Nghiên cứu xây dựng panel hồng cầu tại viện huyết học truyền máu trung ương nhằm nâng cao chất lượng an toàn truyền máu về mặt miễn dịch

Hiện nay, tại các nước tiên tiến vấn đề an toàn truyền máu đã được thực hiện một cách khá triệt để cả về mặt miễn dịch và phòng lây nhiễm các bệnh nhiễm trùng truyền qua đường máu, việc

BỘ Y TẾ

VIỆN HUYẾT HỌC - TRUYỀN MÁU TRUNG ƯƠNG

BÁO CÁO KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI CẤP BỘ

NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG PANEL HỒNG CẦU

TẠI VIỆN HUYẾT HỌC -TRUYỀN MÁU TRUNG ƯƠNG NHẰM NÂNG CAO CHẤT LƯỢNG AN TOÀN TRUYỀN MÁU

VỀ MẶT MIỄN DỊCH

Chủ nhiệm đề tài: - PGS TS NGUYỄN ANH TRÍ

Cơ quan chủ trì đề tài: VIỆN HUYẾT HỌC-TRUYỀN MÁU TRUNG ƯƠNG

Cơ quan chủ quản : BỘ Y TẾ

6869

19/5/2008

HÀ NỘI - 2008

MỤC LỤC

ĐẶT VẤN ĐỀ 7

1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 9

1.1 Lịch sử phát hiện và các đặc điểm của các hệ nhóm máu hồng cầu 9

1.1.1 Hệ nhóm máu ABO 9

1.1.2 Hệ nhóm máu Rhesus (Rh): 11

1.1.3 Hệ nhóm máu Kell: 12

1.1.4 Hệ nhóm máu Duffy 13

1.1.5 Hệ nhóm máu MNSs 14

1.1.6 Hệ nhóm máu Lewis 15

1.1.7 Một số hệ thống nhóm máu khác 15

1.2 Ngân hàng người cho máu có nhóm máu hiếm 16

1.3 Xây dựng Panel hồng cầu để sàng lọc kháng thể bất thường đảm bảo an toàn truyền máu 17

1.3.1 Xây dựng Panel hồng cầu và sàng lọc kháng thể bất thường trên thế giới 19

1.3.2 Xây dựng Panel hồng cầu và ứng dụng để sàng lọc kháng thể bất thường cho bệnh nhân và người cho máu tại Việt nam 19

1.4 Các kỹ thuật sàng lọc kháng thể bất thường 20

2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22

2.1 Đối tượng nghiên cứu 22

2.2 Phương pháp nghiên cứu: 23

2.2.1 Thiết kế nghiên cứu và sơ đồ nghiên cứu theo mục tiêu: 23

2.2.2 Vật liệu nghiên cứu và sinh phẩm: 23

2.2.3 Các bước tiến hành nghiên cứu 24

2.2.4 Xử lý các kết quả nghiên cứu: 30

3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 31

3.1 Khảo sát kháng nguyên nhóm máu hệ hồng cầu để xây dựng panel hồng cầu tại Viện Huyết học Truyền máu TW 31

3.1.1 Hệ nhóm máu Rhesus 31

3.1.2 Hệ nhóm máu Kell 31

3.1.3 Hệ nhóm máu Kidd 31

3.1.4 Hệ nhóm máu Duffy: 32

3.1.5 Hệ nhóm máu MNSs, Mia: 32

3.1.6 Hệ nhóm máu Lewis: 34

3.1.7 Hệ nhóm máu Lutheran: 34

3.1.8 Hệ nhóm máu P: 34

3.2 Tần suất xuất hiện kháng nguyên của một số hệ nhóm máu hồng cầu ở người hiến máu nhóm O 35

3.3 Xây dựng và quản lý panel hồng cầu để sàng lọc KT bất thường 35

3.3.1 Một số đặc điểm của người hiến máu nhóm O được lựa chọn làm panel hồng cầu 36

3.3.2 Xây dựng panel hồng cầu để sàng lọc kháng thể bất thường 37

3.3 Ứng dụng panel hồng cầu để sàng lọc kháng thể bất thường 52

3.3.1 Đặc điểm KTBT ở bệnh nhân bị bệnh máu 52

3.3.2 Tỷ lệ KTBT ở bệnh nhân bị bệnh máu liên quan đến tuổi, giới, số lần truyền máu, nhóm máu và chẩn đoán lâm sàng 52

4 BÀN LUẬN 54

4.1 Khảo sát tần suất xuất hiện kháng nguyên của một số nhóm máu hệ hồng cầu 54

4.1.1 Bàn luận về tần suất xuất hiện kháng nguyên D, C, c, E, e của hệ nhóm máu Rh 54

4.1.2 Bàn luận về tần suất xuất hiện kháng nguyên K, k của hệ Kell 54

4.1.3 Bàn luận về tần suất xuất hiện kháng nguyên Jka, Jkb của hệ Kidd 55

4.1.4 Bàn luận về tần suất xuất hiện kháng nguyên Fya, Fyb của hệ Duffy: 55

4.1.5 Bàn luận về tần suất xuất hiện kháng nguyên hệ nhóm máu MNSs: 56

4.1.6 Bàn luận về tần suất xuất hiện kháng nguyên của hệ Lutheran 57

4.1.7 Bàn luận về tần suất xuất hiện kháng nguyên hệ nhóm máu P 57

4.2 Bàn luận về panel hồng cầu được xây dựng tại Viện Huyết học Truyền máu trung ương để sàng lọc kháng thể bất thường 58

4 3 Ứng dụng panel hồng cầu để sàng lọc kháng thể bất thường 60

4.3.1 Bàn luận về đặc điểm KTBT ở bệnh nhân bị bệnh máu 60

4.3.2 Bàn luận về đặc điểm KTBT ở người hiến máu 62

KẾT LUẬN 63

1 Xây dựng panel hồng cầu để sàng lọc kháng thể bất thường tại Viện Huyết học truyền máu trung ương 63

2 Bước đầu ứng dụng panel hồng cầu đã được sản xuất tại Viện Huyết học Truyền máu để sàng lọc kháng thể bất thường 64

KIẾN NGHỊ 65

TÀI LIỆU THAM KHẢO 66

Tiếng Việt: 66

Tiếng Anh 67

MỤC LỤC CÁC BẢNG

Bảng 1-1 Đặc điểm huyết thanh học của một số trường hợp dưới nhóm A 10

Bảng 1-2 Đặc điểm huyết thanh học của một số trường hợp dưới nhóm B 10

Bảng 1-3 Tỷ lệ nhóm máu hệ ABO theo nghiên cứu một số tác giả trong và ngoài nước 10 Bảng 1-4 Một số kháng nguyên của hệ Rh và các tên gọi khác nhau 11

Bảng 1-5 Một số kháng nguyên của hệ Kell và các tên gọi theo ISBT 12

Bảng 1-6 Các kháng nguyên của hệ Duffy và các tên gọi theo ISBT 13

Bảng 1-7 Một số kháng nguyên của hệ MNSs và các tên gọi theo ISBT 14

Bảng 1-8 Kháng nguyên của hệ nhóm máu Cromer 15

Bảng 2-1 Đối tượng nghiên cứu 22

Bảng 3-1 Tần suất xuất hiện kháng nguyên D, C, c, E, e ở NCM nhóm O 31

Bảng 3-2 Tần suất xuất hiện kháng nguyên K, k, Kpa, Kpb ở NCM nhóm O 31

Bảng 3-3 Tần suất xuất hiện kháng nguyên Fya, Fyb ở NCM nhóm O 32

Bảng 3-4 Tần suất xuất hiện kháng nguyên M, N ở NCM nhóm O 32

Bảng 3-5 Tần suất xuất hiện kháng nguyên Lea, Leb ở NCM nhóm O 34

Bảng 3-6 Tần suất xuất hiện kháng nguyên Lua, Lub ở NCM nhóm O 34

Bảng 3-7 Tần suất xuất hiện kháng nguyên P1 ở NCM nhóm O 34

Bảng 3-8 Tần suất xuất hiện kháng nguyên của một số hệ nhóm máu hồng cầu ở người cho máu nhóm O 35

Bảng 3-13 Panel HC sàng lọc kháng thể bất thường tại Viện HHTM trung ương (Số 1) 39

Bảng 3-14 Panel HC sàng lọc kháng thể bất thường tại Viện HHTM trung ương (Số 2) 40

Bảng 3-15 Panel HC sàng lọc kháng thể bất thường tại Viện HHTM trung ương (Số 3) 41

Bảng 3-16 Panel HC sàng lọc kháng thể bất thường tại Viện HHTM trung ương (Số 4) 42

Bảng 3-17 Panel HC sàng lọc kháng thể bất thường tại Viện HHTM trung ương (Số 5) 43

Bảng 3-18 Panel HC sàng lọc kháng thể bất thường tại Viện HHTM trung ương (Số 6) 44

Bảng 3-19 Panel HC sàng lọc kháng thể bất thường tại Viện HHTM trung ương (Số 7) 45

Bảng 3-20 Panel HC sàng lọc kháng thể bất thường tại Viện HHTM trung ương (Số 8) 46

Bảng 3-21 Panel HC sàng lọc kháng thể bất thường tại Viện HHTM trung ương (Số 9) 47

Bảng 3-22 Panel HC sàng lọc kháng thể bất thường tại Viện HHTM trung ương (Số 10) 48 Bảng 3-23 Panel hồng cầu định danh kháng thể bất thường tại Viện HHTM trung ương 49 Bảng 3-23 Panel hồng cầu định danh kháng thể bất thường tại Viện HHTM trung ương 50 Bảng 3-24 Panel hồng cầu định danh kháng thể bất thường tại Viện HHTM trung ương 51 Bảng 3-21 Panel HC sàng lọc kháng thể bất thường của ngân hàng máu Singapore 51

Bảng 3-26 Tỷ lệ KTBT ở bệnh nhân bị bệnh máu 52

Bảng 3-27 Tỷ lệ KTBT ở bệnh nhân bị bệnh máu liên quan đến nhóm tuổi 52

Bảng 3-28 Tỷ lệ KTBT ở bệnh nhân bị bệnh máu liên quan đến giới 52

Bảng 3-29 Tỷ lệ KTBT ở bệnh nhân bị bệnh máu liên quan đến số lần truyền máu 52

Bảng 3-31 Tỷ lệ KTBT ở bệnh nhân bị bệnh máu liên quan đến chẩn đoán lâm sàng 53

Bảng 3-32 Tỷ lệ KTBT ở bệnh nhân bị bệnh máu liên quan đến nhóm máu 53

Bảng 3-33 Tỷ lệ kháng thể bất thường ở người cho máu 53

Bảng 4-1 So sánh tỷ lệ mang kháng nguyên D, C, c, E, e của hệ Rh với một số tác giả 54

Bảng 4-2 So sánh tỷ lệ mang kháng nguyên K, k của hệ Kell với một số tác giả 55

Bảng 4-3 So sánh tỷ lệ mang kháng nguyên Jka, Jkb của hệ Kidd với một số tác giả 55

Bảng 4-4 So sánh tỷ lệ mang kháng nguyên Fya, Fyb của hệ Duffy với một số tác giả 56

Bảng 4-5 So sánh tỷ lệ mang kháng nguyên M,N, S, s của hệ MNSs với các tác giả khác56 Bảng 4-6 So sánh tỷ lệ (%) mang kháng nguyên Mia với các tác giả khác 57

Bảng 4-7.So sánh tỷ lệ (%) NCM nhóm O mang kháng nguyên Lua, Lub với các tác giả 57 Bảng 4-8 So sánh tần suất xuất hiện (%) kháng nguyên nhóm máu hệ P 57

Bảng 4-9 Tỷ lệ kháng thể bất thường ở bệnh nhân bị bệnh máu 60

Bảng 4-10 So sánh tỷ lệ kháng thể bất thường ở bệnh nhân bị bệnh máu liên quan đến số

lần truyền máu với một số tác giả 61

Bảng 3-18 Bàn luận về tỷ lệ kháng thể bất thường gặp ở người cho máu 62

MỤC LỤC CÁC SƠ ĐỒ VÀ BIỂU ĐỒ Sơ đồ 2-1 Sơ đồ nghiên cứu theo mục tiêu 23

Biểu đồ 3.1 Tần suất xuất hiện kháng nguyên Jka, Jkb ở NCM nhóm O 32

Biểu đồ 3-2 Tần suất xuất hiện kháng nguyên S,s ở NCM nhóm O 33

Biểu đồ 3-3 Tần suất xuất hiện kháng nguyên Mia ở NCM nhóm O 33

PHẦN A TÓM TẮT KẾT QUẢ NỔI BẬT CỦA ĐỀ TÀI

Hoàn cảnh ra đời của đề tài:

Máu rất quan trọng và cần thiết cho sự sống, nhờ có máu mà nhiều người bệnh

đã được cứu chữa, máu cần cho điều trị, cho các cấp cứu ngoại khoa, sản khoa và hiện nay khi triển khai một số các kỹ thuật cao như ghép tạng, mổ tim thì một lượng máu lớn cũng cần được sử dụng Máu quan trọng như vậy nhưng truyền máu cũng

có thể gây ra nhưng tai biến nghiêm trọng nếu không thực hiện đầy đủ các xét nghiệm để bảo đảm an toàn truyền máu, do vậy vấn đề truyền máu hiện nay đang được toàn thế giới quan tâm

Hiện nay, tại các nước tiên tiến vấn đề an toàn truyền máu đã được thực hiện một cách khá triệt để cả về mặt miễn dịch và phòng lây nhiễm các bệnh nhiễm trùng truyền qua đường máu, việc định nhóm máu hệ ABO, Rh và một số hệ nhóm máu khác, sàng lọc kháng thể bất thường của cả người cho và người nhận đã được thực hiện một cách thường quy Nhờ thực hiện đồng bộ các biện pháp trên mà an toàn truyền máu về mặt miễn dịch tại các nước này đã được bảo đảm và hạn chế được tới mức thấp nhất các tai biến truyền máu về mặt miễn dịch

Trong khi đó, tại nước ta hiện nay việc thực hiện an toàn truyền máu về mặt miễn dịch chưa được đảm bảo, chúng ta mới chỉ thực hiện được việc định nhóm máu hệ ABO và định nhóm máu hệ Rh (D), làm phản ứng chéo trong điều kiện kháng globulin mới được thực hiện tại một số trung tâm lớn Việc xác định các hệ nhóm máu hồng cầu khác và sàng lọc kháng thể bất thường chưa được thực hiện Gần đây công tác truyền máu và đảm bảo an toàn truyền máu đã được Đảng và Nhà nước quan tâm, ngành truyền máu đã được Thủ tướng Chính phủ phê duyệt Chương trình An toàn truyền máu quốc gia và dự án vay vốn của ngân hàng thế giới để xây dựng bốn trung tâm truyền máu khu vực, bước đầu đảm bảo và nâng cao công tác

an toàn truyền máu Một trong những nội dung mà kết thúc hai dự án này vào năm 2008- 2010 phải đạt được là phải triển khai kỹ thuật sàng lọc kháng thể bất thường cho những bệnh nhân được truyền máu tại các trung tâm truyền máu khu vực và tuyến tỉnh

Chính vì những lý do trên mà việc đi sâu nghiên cứu tần suất xuất hiện các kháng nguyên của một số hệ nhóm máu hồng cầu, các kiểu hình thường gặp, hiếm gặp để xây dựng một giàn hồng cầu với đầy đủ các kháng nguyên cần thiết của một

số hệ nhóm máu hồng cầu ở người cho máu tình nguyện nhằm xây dựng panel hồng

cầu để cung cấp cho các trung tâm truyền máu trong cả nước triển khai kỹ thuật sàng lọc kháng thể bất thường và đảm bảo cung cấp máu kịp thời cho bệnh nhân, người nước ngoài có nhóm máu hiếm khi cần là điều rất quan trọng và cần thiết Do vậy chúng tôi tiến hành đề tài này với các mục tiêu nghiên cứu sau:

1 Nghiên cứu khảo sát các kháng nguyên của một số nhóm máu hệ hồng cầu ở người cho máu để xây dựng panel hồng cầu tại Viện Huyết học Truyền máu TW

2 Bước đầu nghiên cứu ứng dụng panel hồng cầu của Viện Huyết học Truyền máu TW để sàng lọc kháng thể bất thường cho ng−êi cho m¸u vµ bệnh nhân được truyền máu

Kết quả nổi bật của đề tài:

1 Xây dựng panel hồng cầu tại Viện Huyết học Truyền máu TW để sàng lọc kháng thể bất thường

a Giàn hồng cầu được xây dựng và sản xuất tại Viện Huyết học truyền máu TW sẽ mang được tính đặc thù của của người Việt Nam, như vậy việc sàng lọc kháng thể bất thường sẽ đạt được kết quả tốt nhất

b Giá thành để thực hiện xét nghiệm này sẽ rẻ hơn so với mua hồng cầu panel của nước ngoài

c Việc bảo quản, vận chuyển và cung cấp panel hồng cầu cho các tỉnh

để triển khai xét nghiệm sàng lọc kháng thể bất thường sẽ dễ dàng và thuận tiện hơn so với việc mua panel hồng cầu được sản xuất tại nước ngoài

d Đào tạo được một đội ngũ cán bộ trong toàn ngành thực hiện xét nghiệm sàng lọc kháng thể bất thường để đảm bảo an toàn truyền máu

về mặt miễn dịch cho bệnh nhân trước khi được truyền máu

2 Ứng dụng panel hồng cầu được xây dựng và sản xuất tại Viện Huyết học truyền máu TW để sàng lọc kháng thể bất thường sẽ góp phần nâng cao chất lượng an toàn truyền máu về mặt miễn dịch tại nước ta

3 Triển khai kỹ thuật mới: Kỹ thuật gelcard trong xác định các kháng nguyên nhóm máu và sàng lọc kháng thể bất thường

ĐẶT VẤN ĐỀ

Ngay từ thời cổ xưa, người ta đã biết máu rất quan trọng và cần thiết cho sự sống, máu đã được người lính La Mã cổ đại uống trước khi ra trận, các vua chúa Ai Cập cũng đã sử dụng việc tắm máu để chữa một số bệnh như bệnh động kinh Máu của người khỏe mạnh cũng đã được sử dụng để truyền trực tiếp cho người bệnh Tuy nhiên, tại thời điểm đó người ta chưa thực sự hiểu được tại sao máu lại quan trọng đối với sự sống như vậy và tại sao khi truyền máu thì có trường hợp thành công nhưng hầu hết lại thất bại? Năm 1900, nhà bác học vĩ đại Karl Landsteiner đã phát hiện ra nhóm máu hệ ABO, đây là hệ nhóm máu đầu tiên được phát hiện ở người và cũng là hệ nhóm máu đóng vai trò quan trọng nhất trong thực hành truyền máu [1], [2], [3],[10], [14], [16], [19], [60]

Năm 1941, Levine đã phát hiện thêm nhóm máu Rh Đây là hệ nhóm máu quan trọng thứ hai sau hệ nhóm máu ABO Tiếp sau đó rất nhiều hệ nhóm máu hồng cầu khác lần lượt đã được phát hiện như hệ Kell, hệ Kidd, hệ Duffy Việc phát hiện ra các nhóm máu khác nhau của hệ hồng cầu đã giải thích cho chúng ta thấy được các trường hợp mặc dù đã có sự phù hợp nhóm máu hệ ABO nhưng vẫn xảy ra các tai biến truyền máu, đồng thời cũng tạo tiền đề để đi sâu nghiên cứu về các tai biến truyền máu và đề ra các biện pháp thích hợp để nâng cao chất lượng an toàn truyền máu về mặt miễn dịch [3],[12], [13], [18], [21], [25], [29], [34], [41], [44]

Hiện nay, tại các nước tiên tiến an toàn truyền máu về mặt miễn dịch đã được thực hiện một cách triệt để, việc định nhóm máu hệ ABO, Rh và một số hệ nhóm máu khác, sàng lọc kháng thể bất thường của cả người cho và người nhận đã được thực hiện một cách thường quy Bên cạnh đó việc thực hiện các chương trình nội kiểm và ngoại kiểm về huyết thanh học nhóm máu cũng đã được thực hiện Nhờ thực hiện đồng bộ các biện pháp trên mà an toàn truyền máu về mặt miễn dịch tại các nước này đã được bảo đảm và hạn chế được tới mức thấp nhất các tai biến truyền máu về mặt miễn dịch [15], [17], [23], [26], [27], [36], [37], [50], [54], [56] Trong khi đó, tại nước ta hiện nay việc thực an toàn truyền máu về mặt miễn dịch chưa được đảm bảo, chúng ta mới chỉ thực hiện được việc định nhóm máu hệ ABO và định nhóm máu hệ Rh (D), làm phản ứng chéo trong điều kiện kháng globulin mới được thực hiện tại một số trung tâm lớn Việc xác định các hệ nhóm máu hồng cầu khác và sàng lọc kháng thể bất thường chưa được thực hiện [2], [5], [7], [9], [12]

Trong giai đoạn hội nhập với các nước trong khu vực và trên thế giới, hiện nay

có nhiều người nước đến làm việc và công tác tại Việt Nam, khi bệnh nhân và

người nước ngoài này cần truyền máu với những nhóm máu hiếm thì việc tìm được người cho máu có nhóm máu phù hợp là rất khó khăn [4], [11]

Tại Việt nam đã có một số tác giả nghiên cứu về sự phân bố của nhóm máu hệ ABO, Rh [4], [6], một số tác giả cũng đã nghiên cứu về nhóm máu hệ hồng cầu ở một số nhóm quần thể khác nhau, tuy nhiên với cỡ mẫu còn nhỏ, đối tượng nghiên cứu chủ yếu là nhân viên y tế và người khám sức khỏe, do vậy việc xây dựng một giàn hồng cầu đầy đủ để xây dựng giàn panel hồng cầu tại Việt Nam để cung cấp cho các trung tâm truyền máu trong cả nước triển khai kỹ thuật sàng lọc kháng thể bất thường là khó thực hiện [1], [4], [9]

Chính vì những lý do trên mà việc đi sâu nghiên cứu tần suất xuất hiện của các kháng nguyên của một số hệ nhóm máu hồng cầu, các kiểu hình thường gặp, hiếm gặp để xây dựng một giàn hồng cầu với đầy đủ các kháng nguyên cần thiết của một số hệ nhóm máu hồng cầu ở người ở người hiến máu tình nguyện nhóm O nhằm đảm bảo cung cấp máu kịp thời cho bệnh nhân, người nước ngoài có nhóm máu hiếm khi cần và xây dựng panel hồng cầu cung cấp cho các trung tâm truyền máu trong cả nước triển khai kỹ thuật sàng lọc kháng thể bất thường là điều rất quan trọng và cần thiết Do vậy chúng tôi tiến hành đề tài này với các mục tiêu nghiên cứu sau:

1 Nghiên cứu khảo sát các kháng nguyên của một số nhóm máu hệ hồng cầu ở người cho máu để xây dựng panel hồng cầu tại Viện Huyết học Truyền máu

TW

2 Bước đầu nghiên cứu ứng dụng panel hồng cầu của Viện Huyết học Truyền máu TW để sàng lọc kháng thể bất thường cho ng−êi cho m¸u vµ bệnh nhân được truyền máu

Nh»m n©ng cao chÊt l−îng an toµn truyÒn m¸u vÒ mÆt miÔn dÞch

1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Lịch sử phát hiện và các đặc điểm của các hệ nhóm máu hồng cầu

1.1.1 Hệ nhóm máu ABO

Năm 1900, nhà bác học Karl Landstainer và cộng sự đã làm thực nghiệm trộn các mẫu máu của nhiều cá thể với nhau và quan sát hiện tượng ngưng kết, Ông nhận thấy có mẫu ngưng kết, có mẫu không ngưng kết Qua phân tích hiện tượng ngưng kết giữa hồng cầu của người này với huyết thanh của người kia và ngược lại Ông đã phát hiện ra hệ thống nhóm máu đầu tiên ở người với 3 nhóm máu là: Nhóm A, nhóm B và nhóm O Năm 1902, Decastello và Sturli đã lặp lại thí nghiệm của Landstainer và phát hiện thêm nhóm máu AB, sự phát hiện ra hệ nhóm máu ABO

đã mở ra cho ngành truyền máu một chân trời mới [1], [3], [14], [18]

Hệ nhóm máu ABO có bốn nhóm máu chính là nhóm A, B, AB và O Bốn nhóm máu này được nhận biết dựa vào sự có mặt hoặc không có mặt của kháng nguyên A,

B trên bề mặt hồng cầu và sự có mặt hoặc không có mặt của kháng thể chống A, chống B trong huyết thanh Kháng nguyên của hệ nhóm máu ABO thường xuất hiện sớm vào khoảng tuần thứ năm sau khi thụ thai Kháng thể chống A và chống B thường là kháng thể tự nhiên có bản chất là IgM, thích hợp hoạt động ở 4°C, xuất hiện sau khi sinh, tăng dần hiệu giá và đạt cực đại vào 5-10 tuổi, không qua được hàng rào nhau thai, không bao giờ có trong huyết thanh của cá thể khỏe mạnh mà có kháng nguyên tương ứng trên bề mặt hồng cầu Kháng thể chống A và chống B cũng có thể là kháng thể miễn dịch, có bản chất là IgG, thích hợp hoạt động ở 37°C, được hình thành qua một quá trình đáp ứng miễn dịch do tiếp xúc với kháng nguyên của hệ ABO gặp trong trường hợp bất đồng nhóm máu giữa mẹ và con, truyền máu không hòa hợp hệ ABO, các kháng thể này có thể lọt qua hàng rào nhau thai, có khả năng kết hợp với bổ thể và gây tan máu trong lòng mạch [1], [8], [14], [18], [22] Ngoài bốn nhóm máu chính đã được phát hiện ở trên, năm 1911 Von Dungerm

và Hirszfeld đã phát hiện nhóm máu A gồm có hai loại khác nhau là A1 và A2 Nhóm máu A2 thường gặp hơn ở người Châu Âu ( khoảng 20%), trong số những người có nhóm máu A2 thì có 1-8 % là có kháng thể tự nhiên chống lại hồng cầu A1

và 35% người có nhóm A2B có kháng thể tự nhiên chống lại hồng cầu A1 [1], [3] Cho đến nay người ta đã phát hiện được khá nhiều trường hợp dưới nhóm của nhóm A và nhóm B (Bảng 1.1 và 1.2) với những đặc điểm sau: [1], [3], [30], [34], [44], [47], [49], [57]

Bảng 1-1 Đặc điểm huyết thanh học của một số trường hợp dưới nhóm A

Phản ứng của Hồng cầu với KT trong có huyết thanh Dưới

nhóm Anti A Anti (A+B) Anti A

1 Anti H Anti A Anti A 1

Chất tiết trong nước bọt

Bảng 1-2 Đặc điểm huyết thanh học của một số trường hợp dưới nhóm B

Phản ứng của Hồng cầu với KT trong có huyết thanh

Dưới

nhóm Anti B Anti (A+B) Anti H Anti A Anti A

1 Anti B

Chất tiết trong nước bọt

Mức độ ngưng kết: ++++: Rất mạnh; +: Yếu; (+): Rất yếu; [M]: hai quần thể hồng cầu

Tại Viện Huyết học Truyền máu trung ương trong những năm qua chúng tôi cũng

gặp hai bệnh nhân có nhóm máu Ax, một trường hợp bệnh nhân có nhóm máu Aint

cả ba trường hợp này trong huyết thanh của bệnh nhân đều có kháng thể tự nhiên

chống lại hồng cầu A1 và một bệnh nhân có nhóm Ael [1], [3]

Bảng 1-3 Tỷ lệ nhóm máu hệ ABO theo nghiên cứu một số tác giả

trong và ngoài nước

Tỷ lệ các nhóm máu hệ ABO (%) Tên nước, chủng tộc

45,0 44,5

28,3 29,9

5,44 5,4

Nhóm máu hệ ABO có tỷ lệ rất khác nhau tùy thuộc vào nước, chủng tộc và các

khu vực khác nhau trên thế giới [4], [6], [10], [11] (Bảng 1-3)

1.1.2 Hệ nhóm máu Rhesus (Rh):

Năm 1939, Levine và Stetson đã phát hiện một kháng thể bất thường trong huyết

thanh của một sản phụ có con bị bệnh vàng da tan máu, kháng thể này ngưng kết

với hồng cầu của cha và con nhưng không làm ngưng kết hồng cầu của mẹ [30],

[34], [44]

Năm 1940, Karl Lansteiner và Wiener miễn dịch lợn và thỏ bằng hồng cầu khỉ

Rhesus và đã thu được một kháng thể mà gây ngưng kết với khoảng 85% hồng cầu

người da trắng và họ đã gọi tên yếu tố đó là Rhesus (Viết tắt là Rh), Wiener và

Peters cũng đã nhận xét sự xuất hiện kháng thể Rh (D) ở những bệnh nhân Rh (D)

âm mà đã nhận máu Rh (D) dương Tuy nhiên người được công nhận phát hiện ra

kháng nguyên D của hệ Rh là Levine và cộng sự (1939-1940) [3], [30], [34], [44]

Năm 1941, thêm ba kháng nguyên của hệ Rh được phát hiện là C, E, c bởi

Wiener, Race và Levine Năm 1945, Mourant phát hiện thêm kháng nguyên e của

hệ Rh Bảng 1.4 dưới đây trình bầy các kháng nguyên của hệ Rh và các đặc tính của

chúng [1], [3], [28], [30], [34], [44]

Bảng 1-4 Một số kháng nguyên của hệ Rh và các tên gọi khác nhau

Bằng số ISBT Wiener Fisher

và Race

Tỷ lệ người Châu Âu

Bằng số ISBT Wiener Fisher

và Wiener

Tỷ lệ ở người Châu

Âu

RH1 004001 Rh o D (Rh 0 ) 85 RH11 0040011 rh w2 E w

RH2 004002 rh’ C 70 RH12 0040012 rh G G <1 RH3 004003 rh“ E 30 RH13 0040013 Rh A 85 RH4 004004 hr C 80 RH14 0040014 Rh B 85 RH5 004005 hr“ e 98 RH15 0040015 Rh C 85 RH6 004006 hr Ce 64 RH16 0040016 Rh D 85 RH7 004007 rh i Ce(f) 70 RH17 0040017 Hr o 85 RH8 004008 rh w1 C W 2 RH18 0040018 Hr 100 RH9 004009 rh x C x <1 RH19 0040019 Hr S 100 RH10 0040010 hr V V(ce s ) (2) RH20 0040020 VS (e s ) 98

Cho đến nay khoảng 50 kháng nguyên của hệ Rh đã được phát hiện, tuy nhiên 5

kháng nguyên quan trọng nhất của hệ Rh vẫn là D, C, c, E, e tương ứng với 6 gen là

D, d, C, c, E, e Gen d chỉ được giả định trên lý thuyết vì người ta chưa phát hiện

được cấu trúc của kháng nguyên d, cũng như kháng thể chống d [1], [4], [17], [25],

[30], [34], [44]

Kháng thể của hệ Rh hầu hết là kháng thể miễn dịch có bản chất là IgG,

chúng có thể lọt qua hàng rào nhau thai Kháng thể tự nhiên của hệ Rh rất hiếm,

người ta có thể gặp người có kháng thể IgM chống E nhưng với tỷ lệ rất thấp

Kháng thể của hệ Rh được sinh ra do quá trình miễn dịch bởi các kháng nguyên của

hệ Rh gặp ở người có nhóm máu Rh âm nhận máu Rh dương hoặc do bất đồng

nhóm máu mẹ con hệ Rh, mẹ có nhóm máu Rh âm và con có nhóm máu Rh dương

Kháng thể quan trọng nhất có ý nghĩa trên lâm sàng của hệ Rh là kháng thể D [2],

[3], [5], [6], [8], [9], [30], [34], [44]

1.1.3 Hệ nhóm máu Kell:

Hệ Kell là một hệ thống nhóm máu khá phức tạp Năm 1946, nhà bác học

Coombs và cộng sự đã phát hiện một kháng thể lạ có trong huyết thanh của một sản

phụ sinh con bị vàng da, kháng nguyên tương ứng với kháng thể này được ông đặt

tên là Kell (viết tắt là K), đây cũng là kháng nguyên đầu tiên của hệ Kell được phát

hiện Năm 1949, Levine và cộng sự phát hiện ra kháng nguyên Cellano (viết tắt là

k) và kháng thể của nó Năm 1957, Allen, Chown và cộng sự phát hiện thêm ba

kháng nguyên của hệ Kell là Kpa, Kpb và Kpo Năm 1958, kháng nguyên Jsa được

phát hiện bởi Giblett và kháng nguyên Jsb được Walker phát hiện năm 1963 Cho

đến nay người ta đã phát hiện được 23 kháng nguyên khác nhau của hệ Kell, bảng

1.5 dưới đây cho biết một số kháng nguyên của hệ Kell, tên gọi và tần suất xuất

hiện gặp tại một số vùng, nước [1], [3], [30], [34], [38], [44]

Bảng 1-5 Một số kháng nguyên của hệ Kell và các tên gọi theo ISBT

ISBT Kháng

nguyên

Ca bệnh đầu tiên

Tần suất xuất hiện (người Châu Âu)

Tần suất xuất hiện (người Việt Nam 2006)

Năm phát hiện

Kháng nguyên K có mặt khoảng 10% ở người da trắng, hiếm gặp ở người da

đen, da vàng, người Mỹ và Mông Cổ Kháng nguyên Jsa gặp 19,5% ở người da đen,

UI a gặp 2,6% ở người Phần Lan, trong khi đó hai kháng nguyên này chỉ gặp dưới 1% ở người Châu Âu [1], [3], [30], [34], [44]

Hệ thống Kell cũng đóng một vai trò rất quan trọng trong thực hành truyền máu, chỉ sau hệ ABO và Rh do các kháng thể miễn dịch chống K phản ứng rất mạnh với hồng cầu mang kháng nguyên K và gây tan máu trong lòng mạch khi truyền máu không hòa hợp Kháng thể miễn dịch chống K cũng là nguyên nhân gây vàng da tan máu ở trẻ sơ sinh do bất đồng nhóm máu mẹ con Kháng thể của hệ Kell có bản chất là IgG có thể lọt qua hàng rào nhau thai Trong một số trường hợp kháng thể chống K được sinh ra do kháng nguyên của vi khuẩn giống như kháng nguyên K [1], [3], [30], [34], [44]

1.1.4 Hệ nhóm máu Duffy

Năm 1950, kháng nguyên đầu tiên của hệ Duffy là Fya đã được Cutbush và cộng sự phát hiện, một năm sau Ikin đã phát hiện ra kháng nguyên Fyb Ở người da trắng có 3 kiểu hình thường gặp của hệ Duffy là Fy (a+b-), Fy (a+b+), Fy (a-b+) Tiếp theo bốn kháng nguyên khác của hệ Duffy là Fy3, Fy4, Fy5, Fy6 lần lượt được phát hiện bởi Albrey (1971), Harris (1970), Colledge (1973) và Nichols (1987) Cho đến nay người ta đã phát hiện được thêm 6 kháng nguyên khác nhau của hệ Duffy Kháng thể của hệ Duffy thường được sinh ra do phản ứng truyền máu, có bản chất

là IgG và có thể gây tan máu trong lòng mạch Bảng 1.6 dưới đây cho biết các kháng nguyên của hệ Duffy, tên gọi, tần suất xuất hiện cũng như kiểu hình thường gặp, hiếm gặp tại một số vùng, nước [1], [3], [20], [30], [34], [44]

Bảng 1-6 Các kháng nguyên của hệ Duffy và các tên gọi theo ISBT

ISBT Kháng nguyên Ca bệnh đầu tiên Tần suất xuất hiện

(người Châu Âu)

1.1.5 Hệ nhóm máu MNSs

Hệ nhóm máu MNS được Landsteiner và Levine phát hiện năm 1927 bao gồm 2 kháng nguyên là M và N Năm 1947, Walsh và Montgomery phát hiện kháng

thể S; năm 1951, Levine và cộng sự phát hiện kháng thể chống s Cho đến nay có

46 kháng nguyên của hệ MNS đã được phát hiện (Bảng 1-7), tuy nhiên bốn kháng nguyên hay gặp nhất của hệ MNS là: M, N, S, s [1], [3], [30], [34], [44]

Hệ thống MNS chỉ đứng thứ hai sau hệ thống nhóm máu Rh với 46 kháng nguyên khác nhau, các kháng nguyên này đã được công nhận bởi Hội truyền máu quốc tế Kháng nguyên của hệ MNS được mã hoá bởi 2 gen đồng hợp tử cao là GYPA và GYPB, nằm sát ngay trên nhiễm sắc thể số 6 Sinh học phân tử cho thấy

tính đa dạng của các kháng nguyên trong hệ thống nhóm máu này là do biến đổi các

nucleotid làm tăng tái tổ hợp protein glycoporine A và B [1], [30], [34]

Đặc tính của các kháng thể của hệ MNS cũng rất khác nhau phụ thuộc vào tính sinh miễn dịch của từng kháng nguyên, kháng thể chống M, N thường có bản

chất IgM, không gắn với bổ thể, hiếm khi gây tan máu ở trẻ sơ sinh do bất đồng

nhóm máu mẹ con, nhưng có thể gây tai biến truyền máu Trong khi đó kháng thể

chống S, s hầu hết có bản chất là IgG, có thể gây tan máu do bất đồng nhóm máu

mẹ con và truyền máu [1], [3], [30], [34], [44]

Bảng 1-7 Một số kháng nguyên của hệ MNSs và các tên gọi theo ISBT

Tên gọi

theo

ISBT

Tên kháng nguyên

Tên gọi cũ Tên gọi

theo ISBT

Tên kháng nguyên

1.1.6 Hệ nhóm máu Lewis

Kháng thể đầu tiên của hệ thống nhóm máu Lewis là kháng thể Lea đã được

Mourant mô tả vào năm 1946 Năm 1948, Andresen mô tả kháng thể Leb, hai kháng

nguyên tương ứng với hai kháng thể này tạo nên các kiểu hình của hệ thống nhóm

máu Lewis là: Le (a+ b-), Le (a- b+), Le (a+b+) Kiểu hình Le (a+b+) dường như rất

hiếm gặp ở người Châu Âu, nhưng lại gặp nhiều hơn ở người Nhật Bản, Đài Loan

Các kháng nguyên nhóm máu hệ Lewis không được sinh tổng hợp từ tế bào hồng

cầu, các kháng nguyên này được tạo ra bởi các tế bào của tổ chức và được tiết vào

các dịch của cơ thể và huyết tương, sau đó được hấp thụ lên trên màng hồng cầu

Kháng nguyên Lewis có trong dịch tiết của cơ thể có bản chất là glucoproteins, các

kháng nguyên Lewis có mặt trong huyết tương được gắn lên trên bề mặt hồng cầu

có bản chất là glucolipids Kháng thể của hệ Lewis thường có bản chất là IgM, có

khả năng gắn được với bổ thể nhưng thuộc loại kháng thể không có ý nghĩa trên lâm

sàng [1], [3], [30], [34], [44], [58]

1.1.7 Một số hệ thống nhóm máu khác

Ngoài các hệ thống nhóm máu kể trên, hiện nay đã có tất cả 29 hệ nhóm máu

hồng cầu với 285 kháng nguyên khác nhau đã được Hội Truyền máu quốc tế công

nhận như: Hệ Lutheran, I và i, Diego, Cromer, Lansteiner-Winener, Gerbich,

Dombrock, Yt, Indian, Knops, Xg, Colton, OK, JMH …, các hệ thống nhóm máu

này có đặc điểm khá đặc biệt, ví dụ như hệ nhóm máu Xg thường gặp với tần số cao

ở nữ nhiều hơn ở nam Hệ Cromer có 7 kháng nguyên xuất hiện với tần số cao và 3

kháng nguyên xuất hiện với tần số thấp gặp ở người Châu Âu (Bảng 1-8) [1], [3],

[30], [34], [44], [58]

Bảng 1-8 Một số kháng nguyên của hệ nhóm máu Cromer

Kháng nguyên Phân loại theo ISBT Tần xuất gặp ở Châu Âu

Các kháng nguyên được xếp vào nhóm đa ngưng kết như T, Tk, Th có một

mối liên quan chặt chẽ với một số bệnh, theo tác giả Springer, 1997 qua nghiên cứu

theo dõi dọc 48 bệnh nhân nghi ngờ bị ung thư cho thấy có 37 (77%) bệnh nhân có kháng thể chống T dương tính, trong khi kết quả X quang/ sinh thiết của những bệnh nhân này vẫn cho kết quả âm tính, tác giả đã tiếp tục theo dõi kháng thể chống

T trong huyết thanh của bệnh nhân với khoảng thời gian từ 2-12 năm trước khi các kết quả sinh thiết/ X quang trở nên dương tính Như vậy xác định kháng thể chống

T có thể cho kết quả chẩn đoán sớm một số loại ung thư Tỷ lệ kháng thể chống T gặp trong một số loại ung thư như sau: Ung thư phổi có 85% bệnh nhân dương tính với kháng thể chống T, ung thư tụy có 88% bệnh nhân dương tính với kháng thể chống T và ung thư bàng quang là 83% [1], [3], [30], [34], [44], [58]

Hiện nay, kỹ thuật sinh học phân tử đã và đang được áp dụng một cách rộng rãi trong lĩnh vực y học để chẩn đoán và điều trị bệnh Kỹ thuật sinh học phân tử cũng nhanh chóng được áp dụng trong việc nghiên cứu về cấu trúc kháng nguyên nhóm máu hệ hồng cầu Nhờ những tiến bộ của ngành khoa học mới này mà chúng

ta đã có thêm những hiểu biết mới về kháng nguyên và nhóm máu hệ hồng cầu Các hiểu biết này rất cần thiết vì đây chính là cơ sở khoa học giúp chúng ta có thể đề ra các biện pháp thích hợp để đảm bảo an toàn truyền máu về mặt miễn dịch tại Việt Nam [1], [3], [30], [34], [44], [58]

Tính đa dạng của các kháng nguyên nhóm máu và các hệ nhóm máu hồng cầu ở trên đã cho thấy nếu chúng ta không thực hiện xét nghiệm sàng lọc kháng thể bất thường cho bệnh nhân trước khi truyền máu thì vấn đề an toàn truyền máu về mặt miễn dịch vẫn chưa được thực hiện một cách đầy đủ

1.2 Ngân hàng người cho máu có nhóm máu hiếm

Ngân hàng người hiến máu với những nhóm máu hiếm đã được Hội Truyền máu Quốc tế đề cập từ những năm 1966, cho đến nay vẫn tiếp tục được duy trì và đã phát triển được trên 4.000 người hiến máu tại 60 ngân hàng máu ở 26 quốc gia Chương trình này đặc biệt phát triển ở Anh và đã có bề dầy trên 30 năm, tại đây họ

có chương trình sàng lọc để lựa chọn người hiến máu có nhóm máu hiếm và cũng là nơi cung cấp đầy đủ các nhóm máu hiếm cho bệnh nhân khi cần Chương trình ngân hàng máu hiếm cũng được thực hiện tại Mỹ, Nhật, Trung Quốc, Nam Phi và một số nước thuộc khu vực Châu Âu Tại Nhật Bản người ta đã cung cấp nhiều người hiến máu có nhóm máu rất hiếm cho Hội Truyền máu quốc tế như Di(a+b-); Jr (a-); D /D và Ko [32], [40], [42], [45], [46], [52], [53], [55], [59], [61], [62]

Tại Mỹ, từ năm 1960 đến 1998 đã có hai chương trình nghiên cứu và xác định những người hiến máu có nhóm máu hiếm để phục vụ kịp thời cho những bệnh nhân khi cần truyền máu Năm 1998, hai chương trình này được hợp nhất thành một

và lấy tên là chương trình người hiến máu có nhóm máu hiếm Mỹ, đến nay chương

trình này đã có danh sách của 35.000 người hiến máu có nhóm máu hiếm Những người hiến máu này được quản lý và họ được liên hệ 2 lần/ năm để đảm bảo khi họ

có những thay đổi về địa chỉ và điện thoại chương trình sẽ được thông báo và thuận tiện cho việc liên hệ khi cần thiết Các kháng nguyên hiếm thường gặp tại Mỹ là U- (17%); Di (b-) (7%), Vel- (4%); Kpb- (3%), Jsb- (7%), Yt(a-) (3%) [32], [40], [42], [45], [46], [52], [53], [55], [59], [62]

Tại Nam Phi, ngân hàng máu hiếm được thiết lập từ năm 1977 Những nhóm máu hiếm thường gặp tại Nam Phi là nhóm máu Bombay Oh, k-, Kpb-, Lub- Tại Nam Phi một giàn hồng cầu của người hiến máu có nhóm máu hiếm được đồng quản lý giữa phòng thí nghiệm tham chiếu về miễn dịch huyết học và dịch vụ truyền máu Nam Phi tại Durban Nhóm máu hiếm được cung cấp theo yêu cầu Có một trung tâm bảo quản các đơn vị máu hiếm trong điều kiện đông lạnh với 22 loại nhóm máu hiếm của 18 hệ thống nhóm máu khác nhau Muốn duy trì ngân hàng máu hiếm thì việc sàng lọc những người hiến máu hiện tại để lựa chọn ra những người có nhóm máu hiếm là rất cần thiết [52], [62]

Tại Đài Loan, qua khảo sát 10.000 người hiến máu mới phát hiện được một người có nhóm máu Jk (a-b-), nhóm máu D- chiếm khoảng 4%, hiện tại Đài Loan

có 2.500 người hiến máu có nhóm máu Rh (D) âm và đang được quản lý [55] Tại Việt Nam, tác giả Bạch Quốc Tuyên (1984), Bùi Thị Mai An (2006) qua nghiên cứu một số nhóm máu của hệ hồng cầu của người Việt Nam cũng cho thấy các nhóm máu hiếm thường gặp ở người Việt Nam là D-, Fyb +, K+, k-, P1+, Lub-, S+, s-, Kpa+, Kpb- [3], [17]

Việc xác định các nhóm máu hiếm sẽ góp phần để xây dựng một giàn panel hồng cầu với đầy đủ các kháng nguyên cả hiếm và thường gặp để xác định kháng thể bất thường

1.3 Xây dựng Panel hồng cầu để sàng lọc kháng thể bất thường đảm bảo

an toàn truyền máu

Panel hồng cầu là một giàn kháng nguyên hồng cầu của những người có nhóm máu O mà trên mỗi hồng cầu đó đã được xác định chính xác các kháng nguyên của một số hệ nhóm máu hồng cầu Kháng nguyên trên các hồng cầu này sẽ phát hiện được một hoặc nhiều kháng thể chống lại các kháng nguyên có trên bề mặt hồng cầu

Số lượng các hồng cầu được lựa chọn để xây dựng panel sàng lọc kháng thể bất thường là không hằng định, tuy nhiên thường được xây dựng từ 2- 3 hồng cầu, điều quan trọng là những hồng cầu này phải mang tối đa các kháng nguyên, đặc biệt là

những kháng nguyên hiếm gặp với mục đích là để phát hiện được đầy đủ các kháng thể bất thường có trong huyết thanh của bệnh nhân và người cho máu

Để xây dựng được panel hồng cầu sàng lọc kháng thể bất thường trước hết cần xác định tần suất xuất hiện kháng nguyên của các hệ nhóm máu hồng cầu ở trong một quần thể để xác định các kháng nguyên có tần suất hiện hiện thấp hay cao Tác giả Giblett (1961) đã xây dựng một công thức để xác định tần suất gây miễn dịch của các kháng nguyên nhóm máu hệ hồng cầu với mục đích để xác định các kháng nguyên cần thiết phải có mặt trong panel hồng cầu như sau:

Tần suất gây miễn dịch = Tỷ lệ dân mang kháng nguyên x tỷ lệ dân không mang kháng nguyên, từ công thức này có thể tính ra:

