Nghiên cứu bảo quản thanh long bằng chế phẩm sinh học nano chitosan kết hợp với tinh dầu nghệ

Phương pháp thử nghiệm hoạt tính đối kháng vi sinh vật của tinh dầu nghệ và nano chitosan trên quả thanh long .... Vì vậy việc sử dụng các chất hoạt tính sinh học tự nhiên để bảo quản q

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI

TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI

TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN

LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC

Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS PHẠM VIỆT CƯỜNG

Hà Nội – Năm 2013

1

MỤC LỤC

DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT 3

DANH MỤC CÁC BẢNG VÀ SƠ ĐỒ 4

DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ 5

MỞ ĐẦU 6

Chương 1 – TỔNG QUAN 8

1.1 Nano chitosan 8

1.1.1 Chitosan 8

1.1.2 Phương pháp điều chế nano chitosan từ chitosan 9

1.1.3 Hoạt tính đối kháng vi sinh vật của chitosan 12

1.1.4 Ứng dụng nano chitosan 13

1.2 Tinh dầu nghệ 15

1.2.1 Giới thiệu chung về nghệ 15

1.2.2 Thành phần hóa học 15

1.2.3 Hoạt tính sinh học của tinh dầu nghệ 18

1.3 Thanh Long 23

1.3.1 Thanh long và giá trị kinh tế 23

1.3.2 Vi sinh vật gây hỏng quả 26

1.3.3 Biện pháp bảo quản rau hoa quả tươi sau thu hoạch 28

Chương 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 32

2.1 Nguyên vật liệu 32

2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 32

2 1.2 Hóa chất sử dụng 32

2.1.3 Thiết bị, dụng cụ sử dụng trong nghiên cứu 33

2.2 Phương pháp nghiên cứu 34

2

2.2.1 Phương pháp đo độ đục định lượng tế bào nấm men 34 2.2.2 Phương pháp đếm khuẩn lạc nấm men 35 2.2.3 Phương pháp tìm nồng độ diệt tối thiểu (MBC) của hỗn hợp nano chitosan

và tinh dầu nghệ cho nấm men 36 2.2.4 Phương pháp kiểm tra khả năng đối kháng nấm mốc của chế phẩm tinh dầu nghệ và nano chitosan 37 2.2.5 Phương pháp thử nghiệm hoạt tính đối kháng vi sinh vật của tinh dầu nghệ

và nano chitosan trên quả thanh long 38 2.2.6 Bảo quản thanh long trong điều kiện phòng thí nghiệm bằng NCS-TDN 38

Chương 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 40 3.1 Đánh giá khả năng đối kháng nấm men của chế phẩm nano chitosan và tinh dầu

nghệ in vitro 40

3.2 Đánh giá khả năng đối kháng nấm mốc của chế phẩm nano chitosan và tinh dầu

nghệ in vitro 43 3.3 Đánh giá khả năng đối kháng nấm của nano chitosan-tinh dầu nghệ in vivo trên

thanh long 46 3.4 Đánh giá khả năng bảo quản thanh long bằng chế phẩm nano chitosan và tinh dầu nghệ 48

3.4.1 Bảo quản thanh long ở nhiệt độ phòng 48 3.4.2 Bảo quản thanh long ở nhiệt độ lạnh (10 ± 2 o

C) 50

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO 56

3

DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT

ĐC: Đối chứng

Đ-d: đường kính kháng khuẩn

LDL: Low – density Lipoprotein

MBC: Minimum bactericidal concentration

MTL2: Cladosporium clasdosporioides de Vries

MTL4: Cladosporium tenuisimum Cooke

NCS – TDN: Nano chitosan kết hợp với tinh dầu nghệ

OD: Optical Density

TL1: Rhodoturola sp

4

DANH MỤC CÁC BẢNG VÀ SƠ ĐỒ

Bảng 1.1: Giá trị dinh dưỡng trong 100g quả thanh long

Bảng 2.1: Độ chuẩn Mc Farland ở bước sóng 550nm

Bảng 2.2: Sơ đồ thí nghiệm xác định tính đối kháng nấm men của NCS-TDN

Bảng 3.1: Kết quả đo OD ở bước sóng 550nm của mẫu TL1

Bảng 3.2: Khả năng ức chế sinh trưởng nấm men của NCS-TDN

Bảng 3.3: Hoạt tính đối kháng nấm mốc của NCS-TDN

Bảng 3.4: Khả năng ức chế nấm của NCS-TDN trên thanh long

Bảng 3.5: Kết quả thanh long được bảo quản ở nhiệt độ phòng

Bảng 3.6: Kết quả thanh long bảo quản lạnh 10±20C

Bảng 3.7: Kết quả phân tích hàm lượng dinh dưỡng của thanh long sau khi bảo quản lạnh 30 ngày

Sơ đồ 2.1: Nghiên cứu khả năng bảo quản thanh long sau thu hoạch của chế phẩm NCS-TDN

5

DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ

Hình 1.1: Cấu trúc hóa học của chitosan được điều chế từ chitin

Hình 1.2: Hình thái cây nghệ

Hình 1.3: Cấu trúc của các hợp chất curcumin trong tinh dầu nghệ

Hình 1.4: Cấu trúc của một số hợp chất trong tinh dầu nghệ

Hình 1.5: Vị trí và các cơ chế trong tế bào vi khuẩn được cho là điểm hoạt tính của tinh dầu

