Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống và kỹ thuật trồng giống cỏ ngọt Stevia rebaudiana Bertoni tại thành phố Việt Trì – tỉnh Phú Thọ

Ý nghĩa của đề tài - Ý nghĩa khoa học: kết quả nghiên cứu đề tài là cơ sở cho các nghiên cứutiếp theo về nhân giống các loại cây trồng khác nói chung và cây cỏ ngọt nóiriêng, góp phần tạ

ĐẶT VẤN ĐỀ 1.1 Tính cấp thiết của đề tài

Cây cỏ ngọt (Stevia rebaudiana Bertoni) là cây dược liệu có nguồn gốc

xuất xứ ở Paraguay, Brazil, Argentina, được phát hiện từ năm 1908 nhưng chínhthức đưa vào trồng năm 1931 Sau đó được trồng ở Canada, Liên Bang Nga,Trung Quốc, Nhật Bản và một số các nước khác, trong đó có Việt Nam Sảnphẩm của cây cỏ ngọt được sự dụng trong y học và trong thực phẩm Trong yhọc, nó được dùng như một loại trà cho những người bị bệnh đái tháo đường,người bị bệnh béo phì, cao huyết áp Trong thực phẩm, cỏ ngọt dùng để pha chếlàm tăng độ ngọt của các loại thực phẩm khác nhau, và chế thành các viênđường làm giảm độ nóng khi dùng đường saccarôza Ngoài ra, người ta còndùng để chế biến rượu màu, nước hoa quả, các loại bánh kẹo, món tráng miệngđông lạnh, ướp các loại hải sản sấy khô, chế biến dấm…Hiện nay giá cỏ ngọttrên thị trường dao động khoảng 180.000đ/1kg khô mà cỏ ngọt có thể cho thuhoạch quanh năm nhưng tốt nhất vào mùa hè và thời gian thu hoạch ngắnkhoảng hai tháng một lần Do đó, cỏ ngọt có giá trị cao về kinh tế được nhiềungười quan tâm đầu tư nghiên cứu và diện tích trồng loại cây này dần tăng lên

Để phục vụ mục đích sản xuất, trước tiên cây giống cần đảm bảo chấtlượng tốt đưa năng suất và chất lượng sản phẩm lên cao Hiện nay, nhân giống vôtính cây cỏ ngọt bằng phương pháp giâm cành đang sử dụng phổ biến, ưu điểmcủa phương pháp này là cây con giữ nguyên tính trạng của cây mẹ, cây đồng đềuthuận tiện quá trình chăm sóc, thu hoạch, thời gian nhân giống tương đối nhanh,

hệ số nhân giống cao chu kỳ khai thác ngắn và hiệu quả kinh tế Tuy nhiên, đểcung cấp kịp thời nhanh chóng cây giống có chất lượng tốt cho quá trình sản xuất,đòi hỏi người trồng dược liệu thường xuyên đổi mới và áp dụng các biện pháp kỹthuật tiên tiến vào trong sản xuất nói chung, cây cỏ ngọt nói riêng

Xuất phát từ thực tế trên, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài “Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống và kỹ thuật trồng giống cỏ ngọt Stevia rebaudiana Bertoni tại thành phố Việt Trì – tỉnh Phú Thọ”.

1.3 Yêu cầu của đề tài

Đánh giá ảnh hưởng của nồng độ chất kích thích sinh trưởng (NAA) tớinhân giống vô tính cây cỏ ngọt tại Việt Trì – Phú Thọ

Đánh giá ảnh hưởng của một số chế phẩm phân bón vi sinh tới nhân giống

vô tính cây cỏ ngọt tại Việt Trì – Phú Thọ

Đánh giá ảnh hưởng của một số công thức bón phân tới một số chỉ tiêusinh trưởng của cây cỏ ngọt tại Việt Trì – Phú Thọ

1.4 Ý nghĩa của đề tài

- Ý nghĩa khoa học: kết quả nghiên cứu đề tài là cơ sở cho các nghiên cứutiếp theo về nhân giống các loại cây trồng khác nói chung và cây cỏ ngọt nóiriêng, góp phần tạo ra cây giống có chất lượng tốt

- Ý nghĩa thực tiễn: kết quả nghiên cứu đề tài góp phần hình thành quátrình nhân giống cây cỏ ngọt, làm tăng hiệu quả sản xuất cây dược liệu và là tàiliệu bổ sung các biện pháp kỹ thuật trong nhân giống vô tính cây cỏ ngọt, phục

vụ công tác học tập của sinh viên

Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU 2.1 Nguồn gốc của cây cỏ ngọt

