Phương pháp xét nghiệm hóa sinh miễn dịch

PHƯƠNG PHÁP XÉT NGHIỆM HÓA SINH MIỄN DỊCH Các nhóm xét nghiệm miễn dịch  B nh truy n nhi mệ ề ễ  Xét nghi m tuy n giápệ ế  Xét nghi m ung thệ ư  Xét nghi m ti u đ ngệ ể ườ  B nh lý thi u máuệ ế  Chuy n hóa x ngể ươ  B nh tim m chệ ạ  Hormon tăng tr ngưở  Chuyển hóa  Bệnh lý viêm  Dị ứng  Bệnh tự miễn  Theo dõi thuốc điều trị  Hormon sinh dục  Chống thải ghép  … • Ngưng kết • Miễn dịch độ đục • Nephelometry • Turbidimetry • ELISA • Miễn dịch huỳnh quang • Miễn dịch phóng xạ • Miễn dịch điện hóa phát quang • Miễn dịch hóa phát quang • Hóa phát quang khuếch đại enzym • Hóa phát quang trực tiếp Các phương pháp xét nghiệm miễn dịch Các loại máy xét nghiệm MD  Dàn ELISA  Máy xét nghi m Huỳnh quangệ  Máy xét nghi m sinh hóa đo đ đ cệ ộ ụ  Máy xét nghi m đi n hóa phát quangệ ệ  Máy xét nghi m hóa phát quangệ Phân loại các thiết bị theo bệnh viện Số lượng xét nghiệm hàng ngày Thiết bị cần có ≤ 50 Dàn ELISA Từ 50 – 150 Máy MD hóa phát quang/điện hóa phát quang/huỳnh quang tố độ ≥ 100 xét nghiệm/ giờ ≥ 150 Máy MD hóa phát quang/điện hóa phát quang ≥ 180 xét nghiệm/ giờ ≥ 500 Hệ thống tự động hóa Labo xét nghiệm kết nối SH - MD Đặc tính kỹ thuật dàn ELISA  C u hình g m:ấ ồ  Một máy đọc  Một máy rửa  Một máy ủ - lắc Máy đọc Tốc độ 96 giếng trong vòng ≤ 30 giây Số lượng 24, 48, 96 giếng. Có thể đặt theo hàng hoặc cả khung. Dải sóng 400-750 nm Các bước sóng Có 5 - 9 vị trí nhưng thường đọc ở:405, 450, 490, 630nm Dải hấp thụ 0.000 - 3000 Abs Độ ổn định 0.001Abs Độ chính xác +/- 1%+/- 0.0010Abs 2000 Abs ở 405nm Độ tuyến tính +/-1% từ 0đến 2.000Abs @405nm,+/-3% từ 2.000 đến 3000 Abs ở 450nm Độ lặp lại ±0.5%±0.005Abs từ 0 đến 2.000 Abs @ 405nm Máy rửa  Ki u đĩa: 96-gi ng (đáy ph ng, U, V)ể ế ẳ  Đ u r a: 8 ho c 12 đ ngầ ử ặ ườ  B nh ộ ớ ch ng trình: ≥ươ 40  Th ể tích r a: 50-450ul, b c đi u ch nh 5ulử ướ ề ỉ  Đ chính xác: < 5% 300ulộ ở  S chu trình r a: 1-9ố ử  Th ể tích t n d : ≤ồ ư 2ul đ i v i đĩaố ớ đáy U , V và ≤ 3ul đ i v i đĩa đáy ph ngố ớ ẳ  Th i gian l c/ngâm: 0-99 giâyờ ắ  Bình ch a ch t l ng: 3 bình 3.5Lứ ấ ỏ  Màn hình c m ngả ứ Máy ủ  và Ủ l c đ c 2 đĩa 96 gi ngắ ượ ế  Đi u ch nh đ c nhi t đề ỉ ượ ệ ộ t ừ 5-60 o C v i đớ ộ chính xác 0.1 o C Ưu - nhược điểm Ưu điểm Nhược điểm Giá thành rẻ Tốn kém nếu chạy ít mẫu (nhiều chứng) Thực hiện được đồng thời nhiều mẫu - phù hợp với sàng lọc Thời gian trả kết quả chậm (2-4h) – không phù hợp với chẩn đoán điều trị Độ nhạy, đặc hiệu chấp nhận được Sử dụng phương pháp so màu, hạn chế về mật độ quang Nhân viên cần được đào tạo về kỹ thuật [...]