Hình 1.6: Các giống quả thanh long

Hình 1.7: Cladosporium cladospotioides

Hình 1.8: Cladosporium tenuisimum cooke

Hình 1.9: Rhodoturola sp

Hình 2.1: Pha loãng mẫu theo dãy thập phân

Hình 2.2: Cấy trải mẫu vào môi trường Hansen cứng trên đĩa peptri

Hình 3.1: Đánh giá hoạt tính đối kháng nấm men TL1 của NCS-TDN

Hình 3.2: Hoạt tính đối kháng của NCS-TDN đối với MTL2

Hình 3.3: Thử hoạt tính kháng của NCS-TDN với MTL4

Hình 3.4: Thanh long bị hỏng do nhiễm nấm

Hình 3.5: Thanh long được bảo quản ở nhiệt độ phòng

Hình 3.6: Thanh long bảo quản sau 7 ngày ở nhiệt độ phòng

Hình 3.7: Thanh long được bảo quản sau 15 ngày ở nhiệt độ phòng

Hình 3.8: Thanh long được bảo quản lạnh 10±2o

C

Hình 3.9: Thanh long được bảo lạnh sau 15 ngày

Hình 3.10: Thanh long được bảo lạnh sau 30 ngày

6

MỞ ĐẦU Tinh dầu nghệ được biết đến như là một chất có khả năng chống oxy hóa và có tính đối kháng vi sinh vật tốt, nhất là ức chế các vi sinh vật có khả năng gây hỏng quả Trong khi chitosan là một loại polymer carbohydrate tự nhiên được tạo ra bằng cách deacetyl hóa chitin, có thể tìm thấy trong nhiều loài động vật giáp xác, côn trùng và một vài loại nấm Với nhiều tính năng như tính tương thích sinh học, phân hủy sinh học, bám dính màng và không độc hại nên hiện nay nó trở thành nguyên liệu cho nhiều ứng dụng trong dược sinh học và thực phẩm chức năng Vì những tính chất ưu việt của

nó mà trong những năm gần đây, chitosan đã được nghiên cứu sử dụng để tạo ra các hạt nano chitosan Cùng với tinh dầu nghệ, nano chitosan là chất có khả năng kháng nấm và vi khuẩn mạnh

Quả tươi và rau rất dễ bị hỏng và mẫn cảm đối với các bệnh sau thu hoạch, hạn chế thời gian bảo quản và đưa chúng ra thị trường Ngoài ra, hư hỏng sau thu hoạch gây thất thu kinh tế đáng kể trên toàn thế giới Như đã biết, các loại thuốc diệt nấm tổng hợp được sử dụng từ lâu như phương thức chính để kiểm soát các bệnh sau thu hoạch Nhưng hiện người ta lo ngại về ảnh hưởng của các chất này đến sức khỏe người tiêu dùng cũng như sự xuất hiện của các nguồn bệnh kháng thuốc Vì vậy cần có các biện pháp thay thế để kiểm soát nguồn bệnh sau thu hoạch có hiệu quả, dư lượng thấp,

ít độc hoặc không độc đối với cơ thể không đích

Trong sản phẩm rau hoa quả của Việt Nam, quả Thanh Long đang chiếm vị trí quan trọng trong xuất khẩu, mang lại hiệu quả kinh tế cao Vì vậy việc sử dụng các chất hoạt tính sinh học tự nhiên để bảo quản quả Thanh Long không những có ý nghĩa kinh tế, mà còn mở ra phương pháp mới trong ngành bảo quản sau thu hoạch ở nước ta

7

Với đề tài nghiên cứu “ Nghiên cứu bảo quản Thanh long bằng chế phẩm sinh

học nano chitosan kết hợp với tinh dầu nghệ ” sẽ đóng góp thêm một phương pháp bảo

quản rau hoa quả an toàn và hiệu quả

Mục tiêu của đề tài:

 Thử nghiệm in vitro chế phẩm nano chitosan và tinh dầu nghệ với vi sinh vật gây hỏng quả Thanh Long để tìm nồng độ ức chế vi sinh vật tối thiểu MBC

 Thử nghiệm chế phẩm nano chitosan và tinh dầu nghệ trên quả để kéo dài thời gian bảo quản thanh long, đảm bảo thanh long còn tươi, không bị vi sinh vật làm hỏng quả

Nội dung nghiên cứu:

 Xác định hoạt tính đối kháng nấm của chế phẩm nano chitosan kết hợp với tinh dầu nghệ

 Nghiên cứu thăm dò ứng dụng nano chitosan kết hợp với tinh dầu nghệ trong bảo quản quả thanh long

độ khác nhau phụ thuộc vào mức độ deacetyl hóa (75-95%), khối lƣợng phân tử 2.000 kDa), độ nhớt, giá trị pKa, v.v [27] Do đó, chitosan không thể đƣợc định nghĩa là một hợp chất duy nhất, nó chỉ đơn thuần là họ của các copolymer với các phân

(50-số khác nhau của các đơn vị acetyl

Hình 1.1: Cấu trúc hóa học của chitosan đƣợc điều chế từ chitin Chitosan

liên kết (1→4) 2- amino-2-deoxy-β-D-glucan, đƣợc điều chế từ chitin qua quá trình thủy phân bằng kiềm nhóm N-acetyl

9

Chitosan chủ yếu được sản xuất từ quá trình deacetyl hóa chitin xảy ra ở môi trường kiềm: chitin sôi trong kiềm nồng độ cao vài giờ (40-45% natri hydroxit, 120°C, 1-3 h) Trong điều kiện đó N-deacetyl hóa xảy ra không hoàn toàn, chitosan được xem như là một dẫn xuất một phần N-deacetyl hóa của chitin

Chitosan cũng được tìm thấy trong tự nhiên, chẳng hạn như trong thành tế bào

của nấm thuộc lớp Zygomycetes [43], tảo xanh Chlorella sp., nấm men và động vật

nguyên sinh cũng như lớp biểu bì trong côn trùng [ 47] Gần đây trong công nghệ lên

men cho thấy nấm (Aspergillus niger) có thể cung cấp một nguồn thay thế chitosan

1.1.2 Phương pháp điều chế nano chitosan từ chitosan

Công nghệ nano là một công nghệ rất quan trọng trong khoa học, chủ yếu là do ứng dụng rộng rãi của nó trong một phạm vi rộng lớn bao gồm các ngành kỹ thuật, y học, hóa học và sinh học Việc sử dụng các biopolymer như polysaccharide trong công nghệ nano ngày càng được quan tâm, là trọng tâm các nghiên cứu của các nhà khoa học trên toàn thế giới

Trong 30 năm qua, kỹ thuật điều chế nano chitosan đã được phát triển dựa trên

công nghệ chitosan vi hạt Nano chitosan có thể được chế tạo bằng một vài phương

pháp khác nhau Trước kia, người ta dùng sodium sulphate như chất để tủa Năm 1994, một số tác giả đã sử dụng glutaraldehyde như chất liên kết để liên kết chéo các nhóm amino tự do của chitosan, sau đó nhũ tương hóa (emulsifier), tạo hạt 5-fluorouracil (5-FU) chitosan với kích thước trung bình 0,8 ± 0,1µm [42] Phương pháp này hiện vẫn được dùng Nhìn chung, kỹ thuật chế tạo hạt nano chitosan đã được phát triển dựa trên

kỹ thuật vi hạt chitosan Có ít nhất 4 phương pháp: sự đông đặc ion hóa (ionotropic gelation); vi nhũ tương (microemulsion), khuếch tán dung môi nhũ tương (emulsification solvent diffusion) và tổ hợp đa điện phân (polyelectrolyte complex)