Cây cỏ ngọt thuộc họ Cúc: Asteraceae và thuộc chi: Stevia

Cỏ ngọt có nguồn gốc tự nhiên ở vùng Amambay và Iquacu thuộc biêngiới Braxin và Paraguay Theo nhiều tài liệu thì cỏ ngọt có nguồn gốc từ cácvùng Nam Mỹ (Brazil, Paraguay, Argentina) Tiếng địa phương gọi là “Cỏparaguay” hoặc “kahe-e” hoặc “cỏ mật – honey grass” Gosling (1901), Bertoni(1905), Hemsley (1906) đều cho biết cây cỏ ngọt phân bố nhiều ở Tây Namnước Mỹ, miền Bắc Argentina, Mexico, Trung Mỹ, Nam Mỹ và Cao nguyênBrazil Cỏ ngọt không thấy trồng ở Tây Ấn Độ và vùng Amazon

Vào thế kỉ 16, các thủy thủ người Tây Ban Nha đã từng đề cập đến loạithảo mộc này rồi nhưng đến năm 1888 các nhà thực vật học người Paraguay là

Mises Santiago Bertoni mới phân loại và chính thức đặt tên gọi nó là Stevia rebaudiana Bertoni [5][7].

2.2 Đặc điểm thực vật của cây cỏ ngọt

2.2.1 Bộ rễ

Cây thực sinh (nhân giống hữu tính), cây có rễ cọc có thể ăn sâu tới 30

cm Các rễ phụ lan rộng, ít phân nhánh và có bán kính tới 20 cm Bởi vậy để câyphát triển tốt khi trồng phải lên luống, đảm bảo cho rễ ăn sâu trên tầng đất mặt.Nếu là cây nhân giống vô tính, cây không có rễ cọc, chỉ có rễ chùm nhưng các rễphát triển khá tốt và cũng có thể ăn sâu như cây thực sinh [2]

2.2.2 Thân, cành

- Thân: Là loại cây thân gỗ nhỏ, trên thân có nhiều lông mềm, chiều caocây từ 50 - 80 cm Chiều cao tối đa của thân đạt tới 1,2 m Đường kính thân biếnđộng từ 0,5 - 0,8 cm Trên thân có nhiều đốt, vị trí phân đốt đầu tiên cách gốckhoảng 10 cm Các mắt đốt phía gốc thân có khả năng ra rễ bất định Trong sảnxuất tiến hành thu hoạch khi cây cao 50 - 60 cm

- Cành: Trên cây có 3 cấp cành Cành cấp 1 phát sinh trước khi cây rahoa, các cành cấp 2, 3 chỉ phát sinh sau khi cây có nụ và nở hoa [2]

2.2.3 Lá

Lá mọc đối theo từng cặp chéo nhau, là loại lá đơn nguyên, cĩ răng cưa,Dạng lá thuơn dài 5 - 7 cm, rộng 1,5 - 2 cm, cĩ 3 gân chính Mép lá cĩ từ 4 - 6đơi răng cưa tù, hai mặt lá cĩ lơng láng mịn [2]

2.2.4 Hoa, quả

- Hoa: Là loại hoa phức, tập hợp thành cụm hoa đầu màu trắng, là loại hoalưỡng tính nhưng chủ yếu là giao phấn, tự thụ tỉ lệ thấp Thời gian nở hoa vàotháng 5 và tháng 9

- Quả: Quả bế, màu nâu đậm, hạt khơng cĩ nội nhũ, kích thước, trọnglượng hạt rất nhỏ P1000 hạt = 0,3 - 0,4g Việc gieo trồng hạt khá khĩ khăn nênthường được nhân giống vơ tính hay nuơi cấy mơ [2]

2.3 Yêu cầu ngoại cảnh của cây cỏ ngọt

Là cây trồng của vùng nhiệt đới nên cỏ ngọt thích hợp với khí hậu ơn hồ

ít biến động, đồng thời chịu sự chi phối rất lớn của yếu tố ngoại cảnh

2.3.1 Nhiệt độ

Cây cỏ ngọt cĩ thể sinh trưởng, phát triển trong khoảng nhiệt độ từ 10 - 35 0C.Khi nhiệt độ nhỏ hơn 100C cây sẽ sinh trưởng chậm và nhiệt độ dưới 50C cây sẽchết Nhiệt độ trên 350C cây sinh trưởng kém và dễ bị một số loại sâu bệnh xâmnhiễm, khoảng nhiệt độ thích hợp nhất để cây cỏ ngọt sinh trưởng phát triển vàthu hái quanh năm là 20 – 250C[2]

2.3.2 Nước

Là cây ưa ẩm nên các vùng cĩ lượng mưa từ 1500 - 2000 mm thuận lợi cho

cỏ ngọt sinh trưởng, phát triển Cây cỏ ngọt là loại ưa ẩm trong suốt quá trình sinhtrưởng, phát triển Tuy là cây ưa ẩm nhưng bộ rễ rất sợ úng vì vậy việc làm đấtlên luống đảm bảo tưới và thốt nước tốt Nếu đảm bảo đủ độ ẩm thì cây sinhtrưởng khoẻ cây cho nhiều cành và dài tuổi thọ thân, cành, lá nâng cao năng su

