nghiên cứu cải thiện khả năng tích lũy solasodine của tế bào cà gai leo

1 1    !"#$%&!"'( &()*+ !",-./!0#1 !"&2&!"&0  34$0'-50#!607 0&89$0' :01 !"&;'(3<=>1?-@?3 ==AB30"C3D@&!"B'?EFG( )HIJ#K50LMN39&)N0F 3;&0O30!&# #&'MP !" N&0 1- #0 !"QR0S * !6 B30&;-T$!"1  !"&3&'EC&UV& &F33 "#90&U4#334F3W3( *#(301X !" 9HYJ- 5('U$ZC S&1 FV':0*-&#( '!G&!"F"C60 [H<J-\]&B#!60X&2349X"C (';4'M'V393-T93Q OB084!6V"CM&'1# 49?10:0-5C('F N'V393M&!"!"1*0# [609/).B&2&!" F&?!"!BB#B #@(P H^_J#HYIJ#H=YJ-`393!6&!"a SC @b00@cd@efg#00 chfg# (@cijgP 2 2 `B0@cSolanum hainanense k0@gUB?QR#l:0 &!" N?$0#&0C/!G#$0[[#&0 !##3 \]&B#F S !"R:00@&2 &!"!?#?/0#'0#C(1/G 0#&6 S?m0n-50#F OC&2C0@% S?! 54IAAo#Kp!"&2'(?qk00q.0@&2 aB3(Q?)'B0n291 &UH^J- h0 @]030 :(0@H^J#&B 13'0Q0*  SC( V"0@1(1/GEU?VC3(-5 0#% S?/0#4.0/G0Ho^J#HorJ- `&(0#0@7&!"30:(.0 1#  9's#O3;&C]4 F !"&F-tF'U30*O0 !G)&; !"-u 0cIAoog&2C349X030 ]:0(' 0@('FN]030 :(0 @##!"9X30Hr^J-`&(0# FC393;4349X" C('FN- K)$R #(&Fv  !""#$1GE/ Q0 @'M!G('FN#M  !"CZ*- 3 3 %&'()*+,-.*/0102 1.1. 30%45*67/8*9:%;<* 5('';F4"  !"#0#!GU3; /.('8V"'M&!60*-T 4C S:0!G;EFO C)19Z ('-5$4]&B#;:0"CQ0* !G13(Q&!"&"ZC#&8 '34;0&V"1*.'M ('-w(F8R:0 ;S&;(Ux)!" !" .('H=yJ- 1.1.1. => 50z3?('3O 1&4 .!E3B0:07!6  !{[ N-d7!6GQ0aD87-`3?(' 3!GC)*&8!:0Bm-$ 0&!"a S B0VC:0('&] &!"ZC)V!G;:0QO 03DBm-#0&!60&!"C 'E&F%0!E!6  !{[H<J- 1.1.2. => !"?@A 5('FNC0('3?('!E B!6D-!63E&]'M&83?0 l {S!6D;&Uc[83gH<J-QO #('| ] ]03D7 $;&U/:0 4 4 !6-h0U60[# FN|(' &G#S(')39!)30#%.0!0 ;('(-#X$ FN#C0x 0('&GxDS('-dC&U6:0(' SU&89:03?('/?;&Fm'M 0&V]!6H^AJ- 5('FN9"G/3?(' )0O; O0!G) ?@O!6DH<J- 1.2. BCD4*9EF %94**9G %4F7H, F9IJ,F9KF30 %453;/*67/8*9:%;<* 1.2.1. B'&LM?L@>>@ " N !"-5$ &!"'(!"C#!6&!"O) U!"DC40&V!0&!"'(&]&:- ` !6!:0C0*:0) !68'0*?1&UHIJ- `"C3)"GE}mB'? )1()#mOU?8 Q00-3&#"G&!"O ](H^AJ- dU$B?Q0*!E&(/" C.('B0O-5F"C&!" /?QOB0('#O(&!"O 9B00!l#0-pB0O!E 3/('C3!)! 1('-#('3B0  FN!61U3?4('#( 'E$03?(/)!63)('E' 5 5 B0|/)UC&U&3?&;1 CH<J- k"C;/('09#&v030 # ]  @- ~%N 1;"C0@#;&!" ('M N  0 -f30 19R &U&!"a S !"-k*030 '0v @# @#0••@@@H<J- dU  ?        C0  F  030  !v  B  ?    c* €00@0@0@g•B0L3L0c*‚'0@0@g•B&U !"#?30 Bc*h00@0@g-5!60!68UB"030  0*]?0-t3BC0030 #&3m c?#ƒ#00g#Qc?g#Dc0L3L0g# lcBSa#B&U !"g-NUB;N@'U:0B 10$030 30c!6"030 :0*&DgH^AJ- `030 19*3'#U? S ]3c0••@#0# g#U? SG c@0# 0 g#U? S1c 0#@@  g#?3 S 'Uc g-f30 !6&U)F!")!) F!"D#&!"a S?$0'H^AJ- ~%NO C0}"@@ #&!"a S!N# G -\?!$ 3#@@ 30 !)-@@@&!"/B .$&G=0'&!"(.F &G@@#9 S@@@C0I&G@@#@Q@@@C0r &G@@# @@@C0^&G@@H<J- ~ %N   '0      @    •0 #  0     0@ @#U?&!"a SU# N !"H<J- 5O#"CEC4G'0v 6 6 L nG;?1&U4DcN&U/!G ?g•33•3- L nG;?100:03F#!)   !{- L &UQOS1-109 0($0)Uc9 S! 3?&@g•'G;?10a1BR '"3HYoJ- 1.2.2. BPL@>>@Q !"PMR=>in vitro h('U!"':0*(' B?B("QR( 01FRZ0F8!G1-€!G|EU4 34"?#U0(.Q F?Q/" CHIYJ- TW('&!"3E/!).?$4YA:0(3x IA!US$9&;C/"C- TW&!";)S1 9*- no-o U?"CE('&!" 9X0G)B'?s-`CD/"C&8 !E'M(';!&;GH=^J- w&;:0;US&  0$R 0v - V""C l0 !)&F3;(? !6#&U)39&F3&- - €:&!E*&("C cNg- - `;**?BF1"C30- - K)&U0&F3;!E:0('&F%0QO ;0#9;!"4H_J- 7()()B@ST>@U=> !"PMRNMVWPXYZ[ 7 7 B@ST 1"PMR B&L \]^&L=_ *` &L\= >aWP _ 5 `B  f0 Vitis - Euphorbia milli Perilla frutescens oY ^ I^ oA A#r o#= o#Y or#r oY f0Q@ Morinda citrifolia oy I#I y n@'@@ Coptis japonica Thalictrum minor or oA ^ A#Ao r#r oAAA ‚00 Coleus blumei I< r#A _ h3 Lithospermum erythrorhizon o^ o#= _#r 1.2.3. %L@>>@Q !"PMR ('#*0('34 ;&F3?!|4349XUE C0G-t;&!"030!G1#!60&2a SF!G30HI<J-('9XU!") "Cm3E$&F3&8'!v*0] !6&F39"#*0 %('40#'V F393'H^oJ- Tối ưu hóa điều kiện nuôi cấyv`?0*R!] k!6#&F%0!E#&U#39#[ 83#!E&(!""C&2&!" C-dU9X('EC0G)E B3&!"E&F3?!-`?R( ?  !{U„;]!(?G'?!0 HrAJ- `…1#@ @.BPanax ginsengc`o__^•†03 p/#o__^gHI=J# HI_J•00 .B Coleus bluemei c‡' o_y=g#3.B Lithospermum erythrorhizonc0300†b0#o__og• 'Q@LoA.B Nicotiana tabacumc†0@0'00#o_y<g#'@'@. 8 8 BCoptis japonicacd0'00o_y_g9X(') !"0G)BH^oJ- Chọn lọc các dòng tế bào cho năng suất cao: `9X" C!6'[&].* %B'?sC0!"0 ]&;O0M&!" %('4 0H^YJ-`**(' 034V"U0 &2&!"n@h0@'?4o_y=HIAJ-€!GB %('01U!)&&]C0s:0 %(' 0H^oJ- `…1#U %(':0B'cEuphorbia millig9X 3<]!"00/.(''?s0I^]* *ci00o_yIgHY^J-`**;&1&!" l ( ?U[?-ha SS(':0Coptis japonica '@0o^uci00 0h0o_yogHYrJ#&!" %(' !E0G/!"'@'@0G-p%('** !E43Y]r]!"030 &10 o#Iˆu• %('V&#/!"'@'@0&F&80I<( -k !"00 0 0 4 %( '€j€ :0 Capsicum annuum&2&!"h00 L\00‰0Lf@b4o__A-B **!=L@0#0@'X&!"C&; ** %('!"0cf@o_y=#Š000'@ o_yI#Š o_<^gHYrJ- Cung cấp tiền chất thuốcvnVF:0QOV" U'!6X;4!"?  U?"00'[&]V""C O(4!"?N-€!G$93 N F„H^AJ- K9 S#00 &!"'V!6('FN 0@030 # @030 PnV@00@3 9 9 ('FNBSalvia officinalis3991000 cj ‹@#o_<Ag-F!G&!"3(Q39910 0/3Taxusc†@L5@o__ro__^g-`•@ 0 ('B Vanilla planifolia &!"3(Q4!" 09Xc‚0T#o_yyg-50#'V@@ 7&( 4@@ l'0GPerilla frutiscens-T'V @0('0 7&(9X@@cd @L T@@o_yygH^oJ- Sự kích kháng bảo vệ thực vật:/"C !U'U'?1(?B'-`393 ''O"C-ha S 393':0'U'B#C393' #!GC&;&!""C19 *UQ-ha S393'* *c&!"B1 0?:0g&;399O "CQO('#;[6 0&10HIYJ- `…1#`@cIAA_g&2C!E:0d@efhf 1#YL@/Y#YŒL @/l GGossypium barbadense-T(Qd@ef41  1@0:0#!QO!E:0('-k !"4y]3'VoAA•dd@ef0IA393HIrJ- 1.2.4. Gb=>T=M" !"PMRc>L@>>@AQ &L@ST t;/C.#1.B m&!" FN&F3N-5F 0&V;&!"