10

Hai phương pháp thường sử dụng là ionotropic gelation và tự lắp ráp polyelectrolyte [50]

Phương pháp Ionotropic gelation

Nano chitosan chuẩn bị bằng kỹ thuật gel ionotropic lần đầu tiên được Calvo và cộng sự báo cáo Cơ chế tạo nanochitosan dựa trên tương tác tĩnh điện giữa nhóm amine của chitosan và nhóm tích điện âm của polyanion như tripolyphosphate Phương pháp này đơn giản, nhẹ nhàng Trước tiên, chitosan có thể hòa tan trong axit axetic, có hoặc không có chất ổn định, sau đó bổ sung anionic polyme Khuấy ở nhiệt độ phòng

và các hạt nano được tạo thành một cách tự phát Có thể thay đổi kích thước và điện tích bề mặt của hạt bằng cách thay đổi tỉ lệ chitosan và chất ổn định [7]

Phương pháp Microemulsion

Nano chitosan được điều chế bằng kỹ thuật microemulsion lần đầu tiên được phát triển bởi Maitra và cộng sự [7] Kỹ thuật này dựa trên sự hình thành của nano chitosan bên trong giọt micellar đảo ngược và sau đó liên kết ngang qua glutaraldehyde Trong phương pháp này, một chất hoạt động bề mặt được hòa tan trong N-hexane, sau đó, chitosan trong dung dịch axetic và glutaraldehyde được thêm vào chất có hoạt tính bề mặt / hỗn hợp hexane, khuấy liên tục ở nhiệt độ phòng Hạt nano được hình thành trong sự hiện diện của chất hoạt động bề mặt Hệ thống này được khuấy qua đêm để hoàn thành liên kết ngang, và nhóm amin của chitosan kết hợp với glutaraldehyde Các dung môi hữu cơ được lấy ra bằng cách bay hơi dưới áp suất thấp Sản lượng thu được là nano chitosan liên kết ngang và chất hoạt động bề mặt dư thừa Chất hoạt động bề mặt dư thừa được lấy ra bằng cách kết tủa với CaCl2 và sau đó được loại bỏ bằng ly tâm Cuối cùng các hạt nano được thẩm tách và lyophilyzation Kỹ thuật này cung cấp hạt kích thước nhỏ hơn 100 nm và kích thước các hạt có thể được

11

kiểm soát bằng cách thay đổi lượng glutaraldehyde từ đó làm thay đổi mức độ liên kết ngang Tuy nhiên, phương pháp có một số nhược điểm như việc sử dụng các dung môi hữu cơ, quá trình chuẩn bị tốn thời gian, và sự phức tạp trong bước rửa

Phương pháp khuếch tán dung môi nhũ tương hóa

El-Shabouri báo cáo nano chitosan được điều chế bằng phương pháp khuếch tán dung môi nhũ tương, (Ban đầu được phát triển bởi Niwa và cộng sự sử dụng PLGA) [7] Phương pháp này được dựa trên một phần sự trộn lẫn của dung môi hữu cơ bằng nước Nhũ tương thu được sau khi trộn chất hữu cơ vào dung dịch chitosan có chứa một chất ổn định (poloxamer) khuấy cơ, tiếp theo là đồng nhất áp suất cao Nhũ tương này sau đó được pha loãng với một số lượng lớn nước để khắc phục sự trộn lẫn dung môi hữu cơ trong nước Sự kết tủa polymer xuất hiện như là kết quả của sự khuếch tán dung môi hữu cơ vào trong nước, dẫn đến hình thành của các hạt nano Phương pháp này phù hợp cho các loại thuốc kỵ nước và cho thấy tỷ lệ ngậm thuốc cao Những nhược điểm chính của phương pháp này bao gồm điều kiện xử lý khắc nghiệt (ví dụ, việc sử dụng các dung môi hữu cơ) và lực cắt cao được sử dụng khi điều chế các hạt nano

Phương pháp polyelectrolyte complex (PEC)

Màng polyelectrolyte hoặc tập hợp nhóm polyelectrolyte là một thuật ngữ để mô

tả màng được hình thành bằng cách tự lắp ráp của polyme mang cation và DNA plasmid Cơ chế của PEC hình thành liên quan đến việc trung hòa điện tích giữa cation polymer và DNA dẫn phá vỡ phân tử ưa nước Một số polyme cation (tức là gelatin, polyethylenimine) cũng có tính chất này Nói chung, kỹ thuật này cung cấp phương pháp chuẩn bị đơn giản Các hạt nano được hình thành một cách tự nhiên sau khi bổ

12

sung các DNA vào chitosan hòa tan trong dung dịch axit axetic, theo khuấy cơ học ở nhiệt độ phòng Kích thước phức hợp có thể được thay đổi từ 50 nm đến 700 nm [7]

1.1.3 Hoạt tính đối kháng vi sinh vật của chitosan

Khả năng đối kháng vi sinh vật của chitosan được sử dụng rộng rãi, tuy nhiên,

cơ chế đối kháng vi sinh vật chính xác của nó cho đến nay vẫn chưa được xác định rõ ràng

Một vài cơ chế tác động kháng khuẩn của chitosan đã được đưa ra: (i) tạo phức với các nguyên tố vết hoặc các chất dinh dưỡng thiết yếu, như vậy ức chế sinh trưởng của vi khuẩn; (ii) có thể tương tác với các nhóm anion trên bề mặt tế bào và tạo ra các phức hợp điện phân với các hợp chất trên bề mặt vi khuẩn, tạo ra một lớp không thấm quanh tế bào, ngăn cản sự vận chuyển của các chất hòa tan cần thiết vào trong tế bào

Kiểm tra bằng kính hiển vi điện tử của chế phẩm chitosan ức chế vi sinh vật cho

thấy, vị trí hoạt động của nó là ở trên bề mặt tế bào vi sinh vật Các chủng Candida

albicans tiếp xúc với chitosan hoặc các dẫn xuất của chitosan dưới kính hiển vi điện tử

thấy tổn thương tế bào mức độ khác nhau [37]

