Tư vấn, thực hiện các phương pháp hỗ trợ sinh sản như: bơm tinh trùng vào buồng tử cung IUI, thụ tinh trong ống nghiệm IVF, tiêm tinh trùng vào bào tương noãn ICSI, trưởng thành trứng no
TỔNG QUAN
Tổng quan bệnh viện Hùng Vương
1.1.1 Khái quát lịch sử phát triển bệnh viện Hùng Vương
Thông tin về lịch sử phát triển Bệnh Viện Hùng Vương được tham khảo trên trang website chính thức của bệnh viện (Bệnh Viện Hùng Vương)
Bệnh viện Hùng Vương hiện nay được hình thành từ nhà bảo sanh Chợ Lớn, một cơ sở chuyên khoa sản thuộc Bệnh viện Lalung Bonaire, trước đây là nhà thương Nam Việt và hiện tại là Bệnh viện Chợ Rẫy.
Nhà Bảo sanh Chợ Lớn khởi đầu với 60 giường, chủ yếu phục vụ cho việc sinh thường và được sử dụng làm Trường nữ hộ sinh bản xứ để đào tạo nữ hộ sinh Vào cuối năm 1957, Bảo sanh viện được giao cho Bộ Y tế Việt Nam Cộng hòa quản lý, vẫn giữ quy mô 60 giường và không nhận chữa trị phụ khoa Sau đó, viện được xây dựng sửa chữa và chính thức khánh thành vào ngày 23/3/1958 với tên gọi Bảo sanh viện Hùng Vương, nâng quy mô lên 180 giường và được xếp hạng II, do Bác sĩ Hoàng Gia Hợp làm Giám đốc.
Vào ngày 30/4/1975, miền Nam Việt Nam hoàn toàn được giải phóng, và Bảo sanh viện Hùng Vương đã được tiếp quản bởi một Ban quân quản gồm 5 thành viên Trưởng ban là Bác sĩ Nguyễn Thị Thùy, cùng với các Y sĩ Hồ Thị Thanh, Đặng Huệ Linh, Nguyễn Thị Hạnh, Phạm Văn Hùng và Hoàng Duy Kền Thời kỳ quân quản tại Bảo sanh viện Hùng Vương kết thúc vào cuối năm 1976.
Sau nhiều lần cải tiến và sắp xếp tổ chức, vào tháng 3/1978, Bệnh viện được Sở Y tế công nhận là Bệnh viện chuyên khoa Sản phụ tuyến 4 tại Thành phố Hồ Chí Minh, phù hợp với mô hình XHCN.
1.1.2 Sơ đồ tổ chức – Ban giám đốc bệnh viện Hùng Vương
Thông tin chi tiết về sơ đồ tổ chức và ban giám đốc của Bệnh Viện Hùng Vương có thể được tìm thấy trên trang web chính thức của bệnh viện.
Hình 1.1 Sơ đồ tổ chức bệnh viện Hùng Vương
Ban giám đốc hiện tại (từ 06/2019):
PGS.TS.BS Hoàng Thị Diễm Tuyết: Giám Đốc
BS.CKII Huỳnh Xuân Nghiêm: Phó Giám Đốc
TS.BS Phan Thị Hằng: Phó Giám Đốc
DS.CKII Huỳnh Thị Ngọc Hạnh: Phó Giám Đốc
1.1.3 Sứ mệnh – Tầm nhìn – Cam kết – Chiến lược
Bệnh Viện Hùng Vương cung cấp dịch vụ chăm sóc sức khỏe sinh sản chuyên biệt cho phụ nữ tại Thành phố Hồ Chí Minh và các tỉnh phía Nam Việt Nam, nhằm nâng cao chất lượng cuộc sống và sức khỏe cho phái nữ.
Đến năm 2025, Bệnh viện Hùng Vương phấn đấu trở thành bệnh viện chuyên sâu hàng đầu về sản phụ khoa tại Thành phố Hồ Chí Minh và Việt Nam, đồng thời có khả năng cạnh tranh với các cơ sở y tế trong khu vực.
Bệnh Viện Hùng Vương cam kết mang đến dịch vụ chăm sóc sức khỏe tốt nhất cho người bệnh bằng sự thân thiện và đồng hành trong suốt quá trình điều trị Chúng tôi không ngừng cải tiến chất lượng các kỹ thuật chuyên môn và dịch vụ, nhằm đảm bảo sự hài lòng và hiệu quả điều trị tối ưu.
Bệnh viện Hùng Vương đang nỗ lực phát triển thành một trong những cơ sở y tế chuyên khoa sản phụ hàng đầu tại Thành phố Hồ Chí Minh và khu vực phía Nam, với mục tiêu cung cấp dịch vụ chăm sóc sức khỏe sinh sản hiệu quả và chất lượng cao, tương đương với các nước trong khu vực Bệnh viện cũng hướng tới việc trở thành môi trường bệnh viện - trường học, góp phần đào tạo nguồn nhân lực y tế cho Thành phố Hồ Chí Minh và toàn quốc Để đạt được điều này, Bệnh viện Hùng Vương xây dựng một môi trường làm việc tích cực, đoàn kết, sẻ chia và hiệp lực, đồng hành cùng bệnh nhân trong quá trình điều trị.
Tăng cường nghiên cứu khoa học để hội nhập quốc tế
1.1.4 Thông tin liên hệ Địa chỉ: 128 Hồng Bàng, phường 12, quận 5, Thành phố Hồ Chí Minh Điện thoại:
Email: bv.hungvuong@tphcm.gov.vn
Fanpage: https://www.facebook.com/hungvuonghospital
Tổng quan khoa Hiếm Muộn
Thông tin về khoa Hiếm Muộn – Bệnh Viện Hùng Vương được tham khảo trên trang website chính thức của bệnh viện (Bệnh Viện Hùng Vương)
Khoa Hiếm Muộn, với khẩu hiệu “Gieo mầm hy vọng - Gặt trọn yêu thương”, đã được hình thành và phát triển trong tòa nhà Bách Hợp thuộc bệnh viện.
Hùng Vương Địa điểm cụ thể: Lầu 4, dãy H và G, Tòa nhà Bách Hợp, bệnh viện Hùng Vương (Số 9 Lý Thường Kiệt, P.12, Q.5, Thành phố Hồ Chí Minh)
1.2.1 Sơ đồ tổ chức – Ban quản lý khoa Hiếm Muộn
Hình 1.2 Sơ đồ tổ chức khoa Hiếm Muộn
BS.CKII Lý Thái Lộc: Trưởng khoa
BS.CKI Vũ Đình Tuân: Phó trưởng khoa
HS Lê Thị Phương Dung: Hộ sinh trưởng khoa
Khám và chẩn đoán hiếm muộn nam, nữ
Chúng tôi cung cấp tư vấn và thực hiện các phương pháp hỗ trợ sinh sản, bao gồm bơm tinh trùng vào buồng tử cung (IUI), thụ tinh trong ống nghiệm (IVF), tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (ICSI), trưởng thành trứng non trong ống nghiệm (IVM), và thụ tinh trong ống nghiệm cho phụ nữ đơn thân, cũng như cho nhận trứng và phôi.
Tư vấn và điều trị nam khoa bao gồm các dịch vụ như phẫu thuật giãn tĩnh mạch thừng tinh, các phương pháp lấy tinh trùng như PESA, MESA, TESE, Micro-TESE, cùng với dịch vụ đông lạnh và lưu trữ tinh trùng, mô tinh hoàn Ngoài ra, còn có dịch vụ cho nhận tinh trùng theo nguyên tắc vô danh, đảm bảo tính an toàn và bảo mật cho người sử dụng.
Thực hiện các kỹ thuật hỗ trợ cao trong phòng thí nghiệm:
❖ Nuôi cấy phôi ngày 5 (phôi nang)
❖ Hỗ trợ phôi thoát màng
❖ Sinh thiết phôi thực hiện chẩn đoán di truyền tiền làm tổ (Preimplantation genetic diagnosis), xét nghiệm lệch bội tiền làm tổ (PGT – A)
❖ Tiêm tinh tử tròn vào bào tương trứng (ROSI)
1.2.3 Thành tích – Phương hướng phát triển khoa
Chủ tịch UBNDTP.HCM đã trao bằng khen cho những cá nhân có thành tích xuất sắc trong nghiên cứu khoa học và kỹ thuật điều trị bệnh cho người hiếm muộn tại Thành phố và các tỉnh phía Nam, theo Quyết định số 4711/QĐUB ngày 03 tháng 11 năm 2019.