- Vùng kháng nguyên ít tạo KTBT khi tần suất xuất hiện kháng nguyên trong quần thể là 100% hoặc từ 0-4,9%

- Vùng kháng nguyên thuận lợi tạo KTBT khi tần suất xuất hiện kháng nguyên nằm trong khoảng: 90-99% và 5-29%

- Vùng kháng nguyên dễ tạo KTBT nhất khi tần suất xuất hiện kháng nguyên nằm trong khoảng 30-89%

Trên thực tế và qua nhiều nghiên cứu người ta thấy rằng có nhiều kháng nguyên nhóm máu được xuất hiện hoặc với tần suất thấp hoặc với tần suất cao Mỗi dân tộc, quốc gia khác nhau thì tần suất các kháng nguyên này cũng xuất hiện khác nhau Khi một người có các kháng nguyên xuất hiện với tần suất cao cần truyền máu thì việc cung cấp máu ít gặp trở ngại nhưng khi một người có kháng nguyên nhóm máu xuất hiện với tần suất thấp thì việc có máu để điều trị là rất khó khăn, do vậy tại mỗi quốc gia cần thiết phải xây dựng một giàn hồng cầu riêng để kịp thời cung cấp cho người bệnh khi cần truyền máu và xây dựng panel hồng cầu để triển khai xét nghiệm sàng lọc kháng thể bất thường nhằm đảm bảo cung cấp máu kịp thời và an toàn cho người bệnh [45], [46]

Tại các nước tiên tiến ở Châu Âu và Châu Mỹ, việc xây dựng panel hồng cầu để sàng lọc kháng thể bất thường, ngăn cản các tai biến truyền máu do kháng thể đồng loài đã được thực hiện rất sớm từ những năm của thập kỷ 70 [37] Các kỹ thuật sàng lọc kháng thể bất thường lúc đầu được thực hiện trong môi trường nước muối ở nhiệt độ phòng thí nghiệm và 37°C, sau đó được thực hiện trong môi trường kháng globuline và tiếp tục được cải tiến và được thực hiện trong môi trường kháng globuline với dung dịch có lực ion thấp (Rút ngắn thời gian ủ) để phát hiện các kháng thể đồng loài [27], [30], [31], [33], [35], [39], [43], [48]

1.3.1 Xây dựng Panel hồng cầu và sàng lọc kháng thể bất thường trên thế giới

Hầu hết các nước trên thế giới hiện nay đã thực hiện xét nghiệm sàng lọc kháng thể bất thường một cách thường quy cho cả bệnh nhân và người cho máu, panel hồng cầu được sử dụng cho việc sàng lọc và xác định bản chất của các kháng thể bất thường là do các hãng sản xuất mang tính chất thương mại, mang tính đặc thù cho từng vùng mà lại được bán với giá thành khá cao Hơn nữa, do việc bảo quản các mẫu máu này chỉ giới hạn trong thời gian 3-4 tuần vì vậy việc cung cấp panel hồng cầu này này một cách đầy đủ và kịp thời là rất khó thực hiện, chính vì vậy mỗi quốc gia thường xây dựng riêng cho nước mình một giàn hồng cầu với các kháng nguyên đặc thù để sàng lọc kháng thể bất thường và thuận tiện để phân phối cho các trung tâm truyền máu trên phạm vi toàn quốc Kể cả phương án sản xuất mang tính chất thương mại hoặc sản xuất tại từng quốc gia thì panel hồng cầu được sử dụng để sàng lọc kháng thể bất thường bắt buộc bao gồm kháng nguyên của các hệ nhóm máu: Rh, Kell, Duffy, Lewis, Kidd, MNS, Lutheran, Xg [9], [19], [23], [24], [26], [27], [30], [35], [36], [37], [39], [41], [44], [51]

1.3.2 Xây dựng Panel hồng cầu và ứng dụng để sàng lọc kháng thể bất thường cho bệnh nhân và người cho máu tại Việt nam

Ngay từ thập kỷ 80, tác giả Bạch Quốc Tuyên đã phối hợp với ngân hàng quốc gia Pháp nguyên cứu khảo sát các kháng nguyên nhóm máu hệ hồng cầu của 60 nhân viên y tế làm tại bệnh viện bạch Mai (Chủ yếu là người có nhóm máu O) để xây dựng panel hồng cầu sàng lọc kháng thể bất thường, tuy nhiên do số người có nhóm máu O đồng ý cho panel chỉ có khoảng 30 người và hầu hết những người này cho đến nay đã nghỉ hưu, bên cạnh đó việc xác định các kháng nguyên một số hệ nhóm máu hồng cầu chưa được đầy đủ (Thiếu hồng cầu của những người có kháng nguyên D âm, Fyb +, S+) Cũng do những người cho panel này là nhân viên y tế

mà không phải là người hiến máu nên mỗi lần lấy hồng cầu để làm panel cũng rất khó khăn vì không lấy được một lượng máu lớn (Thường lấy hồng cầu làm panel dưới dạng máu chứng), do vậy khi muốn sản xuất với số lượng lớn hồng cầu panel

để cung cấp cho các cơ sở truyền máu trong toàn quốc để triển khai kỹ thuật sàng lọc kháng thể bất thường là rất khó thực hiện [17]

Tại Việt Nam đã có một số tác giả như Đỗ Trung Phấn, Bùi Thị Mai An (2004), nghiên cứu về tần suất xuất hiện kháng nguyên của một số hệ nhóm máu hồng cầu của người Việt Nam bình thường giai đoạn 1995-2000, tác giả Nguyễn Thị Thanh Mai (2005) cũng đã khảo sát tần suất xuất hiện một số kháng nguyên nhóm máu ở các cặp bố, mẹ của bệnh nhi bị bệnh thiếu máu tan máu [13] Việc xây dựng panel

hồng cầu để sàng lọc kháng thể bất thường cũng đã được tác giả Đỗ Mai Dung (2004) triển khai nghiên cứu tại Bệnh viện Việt Đức nhưng với số lượng người cho máu nhóm O chỉ hạn chế là 120 người nên việc sản xuất panel hồng cầu để sàng lọc kháng thể cũng mới chỉ dừng ở mức độ nghiên cứu Do vậy, trong nghiên cứu này với cỡ mẫu lớn hơn (Khoảng 1.000 người cho máu nhóm O) chúng tôi sẽ dễ dàng chọn được những người cho máu với đầy đủ các kháng nguyên để xây dựng được giàn panel hồng cầu hoàn chỉnh và đưa xét nghiệm sàng lọc kháng thể bất thường vào thực hiện thường quy cho cả người cho máu và bệnh nhân để bảo đảm an toàn truyền máu về mặt miễn dịch Giàn hồng cầu sử dụng để làm panel hồng cầu sàng lọc kháng thể bất thường được bao gồm kháng nguyên của tám hệ nhóm máu hồng cầu: Rh, Kell, Duffy, Lewis, Kidd, MNS- Mia, Lutheran và P [4], [6], [8], [9]

1.4 Các kỹ thuật sàng lọc kháng thể bất thường

Việc nghiên cứu về kháng thể bất thường của nhóm máu hệ hồng cầu đã được nhiều tác giả đề cập từ thập kỷ 60, 70 các tác giả này cho rằng có khoảng từ 1-3 % các cá thể sẽ sinh ra kháng thể bất thường do quá trình thai ngén hoặc sau khi nhận máu, tại thời điểm đó tác giả Peter (1970) cũng đã đề cập việc sàng lọc kháng thể bất thường phải được thực hiện cho cả người hiến máu và bệnh nhân bằng kỹ thuật ngưng kết trong ống nghiệm và giàn hồng cầu sử dụng để sàng lọc kháng thể bất thường phải bao gồm các kháng nguyên của các hệ nhóm máu sau: Hệ Rh, Kell, Duffy, Kidd, Lewis, MNS [44]

Hiện nay, trên thế giới người ta đã áp dụng nhiều kỹ thuật khác nhau để sàng lọc kháng thể bất thường cho bệnh nhân và người cho máu như: Kỹ thuật ngưng kết trong ống nghiệm, kỹ thuật ngưng kết trong phiến nhựa trên hệ thống máy tự động,

kỹ thuật gelcard, tùy theo điều kiện kinh tế của từng nước mà người ta có thể áp dụng một trong các kỹ thuật trên hoặc phối hợp nhiều kỹ thuật với nhau Các nước tiên tiến hiện nay thường dùng kỹ thuật ngưng kết trong phiến nhựa và kỹ thuật gelcard trên hệ thống máy tự đông [26], [27], [30], [31], [33], [35], [36], [37]

Tại Việt nam, kỹ thuật được sử dụng nhiều nhất là kỹ thuật ngưng kết trong ống nghiệm và việc sàng lọc kháng thể bất thường cho người cho máu và bệnh nhân chưa được thực hiện một cách thường quy mà mới chỉ dừng ở mức nghiên cứu Kỹ thuật ngưng kết trong phiến nhựa trên hệ thống máy miễn dịch tự động chưa được

áp dụng tại nước ta, tại một số trung tâm lớn kỹ thuật sàng lọc bằng kỹ thuật gelcard

đã bắt đầu được áp dụng

Tác giả Bùi Thị Mai An (1995), Nguyễn Thị Thu Hà (1999) đã tiến hành nghiên cứu tỷ lệ kháng thể bất thường ở người cho máu và nhận máu nhiều lần bằng panel hồng cầu được sản xuất tại Viện Huyết học Truyền máu

Qua phần tổng quan ở trên cho thấy việc khảo sát tần suất xuất hiện kháng nguyên của các hệ nhóm máu hồng cầu là cần thiết để xây dựng panel hồng cầu tại viện Huyết học Truyền máu trung ương

Sử dụng panel hồng cầu được xây dựng tại Viện Huyết học Truyền máu TW để triển khai kỹ thuật sàng lọc kháng thể bất thường một cách thường quy cho người cho máu và bệnh nhân là cần thiết để nâng cao chất lượng an toàn truyền máu về mặt miễn dịch