Cơ chế đối kháng vi sinh vật của chitosan được cho là do cation của chitosan tương tác

và làm gián đoạn màng tế bào Có giả định cho rằng bản chất polycationic của chitosan, tích điện dương do mang nhóm – của glucosamine, có thể là một yếu tố

cơ bản góp phần tương tác với các thành phần tích điện âm trên màng của nhiều loại nấm và vi khuẩn, gây ra thay đổi bề mặt tế bào, rò rỉ các chất trong tế bào, cuối cùng dẫn đến suy giảm các hoạt động quan trọng của vi sinh vật [19]

Chitosan được chứng minh có hoạt tính đối kháng nấm như Aspergillus niger,

Alternaria alternata, Rhizopus oryzae, Phomopsis asparagi, và Rhizopus stolonifer Có

13

3 cơ chế được đưa ra cho các cách ức chế của chitosan (i) màng plasma của nấm là đích chính của chitosan Điện tích dương của chitosan tương tác với các thành phần phospholipid tích điện âm của màng nấm, điều này làm tăng tính thấm của màng làm cho các thành phần trong tế bào bị thoát ra, dẫn đến tế bào bị chết; (ii) chitosan hoạt động như một chất kẹp (chelating) bằng cách gắn với các nguyên tố vết, làm cho nấm không thể sử dụng các chất dinh dưỡng thiết yếu để sinh trưởng bình thường; và (iii) chitosan có thể thâm nhập vào màng tế bào và gắn với DNA, điều này sẽ ức chế tổng hợp mRNA và như vậy ảnh hưởng đến việc tạo ra các protein và enzyme cần thiết Mặt khác, một số báo cáo cho rằng còn các cơ chế hoạt động khác, như liên kết với nước, làm bất hoạt enzyme, chọn lọc chelation vi lượng khoáng cần thiết cho các enzyme của

vi khuẩn, có thể sáng tỏ cơ chế kháng vi sinh vật của chitosan [33]

Young và cộng sự [45] cho rằng chitosan làm cho ion Ca2+ được giải phóng từ

phức tạo ổn định màng tế bào của Glycine max, kết quả làm mất ổn định của màng và

gây rò rỉ các thành phần tế bào Tokura và cộng sự [52], đã quan sát thấy chitosan (MW = 9300) xếp chồng lên nhau trên thành tế bào và ức chế sự tăng trưởng của vi

khuẩn E coli Họ cho rằng hoạt tính kháng khuẩn có liên quan đến việc kìm hãm các

hoạt động trao đổi chất của vi khuẩn bằng cách ngăn chặn cung cấp chất dinh dưỡng qua màng tế bào [52]

Rõ ràng, các cơ chế hoạt động không loại trừ lẫn nhau, kể từ lúc chitosan ức chế hoạt động của vi sinh vật, và cuối cùng có thể dẫn đến một quá trình giết hại

1.1.4 Ứng dụng nano chitosan

Các hạt nano chitosan chủ yếu được ứng dụng trong y học như chất mang và phân phối thuốc Ở Việt Nam, đã có một số nghiên cứu tạo hạt nano trên cơ sở polysacarit, đặc biệt là chitosan Nói chung, những hạt nano này mới chỉ được khảo sát

về tính chất hóa lý và khả năng mang thuốc, được ứng dụng trong sinh y, cụ thể là ứng

14

dụng dẫn thuốc còn hầu như chưa được nghiên cứu cho những ứng dụng khác (ngoại trừ nghiên cứu về axit glutamic ứng dụng cho mục đích làm chất mang thuốc paclitaxel củaViện Hóa học, Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam) [3]

Trên thế giới đã có nhiều công bố ứng dụng hạt nano trong y học Hạt có kích cỡ nano có thể được tiêm tĩnh mạch vì đường kính của mao mạch máu là khoảng 4 nm Các hạt có đường kính lớn hơn 100 nm nhanh chóng được hấp thụ bởi hệ thống lưới nội mô (RES) trong gan, lá lách, phổi và xương tủy, trong khi các hạt có kích cỡ nhỏ hơn có xu hướng lưu thông kéo dài một thời gian Tạo ra hạt nano với điện tích bề mặt

ưa nước nhưng trung lập là một phương pháp khả thi để giảm đại thực bào và do đó nâng cao hiệu quả điều trị của thuốc Thuốc hứa hẹn nhất đã được nghiên cứu rộng rãi

là những chất chống ung thư Sau khi tiêm tĩnh mạch, nhiều hạt nano chitosan tích tụ trong một số khối u Nano chitosan kìm hãm sự phát triển của khối u và nâng cao tỷ lệ sống của chuột có khối u sau khi được điều trị [6] Ngoài ra, hạt nano chitosan có kích thước nhỏ hơn 100 nm được dùng như thuốc kháng khuẩn, kháng virus, kháng nấm và thuốc chống ký sinh trùng [6]

Có giả thuyết cho rằng các hạt nano có thể bảo vệ thuốc không bị phân giải bởi enzyme trong đường tiêu hóa Pan và cộng sự báo cáo rằng tác dụng hạ đường huyết

đã được quan sát ở các con chuột mắc bệnh tiểu đường sau khi uống các hạt nano chitosan [7]

Chitosan là vector chuyển gen hứa hẹn lần đầu tiên được đề xuất bởi Mumper

[17] Chitosan được chứng minh có hiệu quả trong chuyển gen in vitro Hạt nano

thường thể hiện tác dụng bổ trợ đáng kể cho vắc-xin Kích thước siêu nhỏ của hạt nano cho phép chúng được hấp thụ bởi các tế bào M, trong mô bạch huyết niêm mạc , kích hoạt các vị trí của phản ứng miễn dịch mạnh mẽ [35]

15

1.2 Tinh dầu nghệ

1.2.1 Giới thiệu chung về nghệ

Cây nghệ thuộc họ Zingiberaceae, chi Curcuma, loài Longa Tên khoa học của cây nghệ là: Curcuma longa Linaeus (C longa L.)