Chủ tịch UBNDTP đã trao Bằng khen cho những cá nhân có thành tích xuất sắc trong việc hoàn thành nhiệm vụ trong 02 năm liên tiếp (2017, 2018), góp phần tích cực vào phong trào thi đua của thành phố Quyết định số 1797/QĐUB được ban hành vào ngày 10 tháng 3 năm 2019.
Chủ tịch UBNDTP đã trao Bằng khen cho những cá nhân có thành tích xuất sắc trong việc hoàn thành nhiệm vụ trong 02 năm liên tiếp (2019, 2020), góp phần tích cực vào phong trào thi đua của thành phố Quyết định số 1430/QĐUB được ban hành ngày 20 tháng 4 năm 2021.
Danh hiệu Tập thể lao động xuất sắc liên tục qua các năm, từ lúc thành lập khoa Hiếm muộn, tức từ năm 2004 cho đến nay
Khoa Hiếm muộn – Bệnh viện Hùng Vương là trung tâm thứ 5 tại Việt Nam đạt chứng chỉ RTAC và là bệnh viện công lập thứ 2 trong cả nước sở hữu chứng chỉ chất lượng quốc tế này Hiện tại, đây là trung tâm thứ 26 trong khu vực Châu Á – Thái Bình Dương đạt chứng chỉ RTAC, cần được duy trì và thẩm định định kỳ hàng năm Khoa Hiếm muộn đã đạt chứng chỉ RTAC vào năm 2018 và đã tái kiểm định, duy trì chứng chỉ này cho đến nay.
Khoa Hiếm muộn đã tiên phong trong việc áp dụng các kỹ thuật mới về chẩn đoán di truyền trước khi làm tổ (Preimplantation Genetic Screening), đồng thời tăng cường thực hiện sinh thiết phôi PGT Ngoài ra, khoa cũng chú trọng vào việc phát triển dịch vụ mang thai hộ.
Phát triển kỹ thuật đông tinh trùng số lượng ít
Thiết lập những bước khởi đầu về Micro – TESE và Time Lapse.
Tổng quan về Hiếm muộn
1.3.1 Định nghĩa – Nguyên nhân – Phương pháp điều trị Định nghĩa (BVNHHMHàNội) :
Hiếm muộn và vô sinh là tình trạng mà một cặp đôi không thể thụ thai hoặc không có con sau ít nhất một năm quan hệ tình dục bình thường mà không sử dụng biện pháp tránh thai.
Khả năng thụ thai của cặp vợ chồng khỏe mạnh dưới 30 tuổi và quan hệ tình dục thường xuyên từ 2 đến 3 lần mỗi tuần là khoảng 20 – 25% mỗi tháng Hầu hết các cặp vợ chồng sẽ có thai trong vòng một năm đầu nếu không sử dụng biện pháp tránh thai.
Hiếm muộn nguyên phát là một thuật ngữ được sử dụng để chỉ một cặp vợ chồng chưa có thai lần nào
Hiếm muộn thứ phát chỉ những cặp vợ chồng đã có thai ít nhất một lần, nay muốn sinh lại nhưng không thể có thai được
Hiếm muộn là tình trạng bệnh lý ảnh hưởng đến các cặp vợ chồng, với tần suất nguyên nhân do vợ và chồng tương đương nhau Theo thống kê, nguyên nhân hiếm muộn do vợ chiếm 30-40%, do chồng chiếm 30%, cả vợ và chồng chiếm 15-30%, và khoảng 10% trường hợp hiếm muộn không xác định được nguyên nhân.
• Bất thường chất lượng và số lượng tinh trùng
• Thiếu hụt nội tiết do suy tuyến sinh dục
• Nghiện thuốc lá hay rượu
• Rối loạn rụng trứng hay không rụng trứng
• Lạc nội mạc tử cung
Phương pháp điều trị (BVNHHMHàNội) :
❖ Thụ tinh trong ống nghiệm cổ điển
❖ Thụ tinh trong ống nghiệm theo phương pháp ICSI
❖ Hỗ trợ phôi thoát màng
❖ Thụ tinh trong ống nghiệm – Xin trứng hoặc xin tinh trùng
❖ Mổ nội soi chẩn đoán và điều trị
1.3.2 Sinh lý nam và hiếm muộn ở nam giới
Hệ thống sinh sản nam bao gồm các cấu trúc nội bộ như tinh hoàn, mào tinh hoàn, ống dẫn tinh và tuyến tiền liệt, cùng với các cấu trúc bên ngoài như bìu và dương vật Những cấu trúc này được cung cấp mạch máu dồi dào, với nhiều tuyến và ống dẫn, nhằm hỗ trợ quá trình hình thành, lưu trữ và xuất tinh tinh trùng, từ đó phục vụ cho thụ tinh và sản xuất hormone androgen cần thiết cho sự phát triển của nam giới (Gurung P, 2023).
Hệ thống sinh sản nam có chức năng sản xuất androgen, đặc biệt là testosterone, để duy trì khả năng sinh sản và thúc đẩy quá trình sinh tinh Tinh hoàn không chỉ là cơ quan nội tiết mà còn là cơ quan ngoại tiết, đảm nhiệm vai trò sản xuất androgen và vận chuyển tinh trùng vào hệ thống sinh sản nữ để thụ tinh (Gurung P, 2023).
Quá trình sinh tinh bắt đầu từ tuổi dậy thì với các tế bào mầm trong màng đáy của ống sinh tinh tinh hoàn, được điều hòa bởi tế bào Sertoli dưới tác động của FSH Chu kỳ sinh tinh diễn ra khoảng 13 ngày một lần, nhưng không đồng bộ trong tất cả các ống sinh tinh Giai đoạn đầu tiên là nguyên phân của tinh trùng lưỡng bội thành tế bào sinh tinh sơ cấp, tiếp theo là phân bào I tạo ra tế bào sinh tinh thứ cấp đơn bội, sau đó trải qua phân bào II để hình thành tinh trùng đơn bội Các tế bào sinh tinh nguyên thủy nằm ở ngoại vi ống sinh tinh và trưởng thành khi di chuyển vào lòng ống Tinh trùng giảm tế bào chất để biến đổi thành tinh trùng, sau đó được phóng vào ống thận và di chuyển đến mào tinh hoàn để trưởng thành (Gurung P, 2023).
Mào tinh hoàn là một cấu trúc cuộn bao gồm đầu, thân và đuôi, với đuôi nối với ống dẫn tinh để xuất tinh tinh trùng trưởng thành Tinh trùng mất khoảng 12 ngày để trưởng thành và phát triển khả năng vận động trong mào tinh hoàn, sau đó được lưu trữ ở đuôi cho đến khi xuất tinh Tinh trùng trưởng thành có cấu trúc bao gồm đầu chứa nhân và acrosome, phần giữa chứa nhiều ty thể cung cấp năng lượng cho đuôi tinh trùng.
Trong quá trình hưng phấn tình dục, sự giãn mạch giúp máu lưu thông đến dương vật, nơi chứa ống thể hang và ống thể xốp, làm cho dương vật phồng to và cương cứng Khi kích thích tình dục tiếp diễn, máu tiếp tục lưu thông đến bộ phận sinh dục và tinh hoàn, khiến chúng to ra để chuẩn bị cho quá trình xuất tinh.
Khi xuất tinh xảy ra, các cơn co thắt cơ trơn của mào tinh hoàn đẩy tinh trùng vào ống dẫn tinh, nơi nối với ống phóng tinh gần tuyến tiền liệt Các túi tinh sản xuất fructose, cung cấp năng lượng cho tinh trùng, và được giải phóng trong chất lỏng để tạo thành tinh dịch Tinh dịch đi qua tuyến tiền liệt, nơi tuyến này tiết ra chất lỏng kiềm giúp làm đặc tinh dịch, tăng khả năng tồn tại của tinh trùng trong hệ thống sinh sản nữ Cuối cùng, tinh dịch đi qua tuyến Cowper, tiết ra chất lỏng bôi trơn và làm sạch niệu đạo, trước khi vào ống âm đạo của phụ nữ, cho phép tinh trùng di chuyển đến và thụ tinh với trứng.
Nguyên nhân nội tiết gây ra các vấn đề liên quan đến hormone bao gồm thiếu GnRH bẩm sinh (hội chứng Kallmann), hội chứng Prader Willi, hội chứng Laurence-Moon-Beidl, hội chứng quá tải sắt, chấn thương đầu, cũng như việc bổ sung testosterone hoặc tình trạng cường giáp.
Vô căn: vô sinh nam vô căn (10% đến 20%) trong đó các thông số tinh dịch đều bình thường, nhưng nam giới vẫn bị vô sinh
Nguyên nhân di truyền có thể bao gồm đột biến gen CFTR, rối loạn vận động thể mi nguyên phát, và các hội chứng như Kallmann, Klinefelter, Young, cùng với hội chứng chỉ tế bào Sertoli Ngoài ra, các yếu tố như Kal – 1, Kal – 2 và hormone FSH cũng đóng vai trò quan trọng trong các rối loạn di truyền này.
LH, GnRH1 /GNRHR PROK2/PROK2R thiếu gen, dị thường nhiễm sắc thể, vi mất đoạn nhiễm sắc thể Y, đột biến AR, xóa gr/gr
Bất thường bẩm sinh về niệu sinh dục có thể bao gồm rối loạn chức năng hoặc tắc nghẽn mào tinh hoàn, bất thường của ống dẫn tinh, tinh hoàn ẩn, và rối loạn ống phóng tinh như u nang.
Các bất thường về niệu sinh dục có thể bao gồm tắc nghẽn hoặc thắt ống dẫn tinh hai bên, cắt bỏ tinh hoàn hai bên, viêm mào tinh hoàn, giãn tĩnh mạch thừng tinh và xuất tinh ngược.
Nguyên nhân miễn dịch: Viêm giảm tế bào lympho, bệnh hemosiderosis, bệnh hemochromatosis, sarcoidosis, histiocytosis, bệnh lao, nhiễm nấm, v.v
Nhiễm trùng đường tiết niệu: Gonococci, chlamydia, giang mai, lao, nhiễm trùng niệu sinh dục tái phát, viêm tuyến tiền liệt và viêm tuyến tiền liệt tái phát
Rối loạn chức năng tình dục: Xuất tinh sớm, không xuất tinh, quan hệ tình dục không thường xuyên và rối loạn cương dương
Các khối u ác tính như u tuyến yên, u sọ hầu cần được điều trị bằng phẫu thuật hoặc xạ trị Ngoài ra, khối u tinh hoàn và khối u tuyến thượng thận cũng có thể gây ra tình trạng dư thừa nội tiết tố androgen.
Cannabinoids, opioid và thuốc hướng tâm thần có thể ức chế GnRH, trong khi bổ sung testosterone ngoại sinh và androgen steroid cùng với chất tương tự GnRH và thuốc đối kháng được sử dụng trong điều trị ung thư biểu mô tuyến tiền liệt Ngoài ra, liệu pháp glucocorticoid mãn tính, tác nhân alkyl hóa, thuốc kháng androgen, ketoconazole và cimetidine cũng có vai trò quan trọng Độc tố môi trường như thuốc trừ sâu, thuốc diệt nấm, thuốc trừ sâu, cùng với hút thuốc và uống rượu quá mức, đều có thể ảnh hưởng tiêu cực đến sức khỏe.
Các xét nghiệm dùng để chẩn đoán (Stephen W Leslie, 2023):
• Kháng thể kháng tinh trùng (ASA)
• Kiểm tra tính toàn vẹn DNA
• Xét nghiệm nội tiết tố
• Xét nghiệm sau quan hệ tình dục
• Phân tích nước tiểu sau xuất tinh
• Siêu âm qua trực tràng (TRUS)
• Chụp mạch Điều trị (Stephen W Leslie, 2023) :
Quy tắc an toàn sinh học trong phòng xét nghiệm nam khoa
1.4.1 Sơ đồ mặt bằng phòng xét nghiệm
Hình 1.3 Sơ đồ mặt bằng phòng nhận bệnh
Phòng xét nghiệm nam khoa
Hình 1.4 Sơ đồ mặt bằng phòng xét nghiệm nam khoa
1.4.2 Các mối nguy trong phòng xét nghiệm
Tinh dịch có khả năng lây truyền bệnh, vì vậy cần thực hiện các thao tác cẩn thận Trong phòng xét nghiệm Nam khoa, các vi sinh vật như HIV, hepatitis B và C (HBV và HCV) có thể lây nhiễm từ tinh dịch Nhân viên phòng xét nghiệm cần coi tất cả mẫu tinh dịch là có khả năng nhiễm bệnh và phải thực hiện xét nghiệm với sự cẩn trọng cao (WHO, 2021).
1.4.3 Các thao tác an toàn cho nhân viên phòng thí nghiệm
Thao tác an toàn trong phòng xét nghiệm tinh dịch đồ là điều cần thiết cho nhân viên xét nghiệm, được hướng dẫn chi tiết trong quyển Cẩm Nang Xét Nghiệm Chẩn Đoán Và Xử Lý Tinh Dịch Người của WHO (2021).
Tất cả nhân viên phòng xét nghiệm cần tiêm ngừa viêm gan siêu vi B để đảm bảo an toàn sức khỏe Ngoài ra, việc ăn uống, hút thuốc và cất trữ thức ăn trong phòng xét nghiệm nam khoa là hoàn toàn không được phép.
Không được hút pipette bằng miệng; thay vào đó, hãy sử dụng pipette cơ học để lấy tinh dịch Tất cả nhân viên phòng xét nghiệm cần phải mặc đồ bảo hộ hoặc áo choàng dùng một lần trong khu vực làm việc và phải cởi bỏ chúng khi ra ngoài.
Nhân viên phòng xét nghiệm cần đeo găng tay sử dụng một lần, bao gồm găng bằng bao su, nhựa hoặc vinyl, để đảm bảo an toàn khi xử lý mẫu tinh dịch tươi, đông, tinh tương và các mẫu sinh học khác Găng tay phải được bỏ ngay khi rời khỏi phòng xét nghiệm hoặc khi sử dụng điện thoại, máy tính, và tuyệt đối không được tái sử dụng.
Nhân viên cần rửa tay thường xuyên, đặc biệt là trước khi rời khỏi phòng thí nghiệm, sau khi thực hiện xét nghiệm mẫu và sau khi tháo bỏ áo choàng cùng găng tay.
Nhân viên cần cẩn trọng để tránh bị thương bởi các vật sắc nhọn, nhằm giảm nguy cơ nhiễm bệnh từ tinh dịch Việc tiếp xúc trực tiếp của da hoặc vết thương với tinh dịch cũng cần được hạn chế để bảo vệ sức khỏe.
Tránh làm đổ mẫu tinh dịch
Sau khi sử dụng, hãy để các vật sắc nhọn như kim và dao vào một hộp đựng riêng Niêm phong hộp này khi đầy và loại bỏ nó như các vật nguy hiểm khác để đảm bảo an toàn.
Tất cả các thứ có khả năng độc hại (găng tay, lọ chứa mẫu) nên được thu gom và loại bỏ một cách hợp lý
Tất cả nhân viên cần đeo khẩu trang thường hoặc khẩu trang phẫu thuật khi thực hiện các xét nghiệm có khả năng tạo giọt hoặc sol khí, như vortex và ly tâm trong các vật chứa không đậy nắp Việc đẩy mạnh những giọt cuối của mẫu tinh dịch ra khỏi pipette là điều không nên, vì nó có thể tạo ra sol khí.
Nhân viên nên đeo kính bảo hộ, găng tay và giày kín khi cần thiết
1.4.4 An toàn khi sử dụng các thiết bị phòng xét nghiệm
Bề mặt bàn làm việc và các dụng cụ được sử dụng lại nên được rửa sạch và tiệt trùng Cần thực hiện các quy tắc an toàn sau:
Hằng ngày, sau khi xét nghiệm xong phải:
Để lau sạch chỗ làm việc, hãy sử dụng thuốc tẩy như sodium hypochlorite 0,1% (1g/L) hoặc các chất tẩy rửa tương tự Sau khi làm sạch, để yên ít nhất 1 giờ hoặc qua đêm, sau đó rửa lại bằng nước.
Ngâm các buồng đếm và lamelle phủ trong xà phòng có sodium hypochlorite 0,1% (1g/L) hoặc các chất tẩy khác qua đêm Rửa lại bằng nước
Nếu bên ngoài lọ đựng mẫu bị dơ thì rửa với chất tẩy rửa, sodium hypochlorite 0,1% (1g/L) hoặc các chất tẩy tương tự, sau đó rửa lại bằng nuớc
Trong quá trình thao tác làm đỗ mẫu, cần phải rửa sạch bàn làm việc bằng chất tẩy rửa như sodium hypochlorite 1% (10g/L) hoặc các chất tẩy rửa tương tự Sau khi rửa, hãy đợi ít nhất 4 giờ trước khi rửa lại bằng nước để đảm bảo an toàn và vệ sinh.
QUY TRÌNH NHẬN MẪU
Hướng dẫn bệnh nhân làm xét nghiệm
Bệnh nhân trước khi làm tinh dịch đồ phải xét nghiệm bilan nhiễm trùng (các bệnh lây nhiễm: HIV, HbsAg, Giang mai):
❖ Nếu kết quả âm tính, hướng dẫn bệnh nhân lấy mẫu tinh dịch
❖ Nếu kết quả dương tính, hướng dẫn bệnh nhân gặp bác sĩ tư vấn
Ghi thông tin bệnh nhân:
❖ Họ, tên, năm sinh của chồng và vợ
❖ Số ngày kiêng xuất tinh
Cấp phát lọ lấy mẫu cho bệnh nhân
Yêu cầu bệnh nhân kiểm tra tên tuổi được ghi trong lọ.
Hướng dẫn bệnh nhân lấy mẫu
Mẫu tinh dịch được thu thập trong một phòng chuyên dụng gần phòng xét nghiệm để duy trì nhiệt độ ổn định và kiểm soát thời gian giữa thu nhận và phân tích Các xét nghiệm cần được thực hiện trong vòng 30 phút sau khi thu thập, không quá 60 phút.
Hướng dẫn bệnh nhân cách lấy mẫu tinh dịch một cách rõ ràng và yêu cầu họ tham khảo các bảng hướng dẫn trong phòng lấy mẫu Nhấn mạnh rằng bệnh nhân cần thu thập toàn bộ mẫu tinh dịch và nếu có bất kỳ phần nào bị rơi vãi, họ phải thông báo ngay cho nhân viên y tế.
Mẫu nên được thu nhận sau khi kiêng xuất tinh tổi thiểu là 2 ngày và tối đa là
Thời gian kiêng cữ lý tưởng để thu thập mẫu tinh trùng là từ 3 đến 5 ngày Nếu thời gian kiêng quá ngắn, mẫu tinh trùng có thể chứa nhiều tinh trùng non và số lượng ít Ngược lại, nếu thời gian kiêng quá lâu, mẫu thu được sẽ có số lượng nhiều nhưng chất lượng kém, do chứa nhiều tinh trùng già yếu và tinh trùng chết.
Lưu ý rằng khi lấy mẫu, bệnh nhân cần đảm bảo không bị sốt, không hút thuốc và không uống rượu, bia Số ngày kiêng xuất tinh phải được duy trì giống nhau cho tất cả các lần xét nghiệm tiếp theo (nếu có).
2.2.2 Yêu cầu khi lấy mẫu
Hướng dẫn bệnh nhân thực hiện các bước sau đây:
Bước 2: Rửa tay và dương vật với xà phòng, tránh lây nhiễm vi khuẩn trên da vào mẫu
Bước 3: Rửa sạch lại với nước
Bước 4: Lau khô tay và dương vật bằng khăn sử dụng một lần
Bước 5: Tự kích thích bằng tay (thủ dâm) và xuất tinh vào lọ vô trùng để lấy mẫu
Bước 6: Chuyển lọ chứa mẫu tinh dịch cho nhân viên xét nghiệm
2.2.3 Thu thập mẫu tinh dịch trong chẩn đoán hoặc nghiên cứu
Mẫu tinh dịch cần được thu thập bằng phương pháp thủ dâm và xuất tinh vào lọ sạch Lọ chứa mẫu nên được bảo quản ở nhiệt độ từ 20 ℃ đến 37 ℃ để tránh ảnh hưởng của sự thay đổi nhiệt độ đến chất lượng tinh trùng.
Lọ chứa mẫu và giấy tờ hành chính cần được dán nhãn rõ ràng với thông tin định danh để tránh nhầm lẫn trong quy trình tiếp nhận và xử lý mẫu Các yêu cầu pháp lý về định danh lọ lấy mẫu có thể khác nhau, bao gồm thông tin như tên người lấy mẫu, mã số định danh, ngày và thời gian lấy mẫu, hoặc số nhận dạng mẫu duy nhất Để bảo quản mẫu, cần đặt lọ ở nhiệt độ phòng hoặc trong tủ ấm 37 ℃.
Lọ đựng mẫu cần phải là lọ tiệt trùng, làm từ nhựa đặc biệt không độc hại cho tinh trùng và có miệng rộng để thu tinh dịch một cách dễ dàng, tránh rơi vãi Chỉ nên sử dụng lọ do phòng xét nghiệm cung cấp và chỉ dùng một lần.
Để kiểm tra xem lọ chứa mẫu có độc với tinh trùng hay không, cần thu nhận nhiều mẫu với mật độ tinh trùng cao và di động tốt Chia mẫu thành hai phần: một nửa để trong lọ chuẩn (không độc) và nửa còn lại trong lọ cần kiểm tra Đánh giá độ di động của tinh trùng trong hai lọ sau mỗi giờ ở nhiệt độ phòng hoặc 37 ℃ trong vòng 4 giờ Nếu không có sự khác biệt giữa hai mẫu (P > 0,05), thì lọ cần kiểm tra được coi là không độc đối với tinh trùng.
2.2.4 Thu mẫu vô trùng cho mục đích hỗ trợ sinh sản và xét nghiệm sinh hóa Trong trường hợp này cần phải tránh nhiễm sinh hóa từ các nguồn lây nhiễm khác (ví dụ: vi khuẩn trên da) Lọ chứa mẫu, đầu tip và pipette trộn mẫu phải vô trùng Tùy từng nơi yêu cầu pháp lý có thể khác nhau, tuy nhiên quy trình chuẩn bị tinh trùng phải làm giảm nguy cơ lây nhiễm vi sinh vật và các chất khác Khu vực thao tác sạch (Tủ thao tác an toàn sinh học – Laminar Air Flow hood) và chất lượng không khí trong lab cần phải được kiểm soát Người thực hiện cần tôn trọng những nguyên tắc vô trùng Nếu nghĩ mẫu có nguy cơ nhiễm thì xem như đã nhiễm (WHO, 2021).
Tiếp nhận mẫu
Các thông tin sau đây cần được ghi lại khi tiếp nhận mẫu và trình bày trong phiếu trả kết quả:
❖ Thông tin bệnh nhân (ví dụ: tên, năm sinh, mã số cá nhân) và xác nhận đó là mẫu tự thân;
❖ Khoảng thời gian kiêng xuất tinh;
Việc thu thập mẫu xuất tinh có thể gặp khó khăn, đặc biệt nếu quá trình này không được thực hiện tại phòng thí nghiệm Điều quan trọng là xác định xem có thu được toàn bộ mẫu hay không để đảm bảo tính chính xác của kết quả.
Kiểm tra thể tích tinh dịch là bước quan trọng trong quá trình xét nghiệm Nếu thể tích xuất tinh đạt ≥ 1 mL, mẫu cần được đặt vào tủ ấm để chờ ly giải Ngược lại, nếu thể tích xuất tinh < 1 mL, cần xem xét trường hợp bệnh nhân có làm rơi mẫu tinh dịch hoặc nếu các lần xuất tinh trước đó có thể tích lớn hơn, trong trường hợp này, bệnh nhân nên hẹn lịch để lấy mẫu lại.
Xử lý mẫu ban đầu
Tinh dịch sau khi được thu nhận nên để ly giải ngay, tốt nhất là ở trong tủ ấm
37 ℃ và nếu có thể, đặt lên một máy lắc tròn để thuận tiện cho việc ly giải và trộn đều mẫu (WHO, 2021)
Để đảm bảo chất lượng kết quả xét nghiệm tinh trùng, cần ghi rõ thời gian từ khi thu mẫu đến khi bắt đầu khảo sát đại thể Phân tích nên được tiến hành trong vòng 30 phút và không quá 60 phút sau khi lấy mẫu, vì tinh trùng tiếp xúc lâu với tinh tương sau khi ly giải có thể ảnh hưởng đến độ di động và hình thái của chúng (WHO, 2021).
Một số phương pháp lấy mẫu khác
2.5.1 Thu mẫu tinh dịch tại nhà
Trong một số trường hợp ngoại lệ, bệnh nhân có thể thu nhận mẫu tại nhà nếu không thể lấy mẫu bằng thủ dâm trong phòng lấy tinh trùng hoặc không đủ điều kiện để đến phòng xét nghiệm.
Hướng dẫn bệnh nhân cách lấy mẫu và vận chuyển mẫu tinh dịch một cách rõ ràng Mẫu phải được thu thập hoàn toàn vào lọ chứa, và bệnh nhân cần thông báo ngay nếu có làm rơi vãi mẫu Ngoài ra, cần ghi chú vào phiếu trả kết quả nếu mẫu không được thu nhận hoàn toàn.
Bệnh nhân cần chú ý ghi lại thời gian xuất tinh và chuyển mẫu đến phòng thí nghiệm trong vòng 1 giờ Trong quá trình vận chuyển, mẫu cần được bảo quản ở nhiệt độ từ 20 ℃ đến 30 ℃.
Ghi chú vào phiếu trả kết quả là mẫu lấy ở nhà hoặc ở nơi khác ngoài phòng xét nghiệm
2.5.2 Thu mẫu tinh dịch bằng bao cao su
Mẫu chỉ có thể được lấy từ bao cao su trong những trường hợp đặc biệt, chẳng hạn như khi bệnh nhân không thể lấy mẫu bằng phương pháp thủ dâm Các khuyến cáo này được trích dẫn từ cẩm nang của Tổ Chức Y Tế Thế Giới (WHO, 2021).
Chỉ nên sử dụng bao cao su được thiết kế đặc biệt để chứa tinh trùng, khác với các loại bao cao su thông thường trên thị trường, vì loại bao này không chứa chất kháng tinh trùng.
❖ Hướng dẫn bệnh nhân cách sử dụng bao cao su, đóng gói và gửi hoặc vận chuyển đến phòng xét nghiệm
❖ Bệnh nhân cần phải ghi nhận thời gian xuất tinh và chuyển mẫu tới phòng xét nghiệm trong vòng 1 giờ
❖ Trong suốt quá trình vận chuyển đến phòng xét nghiệm, mẫu cần phải được giữ ở nhiệt độ 20 ℃ – 30 ℃
Khi thu thập mẫu tinh dịch để xét nghiệm, cần ghi chú rõ ràng rằng mẫu có thể được lấy bằng bao cao su qua giao hợp tại nhà hoặc nơi khác ngoài phòng xét nghiệm Tuyệt đối không sử dụng bao cao su thông thường để đựng mẫu, vì chúng có thể chứa các chất ảnh hưởng đến độ di động của tinh trùng (Jones, 1986) Ngoài ra, không nên thu nhận mẫu bằng phương pháp giao hợp gián đoạn, vì những giọt tinh dịch đầu tiên chứa nhiều tinh trùng có thể bị mất Mẫu cũng có nguy cơ bị nhiễm tế bào lạ hoặc vi khuẩn, và pH thấp của dịch nhầy âm đạo có thể làm giảm khả năng di động của tinh trùng.
QUY TRÌNH XÉT NGHIỆM TINH DỊCH ĐỒ
Tiền xử lý mẫu
Khi nhận lọ mẫu từ bệnh nhân, cần kiểm tra thông tin trên lọ và giấy ghi chú, bao gồm họ tên, năm sinh của bệnh nhân, và thông tin vợ nếu bệnh nhân đã có gia đình, để xác nhận tính chính xác của thông tin và người lấy mẫu (WHO, 2021).
3.1.2 Xác định thể tích mẫu
Thể tích tinh dịch là chỉ số quan trọng phản ánh hoạt động của các tuyến sinh dục và khả năng co bóp của cơ trơn trong việc đẩy dịch vào hệ thống ống dẫn Nó cũng cho thấy sự đáp ứng của cơ quan sinh dục đối với kích thích tình dục thông qua hệ thần kinh thực vật Để có kết quả chính xác, thời điểm cân mẫu tốt nhất là ngay khi vừa nhận mẫu, theo phương pháp hướng dẫn của Cẩm Nang Xét Nghiệm Chẩn Đoán Và Xử Lý Tinh Dịch Người (WHO, 2021).
❖ Bật cân và để cân ổn định
❖ Đặt 1 lọ sạch, không chứa mẫu lên cân rồi bấm tare
❖ Đặt lọ mẫu lên cân và đợi cân ổn định
❖ Ghi nhận kết quả cân
Một phương pháp khác để đo thể tích mẫu là sử dụng pipet hút toàn bộ mẫu, nhưng phương pháp này có thể gây thất thoát từ 0.3 – 0.9mL Hơn nữa, việc hút mẫu có thể tạo ra bọt khí khó nhìn thấy bằng mắt thường, dẫn đến sai số trong việc xác định thể tích thực Đặc biệt, mẫu có thể tích nhỏ dễ bị dính lại ở thành pipet, gây hao hụt thêm.
Đánh giá đại thể
Đánh giá đại thể là bước quan trọng để có cái nhìn tổng quan ban đầu về mẫu tinh dịch, mặc dù không cung cấp số liệu định lượng chính xác Quá trình này nên được thực hiện trong khoảng 30 đến 60 phút từ khi tiếp nhận mẫu, nhằm bảo đảm chất lượng tinh trùng không bị ảnh hưởng bởi thời gian tiếp xúc với tinh tương Việc nhanh chóng thực hiện đánh giá giúp ngăn chặn mất nước và tác động của nhiệt độ môi trường, từ đó bảo vệ chất lượng tinh dịch và kết quả xét nghiệm Các yếu tố chính trong đánh giá đại thể bao gồm màu sắc, hình dạng, ly giải, độ nhớt, thể tích và độ pH (WHO, 2021).
Mẫu khỏe mạnh thường có mùi tanh, trong khi mẫu có mùi khai do lẫn nước tiểu hoặc thối rữa cần được ghi chú để phục vụ cho việc đánh giá lâm sàng (WHO, 2021).
Mẫu tinh dịch bình thường thường có màu trắng đục, trắng xám hoặc màu kem, với độ đục phụ thuộc vào số lượng tinh trùng có trong mẫu Nếu không xuất tinh trong thời gian dài, màu tinh dịch có thể hơi ngả vàng (WHO, 2021).
Mẫu tinh dịch có màu nâu, đỏ hoặc hồng có thể là dấu hiệu của xuất tinh ra máu, liên quan đến viêm nhiễm, tổn thương, vỡ mạch máu quanh túi tinh, hoặc các bệnh lý như bệnh lây truyền qua đường tình dục, bệnh tán huyết, ung thư tinh hoàn, và giãn tĩnh mạch niệu đạo Trong khi đó, mẫu có màu vàng sậm thường gặp ở bệnh nhân vàng da, có thể do sự hiện diện của bạch cầu hoặc do sử dụng một số loại vitamin và thuốc (WHO, 2021).
Mẫu màu xanh lá hiếm gặp có thể chỉ ra nguy cơ nhiễm trùng tuyến tiền liệt hoặc các mô xung quanh Trong khi đó, nếu mẫu xuất hiện trong suốt và không màu, điều này cho thấy chỉ có dịch tiền xuất tinh từ tuyến Cowper, liên quan đến khả năng đạt cực khoái khi được kích thích (WHO, 2021).
Ly giải là quá trình được điều hòa bởi dịch tiết tuyến tiền liệt, chứa axit citric và các enzyme phân giải protein như lysozyme, α-amylase và β-glucuronidase Quá trình này cũng liên quan đến kháng nguyên đặc hiệu tuyến tiền liệt PSA và peptidase – 3, có hoạt tính enzyme tương tự chymotrypsin, giúp cắt các protein semenogelin (Krausz, 2023).
Tinh dịch ban đầu khi xuất ra có dạng nửa đông đặc như gel, cần 15-30 phút để ly giải ở nhiệt độ 37°C hoặc phòng Trong quá trình này, tinh dịch trở nên đồng nhất và lỏng hơn, nhưng vẫn giữ độ nhớt cao hơn nước Nếu sau 60 phút mà mẫu tinh dịch vẫn chưa ly giải, cần ghi nhận đây là dấu hiệu bất thường Mẫu ly giải bình thường có thể còn lợn cợn một ít dạng thạch chưa ly giải, hiện tượng này không có ý nghĩa lâm sàng (WHO, 2021).
3.2.3 Độ nhớt Độ nhớt của tinh dịch là một thông số quan trọng cho quá trình thụ tinh Độ nhớt bình thường cho phép tinh trùng di chuyển vào chất nhầy cổ tử cung để đến ống dẫn trứng, bảo tồn khả năng vận động của tinh trùng, ngăn ngừa peroxid hóa lipid và duy trì tính toàn vẹn của nhiễm sắc thể tinh trùng Tuy nhiên, nếu độ nhớt quá cao sẽ cản trở sự di chuyển cũng như mật độ của tinh trùng, từ đó làm giảm cơ hội thụ tinh Trường hợp mẫu chứa mức độ bạch cầu cao hay của bệnh nhân bị nhiễm trùng cũng là nguyên nhân gây ra độ nhớt cao (Barbagallo, 2021)
Phương pháp kiểm tra độ nhớt sử dụng pipet nhựa một lần có đường kính khoảng 1.5 mm để hút mẫu dịch sau khi ly giải Sau đó, nhỏ từng giọt hoặc chấm đầu pipet vào tinh dịch và quan sát chiều dài mỗi giọt Đối với mẫu bình thường, các giọt sẽ rơi xuống rời nhau, trong khi mẫu nhớt sẽ tạo thành sợi dài trên 2 cm.
Nếu không có pipet, một phương pháp khác để xác định độ nhớt của mẫu là sử dụng đũa thủy tinh Bạn chỉ cần chấm đũa vào mẫu và quan sát chiều dài sợi nhớt được hình thành.
Trong quá trình thực hiện mẫu đánh giá vi thể, độ nhớt cao của mẫu có thể gây ra sự không đồng đều trong việc phết phiến, dẫn đến độ dày mỏng khác nhau Điều này ảnh hưởng trực tiếp đến khả năng phân tích và độ chính xác của kết quả.
Kỹ thuật viên cần thực hiện quy trình phá nhớt bằng cách hút nhả liên tục tinh dịch, nhằm hạn chế tối đa việc tạo bọt khí, cho đến khi mẫu không còn hoặc độ nhớt được giảm đáng kể.
3.2.4 Độ pH Độ pH đóng vai trò thiết yếu trong việc duy trì chức năng của tinh trùng trong quá trình thụ tinh.Yếu tố này của tinh dịch chủ yếu phụ thuộc vào dịch tiết của túi tinh có tính kiềm và dịch tiết tuyến tiền liệt có tính axit hơn Hơn 60% lượng xuất tinh có nguồn gốc từ túi tinh, trong khi tuyến tiền liệt đóng góp khoảng 30% Chất lỏng được tiết ra bởi túi tinh chiếm phần lớn trong tinh dịch huyết tương và có hàm lượng fructose cao cung cấp năng lượng cần thiết cho chức năng tinh trùng bình thường Trong khi dịch tiết từ tuyến tiền liệt có chứa lipid, acid citric, các enzyme phân giải protein, kẽm và acid phosphatase, còn đối với chất lỏng được tiết ra bởi các tuyến hành niệu đạo có chức năng như một chất bôi trơn cho niệu (Du Plessis,
Huyết tương tinh dịch là hỗn hợp dịch tiết từ tinh hoàn, mào tinh hoàn và các tuyến sinh dục phụ, chứa các thành phần như HCO3-/CO2, ion vô cơ, acid hữu cơ, đường, lipid, steroid, acid amin, polyamine, nitrogen base và protein, tạo nên hệ thống đệm tinh dịch Độ pH bình thường của tinh dịch dao động từ 6.0 đến 10.0, với tinh dịch khỏe mạnh đạt pH 7.2.
Cách đo pH của mẫu:
❖ Trộn đều mẫu bằng cách pipetting
❖ Nhỏ 1 giọt tinh dịch lên phiến sạch và cho 1 mẫu giấy quỳ lên
❖ Để mẫu ngấm vào giấy quỳ và hiện màu
❖ So sánh màu xuất hiện trên giấy với dải hiệu chuẩn đọc pH
Đánh giá vi thể
3.3.1 Đánh giá trên tiêu bản tươi
Cách chuẩn bị tiêu bản tươi:
Phương pháp chuẩn bị tiêu bản tươi được thực hiện theo WHO 2021 (WHO,
Trước khi chuẩn bị tiêu bản tươi, mẫu tinh dịch cần được lắc nhẹ trong 15 - 30 giây để đảm bảo sự đồng nhất Việc không trộn kỹ mẫu sẽ dẫn đến sự khác biệt về mật độ, tỷ lệ di động, tỷ lệ sống và hình dạng tinh trùng khi quan sát trên hai tiêu bản khác nhau Sau khi đã trộn đều, tiến hành chuẩn bị hai tiêu bản lame tươi để đánh giá theo các bước cụ thể.
❖ Nhỏ một giọt tinh dịch 10 àL đó được trộn đều lờn lame kớnh sạch
❖ Đặt nhẹ nhàng lamelle lên giọt tinh dịch, tránh để hình thành bọt khí giữa lame và lamelle
❖ Đợi 1 phút để tiêu bản ổn định và đánh giá lame tươi dưới kính hiển vi
Kiểm tra sự phân bố đồng đều của tinh trùng trên hai tiêu bản dưới độ phóng đại x100 (vật kính x10 và thị kính x10) Nếu tinh trùng được phân bố đồng đều, tiến hành đánh giá vi thể; ngược lại, nếu phân bố không đồng đều, cần làm lại hai tiêu bản.
Để đánh giá độ di động của tinh trùng, cần chuyển sang độ phóng đại x400 Ngoài ra, tỷ lệ pha loãng cần thiết để xác định mật độ tinh trùng và phát hiện sự hiện diện của các tế bào khác như bạch cầu hoặc tế bào dòng tinh chưa trưởng thành cũng rất quan trọng.
Các chỉ tiêu đánh giá: Đánh giá tinh trùng vón cục
Tinh trùng có 2 dạng vón cục khác nhau cần đánh giá
Kết đám là hiện tượng tinh trùng không di động dính chặt vào nhau hoặc kết hợp với các chất nhầy, tế bào không phải tinh trùng, hoặc các mảnh vụn khác.
Hình 3.1 Sự kết đám tinh trùng
Sự dính chặt của các tinh trùng di động với nhau theo kiểu đầu với đầu, đuôi với đuôi hoặc dính đầu với đuôi (WHO, 2021)
Hình 3.2 Sự kết dính tinh trùng
Các tế bào không phải tinh trùng:
Trong mẫu xuất tinh, bên cạnh tinh trùng, còn có các tế bào khác như tế bào biểu mô và tế bào tròn (bạch cầu hoặc tinh trùng chưa trưởng thành), có thể liên quan đến tình trạng bệnh lý lâm sàng của bệnh nhân Theo WHO (2021), những tế bào này được coi là các tế bào lạ trong mẫu tinh dịch Đánh giá độ di động của tinh trùng cũng là một yếu tố quan trọng trong phân tích này (WHO, 2021).
Tỷ lệ di động của tinh trùng tiến tới có mối liên hệ chặt chẽ với khả năng thụ thai Tổng số tinh trùng di động trong mẫu xuất tinh đóng vai trò quan trọng trong việc đánh giá khả năng sinh sản.
Khả năng di động của tinh trùng được phân thành bốn loại:
Tinh trùng di chuyển nhanh chóng, với tốc độ ít nhất 25 µm/s, có thể di chuyển theo đường thẳng hoặc tạo thành một vũng tròn lớn, đạt được khoảng một nửa chiều dài đuôi trong một giây.
Di động tiến tới chậm: tinh trùng di chuyển tích cực, tuyến tính hoặc thành một vũng trũn lớn, quóng đường di chuyển khoảng từ 5 đến 25 àm/s
Tinh trùng không tiến tới là tình trạng mà tất cả các tinh trùng có đuôi chỉ bơi trong những vùng trũng nhỏ, với phần đầu di chuyển một đoạn ngắn hơn 5 micromet.
Bất động: không thấy đuôi chuyển động
Cách đánh giá độ di động:
Để thực hiện quy trình, bước đầu tiên là tạo hai tiêu bản lame tươi và chờ ổn định trong khoảng sáu mươi giây Tiếp theo, cần đếm tinh trùng cách mép lame phủ ít nhất 5 mm để tránh hiện tượng khô mẫu, và đánh giá một vi trường bất kỳ mà không cần đợi tinh trùng bơi vào vùng đếm.
Bước 3: Đánh giá độ di động của tất cả các tinh trùng trong vi trường bằng cách đếm có hệ thống Bắt đầu từ tinh trùng tiến tới nhanh và chậm để tránh đánh giá quá cao số lượng tinh trùng loại này Sau đó, tiến hành đếm số lượng tinh trùng không tiến tới và bất động Để hạn chế sai số, cần đếm ít nhất 200 tinh trùng trong ít nhất 5 vi trường ở mỗi tiêu bản.
Bước 4: Tính tỷ lệ phần trăm (%) của bốn loại di động trong hai tiêu bản riêng biệt và xác định phần trăm trung bình cùng độ sai biệt giữa hai tiêu bản để xác định khoảng chấp nhận sai số Nếu sự khác biệt giữa các tỷ lệ phần trăm nằm trong khoảng chấp nhận được, ghi lại tỷ lệ phần trăm trung bình cho từng cấp độ di động: (a) tiến tới nhanh; (b) tiến tới chậm; (c) không tiến tới; (d) không tiến tới Nếu sai số vượt quá ngưỡng cho phép, cần tiến hành đánh giá lại một lần nữa.
Lưu ý: Tổng tỷ lệ phần trăm di động của bốn loại di động phải là 100 Nếu là
Giá trị của nhóm chiếm ưu thế được điều chỉnh về tổng số là 100, với giới hạn từ 99 đến 101 Nếu tổng số nằm ngoài khoảng này, cần kiểm tra và loại bỏ các lỗi đếm hoặc tính toán Đánh giá tỷ lệ sống của tinh trùng theo tiêu chuẩn WHO (2021) là một phần quan trọng trong quy trình này.
Tỷ lệ sống của tinh trùng được đánh giá qua tính toàn vẹn của màng tế bào và có thể thực hiện trên tất cả các mẫu xuất tinh Để xác định tỷ lệ tinh trùng sống, người ta sẽ kiểm tra những tinh trùng có màng tế bào nguyên vẹn, không bắt màu thuốc nhuộm hoặc phù nhược trương Phương pháp được khuyến nghị để đánh giá tỷ lệ sống của tinh trùng là test eosin - nigrosin.
Tỷ lệ sống của tinh trùng cần được đánh giá ngay sau khi lấy mẫu, lý tưởng nhất là trong vòng 30 phút và không quá 1 giờ sau khi xuất tinh Việc này giúp hạn chế tác động của các yếu tố môi trường đến sức sống của tinh trùng.
Kỹ thuật nhuộm eosin - nigrosin là phương pháp xét nghiệm xác định sự sống chết của tinh trùng, trong đó nigrosin tạo nền tối màu giúp tăng độ tương phản và dễ nhận biết tinh trùng Dưới kính hiển vi, tinh trùng sống có đầu trắng, trong khi tinh trùng chết có đầu màu đỏ hoặc hồng Tinh trùng có đầu màu hồng nhạt được coi là chết, trong khi nếu chỉ bắt màu ở phần cổ mà phần còn lại vẫn sáng, chúng được đánh giá là "rò màng bào tương cổ" và được xem là sống.
Quy trình xác định sống chết bằng kỹ thuật nhuộm eosin - nigrosin
Bước 1: Trộn đều mẫu tinh dịch
Bước 2: Lấy 50 àl tinh dịch đó ly giải trộn đều với thể tớch tương đương hỗn hợp hóa chất nhuộm eosin - nigrosin
Bước 3: Phết mẫu lên lame kính và để khô trong không khí
Lưu ý: Đánh giá mẫu ngay sau khi khô hoặc sau khi xử lý với mô trường cố định mẫu không chứa nước
KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN
Đại thể
Hình 4.1 Màu sắc mẫu tinh dịch
Bình thường: Tinh dịch đồng nhất, màu trắng hoặc xám đục
Tinh dịch màu vàng: mẫu nhiễm trùng, có lẫn nước tiểu hoặc do đang uống một số loại vitamin
Tinh dịch màu đỏ nâu hoặc hồng: mẫu có lẫn hồng cầu
Tinh dịch loãng, trắng trong: thường là thiểu tinh hoặc vô tinh
Tinh dịch có cặn nhiều: có thể do viêm nhiễm đường tiết niệu
Khả năng cảm nhận mùi tinh dịch có sự khác biệt giữa các kỹ thuật viên, và mùi này phụ thuộc vào chế độ ăn uống cũng như tình trạng viêm nhiễm của bệnh nhân Nếu mẫu tinh dịch có mùi khai hoặc mùi thối rữa, cần ghi chú rõ ràng trong phiếu kết quả xét nghiệm.
Hình 4.2 Thể tích tinh dịch
Thể tích của mẫu là số gam của tinh dịch Khối lượng riêng tinh dịch dao động trong khoảng 1.043 và 1.102 (WHO, 2021)
Ghi nhận thể tích mẫu là 7.9 mL
Giá trị thể tích tinh dịch bình thường theo chuẩn WHO 2021: ≥ 1.4 mL
Thể tích tinh dịch ít: Tắc hoặc thiếu ống dẫn tinh 2 bên bẩm sinh, xuất tinh ngược dòng, thất thoát mẫu, thiếu hụt androgen
Thể tích tinh dịch nhiều: Tăng tiết do viêm nhiễm tuyến dinh dục, thời gian kiêng xuất tinh quá lâu
Hình 4.3 Tinh dịch chưa ly giải
Tinh dịch trở nên đồng nhất và lỏng hơn theo thời gian, với một số vùng thạch nhỏ còn sót lại ở giai đoạn cuối Trong mẫu chưa ly giải, thường có những hạt lợn cợn giống như thạch ở đáy lọ Quá trình ly giải tinh dịch diễn ra nhờ các enzyme do tiền liệt tuyến tiết ra Thông thường, tinh dịch sẽ ly giải hoàn toàn sau khoảng 15 phút ở nhiệt độ phòng, nhưng đôi khi quá trình này có thể kéo dài đến 60 phút hoặc hơn.
Chú ý rằng các mẫu ly giải bình thường có thể chứa những hạt giống thạch nhỏ li ti không ly giải, nhưng điều này không gây ảnh hưởng đáng kể trong lâm sàng.
Hình 4.4 Mẫu tinh dịch có độ nhớt bất thường
Mẫu tinh dịch nhớt là một dung dịch đồng nhất, kết dính và độ nhớt không thay đổi theo thời gian
Bình thường: giọt tinh dịch nhỏ rời rạc từng giọt
Tinh dịch có dấu hiệu bất thường khi dính chặt vào nhau và kéo dài hơn 2cm khi sử dụng pipette, cho thấy độ nhớt cao do sự tiết ra bất thường từ các tuyến phụ Tình trạng này gây khó khăn trong việc đánh giá tỷ lệ di động và mật độ tinh trùng.
Hình 4.5 Độ pH tinh dịch bình thường
Mẫu tinh dịch có pH dưới 7.2 có thể là biểu hiện của giảm thể tích dịch túi tinh, hoặc cũng có thể do nhiễm nước tiểu trong mẫu
Mẫu sau khi xuất tinh không có cơ chế đặc hiệu để điều chỉnh độ pH, dẫn đến việc độ pH tăng dần trong điều kiện phòng xét nghiệm do quá trình thất thoát.
CO2 (giảm dung dịch đệm tự nhiên).