ất và số lần thu hoạch lá trong năm Trong điều kiện khơ hạn kéo dài (5 - 7 ngày)cần phải cung cấp đủ nước tưới cho cỏ ngọt Thường người ta tưới rãnh 2 – 3 giờthì nước rút hết Ẩm độ đất thích hợp cho cỏ ngọt vào khoảng 70 – 75 %[2]

2.3.3 Ánh sáng

Cỏ ngọt là cây sinh trưởng phát triển tốt nơi có cường độ ámh sáng tươngđối mạnh Khi trồng trọt ở điều kiện Việt Nam cây cho thu hoạch tốt nhất vàocác tháng 5, 9,10 Sau tháng 10 do phản ứng với điều kiện ánh sáng ngày ngắn,cây nhanh ra hoa và làm tăng số lần thu hoạch Trong các tháng mùa đông nếuchăm sóc tốt cây vẫn tiếp tục cho thuhoạch nhưng năng suất thấp Ở cường độánh sáng mạnh hàm lượng Steviozit tăng [2]

2.3.4 Đất đai và dinh dưỡng

Cây cỏ ngọt có thể sinh trưởng trên hầu hết các loại đất, tuy nhiên đểtrồng đạt năng suất cao, mang lại hiệu quả kinh tế cao thì các loại đất có thànhphần cơ giới nhẹ, giàu mùn, có mực nước ngầm thấp, có độ pH từ 6 - 7 Đốitượng thu hoạch của cỏ ngọt là lá và thu hoạch nhiều lứa trong năm nên yêu cầulượng phân bón khá lớn cả về hữu cơ và vô cơ [2]

2.4 Tác dụng của cây cỏ ngọt

Trong chi Stevia có tới 100 loài nhưng chỉ có cây cỏ ngọt là có hàm lượngglucozit cao nhất và có thể sử dụng trontg y học và công nghệ thực phẩm Chấtchứa trong cỏ ngọt được đặc biệt quan tâm là Steviozit (C38H60O18) đã tạo nên vịngọt mà ít có cây trồng nào có được, độ ngọt của Steviozit gấp 300 lần đườngSaccarozo và không có tính độc nên có thể dùng Steviozit thay thế đường hoáhọc trong công nghệ thực phẩm

Theo dược sỹ Lê Trần Đức, cỏ ngọt có tính bình, có tác dụng làm hạ hàmlượng Cholesteron trong máu Steviozit không làm hại gan, thận, làm mát máunên chữa được bệnh tiểu đường, bệnh béo phì của phụ nữ, người già và trẻ em

Cỏ ngọt được sử dụng rất đa dạng, lá khô được chế biến thành trà uống, hoặc cóthể phối hợp với chè xanh, trà hay nghiền nhỏ thành bột, chế biến thành Xiro[2].Tinh thể Steviozit được sử dụng trong công nghệ thực phẩm, dược phẩm làmchất bọc các vị thuốc để bảo quản và dễ sử dụng Năm 1908 Resenack, 1909Dietrik, 1931 Budel, Lavtille tìm ra hợp chất trong cây cỏ ngọt là Sterviozit, khi

bị thuỷ phân nó cho ra 3 phân tử Steviol, Izosteviol Bằng phương pháp sắc kýbản mỏng người ta đã tìm ra 11 chất khác nhau trong lá cây cỏ ngọt như:

Steviozit (C38H60O18), Steviol biozit, Rebaudiozit (A, B, C, D ) Steviozit có cấutạo tinh thể hình kim, điểm nóng chảy 202 – 2040C, 1g tan trong 800ml nước,chứa trong cây với tỷ lệ cao từ 6 – 7% khối lượng chất khô Các chất khác trongcây biến động 0,03 - 0,2% Các chất trong cỏ ngọt không gây hại trên gan, thậncủa người nên chúng được sử dụng trong công nghệ thực phẩm, trong y học.Nhật Bản đã sử dụng 45 - 55 tấn/năm steviozit trong y học, công nghiệp bánh,kẹo và trong các món ăn đông lạnh Đặc tính quan trọng của các glucozit này là

có thể làm ngọt các thức ăn và đồ uống mà không gây độc hại cho người, giasúc, không đòi hỏi kỹ thuật sản xuất phức tạp, năng suất cao, công nghệ thu hái,chế biến đơn giản Từ những năm đầu của thế kỷ thứ 20, người dân Paraguay đãbiết sử dụng lá cỏ ngọt như một loại nước giải khát [5]

2.5 Tình hình sản xuất cây cỏ ngọt trên thế giới và ở Việt Nam

2.5.1 Trên thế giới

Trên thế giới có rất nhiều nước đã và đang phát triển và sử dụng cây cỏngọt bắt đầu được sử dụng rộng rãi ở Nhật Bản Hàng năm ở Nhật Bản sử dụng từ45-50 tấn steviozit (tương đương 450 - 500 tấn lá khô) Ở Hàn Quốc dùng 6 - 8tấn Steviozit/tháng (tương đương 60 - 80 tấn là cỏ ngọt khô) Sản phẩm đường cỏngọt ngày càng có uy tín trên thị trường thế giới đặc biệt là Nhật Bản và các nướcĐông Nam Á Các chất cỏ ngọt (glucozit) chiết suất từ lá cỏ ngọt khô được công

ty RSIT ở Canađa gọi là “chất ngọt Hoàng gia” bởi tuyệt vời của nó như mô tảcủa các nhà nghiên cứu, các nhà sản xuất và kinh doanh Nhật Bản, Brazil, Pháp,

