Phần 1 : GIỚI THIỆU1.1 Lịch sử ra đời của sản phẩm: Thống kê của tổ chức Lương –Nông Thế Giới cho thấy: các loại cây trồng trên đồng ruộng hiện nay phải chống đỡ 10.000 loài sâu hại khác nhau, 10.000 loài nấm, 200 loài vi khuẩn, 600 loài virut gây bệnh… Quả là 1 lực lượng hùng hậu tấn công cây trồng gây tổn thất đáng kể mùa màng. Hàng năm, khoảng 20% sản lượng lượng thực thực phẩm trên thế giới bị mất trắng.2Từ những năm 50 của thế kỉ trước, người ta đã sử dụng thuốc trừ sâu hóa học – là những hợp chất Clo và P hữu cơ, có tác dụng tiêu diệt sâu bệnh, tiêu diệt muỗi rất hữu hiệu và có tính kinh tế. Tuy nhiên, trong những năm gần đây, khi sử dụng loại thuốc này đã gây ra những ảnh hưởng to lớn đến xã hội và sức khỏe con người như : sau một thời gian sử dụng thuốc, không những không tiêu diệt được hết sâu hại mà còn có nhiều thêm do sâu hại quen dần và có dấu hiệu “ nhờn thuốc ”. Từ đó, tồn dư các chất độc hại trong đất ngày càng cao, đất đai bị thoái hóa dần, dinh dưỡng bị mất cân đối, mất cân bằng hệ sinh thái trong đất, hệ vi sinh vật trong đất bị phá hủy, dẫn đến tồn dư chất độc trong sản phẩm lương thực thực phẩm, ảnh hưởng đến sức khỏe đến con người và vật nuôi : tình trạng bị ngộ độc thực phẩm tăng cao, sinh ra nhiều bệnh tật và ảnh hưởng tới thế hệ sau.10Chính vì những lí do đó, xu hướng quay trở lại nền nông nghiệp hữu cơ với việc tăng cường sử dụng thuốc trừ sâu sinh học ( chế phẩm sinh học ), phân bón hữu cơ trong canh tác cây trồng đang là xu hướng chung của toàn cầu. Việc sử dụng các tác nhân sinh học như virut, vi khuẩn, vi nấm hay các hợp chất tự nhiên có hoạt tính sinh học mạnh để phòng trừ sâu bệnh cho cây trồng là rất hữu ích và cần thiết : trong đó, thuốc trừ sâu vi sinh đã và đang được lựa chọn.31.2 Giới thiệu chung về sản phẩm.Ngày nay, song song với biện pháp hóa học xuất hiện biện pháp sinh học dựa trên cơ sở đấu tranh sinh học với sâu hại, chuột và vi sinh vật gây bệnh cho cây trồng. Biện pháp sinh học cũng khá đa dạng, gồm có các chế phẩm vi sinh vật diệt sâu hại, các chế phẩm từ tuyến trùng, các loại thiên địch ăn thịt (ong mắt đỏ, mắt vàng,…) diệt những loài côn trùng phá hoại mùa màng. Các chế phẩm vi sinh hoặc các chế phẩm sinh học (với bao gồm ý nghĩa rộng hơn) có tác dụng diệt hoặc gây bệnh cho sâu hại cây trồng. Bệnh côn trùng có tới 80 – 90% số bệnh là do vi sinh vật gây ra. Những bệnh này thường thể hiện côn trùng chết hàng loạt, chấm dứt sự sinh sản, làm hạn chế sự lây lan của các loài sâu hại tiếp theo. Chính vì những nguyên nhân trên, việc nghiên cứu và phát triển các chế phẩm vi sinh diệt trừ sâu hại cây trồng là việc làm cần thiết mang lại hiệu quả cho nông nghiệp cũng như cuộc sống con người. 11.2.1 Thuốc trừ sâu sinh học là gì?Thuốc trừ sâu sinh học bao gồm các loại chế phẩm có nguồn gốc sinh học. Vi sinh vật được nuôi cấy trên môi trường dinh dưỡng khác nhau theo phương pháp thủ công, bán thủ công hoặc phương pháp lên men công nghiệp để tạo ra những chế phẩm có chất lượng cao, có khả năng phòng trừ được các loài sâu bọ gây hại cây trồng nông, lâm nghiệp3 Thuốc trừ sâu sinh học có thể chia thành 4 nhóm :Nhóm vi sinh: thành phần thuốc bao gồm những vi sinh vật còn sống như nấm, vi khuẩn, virus, tuyến trùng, chúng đều ở dạng bào tử hay nang trong thời gian nhất định. Các vi sinh vật này sẽ phát triển và ký sinh trên vật chủ khi gặp điều kiện thuận lợi.Ví dụ : thuốc trừ sâu Bt, nấm trichoderm, Conidiobolus obscurus, Zoophthora radican …Nhóm độc tố và kháng sinh: thuốc BVTV sinh học được tạo ra trong môi trường nuôi cấy vi sinh vật, gồm chất gây độc( độc tố) và chất tác động lên hoạt động sống tế bào ( kháng sinh ). Ví dụ : Kasugamycin, Streptpmycin… ( kháng sinh); Avermectin, spinosad…( độc tố ).Nhóm thảo mộc : thuốc BVTV sinh học được tạo bởi quá trình tách chiết thực vật có hiệu lực khá cao và phong phú do nguồn nguyên liệu dồi dào. Ví dụ : cây thuốc lá, bột tỏi,ớt, saponin….Nhóm nguồn gốc sinh học khác : thuốc BVTV có thể bào chế từ nguồn sinh học khác như vỏ tôm cua( chitosan), các axitamin từ thủy phân protein, dầu khoáng… 3,1
Trang 1ĐỀ TÀI SẢN XUẤT THUỐC TRỪ SÂU SINH HỌC Phần 1 : GIỚI THIỆU
1.1 Lịch sử ra đời của sản phẩm:
Thống kê của tổ chức Lương –Nông Thế Giới cho thấy: các loại cây trồng trên đồngruộng hiện nay phải chống đỡ 10.000 loài sâu hại khác nhau, 10.000 loài nấm, 200 loài vikhuẩn, 600 loài virut gây bệnh… Quả là 1 lực lượng hùng hậu tấn công cây trồng gây tổnthất đáng kể mùa màng Hàng năm, khoảng 20% sản lượng lượng thực thực phẩm trênthế giới bị mất trắng.[2]
Từ những năm 50 của thế kỉ trước, người ta đã sử dụng thuốc trừ sâu hóa học – là nhữnghợp chất Clo và P hữu cơ, có tác dụng tiêu diệt sâu bệnh, tiêu diệt muỗi rất hữu hiệu và
có tính kinh tế Tuy nhiên, trong những năm gần đây, khi sử dụng loại thuốc này đã gây
ra những ảnh hưởng to lớn đến xã hội và sức khỏe con người như : sau một thời gian sửdụng thuốc, không những không tiêu diệt được hết sâu hại mà còn có nhiều thêm do sâuhại quen dần và có dấu hiệu “ nhờn thuốc ” Từ đó, tồn dư các chất độc hại trong đất ngàycàng cao, đất đai bị thoái hóa dần, dinh dưỡng bị mất cân đối, mất cân bằng hệ sinh tháitrong đất, hệ vi sinh vật trong đất bị phá hủy, dẫn đến tồn dư chất độc trong sản phẩmlương thực- thực phẩm, ảnh hưởng đến sức khỏe đến con người và vật nuôi : tình trạng bịngộ độc thực phẩm tăng cao, sinh ra nhiều bệnh tật và ảnh hưởng tới thế hệ sau.[10]Chính vì những lí do đó, xu hướng quay trở lại nền nông nghiệp hữu cơ với việc tăngcường sử dụng thuốc trừ sâu sinh học ( chế phẩm sinh học ), phân bón hữu cơ trong canhtác cây trồng đang là xu hướng chung của toàn cầu Việc sử dụng các tác nhân sinh họcnhư virut, vi khuẩn, vi nấm hay các hợp chất tự nhiên có hoạt tính sinh học mạnh đểphòng trừ sâu bệnh cho cây trồng là rất hữu ích và cần thiết : trong đó, thuốc trừ sâu visinh đã và đang được lựa chọn.[3]
1.2 Giới thiệu chung về sản phẩm.
Ngày nay, song song với biện pháp hóa học xuất hiện biện pháp sinh học dựa trên cơ
sở đấu tranh sinh học với sâu hại, chuột và vi sinh vật gây bệnh cho cây trồng Biện phápsinh học cũng khá đa dạng, gồm có các chế phẩm vi sinh vật diệt sâu hại, các chế phẩm
từ tuyến trùng, các loại thiên địch ăn thịt (ong mắt đỏ, mắt vàng,…) diệt những loài côntrùng phá hoại mùa màng Các chế phẩm vi sinh hoặc các chế phẩm sinh học (với baogồm ý nghĩa rộng hơn) có tác dụng diệt hoặc gây bệnh cho sâu hại cây trồng Bệnh côntrùng có tới 80 – 90% số bệnh là do vi sinh vật gây ra Những bệnh này thường thể hiện
Trang 2hại tiếp theo Chính vì những nguyên nhân trên, việc nghiên cứu và phát triển các chếphẩm vi sinh diệt trừ sâu hại cây trồng là việc làm cần thiết mang lại hiệu quả cho nôngnghiệp cũng như cuộc sống con người [1]
1.2.1 Thuốc trừ sâu sinh học là gì?
Thuốc trừ sâu sinh học bao gồm các loại chế phẩm có nguồn gốc sinh học Vi sinh vậtđược nuôi cấy trên môi trường dinh dưỡng khác nhau theo phương pháp thủ công, bánthủ công hoặc phương pháp lên men công nghiệp để tạo ra những chế phẩm có chấtlượng cao, có khả năng phòng trừ được các loài sâu bọ gây hại cây trồng nông, lâmnghiệp[3]
Thuốc trừ sâu sinh học có thể chia thành 4 nhóm :
- Nhóm vi sinh: thành phần thuốc bao gồm những vi sinh vật còn sống như nấm,
vi khuẩn, virus, tuyến trùng, chúng đều ở dạng bào tử hay nang trong thời giannhất định Các vi sinh vật này sẽ phát triển và ký sinh trên vật chủ khi gặp điều
kiện thuận lợi.Ví dụ : thuốc trừ sâu Bt, nấm trichoderm, Conidiobolus obscurus, Zoophthora radican …
- Nhóm độc tố và kháng sinh: thuốc BVTV sinh học được tạo ra trong môitrường nuôi cấy vi sinh vật, gồm chất gây độc( độc tố) và chất tác động lênhoạt động sống tế bào ( kháng sinh ) Ví dụ : Kasugamycin, Streptpmycin…( kháng sinh); Avermectin, spinosad…( độc tố )
- Nhóm thảo mộc : thuốc BVTV sinh học được tạo bởi quá trình tách chiết thựcvật có hiệu lực khá cao và phong phú do nguồn nguyên liệu dồi dào Ví dụ :cây thuốc lá, bột tỏi,ớt, saponin…
- Nhóm nguồn gốc sinh học khác : thuốc BVTV có thể bào chế từ nguồn sinhhọc khác như vỏ tôm cua( chitosan), các axitamin từ thủy phân protein, dầukhoáng… [3,1]
1.2.2 Ưu và nhược điểm thuốc trừ sâu sinh học :[1,10]
Trang 3- Không gây ảnh hưởng tiêu cực đến sức khỏe con người, vật nuôi, câytrồng, đảm bảo cân bằng sinh thái.
- Hiệu quả của thuốc vi sinh vật thường kéo dài vì chúng không chỉ tiêudiệt được lứa sâu đang phá hoại mà còn lan truyền cho thế hệ tiếp theo
- Sử dụng hợp lý đúng phương pháp, đúng kĩ thuật trong điều kiện khí hậuthích hợp sẽ mang lại hiệu quả kĩ thuật cao
b.Nhược điểm :
- Tác dụng của thuốc trừ sâu sinh học lên sâu bệnh tương đối chậm hơn sovới thuốc trừ sâu hóa học.( phải có thời gian ủ bệnh)
- Việc bảo quản yêu cầu nghiêm ngặt hơn
- Giá thành cao, thời gian tác dụng lâu hơn , dẫn đến hiệu lực không nhanhnhư thuốc hóa học nên người dân không nhìn thấy ngay nên chậm đưavào sản xuất trên diện rộng
Nhưng so với các ưu điểm to lớn th́ì các nhược điểm trên đây của thuốc sinh học là rấtnhỏ và hoàn toàn có thể khắc phục được Vì vậy, thuốc trừ sâu sinh học ngày càng đượckhai thác sử dụng nhiều Ở nước ta, ngoài các chế phẩm này đă được biết đến tương đốilâu, hiện nay có nhiều chế phẩm mới đă được đăng kí sử dụng Yêu cầu ngày càng cónhiều nông sản và thực phẩm an toàn phục vụ đời sống cũng là điều kiện quan trọng thúcđẩy sự phát triển của các thuốc sinh học
1.3 Các vi sinh vật được sử dụng để sản xuất thuốc trừ sâu :[2]
+Vi khuẩn: Bacillus thuringiensis, các vi khuẩn đơn bào giả…
+Xạ khuẩn: Strep.hygroscopicus , Strep.rurgersensis, Strep Longisporus…
Các loại này chữa được các bệnh đậu ôn do nấm gây ra ở cây lúa ,cà chua…
+Nấm sợi: Aschersoria, , Conidiobolus obscurus, Zoophthora radicans…
Có 2 loại cho hiệu quả diệt sâu bệnh cao : Beauveria basiana, Metarhizium anisopliae.
+Virus : đa diện dạng nhân, thể hạt, đa diện dạng tế bào chất…
1.3.1 Chọn nấm mốc xanh Metarhizium anisopliae (Ma)
Ở Việt Nam, biện pháp sinh học cũng được quan tâm và phát triển Trong những nămgần đây, khi mà vấn đề ngộ độc thực phẩm và nhiễm hóa chất bảo vệ thực vật đã lên đến
Trang 4mức báo động Trong số các tác nhân phòng trừ thì nấm xanh Metarhizium được sử dụng
rộng rãi vì có ưu điểm là phổ kí sinh rộng Sản xuất chế phẩm nấm sử dụng trong phòngtrừ sâu hại cây trồng cũng lại là vấn đề quan tâm của Công nghệ sinh học Đó cũng chính
là lý do để em chọn loại nấm sợi này
1.3.2 Giới thiệu, lịch sử ra đời:
Đây là 1 loại nấm sợi có khả năng kí sinh và làm chết nhiều loại côn trùng gây
hại Năm 1878, khi nghiên cứu vế các loài nấm, nhà khoa học người Nga I.I Metchnikov đã phát hiện thấy 1 loài nấm có bào tử màu lục có thể gây chết
hàng loạt côn trùng Lúc đó ông đặt tên cho loài nấm này là: Entomophthora anisoplia, về sau người ta đã khẳng định nó thuộc chi Metarhizium.[2]
Trang 5Hình 1.1 M anisopliae
1.3.2.2 Đặc điểm hình thái
Sợi nấm phát triển trên bề mặt sâu bệnh có màu từ màu trắng đến màu xanh, cuống sinhbào tử ngắn mọc tỏa tròn trên đám sợi nấm dày đặc Bào tử trần hình que có kích thước3,5 x 6,4 x 7,2 µm, màu từ lục xám đến oliu - lục, bào tử xếp thành chuỗi khá chặt chẽ