/. FN!"0G BmHyJ-`"C3m0#1#1 N]( !"- 10 10 dU? !"?!0&0. Digitalis purpurea$0?11# @@.B0cPapaver somniferumg ?&0#0]#'0@@.B .01cC. roseusg &F''1]Q@.B C. Officinalis '?z-‚0 53@&!"'M(&]F/U?"'M ('4o_=Y-5FC&2/" 9'MlG#0('FN-h&0 1:0 ;9C)lG0-5('F NThalictrum minus /0'@'@@-50Stizolobium hassjo /?$0 03uL 0-5FN Hyoscyamus niger /U 7/:00@?&U3;H=^J- 5!60X&2&!"!0••@.('B cCoffea arabicag#'@000:&!6#'@'@.('BCoptis japonica cB.^LY4)&!"!"&3; '@'@l#3!";&!"0^]'M!G ('g-5$&!"a SU2 !G*HyJ- `@@@ S$0'0('?1]  X&!"    / 'M  !G      ( '  B Rauwolfia serpentina-5(':0B@Q)0rA ;/&!"r-=AA3@@@#!G&!G)!"4:0 ()&!".lB&HyJ- p@FV"0*:0?@ 03Ž Q0* !"-T0co_Y_g&2 ('BDioscorea deltoidea&;/ @- h3#  U 1 [  ?  &D   3  4    3#    l  B Lithospermum erythrorhizon-nO!6#39X3Fl-   #      30  *  5  n  &2  1  &!"  %  (  '  l  B Lithospermum349X&(o=>3&2m [...]... Phổ HPLC của dịch chiết solasodine từ rễ cây cà gai leo tự nhiên 1 năm tuổi 35 RT2.57 25000 Độ hấp thụ quang (µV) 20000 15000 10000 RT4.67 5000 0.0 RT2.02 0 2.5 5.0 7.5 10.0 Thời gian lưu (phút) Hình 3.2 Phổ HPLC của dịch chiết solasodine từ tế bào cà gai leo 4 tuần tuổi 3.2 ẢNH HƯỞNG CỦA METHYL JASMONATE LÊN KHẢ NĂNG SINH TRƯỞNG VÀ TÍCH LŨY SOLASODINE CỦA TẾ BÀO CÀ GAI LEO 3.2.1 Ảnh hưởng của nồng... so với kết quả của Loc và Thanh (2011): Tế bào đạt sinh khối cực đại sau 4 tuần nuôi cấy với 18,89 g khối lượng tươi và 1,15 g khối lượng khô [34] 3.1.2 Khả năng tích lũy solasodine của tế bào Dịch chiết tế bào cà gai leo 4 tuần tuổi được phân tích HPLC để khảo sát khả năng tích lũy solasodine Kết quả phân tích được thể hiện ở hình 3.1 và hình 3.2 Theo kết quả nghiên cứu của Loc và Thanh... thích này dùng cho tất cả các bảng 3.2.1.2 Khả năng tích lũy solasodine Bổ sung MeJA với các nồng độ khác nhau để khảo sát ảnh hưởng của chất kích kháng lên sự tích lũy solasodine của tế bào cà gai leo Dịch chiết tế bào được phân tích HPLC, kết quả được trình bày ở bảng 3.2 và các hình 3.3-3.8 Phân tích HPLC solasodine của dịch chiết tế bào cà gai leo nuôi cấy trong môi trường bổ sung MeJA... ra bởi tác nhân oxy hóa Cà gai leo còn chứa saponin steroid làm tăng sức chống chịu của màng tế bào gan dưới sự tấn công của TNT và các tác nhân oxy hóa [55] 1.4.4 Một số công trình nghiên cứu trên cà gai leo Cây cà gai leo đã được Viện Dược liệu chứng minh có tác dụng kháng viêm, bảo vệ gan, hạn chế sự tạo thành xơ của các tổ chức và thuốc “Haina” bào chế từ cà gai leo đã được thử nghiệm... chất chuyển hóa của TNT với thành phần của