độ 10 µg/ml như mô tả trong phần định lượng mục 2.4.3.1a nhưng thay dung dịch NaOH 0,1N bằng dung dịch đệm borat pH = 9,0.
- Mẫu trắng: Dung dịch đệm borat pH = 9,0.
- Tại mỗi thời điểm lấy mẫu, rút 5 ml dịch hòa tan, lọc. Pha loãng 2,5 lần bằng môi trường thử hòa tan. Đo quang tại bước sóng 290 nm và so sánh với mẫu chuẩn để tính % rabeprazol natri hòa tan tại từng thời điểm. Phương pháp đo quang phổ hấp thụ này cũng được thẩm định tương tự như phương pháp đo quang phổ hấp thụ định lượng rabeprazol natri trong dung dịch NaOH 0,1N ở trên (thay dung dịch NaOH 0,1N bằng dung dịch đệm borat pH 9,0).
Chương III: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN