Khóa luận tốt nghiệp Hóa học: Khảo sát thành phần hóa học cao Chloroform của quả mướp đắng Momordica Charantia L

Theo Đông y, quả mướp đẳng có tính han, vị đăng, không độc, nếu được dùng thường xuyên sẽ giúp giảm các bệnh ngoài da, làm cho da dẻ mịn màng.. Quần thê mướp đẳng đã trở nên rất phong ph

A BO GIAO DUC VA DAO TAO

TRUONG DAI HOC SU PHAM THANH PHO HO CHI MINH

KHOA HOA HOC

KHOA LUAN TOT NGHIEP

CƯ NHÂN HOA HOC

QUA MUOP DANG

MOMORDICA CHARANTIA L.

GVHD: ThS Lê Thi Thu Huong

SVTH: Pham Thi Hoai

TP HCM, thang 5 nam 2013

LỜI CÁM ƠN

Con xin kính gởi đến ba, mẹ lòng biết ơn sâu sắc Công ơn sinh thành, dưỡng dục và

những lời động viên của ba, mẹ chính là động lực giúp con vừng bước trong cuộc

sống.

Em xin chân thành cảm ơn tất cả quý Thây Cô trong khoa Hóa Học, trường Đại Học

Su Phạm Tp HCM đã tan tình dạy đỗ, truyền đạt kiến thức cho em trong suốt khóa

học.

Em xin gởi lời cảm ơn sâu sắc đến cô Ths Lê Thị Thu Hương đã tận tỉnh hướng dẫn, giúp đỡ và động viên em.

Em cũng xin cảm ơn tổ bộ môn Hóa Hữu Cơ, cô Ts Nguyễn Thị Ánh Tuyết đã hỗ trợ

cho em về hóa chất và thiết bị phục vụ cho khóa luận

Em xin tỏ lòng biết ơn quý Thay Cô trong Hội đồng bảo vệ khóa luận tốt nghiệp đã

xem xét, góp ý cho khóa luận của em.

Cảm ơn bạn Tạ Thị Hồng Huệ và các bạn lớp Hóa K35C đã động viên, giúp đỡ mình

trong suốt những năm học đại học

Tp HCM, thang 5 năm 2013

CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIET TAT TRONG BÀI KHÓA LUẬN

Heteronuclear Single Quantum

Tương quan H-C qua 1 liên kết

Tương quan H-C qua 2, 3 liên kết

Một phan triệu

Mũi đơn, rộng Mũi đơn

Mũi đôi

Mũi đôi đôi

Mũi đa

Hang số ghép spin Sắc ký lớp mỏng

MỤC LỤC

0980127100 Ả |

CHƯƠNG 1 TỎNG QUAN - 2552 5222 22csscrsrrrsrrsree 2

L.1 MÔ TẢ VE CAY MƯỚP ĐẢNG À -©222©22222ssccscccccee 2

1.1.1 KHÁI QUÁT ooeeeeeoeoeenineeninneoinniesenniree 2

Hl Di RGD Tea TH VỆ ses sccesssescecscessesscusscosatsssessesssessessatssssssesassanesseess 3

1D PHANIBO VA 30912000201 2 4

1.3 TAC DỤNG DƯỢC LY uoceecscscsescsessssesssessssesssecssscsssesssesssssesveesssesneeeneeesneenses 4

1.4.CONG DUNG CUA CAY MUGP DANG cccccssseessessessseesseesseessesseesseesses 6

1.5 CAC NGHIÊN CỨU VE THÀNH PHAN HOA HỌC 8

1.5.1 CAC CONG TRINH TRONG NƯỚớcC 2-2752: 8

1.5.2 CÁC CONG TRINH TREN THE Giới -. 2 222 8

CHƯƠNG 2 THỰC NGHIỆM - 2-2 ©-+52++czsccrsee 23

2.1 NGUYEN LIEU, HOA CHAT, THIET BỊ, -‹5- 23

2.1.1 NGUYEN LIGU ccecccscesssessessesssessesssesseesstsssessesssesssessesseesseesneesees 23

2.1.2 HOA CHAT cccccecsesssesssesssessseessvessvecsesesvessuessuessnessseenseenseeeseessesees 23

2.3 CO LAP VA TINH CHE CÁC HỢP CHÁTT - 5: 5z s52 24

2.3.1 KHảO SÁT PHAN ĐOạN ĐI 52222sc2cvvccvssrrcsrrrrvee 25

2.3.2 KHảO SAT PHAN ĐOạN D3 w ccccsescsesseecseecvecsvecsecsvecsesesecneeeses 26

CHUONG 3 KET QUA VA THẢO LUẬN - c5: s52 30

3.1 KHAO SAT CÂU TRÚC HÓA HỌC CUA HOP CHAT CI 30

3.2 KHAO SÁT CẤU TRÚC HOA HOC CUA HỢP CHAT C2 30

CHƯƠNG4 KET LUẬN VÀ KIÊNNGHỊ 38

' SN) Đi vÀ 71234444 , 39

TÀI LIEU THAM KHẢO 5 St S1 1 111211111 11111111 11122111211 30111112 40

co phân tích, giải mã các thành phan hoá học cũng như dược tính của chat trong cây với mong muốn tìm ra các phương thuốc mới an toàn cho sức khoẻ người

tiêu dùng Mặt khác, nước ta là một nước nhiệt đới gió mùa, có khí hậu nóng và

am nên nguồn thực vật tự nhiên rat phong phú va da dang Vi những lý do này maviệc nghiên cứu thành phần hóa học của cây cỏ ngày càng được đây mạnh

Cây mướp dang có tên khoa học là Momordica charantia L thuộc họ Bau bí

(Cucurbitaceae), Quả mướp đắng từ xưa đã được con người chọn làm nguồnlương thực thiết yêu bởi lẽ nó chứa nhiều chất đinh dưỡng tốt cho sức khoẻ lại dé

chế biến, dé trồng, dé chăm sóc Theo Đông y, quả mướp đẳng có tính han, vị

đăng, không độc, nếu được dùng thường xuyên sẽ giúp giảm các bệnh ngoài da,

làm cho da dẻ mịn màng Theo y học hiện đại, quả mướp đắng có tác dụng diệt vi

khuẩn và virus, chống lại các tế bào ung thư; hỗ trợ đắc lực cho bệnh nhân ung

thư đang chữa bằng tia xạ.

Chính vì những lí do trên, chúng tôi chọn đẻ tài: “Khảo sát thành phần hóahọc cao chloroform của quả mướp đắng Momordica charantia L.” với mong

muốn đóng góp một phan nhỏ trong việc tim hiểu thành phần hóa học có trong

quả mướp đắng được thu hái ở xã Mỹ Hạnh Bắc, huyện Đức Hòa, Long An

Chương 1 TONG QUAN

1.1 MÔ TẢ VE CÂY MƯỚP DANG

1.1.1 Khái quát

Tên khoa học : Momordica charantia L.

Thuộc họ: Bau bí (Cucurbitaceae).

Tên nước ngoài: Bitter melon, bitter ground (Anh), bitter apple, wild cucumber,

bitter cucumber, ampalaya (Philipines), balsam pear (Mỹ), karela (An B6) !9)

Tên việt nam: khổ qua, mướp đắng, lương qua, cam lệ chỉ "!*!?!

Mướp đắng tôn tại ở hai dạng quân thể: mọc hoang và được trồng trọt Loại trồng trọt rất phong phú vé giống nhưng đều được xếp chung vào chỉ mướp đắng Momordica Nếu căn cử theo hình dạng bên ngoài thì người ta chia mướp đắng thành hai chủng loại: l*!"

> Momordica charantia L Var charantia L., quả to (đường kính > 5cm), màu

xanh nhạt, gai tù, ít đăng.

» Momordica charantia L Var abbreviata Ser., qua nhỏ (đường kính < 5cm), màu

xanh dam, gai nhọn vị rất đẳng.

Hình 1.1: Var abbreviata Ser Hinh 1.2: Var charantia L.

1.1.2 Mô tả thực vật

Mướp đắng thuộc loại đây leo băng tua cuốn, thân có cạnh, ở ngọn có mọc lông

tơ, có đời sông khoảng một năm

Lá mọc so le, đài 5-10 cm, rộng 4-8 em, phiến lá chia làm 5-7 thuỳ, hình trứng,

mép khía răng Mặt dưới lá màu nhạt hon mặt trên, gân lá có lông ngắn !®!%!213!,

Hoa đực và hoa cái mọc riêng ở nách lá, có cuéng dai, Hoa đực có đài và ông rất ngắn tràng gồm năm cánh mỏng hình bau dục, nhụy 5 rời nhau Hoa cái có đài và tràng hoa giống hoa đực Tràng hoa màu vàng nhạt, đường kính khoảng 2 em l#!%°L,

Quả hình thoi, dài 8-15 cm, gốc và đầu thuôn nhọn mặt vỏ có nhiều u lỗi to nhỏ không đều Quả khi chưa chín có màu xanh hoặc vàng xanh nhạt, khi chín có màu

vàng hồng Vì thể ở Trung Quốc, mướp ding còn có tên là hỏng dương hồng cô nương Khi chín, quả nứt ra dan từ dau, tách ra làm ba phan đề lộ chùm áo hạt mau đỏ

ˆ 3.14

bên trong '!*1,

màng đỏ bao quanh (giéng như mang hat gac) '

Hinh 1.3: Day va hoa muép dang Hình 1.4: Hat mướp đắng

1.2 PHAN BO VÀ SINH THÁI "!19

Từ thời xưa, cây mướp ding được trồng ở vùng Đông An và Nam Trung Quốc,

được sử dụng như là loại rau ăn quả giàu chất sắt và vitamin C Sau đó, cây được du nhập sang châu Phi và châu Mỹ Latinh Quần thê mướp đẳng đã trở nên rất phong phú với các giống cây da dang được tạo ra trong quá trình chọn giống và lai tạo.

Ở Việt Nam, mướp đắng được trồng khắp các tinh từ Bắc vào Nam, chỉ ở một số

vùng núi cao và lạnh như Sa Pa (Lào Cai), Phó Bảng (Hà Giang) thì mới không thấy

có mướp đăng.

Trên thế giới, cây mướp ding có mặt ở hau hết các nước nhiệt đới và cận nhiệt

đới như Trung Quốc (Phúc Kiến, Quảng Đông, Quảng Tây, Giang Tô, Triết Giang);một số nước đông nam châu A như An Độ, Malaysia Philippin; châu Phi và vùng

Caribbean.

Cây mướp dang có biên độ sinh thái tương đối rộng nhiệt độ thích hợp cho cây

sinh trưởng từ 20°C — 35°C, lượng mưa hằng năm từ 1500 — 2500 mm Cây chịu được nhiều điều kiện đất khác nhau nhưng phát triển tốt nhất trong điều kiện thoáng nước và

đất giàu chất hữu cơ Mướp đắng có thể trồng quanh năm Cây sinh trưởng nhanhtrong mùa mưa âm, ra hoa sau 7 — 8 tuần gieo trồng Sau khi quả già, cây sẽ tàn lụi vàkết thúc vòng đời sau 4 - 5 tháng ton tại

1.3 TÁC DỤNG DƯỢC LÝ

Y học cô truyền và dân gian Việt Nam đã có nhiều kinh nghiệm chữa bệnh tir

mướp đắng nhưng chỉ ở dạng thô ban đầu hoặc ở dạng nước ép, nước sắc Ngày nay

trên thị trường đã xuất hiện nhiều sản phẩm từ quá mướp đắng nhưng chủ yếu ở đạng

thực phẩm chức năng như trà hoà tan, trà túi lọc Điện hình là sản phẩm trà Khổ Qua

của viện Dược Liệu.