Hình 1.2: Hình thái cây nghệ

Nghê ̣ được trồng ở khu vực ấm áp và có mưa nhiều trên thế giới như Trung Quốc, Ấn Độ, In-đô-nê-xi-a Tại Ấn Độ, nó được phổ biến và được gọi là Haldi (Tiếng Hin-ddi) Tại Ma-lay-xi-a, In-đô-nê-xi-a và Ấn Độ, nghệ đã được nghiên cứu do tầm quan trọng về kinh tế của nó Thân rễ của nó là thuôn dài, hình trứng và thường phân nhánh ngắn [20]

1.2.2 Thành phần hóa học

Thành phần trong nghệ gồm: protein (6,3%), chất béo (5,1%), khoáng chất (3,5%), carbohydrates (69,4%) và độ ẩm (13,1%) Phenolic diketone, curcumin (diferuloylmethane) (3 - 4%) quy định màu vàng của nghệ, và bao gồm curcumin I (94%), chất curcumin II (6%) và chất curcumin III (0,3%) (Hình 1.3) Phenolic

16

diketones demethoxycurcumin và bis-demethoxycurcumin cũng đã được phân lập từ

thân rễ Curcuma longa Sự có mặt của tumerone (a, b), curdione, curzerenone,

mono-và di-demethoxycurcumin đã được tìm thấy trong thân rễ Tinh dầu (5,8%) thu được bằng cách chưng cất hơi nước phần thân rễ có chứa thành phần phellandrene(1%), sabinene (0,6%), cineol (1%), borneol (0,5%), zingiberene (25%) và sesquiterpines (53% ) [10]

Hình 1.3: Cấu trúc của các hợp chất curcumin trong tinh dầu nghệ

Kelkar và Sanjeev Rao [32] báo cáo rằng tinh dầu nghệ được điều chế bằng phương pháp chưng cất hơi nước dễ bay hơi chủ yếu là một hỗn hợp của sesquiterpene

xeton và rượu Malingre [38] báo cáo thành phần chiết của C.longa gồm p-cymene, sesquiphellandrene, turmerone, ar-turmerone và rượu sesquiterpene (Hình 1.4)

b-17

Hình 1.4: Cấu trúc của một số hợp chất trong tinh dầu nghệ

Chen và cộng sự [11] so sánh thành phần của các loại dầu dễ bay hơi của thân rễ

và củ nghệ nguồn gốc Trung Quốc C Longa gồm: Turmerone (24%), ar-turmerone

(8,4%) và curdione (11,58%) (Hình 1.4) là các hợp chất quan trọng trong cả hai loại dầu Tuy nhiên, ar-curcumene đã đƣợc tìm thấy trong dầu thân rễ là 12,2%, nhƣng nó

đã không đƣợc báo cáo trong dầu củ Gopalan và Ratnambal [21] so sánh các thành

18

phần chính của dầu nghệ sản xuất từ giống cây trồng khác nhau Có sự thay đổi đáng

kể trong các thành phần chính phụ thuộc vào giống và nguồn gốc sản xuất Dầu lá nghệ Việt Nam chứa chủ yếu là α-phellandrene (24,5%), 1,8-cineole (15,9%), p-cymene (13,2%) và β-pinene (8,9%) Cooray và cộng sự [13] cho biết các thành phần chính của dầu thân rễ được sản xuất từ một giống nghệ duy nhất được trồng ở Sri Lanka, và nó đã được báo cáo rằng ar-turmerone (24,7-48,9%) và turmerone (20-39%) là những hợp chất chính McCarron và cộng sự [36] đã sử dụng phương pháp phân tích GC-MS để so

sánh hợp chất monoterpene hydrocarbon của các loại dầu sản xuất từ lá và rễ của C

longa tươi, phát hiện ra rằng hydrocarbon monoterpene của lá và các loại dầu thân rễ

tươi tương ứng là 92,9 và 16,3% Dầu thân rễ của C longa nguồn gốc Trung Quốc

được phân tích bằng GC-MS [54] Dầu này được cho là chứa 17 thành phần hóa học, trong đó turmerone (24%), ar-turmerone (18%) và germacrone (11%) là các hợp chất chính

1.2.3 Hoạt tính sinh học của tinh dầu nghệ

Hoạt tính chống viêm: Tinh dầu của Curcuma longa có hiệu quả chống viêm và

anti-hyaluronidase [40] Các tác giả cho rằng hiệu quả chống oxy hóa của dầu được chứng minh bằng sự ức chế khả năng khuếch tán của hyaluronidase enzyme Dầu từ lá

Curcuma longa cũng cho thấy hoạt tính chống viêm ở chuột bạch thực nghiệm Dịch

chiết thân rễ làm giảm sự phát triển của u hạt và không độc đối với động vật

Hoạt tính chống oxy hóa: Scatezzini và cộng sự (2000) đã nghiên cứu hoạt tính

chống oxy hóa của một số thực vật sử dụng trong y học cổ truyền của Ấn Độ Nghiên cứu này chỉ ra rằng cây nghệ được sử dụng nhiều trong quá trình chuẩn bị liệu pháp Ayurvedic cách đây hàng ngàn năm [49] Lee (2006) phát hiện ra thành phần hủy tiểu

cầu ar-turmerone có nguồn gốc từ thân rễ của cây nghệ Curcuma longa L., ở nồng độ

ức chế 50% (IC50) ar-turmerone ức chế sự tạo khối của tiểu huyết cầu do collagen cảm

19

ứng (IC50, 14,4 μM) và axit arachidonic (IC50 43,6 μM) [34] Xác định được hoạt tính chống oxy hóa của dịch chiết methanol của thân rễ tươi và khô từ 4 dòng nghệ

(Curcuma longa L.) nuôi cấy in vitro [14] Đã xác định hoạt tính chống oxy hóa của

dịch chiết dầu nghệ đen trồng ở Việt Nam [5]

Tác dụng giảm mỡ: khi sử dụng 1mg dịch chiết nghệ trong 15 ngày, lượng lipid

giảm rõ rệt: lượng cholesterol tổng, triglyceride và LDL giảm từ 55-40% ở động vật thí nghiệm Ngoài ra, dịch chiết này còn làm giảm nguy cơ xơ cứng động mạch Các tác giả cho rằng uống dịch chiết nghệ ức chế oxy hóa LDL và có hiệu quả giảm cholesterol

ở thỏ thí nghiệm [29]