Vi thể
Xác định độ pha loãng
Hình 4.6 Vi trường tinh trùng ở vật kính 40X
Số lượng tinh trùng/ vi trường 40X là khoảng 90 tinh trùng Dựa vào Hình 3.5 Xác định độ pha loãng là 1:20
Suy ra thể tớch tinh dịch là 50 àL
Thể tớch dung dịch pha loóng là 950 àL Đánh giá số lượng tinh trùng trong buồng đếm
Hình 4.7 Lưới trung tâm buồng đếm thứ nhất dưới vật kính 10X
Số lượng tinh trùng ở ô vuông lớn trên cùng bên trái của ô trung tâm: 8
Hình 4.8 Ô đầu tiên trên trái lưới trung tâm buồng đếm thứ nhất
Vì < 10 tinh trùng: đếm 25 ô vuông lớn (toàn bộ lưới trung tâm)
• Số lượng tinh trùng ở 5 ô vuông lớn hàng 1: 36
• Số lượng tinh trùng ở 5 ô vuông lớn hàng 2: 25
• Số lượng tinh trùng ở 5 ô vuông lớn hàng 3: 28
• Số lượng tinh trùng ở 5 ô vuông lớn hàng 4: 35
• Số lượng tinh trùng ở 5 ô vuông lớn hàng 5: 33
Vì chưa đếm đủ 200 con tinh trùng nên đếm thêm 1 lưới ngoại vi
• Số lượng tinh trùng ở lưới ngoại vi: 135
• Tổng số tinh trùng buồng đếm 1: 292
Chuyển sang buồng đếm thứ hai và đếm trên cùng số lượng ô vuông hoặc lưới của buồng đầu, kể cả khi lần đếm này không đạt tới 200 tinh trùng
Hình 4.9 Lưới trung tâm buồng đếm thứ hai dưới vật kính 10X
Số lượng tinh trùng ở buồng đếm 2:
• Số lượng tinh trùng ở 5 ô vuông lớn hàng 1: 29
• Số lượng tinh trùng ở 5 ô vuông lớn hàng 2: 37
• Số lượng tinh trùng ở 5 ô vuông lớn hàng 3: 36
• Số lượng tinh trùng ở 5 ô vuông lớn hàng 4: 30
• Số lượng tinh trùng ở 5 ô vuông lớn hàng 5: 37
• Số lượng tinh trùng ở lưới ngoại vi: 159
• Tổng số tinh trùng buồng đếm 2: 328
So sánh sự khác biệt giữa các lần đếm
Giá trị tổng = Tổng số tinh trùng buồng đếm 1 + Tổng số tinh trùng buồng đếm 2= 292 + 328 = 620
Dựa vào Hình 3.6 xác định giới hạn chênh lệch được chấp nhận:
Giới hạn chênh lệch (sai số) = Tổng số tinh trùng cao của buồng đếm - Tổng số tinh trùng thấp buồng đếm = 328 – 292 = 36 => Đạt
Tính mật độ tinh trùng
Dựa vào Hình 3.7 xác định hệ số điều chỉnh với các thông số tỷ lệ pha loãng 1:20, số lưới đếm là 2 lưới Hệ số điều chỉnh là 20
Mật độ tinh trùng = Giá trị tổng
Tổng số lượng tinh trùng
Tổng số tinh trùng = Mật độ × thể tích tinh dịch = 31 × 7.9 = 244.9 (triệu)
Hình 4.10 Quang trường tinh trùng tiêu bản 1 ở độ phóng đại 400X
Hình 4.11 Quang trường tinh trùng tiêu bản 2 ở độ phóng đại 400X
Bảng 4.1 Khả năng di động của tinh trùng giữa tiêu bản 1 và 2
Số tinh trùng đếm được
Số tinh trùng đếm được
Di động tiến tới nhanh (A) 68 32 54 27
Di động tiến tới chậm (B) 43 20 49 24
Bảng 4.2 Khả năng di động của tinh trùng trong mẫu tinh dịch
Trung bình phần trăm di động (%) Sai số Kết luận phần trăm di động
Di động tiến tới nhanh (A) 30 5 30
Di động tiến tới chậm (B) 22 4 22
4.2.3 Hình thái bình thường và bạch cầu
Hình 4.12 Quan sát mẫu nhuộm vi trường thứ nhất dưới vật kính nhúng dầu
Hình 4.13 Quan sát mẫu nhuộm vi trường thứ hai dưới vật kính 100X
Bảng 4.3 Phân tích hình dạng tinh trùng và tế bào lạ trong mẫu nhuộm
Nhận xét khác về đầu
1 Bất thường Bình thường Bình thường Bất thường
3 Bất thường Nhọn Gãy Bình thường Bất thường
4 Bất thường Bình thường Bình thường Bất thường
5 Bất thường Nhỏ Dày Ngắn Bất thường
6 Bất thường Nhỏ Dày Bình thường Bất thường
7 Bất thường Nhỏ Không đối xứng Bất thường Bất thường
8 Bất thường Dày Bình thường Bất thường
9 Bất thường Dày Bình thường Bất thường
10 Bất thường Xoắn Bất thường
11 Bất thường Dày Ngắn Bất thường
12 Bất thường Không đối xứng Bình thường Bất thường
13 Bất thường Nhọn Dày Bất thường
14 Bất thường Không đối xứng/dày Bình thường Bất thường
15 Bất thường To Bình thường Bình thường Bất thường
16 Bất thường Không đối xứng Bình thường Bất thường
17 Bất thường Bình thường Bình thường Bất thường
18 Bất thường Dày Bình thường Bất thường
19 Bình thường Dày Bình thường Bất thường
20 Bình thường Không đối xứng/dày Bình thường Bất thường
Nhận xét khác về đầu
21 Bất thường Bất thường Bất thường
22 Bất thường Không đối xứng Bất thường Bất thường
23 Bất thường Nhỏ Bình thường Bình thường Bất thường
24 Bình thường Bình thường Bình thường Bình thường
25 Bình thường Không đối xứng Bất thường Bất thường
26 Bất thường Nhỏ Bất thường Bất thường Bất thường
27 Bât thường Dày Bất thường Bất thường
28 Bất thường Nhọn Bình thường Bất thường
29 Bất thường Không đối xứng/dày Bình thường Bất thường
NHẬN XÉT VÀ KIẾN NGHỊ
Nhận xét
Tinh dịch đồ là xét nghiệm đánh giá chất lượng tinh trùng dựa trên tình trạng và tính chất của mẫu tinh dịch, với các tiêu chí như số lượng, khả năng di động, hình dạng và mật độ Xét nghiệm này tuân theo tiêu chuẩn của Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) và chỉ có thể phỏng đoán khả năng sinh sản của nam giới, không thể kết luận về vô sinh Kết quả tinh dịch đồ kết hợp với sức khỏe sinh sản của người vợ sẽ giúp chuyên gia đưa ra phương án điều trị cho cặp vợ chồng hiếm muộn.
Quá trình lấy tinh dịch diễn ra trong một phòng riêng tại khoa Hiếm muộn, với yêu cầu bệnh nhân nam kiêng xuất tinh từ 2 đến 7 ngày để mẫu tinh dịch phản ánh chính xác tình trạng sức khỏe sinh sản Bệnh nhân sẽ tự thu thập mẫu bằng cách thủ dâm và xuất tinh vào lọ chuyên dụng Để đảm bảo độ chính xác, mẫu tinh dịch cần được phân tích trong vòng 2 giờ sau khi thu thập.
Các giá trị sau đây do Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) xây dựng để phân tích tinh dịch bình thường như:
❖ Mật độ: Ít nhất là 16 triệu tinh trùng/ml
❖ Hình thái bình thường: Ít nhất 4% tinh trùng bình thường
❖ Độ di động: Trên 30% tinh trùng chuyển động về phía trước
❖ Lượng bạch cầu: Ít hơn 1 triệu/mL
❖ Tỷ lệ tinh trùng sống trên 54%
Mặc dù kết quả tinh dịch đồ không đạt tiêu chuẩn có thể khiến người ta nghi ngờ về khả năng sinh sản của nam giới, nhưng điều này không nhất thiết đồng nghĩa với việc họ vô sinh, vì khả năng sinh sản còn phụ thuộc vào nữ giới Nhiều nam giới có lượng tinh trùng thấp vẫn có thể sinh sản bình thường, trong khi những người có số lượng tinh trùng bình thường cũng không đảm bảo khả năng sinh sản tốt Chất lượng tinh dịch có thể thay đổi đáng kể giữa các mẫu, ngay cả ở nam giới có khả năng sinh sản Các yếu tố như bệnh tật, sốt và nhiễm trùng có thể ảnh hưởng đến số lượng tinh trùng trong vài tháng Để đánh giá chính xác khả năng sinh sản, cần thực hiện ít nhất hai lần phân tích tinh dịch và tham khảo ý kiến từ các chuyên gia về kết quả xét nghiệm.
Kiến nghị
Xét nghiệm tinh dịch đồ là bước đầu tiên trong việc đánh giá khả năng sinh sản ở nam giới Để xác định nguyên nhân gây ra tình trạng vô sinh hiếm muộn, cần tiến hành thêm các xét nghiệm lâm sàng khác.
❖ Xét nghiệm sinh thiết tinh hoàn
❖ Xét nghiệm đánh giá nội tiết tố
❖ Xét nghiệm kiểm tra di truyền
• Xét nghiệm vi mất đoạn nhiễm sắc thể Y
Vô sinh và hiếm muộn ở nam giới là một vấn đề sức khỏe nghiêm trọng Để cải thiện khả năng sinh sản và phòng ngừa tình trạng này, mỗi người đàn ông cần nắm rõ nguyên nhân và các phương pháp điều trị hiệu quả Việc áp dụng các biện pháp phòng ngừa và cải thiện sức khỏe sinh sản sẽ giúp hạn chế tình trạng vô sinh hiếm muộn.
❖ Rèn luyện sức khỏe (tập thể dục, ăn uống lành mạnh)
❖ Không sử dụng các chất kích thích như thuốc lá, bia rượu, ma túy
❖ Quan hệ tình dục lành mạnh
❖ Hạn chế sự dụng các thực phẩm giúp tăng cơ trong quá trình tập gym
❖ Hạn chế tiếp xúc với môi trường có hóa chất độc hại, phóng xạ
❖ Giữ tinh thần thư giãn, không thức khuya
❖ Tránh các yếu tố gây tích tụ nhiệt kéo dài ở bộ phận sinh dục như ngồi tại chỗ thời gian dài, mặc quần bó, ngâm nước nóng.