Các tác giả Nguyễn Thị Nhu, Nguyễn Thị Bay đã nghiên cứu tác dụng hạ đường

huyết của một bài thuốc nam trên thực nghiệm lâm sàn, đó là sản phẩm trà túi lọc mà

thành phần quả mướp dang chiếm 60% !!)

Các tác giả Mai Phương Mai Võ Phùng Nguyên cũng đã thăm dò tác dụng hạ

đường huyết của một số bài thuốc dân gian ở mô hình đái tháo đường bằng

streptozotocin trên chuột nhắc mà thành phần của bài thuốc cũng có chứa quả mướpđẳng.PH

Các tác giá Mai Phương Mai, Nguyễn Thị Hạnh, Nguyễn Ngọc Hạnh đã chứng

minh tác dụng hạ đường huyết của các dịch chiết từ quả mướp đắng thu hái tại Thái

Nguyên với các dung môi khác nhau.

Theo y học hiện đại, mướp đẳng có tác dụng:

>

X

130)

i)

Diệt vi khuan va virut, chống lại tế bao gây ung thu, hỏ trợ đắc lực cho bệnh

nhân ung thư đang chữa trị bằng tia xạ

Chống các góc tự do - là nguyên nhân gây lão hoá và phát sinh các bệnh tim

mạch, tăng huyết áp, rối loạn lipit máu, tốn thương thần kinh, viêm đườngtiết niệu, đái tháo đường

Tăng oxy hoá glucozo, ngăn chặn sự hấp thu glucozo vào tế bao Ue chế

hoạt tính các men tông hợp glucozơ

Có tác dụng sinh học giống insulin, giúp cơ thẻ tăng tiết insulin

Có tác dụng tốt đối với người mắc bệnh đái tháo đường dạng type 2 Hỗ trợtăng tác dụng giảm liều lượng giảm tác dụng phụ của các loại sulfamid trị

đái thao đường dang type 2.

Dịch chiết từ quả mướp đăng có khả năng ức chế khối u, hỗ trợ men gan

Cao methanol 50% quả mướp đăng cho tác dụng hạ đường huyết 25% (liều

dùng 30 mg/kg), cao butanol cho kết qua là 34% với liều dùng như trên Các tác giả này cho rằng các hợp chất phân cực, tan nhiều trong butanol có khả năng làm giảm đường huyết Cơ chế hoạt động tương tự insulin hoặc thông

qua sự tiết insulin từ tuyến tuy

> Cao nước quả mướp đắng, khi cho chuột công trắng đã được gây tăng đường

máu với aloxan (120 mg aloxan/kg tiêm dưới da) uống hàng ngày trong hai thắng làm chậm sự xuất hiện bệnh võng mạc t2)

> Dịch ép quả mướp dang làm giảm đáng kê tỷ lệ ung thư da ở chuột nhất

trắng gây bởi dimethylbenzo[aJanthracen được làm tăng thêm bởi dau bã

đậu Cao từ vỏ thịt quả hạt và toàn quả mướp đắng có hoạt tính chống ung

thư rõ rệt đối với sự sinh u nhú da chuột nhat khi dùng tại chỗ.

> Ở Trung Quốc người ta đã tách được hai hợp chất hạn chế sinh sản là

a-protein va j›-a-protein từ hạt mướp đắng Các thí nghiệm nuôi cấy, ghép phôi

invitro cho thay 2 hoạt chất này có tác dụng ức chế quá trình làm day đặc

nguyên bảo phôi trước khi làm tô và hình thành phôi ở thai kỳ đầu từ đó

phôi ngừng phát triển, thoái hóa phân hủy dẫn đến say thai °*

1.4 CÔNG DUNG CUA CÂY MƯỚP DANG

Hau hết các bộ phận của cây như rễ, thân, lá, hoa, qua, hạt đều có tác dụng làmthuốc chữa bệnh Í`"!°!

1.4.1 Rễ

Rễ tươi sắc nước uống, mỗi ngày một thang, từ 1000ml nước với 60g rễ mướpđẳng tươi, sắc còn 400ml, chia làm 2-3 lần uống, có thể áp dụng cho mọi dạng bệnh

Ré mướp dang dùng trị ly nhất là amip Tại An Độ dịch rễ (cũng như 14, quả) mướp

đăng được dùng trị bệnh tiêu đường, do có tác dụng làm giảm đường huyết RE mướpđẳng còn có tác dụng trị bệnh gan 6)

1.4.2 Dây

ˆ , ` ` £ + SA h ~* h a a:

Dây mướp đăng được dùng làm thuộc trị viêm xoang, chảy mau mũi, có mô hôi

hoặc bệnh gan làm vàng da |

1.4.3 Lá

Lá có vị dang, tinh mát An lá non trị bệnh nóng bức trong minh Gia lá vắt nước thêm chút mudi, uống trị bệnh nóng mê man hoặc trị mụn nhọt, rôm say Ngoài ra, lá

còn có thé trị được rắn cắn, làm thuốc nhuận trường, hạ sốt

Lá mướp dang khô 12 g, tán bột hoà với nước hay rượu uống, kết hợp lấy lá tươi

giã nát đắp ngoài, chữa nhọt độc, sung tay, các vét thương nhiễm độc Lá tươi 4 - 8 g,nhai nuốt nước, bã đắp chữa rắn cắn ÍŠ°*t"Ð!

1.4.4 Quả

Quả còn xanh có vị đắng, khi chín thì ít đắng hơn Quả mướp đắng có tính hàn

(mat), không độc Quả xanh có tính giải nhiệt, làm tiêu dom, nhuận tràng, bồ than,

nuôi can huyết, bớt mệt mỏi, giảm stress xoa dịu thần kinh, giải độc lợi tiêu, làm bớt đau khớp Khi chín mướp đăng có tính bé thận, kiện tỳ, đưỡng huyết, điệt giun (san, lãi) đồng thời có tác dụng làm sáng mat, bỗ tim, bé máu, mát gan, rất thích hợp với

những người đau gan, đau lá lách '°Ì

O Trung Quốc, quả mướp đẳng còn dùng dé trị đột quy tim, bệnh sốt, khô miệng,

viêm họng O Án Độ, dịch quả mướp ding được dùng trị rắn cắn Người ta còn dùng

bột quả mướp dang dé hàn các vết thương (lam kéo da non), trị vết loét ác tính Ở Thái Lan, dich quả được dùng trị bệnh về gan, lá lách ?!!!

Với tính diệt khuẩn và chống oxi hóa, mướp dang làm da mịn mang, trị mụntrứng cá hay bệnh vay nến, và ngay cả với vết thương do côn trùng cắn, nhiễm trùng

da Mặt khác, quả mướp dang còn cung cấp nguồn năng lượng dồi đảo va tăng khanăng chịu đựng cho cơ thê !°Ỳ

Ngoài các công dụng trên quả mướp đẳng còn được dùng dé trị các bệnh như:

Ho, sốt, kiết ly, da day, đau tức, đái dắt, phù thủng do gan, mắt đỏ đau nhức, giải nhiệt,

hồi hộp, buồn phiên, tắm cho trẻ em trị rôm say, làm hạ đường huyết ở bệnh nhân đái

tháo đường loại 2 (không phụ thuộc insulin) Ï '!°I

1.4.5 Hoa

Hoa mướp đắng được dùng đề chữa dau da dày, ly cấp tính, đau mất 124]

1.4.6 Hạt

Hạt có chất béo, vị đẳng, hơi ngọt, tính am, thanh nhiệt, giải độc, giải cảm, trị ho,

lợi tiêu Hạt còn chữa rin căn, chữa ngọt độc sung tay, vết thương nhiễm trùng, hạ sốt,

đau họng và chong thụ thai, làm hạ huyết áp kháng virut HIV °°?!)

1.5 CAC NGHIÊN CỨU VE THÀNH PHAN HÓA HỌC

1.5.1 Các công trình trong nước

Tác giả Phạm Văn Thanh cùng cộng sự của viện Dược liệu đã thống kê và khảo

sắt sơ bộ các nhóm hoạt chất chính của cây mướp ding Tuy nhiên, các tác giả này

chưa cô lập được các hoạt chất có hoạt tính dưới dang chat tinh khiết cũng như chưa

xác định được cau trúc của các hợp chat này, mà chỉ định lượng theo chất G6, mộtaglycon của nhóm glycoside '*!

Các tác giả Nguyễn Minh Đức va Tran Thị Vy Cam đã chiết tách va phân lập

được 4 hợp chất Mc), Mc;, Mc;, Mc¿.từ cao methanol của hạt mướp dang Trong do

Me; được xác định là Momordicoside A (1) và Me, đã được so bộ dự kiến cấu trúc.

(8]

Các tác giả Võ Hong Thái, Nguyễn Ngọc Hạnh, Phùng Văn Trung ở Viện công

nghệ hóa học đã cô lập và nhận danh được hai chất từ hạt: Momordicoside A (1) và Momordicoside B (2) và bon hợp chất từ quả: Momordicoside K (10), Momordicoside

L (11), 3-O-glucopyranosylstigmasta-5,25(27)-diene (43) và 23-Ó-B-ID-allopyranosyl

5B 19-epoxycucurbita-6,24-dien-3ƒ.22,23š-triol 3-O-f-D-allopyranoside (23) "7!

1.5.2 Các công trình trên thé giới

Người ta đã tìm thấy khoảng hơn 200 hợp chất có trong cây mướp đắng và được

thông kê sơ bộ thành các nhóm chính như sau:

1.5.2.1 Triterpene

- Triterpene glycoside:

* Momordicosides A, B, C, D, E, F;, F>, G, I, K, L (1-11), "9219231

* Momordicine I, II va IH (12-14) 27!

— Sterol: Lanosterol (46): momordenol (47); B-sitosterol (48);

stigmast-7-ene-3ƒ-ol (49); stigmasterstigmast-7-ene-3ƒ-ol (50); stigmast-S-ene-3B,25-distigmast-7-ene-3ƒ-ol (51); stigmasta-5,25-dien-3B-stigmast-7-ene-3ƒ-ol

(52); stigmasta-7,22-dien-3f3-ol (53).

1.5.2.3 Carotenoid `"

-carotene, cryptoxanthin, lutein, lycopene, mutatochrome, phytofluene,

rubixanthin, zeaxatin, zeinoxanthin

Ngoài ra còn có các thành phan khác: alkaloid: charine, zeatin, zeatin riboside;

Monoterpene: p-cymene (54), menthol (55); Scsquitcrpene: nerolidol (56); Sapogenin: diosgenin; (Các chất khoáng: Ca, Mg, Fe, Cu, Zn, P, N, I, E

1.6 CÔNG THỨC CÁC HỢP CHÁT

OH HO

HO (2)

CH, OH

CH,

How ,

H,C CH,

HO

Ou

on (26) (27)

H.C, ZA CH,

H.C CH,

(30)

S

HAC

+ Dung môi: petroleum ether, chloroform, ethyl acetate, methanol, ethanol.

+ Silica gel: Silica gel 60, 0.04 - 0.063 mm, Merck dùng cho sắc kí cột

+ Sắc kí bang mỏng loại 25DC — Alufolein 20 x 20, Kiesel gel 60E;x;, Merck.

