Phương pháp xét nghiệm hóa sinh miễn dịch

PHƯƠNG PHÁP XÉT NGHIỆM HÓA SINH MIỄN DỊCH... • Hóa phát quang khuếch đại enzym• Hóa phát quang trực tiếp Các phương pháp xét nghiệm miễn dịch... Các loại máy xét nghiệm MD Dàn ELISA  M

PHƯƠNG PHÁP XÉT NGHIỆM

HÓA SINH MIỄN DỊCH

Các nhóm xét nghiệm miễn dịch

 Bệnh truyền nhiễm

 Xét nghiệm tuyến giáp

 Xét nghiệm ung thư

 Xét nghiệm tiểu đường

• Hóa phát quang khuếch đại enzym

• Hóa phát quang trực tiếp

Các phương pháp xét nghiệm miễn dịch

Các loại máy xét nghiệm MD

 Dàn ELISA

 Máy xét nghiệm Huỳnh quang

 Máy xét nghiệm sinh hóa đo độ đục

 Máy xét nghiệm điện hóa phát quang

 Máy xét nghiệm hóa phát quang

Phân loại các thiết bị theo bệnh viện

≤ 50 Dàn ELISA

Từ 50 – 150 Máy MD hóa phát quang/điện hóa

phát quang/huỳnh quang tố độ ≥

100 xét nghiệm/ giờ

≥ 150 Máy MD hóa phát quang/điện hóa

phát quang ≥ 180 xét nghiệm/ giờ

≥ 500 Hệ thống tự động hóa Labo xét

nghiệm kết nối SH - MD

Máy đọc

Tốc độ 96 giếng trong vòng ≤ 30 giây

Số lượng 24, 48, 96 giếng Có thể đặt theo hàng hoặc cả khung Dải sóng 400-750 nm

Các bước sóng Có 5 - 9 vị trí nhưng thường đọc ở:405, 450, 490, 630nm Dải hấp thụ 0.000 - 3000 Abs

Máy rửa

 Kiểu đĩa: 96-giếng (đáy phẳng, U, V)

 Đầu rửa: 8 hoặc 12 đường

 Bộ nhớ chương trình: ≥ 40

 Thể tích rửa: 50-450ul, bước điều chỉnh 5ul

 Độ chính xác: < 5% ở 300ul

 Số chu trình rửa: 1-9

 Thể tích tồn dư: ≤ 2ul đối với đĩa đáy U , V và ≤ 3ul đối với đĩa đáy phẳng

 Thời gian lắc/ngâm: 0-99 giây

 Bình chứa chất lỏng: 3 bình 3.5L

 Màn hình cảm ứng

Máy ủ

 Ủ và lắc được 2 đĩa 96 giếng

 Điều chỉnh được nhiệt độ từ 5-60oC với độ chính xác 0.1oC

Ưu - nhược điểm

Giá thành rẻ Tốn kém nếu chạy ít mẫu (nhiều

chứng)

Thực hiện được đồng thời nhiều

mẫu - phù hợp với sàng lọc Thời gian trả kết quả chậm (2-4h) – không phù hợp với chẩn đoán điều trị

Độ nhạy, đặc hiệu chấp nhận

được Sử dụng phương pháp so màu, hạn chế về mật độ quang

Nhân viên cần được đào tạo về kỹ thuật

Máy MD huỳnh quang

 Nguyên lý kỹ thuật: Kháng nguyên + Kháng thể + Chất đánh dấu huỳnh quang + Nguồn sáng

huỳnh quang

Ưu - nhược điểm

Giá thành vừa phải Công nghệ cũ (từ năm 1995)

Xét nghiệm được từng bệnh nhân Sử dụng nhiều loại vật tư tiêu hao

Tốc độ chậm 50-100 xét nghiệm/

giờ Không có trữ lạnh trên máy

Độ nhạy, đặc hiệu chấp nhận

được

Máy MD Điện hóa phát quang

Electrode Photomultiplier

Ưu - nhược điểm

Độ nhạy cao Chi phí thay thế buồng đếm nhân

quang cao

Xét nghiệm từng bệnh nhân Kết quả xét nghiệm phụ thuộc vào độ

ổn định của điện cực và buồng đếm

Nhiều tốc độ Khả năng nhiễm chéo cao vì sử dụng

một buồng đo duy nhất cho tất cả các xét nghiệm

Tốn nhiều dung dịch rửa sau mỗi lần đo

Máy MD Hóa phát quang

 Gồm 2 loại:

 Hóa phát quang khuếch đại enzym

 Hóa phát quang trực tiếp

Hóa phát quang khuếch đại enzym

 Lo i XN ại XN Ng ng phát hi n ưỡng phát hiện ện

(10 -21 mole)

 MD phóng x I ại XN 125 1,000

 Hóa phát quang khu ch đ i enzym ếch đại enzym ại XN 1

 Ngu n: Kricka, LJ in Tietz Textbook of Clinical Chemistry Philadelphia, WB Saunders, 1999, p ồ 219

Có thể đọc tại nhiều thời điểm Cho

Ưu - nhược điểm

Hóa phát quang trực tiếp

 Không cần khuếch đại tín

hiệu; không sử dụng cơ

chất

 Tín hiệu quang hoá thu

được nhanh hơn

 Giảm thiểu tối ưu tín hiệu

nhiễu (background noise)

Light Output (RLUs)

Time (Seconds)

Siemens Medical Solutions Diagnostics

Hóa phát quang trực tiếp

Kích thước tiểu phân nhỏ, tăng khả năng gắn kết

và tăng độ nhạy của phản ứng

 Diện tích tiếp xúc bề mặt tăng gấp 50 lần

 giảm khoảng cách dao động và

 tăng khả năng bắt giữ

MicroParticles

MacroParticle

Y

Y

YYYYY

Hóa phát quang trực tiếp

 Không sử dụng cơ chất (substrate) mà sử dụng acid/ base giúp tạo tín hiệu quang hóa  tăng tốc

độ xét nghiệm.

Ưu - nhược điểm

XIN TRÂN TRỌNG CẢM ƠN!