Chống dị ứng và làm lành vết thương: dịch chiết thô của thân rễ nghệ có hoạt

tính ức chế cycloxygenase (COX) tốt trong thử nghiệm sinh học in vitro

Antivenom activity: Phân đoạn có chứa ar-turmerone chiết từ C longa trung hòa

hiệu quả gây chết và hoạt tính xuất huyết của nọc rắn ở chuột Trong nghiên cứu này, ar-turmerone có khả năng thủ tiêu hoạt tính xuất huyết của nọc độc Bothrops và khoảng 70% hiệu quả gây chết của nọc độc Crotalus Những nghiên cứu miễn dịch học chứng minh rằng ar-turmerone ức chế sự tăng sinh và hoạt tính giết tự nhiên của lyphocytes người [18;29]

Hoạt tính kháng khuẩn: Tinh dầu nghệ được thử với các chủng Staphylococcus albus, Staphylococcus aureus và Bacillus typhosus, kết quả cho thấy sinh trưởng của Staphylococcus albus, Staphylococcus aureus bị ức chế ở các nồng độ khác nhau Đối

với vi khuẩn đường ruột, sinh trưởng của lactobacili bị ức chế bởi tinh dầu nghệ ở nồng

độ 4,5-90μl/100 ml, Dịch chiết alcohol cũng có hiệu quả ức chế (10–200 mg/ml) nhưng không bằng tinh dầu Một số tác giả đã chứng minh hoạt tính kháng khuẩn của dầu nghệ Jayaprakasha và cs (2002) báo cáo hoạt tính kháng khuẩn của dầu nghệ được

20

tách từ dịch mẹ sau khi đã tách lấy curcumin [30] Dầu nghệ được phân đoạn bằng chưng cất chân không thu được 2 phân đoạn, Các phân đoạn này được thử với một số

chủng nấm như Aspergillus flavus, A parasiticus, Fusarium moniliforme và

Penicillium digitatum bằng phương pháp nảy mầm bào tử Phân đoạn nhận được dưới

chân không ở 110-1200C có hiệu quả hơn Kết quả phân tích GC/MS cho thấy trong phân đoạn này chủ yếu là turmerone thơm, turmerone và curlone cùng với các hợp chất

oxy hóa khác [8;51] Theo Dhingra và cs (2007), tinh dầu nghệ (Curcuma longa L, )

độc đối với 7 loại nấm hại nông sản trong kho Phụ thuộc vào loại nấm, sự ức chế phát

triển của chúng dao động từ 36%-77%, Aspergillus flavus, Fusarium semitectum,

Colletotrichum gloeosporioides và C musae là những loại mẫn cảm nhất, bị ức chế sự

phát triển trên 70%, turmerone chiếm 87% của hợp chất dầu kháng nấm và turmerone tinh sạch có hoạt tính kháng nấm tương tự như dầu thô [16] Behura và cs

ar-thấy trong 5 nguồn bệnh nấm lúa được xử lý với tinh dầu nghệ, Rhizotonia solani mẫn cảm nhất và F moniliforme kháng mạnh nhất với sự phát triển bị giảm tương ứng 81%

và 2,5%, [9] Tương tự, Saju và cs báo cáo ở nồng độ 1%-5% tinh dầu nghệ, sự phát

triển của C gloeosporioides, Sphaceloma caradmomi và Pestdlotiopsis palmarum hoàn toàn bị ức chế, trong khi đó F.solani chỉ bị ức chế 79% [46] Phan Minh Giang, Phan

Tống Sơn (2000) [44] đã tách sesquiterpenoids trong dung môi n-hexan của củ nghệ

Curcuma cochinchinensis gagnep được 4 phân đoạn curdione (1), curcumol (2),

isocurcumenol (3) và curcumenol (4) Các tác giả đã nghiên cứu hoạt tính kháng vi sinh vật của các sesquiterpenoid này Các hợp chất 1, 2 và 3 trộn với nhau theo tỉ lệ

2:1: 4 có khả năng ức chế sự phát triển của Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis,

Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, Aspergillus niger, Fusarium oxysporum khác nhau Nồng độ ức chế tối thiểu của hợp chất 1 lớn hơn 300

μg/ml đối với Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Candida albicans, Aspergillus

niger, Candida albicans mẫn cảm với hợp chất 2+3 và 4 với nồng độ ức chế tối thiểu

là 50 μg/ml [44]

21

Các tác dụng khác: chống ung thư, kháng virus, chống nhiễm trùng, chữa lành

vết thương và loại độc của ar-turmerone tách chiết từ Curcuma longa được chứng minh

[18] Ngoài ra nó còn có tác dụng chống nôn, thuốc đánh rắm và chống co thắt và làm giảm táo bón

Phương thức kháng khuẩn của tinh dầu

Mặc dù có rất nhiều nghiên cứu về thành phần và hoạt tính kháng khuẩn của tinh dầu thực vật, nhưng cơ chế hoạt tính của chúng chưa được nghiên cứu tỉ mỉ Do tinh dầu có rất nhiều nhóm các hợp chất hóa học khác nhau, nên có lẽ hoạt tính kháng khuẩn của chúng không do một cơ chế đặc biệt nào mà có một vài đích trong tế bào (hình 1.5)

Hình 1.5: Vị trí và các cơ chế trong tế bào vi khuẩn được cho là điểm hoạt tính của tinh dầu: phân hủy thành tế bào; làm hư hại màng tế bào; làm hỏng protein

màng; các thành phần tế bào bị rò rỉ; tủa tế bào chất; và lực đẩy proton bị suy yếu [48]

Nhìn chung, tinh dầu chứa các hợp chất phenol cao như carvacrol, eugenol và thymol, có hoạt tính kháng nguồn bệnh thực phẩm cao Rất có lý cho rằng cơ chế hoạt tính của chúng tương tự như các phenolics khác đó là làm xáo trộn màng tế bào chất, gián đoạn lực đẩy proton, dòng electron, vận chuyển chủ động và làm tủa các chất trong tế bào

