Nghiên cứu ứng dụng kit chẩn đoán và thử nghiệm phác đồ điều trị hiệu quả bệnh tiên mao trùng (trypanosomiasis) ở trâu

DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT        ! "! #  "$%& ' # ( )*$+$ !# !$,#-.  /$0 ( )1 2  T. evansi 3 ( )1 4 ( 5 DANH MỤC CÁC BẢNG 6.725289$:)1;<+/#=2222222222222222222222222222222222222222222222>? $$9@)ABC$)D222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222>? 6.72E289$:)1;<$0F2222222222222222222222222222222222222222222222>G 6.72>89$:)1;<$H$9222222222222222222222222222222222222222222222>I 6.727289$:)1;<$J$JK222222222222222222222222227L 6.72M$N+$23$$OP$/2222222222222222222222222222222227Q R$22222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222227Q 6.72I$O$9$JSTS*U9$)122222222222222222222222222222222222222222227I $<)9$V2222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222227I 6.725L2$O$9$JSTS*U9$)1)922222222222222222QL 6.7255WJ$JXY.0P9$J$Z$/9$22222222222222222222222222222QE )1$<;$9@)AC$)D222222222222222222222222222222222222222QE E MỤC LỤC trang Phần 1 1 MỞ ĐẦU 1 5252W[3-S*222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222225 52E2(P)$)02222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222E 52>2\$]^S*,22222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222E 52>252\$]$&_3,$)0$$&22222222222222222222222222222222222222222222222222222222E 52>2E2\$]$:222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222E Phần 2 3 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 E25A;$$&^S*,222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222> E25252!$`$%X3*9$)1a$;<BZ2222222222222222222222222222222222222> E252E2 U$:$&9$)1222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222G E252>2W[S%9$a3,<,^9$222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222255 E25272!$`$bA$J$cSJ9$)1222222222222222222222222222222222222222222225Q E252Q2R$ZU9$)1$<BZ222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222E> E2E2d$$d$$)03*)12222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222E? E2E252d$$d$$)0)$Xe2222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222E? E2E2E2d$$d$$)0be222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222EG Phần 3 30 ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU, NỘI DUNG 30 VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 >252W/bf3,3_9$)0222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222>L >25252W/bf$)0222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222>L >252E2W3_$H$93,3_9$)02222222222222222222222222222222222222222222222222222222222>L >2E2WUS%3,$N$)022222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222>5 >2E252WUS%$)02222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222>5 >2E2E2$N$)02222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222>5 >2>2!$)02222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222>5 >2>252gP"#JSU$d$$d$$:9$)1;<+ /#=$$9@)AhC$)D2222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222>5 >2>2E2!$)0$JSTS*U9$23$<3,S*#-9$J$Z $/22222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222>E >272R$bA$J$)02222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222>E >27252R$bA$J$$_i2222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222>E >272E2R$bA$J$cSJ9$)1)JiJ<S=$$_2>> >272>2(/YSU$$)0S[S%U$:2222222222222222222222222222222222222222222222>7 >27272'<$JSTS*U9$)122222222222222222222222222222222222222222222222222222>7 >2Q2R$bA$J#Oa/922222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222>Q Số liệu thu được, được xử lý bằng phương pháp thống kê sinh học (Theo tài liệu của Nguyễn Văn Thiện, 2008), trên phần mềm Excel 2003 35 > Phần 4 36 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 36 7252gP"$cSJS%#JSU$d$$d$$:)1;<+ $9@)ABC$)D2222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222>? 72525289$:)1;/#=$$9@)ABC$)D 222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222>? 7252E289$:)1;<$0F22222222222222222222222222222222222222222222222222222>G 7252>289$:)1;<$H$92222222222222222222222222222222222222222222222222222>I 72527289$:)1;<$J$JK2222222222222222222222222222222227L 72E2!$)0$JSTS*U9$23$<3,S*#-9$J$Z $/2222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222275 72E252'JSU$H$i.^233e/$/U()$+$275 72E2E2$O$9$JSTS*U9$)1)9$V2222222222222222222222222227G 72E2>2$O$9$JSTS*U9$)1$<)9222222222222QL 72>272W*#-3,0P9$J$Z$/9$$9Y.222222222222222222222222222222222Q5 Phần 5 54 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 54 Q252"X_222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222Q7 Q2E2T+222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222QQ Q2>2W*$U2222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222QQ TÀI LIỆU THAM KHẢO 56 2,9Xj9222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222Q? 2,9Xbe,222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222QG 7 Phần 1 MỞ ĐẦU 1.1. Đặt vấn đề 69$)1,9$a$1SbNJ$FX;<B Z3,$*,S3_$J2<Zk9$-H$$bN/75 75BM L 3eJ9$0$l$$b=YmB)/BS3ZZn <BZ9$o$XM5Q,2p$%+H$J9$0<, $V$A3,9$q,5E$JB3_,,lB/JS+B $r/B$XJq,B3)J+B$1$s7$<nbN$f 9$[B3_S/BP$beTK$X2jd3_B lt$`$)0$cSJ9$)1)S,<BZ u$*$bA$JS%#JSU$$+$:9$Bv St$O $9J$JSTS*U$H$$f3,$9Y.2 )D,C$tSU$d$$J$0+B$*STw3,$ sB$H$_$9Set1B$NXtcb$*,S*9 $_f$T<3,Zx3_re*9$)1y $J%2$w$wJB*l9$)1v<BZ9$ <BZ$z,$9$)1<B<$9$+e$ bN$Kr2 je$J%^,$r$9$$&;be$9B$* $bA$J$9S+S=Sbf$)0B0P$$&$<O $cSJ9$;wBl2StBt$bA$J0P"$X +$)aS%$cSJ9$)1)w2 '-$Jv$`3-S*)B$wr$_$-l$X$. $)03*9$)1B3*9$J$cSJ$$3,0 P$JSTS*Ut$9Y.B$uwbN$Krt$`$% XA.3*J$$Z3,U9$B$beeP)/1,$+ $Xe0$-$-$`$_Y.,9$<$bN$Kr2v PSH$)B$wr$$9S*,“Nghiên cứu ứng dụng Kit chẩn đoán và thử nghiệm phác đồ điều trị hiệu quả bệnh tiên mao trùng (Trypanosomiasis) ở trâu tại huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang”. 5 1.2. Mục tiêu nghiên cứu gP"$cSJ9$)1;S,<+ $9@)AC$)D2 $&$JSTS*U9$)1t$9Y.B$1$f 3eS*9$Kr;)D2 '<Yd$$ZBU9$Bt$l$+$X$`$9$+ 9$)1$S,<;$9@)AC$)D2 1.3. Ý nghĩa của đề tài 1.3.1. Ý nghĩa trong học tập và nghiên cứu khoa học W*,0P"$cSJ$X+v$J)JF$fx. $c$$&r$9^S*,-$,bey,$be$)0eB 0Pr$93,$:.#-+j9!2 "XY.^S*,,$`$r$$&3*S$+BSS[$9 ^"$cSJ3,$JSTS*U9$(t$9Y.2 1.3.2. Ý nghĩa trong thực tiễn "XY.^S*,,A;$$&S%XP$)0.#- $J)JF$f$P3P$X+J"$cSJ9$(B ST$N$XJJ$w3,bN$KrOP"$cSJ $$9$)1$S,<S%t9$JS*UU$N2 "XY.^S*,,A;$$&S%$XJbN$KOP $JSTS*U9$($<BZt$9Y.2 E Phần 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Cơ sở khoa học của đề tài 2.1.1. Những hiểu biết về bệnh tiên mao trùng ký sinh ở trâu, bò 2.1.1.1. Phân loại tiên mao trùng ký sinh ở trâu, bò $3,x5IGLyxi$bAjK{-3,B5IIMy|Q}B3U H^)1$9$/$<+),xProtozoay$b !,$Sarcomastigophora R$<,$Mastigophora eZoomastigophorasida 6Kinetoplastorida R$<Trypanosomatorida {&Trypanosomatidae Donein, 1901 ~/Trypanosoma Gruby, 1843 ~/$PMegatrypanum Hoare, 1964 ,Trypanosoma (M) theileria ~/$PHerpetosoma Donein, 1901 ,Trypanosoma (H) leisi ~/$PSchizotrypanum Chagas, 1909 ,Trypanosoma (S) cruzi ~/$PDuttonella Chalmers, 1918 , Trypanosoma (D) vivax , Trvpanosoma (D) uniform ~/$P Nalmomonas Hoare, 1964 , Trypanosoma (N) congolense , Trypanosoma (N) siminae , Trypanosoma (N) vanhogi ~/$P Trypanozoon Liihe, 1906 , Irypanosoma (T) brucei ,Trypanosoma (T) gambience , Trypanosoma (T) rhodesiense > , Trypanosoma (T) equiperdum ~/$P Pycnomonas Hoare, 1964 , Trypanosoma (P) suis ~/$P Trypanosoma Gruby, 1843 ,Trypanosoma evansi (Steel, 1885) J,)1)BtM,SbfF$0U$:Y/ Xx•y$rJ,t$.K<9$$bN3,S3_t3wBSt, T. brucei, T. congolense, T. cruzi, T. evansi, T. gambiense, T. siminae, T. Vivax. 2.1.1.2. Đặc điểm hình thái, cấu tạo của tiên mao trùng R$+€K3,)jK+xELLEy|55}$X)1t H$$be$•5Gh>7#EBQ‚Bt$d$s$BSSbfJ $N#-$Jv$H$<B$+3ZY$$<+$,$ ,2"$S3$Hbe3,, $%Sw$)1$%-$$J^3_ $^2 )1T. evansiSbf#X3,+SA$d$$JBA$%$C, X,BtH$$be$•B$*,5G>7‚xd$,EQ‚yB $*5BQhE‚2A$%t$d$/$C.$$[$d$$B/$< $&2!$d$B-wA.^T. evansis/$b-w^ J,)1$J$$&Trypanosomatidae.-wv, 3,Sbf$$,$>$l$H$ j•,1,e3•,5L5QB3•Sbf$,>exe ,3,e1XJ3e)$$-l$Ae`y2e 3•,1Sbf-+vJ$<OrXSFxj ~ƒj~y2XJ3ee1,I[3/#X &$$*,$<)12$H$$Nk#X^ J[3/))1t+$d$/$C.$x{B5IME |>>}„R$+€KB5IGE|5L}„!:D/ $B5III|7}y2 !)$$-~Te3,e,2)$$- t$0JY…t,$i#o31$r,, JBx$%ASyB$Bxbe,y3, 7 +be2 !$<!$<)1t$0 !B$d$lP$[$d$ 02!$<$bNu;3UH<$[l3UH<A$%2 !,$<B3*$H/$<Zt$%$0! x" !y2v t$+3ZY$$<)Sl3,$H,A$% $,$2…^)1te3•,1/e3• ^$<2tI[3/;#Y$3,[;<B#X &$*,x{B5IME|>>}„!:D/ $B5III|7}y2 Hình 2.1: Cấu tạo của Trypanosoma be„6J$X,$0+*c„!$<„  $%„Jx$%y„†$%S[„~w„{R$l$< $H$„~„‡be$$-2"(,$-$r2_SH$ ˆ^3,,$-$r2($‰X#w3e$<x i$ !:$U"BEL55|M}y2 2.1.1.3. Cấu trúc kháng nguyên của tiên mao trùng Trypanosoma evansi "$J  ) ^ T. evansi T  E + $J )  F SU$ x$J)$rXSFy3,$J)XSF2 Q Š"$J)FSU$x$J)$rXSFy R$leJ$,$$l$J))1$rX SFYJd$/a$26u$bA$JS9:U$ $X$$$•/:U$3e T. evansi2!bNS=$J$9e> $,$$l$J)$rXSF;,)$$-X, x~3ƒ~y~?QB~MQ3,~5LL2 - w$r$*3,S[H$bbeBJ+,$rX$f 3e$J$%^3_$^2 Š"$J)XSF j*$J)XSFBlS*_SXXSFe3•*[ j~xjƒ~yB$`YS%e3*#-$9 $J)XSF^)13,A$X*^$J )XSF2 !$N$J$%S[$9SbfSJ$-,j3, x5I?IyS=$J$9XSF^e$J)*[2 x5IMQy  S=  r .  e  J  *  [  ^  )    1  t $,$  $l , $^,*[X,ue$<O/ $x‰)1t5LM$<Oy2eJ*[,H$$H$A $%3_$^+$J$%S[$93ev$J)XSF jxjy2$Ct$J)XSFet$. KH$$H$3_$^+*U$$^S2!bNbebfuB )1tH$-3,K$[3,$dj~B$],Q 5L‹/^)1-$$J)*[,2 !$*J.$)03*:U$$&$uB)1 XSF$J)*[S%qJ$:U$S[$9^3_$^2 !$`YS%,,$,,eS%a_3*#-$9$J )XSF^)12!$b3_BYS%3*XSF $J)e3•^)1$SX3i$b$/$-2 * Cơ chế di truyền của kháng nguyên biến đổi "$$J$%S[$9X$f3e$<O^$J)*[ xj~yB,))1$dSts,)$<$H$$wSc ? [...]... mao trùng - Thử nghiệm tính mẫn cảm của tiên mao trùng với một số thuốc trị TMT - Thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh tiên mao trùng trên diện hẹp - Thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh tiên mao trùng trên diện rộng - Ứng dụng phác đồ có hiệu quả cao trong điều trị bệnh tiên mao trùng trên đàn trâu ở huyện Yên Sơn - tỉnh Tuyên Quang 3.3.2.2 Đề xuất biện pháp phòng chống bệnh T evansi cho trâu ở huyện Yên... nhạy và độ đặc hiệu của Kit chẩn đoán với Kit nhập ngoại và phương pháp tiêm truyền chuột bạch - Tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng ở trâu theo lứa tuổi - Tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng ở trâu theo tính biệt - Tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng ở trâu theo các tháng trong năm 32 3.3.2 Nghiên cứu phác đồ điều trị bệnh T evansi cho trâu và đề xuất biện pháp phòng chống 3.3.2.1 Xây dựng phác đồ điều trị bệnh tiên mao trùng. .. Đặc điểm bệnh lý Khi ruồi trâu, mòng đốt, hút máu và truyền tiên mao trùng vào trâu, bò, ngựa, tiên mao trùng xâm nhập vào da, gây ra vết viêm trên mặt da Có thể quan sát được phản ứng viêm ở da của thỏ, cừu, dê và bò gây nhiễm thực nghiệm tiên mao trùng, kích thước chỗ viêm phụ thuộc vào số lượng tiên mao trùng được tiêm truyền (Ước chừng khoảng 10 8 tiên mao trùng có thể 12 gây viêm da - ở vị trí... [3] đã nghiên cứu về một số đặc điểm sinh học của T evansi, bệnh học do chúng gây ra và quy trình bảo quản và sử dụng giống T evansi để chẩn đoán bệnh tiên mao trùng Lê Đức Quyết (1995) [21] cho biết: trâu ở một số tỉnh miền Nam và Tây Nguyên nhiễm tiên mao trùng là 22,12%; bò là 6,6% - 10,3% 30 Phần 3 ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Đối tượng và vật liệu nghiên cứu 3.1.1... cứu 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu - Trâu của một số xã thuộc huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang - Kit chẩn đoán bệnh tiên mao trùng chế tạo theo nguyên lý CATT 3.1.2 Động vật thí nghiệm và vật liệu nghiên cứu * Động vật: - Trâu ở các địa phương của huyện Yên Sơn - Chuột bạch: 18 – 20 g/con, khỏe mạnh * Kit chế tạo theo nguyên lý CATT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng * Hoá chất nghiên cứu: - Thuốc nhuộm giemsa... lượng lớn tiên mao trùng phát triển ở tại chỗ viêm này Vào máu, tiên mao trùng nhân lên theo cấp số nhân ở trong máu, trong bạch huyết và ở trong các mô khác của cơ thể vật chủ theo cách phân chia theo chiều dọc Số lượng tiên mao trùng trong máu không phải lúc nào cũng như nhau Mật độ tiên mao trùng thay đổi theo ngày Biểu đồ sóng tiên mao trùng cho thấy, xen kẽ giữa những sóng tiên mao trùng mạnh... tích dịch màu vàng nhạt; có những đám keo nhầy vàng dưới vùng da thuỷ thũng 2.1.4 Những phương pháp chẩn đoán bệnh tiên mao trùng 2.1.4.1 Chẩn đoán lâm sàng Các biểu hiện