+ Thuốc thử hiện hình sắc kí bảng móng: HạSO; 30%.

2.1.3 Thiết bị

+ Các thiết bị dùng đề giải ly, dụng cụ chứa mau.

+ Cột sắc kí đường kính 2-5.5 cm.

+ Máy say.

+ Đèn UV ở bước sóng 254 nm hiệu UVitec.

+ Thiết bị gia nhiệt hong ngoại hiệu Schott.

+ Máy cô quay chân không hiệu Buchi-111.

+ Pho cộng hưởng từ hat nhân 'H-NMR được thực hiện trên máy cộng hưởng từ hạt nhân Bruker AM500 FT-NMR Spectrometer, tần số cộng hưởng SOOMHz.

+ Phô cộng hưởng từ hạt nhân “C-NMR kết hợp kỹ thuật DEPT được thực hiệntrên máy cộng hưởng từ hạt nhân Bruker AM500 FT-NMR Spectrometer, tan số cộng

hưởng 125MHz.

Tat cả phd được ghi tại phòng phân tích cấu trúc, Viện Hóa Học - Viện Khoa

Học và Công Nghệ Việt Nam, 18 - Hoàng Quốc Việt, quận Cau Giấy, Hà Nội

2.2 DIEU CHE CÁC LOẠI CAO Í®

Sứ dụng phương pháp ngâm dam ở nhiệt độ phỏng dé điều chế cao ethanol Qua

mướp ding được phơi khô, say và nghiền nhỏ thành bột mịn (2 kg) Nguyên liệu bột

mịn được ngâm dâm bằng dung môi ethanol 70” Sau vài ngày, lọc lấy dịch trích Cô

quay thu hồi dung môi dưới áp suất thấp Tiếp tục thực hiện nhiều lần cho đến khi

lượng cao thu được không đáng kẻ, thu được 200 g cao ethanol thô.

Ap dụng phương pháp chiết long-long dé điều chế các loại cao, trong đó cao tông

ban đầu được hòa tan vào nước Sử dụng lần lượt các dung môi: petroleum ether,

chloroform, methanol dé chiết và đem cô quay chân không thu được các cao phân

đoạn: cao petroleum ether (45 g), cao chloroform (60 g), cao methanol (50 g), cặn còn

lại (35 g) Quá trình thực hiện được trình bay theo sơ đồ 1.

So dé 1: Sơ đề điều chế các cao thô từ quả mướp đắng

Bột quả khô |

Ngâm dam trong ethanol, loc

Ba qua khô Dich ethanol

Cô quay thu hồi dung môi

Cao ethanol (200 g)

- Chiết lỏng-lỏng lần lượt bằng các

dung môi: petroleum ether,

chloroform, methanol

- Cô quay thu hồi dung môi

Cao petroleum Cao chloroform Cao methanol

ether (45g) (60g) (30g)

2.3 CO LAP VA TINH CHE CAC HOP CHAT

Can con lai

(35g)

ES * : + h : a # ¬ & ~ ˆ , a:

Két qua sắc kí ban mỏng trên cao chloroform có nhiều vết rõ, dep nên chúng tôi

chọn loại cao này dé khảo sát.

Sắc kí cột silica gel áp dụng trên cao chloroform (60 g) lần lượt giải ly bằng các

hệ dung môi có độ phân cực tăng dần Dịch giải ly từ cột sắc kí được hứng vào các

eclen Sau đó, cô quay thu hồi dung môi, phan cao thu được đựng vào các hũ bi Kiểmtra theo dõi quá trình giải ly bằng sắc kí lớp mỏng Những lọ có kết quả giống nhau

được gộp chung lại thành một phân đoạn Kết quả được 9 phân đoạn (D1-D9), trình

bảy trong bảng 2.1.