Cấu trúc hóa học của các thành phần trong từng loại tinh dầu tác động đến cơ chế hoạt động và hoạt tính của chúng Tầm quan trọng của sự có mặt của các nhóm hydroxyl trong các hợp chất phenolic đã được chứng minh Các thành phần của tinh dầu cũng tác động lên protein gắn trong màng tế bào chất Các enzyme như ATPases được biết nằm trong màng tế bào chất và được bao quanh bởi các phân tử lipid Các phân tử lipophilic hydrocacbon có thể tích tụ trong lớp lipid kép và làm hỏng tương tác lipid-protein; ngoài ra có thể có sự tương tác trực tiếp của các hợp chất lipophilic với phần kỵ nước của protein Một vài tinh dầu kích thích sinh trưởng của pseudomycelia (một loạt tế bào gắn với nhau do sự phân tách không hoàn thiện của các tế bào mới tạo thành) của một số nấm men Điều đó có thể biểu thị tác động của tinh dầu lên enzyme tham gia vào quá trình điều hòa năng lượng hoặc tổng hợp các thành phần cấu trúc quan trọng Tinh dầu dã hương và các thành phần của nó được chứng minh ức chế axit

amino decarboxylases trong Enterobacter aerogenes Cơ chế này được cho là do gắn

với protein

23

Gần đây các nghiên cứu cho thấy điểm hoạt tính của các hydrocacbon vòng, gồm cả terpene hydrocacbon là màng tế bào β-pinene làm rò rỉ K+, H+ và ảnh hưởng đến hô hấp của nấm men Tương tự, cyclohexane, limonene và β-pinene cũng ức chế

hô hấp và các quá trình phụ thuộc năng lượng khác liên quan đến màng tế bào

S.cerevisiae Các hydrocacbon terpenes như α-pinene, β -pinene, γ-terpinene và

limonene được tìm thấy ảnh hưởng tới các đặc điểm cấu trúc và chức năng của màng nhân tạo, chúng làm cho màng thấm tốt hơn và phồng lên Điều này ức chế các enzyme

hô hấp, dẫn đến pH gradient và điện thế bị trục trặc, mà đây là những yếu tố then chốt cho hệ năng lượng trong tế bào Phần lớn các terpenoid ức chế quá trình hấp thu oxy và phosphoryl hóa của vi sinh vật [48;23]

1.3 Thanh Long

1.3.1 Thanh long và giá trị kinh tế

Thanh long một loài cây được trồng chủ yếu để lấy quả và cũng là tên của một vài chi của họ xương rồng Thanh Long là loài thực vật bản địa tại Mexico, các nước Trung Mỹ và Nam Mỹ Hiện nay, loài cây này cũng được trồng ở các nước trong khu vực Đông Nam Á như Việt Nam, Malaysia, Thái Lan, Philippines, Indonesia (đặc biệt là ở miền tây đảo Java); miền nam Trung Quốc, Đài Loan và một số khu vực khác

Quả của thanh long có ba loại, tất cả đều có vỏ giống như da và có một chút lá Chúng có tên gọi khoa học như sau:

 Hylocereus undatus thuộc chi Hylocereus, ruột trắng với vỏ hồng hay đỏ

 Hylocereus polyrhizus thuộc chi Hylocereus, ruột đỏ với vỏ hồng hay đỏ

 Hylocereus megalanthus, trước đây được coi là thuộc chi Selenicereus, ruột trắng với vỏ vàng

24

Các hạt giống như hạt vừng đen nằm lẫn lộn trong ruột Lớp cùi thịt trong ruột thường được ăn ở dạng quả tươi, có mùi vị thơm dịu, ngọt vừa phải và cung cấp ít calo

Hương vị của nó đôi khi giống như hương vị của quả kiwi (Actinidia deliciosa) Quả

có thể chế biến thành nước quả hay rượu vang; hoa có thể ăn được hay ngâm vào nước

Hình 1.6: Các giống quả thanh long

a) Thanh long ruột trắng vỏ đỏ; b) Thanh long ruột trắng vỏ vàng; c) Thanh long ruột đỏ vỏ đỏ

a)

a)

b)

c)

25

giống nhƣ chè Mặc dù các hạt bé tí xíu của chúng đƣợc ăn cùng với thịt của ruột quả nhƣng chúng không bị tiêu hóa

Bảng 1.1: Giá trị dinh dưỡng trong 100 g quả thanh long (trong đó có 55 g ăn được)

Thứ tự Thành phần dinh dƣỡng Đơn vị Giá trị dinh dƣỡng (g)

Các giá trị nêu trên có thể thay đổi theo giống và điều kiện trồng trọt [57]

Ở Việt Nam Thanh Long đƣợc trồng rộng rãi ở Bình Thuận, Long An, Tiền Giang và một số tỉnh khác Trong đó Bình Thuận là tỉnh xuất khẩu thanh long lớn nhất

26

nước Bình Thuận hiện có trên 13.000ha thanh long, sản lượng hàng năm đạt khoảng 300.000 tấn, giá trị hàng hóa trên 2.000 tỷ đồng Thanh Long Bình Thuận hiện tiêu thụ trên thị trường ở dạng trái tươi, trong đó tiêu thụ nội địa khoảng 15-20% và xuất khẩu khoảng 80-85% [56]

1.3.2 Vi sinh vật gây hỏng quả

Thanh long (Hylocereus tricostatus) chỉ có ở nước ta (gần đây mới lan sang vài

nước lân cận) và mới được chú ý nên chưa có kết quả công bố về hệ nấm mốc trên loại quả này [4] Theo Nguyễn Thùy Châu và cộng sự (2009) [2], thanh long thường bị

nhiễm Aspergillus và Rhizopus, vải thường bị Fusarium và Penicillium tấn công gây thối hỏng Các loài nấm sợi thuộc chi Aspergillus gặp với tần suất cao ở thanh long và xoài, các loài thuộc chi Cladosporium gặp ở xoài ít hơn ở thanh long, ngược lại các loài thuộc chi Mucor gặp ở xoài nhiều hơn so với ở thanh long [4] Các chủng nấm thường gặp ở xoài và thanh long là Fusarium dimerum Penzig, Aspergillus nidulans Wint, Aspergillus fumigatus Fresenius và Aspergillus japonicus Saito[4]

Phòng Công nghệ sinh học – Viện Hóa sinh biển đã phân lập từ vỏ quả Thanh Long hỏng các chủng vi sinh vật:

Cladosporium cladosporioides (Fres.) de Vries: Là chủng nấm mốc gây bệnh ở

các loài cây ngũ cốc đặc biệt là lúa mì, và một số loài cây thân gỗ [15]

27

Hình 1.7 : Cladosporium cladosporioides

Cladosporium tenuisimum Cooke : Là chủng nấm mốc đƣợc báo cáo là tác nhân

gây bệnh của bệnh thối quả cà chua, bệnh đốm lá chuối, cháy lá và thối quả dƣa hấu