và nhìn bằng mắt thường người ta có thể thấy bào tử được tạo ra trên bề mặt cơ thể côntrùng một lớp phấn khá rõ màu xanh lục Sợi nấm khi phát triển bên trong côn trùng cóchiều rộng khoảng 3 -4 µm, dài khoảng 20µm, chia thành nhiều tế bào ngắn, trong tếbào có thể thấy rõ nhiều giọt mỡ [2]
Nấm M anisopliae có bào tử dạng hình trụ, hình hạt đậu, khuẩn lạc có màu xanh thỉnh
thoảng có màu tối hoặc màu hồng vỏ quế, chúng phát triển chậm trên môi trường không
có peptone (ví dụ như môi trường PDA, Czapek -Dox), thích hợp trên môi trường cópepton, cụ thể trên môi trường Sabouraud nấm phát triển tốt trong điều kiện nhiệt độ25⁰C sau 7 -10 ngày nuôi cấy thì khuẩn lạc có đường kính 4 -6 cm
Trang 6Loài nấm M anisopliae có hai loài (varities) dạng bào tử nhỏ và lớn, dạng bảo tử nhỏ M.var.anisopliae có kích thước bào tử 3,5 -5,0 x 2,5 -4,5 µm, dạng bào tử lớn là M anisopliae var major có kích thước bào tử 10,0 -14,0 µm
Để phân biệt hai loài nấm trên, tác giả Tsai và Cs (dẫn theo Phạm Thị Thùy, 2010) đã
nghiên cứu đặc tính huyết thanh khác nhau của hai loài này và xác định rằng loài M anisopliae là chủng gây bệnh mạnh nhất trên côn trùng thuộc bộ cánh cứng Coleoptera.
Nhiều nhà khoa học đã nghiên cứu và tìm thấy có khoảng 204 loài sâu bệnh, côn trùng
thuộc họ Elaridae và Curculionidae dễ bị nhiễm bệnh bởi nấm M anisopliae.[2,5]
1.3.2.3 Cấu tạo và thành phần hóa học của tế bào nấm M anisopliae
Cũng như trong thành phần cấu tạo của các loại nấm lớn và các nhóm vi sinh vật khác, tếbào vi nấm gồm có: thành tế bào, chất nguyên sinh, không bào, nhân tế bào và các thể ẩnnhập Thành phần hóa học của các thể bào vi nấm thay đổi theo loài, theo vị trí tế bàotrên sợi nấm so với ngọn nấm (Gibatt, 1996) Các thành phần nguyên tố hóa học của tếbào vi nấm quan trọng nhất là cacbon(40%), oxy (40%), nitơ (7- 8%) và hydro (2-3% ).Hydratcacbon quan trọng ở các tế bào nấm là Glycogen và Trehalogen Glycogen làhydratcacbon dự trữ của nấm Tương đương với tinh bột ở thực vật Tỷ lệ hydratcacboncũng như các thành phần khác của tế bào, thay đổi theo từng loài vi nấm [2]
*Sợi nấm, hệ sợi nấm và khuẩn lạc.
Sợi nấm có vách ngăn, toàn bộ sợi nấm và các nhánh phát triển từ một bào tử nấm đượcgọi là hệ sợi nấm Sợi nấm phát triển từ ống nảy mầm và bào tử mọc ra, sợi nấm chỉ tăngtrưởng ở ngọn và đều được đo theo chu kỳ thời gian
Trên môi trường nuôi cấy nhân tạo và cả trên một số cơ chất tự nhiên, hệ sợi của vi nấmthường phát triển thành một khối có hình dạng nhất định, thường có tiết diện hình tròn,hoặc gần cầu gọi là khuẩn lạc Một khuẩn lạc có thể phát sinh từ một đoạn sợi nấm nhưngthông thường nhất là từ bào tử