Bảng 2.1: Kết qua sắc ký cột cao chloroform

ie môi giải “ne > Ket qua

Khao sat thu

D9 EA:M 20:1 Nhiều vết | Chua khảo sát

Ghi chú: PE (petroleum cther), EA (cthyl acctate), C (chloroform), M (methanol)

2.3.1 Khảo sát phân đoạn ĐI

Sắc kí cột silica gel áp dụng cho phân đoạn DI (2 g), giải ly bằng hỗn hợp dungmôi chloroform:methanol có độ phan cực tang dan Dich giải ly từ cột sắc kí đượchứng vào các bình tam giác 250 ml Sau đó, cô quay thu hỏi dung môi, phần cao thu

được đựng vào các hủ bị, Kết quả được 3 phân đoạn, các phân đoạn được trình bày

trong bảng 2.2.

Bảng 2.2: Kết quả sắc kí cột trên phân đoạn ĐI

Phân Dung môi Sắc kí lớp Ghi chú

đoạn giải ly mỏng

ĐI C:M 80:1 Nhiều vết Chưa khảo sát

ĐI.2 C:M 70:1 Rõ vết Khao sát thu Cl

B13 C:M 70:1 Nhiéu vét Chua khao sat

Phan cao thu được từ phân đoạn ÐI.2 được rửa nhiều lần bằng methanol Sau đó

tiếp tục sắc kí cột silica gel, giải ly bằng hệ dung môi C:M (70:1) Kết quả thu được

chất bột màu trắng (3 mg) Kiểm tra bằng sắc kí bảng mỏng với hệ dung môi C:M(30:1) cho một vết rõ, màu tim, Ry = 0.7 Hợp chất nay được kí hiệu là C1

Quy trình cô lập hợp chất C1 của quả mướp đắng được trình bảy trong sơ đồ 2

2.3.2 Khảo sát phân đoạn D3

Sắc kí cột silica gel áp dụng cho phân đoạn D3 (15 g), giải ly bằng hỗn hợp dungmôi C:M có độ phân cực tăng dần Kết quả được 4 phân đoạn (Đ3.1-Ð3.4), các phân

đoạn được trình bày trong bảng 2.3.

Phan cao thu được từ phân đoạn D3.2 có khối lượng (1 g) Sau đó tiếp tục sắc kí

cột silica gel, giải ly bằng hệ dung môi C:M có độ phân cực tăng dan Kết quả thu

được 3 phan đoạn (Đ3.2.I-Ð3.2.3) các phân đoạn được trình bày trong bang 2.4.

fe) phan doan D3.2.2 xuat hiện kết tỉnh dang tinh thé v6 dinh hinh mau trắng Giải

ly bằng hệ dung môi C:M (6:1) cho một vết màu tim, R¿= 0.49 Tinh chế bằng cách kết

tỉnh nhiều lần trong dung môi methanol ta thu được 10 mg hợp chất màu trắng, dangbột được kí hiệu là C2.

Quy trình cô lập hợp chất C2 của quá mướp đẳng được trình bày trong sơ đồ 3

Bang 2.3: Kết quả sắc kí cột trên phân đoạn D3

Bang 2.4: Kết quả sắc kí cột trên phân đoạn D3.2

Phân đoạn i i Sac ký lớp mỏng Ghi chú

Đ3.2.1 ` Vét tim còn do Chua khao sat

So đồ 2: Sơ đồ cô lập hợp chat C1 từ phân đoạn ĐI

(2 g)

-Sac kí cột silicagel.

-Giải ly C:M.

-Cô quay thu héi dung môi

Phân đoạn ĐI.1 Phân đoạn ĐI.2 Phân đoạn D1.3 |

Sơ đã 3: Sơ đồ cô lập hợp chat C2 từ phân đoạn D3

Phân đoạn D3

(15 g)

-Sắc kí cột Silica gel

GiảilyCM -Cô quay thu hôi dung môi

-Phân đoạn D3.2 -Phân đoạn Ð3.3