Mỹ, Inđonêxia và Trung Quốc… Một số nghiên cứu gần đây, từ cơ sở dữ liệuMedicina đã nêu lên tác dụng của cỏ ngọt trong việc duy trì hàm lượng đườngtrong máu, cỏ ngọt còn tỏ ra có hiệu quả đối với việc cải thiện chế độ tiêu hoá,điều hoà hoạt động của hệ động mạch và sự chuyển hoá nói chung, tạo ra một sựminh mẫn về trí óc, làm cho giấc ngủ sâu hơn, êm đềm hơn Hiện nay trên thếgiới, trong kết quả nghiên cứu về tính an toàn của các chất phụ gia thực phẩm,người ta đã kiến nghị cấm dùng một số chất ngọt có hại cho người đang có lẫntrong các loại rượu và nước ngọt [8]

Bảng 2.1 Tình hình sản xuất và sử dụng cỏ ngọt ở một số nước trên thế giới.

Năm Sản lượng

(tấn)

Nguồn lá cỏ ngọt (tấn) Nhật

Bản

Hàn Quốc

Đài Loan

Trung Quốc

Các nước khác

Các nước khác gồm: Paraguay, Brazil, Thái Lan, Malaixia

Một số nghiên cứu gần đây, từ cơ sở dữ liệu Medicina đã nêu lên tác dụngcủa cỏ ngọt trong việc duy trì hàm lượng đường trong máu, cỏ ngọt còn tỏ ra cóhiệu quả đối với việc cải thiện chế độ tiêu hoá, điều hoà hoạt động của hệ độngmạch và sự chuyển hoá nói chung, tạo ra một sự minh mẫn về trí óc, làm cho giấcngủ sâu hơn, êm đềm hơn Hiện nay trên thế giới, trong kết quả nghiên cứu vềtính an toàn của các chất phụ gia thực phẩm, người ta đã kiến nghị cấm dùng một

số chất ngọt có hại cho người đang có lẫn trong các loại rượu và nước ngọt [5]

2.5.2 Ở Việt Nam

Ở Việt Nam cỏ ngọt được trồng đầu tiên ở trung tâm quỹ gen cây trồngViệt Nam (Văn Điển – Hà Nội) Sau đó được trồng ở viện nghiên cứu cây dượcliệu Trung ương, Viện dinh dưỡng quốc gia, Trung tâm giống cây trồng Đà Lạt,Trường đại học nông nghiệp Hà Nội Sau nhiều năm khảo nghiệm đã xác định

cỏ phù hợp với nhiều vùng sinh thái của nước ta Đến năm 1988 đã được phổbiến trồng tại các tỉnh Hà Nội, Hà Tây, Vĩnh Phú, Thái Bình, Yên Bái, Đắc Lắc,Lâm Đồng, Sông Bé Năng suất lá khô từ 2 – 2,5 tấn/ha/năm, đạt giá trị 35 – 40triệu đồng [2]

Hiện nay, cỏ ngọt được trồng rất nhiều và diện tích ngày càng được ngườidân mở rộng ở huyện Khoái Châu của tỉnh Hưng yên Điển hình là ở xã An Vĩthuộc hiện này, là địa phương trồng nhiều cỏ ngọt nhất ở huyện này, diện tíchtrồng cỏ ngọt đã lên đến gần 25 ha Gần đây trên địa bàn tỉnh Bắc Giang Công

ty Cổ phần Stevia Ventures và Trung tâm Nghiên cứu Giống và Phát triển cây

trồng Hà Nội (Viện Dược liệu) phối hợp với Sở Khoa học và Công nghệ BắcGiang, UBND xã Nội Hoàng (huyện Yên Dũng) đã tổ chức hội nghị triển khai

dự án cây cỏ ngọt với kế hoạch là mở rộng diện tích vùng nguyên liệu cỏ ngọt

để đáp ứng thị trường xuất khẩu[8]

Ở Nghệ An, Cây cỏ ngọt mới phát triển khoảng 2 năm, được trồng đầutiên ở xã Nghi Đồng (huyện Nghi Lộc) Nhận thấy đây là loại cây có thể pháttriển được ở địa phương, huyện Hưng Nguyên đã chủ động liên hệ với Công ty

Á Châu để trồng thí điểm ở xã Hưng Yên Bắc, hiệu quả của cây cỏ ngọt đã đượckhẳng định, từ chỗ chỉ có vài hộ tham gia trồng sau đã được nhân rộng 25 hộ vớikhoảng gần 3 ha Dù trồng trong điều kiện thời tiết không thuận lợi nhưng bìnhquân mỗi lần thu hoạch khoảng 6 tạ/sào, thậm chí có hộ đạt 9 – 10 tạ/sào, giá trịthu nhập đạt khoảng 3,5 - 4,7 triệu đồng/sào/lứa Nếu chăm sóc tốt, áp dụngđúng kỹ thuật trồng một lần cỏ ngọt có thể cho thu hoạch 2 năm Mỗi năm thuhoạch 5 - 6 lứa Năng suất bình quân từ 10 - 12 tấn lá tươi/ha/năm, lợi nhuận óthể đạt từ 70 - 90 triệu đồng/ha/năm[9]

2.5 Cơ sở khoa học của đề tài

2.5.1 Tính toàn năng của tế bào

Haberlandt (1902) lần đầu tiên đã quan niệm rằng mỗi tế bà bất kỳ củamột cơ thể sinh vật đa bào đều có khả năng tiềm tàng để phát triển thành một cởthể hoàn chỉnh Theo quan niệm của sinh học hiện đại thì mỗi tế bào riêng rẽ đãphân hóa đều mang toàn bộ lượng thông tin di truyền (bộ AND) tương đươngvới lượng thông tin di truyền của một cơ thể trưởng thành Vì vậy, trong điềukiện nhất định mỗi tế bào bất kỳ đều có thể phát triển thành một cá thể hoànchỉnh Đặc tính đó của tế bào gọi là tính toàn năng của tế bào

Bất kỳ một tế bào nào cũng có thể hình thành một cây hoàn chỉnh Đócũng là cơ sở khoa học của kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào nói chung và kỹ thuậtnhân giống vô tính nói riêng Cho đến nay con người đã hoàn toàn chứng minhđược khả năng tái sinh một cơ thể thực vật hoàn chỉnh từ một tế bào riêng rẽ

Tính phân hóa của tế bào là sự biến đổi của các tế bào phôi sinh thành các

tế bào của các mô chuyên hóa đảm nhiệm các chức năng khác nhau Tính phản

phân hóa của tế bào là các tế bào khi đã được phân hóa thành các mô riêng biệtvới các chức năng khác nhau nhưng trong điều kiện nhất định chúng vẫn có thểquay trở về trạng thái phôi sinh để phân chia tế bào Trong kỹ thuật nuôi cấy các

cơ quan dinh dưỡng của cây như lá, thân…, thì giai đoạn tạo mô sẹo chính lànhững tế bào đã quay trở về trạng thái phôi sinh có khả năng phân chia liên tục

mà mất hẳn chức năng của các cơ quan dinh dưỡng như lá, thân… trước đó[6]

2.5.2 Sự cân bằng hoocmon trong cây

- Cân bằng hoocmon chung: là sự cân bằng của hai tác nhân đối kháng

nhau đó là chất kích thích sinh trưởng và chất ức chế sinh trưởng

Ý nghĩa của cân bằng hoocmon chung:

+ Sự cân bằng chung sẽ điều chỉnh toàn bộ quá trình phát triển cá thể củacây từ giai đoạn nảy mầm cho tới khi kết thúc chu kỳ sống của mình Tại bất cứthời điểm nào trong đời sống của cây, ta cũng có thể chỉ ra một tỷ lệ nhất địnhgiữa ảnh hưởng kích thích và ảnh hưởng ức chế

+ Việc điều khiển thời gian ra hoa của cây cũng có ý nghĩa là điều khiểncân bằng hoocmon chung trong cây Người ta có thể cho cây trồng ra hoa sớmhơn (sớm đạt cân bằng giữa các tác nhân kích thích và ức chế) hoặc ngược lại,làm cho cây đạt cân bằng hoocmon này muộn hơn để cây ra hoa quả muộn Cóthể sử dụng các điều kiện ngoại cảnh hoặc các biện pháp kỹ thuật để điều khiểncân bằng hoocmon chung đó của cây theo hướng có lợi cho con người

- Cân bằng hoocmon riêng: là sự cân bằng của hai hay vài hoocmon quyết

định đến một biểu hiện sinh trưởng nào đó của cây Sự cân bằng hoocmon riêng

có thể được thiết lập giữa các chất kích thích sinh trưởng như sự hình thành rễhoặc chồi, hiện tượng ưu thế ngọn, sự ngủ nghỉ và nảy mầm, sự chín, sự rụng, sựhình thành củ

Sự hình thành rễ hoặc chồi là do tỷ lệ cân bằng auxin/xytokinin quyếtđịnh Auxin là hoocmon ra rễ, còn xytokinin là hoocmon hình thành chồi Tỷ lệcân bằng này sẽ quy định mức độ hình thành rễ và chồi khác nhau trong cây

Hiện tượng ưu thế ngọn được điều chỉnh bởi cân bằng auxin/xytokinin.Auxin được tổng hợp trong đỉnh sinh trưởng và lằm tăng ưu thế ngọn; còn

xytokinin thì được tổng hợp trong rễ và làm yếu ưu thế ngọn Đi từ ngọn xuống

rễ, tỷ lệ cân bằng này giảm dần và hiện tượng ưu thế ngọn cũng giảm dần

Sự rụng của cơ quan được điểu chỉnh bởi cân bằng của auxin/ABA +etylen tức do ba hoocmon quyết định Trong cơ quan sắp rụng thì hàm lượngauxin rất thấp còn hàm lượng ABA và cả etylen rất cao, nên sự hình thành tầngrời được hoạt hóa Người ta xử lý auxin đề kìm hẵm sự rụng, xử lý ethrel (chấtsản sinh etylen) kích thích sự rụng

Ý nghĩa của cân bằng hoocmon riêng: tất cả quá trình sinh trưởng và pháttriển của cây được biểu hiện bằng các quá trình phát sinh hình thái riêng biệttrong cây đều được điều chỉnh bằng các cân bằng hoocmon nhất định Hiểu biếtquy luật điều chỉnh hoocmon của các cân bằng riêng này rất có ý nghĩa trongviệc điều chỉnh cây trồng theo hướng có lợi cho con người Hầu hết các ứngdụng của chất điều hòa sinh trưởng đối với cây trồng đều dựa trên các cân bằnghoocmon này[6]

2.5.3 Cơ sở của việc giâm cành

Khi có tác động cắt cành thì auxin sẽ được hình thành một cách nhanhchóng tại đỉnh sinh trưởng và các cơ quan non, sau đó qua hệ thống mạch libeauxin được vận chuyển về phần vết cắt cành chiết, cành giâm để kích thích tạo

rễ bất định Người ta chia sự hình thành rễ bất định làm ba giai đoạn :

- Giai đoạn phản phân hoá của tế bào tượng tầng trở lại chức năng phânchia của mô phân sinh tạo khối tế bào bất định (callus) Lượng auxin lớn phảnphân hoá tế bào (10-4 - 10-5g/cm3)

- Giai đoạn tái phân hoá : các tế bào bất định tái phân hoá hình thành mầm

rễ bất định cần lượng auxin thấp hơn (10-7 g/cm3)

- Giai đoạn sinh trưởng của mầm rễ để hình thành rễ bất định Lượngauxin cần rất thấp (10-11 - 10-12 g/cm3) hoặc không cần auxin trong giai đoạn này

Thường sử dụng các chất thuộc nhóm auxin ngoại sinh để kích thích tạo

rễ bất định nhanh và hiệu quả trong kỹ thuật giâm chiết cành: IBA, NAA,2,4D Tùy theo chất sử dụng và loại cây trồng, cũng như tùy vào phương pháp

xử lý mà nồng độ sử dụng là khác nhau [6]

2.6 Một số nghiên cứu về nhân giống bằng phương pháp giâm cành

Cây Pơ mu được giâm hom thành công ở những cá thể từ 2 - 8 tuổi, bằngcành của cây trưởng thành hoặc đã qua tạo chồi Hom ra rễ đạt 80 - 90% khi xử

lý bằng NAA 1,5%, với giá thể bằng cát hay trực liếp trong túi bầu Cây Pơmutrồng bằng hom có tiềm năng sinh trưởng tốt và có thể mở ra triển vọng trồngphục hồi rừng

Cây Bách xanh giâm hom thành công ở những cá thể từ 2 - 10 tuổi, bằngcành của cây trưởng thành hoặc đã qua tạo chồi Hom ra rễ đạt 85 - 95% khi xử

lý bằng IBA 1% trên cát hay trực tiếp trong túi bầu Cây Bách xanh trồng bằnghom tuy sinh trưởng chậm hơn cây Pơ mu nhưng có khả năng phát triển tốt ởnhững nơi khô hạn Đặc biệt với tán lá đẹp và thường xanh nên có khả năngtrồng làm cây xanh đường phố

Kết quả của giâm hom Thông Ba lá có thể đưa vào sản xuất đại trà vớimột số lượng lớn để phục vụ trồng rừng Hom giâm Thông ba lá tốt nhất ở giaiđoạn 2 - 7 tuổi, bằng chồi đã qua giai đoạn tạo chồi Tỷ lệ ra rễ từ 80 - 90% khi

xử lý bằng IBA 0,5 - 1% (hoặc không xử lý khi chọn hom tốt) trên giá thể bằngcát hay lúi bầu [4]

Họ cam quýt để giâm cành, dùng α-NAA ở nồng độ 4000 – 6000 ppm xử

lý nhanh trong 3 – 5 giây Để giâm cành hoa hồng, người ta sử dụng α-NAA ởnồng độ từ 2000 – 4000 ppm tùy theo giống[6]

Nhân giống cây Lô hội bằng việc tách chồi nách khi áp dụng phun chếphẩm dinh dưỡng bao gồm 10%MS + 5 ppm cho tỷ lệ nảy chồi và hệ số nhânchồi lớn đây là biện pháp khoa học và có hiệu quả Nhân giống vô tính cây Lôhội bằng phương pháp giâm hom thân cho hiệu quả thấp, tỷ lệ sống dao động từ22,2% đến 35,5% ở các nồng độ 10 ppm IBA, 50 ppm IBA, 100 ppm IBA, IBAdạng bột [1]

Bốn thí nghiệm được tiến hành trong điều kiện nhà ươm có mái che nhằmnghiên cứu ảnh hưởng của giá thể, chiều dài cành, vị trí cành giâm và nồng độ

chất điều tiết sinh truởng α -NAA đến khả năng ra rễ, bật mầm và sinh truởng của cành giâm cây đinh lăng lá nhỏ (Polyscias fruticosa L Harms) Kết quả chỉ

ra: sử dụng giá thể là 50% đất + 50% trấu hun giúp cây sinh truởng phát triểncao nhất về chiều cao chồi (14,2 cm), đường kính thân (0,51 cm), số lá/cây caonhất (3 lá/cây) và số rễ (4,2 rễ/cây) Sử dụng cành thân có chiều dài cành giâm

từ 15 – 20 cm, xử lý nồng độ α -NAA 2000 – 3000 ppm trong thời gian từ 3 - 5

giây giúp cành giâm ra rễ nhiều, khả năng sinh truởng của cành giâm cao hơnhẳn công thức đối chứng [3]

Khảo sát sự bén rễ của việc giâm hom cây cỏ ngọt bằng cách sử dụng chấtđiều hòa sinh trưởng khác nhau được thực hiện trong điều kiện nhà ươm có máiche và những điều kiện ngoại cảnh khác tại Medicinal and Aromatic Plant Unit,

bộ môn Nghề làm vườn, Trường Đại học Khoa học Nông nghiệp, Dharwadtrong tháng 8 năm 2007

Như một phần của thí nghiệm đầu tiên, IBA và NAA đã được thử nghiệmdưới mái che Nghiên cứu cho thấy: IBA 500 ppm có hiệu quả trong việc hútvào của rễ (92,00%) tốt hơn so với 78% trong sự kiểm soát Tiếp theo phươngpháp thực hiện tốt nhất được tìm thấy là IBA 400 và 300 ppm

Ba phương pháp thực hiện tốt nhất được lựa chọn từ thí nghiệm đầu tiên

và thử nghiệm dưới các môi trường khác nhau Trong các điều kiện môi trườngkhác nhau, bén rễ của hom giâm được tìm thấy tốt nhất trong môi trường có máiche (90,00%) Tiếp theo là điều kiện che polytunnel (88,78%), điều kiện bóngrâm (81,11%) và điều kiện mở (72,56%) Sự tương tác ảnh hưởng của điều hòasinh trưởng và điều kiện phát triển đã được tìm thấy trở nên có ý nghĩa Các hiệuứng tương tác của hom được xử lý với IBA 500 ppm và trong môi trường máiche tìm thấy có ý nghĩa như một minh chứng tỷ lệ tối đa của rễ (94,67%)

Các nghiên cứu cho thấy hom cây cỏ ngọt có thể được nhân giống thànhcông cao với nồng độ IBA 500 ppm Trong số các điều kiện môi trường khácnhau, rễ của cành giâm cỏ ngọt thực hiện bằng IBA 500 ppm dưới mái che đãcho kết quả tốt [7]

Chương 2 ĐỐI TƯỢNG, PHẠM VI, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Đối tượng nghiên cứu

Đối tượng nghiên cứu là cây cỏ ngọt (Stevia rebaudiana Bertoni).

3.2 Phạm vi nghiên cứu

3.2.1 Địa điểm nghiên cứu

Tại Trung tâm thực nghiệm khoa Nông - Lâm – Ngư - Trường Đại họcHùng Vương – Việt Trì – Phú Thọ

Thời gian thực hiện: từ tháng 1/2013 đến tháng 13/2013

3.2.2 Vật liệu nghiên cứu

- Chất kích thích sinh trưởng: NAA, các chế phẩm phân hữu cơ và phânhóa học

3.3 Nội dung nghiên cứu

- Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ chất kích thích sinh trưởng (NAA) đến khả năng ra rễ của cây cỏ ngọt

- Nghiên cứu ảnh hưởng của một số chế phẩm phân hữu cơ vi sinh đến sựsinh trưởng của hom cỏ ngọt

- Áp dụng quy trình trồng cây cỏ ngọt và nghiên cứu ảnh hưởng của một

số công thức bón phân tới các chỉ tiêu sinh trưởng của cây cỏ ngọt trồng tại ViệtTrì – Phú Thọ

3.4 Phương pháp nghiên cứu

3.4.1.Phương pháp bố trí thí nghiệm

Trong nghiên cứu chúng tôi thực hiện trên 4 thí nghiệm về các biện pháp

kỹ thuật tác động đến nhân giống cây cỏ ngọt bằng phương pháp giâm cành Cácthí nghiệm được bố trí độc lập Hom cỏ ngọt có chiều dài 6cm giâm trên tầngđất B vớii chế độ tưới nước 2 lần/ngày và che sáng bằng lưới đen