cà gai leo và giữa cà gai leo với tế bào gan TNT xâm nhập vào cơ thể sẽ được chuyển hóa trong tế bào gan và làm gia tăng sự hình thành của superoxide và hydrogen peroxide Chúng tấn công vào cấu trúc lipoprotein của màng tế bào gan bằng chuỗi phản ứng lipoperoxide gây ra sự phá hủy tế bào gan Flavonoid là tác nhân kháng oxy hóa của cà gai leo có thể hạn... jasmonate 3.2.1.1 Sinh trưởng của tế bào Tế bào cà gai leo 3 tuần tuổi được nuôi cấy trên môi trường có bổ sung MeJA với các nồng độ khác nhau 50-300 µM vào thời điểm ban đầu của quá trình nuôi cấy Sinh khối được thu sau 4 tuần nuôi cấy để quan sát ảnh hưởng của MeJA lên khả năng sinh trưởng của tế bào Kết quả được trình bày ở bảng 3.1 Bảng 3.1 cho thấy tế bào cà gai leo sinh trưởng chậm khi... vitro cây cà gai leo [10] Nguyễn Hữu Thuần Anh và cs (2008) đã nghiên cứu khả năng tích lũy glycoalkaloid toàn phần trong callus của cây cà gai leo (Solanum hainanense Hance) Kết quả cho thấy glycoalkaloid toàn phần tích lũy trong callus của cà gai leo đạt cực đại sau 10 tuần nuôi cấy (37,73 mg/mL) trên môi trường cơ bản MS có bổ sung 0,5 mg/L 2,4-D và 1,0 mg/L BAP [1] Loc và Thanh (2011) đã nghiên. .. 0,5% của dw 2% của dw Thorn apple (rễ tơ) Cadmium chloride Sesquiterpenes 0 140 nmol/g 22 23 23 24 1.4 KHÁI QUÁT VỀ CÀ GAI LEO (Solanum hainanense Hance) 1.4.1 Nguồn gốc và phân bố Cây cà gai leo (Solanum hainanense Hance) thuộc họ Cà (Solanaceae), còn có tên khoa học khác là Solanum procumbens Lour Ngoài ra, cà gai leo còn có nhiều tên gọi địa phương khác như: cà quánh, cà quạnh, cà quýnh, cà bò,... dịch tế bào huyền phù đồng nhất Tế bào sau 3 tuần nuôi cấy tăng sinh được sử dụng cho các thí nghiệm thăm dò nồng độ và thời điểm bổ sung chất kích kháng Mỗi lần cấy chuyển lấy 20 mL dịch tế bào huyền phù chuyển vào bình môi trường mới [34] 2.2.2.2 Thăm dò ảnh hưởng của chất kích kháng thực vật lên khả năng sinh trưởng và tích lũy solasodine của tế bào cà gai leo Chuyển 20 mL tế bào huyền... chứng minh cà gai leo có tác dụng kháng viêm, giảm đau, giảm sự phát triển của quá trình xơ trong xơ gan thực nghiệm trên chuột [9], [4] Phạm Kim Mãn và cs (1999) đã nghiên cứu tác dụng chống ung thư của cà gai leo và kết luận rằng, chế phẩm dịch chiết từ cây cà gai leo nồng độ 5 mg/100 mL có tác dụng hủy diệt tế bào ung thư 180 Sarcoma với tỷ lệ tế bào chết là 52,8% [13] Việc nghiên cứu . japonicacd0'00o_y_g9X(') !"0G)BH^oJ- Chọn lọc các dòng tế bào cho năng suất cao: `9X" C!6'[&].*