2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 Đối tượng nghiên cứu

- 1026 người hiến máu nhóm O đến cho máu tại Viện Huyết học Truyền máu

TW từ 2004- 2007 được xác định kháng nguyên các nhóm máu hệ hồng cầu cụ thể như trong bảng 2.1

- Cỡ mẫu để xác định các kháng nguyên nhóm máu là cỡ mẫu thuận tiện tùy theo số lượng của từng loại kháng huyết thanh để xác định kháng nguyên nhóm máu hệ hồng cầu được viện trợ từ Tổ chức y tế thế giới (WHO)

Bảng 2-1 Đối tượng nghiên cứu

Tên các kháng nguyên

và số mẫu được xác

định Tên xét nghiệm

Tên KN Số mẫu XN

Đối tượng Nghiên cứu

Tổng số mẫu nghiên cứu

Xác định kháng

nguyên hệ Kell

Kpb 744 Fya 90

Xác định kháng

nguyên hệ Lutheran Lub 743

501 Bệnh nhân bệnh máu

Sàng lọc kháng thể

601

2.2 Phương pháp nghiên cứu:

2.2.1 Thiết kế nghiên cứu và sơ đồ nghiên cứu theo mục tiêu:

- Thiết kế nghiên cứu : Nghiên cứu mô tả cắt ngang

- Sơ đồ nghiên cứu theo mục tiêu

Sơ đồ 2-1 Sơ đồ nghiên cứu theo mục tiêu

2.2.2 Vật liệu nghiên cứu và sinh phẩm:

1 Kháng huyết thanh hệ Rh, Kell, Duffy, Kidd, M, N, S, s, P, Lutheran của Hãng BIO-RAD và DIA- MED

Người hiến máu tại viện huyết học Truyền máu TW (2004-2007)

(

Lấy máu để xác định các KN nhóm máu hệ hồng cầu

Đủ tiêu chuẩn hiến máu

Xác định tần suất xuất hiện các KN nhóm máu hệ

Rh, Kell, Duffy, Kidd, Lewis, Lutherran, MNSs, P1,

Sử dụng panel hồng cầu để sàng lọc kháng thể bất thường

Mục tiêu 2: Bước đầu ứng dụng panel hồng cầu của Viện Huyết học Truyền máu Trung ương để sàng lọc KTBT cho người hiến máu và bệnh nhân

2 Kháng huyết thanh hệ Mia của trung tâm truyền máu Đài Loan và Singapore

3 Enzyme Papain của Hãng BIO- RAD

4 Gelcard để định nhóm máu k, Leb, Cw, M của hãng DIA- MED

5 Dung dịch treo hồng cầu để làm phương pháp Gelcard của BIO-RAD và DIA-MED

6 Gelcard Coombs/Liss, gelcard môi trường nước muối, huyết thanh Coombs, đệm Liss của hãng BIO-RAD và DIA-MED

2.2.3 Các bước tiến hành nghiên cứu

2.2.3.1 Lựa chọn người hiến máu để xác định các kháng nguyên nhóm máu

hệ hồng cầu:

Người hiến máu được chọn để lấy mẫu máu nghiên cứu phải đạt được các tiêu chuẩn sau:

- Có đủ tiêu chuẩn để hiến máu theo quy định của “Quy chế truyền máu”;

- Không bị nhiễm các bệnh nhiễm trùng truyền qua đường máu: HIV, HBV, HCV, giang mai, sốt rét;

- Những người hiến máu này được tư vấn, giải thích về ý nghĩa nhân đạo và cần thiết của việc nghiên cứu;

- Là những người tình nguyện, đồng ý sẽ hiến máu nhiều lần trong tương lai

2.2.3.2 Lấy mẫu máu để tiến hành nghiên cứu:

Lấy 2 ml máu tĩnh mạch vào một ống nghiệm sạch, chuyên dụng có chứa sẵn chất chống đông bằng EDTA Lắc đều để máu không bị đông dây

2.2.3.3 Xác định kháng nguyên nhóm máu hệ hồng cầu bằng các kỹ thuật:

a/ Kỹ thuật ngưng kết trong ống nghiệm để xác định kháng nguyên của hệ nhóm máu Rh (D, C, c, E, e):

- Bước 1: Nhỏ 1 giọt kháng huyết thanh của hệ Rh (Hoặc anti D, anti C, Anti c, Anti

E, anti e) vào một ống nghiệm đã được dán nhãn;

- Bước 2: Thêm 1 giọt hồng cầu 5% cần định nhóm vào ống nghiệm trên;

- Bước 3: Trộn đều ống nghiệm;

- Bước 4: Ly tâm 1000 vòng/phút trong vòng 15-30 giây;

- Bước 5: Nhận định kết quả

+ Phản ứng ngưng kết: có kháng nguyên D, C, c, E, e trên bề mặt hồng cầu

+ Phản ứng không ngưng kết: Không có kháng nguyên D, C, c, E, e trên bề mặt hồng cầu;

- Bước 6: Nếu kết quả dương tính, nhỏ thêm 1 giọt Rh control, trộn đều và đọc kết quả

b/ Kỹ thuật ngưng kết trong ống nghiệm để xác định kháng nguyên Mia:

- Bước 1: Nhỏ 2 giọt Anti Mia vào một ống nghiệm đã được dán nhãn;

- Bước 2: Thêm 1 giọt hồng cầu 5% cần định nhóm vào ống nghiệm trên (Hồng cầu cần định nhóm đã được rửa 3 lần bằng nước muối 0,9 % và pha thành 5%);

- Bước 3: Trộn đều ống nghiệm;

c/ Kỹ thuật ngưng kết trong ống nghiệm để xác định kháng nguyên Lea:

- Bước 1: Nhỏ 2 giọt Anti Lea vào một ống nghiệm đã được dán nhãn;

- Bước 2: Thêm 1 giọt hồng cầu 5% cần định nhóm vào ống nghiệm trên;

- Bước 3: Trộn đều ống nghiệm;

+ Phản ứng không ngưng kết: Không có kháng nguyên Lea trên bề mặt hồng cầu

d/ Kỹ thuật ngưng kết trong ống nghiệm để xác định kháng nguyên Jka, Jkb, s, Lua, Lub, Fya, Kpa, Kpb:

- Bước 1: Nhỏ 2 giọt thuộc thử anti Jka (hoặc anti Jkb, anti s, anti Lua, anti Lub, anti Kpa, anti Kpb) vào một ống nghiệm đã dán nhãn;

- Bước 2: Thêm 1 giọt hồng cầu 5% cần định nhóm (Pha hồng cầu 5% trong đệm Liss);

- Bước 3: Trộn đều ống nghiệm;

- Bước 4: Ủ ống nghiệm trên ở 37˚C/15 phút;

- Bước 5: Rửa 3 lần bằng nước muối 0,9 %;

- Bước 6: Nhỏ 2 giọt kháng globulin (Loại IgG);

- Bước 7: Ly tâm 1000 vòng/ phút trong vòng 15-30 giây;

e/ Kỹ thuật gelcard để xác định kháng nguyên Fyb, S:

- Bước 1: Nhỏ 25 µl thuốc thử anti Fyb (hoặc anti S) vào một gelcard đã được ghi tên hoặc đánh số;

- Bước 2: Thêm 50 µl hồng cầu 1% cần định nhóm pha trong dung dịch scanliss;

- Bước 3: Ủ ống nghiệm trên ở 37˚C/15 phút bằng máy ủ chuyên dụng;

- Bước 4: Ly tâm 900 vòng/phút/10 phút bằng máy ly tâm chuyên dụng;

- Bước 5: Nhận định kết quả

+ Phản ứng ngưng kết: Có kháng nguyên Fyb (hoặc S) trên bề mặt hồng cầu

+ Phản ứng không ngưng kết: Không có kháng nguyên Fyb (hoặc S) trên bề mặt hồng cầu

e/ Kỹ thuật gelcard để xác định kháng nguyên k, Cw, Leb:

- Bước 1: Nhỏ 12 µl hồng cầu 5% cần định nhóm ( pha trong dung dịch scanliss) vào một gelcard đã có sẵn thuốc thử anti Leb (hoặc anti k và anti Cw);

- Bước 2: Ly tâm 900 vòng/phút/10 phút bằng máy ly tâm chuyên dụng;

- Bước 3: Nhận định kết quả

+ Phản ứng ngưng kết: Có kháng nguyên k (hoặc Cw, Leb) trên bề mặt hồng cầu + Phản ứng không ngưng kết: Không có kháng nguyên k (hoặc Cw, Leb) trên bề mặt hồng cầu

f/ Kỹ thuật gelcard để xác định kháng nguyên M:

- Bước 1: Nhỏ 50 µl hồng cầu 1% cần định nhóm (pha trong dung dịch scanliss) vào một gelcard đã có sẵn thuốc thử anti M;

- Bước 2: Ủ ống nghiệm trên ở 22˚C/10 phút;

- Bước 3: Ly tâm 900 vòng/phút/10 phút bằng máy ly tâm chuyên dụng;

- Bước 4: Nhận định kết quả

+ Phản ứng ngưng kết: Có kháng nguyên M (hoặc Leb) trên bề mặt hồng cầu

+ Phản ứng không ngưng kết: Không có kháng nguyên M (hoặc Leb) trên bề mặt hồng cầu

g/ Kỹ thuật ngưng kết trên phiến kính xác định kháng nguyên N:

- Bước 1: Nhỏ 2 giọt thuộc thử anti N vào một ống nghiệm đã dán nhãn;

- Bước 2: Thêm 1 giọt hồng cầu 5% cần định nhóm;