Thí nghiệm 1: Nghiên cứu ảnh hưởng của hàm lượng chất kích thích sinh

trưởng (NAA) tới nhân giống vô tính cây cỏ ngọt tại Việt Trì – Phú Thọ

Thí nghiệm được bố trí một khối gồm bốn công thức và ba lần nhắc lại:

- Công thức 1 (ĐC): Nhúng hom cỏ ngọt trong nước lã

- Công thức 2: Nhúng hom cỏ ngọt trong thuốc kích thích NAA với liềulượng 5mg/l

- Công thức 3: Nhúng hom cỏ ngọt trong thuốc kích thích NAA với liềulượng 10mg/

- Công thức 4: Nhúng hom cỏ ngọt trong thuốc kích thích NAA với liềulượng 15mg/l

- Phương pháp xử lý: Nhúng hom cỏ ngọt trong vòng 3 - 5 giây

* Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng của một số loại phân HCVS đến các chỉ tiêu sinh

trưởng của hom cỏ ngọt gồm 4 công thức:

CT5: 180 kg N + 100 kg P2O5 + 60 kg K2O (đối chứng)

CT6: 120 kg N +100 kg P2O5 + 60 kg K2O + 800 kg Phức hợp hữu cơCT7: 120 kg N +100 kg P2O5 + 60 kg K2O + 800 kg HCVS Sông Gianh

*Thí nghiệm 3: Nghiên cứu ảnh hưởng của một số công thức bón phân đến khả năng sinh trưởng của cây cỏ ngọt

Tỷ lệ cây ra mô sẹo (%) =

Số cây ra mô sẹo

x 100Tổng số cây điều tra

- Tỷ lệ cây sống sau khi giâm:

Tỷ lệ cây sống (%) =

Số cây sống

x 100Tổng số cây điều tra

- Chiều cao cây (cm): được đo từ sát mặt đất (từ gốc) đến đỉnh sinhtrưởng, đo 5 ngày/ lần

- Số lá/ cây: đếm số lá trên cây, 5 ngày/ lần

- Chiều dài rễ (cm): được đo khi xuất vườn

- Chất lượng xuất vườn: cây có từ 7 – 8 lá, chiều cao cây từ 12 – 15cm

- Tỷ lệ cây xuất vườn (%):

Tỷ lệ cây xuất vườn (%) = Số cây đạt chất lượng xuất vườn x 100

Tổng số cành đem giâm

3.4.3 Phương pháp điều tra thu thập số liệu

Ở các thí nghiệm, mỗi công thức điều tra 10 cây theo đường chéo 5 điểm,mỗi điểm 2 cây với 3 lần nhắc lại

Tiến hành theo dõi, thu thập số liệu sau khi giâm cành 5 ngày

3.4.4 Phương pháp phân tích và xử lý số liệu

Số liệu được xử lý bằng chương trình Excel và phần mềm IRRI STAT 5

Chương 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 4.1 Nghiên cứu ảnh hưởng của chất kích thích sinh trưởng (NAA) tới giâm hom cây cỏ ngọt.

4.1.1 Ảnh hưởng của nồng độ chất kích sinh trưởng (NAA) đến tỷ lệ ra mô sẹo của cành giâm cây cỏ ngọt

Chất kích thích sinh trưởng NAA có vai trò quan trọng trong quá trìnhhình thành rễ, nếu sử dụng NAA đúng liều lượng sẽ quyết định đến sự phát triểncủa bộ rễ Ở thực vật nói chung và cỏ ngọt nói riêng bộ rễ là cơ quan hút nước

và muối khoáng dưới dạng hòa tan chính vì vậy bộ rễ không chỉ quyết định đếncác chỉ tiêu dưới mặt đất như chiều dài rễ, số lượng rễ mà còn quyết định đếncác chỉ tiêu sinh trưởng trên mặt đất của cây như: Số lượng lá, số chồi, chiều caocây…

Trong thí nghiệm này chúng tôi sử dụng hom cỏ ngọt ngâm trong dụngdịch NAA với các nồng độ 5mg/l, 10mg/l, 15mg/l và so sánh với đối chứng lànhúng trong nước lã để đánh giá ảnh hưởng của nồng độ NAA đến tỷ lệ ra môsẹo của cây cỏ ngọt Kết quả nghiên cứu được trình bày ở bảng 4.1

Bảng 4.1 Ảnh hưởng của nồng độ chất kích sinh trưởng (NAA) đến tỷ lệ hom

ra mô sẹo của cành giâm cây cỏ ngọt Chỉ tiêu

CTTN

Tỷ lệ hom ra mô sẹo (%) Màu sắc mô sẹo

Sau 5 ngày Sau 10 ngày Sau 5 ngày Sau 10 ngày

độ NAA tăng lên thì tỉ lệ ra mô sẹo có xu hướng giảm xuống do khi sử dụng với