Tốc độ tăng trưởng của các loại vi nấm thường được tính bằng đường kính khuẩn lạc.Khuẩn lạc của một vài loài nấm còn được đặc trưng bởi màu sắc của sợi nấm Bề mặtkhuẩn lạc của vi nấm có thể mượt, nhẵn bóng, dạng bột, dạng hạt, dạng sợi hoặc dạngxốp Chưa có nhiều dẫn liệu về những biến đổi sinh lý, sinh hóa trong bào tử nấm thuộccác nhóm phân loại khác nhau, tuy nhiên vẫn có những công trình nghiên cứu nói tới sựbiến đổi này Trong quá trình nảy mầm, sợi nấm rất cần glucoza hoặc các đường đơnkhác từ môi trường bên ngoài, ngược lại không cần cung cấp lipit Glucoza cũng đượcxem là nguồn cacbon rất cần đối với sự nảy sợi ở nhiều loại vi nấm, chẳng hạn đối với sự
Trang 7nảy sợi của bào tử trần nấm Penicillium griseofulvum Trong quá trình nảy mầm, sinh
trưởng và hình thành bào tử, nấm M anisopliae cũng rất cần nguồn cacbon, nitơ và
vitamin.[7, 8]
Hình 1.2 Bào tử nấm M anisopliae
Trang 8Hình 1.3 Khuẩn lạc M anisopliae
1.3.2.4 Độc tố diệt côn trùng của nấm lục cương Metarhizium anisopliae [2,4]
Độc tố diệt côn trùng của nấm lục cương gồm một số ngoại độc tố có tên là : Destruxin
A, B, C hay D Các ngoại độc tố đó là các sản phẩm thứ cấp vòng peptit, L prolyn, L
-leucine, anhydride, L - prolyn - L -valine anhydride và Desmethyl Destruxin B Theo tài
liệu của tác giả Lysenko và Kucera thì nấm M anisopliae cũng sinh độc tố Destruxin A
và độc tố Destruxin B Theo Suzuki và cộng sự (1970) thì: Destruxin A có công thứcnguyên là C29H47O7N5, có điểm sôi là 188⁰C Destruxin B có công thức nguyên làC30H51O7N5, có điểm sôi là 234⁰C Độc tố Destruxin A có bản chất hóa học là D -2hydroxy -4 -pentenoy -L –prolyl-isoleucyl -N -methyl -L valyl -N -methyl -L -alanyl -alanyl lacton.Độc tố Destruxin B có bản chất hóa học à D - α hydroxy - γmethylvaleryl -L -prolyl -L -isoleucyl -N -methyl -L valyl -N -methyl -L -alanyl -βalanyl lacton.alanyl lacton
Lần lượt từ năm 1961 và 1962, Y Kodaira (dẫn theo Phạm Thị Thùy, 2010) đã tách ra
được độc tố Destruxin A, và Destruxin B từ dịch nuôi cấy nấm lục cương M anisopliae.
S Tamura và cs từ năm 1965 –1970 đã tiến hành nuôi cấy nấm lục cương
Các tác giả cũng tách được những độc tố trên từ môi trường Czapek -Dox có chứa 0,5%pepton Từ 1 lít dịch nuôi cấy người ta có thể thu nhận được 13 -15 mg độc tố Destruxin
A và B, dịch lọc được xử lý bằng than hoạt tính rồi được phản hấp phụ bằng N -butanol,sau đó được tách ra bằng benzene và được làm sạch trên bột nhôm oxit trung tính (dẫntheo Phạm Thị Thùy, 2010)
Năm 1971, người ta đã tổng hợp nhân tạo được Destruxin B Có khoảng 70 loài côn trùng
bị tiêu diệt bởi nấm lục cương M anisopliae Dưới kính hiển vi điện tử với độ phóng đại lớn, năm 2000 các nhà khoa học Mỹ đã chụp được chuỗi bào tử M anisopliae kéo dàI với
mật độ giống như dạng khôi mô giậu
Trang 9Hình 1.4 Cấu trúc độc tố destruxin A – B.
