định lượng vitamin a

Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh Môn: Phương pháp phân tích thành phần hóa-lý thực phẩm oOo Đề tài: Định lượng vitamin A Nhóm thực hiện: Nguyễn Thị Diễm My Nguyễn Thị Kim Oanh Phạm Thị Kim Chi Nguyễn Mỹ Xuân Nguyễn Thị Thanh Thủy Võ Thị Trâm GVGD: TRẦN VŨ HUY Mục lục I. Giới thiệu 1. Cấu tạo, tính chất và chức năng của vitamin A 2. Một số phương pháp phân tích Vitamin A trong thực phẩm II. Tìm hiểu một số phương pháp phân tích vitamin A 1.Phương pháp so màu 2.Phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao 3.Phương pháp quang phổ 4.So sánh các phương pháp III. Các hãng sản xuất máy phân tích [...]... Kalihydroxyde (KOH) 2% trong nước : H a tan 2g KOH trong 100ml nước cất - Acetonnitrile, HPLC - Na2SO4 khan c.Cách tiến hành - Xây dựng đường chuẩn (dùng Vitamin A palmitat ): • Nếu dùng chuẩn vitamin A thì phân tích ngay trên thiết bị HPLC • Nếu dùng vitamin A dưới dạng este, thí dụ như vitamin A acetat, vitamin A palmitat, thì phải tiến hành xà phòng h a để giải phóng vitamin A ra thể tự do rồi mới tiến hành... •Gồm các loại thuốc thử sau: •Etanol (CH3CH2OH) 95% (tính theo thể tích) không ch a aldehyt •Dung dịch Natri ascocbat 200 g/l •Dung dịch Kali hydroxit (KOH) 50% •Dung dịch nước cồn Kali hydroxit 30 g/l •Dầu nhẹ •Clorofom ( CHCl3) •Axit trifluoroaxetic (CF3COOH) •Thuốc thử màu •Dung dịch Vitamin A: sử dụng vitamin A theo tiêu chuẩn US Pharmacopeia •Hydroxytoluen đã butylat h a c Thiết bị dụng cụ Sử dụng... theo mg/Kg - Co là hàm lượng Vatamin A trong dịch chiết (Co) thông qua đường chuẩn, mg/L - m : Khối lượng (g) 3 Phân tích xác định hàm lượng vitamin A trong nguyên liệu để sản xuất thuốc thú y bằng phương pháp đo quang phổ c a dung dịch  -Lượng mẫu: 0.1g nguyên liệu đã được nghiền mịn -H a chất: ethanol KOH khan dietyl ether Na2SO4 iso-propanol Nước cất - Mẫu trắng: iso-propanol Dụng cụ Quy trình:... kiểm soát tính hàm lượng các vitamin A trong dịch chiết và trong mẫu thông qua đường chuẩn xây dựng ở bước trên Tính độ thu hồi mẫu kiểm soát (R) + Các dung dịch mẫu thử nghiệm tính hàm lượng vitamin A trong dịch chiết thông qua đường chuẩn xây dựng ở bước trên Tính kết quả Hàm lượng vitamin A có trong mẫu được tính theo công thức sau: C = Co/m Trong đó: - C là hàm lượng Vitamin A có trong mẫu Tính... tích Vitamin A trong thực phẩm  Phương pháp sắc kí lỏng hiệu cao năng  Phương pháp sắc kí khí  Phương pháp định tính  Phương pháp chuẩn độ Iod  Phương pháp đo quang trực tiếp và sau triết tách vitamin A  Phương pháp sắc kí lỏng  Phương pháp so màu II Tìm hiểu một số phương pháp phân tích vitamin A 1 Phương pháp so màu Tiêu chuẩn này qui định phương pháp so màu để xác định vitamin A trong s a bột... • Gộp tất cả lốp ete vào bình quả lê.Cô quay đến cạn Cặn còn lại h a tan trong acetonitrile, chuyển sang bình định mức 10ml Định mức đến vạch bằng acetonitrile Dung dịch này dùng để làm dung dịch vitamin A chuẩn gốc (1000mg/l) • Dung dịch chuẩn 100ug/ml: hút chính xác 1ml dung dịch vitamin A chuẩn gốc 1000ug/ml vào bình định mức 10ml Định mức tới vạch bằng ACN d.Chuẩn bị mẫu thử - Cân khoảng 10g mẫu... ở bước sóng 326 nm V: là tổng thể tích Vitamin A dạng este đã pha loãng có nồng độ từ 10 IU/ml đến 15 IU/ml d: là hệ số chuyển đổi từ độ hấp thụ cụ thể c a Vitamin A dạng este thành đơn vị quốc tế trên gam (d=1900) 2 Xác định Vitamin A trong thực phẩm bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao a. Chuẩn bị dụng cụ - Hệ thống máy HPLC, Shimadzu - Cột Purospher Star RP-18e( 150x4.6mm,5um) - Cân phân tích... xà phòng h a • Cân 18.32 mg vitamin A palmitat tương ứng với 10mg vitamin A cho vào bình cầu có cổ nhám, thêm 20-40ml dung dịch KOH 2M trong etanol và 0.5natri ascorbat • Lắp ống sinh hàn hồi lưu • Đặt trên nồi cách thủy, xà phòng h a ở nhiệt độ 700C trong 30 phút • Chuyển dung dịch còn nóng vào một bình lóng, r a bình cầu nhiều lần bằng H2O cất và tập trung nước r a vào bình lóng Chú ý: Lượng nước... nước không được quá 3 lần lượng KOH 2M Vitamin A từ dung dịch đã xà phòng h a được chiết 3 lần bằng dietyl ete không có peroxit 3 lần, mỗi lần 40ml Tập trung lớp ete chiết được vào một bình lóng R a lớp ete nhiều lần với nước cất (mỗi lần 50ml) cho đến khi không còn vết kiềm (thử với phenolphtalein).Loại nước trong dịch chiết etebằng cách lọc qua lớp Na2SO4 khan, r a lớp Na2SO4 ba lần, mỗi lần với 10ml... 3 phút) Lọc dịch đục qua màng lọc 13mm, 0.45um và thu dịch lọc và tiến hành phân tích trên HPLC e.Tiến hành phân tích trên HPLC Điều kiện phân tích - Pha động - Tốc độ dòng - Detector UV, λ= 325nm tiêm các dung dịch mẫu thử nghiệm theo thứ tự sau: + Các dịch chuẩn Dựng đừơng chuẩn gi a nồng độ các chuẩn vitamin A và diện tích c a các chuẩn Vitamin A Tính toán hệ số tương quan hồi quy tuyến tính + . hoạt động c a vitamin A, nó đồng h a trực tiếp bởi cơ thể.  Tiền vitamin A: là một tiền chất c a vitamin A được biết nhiều dưới dạng beta-carotene được chuyển h a thành vitamin A mà cơ thể. ra còn có anpha, gama caroten I. Giới Thiệu 1. Cấu tạo, tính chất và chức năng c a vitamin A a. Cấu tạo  Vitamin A dễ bị oxi h a.  Trong cơ thể dưới tác dụng enzyme, retanol chuyển thành anđehyt. tích Vitamin A trong thực phẩm 1. Phương pháp so màu Tiêu chuẩn này qui định phương pháp so màu để xác định vitamin A trong s a bột giày ch a ít nhất 10 IU (đơn vị quốc tế) vitamin A trên gam. II.