- Bước 3: Trộn đều hồng cầu cần định nhóm và thuốc thử để có đường kính 2 cm, lắc liên tục và đọc kết quả trong vòng 3 phút;

- Bước 4: Nhận định kết quả bằng mắt thường

+ Phản ứng ngưng kết: Có kháng nguyên N trên bề mặt hồng cầu

+ Phản ứng không ngưng kết: Không có kháng nguyên N trên bề mặt hồng cầu

h/ Kỹ thuật gelcard để xác định kháng nguyên P1:

- Bước 1: Rửa hồng cầu cần định nhóm bằng nước muối 0,9% và xử lý bằng enzyme papain;

- Bước 2: Pha hồng cầu đã được xử lý enzyme papain thành dung dịch hồng cầu 1% trong dung dịch scanliss;

- Bước 3: Nhỏ 25 µl thuốc thử anti Fyb (hoặc anti S) vào một gelcard đã được ghi tên hoặc đánh số;

- Bước 4: Thêm 50 µl hồng cầu 1% cần định nhóm được xử lý enzyme papain đã pha ở trên;

- Bước 5: Ủ ống nghiệm trên ở 37˚C/20 phút bằng máy ủ chuyên dụng;

- Bước 6: Ly tâm 900 vòng/phút x 10 phút bằng máy ly tâm chuyên dụng;

- Bước 5: Nhận định kết quả

+ Phản ứng ngưng kết: Có kháng nguyên P1 (Fyb) trên bề mặt hồng cầu

+ Phản ứng không ngưng kết: Không có kháng nguyên P1 (Fyb) trên bề mặt hồng cầu

Các xét nghiệm trên được thực hiện tại khoa Huyết thanh học nhóm máu và sử dụng các trang thiết bị của khoa bao gồm: Máy ly tâm Kobuta của Nhật, máy rửa Coombs tự động Hitachi của Nhật, hệ thống máy ủ, ly tâm làm gelcard của hãng BIORAD và DIAMED, kính hiển vi Nikon của Nhật, tủ lạnh bảo quản sinh phẩm

và mẫu máu, bình cách thủy Memmert của Đức …

2.2.3.4 Lựa chọn những người hiến máu nhóm O đã được xác định các kháng nguyên nhóm máu hệ hồng cầu để xây dựng panel hồng cầu

Những người hiến máu nhóm O được lựa chọn làm panel hồng cầu phải có đầy đủ các tiêu chuẩn sau:

• Là người hiến máu tình nguyện đạt tiêu chuẩn của người hiến máu theo quy định của quy chế truyền máu;

• Những người hiến máu này được tư vấn, giải thích về ý nghĩa nhân đạo và cần thiết của việc nghiên cứu;

• Không bị nhiễm các bệnh nhiễm trùng truyền qua đường máu: HIV, HBV, HCV, giang mai, sốt rét;

• Có bản cam kết đồng ý và tiếp tục hiến máu để làm panel hồng cầu trong tương lai;

• Đã được xác định các kháng nguyên nhóm máu hệ Rh, Kell, Duffy, Lewis, MNSs - Mia, P1, Lutheran và được quản lý trên máy tính bằng phần mềm excel

2.2.3.5 Sử dụng Panel hồng cầu để sàng lọc kháng thể bất thường cho người hiến máu và bệnh nhân

a/Kỹ thuật ngưng kết trong ống nghiệm để sàng lọc kháng thể bất thường

Tùy thuộc vào số hồng cầu được chọn làm panel để chuẩn bị ống nghiệm làm xét nghiệm (thường là 3 hồng cầu)

Bước 1: Nhỏ vào 3 ống nghiệm đã được dán nhãn, mỗi ống nghiệm 2 giọt huyết thanh của bệnh nhân;

Bước 2: Thêm 1 giọt hồng cầu panel 5% tương ứng vào các ống nghiệm trên; Bước 3: Trộn đều;

Bước 4: Ly tâm 1000 vòng/ phút trong vòng 15-30 giây;

Bước 5: Đọc và ghi lại kết quả;

Bước 6: Ủ tiếp ở 37˚C/ 30 phút;

Bước 7: Ly tâm 1000 vòng/ phút trong vòng 15-30 giây;

Bước 8: Đọc, ghi lại kết quả;

Bước 9: Rửa hồng cầu 3 lần bằng nước muối 0,9%;

Bước 10: Thêm 2 giọt kháng globulin;

Bước 11: Ly tâm 1000 vòng/ phút trong vòng 15-30 giây;

Bước 12: Đọc và ghi lại kết quả;

Bước 13: Nếu kết quả âm tính thêm 1 giọt hồng cầu chứng (Hồng cầu nhóm

O đã được cảm nhiễm anti D);

Bước 14: Ly tâm 1000 vòng/ phút trong vòng 15-30 giây;

Bước 15: Đọc và ghi lại kết quả

- Kết quả phải dương tính

- Nếu kết quả âm tính phải lặp lại thử nghiệm

Nhận định kết quả:

- Nếu kết quả một hoặc tất cả các điều kiện, nhiệt độ của phản ứng trên dương tính (ngưng kết) với 1 hoặc cả 3 hồng cầu panel => Bệnh nhân có thể có kháng thể bất thường

- Nếu kết quả tất cả những điều kiện, nhiệt độ của phản ứng trên đều âm tính với cả 3 hồng cầu panel => Bệnh nhân không có kháng thể bất thường

b/ Kỹ thuật gelcard để sàng lọc kháng thể bất thường ở 22 °C và Coombs gián

2.2.4 Xử lý các kết quả nghiên cứu:

Các kết quả trên được nhập máy tính và xử lý bằng phần mềm Excel và info 6.0

Epi-3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Khảo sát kháng nguyên nhóm máu hệ hồng cầu để xây dựng panel

hồng cầu tại Viện Huyết học Truyền máu TW

Tần suất xuất hiện (%) 97,9 93,1 41,6 30,8 92,0

Tần suất xuất hiện kháng nguyên D, C, e là cao nhất ở NCM nhóm O với thứ

Qua nghiên cứu khảo sát kháng nguyên K ở 868 người hiến máu nhóm O,

chúng tôi chưa phát hiện được trường hợp nào có kháng nguyên K dương tính (0 %)

trong khi đó tần suất xuất hiện kháng nguyên k ở cả 125 người hiến máu nhóm O là

100% Tần suất xuất hiện kháng nguyên Kpb là 100% và không gặp trường hợp nào

có kháng nguyên Kpa (Bảng 3.2)

3.1.3 Hệ nhóm máu Kidd

Qua khảo sát 773 người hiến máu nhóm O, kết quả ở biểu đồ 3-1 cho thấy tần

suất xuất hiện kháng nguyên Jka và Jkb là khá cao với thứ tự là 67,1% và 79,2%

Bảng 3-3 Tần suất xuất hiện kháng nguyên Fya, Fyb ở NCM nhóm O

Khảo sát 781 người hiến máu nhóm O, chúng tôi thấy tần suất xuất hiện

kháng nguyên Fyb là 13,8%, trong khi đó tần suất xuất hiện kháng nguyên Fya ở 90

người hiến máu nhóm O là 100% (Bảng 3.3)

Tần suất xuất hiện của kháng nguyên M ở người hiến máu nhóm O là khá cao (92,5%), trong khi đó tần suất xuất hiện kháng nguyên N chỉ là 56,2% (Bảng 3-4)

Biểu đồ 3-2 Tần suất xuất hiện kháng nguyên S,s ở NCM nhóm O

Với 776 người hiến máu nhóm O được xác định cả kháng nguyên S, s, chúng tôi thu được kết quả về tần suất xuất hiện kháng nguyên s là 100%, trong khi tần suất xuất hiện kháng nguyên S chỉ có 5,4 % (Biểu đồ 3.2)

13

129

KN Mia +

KN Mia

-Biểu đồ 3-3.2 Tần suất xuất hiện kháng nguyên Mia ở NCM nhóm O

Biểu đồ 3.3 cho thấy tần suất xuất hiện kháng nguyên Mia ở người hiến máu nhóm O là 10,1%

Mia -: 89,9%

3.1.6 Hệ nhóm máu Lewis:

Bảng 3-5 Tần suất xuất hiện kháng nguyên Lea, Leb ở NCM nhóm O

Số mẫu NC 795 100

Số mẫu (+) 176 25

Tần suất xuất hiện kháng nguyên Lea, Leb của người hiến máu nhóm O đều

thấp với thứ tự là 22,1% và 25% (Bảng 3.5)

3.1.7 Hệ nhóm máu Lutheran:

Bảng 3-6 Tần suất xuất hiện kháng nguyên Lua, Lub ở NCM nhóm O

Số mẫu NC 743 743

Qua nghiên cứu 743 người hiến máu nhóm O, chúng tôi thấy tần suất xuất

hiện kháng nguyên Lua của hệ Lutheran là rất thấp (0 %), trong khi tần suất xuất

hiện kháng nguyên Lub lại rất cao (98,6%) (Bảng 3.6)

Tần suất xuất hiện (%) 12,4

Tần suất xuất hiện kháng nguyên P1 ở 775 người hiến máu nhóm O là 12,4%

(Bảng 3.7)

3.2 Tần suất xuất hiện kháng nguyên của một số hệ nhóm máu hồng cầu

ở người hiến máu nhóm O

Bảng 3-8 Tần suất xuất hiện kháng nguyên của một số hệ nhóm máu hồng cầu

ở người hiến máu nhóm O

Tên các kháng nguyên và tần suất xuất hiện

Kidd

Jkb 79,2 Lea 22,1

3.3 Xây dựng và quản lý panel hồng cầu để sàng lọc KT bất thường

Sau khi xác định kháng nguyên của 8 hệ nhóm máu hồng cầu ở 1026 NCM nhóm O, các kết quả trên được vào sổ kết quả và nhập vào máy tính theo chương