lâm sàng đặc trưng của bệnh tiên mao trùng ở trâu, bò, ngựa không phải lúc nào cũng phát hiện được Rất nhiều gia súc mang bệnh nhưng khó phát hiện các triệu chứng đặc trưng, nhất là đối với những gia súc mắc bệnh tiên mao trùng mãn... dụng chế kháng nguyên chẩn đoán Từ đó, tác giả đã tinh chế kháng nguyên theo phương pháp tách tiên mao trùng để dùng trong phản ứng miễn dịch huỳnh quang gián tiếp, chẩn đoán bệnh tiên mao trùng cho độ nhạy và độ đặc hiệu cao + Phương pháp ELISA (Enzym Linked Immunosorbent Assay) Phương pháp ELISA là một trong những phương pháp hiện đại nhất được ứng dụng để chẩn đoán bệnh tiên mao trùng Nguyên lý: dùng... đánh giá ở thực địa + Phương pháp phát hiện ADN của tiên mao trùng bằng phản ứng PCR (Polymerase Chain Reaction): PCR là phương pháp hiện đại nhất, mới được đưa vào ứng dụng để chẩn đoán bệnh tiên mao trùng trong những năm gần đầy Nguyên lý: dựa vào phản ứng chuỗi Polymerase để xác định sự có mặt gen AND của tiên mao trùng trong máu động vật nhiễm bệnh Phương pháp PCR có độ nhậy và độ đặc hiệu rất... 44,1 – 95,6%) và độ đặc hiệu 99,5% (CI 90,7 – 100%); phương pháp CATT có độ nhạy 80,2% (Ci 44,5 – 95,2%) và độ đặc hiệu 98,5% (CI 79,5 – 99,9%) Tỷ lệ huyết thanh dương tính với T evansi ở ngựa là 16,4% 2.1.5 Phòng trị bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò 2.1.5.1 Phòng bệnh Để phòng ngừa bệnh tiên mao trùng có hiệu quả cao, các nhà khoa học đã đề nghị áp dụng 3 biện pháp sau: * Diệt tiên mao trùng trên cơ . St$O $9J$JSTS*U$H$$f3,$9Y.2 )D,C$tSU$d$$J$0+B$*STw3,$ sB$H$_$9Set1B$NXtcb$*,S*9 $_f$T<3,Zx3_re*9$)1y $J%2$w$wJB*l9$)1v<BZ9$ <BZ$z,$9$)1<B<$9$+e$ bN$Kr2 je$J%^,$r$9$$&;be$9B$* $bA$J$9S+S=Sbf$)0B0P$$&$<O $cSJ9$;wBl2StBt$bA$J0P"$X +$)aS%$cSJ9$)1)w2 '-$Jv$`3-S*)B$wr$_$-l$X$. $)03*9$)1B3*9$J$cSJ$$3,0 P$JSTS*Ut$9Y.B$uwbN$Krt$`$% XA.3*J$$Z3,U9$B$beeP)/1,$+ $Xe0$-$-$`$_Y.,9$<$bN$Kr2v PSH$)B$wr$$9S*, Nghiên cứu ứng dụng Kit chẩn đoán và thử nghiệm phác đồ điều trị hiệu quả bệnh tiên mao trùng (Trypanosomiasis) ở trâu tại huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang”. 5 1.2. Mục tiêu nghiên cứu gP"$cSJ9$)1;S,<+ $9@)AC$)D2 $&$JSTS*U9$)1t$9Y.B$1$f 3eS*9$Kr;)D2 '<Yd$$ZBU9$Bt$l$+$X$`$9$+ 9$)1$S,<;$9@)AC$)D2 1.3 tiễn "XY.^S*,,A;$$&S%XP$)0.#- $J)JF$f$P3P$X+J"$cSJ9$(B ST$N$XJJ$w3,bN$KrOP"$cSJ $$9$)1$S,<S%t9$JS*UU$N2 "XY.^S*,,A;$$&S%$XJbN$KOP $JSTS*U9$($<BZt$9Y.2 E Phần 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Cơ sở khoa học của đề tài 2.1.1. Những hiểu biết về bệnh tiên mao trùng ký sinh ở trâu, bò 2.1.1.1. Phân loại tiên mao trùng ký sinh ở trâu, bò $3,x5IGLyxi$bAjK{-3,B5IIMy|Q}B3U H^)1$9$/$<+),xProtozoay$b !,$Sarcomastigophora R$<,$Mastigophora eZoomastigophorasida 6Kinetoplastorida R$<Trypanosomatorida {&Trypanosomatidae. $y2$)$ljZ+oXSF 3,$<)+$,$$e,$J$%wbe$rZ$. K$_t2A$XSJ0:U$$b)+Sbf[+$ $Œ5L5E,,iSX$9bf/J$$_5L5E, ;wU9$2 2.1.2. Dịch tễ học bệnh tiên mao trùng 2.1.2.1. Phân bố của bệnh tiên mao trùng 69$)1$</-Bv$H<$HWr Jl2R$H<Jl$$<(€B$HWrJl.,v $<R$$SXR$2 $