... phí thay thế buồng đếm nhân quang cao Xét nghiệm từng bệnh nhân Kết quả xét nghiệm phụ thuộc vào độ ổn định của điện cực và buồng đếm Nhiều tốc độ Khả năng nhiễm chéo cao vì sử dụng một buồng đo duy nhất cho tất cả các xét nghiệm Tốn nhiều dung dịch rửa sau mỗi lần đo Máy MD Hóa phát quang  Gồm 2 loại:  Hóa phát quang khuếch đại enzym  Hóa phát quang trực tiếp Hóa phát quang khuếch đại enzym  Loại... Y  tăng khả năng bắt giữ Y Y Y  giảm khoảng cách dao động và Macro Particle Hóa phát quang trực tiếp  Không sử dụng cơ chất (substrate) mà sử dụng acid/ base giúp tạo tín hiệu quang hóa  tăng tốc độ xét nghiệm Ưu - nhược điểm Ưu điểm Độ nhạy cao Xét nghiệm từng bệnh nhân Ttốc độ cao 180/ 240 xét nghiệm/ giờ Menu xét nghiệm rộng Nhược điểm XIN TRÂN TRỌNG CẢM ƠN! ... cao Xét nghiệm từng bệnh nhân Nhiều tốc độ 120/ 200 xét nghiệm/ giờ Menu xét nghiệm rộng Nhược điểm Hóa phát quang trực tiếp  Không cần khuếch đại tín hiệu; không sử dụng cơ chất  Tín hiệu quang hoá thu được nhanh hơn  Giảm thiểu tối ưu tín hiệu Light Output (RLUs) nhiễu (background noise) 1 Time (Seconds) 2 Siemens Medical Solutions Diagnostics Hóa phát quang trực tiếp Kích thước tiểu phân nhỏ,... điểm Giá thành vừa phải Công nghệ cũ (từ năm 1995) Xét nghiệm được từng bệnh nhân Sử dụng nhiều loại vật tư tiêu hao Tốc độ chậm 50-100 xét nghiệm/ giờ Không có trữ lạnh trên máy Độ nhạy, đặc hiệu chấp nhận được Máy MD Điện hóa phát quang Photon Ru2+ excited state Ru2+ e- H+ Ru3+ TPA ground state TPA+ e- + TPA Platinum electrode Magnet e+ Máy MD Điện hóa phát quang Photomultiplier Counter-electrode... 1,000 1  Huỳnh quang  Hóa phát quang khuếch đại enzym  Nguồn: Kricka, LJ in Tietz Textbook of Clinical Chemistry Philadelphia, WB Saunders, 1999, p 219 Hóa phát quang khuếch đại enzym Có thể đọc tại nhiều thời điểm Cho • Tín hiệu mạnh • KQ đo chính xác • Mở rộng đường chuẩn XN • Ví dụ HCG : 1 - 5,000 UI/L Hóa phát quang khuếch đại enzym Ưu - nhược điểm Ưu điểm Độ nhạy rất cao Xét nghiệm từng bệnh nhân . PHƯƠNG PHÁP XÉT NGHIỆM HÓA SINH MIỄN DỊCH Các nhóm xét nghiệm miễn dịch  B nh truy n nhi mệ ề ễ  Xét nghi m tuy n giápệ ế  Xét nghi m ung thệ ư  Xét nghi m ti u đ ngệ. tiếp Các phương pháp xét nghiệm miễn dịch Các loại máy xét nghiệm MD  Dàn ELISA  Máy xét nghi m Huỳnh quangệ  Máy xét nghi m sinh hóa đo đ đ cệ ộ ụ  Máy xét nghi m đi n hóa phát quangệ ệ  Máy xét. dịch độ đục • Nephelometry • Turbidimetry • ELISA • Miễn dịch huỳnh quang • Miễn dịch phóng xạ • Miễn dịch điện hóa phát quang • Miễn dịch hóa phát quang • Hóa phát quang khuếch đại enzym • Hóa