Nó cũng đã đƣợc phân lập nhƣ một nấm ký sinh kết hợp với các loại nấm khác từ lƣỡi

lá, bẹ lá và rễ lúa, thối quả dƣa chuột [53]

Hình 1.8: Clasdosporium tenuisimum cooke

28

Rhodoturola sp: là chủng nấm men gây bệnh cơ hội [24]

Hình 1.9: Rhodoturola sp

Các chủng này được sử dụng cho những nghiên cứu của luận văn

1.3.3 Biện pháp bảo quản rau hoa quả tươi sau thu hoạch

Thông thường có hai phương pháp chính để bảo quản rau hoa quả tươi sau khi thu hoạch là: (i): bảo quản tự nhiên; (ii): bảo quản nhân tạo

- Bảo quản tự nhiên:

Ở nhiệt độ thường

Đây là cách bảo quản ở nhiệt độ và độ ẩm không khí tự nhiên Phương pháp này rau hoa quả giữ tươi trong thời gian rất ngắn, vì vậy không phù hợp cho sản xuất ở quy

mô lớn

29

Xử lý lạnh

Bảo quản rau hoa quả ở nhiệt độ thấp khoảng 10±2oC Tuy nhiên, phương pháp này không khả quản vì sau khi hoa quả tươi được mang đi tiêu thụ khó duy trì được nhiệt độ thấp nên cũng dễ bị vi sinh vật làm hỏng

Phương pháp điều chỉnh thành phần không khí

Nguyên tắc của phương pháp này là làm tăng nồng độ khí cacbonic và giảm nồng độ oxy trong không khí xung quanh trái để giảm cường độ hô hấp của rau quả Dùng bịch polyetylen có đục 20 – 30 lỗ bằng kim, bao bọc rau quả và hàn kín bao lại

Kỹ thuật này kết hợp với nhiệt độ lạnh ở 50C.Phương pháp này rau quả bảo quản được trong thời gian khá dài

- Bảo quản nhân tạo

Xử lý thuốc kích thích

Dùng chế phẩm axit gibberelic (GA3) với liều 2 gói bột (mỗi gói chứa 1g), pha trong bình xịt 12 lít, xịt đều quanh trái Xử lý trước khi thu hoạch từ 1 – 3 ngày Nhưng

30

phương pháp này không nên dùng cho rau xanh vì hàm lượng thuốc tồn dư trong rau quá cao không tốt cho sức khỏe người tiêu dùng

Bằng hoá chất ozon

Dùng dung dịch hoạt hoá anolyte (hay còn gọi là nước ozon), rửa sạch trái, sau

đó hong khô, đóng gói, bảo quản trong nhà mát phương pháp này thường dùng cho quả tươi sau thu hoạch

Ngoài ra còn sử dụng các tác nhân hóa học khác như chất bảo quản, lý học như tia cực tím, phóng xạ để bảo quản

Trong những năm gần đây các cơ quan nghiên cứu khoa học Nông nghiệp ở nước ta đã nghiên cứu ra một số chế phẩm bảo quản rau quả tươi được ứng dụng trong thực tiễn đã mang lại hiệu quả cao trong ngành bảo quản rau quả tươi ở nước ta Hầu hết những phương pháp này đều có nguồn gốc sinh học, tính an toàn cao cho con người

Màng bán thấm BOQ -15

Đây là sản phẩm do bộ môn Bảo quản sau thu hoạch ( Viện cơ điện Nông nghiệp và Công nghệ sau thu hoạch ) nghiên cứu, sản xuất BOQ –15 là hỗn hợp dung môi hữu cơ và thuốc chống nấm được kết hợp với nhau dưới dạng một dung dịch lỏng dùng để bảo quản các loại quả thuộc họ Citrus ( cam, chanh, quít, bưởi) và một số loại rau ăn quả như cà chua [58]

Sử dụng màng Chitosan

Đây là sản phẩm và quy trình công nghệ do các cán bộ khoa học của Viện nghiên cứu cây ăn quả miền Nam và Viện nghiên cứu và Phát triển Công nghệ Sinh

31

học (Trường Đại học Cần Thơ) nghiên cứu thành công trong việc bảo quản các loại quả tươi sau thu hoạch [58]

Màng bao – BQE 15

Viện Cơ điện nông nghiệp và công nghệ sau thu hoạch Việt Nam, đã triển khai

đề tài "Nghiên cứu ứng dụng công nghệ bảo quản hoa quả bằng màng costing - BQE

15 và Retain - AVG" và đưa vào ứng dụng ở một số tỉnh như Hưng Yên, Hà Giang

BQE 15 là chế phẩm sinh học được chiết suất từ sáp ong, cỏ… thành phần chính

là keo BE có màu nâu vàng nhạt ở thể lỏng và chất chỉ thị Anionic BQE 15 được sử dụng để tạo ra một lớp màng bán thấm rất mỏng bao bọc quanh vỏ hoa quả như: Cam, quýt, bưởi… nhằm ngăn chặn oxy tác động vào vỏ quả, làm chậm quá trình hô hấp, ngăn chặn vi khuẩn tấn công, nên giảm thiểu tỷ lệ thối rữa của hoa quả khi bảo quản Hoa quả bảo quản bằng "màng costing", quả luôn tươi, bóng đẹp hấp dẫn khách hàng [59]

Sự hư hỏng của nông sản sau thu hoạch trong các kho là một vấn đề thường xuyên xẩy ra trong các vùng có khí hậu nhiệt đới do nhiệt độ và độ ẩm cao Vì vậy mà

các loại hạt, thực phẩm bị các loài Aspergillus khác nhau làm hỏng, một số tạo mycotoxin và sự hư hỏng của ngũ cốc tươi do Fusarium semitectum và các loài

Colletotrichum làm mất mát đáng kể [4] Hiện không có phương pháp hữu hiệu, thiết

thực, an toàn cao để làm sạch các kho chứa, giảm tấn công của vi sinh vật Vì vậy, rất cần nghiên cứu và phát triển các chất không độc có thể giảm tốc độ hư hại, kéo dài thời gian bảo quản

Dung dịch nanochitosan – tinh dầu nghệ có thể là chất thay thế có tiềm năng cho các loại hóa chất độc hại diệt nấm hiện đang được lưu hành trong bảo quản sau thu hoạch rau quả tươi hiện nay ở nước ta