1.3.2.5 Cơ chế tác động của nấm lên sâu bệnh và con đường truyền bệnh [5, 7]
a Cơ chế tác động:
Hầu hết những loài nấm gây bệnh cho sâu bệnh đều xâm nhập vào cơ thể vật chủ qua lớp
da (vỏ) cơ thể Bào tử nấm tiếp xúc với da côn trùng nảy mầm – xâm nhập vào cơ thể sinh sản trong xoang làm yếu và phá hoại chức năng trao đổi chất của côn trùng
Điều kiện nhiệt độ, ẩm độ thích hợp, sau 24 giờ tiếp xúc với da côn trùng bào tử phìnhlên, nảy mầm thành ống mầm và hình thành vòi bám Kích thước vòi bám gấp 2-3 lần bào
tử, có dịch nhầy để dính vào da côn trùng
Hình 1.5 Bào tử hình thành vòi bám dính vào da côn trùng
Sau đó bào tử xâm nhiễm vào bên trong cơ thể sâu, côn trùng qua lớp vỏ chitin nhờ áplực cơ giới kết hợp với hoạt động enzyme của nấm Trong quá trình trao đổi chất Nấmtiết ra enzyme (proteaza, lipoaza, kitinaza) làm mềm lớp vỏ chitin, đồng thời vòi bámhình thành cac sợi ngắn chọc thủng qua da con trùng vào bên trong Do khả năng xâmnhập vào bên trong cơ thể côn trùng qua lớp vỏ cơ thể nên nấm có thể ký sinh được sâu,
Trang 10côn trùng chích hút và cả những pha phát triển của côn trùng như trứng, nhộng mà các visinh vật khác không ký sinh được.
Khi côn trùng lột xác: nấm hình thành vòi bám mới để tiến hành tái xâm nhiễm
Sự sinh sản của nấm trong cơ thể côn trùng làm cho hoạt hoạt động trao đổi chất, cơ quan
mô bị phá hoại, rối loạn chức năng sinh lý Nấm tiết độc tố dextruxin A và B và enzymegiết chết vật chủ - sinh trưởng phát triển trên xác vật chủ - hình thành các hạch nấm làmcho cơ thể sâu chết cứng lại và dần chết đi
b Con đường truyền bệnh:
Nguyên nhân gây bệnh chủ yếu là lây lan từ cá thể ốm sang cá thể khỏe thông qua tiếpxúc trực tiếp với nhau, hay qua nguồn thức ăn có chứa mầm bệnh Việc lây truyền theocon đường đẻ trứng của ký sinh hầu như không đáng kể
Cho đến nay người ta đã biết được trên 70 loài côn trùng bị nấm này tiêu diệt, trong số
đó có tới 34 loài côn trùng cánh cứng và chỉ có 5 loài côn trùng cánh vảy.
1.4 Những nghiên cứu cụ thể để nâng cao hoạt lực, năng suất của loại vsv đó:
1.4.1 Đặc điểm sinh lý, sinh hóa của M.anisopliae:
- Không thể sinh trưởng tốt trên nền cơ chất không có kitin.[2,4]
(A chitin, hợp chất hữu cơ (heterosacarit) chứa nitơ, có ở một số động vật và thành tếbào của phần lớn các loài nấm Vỏ ngoài của bộ xương ngoài ở động vật chân khớp là lớpcuticun được thấm Kali ở những lớp ngoài cùng làm cho bộ xương rắn chắc hơn Cùngvới protein, K tạo nên bộ xương vừa dai, vừa dẻo và không thấm nước K còn thấy ởnhững phần cứng của một số nhóm động vật khác K là polime của N - axetylglucozamin,gồm nhiều đơn vị glucozơ mà mỗi đơn vị có một trong số các nhóm hiđroxyl được thaybằng nhóm axetylamin (CH3CONH)).[14]
- Sống được ở nhiệt độ thấp 80C), biên độ của độ ẩm rộng, ở nơi tích lũy nhiều CO2 vàthiếu O2 chúng có thể sống sót tới 445 ngày Khi hoại sinh trong đất bào tử đính bị ức chế
nảy mầm bởi khu hệ nấm đất, trong đó có chủng Aeromonas (thí nghiệm in vitro).
- Ở dưới 100C và trên 350C thì sự hình thành bào tử không thể xảy ra
- Nhiệt độ tốt nhất cho sự nảy mầm bào tử là 25 – 300C và chết ở 490C trong 10 phút
- Nhiệt độ tốt nhất cho sự sinh trưởng là 250C và pH 3,3 – 8,5